CN108887588B - 一种利用酶法制备羊骨粉的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用酶法制备羊骨粉的方法，包括以下步骤：采用高压和冷冻法对羊骨进行预处理；采用化学脱脂剂对羊骨粗粉进行除脂；采用中性蛋白酶、十二烷基‑β‑D‑麦芽糖苷、陈皮提取物对脱脂羊骨粗粉进行酶解，得到酶解羊骨粉；酶解羊骨粉经烘干粉碎后即得到所述羊骨粉。本发明首先采用高压和冷冻的方式，将羊骨粉中各成分之间结合力减弱，有利于其从羊骨粉中分离出；然后采用化学脱脂剂进行脱脂，有利于保护羊骨粉中其他有益成分；酶解时，添加十二烷基‑β‑D‑麦芽糖苷和陈皮提取物，一方面能够提高酶解效率和酶解速度，另一方面能够除腥。本发明操作简单，易于推广，且所得产品附加值高，营养价值好，具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于动物副产品加工技术领域，具体涉及一种利用酶法制备羊骨粉的方法。
背景技术
我国羊骨资源丰富，但加工利用能力不足，深加工技术落后，附加值很低，造成资源的巨大浪费。羊骨营养丰富，胶原蛋白占总蛋白的90％以上，但胶原蛋白结构稳定，难以被吸收利用，并且骨中的钙磷等矿物元素主要以羟基磷灰石形式存在，由骨胶原粘合固定，也不易被有效利用，因此骨粉中的蛋白质和钙磷的生物利用度很低。
酶解是利用羊骨资源的一条有效途径，不仅可以制备高附加值的胶原多肽，并且在水解过程中使钙磷等元素释放，而肠道对多肽的利用率高达100％。羊骨胶原多肽还具有促进免疫、抗氧化、美容、抑菌、防治骨质疏松、降血压等生理作用；水解过程中形成的离子钙也更容易被人体吸收，部分还可以与胶原蛋肽形成生物利用度更高的肽钙螯合物。
公布号为CN105876660A的中国发明专利公开了一种利用酶法制备牦牛羊骨粉的方法，该专利首先利用脂肪酶除脂，然后利用蛋白酶脱除胶原蛋白，再采用加入除腥剂除腥，最后得到的羊骨粉和其他原料复配，得到成品牦牛羊骨粉。该方法存在诸多弊端，首现，采用脂肪酶除脂时，会有少量胶原蛋白也被酶解损失掉；其次，利用蛋白酶脱除胶原蛋白时，酶解过程中，胶原蛋白水解成多肽和短肽，羟基磷灰石也转化成溶于水的钙和磷，这些物质都易溶于水，在对骨渣进行过滤时，有益成分均损失在水相中，得到的骨渣营养价值低，用途有限，所以利用价值低。
因此，很有必要开发出一种新的利用酶法制备羊骨粉的方法，以解决上述弊端。
发明内容
本发明提供了一种利用酶法制备羊骨粉的方法，解决了现有技术中采用脂肪酶除脂时，会有少量胶原蛋白被酶解损失掉；利用蛋白酶脱除胶原蛋白时，酶解过程中，胶原蛋白水解成小分子肽，羟基磷灰石也转化成溶于水的钙和磷，这些物质都易溶于水，在对骨渣进行过滤时，有益成分均损失在水相中，得到的骨渣营养价值低的问题。
本发明提供了一种利用酶法制备羊骨粉的方法，包括以下步骤：
步骤1，预处理：将羊骨洗净、晾干后置于250～300MPa下处理1～2h，处理完毕后再将羊骨置于-10～-5℃下处理3～5h，处理完毕后升温至室温，然后将羊骨粉碎，过10目筛，得到羊骨粗粉；
步骤2，除脂：将步骤1中羊骨粗粉加入到相当于羊骨粗粉重量5～10倍的清水中浸泡5～8h，并在浸泡过程中撇去上层脂类物质及杂质，得到羊骨粗粉与水的混合物；
往羊骨粗粉与水的混合物中依次加入无机碱、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇，搅拌1～2h，搅拌完毕后静置3～5h，然后撇去上层脂类物质，过滤，除去滤液，滤渣用水清洗至中性后得到脱脂羊骨粗粉；
其中，羊骨粗粉、无机碱、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇的重量比为100：5～10：1：3～5：20；
步骤3，酶解：将步骤2的脱脂羊骨粗粉加入到相当于脱脂羊骨粗粉重量5～10倍的清水中，然后往其中加入中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物，混合均匀后调节体系pH为3～5，然后在30～35℃下酶解5～8h，酶解完毕后高温灭酶，得到酶解液；将酶解液减压浓缩除去水，得到酶解羊骨粉；
其中，脱脂羊骨粗粉、中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物的重量比为100：0.5～1：0.5：5。
步骤4，烘干粉碎：将步骤3得到的酶解羊骨粉干燥至含水低于5％，然后粉碎、过100目筛，即得到所述羊骨粉。
