CN108904379A - 木芙蓉叶提取物及其制备方法、防腐组合物及其制备方法和化妆品组合物 - Google Patents

木芙蓉叶提取物及其制备方法、防腐组合物及其制备方法和化妆品组合物 Download PDF

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Abstract

本发明提供了木芙蓉叶提取物及其制备方法、防腐组合物及其制备方法和化妆品组合物，涉及化妆品防腐技术领域。该木芙蓉叶提取物的制备方法，通过将低温高压均质处理、超声提取、聚酰胺树脂纯化及脱色等步骤相结合，使得该制备方法具有提取率高、提取速度快的优势，且通过该制备方法制得的木芙蓉叶提取物黄酮纯度高、颜色浅、稳定性高并且安全性好。本发明还提供一种防腐组合物，包括上述木芙蓉叶提取物、多元醇、增溶剂和水等原料，各原料之间具有协同增效的作用，使得该防腐组合物抑菌效果显著、抑菌谱广、效果稳定、刺激性小、安全性高，同时该防腐组合物具有显著的抗氧化功效。本发明还提供一种化妆品组合物，包括上述木芙蓉叶提取物或防腐组合物。

Description

木芙蓉叶提取物及其制备方法、防腐组合物及其制备方法和 化妆品组合物
技术领域
本发明涉及化妆品防腐技术领域，具体而言，涉及木芙蓉叶提取物及其制备方法、防腐组合物及其制备方法和化妆品组合物。
背景技术
防腐剂是能够阻止微生物生长，防止产品变质的一类添加剂。在化妆品中，添加防腐剂可以避免化妆品中微生物活动所造成的产品变质、变味、腐败，延长产品的货架期，防止消费者因为使用被微生物污染的化妆品而产生不良影响。目前，我国《化妆品安全技术规范》(2015版)规定准用防腐剂51项，其中广泛使用的防腐剂主要有尼泊金酯类、甲醛释放体类、苯甲醇及其衍生物、甲基异噻唑啉酮、苯氧乙醇等，种类繁多。
大多数化妆品防腐剂都是以成本较低、易于生产的化学合成物质为主。虽然其可以有效保持化妆品的稳定，但是随着科技的发展，许多化妆品防腐剂都被证明有一定的负面作用，比如甲醛释放体类防腐剂存在一定的致癌风险，甲基异噻唑啉酮具有一定刺激性和致敏性，可引起严重的皮炎，同时苯氧乙醇、尼泊金酯类等防腐剂也因其潜在的安全性而备受广大学者和消费者的质疑和担忧。因此，从天然植物中开发安全、温和、高效的防腐体系作为化学防腐剂的替代品，是目前化妆品防腐领域的研究热点。
天然植物来源的防腐剂是以天然植物中提取出来的有效成分为主要活性成分。目前，市面上诸如上述的天然植物防腐剂并不多见，而且也存在许多不足，比如提取效率低、纯度低、颜色深、味道大、降低化妆品体系粘度而影响稳定性等。
有鉴于此，特提出本发明以解决上述技术问题中的至少一个。
发明内容
本发明的第一个目的在于提供一种木芙蓉叶提取物的制备方法，该制备方法具有提取率高、提取速度快的优势，且通过该制备方法获得的木芙蓉叶提取物纯度高、颜色浅、稳定性高并且安全性好。
本发明的第二个目的在于提供一种木芙蓉叶提取物，采用上述制备方法制备得到。
本发明的第三个目的在于提供一种防腐组合物，包括上述木芙蓉叶提取物。
本发明的第四个目的在于提供一种防腐组合物的制备方法，该制备方法操作简单，适合于工业上大规模生产。
本发明的第五个目的在于提供一种化妆品组合物，包括上述木芙蓉叶提取物、防腐组合物或采用防腐组合物的制备方法制得的防腐组合物。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
本发明提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1.提供木芙蓉叶粉，将木芙蓉叶粉与溶剂的混合溶液进行低温高压均质处理；
S2.将低温高压均质处理得到的混合物进行超声提取后得到的滤液进行浓缩，得到浓缩混悬液；
S3.将浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，得到洗脱液；
S4.将洗脱液进行脱色和分离，得到木芙蓉叶提取物。
进一步的，在本发明上述技术方案的基础之上，步骤S1中均质温度为 0～10℃，优选为2～8℃，进一步优选为4℃；
和/或，步骤S1中均质压力为2～50MPa，优选为4～40MPa，进一步优选为5.5MPa；
和/或，步骤S1中均质时间为10～60s，优选为20～50s，进一步优选为 30s；
和/或，步骤S1中溶剂为低碳醇水溶液，优选为乙醇水溶液，乙醇水溶液中乙醇的体积分数为35～95％。
进一步的，在本发明上述技术方案的基础之上，步骤S2中超声提取功率为228～380W，优选为266～304W；
和/或，步骤S2中超声提取温度为30～50℃，优选为35～45℃；
和/或，步骤S2中超声提取时间为0.2～2h，优选为0.5～1.0h。
进一步的，在本发明上述技术方案的基础之上，步骤S3中聚酰胺树脂的规格为80～100目、100～200目或200～300目，优选为100～200目；
和/或，步骤S3中采用的洗脱溶剂为体积分数为40～85％的乙醇水溶液，洗脱量为0.5～4.5BV，洗脱速度1.0～3.5BV/h；
和/或，步骤S4中采用活性炭对洗脱液进行脱色，活性炭的质量为洗脱液质量的0.1～1.5％，优选为0.5～0.8％；
和/或，步骤S4中脱色时间为0.2～1.0h，脱色温度30～55℃；
和/或，步骤S4中将洗脱液脱色得到的脱色滤液进行分离；优选地，将脱色滤液进行调节至pH为碱性，分离，将得到的上清液进行调节至pH为酸性，分离得到沉淀；进一步优选地，采用氢氧化钠或氢氧化钾溶液对脱色滤液进行调节至pH为9～11，分离，将得到的上清液采用盐酸或硫酸溶液进行调节至pH为3.5～5.5；
和/或，步骤S4中将洗脱液进行分离得到的沉淀进行干燥；优选地，干燥为冷冻干燥；进一步优选地，冷冻干燥温度为-70～-90℃，冷冻干燥时间为20～70h，真空压力为1～15Pa；
和/或，木芙蓉叶提取物中总黄酮的含量不低于81％。
本发明还提供了一种木芙蓉叶提取物，采用上述木芙蓉叶提取物的制备方法制备得到；
优选地，木芙蓉叶提取物中总黄酮的含量不低于81％。
本发明还提供了一种包含木芙蓉叶提取物的防腐组合物，所述防腐组合物主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物1～10％，多元醇 25～65％，增溶剂0.5～20％，水补足余量。
进一步的，在本发明上述技术方案的基础之上，所述防腐组合物包括以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物2～8％，多元醇30～60％，增溶剂5～15％，水补足余量；
优选地，所述防腐组合物包括以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物2.5～8％，多元醇35～55％，增溶剂5～13％，水补足余量。
进一步的，在本发明上述技术方案的基础之上，所述多元醇包括乙基己基甘油、辛甘醇、1,2-戊二醇或1,2-己二醇中的一种或者至少两种的组合，优选为乙基己基甘油和辛甘醇的组合或1,2-戊二醇和1,2-己二醇的组合；
和/或，所述增溶剂为非离子型增溶剂，优选地，所述增溶剂包括氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮，进一步优选地，所述增溶剂包括PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮中的一种；
