CN108901857B - 一种弹簧草的组培繁殖方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及植物组织培养技术，具体涉及一种弹簧草的组培繁殖方法。本发明采用弹簧草的球茎鳞片作为外植体，外植体消毒后通过增殖培养基，其中增殖培养基中各组分的协同作用诱导产生大量丛芽，在经过生根壮苗培养基培养成独立完整的健壮植株。本发明通过增殖培养基、生根壮苗培养基的配方改进，及光照强度和时间的改进，通过组织培养获得弹簧草幼苗，上述繁殖方法相比于传统的弹簧草的有性生殖培养方法，具有繁殖速度快、产量高、幼苗健壮及成活率高的优点。

Description

一种弹簧草的组培繁殖方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术，具体涉及一种弹簧草的组培繁殖方法。
背景技术
弹簧草也称螺旋草，因叶片扭曲盘旋，形似弹簧得名，其为多年生鳞茎类多肉植物，植株为圆形或不规则形鳞茎，鳞茎由一层层肥厚的肉质鳞片组成，地下部分的表皮呈黄白色，露出土面的部分经日晒后呈绿色。弹簧草形态独特，鳞茎古朴，叶片根据种类的不同，或像弹簧，或像水中飘逸的海带，或像卷曲的长发，其线条流畅飘逸，富于变化，花色淡雅清新，适合用小盆栽种，点缀于窗台、书桌等处。
在自然条件下弹簧草生长缓慢，繁殖率较低，无法满足市场需求，而组培繁殖可以快速繁育，可以在短期内获得大量与母株遗传背景一致的优质种苗，这对于满足弹簧草的市场需求具有重要意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：提供一种繁殖速度快、产量高、成活率高的弹簧草的组培繁殖方法。
为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种弹簧草的组培繁殖方法，包括以下步骤：
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料，进行消毒处理后接种至增殖培养基内培养23～30d，培养温度为15～20℃，光照强度为800～1000lux，光照时间为11～13h/d，外植体诱导分化出丛生芽；
所述增殖培养基包括如下组分：
MS、吡效隆0.1～0.3mg/L，NAA0.05～0.07mg/L，多效唑0.01～0.03mg/L、蔗糖28～32g/L和卡拉胶5～7g/L；
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中，培养时间为25～28d，光照强度为1200～1800lux，光照时间13～14h/d，培育出弹簧草幼苗；
所述生根壮苗培养基包括如下组分：
1/2MS、IBA1～2mg/L，多效唑0.01～0.03mg/L、AC0.5～0.8g/L、蔗糖25～30g/L和卡拉胶5～7g/L。
本发明的有益效果在于：本发明采用弹簧草的球茎鳞片作为外植体，外植体消毒后通过增殖培养基，其中增殖培养基中各组分的协同作用诱导产生大量丛芽，在经过生根壮苗培养基培养成独立完整的健壮植株。本发明通过增殖培养基、生根壮苗培养基的配方改进，及光照强度和时间的改进，通过组织培养获得弹簧草幼苗，上述繁殖方法相比于传统的弹簧草的有性生殖培养方法，具有繁殖速度快、产量高、幼苗健壮及成活率高的优点。
具体实施方式
为详细说明本发明的技术内容、所实现目的及效果，以下结合实施方式予以说明。
本发明最关键的构思在于：采用弹簧草的球茎鳞片作为外植体，外植体消毒后通过增殖培养基，增殖培养基中各组分的协同作用诱导产生大量丛芽，在经过生根壮苗培养基培养成独立完整的健壮植株，成活率高。
本发明提供一种弹簧草的组培繁殖方法，包括以下步骤：
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料，进行消毒处理后接种至增殖培养基内培养23～30d，培养温度为15～20℃，光照强度为800～1000lux，光照时间为11～13h/d，外植体诱导分化出丛生芽；
所述增殖培养基包括如下组分：
MS、吡效隆0.1～0.3mg/L，NAA0.05～0.07mg/L，多效唑0.01～0.03mg/L、蔗糖28～32g/L和卡拉胶5～7g/L；
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中，培养时间为25～28d，光照强度为1200～1800lux，光照时间13～14h/d，培育出弹簧草幼苗；
所述生根壮苗培养基包括如下组分：
1/2MS、IBA1～2mg/L，多效唑0.01～0.03mg/L、AC0.5～0.8g/L、蔗糖25～30g/L和卡拉胶5～7g/L。
弹簧草培养基的原理说明：通过在增殖培养基内加入吡效隆0.1～0.3mg/L和多效唑0.01～0.03mg/L，并通过光照800～1000lux的光照培养，促进外植体诱导分化出大量的丛芽，大大提高弹簧草的产量，在生根壮苗培养基中加入IBA1～2mg/L、多效唑0.01～0.03mg/L，并通过1200～1800lux的光照培养，能够促进丛芽发育成完成的植株。
从上述描述可知，本发明的有益效果在于：本发明采用弹簧草的球茎鳞片作为外植体，外植体消毒后通过增殖培养基，其中增殖培养基中各组分的协同作用诱导产生大量丛芽，在经过生根壮苗培养基培养成独立完整的健壮植株。本发明通过增殖培养基、生根壮苗培养基的配方改进，及光照强度和时间的改进，通过组织培养获得弹簧草幼苗，上述繁殖方法相比于传统的弹簧草的有性生殖培养方法，具有繁殖速度快、产量高、幼苗健壮及成活率高的优点。