优选的，所述步骤2中浸泡羊骨粗粉的清水温度为30～40℃。
优选的，所述无机碱为碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠中的一种。
优选的，所述中性蛋白酶的酶活性为10000U/g。
优选的，所述步骤3中高温灭酶的条件为100℃下加热3min。
优选的，所述陈皮提取物的制备方法如下：
将陈皮粉碎后往其中加入相当于陈皮重量5倍的水，调节其pH值为3～3.5，然后往其中加入纤维素酶和果胶酶，升温至50℃，酶解反应3h，得到酶解陈皮；
往酶解陈皮中加入乙醇，升温至80℃，进行醇提反应，反应3h后过滤、浓缩、干燥，即得到所述陈皮提取物；
其中，陈皮、纤维素酶、果胶酶、乙醇的质量比为100：2：1：50。
优选的，所述纤维素酶和果胶酶的酶活性均为8000U/g。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
1)本发明首先采用高压和冷冻的方式，将羊骨粉中各成分之间的结合力减弱，有利于后续处理中这些成分从羊骨粉中分离出，进而提高脱脂效率和酶解效率。
2)本发明采用化学脱脂剂对羊骨粉进行脱脂，化学脱脂剂针对性强，脱脂效率高，仅针对脂肪起作用，对其他成分的影响小，有利于保护羊骨粉中的有益成分；此外，脱脂剂中的羧甲基纤维素能够对羊骨粉中的胶原蛋白形成保护，避免其受脱脂剂的影响。
3)本发明在采用中性蛋白酶进行酶解时，还添加有十二烷基-β-D-麦芽糖苷和陈皮提取物，十二烷基-β-D-麦芽糖苷和陈皮提取物能够促进酶解反应的发生，提高酶解效率和酶解速度，同时，陈皮提取物还能够对酶解液进行除腥，简化了处理步骤。
4)本发明操作简单，易于推广，且所得产品附加值高，营养价值好，具有广泛的应用前景。
具体实施方式
为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但所举实施例不作为对本发明的限定。
下述各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所用材料如无特殊说明，均可在市场上购买得到。
实施例1
一种利用酶法制备羊骨粉的方法，包括以下步骤：
步骤1，预处理：将羊骨洗净、晾干后置于250MPa下处理2h，处理完毕后再将羊骨置于-10℃下处理3h，处理完毕后升温至室温，然后将羊骨粉碎，过10目筛，得到羊骨粗粉；
步骤2，除脂：将步骤1中羊骨粗粉加入到相当于羊骨粗粉重量10倍的温度为40℃的清水中浸泡5h，并在浸泡过程中撇去上层脂类物质及杂质，得到羊骨粗粉与水的混合物；
往羊骨粗粉与水的混合物中依次加入碳酸钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇，搅拌1h，搅拌完毕后静置3h，然后撇去上层脂类物质，过滤，除去滤液，滤渣用水清洗至中性后得到脱脂羊骨粗粉；
其中，羊骨粗粉、碳酸钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇的重量比为100：10：1：5：20；
步骤3，酶解：将步骤2的脱脂羊骨粗粉加入到相当于脱脂羊骨粗粉重量10倍的清水中，然后往其中加入酶活性为10000U/g的中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物，混合均匀后调节体系pH为3～5，然后在30℃下酶解8h，酶解完毕后在100℃下加热3min，终止酶解，得到酶解液；将酶解液减压浓缩除去水，得到酶解羊骨粉；
其中，脱脂羊骨粗粉、中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物的重量比为100：0.5：0.5：5。
步骤4，烘干粉碎：将步骤3得到的酶解羊骨粉干燥至含水量为5％，然后粉碎、过100目筛，即得到羊骨粉。
实施例2
一种利用酶法制备羊骨粉的方法，包括以下步骤：
步骤1，预处理：将羊骨洗净、晾干后置于300MPa下处理1h，处理完毕后再将羊骨置于-5℃下处理5h，处理完毕后升温至室温，然后将羊骨粉碎，过10目筛，得到羊骨粗粉；
步骤2，除脂：将步骤1中羊骨粗粉加入到相当于羊骨粗粉重量5倍的温度为30℃的清水中浸泡8h，并在浸泡过程中撇去上层脂类物质及杂质，得到羊骨粗粉与水的混合物；