和/或，所述水为去离子水。
本发明还提供了防腐组合物的制备方法，包括以下步骤：
将配方量的木芙蓉叶提取物、多元醇、增溶剂和水混合，然后分离，得到防腐组合物；
优选地，所述的防腐组合物的制备方法，包括以下步骤：
将配方量的水与多元醇混合均匀并升温至40～60℃，向其中加入配方量的木芙蓉叶提取物和增溶剂，混合均匀，保温5～15min，降温30℃以下，过滤，得到防腐组合物。
本发明还提供了一种化妆品组合物，包括上述木芙蓉叶提取物、上述防腐组合物或采用上述的防腐组合物的制备方法制备得到的防腐组合物。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，主要是将木芙蓉叶粉与溶剂的混合溶液进行低温高压均质处理和超声提取，然后浓缩，利用聚酰胺树脂对浓缩得到的浓缩混悬液进行分离纯化，再将纯化得到的洗脱液进行脱色和分离，得到木芙蓉叶提取物；其中，采用低温高压均质处理可避免高温对木芙蓉叶中有效组分的破坏，同时有效促进目标组分的溶出，从而提高提取效率；另外，将低温高压均质处理得到的混合物进行超声波提取，超声波的空化作用、机械振动效应和热效应可以显著提升提取效率，同时缩短提取时间并减少提取过程对目标组分的破坏；再者，利用聚酰胺树脂纯化技术可以对木芙蓉叶中的总黄酮进行纯化，可以提升所获木芙蓉叶提取物中总黄酮的含量，并对干扰组分进行有效分离。
该木芙蓉叶提取物的制备方法通过将低温高压均质处理、超声提取、聚酰胺树脂纯化以及脱色处理等步骤结合，使得该制备方法具有简单、易于操作、提取效率高等优势，实验表明，该制备方法较常规制备方法可缩短2-6h，且通过该制备方法获得的木芙蓉叶提取物颜色浅、提取率以及黄酮含量高并且安全性好，实验表明，木芙蓉叶提取物的提取率均大于1.9％，木芙蓉叶提取物中总黄酮的含量均在81％以上。
(2)本发明提供了一种木芙蓉叶提取物，通过上述制备方法制备得到。鉴于木芙蓉叶提取物的制备方法所具有的优势，使得木芙蓉叶提取物提取率高、黄酮纯度高、颜色浅、稳定性高并且安全性好。
(3)本发明提供了一种防腐组合物，包括上述木芙蓉叶提取物、多元醇、增溶剂和水等原料，各原料之间具有协同增效的作用，通过上述各原料之间的配合作用，使得该防腐组合物抑菌效果显著，抑菌谱广，效果稳定，刺激性小，安全性高，同时该防腐组合物具有显著的抗氧化功效，可以将其应用于相关化妆品中，在起到防腐作用的同时提升产品的抗衰老功效。
(4)本发明提供了一种防腐组合物的制备方法，该制备方法操作简单、方便、易行，适合于工业上大规模生产。
(5)本发明提供了一种化妆品组合物，包括上述防腐组合物。鉴于上述防腐组合物所具有的优势，使得该化妆品组合物也具有同样的优势。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
根据本发明的第一个方面，提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1.提供木芙蓉叶粉，将木芙蓉叶粉与溶剂的混合溶液进行低温高压均质处理；
S2.将低温高压均质处理得到的混合物进行超声提取后得到的滤液进行浓缩，得到浓缩混悬液；
S3.将浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，得到洗脱液；
S4.将洗脱液进行脱色和分离，得到木芙蓉叶提取物。
具体的，木芙蓉叶是锦葵科木槿属植物木芙蓉的叶子，是一味传统中药，其主要成分为黄酮类和甾醇类。
木芙蓉叶粉通常是将木芙蓉叶粉碎成适当细度得到的粉状产品。选用对木芙蓉叶中有效成分溶解度大，对不需要溶出成分溶解度小的溶剂与木芙蓉叶粉混合。此处，对于溶剂的种类不作具体限定。
天然产物中有效成分提取的提取效率与提取过程中被提取物的细胞破碎程度有关，彻底破碎细胞壁使细胞内的有效成分完全释放出来需要破坏比较坚固的细胞壁组织。
低温高压均质处理过程，就是被提取颗粒与溶剂混合后在一定的温度、压力和时间下被粉碎为超细颗粒，能够破碎被均质物的细胞组织结构，极大地提高被提取物的表面积，使其充分与溶剂相接触，从而有效提高提取效率。
在本发明步骤S1中，将木芙蓉叶粉与溶剂混合，进行低温高压均质处理。相较于煎煮提取、热回流提取、渗漉提取、微波提取等其它前处理方法，低温高压均质处理法具有显著的优势，其处理温度低，可以避免高温对木芙蓉叶中黄酮的破坏，同时高速均质可以有效破坏木芙蓉叶细胞，促进有效物质更好地溶出，从而提升提取效率。
低温高压均质处理所采用的装置不作具体限定，优选为低温高压均质机。该低温高压均质机具有处理量大、速度快的特点，还能提供低温环境，降低温度过高对木芙蓉叶中有效成分稳定性的不利影响。
步骤S2中将低温高压均质处理得到的混合物进行超声波提取，超声波的机械效应和热效应能够加速木芙蓉叶中有效组分的扩散释放，显著强化和改善木芙蓉叶中有效成分的提取过程，提高有效成分的溶出速度和溶出次数。
步骤S2中，将超声提取后得到的滤液进行浓缩，以除去部分溶剂得到浓缩混悬液。浓缩可采用本领域技术人员常用的技术手段。
步骤S3中，采用聚酰胺树脂对浓缩混悬液进行纯化。聚酰胺树脂是一类结构中含有重复单位酰胺键的高分子聚合物，酰胺基团以静电引力吸附溶液中的阴离子，故可以与黄酮类等富含酚羟基的化合物形成氢键而被吸附，可以起到很好的纯化作用，显著提升木芙蓉叶提取物中总黄酮的含量及稳定性，实现木芙蓉叶中有效成分的分离和精制。
步骤S4中，将得到的洗脱液进行脱色、分离处理，得到木芙蓉叶提取物。采用上述方法制备得到的木芙蓉叶提取物中有效成分含量高，颜色浅。
本发明提供的木芙蓉叶提取物的制备方法，通过将低温高压均质处理、超声提取、聚酰胺树脂分离纯化以及脱色处理等步骤结合，使得该制备方法具有提取率高、提取速度快的优势，且通过该制备方法获得的木芙蓉叶提取物纯度高、颜色浅、稳定性高并且安全性好。另外，该制备方法简单，易于操作，可适用于批量生产。
木芙蓉叶粉的获得方式有多种。作为本发明的一种优选实施方式，将干燥后的木芙蓉叶去除杂质，粉碎，过筛，得到木芙蓉叶粉。
通常采用粉碎机对木芙蓉叶进行粉碎。粉碎可增加木芙蓉叶的表面积，加速木芙蓉叶中有效成分在溶剂中的溶解。粉碎后过筛，以使得木芙蓉叶粉保持较为一致的细度。
筛网的种类不作具体限定，可根据实际制备要求进行设定。
优选地，筛网为不锈钢网筛。
优选地，过筛目数为30～100目，进一步优选为40～60目。典型但非限制性的过筛目数为30目、32目、35目、40目、45目、48目、50目、60 目、65目、70目、80目、90目或100目。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤S1中均质温度为0～10℃，优选为2～8℃，进一步优选为4℃。典型但非限制性的均质温度为0℃、2℃、4℃、 5℃、6℃、8℃或10℃。
和/或，均质压力为2～50MPa，优选为4～40MPa，进一步优选为5.5MPa，典型但非限制性的均质压力为2MPa、4MPa、5.5MPa、10MPa、15MPa、 20MPa、25MPa、30MPa、35MPa、40MPa、45MPa或50MPa；
和/或，均质时间为10～60s，优选为20～50s，进一步优选为30s，典型但非限制性的均质时间为10s、20s、30s、40s、50s或60s。
