CN108685802B - 防腐组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于化妆品防腐技术领域，涉及防腐组合物及其制备方法和应用。本发明的防腐组合物，包括地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物以及辅料。本发明创造性地将地榆提取物、天山堇菜提取物和木芙蓉叶提取物进行组合，作为防腐组合物的活性成分，三种提取物可以协同增效，使得防腐组合物具有很好的广谱抗菌作用，且对化妆品中常见真菌白色念珠菌、黑曲霉以及大肠杆菌、酵母菌等都具有很好的抑菌作用；同时，刺激性低、稳定性高、防腐效果突出，对人体无害，无毒副作用，可安全应用于各类化妆品中。

Description

防腐组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于化妆品防腐技术领域，具体而言，涉及一种防腐组合物及其制备方法和应用。

背景技术

防腐剂是能够阻止微生物生长，防止产品变质的一类添加剂。在化妆品中，添加防腐剂可以避免化妆品中微生物活动所造成的产品变质、变味、腐败，延长产品的货架期，防止消费者因为使用被微生物污染的化妆品而产生不良影响。目前，我国《化妆品安全技术规范》(2015版)规定准用防腐剂51项，其中广泛使用的防腐剂主要有尼泊金酯类、甲醛释放体类、苯甲醇及其衍生物、甲基异噻唑啉酮或苯氧乙醇等，种类繁多。

目前所使用的大多数化妆品防腐剂都是以成本较低、易于生产的化学合成物质为主，虽然其可以有效保持化妆品的稳定，但是随着科技的发展，许多化学防腐剂都被证明有一定的负面作用，比如甲醛释放体类防腐剂存在一定的致癌风险，甲基异噻唑啉酮具有一定刺激性和致敏性，可引起严重的皮炎，同时苯氧乙醇、尼泊金酯类等防腐剂也因其潜在的安全性而备受广大学者和消费者的质疑和担忧。与此相对应的，天然植物来源的防腐剂具有刺激小、安全、可再生、效果突出等特点。因此，从天然植物中开发安全、温和、高效的防腐体系作为化学防腐剂的替代品，是目前化妆品防腐领域的研究热点。

天然植物来源的防腐剂是以天然植物中提取出来的抑菌有效成分为主要活性成分。目前，市面上的天然植物防腐剂并不多见。因其仍然存在许多不足，例如一些天然植物提取物的防腐剂虽然具有一定安全性，但是其抑菌效果不能达到化学品防腐剂的性能，防腐能力不足，具有使用局限性，再如还存在提取物的纯度低、颜色深、味道重、降低化妆品体系粘度而影响稳定性等问题。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种防腐组合物，有效成分来源于天然植物提取物，刺激性低、稳定性高、防腐效果突出，对人体无害，无毒副作用，可安全应用于化妆品中。

本发明的另一个目的在于提供一种上述防腐组合物的制备方法，工艺简单，操作简便，易于实施。

本发明的又一个目的在于提供一种防腐组合物在制备化妆品中的应用；以及包含上述防腐组合物的化妆品。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一方面，本发明提供一种防腐组合物，主要由如下原料制成：地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物以及任选地辅料。

作为进一步优选技术方案，所述辅料包括增溶剂和/或保湿剂；

优选地，所述增溶剂为非离子型增溶剂，所述增溶剂包括氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮，所述增溶剂优选包括PEG－40氢化蓖麻油、PEG－60氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种，所述增溶剂进一步优选为PEG－40氢化蓖麻油；

优选地，所述保湿剂包括多元醇，所述多元醇优选为乙基己基甘油、辛甘醇、1，2－戊二醇或1，2－己二醇中的至少一种，所述多元醇进一步优选为乙基己基甘油与辛甘醇、1，2－戊二醇或者1，2－己二醇的组合。

作为进一步优选技术方案，所述防腐组合物主要由以下质量百分比的原料制成：地榆提取物0.5％～5％、天山堇菜提取物2％～8％、木芙蓉叶提取物1％～10％、增溶剂3％～20％、保湿剂15％～50％，余量为水；

优选地，所述防腐组合物主要由以下质量百分比的原料制成：地榆提取物1.5％～4.5％、天山堇菜提取物3％～6％、木芙蓉叶提取物3％～9％、增溶剂4％～12％、保湿剂22％～40％，余量为水；

更优选地，所述防腐组合物主要由以下质量百分比的原料制成：地榆提取物2％～4％、天山堇菜提取物3％～5.5％、木芙蓉叶提取物3％～8％、增溶剂7％～12％、保湿剂25％～40％，余量为水。

作为进一步优选技术方案，所述地榆提取物中总黄酮含量≥80wt％，优选为80～93wt％，进一步优选为85～93wt％；

优选地，所述地榆提取物通过如下方法制备：将地榆进行预处理，经超声波提取后，得到提取液；对提取液依次进行分离、浓缩、纯化和脱色，得到地榆提取物；

优选地，采用低温高压均质处理的方式对地榆进行预处理；优选地，均质的温度为0～10℃，优选为2～6℃；优选地，均质的压力为2.0～6.0MPa，优选为2.5～5.5MPa；优选地，均质的时间为10～60s，优选为20～30s；优选地，均质所采用的溶剂为质量浓度为40～95％的低碳醇，优选为70～90％的低碳醇；

优选地，超声波提取的功率为228～380W，优选为304～342W；优选地，料液比为1：15～1：60，优选为1：15～1：35；优选地，提取物温度为30～60℃，优选为35～50℃；优选地，提取时间为0.15～1.5h，优选为0.5～1.0h；

优选地，纯化的方式为采用大孔吸附树脂进行纯化；优选地，大孔吸附树脂为弱极性或非极性大孔吸附树脂；优选地，所述大孔吸附树脂包括HPD－100型、D101型、D4020型或HPD－400型中的一种；

优选地，采用活性炭进行脱色；

优选地，脱色之后还包括浓缩和干燥的步骤。

作为进一步优选技术方案，所述天山堇菜提取物中总黄酮含量≥75wt％，优选为75～96wt％，进一步优选为85～96wt％；

优选地，所述天山堇菜提取物通过如下方法制备：将天山堇菜进行预处理，经超声波提取后，得到提取液；对提取液依次进行分离、浓缩和纯化，得到天山堇菜提取物；

优选地，采用低温高压均质处理的方式对天山堇菜进行预处理；优选地，均质的温度为0～10℃，优选为2～6℃；优选地，均质的压力为2.0～6.0MPa，优选为2.5～5.5MPa；优选地，均质的时间为10～60s，优选为20～30s；优选地，均质所采用的溶剂为质量浓度为35～95％的低碳醇，优选为50～90％的低碳醇；

优选地，超声波提取的功率为228～380W，优选为266～342W；优选地，料液比为1：15～1：60，优选为1：20～1：30；优选地，提取物温度为30～60℃，优选为40～45℃；优选地，提取时间为0.15～1.5h，优选为0.5～1.0h；

优选地，纯化的方式为硅胶柱纯化；优选地，硅胶柱中硅胶的规格为100～200目、200～300目或300～400目；优选地，纯化之后还包括超滤、浓缩和干燥的步骤。

作为进一步优选技术方案，所述木芙蓉叶提取物中总黄酮含量≥80wt％，优选为80～95wt％，进一步优选为85～95wt％；

优选地，所述木芙蓉叶提取物通过如下方法制备：将木芙蓉叶进行预处理，经超声波提取后，得到提取液；对提取液依次进行分离、浓缩、纯化和脱色，得到木芙蓉叶提取物；

优选地，采用低温高压均质处理的方式对木芙蓉叶进行预处理；优选地，均质的温度为0～10℃，优选为2～6℃；优选地，均质的压力为2.0～6.0MPa，优选为2.5～5.5MPa；优选地，均质的时间为10～60s，优选为20～30s；优选地，均质所采用的溶剂为质量浓度为45～90％的低碳醇，优选为70～80％的低碳醇；