往羊骨粗粉与水的混合物中依次加入氢氧化钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇，搅拌2h，搅拌完毕后静置5h，然后撇去上层脂类物质，过滤，除去滤液，滤渣用水清洗至中性后得到脱脂羊骨粗粉；
其中，羊骨粗粉、氢氧化钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇的重量比为100：5：1：3：20；
步骤3，酶解：将步骤2的脱脂羊骨粗粉加入到相当于脱脂羊骨粗粉重量5倍的清水中，然后往其中加入酶活性为10000U/g的中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物，混合均匀后调节体系pH为3～5，然后在35℃下酶解5h，酶解完毕后在100℃下加热3min，终止酶解，得到酶解液；将酶解液减压浓缩除去水，得到酶解羊骨粉；
其中，脱脂羊骨粗粉、中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物的重量比为100：1：0.5：5。
步骤4，烘干粉碎：将步骤3得到的酶解羊骨粉干燥至含水量为3％，然后粉碎、过100目筛，即得到羊骨粉。
实施例3
一种利用酶法制备羊骨粉的方法，包括以下步骤：
步骤1，预处理：将羊骨洗净、晾干后置于280MPa下处理1.5h，处理完毕后再将羊骨置于-8℃下处理4h，处理完毕后升温至室温，然后将羊骨粉碎，过10目筛，得到羊骨粗粉；
步骤2，除脂：将步骤1中羊骨粗粉加入到相当于羊骨粗粉重量8倍的温度为35℃的清水中浸泡6h，并在浸泡过程中撇去上层脂类物质及杂质，得到羊骨粗粉与水的混合物；
往羊骨粗粉与水的混合物中依次加入碳酸氢钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇，搅拌1.5h，搅拌完毕后静置4h，然后撇去上层脂类物质，过滤，除去滤液，滤渣用水清洗至中性后得到脱脂羊骨粗粉；
其中，羊骨粗粉、碳酸氢钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇的重量比为100：8：1：4：20；
步骤3，酶解：将步骤2的脱脂羊骨粗粉加入到相当于脱脂羊骨粗粉重量8倍的清水中，然后往其中加入酶活性为10000U/g的中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物，混合均匀后调节体系pH为3～5，然后在32℃下酶解6h，酶解完毕后在100℃下加热3min，终止酶解，得到酶解液；将酶解液减压浓缩除去水，得到酶解羊骨粉；
其中，脱脂羊骨粗粉、中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物的重量比为100：0.8：0.5：5。
步骤4，烘干粉碎：将步骤3得到的酶解羊骨粉干燥至含水量为2％，然后粉碎、过100目筛，即得到羊骨粉。
需要说明的是，陈皮提取物的制备方法如下：
将陈皮粉碎后往其中加入相当于陈皮重量5倍的水，调节其pH值为3～3.5，然后往其中加入纤维素酶和果胶酶，升温至50℃，酶解反应3h，得到酶解陈皮；
往酶解陈皮中加入乙醇，升温至80℃，进行醇提反应，反应3h后过滤、浓缩、干燥，即得到所述陈皮提取物；
其中，陈皮、纤维素酶、果胶酶、乙醇的质量比为100：2：1：50，且纤维素酶和果胶酶的酶活性均为8000U/g。
为了进一步说明本发明的效果，本发明还设置了对比例，具体如下：
对比例1
一种利用酶法制备羊骨粉的方法，包括以下步骤：
步骤1，预处理：将羊骨洗净、晾干后置于250MPa下处理2h，处理完毕后再将羊骨置于-10℃下处理3h，处理完毕后升温至室温，然后将羊骨粉碎，过10目筛，得到羊骨粗粉；
步骤2，除脂：将步骤1中羊骨粗粉加入到相当于羊骨粗粉重量10倍的温度为40℃的清水中浸泡5h，并在浸泡过程中撇去上层脂类物质及杂质，得到羊骨粗粉与水的混合物；
往羊骨粗粉与水的混合物中加入氢氧化钠，调节体系pH值为8～9，然后再加入相当于羊骨粗粉重量1％的酶活力为10000的脂肪酶，在35℃下酶解5h，酶解完毕后过滤，滤渣即为脱脂羊骨粗粉；
步骤3，酶解：将步骤2的脱脂羊骨粗粉加入到相当于脱脂羊骨粗粉重量10倍的清水中，然后往其中加入酶活性为10000U/g的中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物，混合均匀后调节体系pH为3～5，然后在30℃下酶解8h，酶解完毕后在100℃下加热3min，终止酶解，得到酶解液；将酶解液减压浓缩除去水，得到酶解羊骨粉；