低温高压均质处理的效果与均质温度、均质压力和均质时间有一定的关系。故需要调整均质温度、均质压力和均质时间使其在合理的范围内，才能确保良好的均质处理效果。
步骤S1中，溶剂的种类有很多，例如低碳醇水溶液，优选为乙醇水溶液或甲醇水溶液。作为本发明的一种优选实施方式，溶剂为乙醇水溶液，乙醇水溶液中乙醇的体积分数为45～95％，优选为70～80％。乙醇水溶液中乙醇典型但非限制性的体积分数为45％、50％、60％、70％、75％、80％、 90％或95％。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤S2中超声提取功率为 228～380W，优选为266～304W，典型但非限制性的超声提取功率为228W、 240W、266W、280W、304W、320W、342W、360W或380W。
和/或，超声提取温度为30～50℃，优选为35～45℃，典型但非限制性的提取物温度为30℃、35℃、40℃、45℃或50℃；
和/或，超声提取时间为0.2～1.5h，优选为0.5～1.0h，典型但非限制性的超声提取时间为0.2h、0.3h、0.5h、0.8h、1.0h、1.2h或1.5h。
需要说明的是，在超声提取前需要将低温高压均质处理得到的混合物进行适当的稀释，所采用的稀释剂与步骤S1中的溶剂相同。
作为一种优选实施方式，步骤S2中低温高压均质处理得到的混合物与稀释剂的质量体积比(料液比，m/v)为1:(10～50)，优选为1:(20～30)，典型但非限制性的质量体积比为1:10、1:15、1:20、1:30、1:40、1:45或1:50。
通过对超声提取过程中提取功率、提取时间以及提取温度等具体参数的限定，使得超声提取效果更佳。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤S2中在对低温高压均质处理得到的混合物超声提取后，还包括离心或过滤以及收集滤液的步骤。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤S2中对超声提取后得到的滤液进行减压浓缩，以使得浓缩混悬液中的总黄酮含量在3～10mg/mL。减压浓缩至滤液体积的1/10～1/2，优选为1/5～1/7，典型但非限制性的浓缩比例为 1/2、1/3、1/4、1/5、1/6、1/7、1/8、1/9或1/10。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤S3中聚酰胺树脂的规格为 80～100目、100～200目或200～300目，优选为100～200目。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤S3中洗脱溶剂为体积分数为40～85％的乙醇水溶液，优选体积分数为70～80％的乙醇水溶液。乙醇水溶液中乙醇典型但非限制性的体积分数为40％、50％、60％、70％、75％、80％或85％。
优选地，洗脱量为0.5～4.5BV，进一步优选为1～3BV，典型但非限制性的洗脱量为0.5BV、1BV、2BV、3BV、3.5BV、4BV或4.5BV；
优选地，洗脱速度1.0～3.5BV/h，进一步优选为1.0～2.0BV/h，优选为典型但非限制性的洗脱速度为1.0BV/h、2.0BV/h、3.0BV/h或3.5BV/h；
聚酰胺树脂的规格以及纯化过程中溶剂、洗脱量和洗脱速度等工艺参数，对木芙蓉叶提取物纯化效果和安全性起着决定性作用。通过对上述参数的限定，使得木芙蓉叶提取物具有良好的纯化效果和安全性。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤S4中采用活性炭对洗脱液进行脱色。
活性炭对于体系物质的吸附不具有选择性，添加量过低脱色效果不佳，也会影响其吸附杂质，添加量过高，虽然脱色效果好，但是吸附量增加，会吸附较多的目标组分，造成体系有效成分损失过大。
作为本发明的一种优选实施方式，活性炭的质量为洗脱液质量的 0.1～1.5％，优选为0.5～0.8％。活性炭的质量占洗脱液质量典型但非限制性的质量分数例如为0.1％、0.2％、0.5％、0.8％、1.0％、1.2％、1.4％或1.5％。
优选地，步骤S4中脱色时间为0.2～1.0h，优选为0.3～0.5h，典型但非限制性的脱色时间为0.2h、0.3h、0.5h、0.6h、0.8h或1.0h。
优选地，步骤S4中脱色温度为30～55℃，优选为40～50℃，典型但非限制性的脱色温度30℃、35℃、40℃、45℃、50℃或55℃。
通过对脱色过程中活性炭的用量、脱色时间和脱色温度等脱色条件进行优化，使得脱色效果达到较优水平。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤S4中将洗脱液脱色得到的脱色滤液进行分离；
优选地，将脱色滤液进行调节至pH为碱性，分离，将得到的上清液进行调节至pH为酸性，分离得到沉淀；
进一步优选地，采用氢氧化钠或氢氧化钾溶液对脱色滤液进行调节至 pH为9～11，分离，将得到的上清液采用盐酸或硫酸溶液进行调节至pH为 3.5～5.5。
采用碱溶酸沉的方式对洗脱液脱色得到的脱色滤液进行处理，有利于进一步提高木芙蓉叶提取物的纯度。
步骤S4中在对洗脱液进行脱色和分离处理之后，还包括浓缩和干燥的步骤。
将脱色处理得到的脱色滤液进行浓缩，以除去多余的溶剂。作为本发明的一种优选实施方式，浓缩为减压浓缩，减压浓缩至原超滤滤液体积的 1/4～1/10，优选为1/5～1/8，典型但非限制性的浓缩比为1/4、1/5、1/6、1/8 或1/10。
将浓缩得到的浓缩液进行干燥，得到木芙蓉叶提取物。干燥的方式有多种，作为本发明的一种优选实施方式，步骤S4中干燥为冷冻干燥。
冷冻干燥，又称升华干燥。将含水物料冷冻到冰点以下，使水转变为冰，然后在较高真空下将冰转变为蒸气而除去的干燥方法。冷冻干燥可使得木芙蓉叶中有效成分(主要指易挥发性成分和受热易变性成份)损失很小。
优选地，冷冻干燥温度为-70～-90℃，进一步优选为-80～-90℃，典型但非限制性的冷冻干燥温度为-70℃、-75℃、-80℃、-85℃或90℃。
优选地，冷冻干燥时间为20～70h，进一步优选为40～60h，典型但非限制性的冷冻干燥时间为20h、30h、40h、50h、60h或70h。
优选地，真空压力为1～15Pa，进一步优选为1～5Pa，典型但非限制性的真空压力为1Pa、2Pa、3Pa、5Pa、6Pa、8Pa、10Pa、12Pa、14Pa或15Pa。
通过对冷冻干燥中具体工艺参数的限定，使得在较短的干燥时间内即可达到良好的干燥效果。
采用上述制备方法制备得到的木芙蓉叶提取物中总黄酮含量不低于 81％。
根据本发明的第二个方面，还提供了一种木芙蓉叶提取物，采用上述木芙蓉叶提取物的制备方法制备得到。
鉴于上述木芙蓉叶提取物的制备方法所具有的优势，使得到的木芙蓉叶提取物纯度高、颜色浅、稳定性高并且安全性好。
作为本发明的一种优选实施方式，木芙蓉叶提取物中总黄酮的含量不低于81％。
根据本发明的第三个方面，还提供了一种防腐组合物，包括上述木芙蓉叶提取物；
该防腐组合物主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物 1～10％，多元醇25～65％，增溶剂0.5～20％，水补足余量。