进一步的，所述增殖培养基的pH为6.0。
进一步的，所述生根壮苗培养基的pH为5.8。
进一步的，所述增殖培养基包括如下组分：MS、吡效隆0.1mg/L，NAA0.05mg/L，多效唑0.01mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶5g/L。
进一步的，所述生根壮苗培养基包括如下组分：1/2MS、IBA1mg/L，多效唑0.01mg/L、AC0.5g/L、蔗糖25g/L和卡拉胶5g/L。
进一步的，步骤1中，所述培养温度为15℃，光照强度为1000lux，光照时间为13h/d。
进一步的，步骤2中，所述光照强度为1800lux，光照时间13h/d。
进一步的，步骤1中，所述“消毒处理”具体为：将外植体使用1％的升汞浸泡消毒10～15min。
进一步的，所述消毒处理后，再用无菌水清洗2～3遍。
进一步的，具体包括以下步骤：
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料，将外植体使用1％的升汞浸泡消毒10～15min，再用无菌水清洗2～3遍后接种至增殖培养基内培养23～30d，培养温度为15℃，光照强度为1000lux，光照时间为13h/d，外植体诱导分化出丛生芽；
所述增殖培养基包括如下组分：
MS、吡效隆0.1mg/L，NAA0.05mg/L，多效唑0.01mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶5g/L，所述增殖培养基的pH为6.0；
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中，培养时间为25～28d，光照强度为1800lux，光照时间13h/d，培育出弹簧草幼苗；
所述生根壮苗培养基包括如下组分：
1/2MS、IBA1mg/L，多效唑0.01mg/L、AC0.5g/L、蔗糖25g/L和卡拉胶5g/L，所述生根壮苗培养基的pH为5.8。
实施例1
一种弹簧草的组培繁殖方法，包括以下步骤：
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料，将外植体使用1％的升汞浸泡消毒10min，再用无菌水清洗2～3遍后接种至增殖培养基内培养23d，培养温度为15℃，光照强度为800lux，光照时间为13h/d，外植体诱导分化出丛生芽；
所述增殖培养基包括如下组分：
MS、吡效隆0.1mg/L，NAA0.05mg/L，多效唑0.01mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶5g/L，所述增殖培养基的pH为6.0；
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中，培养时间为25d，光照强度为1200lux，光照时间14h/d，培育出弹簧草幼苗；
所述生根壮苗培养基包括如下组分：
1/2MS、IBA1mg/L，多效唑0.01mg/L、AC0.5g/L、蔗糖25g/L和卡拉胶5g/L，所述生根壮苗培养基的pH为5.8。
实施例2
一种弹簧草的组培繁殖方法，包括以下步骤：
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料，将外植体使用1％的升汞浸泡消毒15min，再用无菌水清洗2～3遍后接种至增殖培养基内培养26d，培养温度为18℃，光照强度为900lux，光照时间为12h/d，外植体诱导分化出丛生芽；
所述增殖培养基包括如下组分：
MS、吡效隆0.2mg/L，NAA0.06mg/L，多效唑0.02mg/L、蔗糖28g/L和卡拉胶6g/L，所述增殖培养基的pH为6.0；
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中，培养时间为27d，光照强度为1500lux，光照时间13h/d，培育出弹簧草幼苗；
所述生根壮苗培养基包括如下组分：
1/2MS、IBA1.5mg/L，多效唑0.02mg/L、AC0.6g/L、蔗糖28g/L和卡拉胶6g/L，所述生根壮苗培养基的pH为5.8。
实施例3
一种弹簧草的组培繁殖方法，包括以下步骤：
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料，将外植体使用1％的升汞浸泡消毒15min，再用无菌水清洗2～3遍后接种至增殖培养基内培养30d，培养温度为20℃，光照强度为1000lux，光照时间为11h/d，外植体诱导分化出丛生芽；
所述增殖培养基包括如下组分：
MS、吡效隆0.3mg/L，NAA0.07mg/L，多效唑0.01～0.03mg/L、蔗糖32g/L和卡拉胶7g/L，所述增殖培养基的pH为6.0；
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中，培养时间为28d，光照强度为1800lux，光照时间13h/d，培育出弹簧草幼苗；
所述生根壮苗培养基包括如下组分：
