CN108896364B - 用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置。且结构包括内管和外管;所述外管用于盛放待分离纯化的样品,内管竖向置于外管内;在所述内管的底部设有倾斜设置的超滤膜,所述超滤膜黏附于所述内管上;所述超滤膜与所述内管轴线之间的夹角为α,且0°<α<85°。采用本发明中的装置在对样品进行过滤时,过滤方向与离心力方向是相反的,在离心力的作用下,样品溶液中的小分子进入内管,大分子被截留在超滤膜外,因离心力方向向下,残渣会在离心力的作用下离开超滤膜表面而沉于外管底部,避免了浓差极化,同时避免了高粘度样品产生的液体压强。本发明中的离心超滤装置,应用简单快速,纯化效率高,适于现场快速检测。
Description
技术领域
本发明涉及一种离心超滤装置,具体地说是一种用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置。
背景技术
近年来,随着食品(包括饲料、动物组织等)基质中非法添加、药品滥用现象日益显现,对食品成分进行检测已经成为食品安全控制中的重要环节。食品安全分析的样品主要有饲料、动物组织等,然而动物组织中不仅含有脂肪、糖类等多种基质干扰,还存在一些大分子如淀粉、蛋白质等。这些成分的存在给食品样品前处理带来了极大的困扰,因此常需要对食品基质中的大分子类干扰成分进行去除。目前常见的食品样品前处理方法主要有固相萃取法(SPE)、液液萃取法(LLE)、QuEchERS法等。
但是这些前处理方法具有一定的缺陷,如常需要昂贵的分析填料、有机溶剂消耗量大,最重要的是这些方法分析时间一般较长,不适合于现场筛查。因此,提高分析方法的准确性,并建立一种适合现场筛查的方法是目前分析工作面临的最大问题。
作为一种新兴的分离技术,离心超滤技术是以一定截留能力的膜为过滤介质,以压力差为动力,使溶液中的大分子和小分子得以分离的方法。相比传统的方法具有温和、方便、快速高效等优点,目前已被广泛应用于食品生产、化工、医药卫生等领域。申请公布号为CN106323705A的专利申请公开了一种超滤膜用于蛋白组样品快速预处理,授权公告号为CN104710506B的专利公开了一种离心超滤装置用于糖蛋白质的富集纯化,这些装置操作简单,可以成功完成小分子杂质的去除或大分子组分的截留,但是易导致浓差极化层的产生,从而影响膜过滤体积通量,因此不适合于大体积或者粘度大的复杂样品的分析。为增大过滤通量,授权公告号为CN204996469U的专利公开了一种超滤离心管用于尿液样品分析,申请公布号为CN101745439A的专利申请公开了一种超滤离心管,改进了传统的二维过滤平面,一定程度上增大了过滤通量,但仍未从根本上解决样品粘度过大时会导致的膜孔阻塞或浓差极化问题。为克服浓差极化现象,授权公告号为CN101898088B的专利公开了一种中空纤维离心超滤装置,在此专利中离心力方向与过滤方向垂直,成功避免了离心超滤过程中的浓差极化。但此装置也存在一定问题,1.虽然中空纤维离心超滤方法非常适用于结合率的测定,但一般只用于微量样品的处理,无法对大体积的样品进行分析;2.由于超滤是基于中空纤维两侧浓度差来完成,分析高粘度样品时会因离心力产生的液体压强而导致中空纤维压扁,超滤受到影响。目前,市面上出现了一种商品化的Sin-QuEchERS一步净化多残留方法,通过一层阻水的纳米材料完成水相和有机相的分离,但需采用手压的方式,增加了操作难度。
发明内容
本发明的目的就是提供一种用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,以解决现有装置难以克服浓差极化现象以及不能对高粘度、复杂样品进行分离纯化的问题。
本发明的目的是这样实现的:一种用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,包括内管和外管;所述外管用于盛放待分离纯化的样品,所述内管竖向置于所述外管内;在所述内管的底部设有倾斜设置的超滤膜,所述超滤膜黏附于所述内管上;所述超滤膜与所述内管轴线之间的夹角为α,且0°<α<85°。
在所述超滤膜的底部还可以设置支撑层和引流层。所述支撑层例如可以是筛板结构。所述超滤膜可通过环氧树脂胶粘结于内管底部倾斜的切面上。
本发明所提供的离心超滤装置可以有如下两种实现方式:
一种实现方式是:在所述内管和所述外管的上端均设有外沿;在所述外管的外沿上开有若干通孔,在所述内管的外沿下方设有与外管外沿上通孔一一对应的柱销,每一柱销可对应插接在相应的通孔内,从而实现内管和外管之间的相对固定。在所述内管的上方设有盖塞;所述盖塞包括盖板、位于所述盖板下方的柱塞以及位于所述盖板侧沿的卡扣;所述盖板紧压在所述内管的外沿上,所述盖板下方的柱塞插接在所述内管内;所述盖板侧沿的卡扣卡接在所述外管外沿的底部。所述柱塞与所述内管之间为螺纹连接。
另一种实现方式是:在所述内管内设有竖向的隔板,所述隔板将所述内管的内腔分隔为一大一小两个空间;其中,所述超滤膜对应设置在内管的大空间底部,在所述内管的小空间底部设有封板,在所述封板上开有直径为0.1-0.5mm的通气孔;在所述内管的外侧壁与所述外管的内侧壁之间设有用于对所述内管进行固定并密封的橡胶圈。在所述内管的上方设有盖塞;所述盖塞包括盖板、位于所述盖板下方的柱塞以及位于所述盖板侧沿的卡扣;所述盖板紧压在所述内管的外沿上,所述盖板下方的柱塞插接在所述内管内大空间的端口处;所述内管内小空间的端口处插接有橡胶塞;所述盖板侧沿的卡扣卡接在所述外管外沿的底部。所述柱塞与所述内管内大空间的端口之间为螺纹连接。
本发明公开了一种适于对饲料、牲畜尿液、粪便及动物组织等样品进行前处理的离心超滤装置。该装置中,外管内用于盛放待分离纯化的样品,内管底部设有倾斜设置在超滤膜,超滤膜与内管轴线之间的夹角大于0小于85°。过滤时,过滤方向是从外管并经超滤膜后进入内管,因此过滤方向是向上的,而离心力的方向是向下的,即:本发明装置中过滤方向与离心力方向相反,在离心力的作用下,样品溶液中的小分子进入内管,大分子被截留在超滤膜外,因离心力方向向下,残渣会在离心力的作用下离开超滤膜表面而沉于外管底部,避免了浓差极化,同时避免了高粘度样品产生的液体压强。
本发明所提供的离心超滤装置,可广泛用于饲料等样品的前处理,也可用于牲畜粪便、尿液、组织样品等的前处理,其应用简单快速,纯化效率高,可以很好的去除基质干扰,提高检测的专属性。
附图说明
图1是本发明实施例1所提供的离心超滤装置的结构示意图。
图2是本发明实施例1中内管的结构示意图。
图3是本发明实施例1中外管的结构示意图。
图4是本发明实施例1中内管置于外管内后的结构示意图。
图5是本发明实施例1中盖塞的结构示意图。
图6是本发明实施例2所提供的离心超滤装置的结构示意图。
图7是本发明实施例2中内管底部的结构示意图。
图8是本发明实施例3中喹乙醇(OTA)的离子迁移谱图;其中,图A代表的是空白饲料样品经离心超滤装置处理后得到的IMS谱图,图B代表的是加标饲料样品经离心超滤装置处理后得到的IMS谱图。
图中:1、内管,1-1、内管外沿,1-2、柱销,1-3、隔板,1-4、大空间,1-5、小空间,1-6、封板,1-7、通气孔,2、超滤膜,3、外管,3-1、外管外沿,3-2、通孔,4、盖塞,4-1、盖板,4-2、柱塞,4-3、卡扣,5、橡胶圈,6、橡胶塞。
具体实施方式
以下通过附图及具体的实施例对本发明作进一步的说明,但其并不对本发明进行任何限制。
实施例1,一种用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置。
如图1所示,本实施例所提供的用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置包括内管1和外管3。外管3和内管1均为圆柱形管体结构,内管1竖向设置在外管3内。外管3内用于盛放待分离纯化的样品溶液。外管3可采用玻璃、塑料等材质制成,内管1的材质不限。在内管1的底部设有倾斜设置的超滤膜2,超滤膜2黏附于内管1上。具体是,可以先在内管1底部通过切割形成一个斜切面,将超滤膜2通过环氧树脂胶粘结于内管1底部的斜切面上(放置24h使粘接紧密)。超滤膜2所在平面与内管1轴线之间的夹角为α,且0°<α<85°。
内管1和外管3均为敞口结构,如图2和图3所示,在内管1的上端设有内管外沿1-1,在外管3的上端设有外管外沿3-1。内管外沿1-1和外管外沿3-1均为环形板状体结构。在外管外沿3-1上开有若干上下贯穿的通孔3-2,例如可以均匀设置四个通孔3-2。在内管外沿1-1底部设有与外管外沿3-1上通孔3-2一一对应的竖向柱销1-2。当将内管1置于外管3内后,内管外沿1-1底部的柱销1-2可对应插接在外管外沿3-1上的通孔3-2内,从而实现内管1和外管3之间的相对固定。如图4所示,图4中示出了内管1置于外管3内后的结构示意图。