该防腐组合物均是采用特定的原料制成，其中木芙蓉叶提取物能够和多元醇协同增效，提升防腐效果的同时具有一定的保湿性能，增溶剂可有效改善木芙蓉叶提取物在本组合物中的溶解性，从而改善防腐组合物的稳定性。而且该防腐组合物各原料的用量之间也存在相互配合的关系。
通过上述各原料以及用量之间的配合作用，使得该防腐组合物抑菌效果显著，抑菌谱广，效果稳定，刺激性小，安全性高，同时该防腐组合物具有显著的抗氧化功效。
具体的，木芙蓉叶提取物具有显著的抑菌防腐功效。木芙蓉叶提取物典型但非限制性的质量分数为1％、2％、3％、4％、5％、6％、8％、9％或 10％。
多元醇作为保湿剂同时又具有一定的抑菌功效，可增效木芙蓉叶提取物。多元醇典型但非限制性的质量分数为25％、30％、35％、40％、45％、 50％、55％、60％或65％。
增溶剂可增大木芙蓉叶提取物在水中的溶解性，增强木芙蓉叶提取物与多元醇的相容性。增溶剂的用量对增溶剂的增溶作用很重要。用量不足，可能起不到增溶作用，或在贮存、稀释时防腐组合物会发生沉淀；用量太多，既浪费，又可能产生毒副作用。在本发明中，增溶剂典型但非限制性的质量分数为0.5％、1％、2％、3％、5％、8％、10％、12％、14％、15％、 16％、18％或20％。
本发明所述的“主要由……制成”，意指其除所述原料外，还可以包括防腐剂领域可接受的辅料，比如增稠剂、抗氧剂等其他组分，这些其他组分赋予防腐组合物不同的特性。除此之外，本发明所述的“主要由……制成”，还可以替换为封闭式的“为”或“由……制成”。
另外，需要注意的是，水补足余量，指本发明防腐组合物的原料中除去木芙蓉叶提取物、多元醇、增溶剂以及任选地其他原料之外的余量为水，水与木芙蓉叶提取物、多元醇、增溶剂以及任选地其他原料的质量百分含量之和为100％。
鉴于木芙蓉叶提取物所具有的优势，使得该防腐组合物安全、温和、高效，且不会产生负面作用，可以作为功效添加剂加入到化妆品中使用。
作为本发明的一种优选实施方式，所述防腐组合物包括以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物2～8％，多元醇30～60％，增溶剂5～15％，水补足余量；
优选地，所述防腐组合物包括以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物2.5～8％，多元醇35～55％，增溶剂5～13％，水补足余量。
通过对防腐组合物各原料用量的进一步限定，使得该防腐组合物的防腐抑菌以及抗氧化效果更为显著，同时对皮肤的刺激更小，安全性得到进一步提升。
作为本发明的一种优选实施方式，所述多元醇包括乙基己基甘油、辛甘醇、1,2-戊二醇或1,2-己二醇中的一种或者至少两种的组合。
乙基己基甘油、辛甘醇、1,2-戊二醇和1,2-己二醇是多功能性的保湿剂，在配方中能起到抑菌的作用，既可加到水相，又可以加到油相。当加到水相时，其能形成一个抑菌环境，对整个防腐组合物起到防腐作用。
另外，乙基己基甘油可以增效醇类，例如乙基己基甘油能够提高辛甘醇、1,2-戊二醇的抗菌作用。优选地，所述多元醇为乙基己基甘油和辛甘醇的组合或1,2-戊二醇和1,2-己二醇的组合。
作为本发明的一种优选实施方式，所述增溶剂为非离子型增溶剂。
优选地，所述增溶剂包括氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮，进一步优选地，所述增溶剂包括PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮中的一种。
氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮均为高效增溶剂，能增大木芙蓉叶提取物在水中的溶解性，从而形成稳定、透明的溶液。
作为本发明的一种优选实施方式，所述水为去离子水。
鉴于上述防腐组合物所具有的优势，可以将其应用于相关化妆品中，在起到防腐作用的同时提升产品的抗衰老功效。
根据本发明的第四个方面，还提供了一种防腐组合物的制备方法，包括以下步骤：
将木芙蓉叶提取物、多元醇、增溶剂和水混合，然后分离，得到防腐组合物。
该制备方法简单，易于操作，可适用于批量生产。且通过该方法所制备的防腐组合物混合均匀，稳定性好。
作为本发明的一种优选实施方式，所述的防腐组合物的制备方法，包括以下步骤：
将水与多元醇混合均匀并升温至40～60℃，向其中加入木芙蓉叶提取物和增溶剂，混合均匀，保温5～15min，降温30℃以下，过滤，得到防腐组合物。
通过采用不同的加料、混合顺序和加料温度，使得各原料混合更均匀，各原料之间的相容性更好，更利于提升防腐组合物的稳定性和均一性。
根据本发明的第五个方面，还提供了一种化妆品组合物，包括上述榆提取物、上述防腐组合物或由上述的防腐组合物的制备方法制备得到的防腐组合物。
鉴于上述防腐组合物所具有的优势，使得该化妆品组合物能够保持长期的稳定性。
作为本发明的一种优选实施方式，所述化妆品组合物为霜剂、乳液、溶液剂、膜剂或喷雾形式。
该化妆品组合物具体形式可以为乳液、护肤霜、精华液、化妆水、面膜、喷雾、洁面奶、眼霜等多种形式。
下面结合具体实施例和对比例，对本发明作进一步说明。
实施例1
本实施例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将干燥后的木芙蓉叶去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过50目不锈钢网筛，得到木芙蓉叶粉；
将木芙蓉叶加入浓度为80％的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度4℃，均质压力5.5MPa，均质时间30s；
(2)将低温高压均质处理得到的混合物采用超声波辅助提取法提取，超声功率304W，料液比1:30，提取温度35℃，提取时间0.5h，提取后抽滤，收集滤液；
将得到的滤液进行减压浓缩至原体积的1/6，得到浓缩混悬液；
(3)将得到的浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，得到洗脱液；其中，所用聚酰胺树脂的目数为100～200目，洗脱溶剂为90％乙醇水溶液，洗脱量为3.0BV，洗脱速度2.0BV/h；
(4)将得到的洗脱液中加入活性炭进行脱色处理，得到脱色液，其中，活性炭添加量为洗脱液质量的0.5％，脱色时间0.5h，脱色温度50℃；
将得到的脱色滤液进行减压浓缩至原体积的1/6，去除多余乙醇，得到浓缩液；
采用氢氧化钠溶液对浓缩后的脱色滤液进行调节至pH为9.5，离心去除沉淀，得到的上清液，采用盐酸溶液对上清液进行调节至pH为3.5，离心，得到沉淀；
将得到的沉淀用去离子水进行清洗，并进行冷冻干燥，冷冻温度-90℃，冷冻干燥时间45h，真空压力1.0Pa，得到木芙蓉叶提取物。
实施例2
本实施例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将干燥后的木芙蓉叶去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过60目不锈钢网筛，得到木芙蓉叶粉；
将木芙蓉叶加入浓度为75％的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度4℃，均质压力5.5MPa，均质时间30s；