优选地，超声波提取的功率为228～380W，优选为266～342W；优选地，料液比为1：10～1：50，优选为1：20～1：30；优选地，提取物温度为30～50℃，优选为35～45℃；优选地，提取时间为0.2～2h，优选为0.5～1.0h；优选地，纯化的方式为聚酰胺树脂纯化；优选地，聚酰胺树脂的规格为80～100目、100～200目或200～300目；优选地，采用活性炭进行脱色；优选地，脱色之后还包括浓缩、调pH、分离、洗涤和干燥的步骤。

根据本发明的另一个方面，本发明提供一种上述防腐组合物的制备方法，将地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物以及任选地辅料混合均匀后得到所述防腐组合物；

优选地，先将保湿剂与水混合，再加入地榆提取物、天山堇菜提取物和木芙蓉叶提取物，混合均匀，然后加入增溶剂混匀，分离出不溶物后得到所述防腐组合物。

作为进一步优选技术方案，包括以下步骤：将水与保湿剂混合均匀并升温至40～60℃，向其中加入地榆提取物、天山堇菜提取物和木芙蓉叶提取物，搅拌溶解后，再加入增溶剂，混合均匀，保温5～15min，降温至30℃以下，分离出不溶物，得到防腐组合物。

根据本发明的另一个方面，本发明提供一种上述防腐组合物在制备化妆品中的应用。

根据本发明的另一个方面，本发明提供一种包含上述防腐组合物的化妆品；

优选地，所述化妆品包括霜剂、乳液、凝胶剂、面膜、擦剂、洗剂、喷雾剂、皂剂、软膏剂、酊剂或胶囊剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

本发明提供的防腐组合物，创造性地将地榆提取物、天山堇菜提取物和木芙蓉叶提取物进行组合，作为防腐组合物的活性成分，三种提取物可以协同增效，使得防腐组合物具有很好的广谱抗菌作用，且对化妆品中常见真菌白色念珠菌、黑曲霉以及大肠杆菌、酵母菌等都具有很好的抑菌作用。

本发明的防腐组合物主要由地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物以及任选地辅料组成，各原料组分科学地搭配，各组分之间相互影响，取得协同增效作用，为人们提供了一种天然、安全有效、抑菌谱广、无毒副作用的防腐组合物，具有安全性高、刺激性小、稳定性好等特点，同时还具有显著的抗氧化作用，将其应用在化妆品中，在起到良好的防腐效果的同时还能提升产品的抗衰老功效。

本发明的制备方法流程简单，操作简便、易于实施，能够充分发挥各原料的功效，产品稳定性好，易于工业化生产。

具体实施方式

下面将结合实施方式和实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施方式和实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

第一方面，在至少一个实施例中提供一种防腐组合物，主要由如下原料制成：

地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物以及任选地辅料。

地榆为蔷薇科植物地榆，也可称为长穗地榆，是一种常用的中药，含有丰富的营养物质和生理活性成分，例如黄酮类成分、皂苷类成分、鞣质类成分、甾体及其苷类成分、糖类成分等其他成分。其性微寒、苦、涩、酸，归肝、胃、大肠经，有凉血止血、解毒敛疮之功效。地榆对伤寒杆菌、脑膜炎球菌、福氏痢疾杆菌等具有抑制作用。

地榆在我国有多个种和变种，例如地榆、长叶地榆、长穗地榆、细叶地榆等。由于长穗地榆中含有更丰富的活性物质，因此本发明优选使用长穗地榆的提取物作为防腐组合物中的活性成分。由于地榆根中皂苷含量丰富，因此优选以地榆的根为原料制备皂苷提取物。

天山堇菜作为一种维药，其含有丰富的黄酮、挥发油、生物碱、氨基酸、粘液质皂苷、鞣质等成分，具有清热解毒的功效，可用于各种发热、受寒、感冒、胸膜炎、肺炎、咽炎、疔疮肿痈等症。天山堇菜中含有丰富的挥发油、黄酮化合物、生物碱类和微量元素。其中总黄酮为天山堇菜提取物中的主要抗菌成分。

黄酮是一类具有C6－C3－C6基本母核的天然产物，黄酮可分为黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、查儿酮类、花青素类。黄酮类化合物具有良好的抗氧化和抗菌作用。

木芙蓉叶是锦葵科木槿属植物木芙蓉的叶子，是一味传统中药，其主要成分为黄酮类和甾醇。木芙蓉叶提取物具有清肺凉血，消肿排脓等作用。对于金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、副大肠杆菌、变形杆菌等均有抑制作用；还具有一定的抗癌作用。

本发明创造性地将地榆提取物、天山堇菜提取物和木芙蓉叶提取物进行组合，作为防腐组合物的活性成分，三种提取物可以协同增效，使得防腐组合物具有很好的广谱抗菌作用，且对化妆品中常见真菌白色念珠菌、黑曲霉以及大肠杆菌、酵母菌等都具有很好的抑菌作用。

进一步地，本发明的防腐组合物主要由地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物以及任选地辅料组成，各原料组分科学地搭配，各组分之间相互影响，取得协同作用，抑菌效果显著，为人们提供了一种天然、安全有效、抑菌谱广、无毒副作用的防腐组合物，具有安全性高、刺激性小、稳定性好等特点，同时还具有显著的抗氧化作用，将其应用在化妆品中，在起到良好的防腐效果的同时还能提升产品的抗衰老功效。

在一种优选的实施方式中，所述辅料包括增溶剂和/或保湿剂；

优选地，所述防腐组合物还包括溶剂，可选地，所述溶剂包括但不限于醇类、脂类、醚类或者水等，所述溶剂优选为水，更优选为去离子水。

可以理解的是，所述的辅料包括但不限于增溶剂、保湿剂、增香剂、增稠剂、抗氧剂等，本领域可接受的常规辅料均可添加，辅料可以组合两种及以上使用，这些辅料可以赋予防腐组合物不同的特性。在本发明的一些优选实施中，所述辅料包括增溶剂和保湿剂，这些提取物可以和保湿剂协同增效，提升防腐效果的同时具有一定的保湿性能，增溶剂可以改善提取物在组合物中的溶解性，从而改善其稳定性。

优选地，所述增溶剂为非离子型增溶剂，所述增溶剂包括氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮，所述增溶剂优选包括PEG－40氢化蓖麻油、PEG－60氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种，所述增溶剂进一步优选为PEG－40氢化蓖麻油；

上述氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮均为高效增溶剂，能增大上述提取物在水中的溶解性，从而形成稳定、透明的溶液；尤其是PEG－40氢化蓖麻油具有更优异的增溶效果。

优选地，所述保湿剂包括但不限于多元醇类、天然保湿因子或氨基酸等，所述保湿剂优选为多元醇类保湿剂。

优选地，所述保湿剂包括多元醇，所述多元醇优选为乙基己基甘油、辛甘醇、1，2－戊二醇或1，2－己二醇中的至少一种，所述多元醇进一步优选为乙基己基甘油与辛甘醇、1，2－戊二醇或者1，2－己二醇的组合，更优选为乙基己基甘油与1，2－戊二醇的组合。

上述乙基己基甘油、辛甘醇、1，2－戊二醇和1，2－己二醇是多功能性的保湿剂，在配方中能起到抑菌的作用，既可加到水相，又可以加到油相。当加到水相时，其能形成一个抑菌环境，对整个防腐组合物起到防腐作用。另外，乙基己基甘油可以增效醇类，例如乙基己基甘油能够提高辛甘醇、1，2－戊二醇的抗菌作用。

在一种优选的实施方式中，所述防腐组合物包括如下组分：地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物、增溶剂、保湿剂和水。组合物中，三种提取物可以协同增效，同时结合乙基己基甘油及1，2－戊二醇类保湿剂可进一步扩大本组合物的抑菌范围并降低组合物的刺激性和过敏性，而增溶剂可有效改善组合物的稳定性。

优选地，所述防腐组合物主要由以下质量百分比的原料制成：地榆提取物0.5％～5％、天山堇菜提取物2％～8％、木芙蓉叶提取物1％～10％、增溶剂3％～20％、保湿剂15％～50％，余量为水。