其中，脱脂羊骨粗粉、中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物的重量比为100：0.5：0.5：5；
步骤4，烘干粉碎：将步骤3得到的酶解羊骨粉干燥至含水量为5％，然后粉碎、过100目筛，即得到羊骨粉。
对比例2
一种利用酶法制备羊骨粉的方法，包括以下步骤：
步骤1，预处理：将羊骨洗净、晾干后粉碎，过10目筛，得到羊骨粗粉；
步骤2，除脂：将步骤1中羊骨粗粉加入到相当于羊骨粗粉重量10倍的温度为40℃的清水中浸泡5h，并在浸泡过程中撇去上层脂类物质及杂质，得到羊骨粗粉与水的混合物；
往羊骨粗粉与水的混合物中依次加入碳酸钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇，搅拌1h，搅拌完毕后静置3h，然后撇去上层脂类物质，过滤，除去滤液，滤渣用水清洗至中性后得到脱脂羊骨粗粉；
其中，羊骨粗粉、碳酸钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇的重量比为100：10：1：5：20；
步骤3，酶解：将步骤2的脱脂羊骨粗粉加入到相当于脱脂羊骨粗粉重量10倍的清水中，然后往其中加入酶活性为10000U/g的中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物，混合均匀后调节体系pH为3～5，然后在30℃下酶解8h，酶解完毕后在100℃下加热3min，终止酶解，得到酶解液；将酶解液减压浓缩除去水，得到酶解羊骨粉；
其中，脱脂羊骨粗粉、中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物的重量比为100：0.5：0.5：5；
步骤4，烘干粉碎：将步骤3得到的酶解羊骨粉干燥至含水量为5％，然后粉碎、过100目筛，即得到羊骨粉。
对比例3
一种利用酶法制备羊骨粉的方法，包括以下步骤：
步骤1，预处理：将羊骨洗净、晾干后置于250MPa下处理2h，处理完毕后再将羊骨置于-10℃下处理3h，处理完毕后升温至室温，然后将羊骨粉碎，过10目筛，得到羊骨粗粉；
步骤2，除脂：将步骤1中羊骨粗粉加入到相当于羊骨粗粉重量10倍的温度为40℃的清水中浸泡5h，并在浸泡过程中撇去上层脂类物质及杂质，得到羊骨粗粉与水的混合物；
往羊骨粗粉与水的混合物中依次加入碳酸钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇，搅拌1h，搅拌完毕后静置3h，然后撇去上层脂类物质，过滤，除去滤液，滤渣用水清洗至中性后得到脱脂羊骨粗粉；
其中，羊骨粗粉、碳酸钠、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇的重量比为100：10：1：5：20；
步骤3，酶解：将步骤2的脱脂羊骨粗粉加入到相当于脱脂羊骨粗粉重量10倍的清水中，然后往其中加入酶活性为10000U/g的中性蛋白酶，调节体系pH为3～5，然后在30℃下酶解8h，酶解完毕后在100℃下加热3min，终止酶解，得到酶解液；将酶解液过滤，滤渣即为酶解羊骨粉；
其中，脱脂羊骨粗粉、中性蛋白酶的重量比为100：0.5；
步骤4，烘干粉碎：将步骤3得到的酶解羊骨粉干燥至含水量为5％，然后粉碎、过100目筛，即得到羊骨粉。
实施例1～3和对比例1～3均利用酶法制备了羊骨粉，对实施例1～3和对比例1～3制备过程中酶解液成分进行测试，以说明本发明的效果，具体实验过程和检验结果如下。
取实施例1～3和对比例1～3制备出的酶解液，以5000r/min的速度离心15min后取上清液进行各项指标的检测，其中，水解度的测定采用邻苯二甲醛法，氨基酸态氮的测定采用中性甲醛滴定法，多肽生成总量以不被TCA所沉淀的多肽计算，其中总氮的测定采用福林-酚法；短肽不被15％TCA所沉淀，15％三氯乙酸中的可溶性氮的测定采用福林-酚法，原料中总氮的测定采用凯氏氮法测定。具体结果见表1。
表1酶解液成分测试结果
| 项目 | 水解度(％) | 氨基酸态氮(％) | 多肽生成量(mg/g) | 短肽得率(％) |
| 实施例1 | 29.52 | 27.31 | 87.15 | 55.22 |
| 实施例2 | 29.78 | 26.94 | 88.02 | 54.42 |