(2)将低温高压均质处理得到的混合物采用超声波辅助提取法提取，超声功率266W，料液比1:25，提取温度40℃，提取时间0.75h，提取后抽滤，收集滤液；
将得到的滤液进行减压浓缩至原体积的1/5，得到浓缩混悬液；
(3)将得到的浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，得到洗脱液；其中，所用聚酰胺树脂的目数为100～200目，洗脱溶剂为80％乙醇水溶液，洗脱量为3.0BV，洗脱速度1.5BV/h；
(4)将得到的洗脱液中加入活性炭进行脱色处理，得到脱色液，其中，活性炭添加量为洗脱液质量的0.75％，脱色时间0.5h，脱色温度45℃；
将得到的脱色滤液进行减压浓缩至原体积的1/8，去除多余乙醇，得到浓缩液；
采用氢氧化钠溶液对浓缩后的脱色滤液进行调节至pH为10.5，离心去除沉淀，得到的上清液，采用盐酸溶液对上清液进行调节至pH为4.5，离心，得到沉淀；
将得到的沉淀用去离子水进行清洗，并进行冷冻干燥，冷冻温度-85℃，冷冻干燥时间60h，真空压力3.5Pa，得到木芙蓉叶提取物。
实施例3
本实施例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，步骤(3)中除了采用硅胶目数为200～300目的聚酰胺树脂进行纯化，其余步骤以及工艺参数与实施例1相同。
实施例4
本实施例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将干燥后的木芙蓉叶去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过30目不锈钢网筛，得到木芙蓉叶粉；
将木芙蓉叶加入浓度为90％的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度10℃，均质压力50MPa，均质时间10s；
(2)将低温高压均质处理得到的混合物采用超声波辅助提取法提取，超声功率228W，料液比1:10，提取温度30℃，提取时间2h，提取后抽滤，收集滤液；
将得到的滤液进行减压浓缩至原体积的1/2，得到浓缩混悬液；
(3)将得到的浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，得到洗脱液；其中，所用聚酰胺树脂的目数为80～100目，洗脱溶剂为40％乙醇水溶液，洗脱量为0.5BV，洗脱速度1.0BV/h；
(4)将得到的洗脱液中加入活性炭进行脱色处理，得到脱色液，其中，活性炭添加量为洗脱液质量的0.1％，脱色时间1h，脱色温度55℃；
将得到的脱色滤液进行减压浓缩至原体积的1/4，去除多余乙醇，得到浓缩液；
采用氢氧化钾溶液对浓缩后的脱色滤液进行调节至pH为9，离心去除沉淀，得到的上清液，采用硫酸溶液对上清液进行调节至pH为3.5，离心，得到沉淀；
将得到的沉淀用去离子水进行清洗，并进行冷冻干燥，冷冻温度-70℃，冷冻干燥时间70h，真空压力15Pa，得到木芙蓉叶提取物。
实施例5
本实施例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将干燥后的木芙蓉叶去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过100目不锈钢网筛，得到木芙蓉叶粉；
将木芙蓉叶加入浓度为45％的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度0℃，均质压力2MPa，均质时间60s；
(2)将低温高压均质处理得到的混合物采用超声波辅助提取法提取，超声功率380W，料液比1:50，提取温度55℃，提取时间0.2h，提取后抽滤，收集滤液；
将得到的滤液进行减压浓缩至原体积的1/10，得到浓缩混悬液；
(3)将得到的浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，得到洗脱液；其中，所用聚酰胺树脂的目数为200～300目，洗脱溶剂为85％乙醇水溶液，洗脱量为4.5BV，洗脱速度3.5BV/h；
(4)将得到的洗脱液中加入活性炭进行脱色处理，得到脱色液，其中，活性炭添加量为洗脱液质量的1.5％，脱色时间0.2h，脱色温度30℃；
将得到的脱色滤液进行减压浓缩至原体积的1/10，去除多余乙醇，得到浓缩液；
采用氢氧化钾溶液对浓缩后的脱色滤液进行调节至pH为11，离心去除沉淀，得到的上清液，采用硫酸溶液对上清液进行调节至pH为5.5，离心，得到沉淀；
将得到的沉淀用去离子水进行清洗，并进行冷冻干燥，冷冻温度-80℃，冷冻干燥时间20h，真空压力5Pa，得到木芙蓉叶提取物。
对比例1
本对比例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，除了步骤(3)中未进行聚酰胺树脂纯化的步骤，其余步骤以及工艺参数与实施例1相同。
对比例2
本对比例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，除了步骤(4)中未进行碱溶酸沉(pH调节)的步骤，其余步骤以及工艺参数与实施例1相同。
对比例3
本对比例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，除了将步骤(1)中未进行低温高压均质处理，其余步骤以及工艺参数与实施例1相同。
对比例4
本对比例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，除了将步骤(1)中将低温高压均质处理替换为浸渍处理，其中浸渍处理时间为15h，其余步骤以及工艺参数与实施例1相同。
对比例5
本对比例提供了一种木芙蓉叶提取物的制备方法，除了将步骤(1)中的低温高压均质处理替换为高压均质处理，其中均质温度为60-80℃，其余步骤以及工艺参数与实施例1相同。
实施例6
本实施例提供了一种防腐组合物，主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物7％，辛甘醇25％，乙基己基甘油20％，PEG-40氢化蓖麻油8％，去离子水补足余量，其中，木芙蓉叶提取物为实施例1制备得到。
该防腐组合物的制备方法，包括以下步骤：
将配方量的去离子水与辛甘醇、乙基己基甘油混合均匀并升温至60℃，向其中加入配方量的木芙蓉叶提取物搅拌溶解，搅拌速度为200r/min，然后加入配方量的PEG-40氢化蓖麻油，搅拌均匀，搅拌速度为400r/min，保温5min，降温30℃以下，过0.22μm微孔滤膜，得到防腐组合物。
实施例7
本实施例提供了一种防腐组合物，主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物5％，辛甘醇30％，乙基己基甘油15％，PEG-40氢化蓖麻油12％，去离子水补足余量，其中，木芙蓉叶提取物为实施例2制备得到。
该防腐组合物的制备方法，包括以下步骤：
将配方量的去离子水与辛甘醇、乙基己基甘油混合均匀并升温至40℃，向其中加入配方量的木芙蓉叶提取物搅拌溶解，搅拌速度为400r/min，然后加入配方量的PEG-40氢化蓖麻油，搅拌均匀，搅拌速度为400r/min，保温15min，降温30℃以下，过0.22μm微孔滤膜，得到防腐组合物。
实施例8