结合图1和图5,在内管1的上方设有盖塞4。盖塞4材质不限。盖塞4具体包括盖板4-1,在盖板4-1的下方设有柱塞4-2,在盖板4-1的侧沿设有卡扣4-3。盖塞4用于实现对内管1端口的密封。采用盖塞4对内管1上端口进行密封时,首先使柱塞4-2插入内管1的端口处,柱塞4-2的结构应与内管1的上端口相匹配,本实施例中内管1上端口与柱塞4-2之间为螺栓连接,即:在柱塞4-2的外侧壁设有外螺纹,在内管1上端口内设有内螺纹(内螺纹高度约为内管1上端至超滤膜2顶部间高度的1/3)。柱塞4-2插入到位后,盖板4-1底面与内管外沿紧密贴合,此时,卡扣4-3卡接在外管外沿的底部,具体可以是卡接在外管外沿底部露出的柱销上。
本发明中的离心超滤装置可用于对饲料、牲畜粪便、牲畜尿液、牲畜体液、各类组织样品等进行分离纯化,处理时,将待分离纯化的样品溶液置于外管3内,将内管1置于外管3中(在将内管1置于外管3前应对内管1进行超声清洗),使内管1及底部的超滤膜2浸入外管3内的样品溶液中,再将盖塞4盖接在内管1上。将装好的离心超滤装置放入离心机中,当离心机旋转时,在离心力的作用下,大小合适的分子以及溶剂通过超滤膜2膜孔进入内管1中,将内管1内滤液抽出即可注入到色谱、光谱、质谱等现代分析仪器中进行分析。
在实际应用时可依据所需处理的样品特性选择适宜截留分子量的超滤膜。
其他实施例中还可以在超滤膜2的底部设置支撑层和引流层。支撑层例如可以为筛板结构。支撑层的设置可保证内管1在离心过程中稳定,同时便于取出滤液。
实施例2,另一种用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置。
如图6所示,本实施例中的离心超滤装置包括内管1和外管3。外管3和内管1均为圆柱形管体结构,内管1竖向设置在外管3内。外管3内用于盛放待分离纯化的样品溶液。外管3可采用玻璃、塑料等材质制成,内管1的材质不限。在内管1内设有竖向的隔板1-3,隔板1-3将内管1的内腔分隔为一大一小两个空间,两个空间分别为大空间1-4和小空间1-5。通过切割在内管1的底部形成一个斜切面,在大空间1-4底部的斜切面处通过环氧树脂胶粘结有超滤膜2,在小空间1-5底部的斜切面处设有可对小空间1-5底部进行封挡的封板1-6。结合图7,超滤膜2和封板1-6处于同一平面内,且超滤膜2位于封板1-6的斜上方。在封板1-6上开有直径为0.1-0.5mm的通气孔1-7,气体可通过该通气孔1-7进出内外管之间,但液体不能由该通气孔1-7通过。
内管1和外管3均为敞口结构。在内管1的上端设有内管外沿,在外管3的上端设有外管外沿。内管外沿和外管外沿均为环形板状体结构。当将内管1置于外管3内后,内管外沿可紧压在外管外沿上。为了实现内外管间的相对稳定连接,本实施例在内管1的外侧壁与外管3的内侧壁之间设有环形橡胶圈5。该橡胶圈5的存在,一方面使得内管1与外管3间实现稳固连接,另一方面对其下方内外管间的空间起到了密封作用。
在内管1的上方设有盖塞4。盖塞4材质不限。盖塞4具体包括盖板,在盖板的下方设有柱塞,柱塞偏离盖板的中心线,在盖板的侧沿设有卡扣。盖塞4和橡胶塞6一起作用实现对内管1端口的密封。密封时,首先将橡胶塞6塞入到内管1内小空间1-5对应的上端口处,橡胶塞6塞入到位后,橡胶塞6顶面与内管外沿顶面相平齐;接着使盖塞4下方的柱塞插入到内管1内大空间1-4对应的上端口处。盖塞4下方的柱塞与内管1内大空间1-4对应的上端口之间可以是螺纹连接,盖塞4下方的柱塞插入到位后,盖板底面与内管外沿和橡胶塞6顶部紧密贴合,此时,卡扣卡接在外管外沿的底部。