通过上述各原料以及用量之间的配合作用，使得防腐组合物抑菌效果显著，抑菌谱广，效果稳定，刺激性小，安全性高，同时该组合物具有显著的抗氧化功效，可以将其应用于相关化妆品中，在起到防腐的同时提升产品的抗衰老功效。本发明的地榆提取物、天山堇菜提取物以及木芙蓉叶提取物具有刺激性低、色泽浅、稳定性高、抑菌防腐效果显著等特点，显著改善了目前植物提取物所面临的难题。地榆提取物典型但非限制性的质量分数为0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％或5％；天山堇菜提取物典型但非限制性的质量分数为2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％或8％；木芙蓉叶提取物典型但非限制性的质量分数为1％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、7％、8％、9％或10％。

增溶剂可增大提取物在水中的溶解性，增强提取物与多元醇的相容性。增溶剂的用量对其增溶作用很重要。用量不足，可能起不到增溶作用，或在贮存、稀释时防腐组合物会发生沉淀；用量太多，既浪费，又可能产生毒副作用。本发明中，增溶剂典型但非限制性的质量分数为3％、4％、5％、6％、8％、10％、12％、14％、15％、16％、18％或20％。

保湿剂可以和提取物协同增效，提升防腐效果的同时具有一定的保湿性能。在本发明中，保湿剂典型但非限制性的质量分数为15％、16％、18％、20％、22％、25％、26％、28％、30％、32％、35％、36％、38％、40％、42％、45％、46％、48％或50％。

需要说明的是，余量为水，指本发明防腐组合物的原料中除去地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物、保湿剂、增溶剂以及任选地其他原料之外的余量为水，水与地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物、保湿剂、增溶剂以及任选地其他原料的质量百分含量之和为100％。

优选地，所述防腐组合物主要由以下质量百分比的原料制成：地榆提取物1.5％～4.5％、天山堇菜提取物3％～6％、木芙蓉叶提取物3％～9％、增溶剂4％～12％、保湿剂22％～40％，余量为水；

更优选地，所述防腐组合物主要由以下质量百分比的原料制成：地榆提取物2％～4％、天山堇菜提取物3％～5.5％、木芙蓉叶提取物3％～8％、增溶剂7％～12％、保湿剂25％～40％，余量为水。

通过对防腐组合物各原料用量的进一步限定，使得该防腐组合物的防腐抑菌以及抗氧化效果更为显著，同时对皮肤的刺激更小，安全性得到进一步提升。

在一种优选的实施方式中，所述地榆提取物中总黄酮含量≥80wt％，优选为80～93wt％，进一步优选为85～93wt％；

和/或，所述天山堇菜提取物中总黄酮含量≥75wt％，优选为75～96wt％，进一步优选为85～96wt％；

和/或，所述木芙蓉叶提取物中总黄酮含量≥80wt％，优选为82～95wt％，进一步优选为85～95wt％。

提高地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物中总黄酮的含量，可以提高防腐组合物的防腐效果。

在一种优选的实施方式中，所述地榆提取物通过如下方法制备：将地榆进行预处理，经超声波提取后，得到提取液；对提取液依次进行分离、浓缩、纯化和脱色，得到地榆提取物。

在一种优选的实施方式中，所述天山堇菜提取物通过如下方法制备：将天山堇菜进行预处理，经超声波提取后，得到提取液；对提取液依次进行分离、浓缩和纯化，得到天山堇菜提取物。

在一种优选的实施方式中，所述木芙蓉叶提取物通过如下方法制备：将木芙蓉叶进行预处理，经超声波提取后，得到提取液；对提取液依次进行分离、浓缩、纯化和脱色，得到木芙蓉叶提取物。

优选地，采用低温高压均质处理的方式对地榆进行预处理；

优选地，采用低温高压均质处理的方式对天山堇菜进行预处理；

优选地，采用低温高压均质处理的方式对木芙蓉叶进行预处理。低温高压均质处理过程，就是被提取颗粒与溶剂混合后在一定的温度、压力和时间下被粉碎为超细颗粒，能够破碎被均质物的细胞组织结构，极大地提高被提取物的表面积，使其充分与溶剂相接触，从而有效提高提取效率；相较于现有的其它前处理方法，低温高压均质处理法具有显著的优势，其处理温度低，可以避免高温对原料中总皂苷的破坏，同时高速均质可以有效破坏其细胞，促进有效物质更好地溶出，从而提升提取效率。

优选地，地榆纯化的方式为采用大孔吸附树脂进行纯化；大孔吸附树脂可以对长穗地榆中的皂苷组分进行选择性地吸附，同时去除提取液中的糖、蛋白以及部分色素等不稳定组分，从而有效提高长穗地榆提取液的纯度及稳定性，实现地榆中有效成分的分离和精制。

优选地，天山堇菜纯化的方式为硅胶柱纯化。硅胶可以对黄酮进行有效的吸附和解析，从而去除提取液中的果胶、蛋白、糖类以及部分色素等其它杂质，显著提升天山堇菜提取物中总黄酮的含量及稳定性。

优选地，木芙蓉叶纯化的方式为聚酰胺树脂纯化；聚酰胺是一类结构中含有重复单位酰胺键的高分子聚合物，酰胺基团以静电引力吸附溶液中的阴离子，故可以与黄酮类等富含酚羟基的化合物形成氢键而被吸附，可以起到很好的纯化作用。

本发明的三种原料的提取物制备中，采用的低温高压均质前处理技术可以减少前处理对目标组分的破坏，同时提升提取率；采用的超声波提取技术可以有效提升提取率，减少提取时间；采用的大孔树脂纯化、硅胶柱纯化、超滤膜纯化以及聚酰胺树脂纯化和碱溶酸沉等纯化技术一方面可以提升提取物中目标组分的含量，另一方面可以减少不稳定组分的含量，从而提高产品的稳定性并减少刺激性和致敏性。

在本发明的一种优选实施中，所述的地榆提取物的制备方法，具体包括以下步骤：

S1.将干燥后的长穗地榆去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过不锈钢网筛，得到长穗地榆粉；其中，过筛目数为30目～100目，优选为60目～80目；

S2.将长穗地榆加入一定浓度的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理；其中，乙醇浓度为40％～95％，优选为75％～90％；均质温度0～10℃，优选为4℃；均质压力2.0～6.0MPa，优选为5.5MPa；均质时间10～60s，优选为30s；低温高压均质处理的效果与均质温度、均质压力和均质时间有一定的关系；故需要调整均质温度、均质压力和均质时间使其在合理的范围内，才能确保良好的均质处理效果；

S3.用超声波辅助提取法提取S2.处理过后的混合液，提取后离心或抽滤，收集滤液；其中，超声功率228W～380W，优选为304W～342W；料液比1：10～1：50，优选为1：15～1：35；提取物温度20～55℃，优选为35～50℃；提取时间0.15～2h，优选为0.5～1.0h；通过对超声提取过程中提取功率、提取时间以及提取物温度等具体参数的限定，可使得超声提取效果更佳；

S4.将S3.获得的滤液进行减压浓缩，获得浓缩混悬液；其中，减压浓缩至原体积的1/10～1/2，优选为1/5～1/8；

S5.将S4.获得的浓缩混悬液通过大孔吸附树脂进行纯化，获得洗脱液；其中，大孔吸附树脂型号为HPD－100型、D101型、D4020型或HPD－400型，优选为HPD－400型；洗脱液为60～90％乙醇水溶液，优选为70～90％乙醇；洗脱量为1～4BV，优选为1.5～3BV；洗脱流速为2～4BV/h，优选为1～2BV/h；通过对上述参数的限定，可使得地榆提取物具有良好的纯化效果和安全性；

S6.将S5.获得的洗脱液中加入活性炭进行脱色处理，获得脱色液；其中，活性炭添加量为S5所得洗脱液质量的0.2％～2％，优选为0.5％～1.5％；脱色时间0.2～1.0h，优选为0.2～0.8h；脱色温度30～55℃，优选为40～45℃。活性炭对于体系物质的吸附不具有选择性，添加量过低脱色效果不佳，也会影响其吸附杂质，添加量过高，虽然脱色效果好，但是吸附量增加，会吸附较多的目标组分，造成体系有效物质损失过大；