本实施例提供了一种防腐组合物，除了防腐组合物的原料中采用实施例3制备得到木芙蓉叶提取物，其余原料、用量以及防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
实施例9
本实施例提供了一种防腐组合物，主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物10％，1,2-戊二醇16％，1,2-己二醇9％，聚乙烯吡咯烷酮 20％，去离子水补足余量，其中，木芙蓉叶提取物为实施例4制备得到。
该防腐组合物的制备方法，包括以下步骤：
将配方量的去离子水与1,2-戊二醇、1,2-己二醇混合均匀并升温至 60℃，向其中加入配方量的木芙蓉叶提取物搅拌溶解，搅拌速度为500 r/min，然后加入配方量的聚乙烯吡咯烷酮，搅拌均匀，搅拌速度为500r/min，保温10min，降温30℃以下，过0.22μm微孔滤膜，得到防腐组合物。
实施例10
本实施例提供了一种防腐组合物，主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物1％，乙基己基甘油30％，1,2-戊二醇30％，PEG-60氢化蓖麻油0.5％，去离子水补足余量，其中，木芙蓉叶提取物为实施例5制备得到。
该防腐组合物的制备方法，包括以下步骤：
将配方量的去离子水与1,2-戊二醇、1,2-己二醇混合均匀并升温至 50℃，向其中加入配方量的木芙蓉叶提取物搅拌溶解，搅拌速度为500 r/min，然后加入配方量的PEG-60氢化蓖麻油搅拌均匀，搅拌速度为600 r/min，保温10min，降温30℃以下，过0.22μm微孔滤膜，得到防腐组合物。
实施例11
本实施例提供了一种防腐组合物，主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物2.2％，辛甘醇20％，乙基己基甘油12％，PEG-40氢化蓖麻油14％，去离子水补足余量，其中，木芙蓉叶提取物为实施例1制备得到。
该防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
实施例12
本实施例提供了一种防腐组合物，主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物9％，辛甘醇20％，乙基己基甘油8％，PEG-40氢化蓖麻油 4％，去离子水补足余量，其中，木芙蓉叶提取物为实施例1制备得到。
该防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
对比例6
本对比例提供了一种防腐组合物，除了防腐组合物的原料中采用对比例1制备得到的木芙蓉叶提取物，其余原料、用量以及防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
对比例7
本对比例提供了一种防腐组合物，除了防腐组合物的原料中采用对比例2制备得到的木芙蓉叶提取物，其余原料、用量以及防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
对比例8
本对比例提供了一种防腐组合物，除了防腐组合物的原料中采用对比例3制备得到的木芙蓉叶提取物，其余原料、用量以及防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
对比例9
本对比例提供了一种防腐组合物，除了防腐组合物的原料中采用对比例4制备得到的木芙蓉叶提取物，其余原料、用量以及防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
对比例10
本对比例提供了一种防腐组合物，除了防腐组合物的原料中采用对比例5制备得到的木芙蓉叶提取物，其余原料、用量以及防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
对比例11
本对比例提供了一种防腐组合物，主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物0.5％，辛甘醇10％，乙基己基甘油10％，PEG-40氢化蓖麻油25％，去离子水补足余量，其中，木芙蓉叶提取物为实施例1制备得到。
该防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
对比例12
本对比例提供了一种防腐组合物，主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物7％，辛甘醇10％，乙基己基甘油12％，PEG-40氢化蓖麻油35％，去离子水补足余量，其中，木芙蓉叶提取物为实施例2制备得到。
该防腐组合物的制备方法与实施例7相同。
对比例13
本对比例提供了一种防腐组合物，除了防腐组合物的原料中未添加辛甘醇和乙基己基甘油，其余原料以及用量与实施例6相同。
该防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
对比例14
本对比例提供了一种防腐组合物，除了防腐组合物的原料中未添加 PEG-40氢化蓖麻油，其余原料以及用量与实施例6相同。
该防腐组合物的制备方法与实施例6相同。
为验证各实施例和对比例的效果，特设以下实验例。
实验例1
对实施例1-5与对比例1-5木芙蓉叶提取物的制备方法进行比较，比较结果见表1。
表1各实施例和对比例木芙蓉叶提取物提取率、总黄酮含量以及颜色对比
样品组别 提取率 总黄酮含量 颜色
实施例1 2.58％ 85.33％ 浅黄色
实施例2 2.87％ 88.51％ 浅黄色
实施例3 2.69％ 86.15％ 浅黄色
实施例4 2.18％ 83.36％ 浅黄色
实施例5 1.96％ 81.50％ 浅黄色
对比例1 1.05％ 28.61％ 深黄棕色
对比例2 1.14％ 31.36％ 浅黄色
对比例3 0.86％ 42.28％ 浅黄色
对比例4 2.13％ 70.39％ 浅黄色
对比例5 2.32％ 68.26％ 浅黄色
由表1中数据可以看出，采用本发明实施例提供的木芙蓉叶提取物的制备方法制得的木芙蓉叶提取物颜色浅、提取率以及总黄酮含量高，较对比例有较为明显的优势。且本发明制备方法提取效率高，提取时间较常规制备方法可缩短2-6h。
实验例2防腐性能考察-MIC实验
以实施例6～12以及对比例6～14进行实验，测试其最小抑菌浓度MIC 值：以灭菌后的营养肉汤、沙氏培养基为稀释液，利用二倍稀释法对测试样品进行稀释，后向稀释液中接种，接种的菌液浓度分别为：大肠埃希氏菌1×108cfu/mL、金黄色葡萄球菌1×108cfu/mL、铜绿假单胞菌1×107cfu/mL、白色念珠菌1×106cfu/mL、黑曲霉1×105cfu/mL。35℃培养36h(细菌)、28℃培养48h(真菌)后观察结果。
细菌采用微量液体稀释法，在培养终点前3h，加入TTC试剂，继续培养，若培养液变红，则认定此浓度不能抑制微生物生长，若培养液未变红，则认定为未变红的培养液中的最小药剂浓度为此抑菌剂对此微生物的最小抑菌浓度。具体结果如表2所示。
表2实施例和对比例的MIC值
从表2据可以看出，本实施例6-12对上述各种细菌均具有良好抑菌效果，而对比例的抑菌效果较差。