采用本实施例中离心超滤装置对饲料、牲畜粪便、牲畜尿液、牲畜体液、各类组织样品等进行分离纯化时,首先将待分离纯化的样品溶液置于外管3内,将内管1置于外管3中。在将内管1置于外管3前,首先将橡胶塞6塞入到内管1内小空间1-5对应的上端口处。接着将内管1由上至下逐渐压入外管3中,由于内管1外侧壁上套接有橡胶圈5,因此橡胶圈5会与外管3内侧壁紧密接触,随着内管1的下压,位于橡胶圈5下方的内外管之间的空气被压缩,一部分空气可以从封板1-6上的通气孔1-7进入到内管1的小空间1-5内,因此小空间1-5内的空气压力也逐渐增大。在橡胶圈5下方的内外管之间的空气压力及内管1的重力作用下,样品溶液中的大小合适的分子以及溶剂可通过超滤膜2膜孔进入到内管1的大空间1-4内,即:本实施例中在将内管1置于外管3的过程中,就可实现对一部分样品的分离纯化。之后将盖塞4盖接在内管1上。将装好的离心超滤装置放入离心机中,当离心机旋转时,在离心力的作用下,大小合适的分子以及溶剂通过超滤膜2膜孔进入内管1的大空间1-4内,将内管1的大空间1-4内滤液抽出即可注入到色谱、光谱、质谱等现代分析仪器中进行分析。
无论是实施例1中的离心超滤装置,还是实施例2中的离心超滤装置,过滤时的过滤方向总是向上的,而离心力的方向是向下的,即:本发明的装置中过滤方向与离心力方向相反,在离心力的作用下,样品溶液中的小分子进入内管,大分子被截留在超滤膜外,因离心力方向向下,残渣会在离心力的作用下离开超滤膜表面而沉于外管底部,避免了浓差极化同时避免了高粘度样品产生的液体压强。而且,实施例2中通过将内管内腔进行分隔,大空间底部设置超滤膜,小空间底部设置封板,封板上开设通气孔;同时在内管外侧壁套接橡胶圈,将橡胶塞塞入小空间对应的端口处,这种结构设计使得内管在置入外管的过程中就能实现一部分样品的过滤,即增加了额外的过滤驱动力。
通过本发明中的装置可以克服浓差极化现象,同时实现高粘度、复杂样品的分离,并获得足够的样品量。采用该装置可以对饲料、牲畜粪便、尿液、体液及动物组织样品中待测物进行快速分离纯化,适用于现场快速检测。下面结合具体例子对本发明做进一步的说明。
实施例3,饲料样品中非法添加喹乙醇的分析。
称取饲料样品5 g置于实施例1中的外管3中,加入25 mL提取液(80%甲醇-水)超声震荡5 min,将内管1放入外管3中,盖上盖塞4,离心(5000 rpm,5 min),取内管1中的澄清溶液,注入IMS进行分析。
分别对空白饲料样品及加标饲料样品进行分析,结果如图8所示。由图8可知,经本发明实施例1中的离心超滤装置处理之后,饲料中存在的淀粉脂肪等成分基本被去除,IMS分析未见干扰,因此本发明中的装置具有较高的纯化分离效果,方法可行性良好。
实施例4,牲畜粪便样品中非法添加喹乙醇的分析。
从养殖场现场采集粪便样品1 g置于实施例1中的外管3中(不用时直接封存),加入25 mL提取液(80%甲醇-水)超声震荡5 min,将内管1放入外管3中,盖上盖塞4,离心(5000rpm,5 min),取内管1中的澄清溶液,注入IMS进行分析。由分析结果可知,经本发明实施例1中的离心超滤装置处理之后,样品基质基本被去除,IMS分析未见基质干扰。
实施例5,牲畜尿液样品中非法添加喹乙醇的分析。
从养殖场现场采集尿液样品1 mL置于实施例2中的外管3中(不用时直接封存),加入25 mL提取液(80%甲醇-水)超声震荡5 min,将内管1放入外管3中,盖上盖塞4,离心(5000rpm,5 min),取内管1的大空间1-4内的澄清溶液,注入IMS进行分析。由分析结果可知,经本发明实施例2中的离心超滤装置处理之后,样品基质基本被去除,IMS分析未见内源性基质成分的干扰。
实施例6,动物组织样品中喹乙醇的分析。
取研碎的动物组织样品约1g置于实施例2中的外管3中(不用时直接封存),加入10mL乙腈,涡旋1min使沉淀蛋白,加入盐析剂MgSO4,超声震荡,将内管1放入外管3中,盖上盖塞4,离心(5000 rpm,5 min),取内管1的大空间1-4内的澄清溶液,注入IMS进行分析。由分析结果可知,经本发明实施例2中的离心超滤装置处理之后,样品基质基本被去除,IMS分析未见内源性基质成分的干扰。
实施例7,鱼肉样品中孔雀石绿的分析。
取研碎的鱼肉样品约1g置于实施例1中的外管3中(不用时直接封存),加入10 mL乙腈,涡旋1min使沉淀蛋白,加入盐析剂MgSO4,超声震荡,将内管1放入外管3中,盖上盖塞4,离心(5000 rpm,5 min),取内管1中的澄清溶液,注入IMS进行分析。由分析结果可知,经本发明实施例1中的离心超滤装置处理之后,样品基质基本被去除,IMS分析未见内源性基质成分的干扰。
实施例8,硫酸阿托品眼用凝胶含量测定。
供试品溶液制备:精密称取约2.5 g供试品置于本发明实施例2中的外管3中,加入25 mL提取液(0.1mol·L-1乙酸溶液)超声震荡5min,将内管1放入外管3中,盖上盖塞4,离心(5000 rpm,5 min),精密移取内管1的大空间1-4内的澄清溶液,稀释50倍(目标成分约为20 μg·mL-1),进行HPLC分析。