S7.将S6.获得的脱色液进行减压浓缩，去除多余乙醇；其中，减压浓缩至原体积的1/5～1/15，优选为1/6～1/10；

S8.将S7.获得的浓缩液进行冷冻干燥，获得长穗地榆提取物；其中，冷冻温度－70～－90℃，优选为－80～－90℃；冷冻干燥时间20～70h，优选为40～60h；真空压力1.0Pa～15Pa，优选为1.0Pa～5.0Pa；所获得地榆提取物中总黄酮含量不低于80％。

在上述特定的操作步骤以及操作参数的配合下，通过将低温高压均质处理、超声提取、大孔吸附树脂纯化等步骤结合，制得的地榆提取物具有纯度高、颜色浅、稳定性高并且安全性好等特点。另外，该制备方法简单，易于操作，提取率高、提取速度快可适用于批量生产。

需要说明的是，本发明对于所述的“低碳醇”没有特殊限制(下同)，包括但不限于甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、异丙醇等，优选采用的是来源广、成本低，应用效果更佳的乙醇。

在本发明的一种优选实施中，所述天山堇菜提取物的制备方法，具体包括以下步骤：

S1.将干燥后的天山堇菜去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过不锈钢网筛，得到天山堇菜粉；其中，过筛目数为30目～80目，优选为50目～60目；

S2.将天山堇菜粉加入一定浓度的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理；其中，乙醇浓度为35％～95％，优选为70％～90％；均质温度0～10℃，优选为4℃；均质压力2.0～6.0MPa，优选为5.5MPa；均质时间10～60s，优选为30s；低温高压均质处理的效果与均质温度、均质压力和均质时间有一定的关系；故需要调整均质温度、均质压力和均质时间使其在合理的范围内，才能确保良好的均质处理效果；

S3.用超声波辅助提取法提取S2.处理过后的混合液，提取后离心或抽滤，收集滤液；其中，超声功率228W～380W，优选为266W～342W；料液比1：15～1：60，优选为1：20～1：30；提取物温度30～60℃，优选为40～45℃；提取时间0.15～1.5h，优选为0.5～1.0h；通过对超声提取过程中提取功率、提取时间以及提取物温度等具体参数的限定，可使得超声提取效果更佳；

S4.将S3.获得的滤液进行减压浓缩，获得浓缩混悬液；其中，减压浓缩至原体积的1/8～1/3，优选为1/4～1/6，使其中总黄酮含量在8～15mg/mL；

S5.将S4.获得的浓缩混悬液通过硅胶柱进行纯化，获得洗脱液；其中，硅胶的规格为100～200目、200～300目或300～400目，优选为200～300目；洗脱液为50～95％乙醇水溶液，优选为80～90％乙醇；洗脱量为0.5～3.5BV，优选为2～3BV；洗脱流速为1.5～3BV/h，优选为1.5～2BV/h；通过对上述参数的限定，可使得天山堇菜提取物具有良好的纯化效果和安全性；

S6.将S5.获得的洗脱液中通过超滤膜进行处理，获得超滤滤液；超滤技术是通过膜表面的微孔结构对物质进行选择性分离。当液体混合物在一定压力下流经膜表面时，小分子溶质透过膜，而大分子物质则被截留，使原液中大分子浓度逐渐提高，从而实现大、小分子的分离、浓缩、净化的目的。利用超滤膜可以进一步纯化天山堇菜提取物，去除部分大分子物质，而天山堇菜总黄酮可以透过超滤膜，从而达到纯化的目的。其中，超滤膜孔径为1KD、5KD或10KD，优选为5KD、10KD，超滤压力5psi～20psi，优选为5psi～15psi；

S7.将S6.获得的超滤滤液进行减压浓缩，获得浓缩液；其中，减压浓缩至原体积的1/4～1/15，优选为1/5～1/12；

S8.将S7.获得的浓缩液进行冷冻干燥，获得天山堇菜提取物；冷冻干燥可使得天山堇菜中有效成分(主要指易挥发性成分和受热易变性成份)损失很小；其中，冷冻温度－70～－90℃，优选为－80～－90℃；冷冻干燥时间20～70h，优选为40～60h；真空压力1.0Pa～15Pa，优选为1.0Pa～5.0Pa；所获得天山堇菜提取物中总黄酮含量不低于75％。

在上述特定的操作步骤以及操作参数的配合下，通过将低温高压均质处理、超声提取、硅胶柱纯化等步骤结合，制得的天山堇菜提取物具有纯度高、颜色浅、稳定性高并且安全性好等特点。另外，该制备方法简单，易于操作，提取率高、提取速度快可适用于批量生产。

在本发明的一种优选实施中，所述的木芙蓉叶提取物的制备方法，具体包括以下步骤：

S1.将干燥后的木芙蓉叶去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过不锈钢网筛，得到木芙蓉叶粉；其中，过筛目数为30目～100目，优选为40目～60目；

S2.将木芙蓉叶粉加入一定浓度的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理；其中，乙醇浓度为45％～90％，优选为70％～80％；均质温度0～10℃，优选为4℃；均质压力2.0～6.0MPa，优选为5.5MPa；均质时间10～60s，优选为30s；低温高压均质处理的效果与均质温度、均质压力和均质时间有一定的关系；故需要调整均质温度、均质压力和均质时间使其在合理的范围内，才能确保良好的均质处理效果；

S3.用超声波辅助提取法提取S2.处理过后的混合液，提取后离心或抽滤，收集滤液；其中，超声功率228W～380W，优选为266W～304W；料液比1：10～1：50，优选为1：20～1：30；提取物温度30～50℃，优选为35～45℃；提取时间0.2～2h，优选为0.5～1.0h；通过对超声提取过程中提取功率、提取时间以及提取物温度等具体参数的限定，可使得超声提取效果更佳；

S4.将S3.获得的滤液进行减压浓缩，获得浓缩混悬液；其中，减压浓缩至原体积的1/10～1/2，优选为1/5～1/7，使其中总黄酮含量在3～10mg/mL；

S5.将S4.获得的浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，获得洗脱液；其中，聚酰胺树脂的规格为80～100目、100～200目或200～300目，优选为100～200目；洗脱液为40～95％乙醇水溶液，优选为70～90％乙醇；洗脱量为0.5～4.5BV，优选为1～3BV；洗脱流速为1.5～3.5BV/h，优选为1～2BV/h；通过对上述参数的限定，可使得木芙蓉叶提取物具有良好的纯化效果和安全性；

S6.将S5.获得的洗脱液中加入活性炭进行脱色，经离心或抽滤获得脱色滤液；其中，活性炭添加量为S5所得洗脱液质量的0.1％～1.5％，优选为0.5％～0.8％；脱色时间0.2～1.0h，优选为0.3～0.5h；脱色温度30～55℃，优选为40～50℃；离心速度3000～4500r/min，优选为4500r/min；离心时间15～30min，优选为20～30min；

S7.将S6.获得的脱色滤液进行减压浓缩，获得浓缩液；其中，减压浓缩至原体积的1/4～1/10，优选为1/5～1/8；

S8.将S7.获得的浓缩液调节pH至碱性，离心获得上清液；其中，采用氢氧化钠或氢氧化钾溶液进行调节pH，调节pH至9～11，优选采用氢氧化钠溶液进行调节pH，调节pH至9.5～10.5；

S9.将S8.获得的上清液调节pH至酸性，离心获得沉淀；其中，采用盐酸或硫酸溶液进行调节pH，调节pH至3.5～5.5，优选采用采用盐酸溶液进行调节pH，调节pH至3.5～4.5；