具体的，实施例11和12以及对比例11均为实施例6的对照/对比实验，四者不同之处在于防腐组合物中各原料的质量分数不同。由表2中上述四组数据可以看出，只有当防腐组合物中各原料的质量分数在适当的范围内，才能确保防腐组合物对各种微生物细菌有良好的抑菌效果。
对比例6-10均为实施例6的对比实验，几者不同之处在于木芙蓉叶提取物的制备方法不同。由表2中数据可以看出，木芙蓉叶提取物的制备方法中步骤(1)中低温高压均质处理、步骤(3)中的聚酰胺树脂纯化、步骤(4)中碱溶酸沉等步骤对于木芙蓉叶提取物的性能有重要影响，上述步骤可通过影响木芙蓉叶提取物的抑菌性能进而影响防腐组合物的最终抑菌效果。
对比例13和14也为实施例6的对比实验，三者不同之处在于防腐组合物的原料组成不同。由表2中数据可以看出，当防腐组合物的原料中缺少多元醇或者增溶剂，防腐组合物对各微生物细菌的抑菌效果有明显下降，可见，防腐组合物的各原料之间存在着相互配合的作用关系。
实验例3防腐性能考察-抑菌圈实验
以实施例6～12以及对比例6～14进行实验。以金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌，白色念珠球菌作为接种菌，采用K～B纸片法试验来比较它们之间抑菌能力的差异。具体实验方法如下：
将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌分别接种MH液体培养基上，在37℃下培养24h；白色念珠菌接种沙保弱液体培养基，在25℃下培养 5d。用生理盐水将四种细菌培养物分别稀释成浓度为1.0×106CFU/ml的菌悬液。
用无菌棉签分别将上述四种菌悬液涂布在营养琼脂平板上制成菌苔，然后取直径为3cm的灭菌滤液圆片。分别取实施例6～12以及对比例6～14的样品，再分别贴在四种不同菌悬液制成的平板上。细菌培养24h，真菌培养 5d，观察结果。纸片法抑菌直径≥10mm为有效，抑菌直径≤10mm为无效，实验结果如表3示。
表3实施例和对比例的抑菌圈直径
由表3结果可以看出，本发明各实施例提供的防腐组合物的抑菌效果整体上要明显优于对比例提供的防腐组合物的抑菌效果。
实验例4防腐性能考察-防腐挑战实验
对实施例6～12进行防腐挑战实验。参考美国化妆品、盥洗用品和香精协会(CTFA)推荐的防腐体系效能评价方法，进行28天单次接菌挑战性实验。
(1)菌株：细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌)；真菌(黑曲霉、扩展青霉)。采用混合菌接种，细菌混合菌悬浊液107CFU/mL；真菌混合菌悬浊液106CFU/mL。
(2)样品接种：分别称取上述各实施例6～12各100克各2份，分别加入1mL混合细菌悬浊液和1mL混合真菌悬浊液，混合均匀，将样品于室温(22.5±2.5℃)保存，并分别于0、2、7、14、21、28天检测样品中的菌落数，以判断样品的防腐效能。
(3)实验结果：具体如表4所示。
表4防腐挑战结果
由表4的实验结果可以看出，实施例6～12提供的防腐组合物在第7天通过细菌的防腐挑战，而各实施例通过真菌防腐挑战的天数均为第14天，实验结果证明了本发明各实施例提供的防腐组合物均具有良好防腐效果。
实验例5致敏性考察-斑贴实验
分别对实施例6～12以及对比例6～14的样品的致敏性进行考察，以30 名受试者为对象实施斑贴试验。选用面积不超过50mm2、深度约1mm的合格斑试器。将受试物放入斑试器小室内，用量约为0.020g，对照孔为空白对照(不置任何物质)。将加有受试物的斑试器用低致敏胶带贴敷于受试者的背部或前臂曲侧，用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上，持续24h。分别于去除受试物斑试器后30min(待压痕消失后)、24h和48h观察皮肤反应。
其中，红斑反应：红斑、浸润、水肿、可有丘疹；疱疹反应：红斑、浸润、水肿、丘疹、疱疹，反应超出受试区；融合性疱疹反应：明显红斑、严重浸润、水肿、融合性疱疹、反应超出受试区。
具体实验结果如表5所示。
表5各实施例和对比例斑贴实验结果
由表5的实验结果可以看出，本发明实施例6～12提供的防腐组合物的致敏性能整体上低于对比例6-14提供的防腐组合物的致敏性，说明本发明提供的防腐组合物不但具有一定的抑菌防腐功效，同时还不会造成过敏反应，可以有效提升产品的安全性。
实验例6稳定性考察
分别对实施例6～12的稳定性进行考察，考察1个月内其各实施例在不同存储条件下的稳定性，具体实验结果如表6所示。
表6各实施例在不同存储条件下的稳定性
由表6的考查结果可以看出，经过纯化后的各木芙蓉叶提取物制备得到的防腐组合物(实施例6～12)具有良好的稳定性，可以经受各种储存条件的考验。
实验例7抗氧化性能考察-DPPH·清除实验
以实施例6～12以及对比例6～14的样品进行DPPH·清除能力的考查，以确定其抗氧化性能。
(1)实验原理
DPPH·又称1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，是一种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自共振稳定作用的3个苯环的空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。它的无水乙醇溶液呈紫色，在517nm波长处有最大吸收，吸光度与浓度呈线性关系。向其中加入自由基清除剂时，可以结合或替代DPPH·，使自由基数量减少，吸光度变小，溶液颜色变浅，借此可评价清除自由基的能力。
(2)试剂配制
配制0.2mmol/L的DPPH·甲醇溶液；配制0.1％各样品水溶液及1mg/mL 的VC溶液作为阳性对照样品。
(3)实验步骤
2mL样品溶液+2mLDPPH·溶液于具塞试管中，混匀，避光反应30min，测定517nm波长下的吸光值A1；
2mL样品溶液+2mL甲醇于具塞试管中，混匀，避光反应30min，测定 517nm波长下的吸光值A2；
2mLDPPH·溶液+2mL甲醇于具塞试管中，混匀，避光反应30min，测定517nm波长下的吸光值A0；
(4)实验结果，具体如表7所示。
表7各实施例DPPH·清除能力测定结果
如表7所示，各实施例对DPPH·均有显著的清除作用，显示了良好的抗氧化功效，而采用对比例6～14的抗氧化效果较差。
综上所述，本发明所获得的防腐组合物的防腐效果优良，同时大大减轻了植物提取物所存在的致敏问题，同时稳定性良好并且具有很好的抗氧化能力，除了具有防腐效果以外还可以作为抗衰老功效原料应用于化妆品中。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种木芙蓉叶提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.提供木芙蓉叶粉，将木芙蓉叶粉与溶剂的混合溶液进行低温高压均质处理；
S2.将低温高压均质处理得到的混合物进行超声提取后得到的滤液进行浓缩，得到浓缩混悬液；
S3.将浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，得到洗脱液；
S4.将洗脱液进行脱色和分离，得到木芙蓉叶提取物。
2.根据权利要求1所述的木芙蓉叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤S1中均质温度为0～10℃，优选为2～8℃，进一步优选为4℃；