色谱条件采用phenomenex C18色谱柱(250mm×4.60mm,5μm),流动相为甲醇-50mmol·L-1磷酸盐缓冲溶液(取6.8g磷酸二氢钾溶于1L水中,加入三乙胺10 mL,用磷酸调pH为3.5),流速1.0 mL·min-1,柱温为室温,检测波长217nm,进样量20 μL。由分析结果可知,经本发明实施例2中的离心超滤装置处理之后,凝胶基质基本被去除,色谱分析未见基质成分的干扰。
Claims (10)
1.一种用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤方法,其特征是,该方法所采的离心超滤装置包括内管和外管;在所述外管内盛放有待分离纯化的样品,所述内管竖向置于所述外管内;在所述内管的底部设有倾斜设置的超滤膜,所述超滤膜黏附于所述内管上;所述超滤膜与所述内管轴线之间的夹角为α,且0°<α<85°;过滤时,过滤方向是向上的,而离心力的方向是向下的。
2.一种用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,其特征是,包括内管和外管;所述外管用于盛放待分离纯化的样品,所述内管竖向置于所述外管内;在所述内管的底部设有倾斜设置的超滤膜,所述超滤膜黏附于所述内管上;所述超滤膜与所述内管轴线之间的夹角为α,且0°<α<85°;在所述内管内设有竖向的隔板,所述隔板将所述内管的内腔分隔为一大一小两个空间;其中,所述超滤膜对应设置在内管的大空间底部,在所述内管的小空间底部设有封板,在所述封板上开有直径为0.1-0.5mm的通气孔;在所述内管的外侧壁与所述外管的内侧壁之间设有用于对所述内管进行固定并密封的橡胶圈。
3.根据权利要求2所述的用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,其特征是,在所述内管的上方设有盖塞;所述盖塞包括盖板、位于所述盖板下方的柱塞以及位于所述盖板侧沿的卡扣;所述盖板紧压在所述内管的外沿上,所述盖板下方的柱塞插接在所述内管内大空间的端口处;所述内管内小空间的端口处插接有橡胶塞;所述盖板侧沿的卡扣卡接在所述外管外沿的底部。
4.根据权利要求3所述的用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,其特征是,所述柱塞与所述内管内大空间的端口之间为螺纹连接。
5.根据权利要求2所述的用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,其特征是,在所述超滤膜的底部还设有支撑层和引流层。
6.根据权利要求5所述的用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,其特征是,所述支撑层为筛板结构。
7.根据权利要求2所述的用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,其特征是,所述超滤膜通过环氧树脂胶粘结于内管底部倾斜的切面上。
8.根据权利要求2所述的用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,其特征是,在所述内管和所述外管的上端均设有外沿;在所述外管的外沿上开有若干通孔,在所述内管的外沿下方设有与外管外沿上通孔一一对应的柱销,每一柱销可对应插接在相应的通孔内,从而实现内管和外管之间的相对固定。
9.根据权利要求2或8所述的用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,其特征是,在所述内管的上方设有盖塞;所述盖塞包括盖板、位于所述盖板下方的柱塞以及位于所述盖板侧沿的卡扣;所述盖板紧压在所述内管的外沿上,所述盖板下方的柱塞插接在所述内管内;所述盖板侧沿的卡扣卡接在所述外管外沿的底部。
10.根据权利要求9所述的用于饲料、牲畜粪尿、组织样品前处理的离心超滤装置,其特征是,所述柱塞与所述内管之间为螺纹连接。
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