S10.用水清洗S9.获得的沉淀，再经冷冻干燥获得木芙蓉叶提取物；冷冻干燥可使得木芙蓉叶中有效成分(主要指易挥发性成分和受热易变性成份)损失很小；其中，冷冻温度－70～－90℃，优选为－80～－90℃；冷冻干燥时间20～70h，优选为40～60h；真空压力1.0Pa～15Pa，优选为1.0Pa～5.0Pa；所获得木芙蓉叶提取物中总黄酮含量不低于80％。

在上述特定的操作步骤以及操作参数的配合下，通过将低温高压均质处理、超声提取、聚酰胺树脂纯化和碱溶酸沉技术等步骤结合，制备得到的木芙蓉叶提取物具有纯度高、颜色浅、稳定性高并且安全性好等特点。另外，该制备方法简单，易于操作，提取率高、提取速度快，可适用于批量生产。

本发明首次将低温高压均质技术应用于长穗地榆、天山堇菜以及木芙蓉叶的前处理，该技术的低温操作可以避免前处理对有效组分的破坏，而高压均质可有效促进目标组分的溶出，与现有技术相比，该技术可以有效提高提取效率；利用超声波提取技术对三种植物进行提取，超声波的空化作用、机械振动效应和热效应可以显著提升提取效率，同事降低提取时间并减少提取过程对目标组分的破坏；利用大孔树脂纯化技术对长穗地榆提取物进行纯化，可以提升所获长穗地榆提取物中总皂苷的含量，并对干扰组分进行有效分离；利用硅胶纯化技术和超滤膜纯化技术可以对天山堇菜中的总黄酮进行纯化，提升所获提取物的纯度；利用聚酰胺树脂纯化技术和碱溶酸沉技术对木芙蓉叶中的总黄酮进行纯化，获得木芙蓉叶提取物中总黄酮含量超过80％；本发明将长穗地榆提取物、天山堇菜提取物以及木芙蓉叶提取物进行组合，同时结合增溶剂和多元醇的搭配组合，所获得的组合物抑菌效果更好。

第二方面，在至少一个实施例中提供一种所述防腐组合物的制备方法，将地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物以及任选地辅料混合均匀后得到所述防腐组合物。该方法具有工艺简单和操作方便的优点。

在一种优选的实施方式中，所述方法包括：先将保湿剂与水混合，再加入地榆提取物、天山堇菜提取物和木芙蓉叶提取物，混合均匀，然后加入增溶剂混匀，分离出不溶物后得到所述防腐组合物。该制备方法简单，易于操作，够充分发挥各原料的功效，适用于批量生产。且通过该方法所制备的防腐组合物混合均匀，稳定性好。

在本发明的一种优选的实施方式中，所述防腐组合物的制备方法包括以下步骤：将水与保湿剂混合均匀并升温至40～60℃，向其中加入地榆提取物、天山堇菜提取物和木芙蓉叶提取物，搅拌溶解后，再加入增溶剂，混合均匀，保温5～15min，降温至30℃以下，分离出不溶物，得到防腐组合物。

进一步地，包括以下步骤：

1)将去离子水与保湿剂混合，搅拌升温至40～60℃；

2)加入地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物，搅拌溶解，搅拌速度200～600r/min；

3)加入增溶剂，搅拌均匀，搅拌速度200～600r/min，保温5～15min；

4)降温至30℃以下，过0.22μm微孔滤膜，即得所述组合物。

通过采用不同的加料、混合顺序和加料温度，使得各原料混合更均匀，各原料之间的相容性更好，更利于提升防腐组合物的稳定性和均一性。

第三方面，在至少一个实施例中提供一种上述防腐组合物在制备化妆品中的应用。

第四方面，在至少一个实施例中提供一种包含上述防腐组合物的化妆品。

鉴于上述防腐组合物所具有的优势，使得该包含该防腐组合物的化妆品能够保持长期的稳定性，使用安全、刺激性低、稳定性高、防腐效果突出。

优选地，所述化妆品包括但不限于霜剂、乳液、凝胶剂、面膜、擦剂、洗剂、化妆水、喷雾剂、皂剂、软膏剂、酊剂或胶囊剂等。

可以理解的是，本发明的防腐组合物可应用在各类化妆品中，包括但不限于以达到清洁、保养、美容、修饰和改变外观的等各种类的护肤品、彩妆或药妆；例如可以为乳液、护肤霜、精华液、化妆水、面膜、喷雾、洁面奶、眼霜等。

下面结合具体实施例、对比例和实验例，对本发明作进一步说明。

实施例1

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物2％、天山堇菜提取物3％、木芙蓉叶提取物5％、乙基己基甘油15％、PEG－40氢化蓖麻油7％、1，2－戊二醇18％和去离子水50％。

其中，长穗地榆提取物的制备方法如下：

(1)将干燥后的长穗地榆的根去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过60目不锈钢网筛，得到长穗地榆粉；(2)将长穗地榆加入85％浓度的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度4℃，均质压力5.5MPa，均质时间30s；(3)采用超声波辅助提取法提取，超声功率342W，料液比1：20，提取温度40℃，提取时间0.5h，提取后离心或抽滤，收集滤液；(4)将获得的滤液进行减压浓缩至原体积的1/5，获得浓缩混悬液；(5)将浓缩混悬液通过大孔吸附树脂进行纯化，大孔吸附树脂型号为HPD－400，洗脱液为75％乙醇水溶液，洗脱量为1.5BV，洗脱速度1.5BV/h；(6)将获得的洗脱液中加入活性炭进行脱色处理，活性炭添加量为0.5％，脱色时间0.5h，脱色温度40℃；(7)将获得的脱色液进行减压浓缩至原体积的1/7，去除多余乙醇；(8)将获得的浓缩液进行冷冻干燥，冷冻温度－85℃、冷冻干燥时间45h、真空压力1.0Pa。

天山堇菜提取物的制备方法如下：

(1)将干燥后的天山堇菜去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过50目不锈钢网筛，得到天山堇菜粉；(2)将天山堇菜粉加入80％浓度的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度4℃，均质压力5.5MPa，均质时间30s；(3)采用超声波辅助提取法提取，超声功率304W，料液比1：30，提取温度45℃，提取时间0.5h，提取后离心或抽滤，收集滤液；(4)将获得的滤液进行减压浓缩至原体积的1/4，获得浓缩混悬液；(5)将浓缩混悬液通过硅胶柱进行纯化，所用硅胶目数为200～300目，洗脱液为85％乙醇，洗脱量为2BV，洗脱流速为1.5BV/h；(6)将获得的洗脱液用切向流超滤系统进行纯化，超滤膜的孔径为5KD，超滤压力5psi；(7)将获得的超滤液进行减压浓缩至原体积的1/8，去除多余乙醇；(8)将获得的浓缩液进行冷冻干燥，冷冻温度－85℃、冷冻干燥时间50h、真空压力3.0Pa。

木芙蓉叶提取物的制备方法如下：

(1)将干燥后的木芙蓉叶去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过40目不锈钢网筛，得到木芙蓉叶粉；(2)将木芙蓉叶粉加入80％浓度的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度4℃，均质压力5.5MPa，均质时间30s；(3)采用超声波辅助提取法提取，超声功率304W，料液比1：30，提取温度35℃，提取时间0.5h，提取后离心或抽滤，收集滤液；(4)将获得的滤液进行减压浓缩至原体积的1/6，获得浓缩混悬液；(5)将浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，所用聚酰胺目数为100～200目，洗脱液为90％乙醇，洗脱量为3.0BV，洗脱流速为2BV/h；(6)采用活性炭脱色，活性炭添加量为溶液质量的0.5％％，脱色温度50℃，脱色时间0.5h，离心速度4500r/min，离心时间30min；(7)将获得的超滤液进行减压浓缩至原体积的1/6，去除多余乙醇；(8)采用氢氧化钠溶液进行调节pH，调节pH至9.5，离心去除沉淀；(9)采用盐酸溶液进行调节pH，调节pH至3.5，离心获得沉淀；(10)将获得的沉淀用去离子水进行清洗，并进行冷冻干燥，冷冻温度－90℃、冷冻干燥时间45h、真空压力1.0Pa。