和/或，步骤S1中均质压力为2～50MPa，优选为4～40MPa，进一步优选为5.5MPa；
和/或，步骤S1中均质时间为10～60s，优选为20～50s，进一步优选为30s；
和/或，步骤S1中溶剂为低碳醇水溶液，优选为乙醇水溶液，乙醇水溶液中乙醇的体积分数为45～90％。
3.根据权利要求1所述的木芙蓉叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤S2中超声提取功率为228～380W，优选为266～304W；
和/或，步骤S2中超声提取温度为30～50℃，优选为35～45℃；
和/或，步骤S2中超声提取时间为0.2～2h，优选为0.5～1.0h。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的木芙蓉叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤S3中聚酰胺树脂的规格为80～100目、100～200目或200～300目，优选为100～200目；
和/或，步骤S3中采用的洗脱溶剂为体积分数为40～85％的乙醇水溶液，洗脱量为0.5～4.5BV，洗脱速度1.0～3.5BV/h；
和/或，步骤S4中采用活性炭对洗脱液进行脱色，活性炭的质量为洗脱液质量的0.1～1.5％，优选为0.5～0.8％；
和/或，步骤S4中脱色时间为0.2～1.0h，脱色温度为30～55℃；
和/或，步骤S4中将洗脱液脱色得到的脱色滤液进行分离；优选地，将脱色滤液进行调节至pH为碱性，分离，将得到的上清液进行调节至pH为酸性，分离得到沉淀；进一步优选地，采用氢氧化钠或氢氧化钾溶液对脱色滤液进行调节至pH为9～11，分离，将得到的上清液采用盐酸或硫酸溶液进行调节至pH为3.5～5.5，分离，得到沉淀；
和/或，步骤S4中将洗脱液进行分离得到的沉淀进行干燥；优选地，干燥为冷冻干燥；进一步优选地，冷冻干燥温度为-70～-90℃，冷冻干燥时间为20～70h，真空压力为1～15Pa；
和/或，木芙蓉叶提取物中总黄酮的含量不低于81％。
5.一种木芙蓉叶提取物，其特征在于，采用权利要求1-4任意一项所述的木芙蓉叶提取物的制备方法制备得到；
优选地，木芙蓉叶提取物中总黄酮的含量不低于81％。
6.包含权利要求5所述的木芙蓉叶提取物的防腐组合物，其特征在于，所述防腐组合物主要由以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物1～10％，多元醇25～65％，增溶剂0.5～20％，水补足余量。
7.根据权利要求6所述的防腐组合物，其特征在于，包括以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物2～8％，多元醇30～60％，增溶剂5～15％，水补足余量；
优选地，所述防腐组合物包括以下质量分数的原料制成：木芙蓉叶提取物2.5～8％，多元醇35～55％，增溶剂5～13％，水补足余量。
8.根据权利要求6或7所述的防腐组合物，其特征在于，所述多元醇包括乙基己基甘油、辛甘醇、1,2-戊二醇或1,2-己二醇中的一种或者至少两种的组合，优选为乙基己基甘油和辛甘醇的组合或1,2-戊二醇和1,2-己二醇的组合；
和/或，所述增溶剂为非离子型增溶剂，优选地，所述增溶剂包括氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮，进一步优选地，所述增溶剂包括PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮中的一种；
和/或，所述水为去离子水。
9.权利要求6-8任意一项所述的防腐组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将配方量的木芙蓉叶提取物、多元醇、增溶剂和水混合，然后分离，得到防腐组合物；
优选地，所述的防腐组合物的制备方法，包括以下步骤：
将配方量的水与多元醇混合均匀并升温至40～60℃，向其中加入配方量的木芙蓉叶提取物和增溶剂，混合均匀，保温5～15min，降温30℃以下，过滤，得到防腐组合物。
10.一种化妆品组合物，其特征在于，包括权利要求5所述的木芙蓉叶提取物、权利要求6-8任意一项所述的防腐组合物或采用权利要求9所述的防腐组合物的制备方法制备得到的防腐组合物。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111759776A (zh) * 2020-08-18 2020-10-13 广东丸美生物技术股份有限公司 一种抗敏抗紫外组合物及其化妆品
CN114632046A (zh) * 2022-04-18 2022-06-17 成都花荟缘文化发展有限公司 一种抗紫外芙蓉香水及其制备方法
CN115888510A (zh) * 2023-01-10 2023-04-04 汕头市奇伟实业有限公司 一种复配型天然植物防腐组合物及其多向差速紊流制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106309251A (zh) * 2016-10-14 2017-01-11 广东丸美生物技术股份有限公司 一种具有抗炎舒敏功效的积雪草提取物及其应用
CN108096112A (zh) * 2018-01-12 2018-06-01 福建师范大学 一种具有防腐功效的植物组合物及其制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106309251A (zh) * 2016-10-14 2017-01-11 广东丸美生物技术股份有限公司 一种具有抗炎舒敏功效的积雪草提取物及其应用
CN108096112A (zh) * 2018-01-12 2018-06-01 福建师范大学 一种具有防腐功效的植物组合物及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
万俊等: "低温高压均质法提取谷胱甘肽的生产工艺研究", 《食品与机械》 *
李昌灵等: "木芙蓉（Hibiscus mutabilis）叶提取物对大肠杆菌O1和金黄色葡萄球菌91053的体外抗菌效果研究", 《食品工业科技》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111759776A (zh) * 2020-08-18 2020-10-13 广东丸美生物技术股份有限公司 一种抗敏抗紫外组合物及其化妆品
CN111759776B (zh) * 2020-08-18 2022-06-21 广东丸美生物技术股份有限公司 一种抗敏抗紫外组合物及其化妆品
CN114632046A (zh) * 2022-04-18 2022-06-17 成都花荟缘文化发展有限公司 一种抗紫外芙蓉香水及其制备方法
CN115888510A (zh) * 2023-01-10 2023-04-04 汕头市奇伟实业有限公司 一种复配型天然植物防腐组合物及其多向差速紊流制备方法

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