1/2MS、IBA2mg/L，多效唑0.03mg/L、AC0.8g/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7g/L，所述生根壮苗培养基的pH为5.8。
将实施例1～实施例3的弹簧草幼苗移栽至基质土中培养，存活率均能到达93％以上，其中实施例1的存活率达到了95％，实验数据表明，增殖培养基配方为MS、吡效隆0.1mg/L，NAA0.05mg/L，多效唑0.01mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶5g/L，所述增殖培养基的pH为6.0，生根壮苗培养基配方为1/2MS、IBA1mg/L，多效唑0.01mg/L、AC0.5g/L、蔗糖25g/L和卡拉胶5g/L，所述生根壮苗培养基的pH为5.8时，弹簧草幼苗移栽的存活率最高。
综上所述，本发明提供的弹簧草的组培繁殖方法，采用弹簧草的球茎鳞片作为外植体，外植体消毒后通过增殖培养基，其中增殖培养基中各组分的协同作用诱导产生大量丛芽，在经过生根壮苗培养基培养成独立完整的健壮植株。
本发明通过在增殖培养基内加入吡效隆0.1～0.3mg/L和多效唑0.01～0.03mg/L，并通过光照800～1000lux的光照培养，促进外植体诱导分化出大量的丛芽，大大提高弹簧草的产量，在生根壮苗培养基中加入IBA1～2mg/L、多效唑0.01～0.03mg/L，并通过1200～1800lux的光照培养，能够促进丛芽发育成完成的植株。上述繁殖方法相比于传统的弹簧草的有性生殖培养方法，具有繁殖速度快、产量高、幼苗健壮及成活率高的优点。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等同变换，或直接或间接运用在相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (8)

1.一种弹簧草的组培繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料，进行消毒处理后接种至增殖培养基内培养23~30d，培养温度为15~20℃，光照强度为800~1000 lux，光照时间为11~13h/d，外植体诱导分化出丛生芽；
所述增殖培养基为：
MS、吡效隆0.1~0.3mg/L，NAA0.05~0.07mg/L，多效唑0.01~0.03mg/L、蔗糖28~32g/L和卡拉胶5~7g/L；
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中，培养时间为25~28d，光照强度为1200~1800 lux，光照时间13~14 h/d，培育出弹簧草幼苗；
所述生根壮苗培养基为：
1/2MS、IBA1~2mg/L，多效唑0.01~0.03mg/L、AC0.5~0.8g/L、蔗糖25~30 g/L和卡拉胶5~7g/L；
所述增殖培养基的pH为6.0；
所述生根壮苗培养基的pH为5.8。
2.根据权利要求1所述的弹簧草的组培繁殖方法，其特征在于，所述增殖培养基为：MS、吡效隆0.1mg/L，NAA0.05mg/L，多效唑0.01mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶5g/L。
3.根据权利要求1所述的弹簧草的组培繁殖方法，其特征在于，所述生根壮苗培养基为：1/2MS、IBA1mg/L，多效唑0.01mg/L、AC0.5g/L、蔗糖25 g/L和卡拉胶5g/L。
4.根据权利要求1所述的弹簧草的组培繁殖方法，其特征在于，步骤1中，所述培养温度为15℃，光照强度为1000 lux，光照时间为13h/d。
5.根据权利要求1所述的弹簧草的组培繁殖方法，其特征在于，步骤2中，所述光照强度为1800 lux，光照时间13 h/d。
6.根据权利要求1所述的弹簧草的组培繁殖方法，其特征在于，步骤1中，所述“消毒处理”具体为：将外植体使用1%的升汞浸泡消毒10~15min。
7.根据权利要求6所述的弹簧草的组培繁殖方法，其特征在于，所述消毒处理后，再用无菌水清洗2~3遍。
8.根据权利要求1所述的弹簧草的组培繁殖方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料，将外植体使用1%的升汞浸泡消毒10~15min，再用无菌水清洗2~3遍后接种至增殖培养基内培养23~30d，培养温度为15℃，光照强度为1000 lux，光照时间为13h/d，外植体诱导分化出丛生芽；
所述增殖培养基为：
MS、吡效隆0.1mg/L，NAA0.05mg/L，多效唑0.01mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶5g/L，所述增殖培养基的pH为6.0；
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中，培养时间为25~28d，光照强度为1800 lux，光照时间13 h/d，培育出弹簧草幼苗；
所述生根壮苗培养基为：
1/2MS、IBA1mg/L，多效唑0.01mg/L、AC0.5g/L、蔗糖25 g/L和卡拉胶5 g/L，所述生根壮苗培养基的pH为5.8。
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