实施例2

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物4％、天山堇菜提取物5％、木芙蓉叶提取物7％、乙基己基甘油12％、PEG－40氢化蓖麻油10％、1，2－戊二醇22％和去离子水40％。

其中，各提取物的制备方法均同实施例1。

实施例3

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物3％、天山堇菜提取物5.5％、木芙蓉叶提取物4％、乙基己基甘油10％、PEG－40氢化蓖麻油12％、1，2－戊二醇20％和去离子水45.5％。

其中，各提取物的制备方法均同实施例1。

实施例4

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物3.5％、天山堇菜提取物4％、木芙蓉叶提取物8％、乙基己基甘油13％、PEG－40氢化蓖麻油9％、1，2－戊二醇18％和去离子水44.5％。

其中，各提取物的制备方法均同实施例1。

实施例1－4所述的防腐组合物的制备方法如下：

(1)将去离子水、1，2－戊二醇以及乙基己基甘油混合，搅拌升温至40～60℃；(2)加入长穗地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物，搅拌溶解，搅拌速度200～600r/min；(3)加入增溶剂，搅拌均匀，搅拌速度200～600r/min，保温5～15min；(4)降温至30℃以下，过0.22μm微孔滤膜，即得所述组合物。

实施例5

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物4.5％、天山堇菜提取物6％、木芙蓉叶提取物3％、乙基己基甘油14％、聚乙烯吡咯烷酮8％、辛甘醇19％和去离子水45.5％。

其中，各提取物的制备方法、组合物的制备方法均同实施例1。

实施例6

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物1.5％、天山堇菜提取物2.5％、木芙蓉叶提取物2％、1，2－己二醇7％、聚乙烯吡咯烷酮5％、1，2－戊二醇15％和去离子水67％。

其中，各提取物的制备方法、组合物的制备方法均同实施例1。

实施例7

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物5％、天山堇菜提取物5.5％、木芙蓉叶提取物6％、乙基己基甘油11.5％、PEG－60氢化蓖麻油11％、1，2－己二醇25％和去离子水36％。

其中，各提取物的制备方法、组合物的制备方法均同实施例1。

实施例8

一种防腐组合物，与实施例1的区别仅在于长穗地榆提取物的制备方法；

本实施例中，长穗地榆提取物的制备方法包括：

(1)将干燥后的长穗地榆的根去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过80目不锈钢网筛，得到长穗地榆粉；(2)将长穗地榆加入90％浓度的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度4℃，均质压力5.5MPa，均质时间30s；(3)采用超声波辅助提取法提取，超声功率304W，料液比1：30，提取温度40℃，提取时间0.75h，提取后离心或抽滤，收集滤液；(4)将获得的滤液进行减压浓缩至原体积的1/6，获得浓缩混悬液；(5)将浓缩混悬液通过大孔吸附树脂进行纯化，大孔吸附树脂型号为HPD－400，洗脱液为85％乙醇水溶液，洗脱量为2.0BV，洗脱速度1.5BV/h；(6)将获得的洗脱液中加入活性炭进行脱色处理，活性炭添加量为0.75％，脱色时间0.7h，脱色温度45℃；(7)将获得的脱色液进行减压浓缩至原体积的1/6，去除多余乙醇；(8)将获得的浓缩液进行冷冻干燥，冷冻温度－90℃、冷冻干燥时间56h、真空压力1.5Pa。

实施例9

一种防腐组合物，与实施例1的区别仅在于天山堇菜提取物的制备方法；

本实施例中，天山堇菜提取物的制备方法包括：

(1)将干燥后的天山堇菜去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过60目不锈钢网筛，得到天山堇菜粉；(2)将天山堇菜粉加入70％浓度的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度4℃，均质压力5.5MPa，均质时间30s；(3)采用超声波辅助提取法提取，超声功率266W，料液比1：20，提取温度40℃，提取时间1.0h，提取后离心或抽滤，收集滤液；(4)将获得的滤液进行减压浓缩至原体积的1/5，获得浓缩混悬液；(5)将浓缩混悬液通过硅胶柱进行纯化，所用硅胶目数为200～300目，洗脱液为90％乙醇，洗脱量为3BV，洗脱流速为2BV/h；(6)将获得的洗脱液用切向流超滤系统进行纯化，超滤膜的孔径为10KD，超滤压力10psi；(7)将获得的超滤液进行减压浓缩至原体积的1/10，去除多余乙醇；(8)将获得的浓缩液进行冷冻干燥，冷冻温度－90℃、冷冻干燥时间60h、真空压力4.0Pa。

实施例10

一种防腐组合物，与实施例1的区别仅在于木芙蓉叶提取物的制备方法；

本实施例中，木芙蓉叶提取物的制备方法包括：

(1)将干燥后的木芙蓉叶去除杂质，并用植物粉碎机粉碎，过60目不锈钢网筛，得到木芙蓉叶粉；(2)将木芙蓉叶粉加入75％浓度的乙醇水溶液中，采用低温高压均质机对其进行预处理，均质温度4℃，均质压力5.5MPa，均质时间30s；(3)采用超声波辅助提取法提取，超声功率266W，料液比1：25，提取温度40℃，提取时间0.75h，提取后离心或抽滤，收集滤液；(4)将获得的滤液进行减压浓缩至原体积的1/5，获得浓缩混悬液；(5)将浓缩混悬液通过聚酰胺树脂进行纯化，所用聚酰胺目数为100～200目，洗脱液为80％乙醇，洗脱量为3.0BV，洗脱流速为1.5BV/h；(6)采用活性炭脱色，活性炭添加量为溶液质量的0.75％％，脱色温度45℃，脱色时间0.4h，离心速度4500r/min，离心时间20min；(7)将获得的超滤液进行减压浓缩至原体积的1/8，去除多余乙醇；(8)采用氢氧化钠溶液进行调节pH，调节pH至10.5，离心去除沉淀；(9)采用盐酸溶液进行调节pH，调节pH至4.5，离心获得沉淀；(10)将获得的沉淀用去离子水进行清洗，并进行冷冻干燥，冷冻温度－85℃、冷冻干燥时间60h、真空压力3.5Pa。

对比例1

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物10％、天山堇菜提取物0.5％、木芙蓉叶提取物0.2％、乙基己基甘油5％、PEG－40氢化蓖麻油26％、1，2－戊二醇7％和去离子水51.3％。

其中，各提取物的制备方法、组合物的制备方法均同实施例1。

本对比例中，与实施例1的区别在于组合物中各原料的含量不在本发明提供的范围内。

对比例2

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物0.2％、天山堇菜提取物14％、木芙蓉叶提取物0.6％、乙基己基甘油10％、PEG－40氢化蓖麻油10％、1，2－戊二醇20％和去离子水45.2％。

其中，各提取物的制备方法、组合物的制备方法均同实施例1。

本对比例中，与实施例1的区别在于组合物中三个提取物的含量不在本发明提供的范围内。

对比例3

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

长穗地榆提取物4％、天山堇菜提取物5％、木芙蓉叶提取物7％、脱乙酰壳多糖5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷38％和去离子水41％。

其中，各提取物的制备方法、组合物的制备方法均同实施例1。

本对比例中，与实施例1的区别在于组合物中辅料的类型不在本发明提供的范围内。

对比例4

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

天山堇菜提取物7％、PEG－40氢化蓖麻油10％、1，2－戊二醇20％、乙基己基甘油15％和去离子水48％；

本对比例中，与实施例1的区别在于组合物中组合物中省略了地榆提取物和木芙蓉叶提取物。

对比例5

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

木芙蓉叶提取物7％、PEG－40氢化蓖麻油8％、1，2－戊二醇25％、乙基己基甘油20％和去离子水40％；

本对比例中，与实施例1的区别在于组合物中组合物中省略了地榆提取物和天山堇菜提取物。

对比例6

一种防腐组合物，主要由以下质量百分比的原料制成：

地榆提取物5％、PEG－40氢化蓖麻油20％、1，2－戊二醇18％、乙基己基甘油22％和去离子水35％；

本对比例中，与实施例1的区别在于组合物中组合物中省略了木芙蓉叶提取物和天山堇菜提取物。

实验例1防腐性能考察——MIC实验

对各实施例以及对比例进行实验，测试其最小抑菌浓度MIC值：以灭菌后的营养肉汤、沙氏培养基为稀释液，利用二倍稀释法对测试样品进行稀释，后向稀释液中接种，接种的菌液浓度分别为：大肠埃希氏菌1×10⁸cfu/mL、金黄色葡萄球菌1×10⁸cfu/mL、铜绿假单胞菌1×10⁷cfu/mL、白色念珠菌1×10⁶cfu/mL、黑曲霉1×10⁵cfu/mL。35℃培养36h(细菌)、28℃培养48h(真菌)后观察结果。

细菌采用微量液体稀释法，在培养终点前3h，加入TTC试剂，继续培养，若培养液变红，则认定此浓度不能抑制微生物生长，若培养液未变红，则认定为未变红的培养液中的最小药剂浓度为此抑菌剂对此微生物的最小抑菌浓度。具体结果如表1所示。

表1实施例及对比例MIC值

从表1数据可以看出，本发明实施例对上述各种细菌均具有良好抑菌效果，而对比例的抑菌效果较差。

实验例2防腐性能考察—抑菌圈实验

对各实施例以及对比例进行实验。以金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌，白色念珠球菌作为接种菌，采用K～B纸片法试验来比较它们之间抑菌能力的差异。具体实验方法如下：

将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌分别接种MH液体培养基上，在37℃下培养24h；白色念珠菌接种沙保弱液体培养基，在25℃下培养5d。用生理盐水将四种细菌培养物分别稀释成浓度为1.0×10⁶CFU/ml的菌悬液。

用无菌棉签分别将上述四种菌悬液涂布在营养琼脂平板上制成菌苔，然后取直径为3cm的灭菌滤液圆片。分别取各实施例以及对比例的样品，再分别贴在四种不同菌悬液制成的平板上。细菌培养24h，真菌培养5d，观察结果。纸片法抑菌直径≥10mm为有效，抑菌直径≤10mm为无效，实验结果如表2示。

表2纸片法测定各实施例及对比例样品防腐效果结果

由表2结果可以看出，本发明所得防腐组合物具有较好的抑菌效果，而对比例所得组合物抑菌效果较差。

实验例3防腐性能考察——防腐挑战实验

对各实施例进行防腐挑战实验。参考美国化妆品、盥洗用品和香精协会(CTFA)推荐的防腐体系效能评价方法，进行28天单次接菌挑战性实验。

实验菌株：细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌；真菌(黑曲霉、扩展青霉)。采用混合菌接种，细菌混合菌悬浊液10⁷CFU/mL；真菌混合菌悬浊液10⁶CFU/mL。样品接种：分别称取上述各实施例各100克各2份，分别加入1mL混合细菌悬浊液和1mL混合真菌悬浊液，混合均匀，将样品于室温(22.5±2.5℃)保存，并分别于0、2、7、14、21、28天检测化妆品中的菌落数，以判断化妆品的防腐效能。实验结果如表3所示。

表3防腐挑战结果

由表3的实验结果可以看出，实施例在第7天通过细菌的防腐挑战，而各实施例通过真菌防腐挑战的天数均为第14天，实验结果证明了本发明所获得组合物的良好防腐效果。

实验例4致敏性考察——斑贴实验

分别对各实施例以及对比例的样品的致敏性进行考察，以30名受试者为对象实施斑贴试验。选用面积不超过50mm²、深度约1mm的合格斑试器。将受试物放入斑试器小室内，用量约为0.020g，对照孔为空白对照(不置任何物质)。将加有受试物的斑试器用低致敏胶带贴敷于受试者的背部或前臂曲侧，用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上，持续24h。分别于去除受试物斑试器后30min(待压痕消失后)、24h和48h观察皮肤反应，实验结果如表4所示。其中，红斑反应：红斑、浸润、水肿、可有丘疹；疱疹反应：红斑、浸润、水肿、丘疹、疱疹，反应超出受试区；融合性疱疹反应：明显红斑、严重浸润、水肿、融合性疱疹、反应超出受试区。

表4各实施例和对比例斑贴实验结果

实验例5稳定性考察

分别对各实施例的样品进行稳定性考察，考察1个月内其各实施例在不同存储条件下的稳定性，具体实验结果如表5所示。

表5各实施例在不同存储条件下的稳定性

实验例6抗氧化性能考察——DPPH·清除实验

分别对各实施例及对比例的样品进行DPPH·清除能力的考查，以确定其抗氧化性能。

(1)实验原理：DPPH·又称1，1－二苯基－2－三硝基苯肼，是一种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自共振稳定作用的3个苯环的空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。它的无水乙醇溶液呈紫色，在517nm波长处有最大吸收，吸光度与浓度呈线性关系。向其中加入自由基清除剂时，可以结合或替代DPPH·，使自由基数量减少，吸光度变小，溶液颜色变浅，借此可评价清除自由基的能力。

(2)试剂配制：配制0.2mmol/L的DPPH·甲醇溶液；配制0.1％各样品水溶液及1mg/mL的VC溶液作为阳性对照样品。

(3)实验步骤：2mL样品溶液+2mLDPPH·溶液于具塞试管中，混匀，避光反应30min，测定517nm波长下的吸光值A₁；2mL样品溶液+2mL甲醇于具塞试管中，混匀，避光反应30min，测定517nm波长下的吸光值A₂；2mLDPPH·溶液+2mL甲醇于具塞试管中，混匀，避光反应30min，测定517nm波长下的吸光值A₀；实验结果如表6所示。

表6各实施例和对比例DPPH·清除能力测定结果

组别	DPPH·清除率，％
		实施例1	92.1
实施例2	91.3
		实施例3	93.5
实施例4	92.4
		实施例5	94.1
实施例6	93.2
		实施例7	95.5
实施例8	94.6
		实施例9	95.3
实施例10	95.8
		对比例1	91.1
对比例2	88.9
		对比例3	43.5
对比例4	87.6
		对比例5	86.9
对比例6	90.2
		阳性对照	95.9

如表6所示，各实施例对DPPH·均有显著的清除作用，显示了良好的抗氧化功效，而采用对比例制得的组合物的抗氧化效果较差。

通过实验例1～6的实验结果可以看出，本发明所获得的组合物防腐效果优良，同时大大减轻了植物提取物所存在的致敏问题，同时稳定性良好并且具有很好的抗氧化能力，除了具有防腐效果以外还可以作为抗衰老功效原料应用于化妆品中。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (53)

1.一种防腐组合物，其特征在于，主要由如下原料制成：地榆提取物0.5％～5％、天山堇菜提取物2％～8％、木芙蓉叶提取物1％～10％、增溶剂3％～20％、保湿剂15％～50％，余量为水。

2.根据权利要求1所述的防腐组合物，其特征在于，所述增溶剂为非离子型增溶剂，所述增溶剂包括氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮。

3.根据权利要求2所述的防腐组合物，其特征在于，所述增溶剂包括PEG－40氢化蓖麻油、PEG－60氢化蓖麻油或聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的防腐组合物，其特征在于，所述增溶剂为PEG－40氢化蓖麻油。

5.根据权利要求1所述的防腐组合物，其特征在于，所述保湿剂包括多元醇，所述多元醇为乙基己基甘油、辛甘醇、1，2－戊二醇或1，2－己二醇中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的防腐组合物，其特征在于，所述多元醇为乙基己基甘油与辛甘醇、1，2－戊二醇或者1，2－己二醇的组合。

7.根据权利要求1－6任意一项所述的防腐组合物，其特征在于，所述防腐组合物主要由以下质量百分比的原料制成：地榆提取物1.5％～4.5％、天山堇菜提取物3％～6％、木芙蓉叶提取物3％～9％、增溶剂4％～12％、保湿剂22％～40％，余量为水。

8.根据权利要求1－6任意一项所述的防腐组合物，其特征在于，所述防腐组合物主要由以下质量百分比的原料制成：地榆提取物2％～4％、天山堇菜提取物3％～5.5％、木芙蓉叶提取物3％～8％、增溶剂7％～12％、保湿剂25％～40％，余量为水。

9.根据权利要求1－6任一项所述的防腐组合物，其特征在于，所述地榆提取物中总黄酮含量≥80wt％。

10.根据权利要求9所述的防腐组合物，其特征在于，所述地榆提取物中总黄酮含量为80～93wt％。

11.根据权利要求10所述的防腐组合物，其特征在于，所述地榆提取物中总黄酮含量为85～93wt％。

12.根据权利要求9所述的防腐组合物，其特征在于，所述地榆提取物通过如下方法制备：将地榆进行预处理，经超声波提取后，得到提取液；对提取液依次进行分离、浓缩、纯化和脱色，得到地榆提取物。

13.根据权利要求12所述的防腐组合物，其特征在于，采用低温高压均质处理的方式对地榆进行预处理。

14.根据权利要求13所述的防腐组合物，其特征在于，均质的温度为0～10℃；

均质的压力为2.0～6.0MPa；

均质的时间为10～60s；

均质所采用的溶剂为质量浓度为40～95％的低碳醇。

15.根据权利要求14所述的防腐组合物，其特征在于，均质的温度为2～6℃；

均质的压力为2.5～5.5MPa；

均质的时间为20～30s；

均质所采用的溶剂为质量浓度为70～90％的低碳醇。

16.根据权利要求12所述的防腐组合物，其特征在于，超声波提取的功率为228～380W；

料液比为1：15～1：60；

提取物温度为30～60℃；

提取时间为0.15～1.5h。

17.根据权利要求16所述的防腐组合物，其特征在于，超声波提取的功率为304～342W；

料液比为1：15～1：35；

提取物温度为35～50℃；

提取时间为0.5～1.0h。

18.根据权利要求12所述的防腐组合物，其特征在于，纯化的方式为采用大孔吸附树脂进行纯化。

19.根据权利要求18所述的防腐组合物，其特征在于，大孔吸附树脂为弱极性或非极性大孔吸附树脂。

20.根据权利要求19所述的防腐组合物，其特征在于，所述大孔吸附树脂包括HPD－100型、D101型、D4020型或HPD－400型中的一种。

21.根据权利要求12所述的防腐组合物，其特征在于，采用活性炭进行脱色。

22.根据权利要求12所述的防腐组合物，其特征在于，脱色之后还包括浓缩和干燥的步骤。

23.根据权利要求1－6任一项所述的防腐组合物，其特征在于，所述天山堇菜提取物中总黄酮含量≥75wt％。

24.根据权利要求23所述的防腐组合物，其特征在于，所述天山堇菜提取物中总黄酮含量为75～96wt％。

25.根据权利要求24所述的防腐组合物，其特征在于，所述天山堇菜提取物中总黄酮含量为85～96wt％。

26.根据权利要求23所述的防腐组合物，其特征在于，所述天山堇菜提取物通过如下方法制备：将天山堇菜进行预处理，经超声波提取后，得到提取液；对提取液依次进行分离、浓缩和纯化，得到天山堇菜提取物。

27.根据权利要求26所述的防腐组合物，其特征在于，采用低温高压均质处理的方式对天山堇菜进行预处理。

28.根据权利要求27所述的防腐组合物，其特征在于，均质的温度为0～10℃；

均质的压力为2.0～6.0MPa；

均质的时间为10～60s；

均质所采用的溶剂为质量浓度为35～95％的低碳醇。

29.根据权利要求28所述的防腐组合物，其特征在于，均质的温度为2～6℃；

均质的压力为2.5～5.5MPa；

均质的时间为20～30s；

均质所采用的溶剂为质量浓度为50～90％的低碳醇。

30.根据权利要求26所述的防腐组合物，其特征在于，超声波提取的功率为228～380W；

料液比为1：15～1：60；

提取物温度为30～60℃；

提取时间为0.15～1.5h。

31.根据权利要求30所述的防腐组合物，其特征在于，超声波提取的功率为266～342W；

料液比为1：20～1：30；

提取物温度为40～45℃；

提取时间为0.5～1.0h。

32.根据权利要求26所述的防腐组合物，其特征在于，纯化的方式为硅胶柱纯化。

33.根据权利要求32所述的防腐组合物，其特征在于，硅胶柱中硅胶的规格为100～200目、200～300目或300～400目。

34.根据权利要求26所述的防腐组合物，其特征在于，纯化之后还包括超滤、浓缩和干燥的步骤。

35.根据权利要求1－6任一项所述的防腐组合物，其特征在于，所述木芙蓉叶提取物中总黄酮含量≥80wt％。

36.根据权利要求35所述的防腐组合物，其特征在于，所述木芙蓉叶提取物中总黄酮含量为82～95wt％。

37.根据权利要求36所述的防腐组合物，其特征在于，所述木芙蓉叶提取物中总黄酮含量为85～95wt％。

38.根据权利要求35所述的防腐组合物，其特征在于，所述木芙蓉叶提取物通过如下方法制备：将木芙蓉叶进行预处理，经超声波提取后，得到提取液；对提取液依次进行分离、浓缩、纯化和脱色，得到木芙蓉叶提取物。

39.根据权利要求38所述的防腐组合物，其特征在于，采用低温高压均质处理的方式对木芙蓉叶进行预处理。

40.根据权利要求39所述的防腐组合物，其特征在于，均质的温度为0～10℃；

均质的压力为2.0～6.0MPa；

均质的时间为10～60s；

均质所采用的溶剂为质量浓度为45～90％的低碳醇。

41.根据权利要求40所述的防腐组合物，其特征在于，均质的温度为2～6℃；

均质的压力为2.5～5.5MPa；

均质的时间为20～30s；

均质所采用的溶剂为质量浓度为70～80％的低碳醇。

42.根据权利要求38所述的防腐组合物，其特征在于，超声波提取的功率为228～380W；

料液比为1：10～1：50；

提取物温度为30～50℃；

提取时间为0.2～2h。

43.根据权利要求42所述的防腐组合物，其特征在于，超声波提取的功率为266～342W；

料液比为1：20～1：30；

提取物温度为35～45℃；

提取时间为0.5～1.0h。

44.根据权利要求38所述的防腐组合物，其特征在于，纯化的方式为聚酰胺树脂纯化。

45.根据权利要求44所述的防腐组合物，其特征在于，聚酰胺树脂的规格为80～100目、100～200目或200～300目。

46.根据权利要求38所述的防腐组合物，其特征在于，采用活性炭进行脱色。

47.根据权利要求38所述的防腐组合物，其特征在于，脱色之后还包括浓缩、调pH、分离、洗涤和干燥的步骤。

48.权利要求1～47任一项所述的防腐组合物的制备方法，其特征在于，将地榆提取物、天山堇菜提取物、木芙蓉叶提取物以及增溶剂和保湿剂混合均匀后得到所述防腐组合物。

49.根据权利要求48所述的防腐组合物的制备方法，其特征在于，先将保湿剂与水混合，再加入地榆提取物、天山堇菜提取物和木芙蓉叶提取物，混合均匀，然后加入增溶剂混匀，分离出不溶物后得到所述防腐组合物。

50.根据权利要求48所述的防腐组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将水与保湿剂混合均匀并升温至40～60℃，向其中加入地榆提取物、天山堇菜提取物和木芙蓉叶提取物，搅拌溶解后，再加入增溶剂，混合均匀，保温5～15min，降温至30℃以下，分离出不溶物，得到防腐组合物。

51.权利要求1～47任一项所述的防腐组合物在制备化妆品中的应用。

52.包含权利要求1～47任一项所述的防腐组合物的化妆品。

53.根据权利要求52所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品包括霜剂、乳液、凝胶剂、面膜、擦剂、洗剂、喷雾剂、皂剂、软膏剂、酊剂或胶囊剂。