| 实施例3 | 28.92 | 27.56 | 87.81 | 54.20 |
| 对比例1 | 28.56 | 25.38 | 81.62 | 50.38 |
| 对比例2 | 28.13 | 26.41 | 86.88 | 53.58 |
| 对比例3 | 26.32 | 24.82 | 85.93 | 51.76 |
由表1可看出，实施例1～3的利用酶法制备出的羊骨粉酶解液的水解度均在28.9％以上，氨基酸态氮的含量在26.9％以上，多肽生成量在87mg/g以上，短肽得率在54％以上，说明实施例1～3的酶解率高，得到的营养成分含量也高。
对比例1中采用脂肪酶脱脂，且脱脂产物过滤后再进行酶解，这种方式对中性蛋白酶的酶解反应基本不产生影响，但是在脂肪酶的酶解过程中，有少量胶原蛋白也产生了酶解，所以最终得到的酶解液中氨基酸态氮的含量、多肽生成量以及短肽得率均较实施例1～3低。
对比例2中羊骨在预处理时没有经过高压及冷冻处理，因此羊骨中所含的成分不易分离出参与酶解反应，所以酶解度和有益成分的含量均较实施例1～3低，且水解度比对比例1小，但是由于没有损失，有益成分含量较对比例1高。
对比例3中羊骨粉在采用中性蛋白酶酶解时，没有加入其他辅助酶解的成分，因此水解度相对较低，有益成分含量也相对较低。
此外，需要说明的是，对比例3中酶解液过滤后，滤渣即为酶解羊骨粉，即含有有益成分的滤液被弃掉，留下的羊骨粉的营养成分含量低，利用价值也较低。
进一步需要说明的是，本发明说明书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，由于采用的步骤方法与实施例1～3相同，为了防止赘述，本发明的描述了优选的实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (7)
1.一种利用酶法制备羊骨粉的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1，预处理：将羊骨洗净、晾干后置于250～300MPa下处理1～2h，处理完毕后再将羊骨置于-10～-5℃下处理3～5h，处理完毕后升温至室温，然后将羊骨粉碎，过10目筛，得到羊骨粗粉；
步骤2，除脂：将步骤1中羊骨粗粉加入到相当于羊骨粗粉重量5～10倍的清水中浸泡5～8h，并在浸泡过程中撇去上层脂类物质及杂质，得到羊骨粗粉与水的混合物；
往羊骨粗粉与水的混合物中依次加入无机碱、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇，搅拌1～2h，搅拌完毕后静置3～5h，然后撇去上层脂类物质，过滤，除去滤液，滤渣用水清洗至中性后得到脱脂羊骨粗粉；
其中，羊骨粗粉、无机碱、羧甲基纤维素、月桂酰水解蚕丝钠、乙醇的重量比为100：5～10：1：3～5：20；
步骤3，酶解：将步骤2的脱脂羊骨粗粉加入到相当于脱脂羊骨粗粉重量5～10倍的清水中，然后往其中加入中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物，混合均匀后调节体系pH为3～5，然后在30～35℃下酶解5～8h，酶解完毕后高温灭酶，得到酶解液；将酶解液减压浓缩除去水，得到酶解羊骨粉；
其中，脱脂羊骨粗粉、中性蛋白酶、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、陈皮提取物的重量比为100：0.5～1：0.5：5；
步骤4，烘干粉碎：将步骤3得到的酶解羊骨粉干燥至含水低于5％，然后粉碎、过100目筛，即得到所述羊骨粉。
2.根据权利要求1所述的利用酶法制备羊骨粉的方法，其特征在于，所述步骤2中浸泡羊骨粗粉的清水温度为30～40℃。
3.根据权利要求1所述的利用酶法制备羊骨粉的方法，其特征在于，所述无机碱为碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠中的一种。
4.根据权利要求1所述的利用酶法制备羊骨粉的方法，其特征在于，所述中性蛋白酶的酶活性为10000U/g。
5.根据权利要求1所述的利用酶法制备羊骨粉的方法，其特征在于，所述步骤3中高温灭酶的条件为100℃下加热3min。
6.根据权利要求1所述的利用酶法制备羊骨粉的方法，其特征在于，所述陈皮提取物的制备方法如下：将陈皮粉碎后往其中加入相当于陈皮重量5倍的水，调节其pH值为3～3.5，然后往其中加入纤维素酶和果胶酶，升温至50℃，酶解反应3h，得到酶解陈皮；往酶解陈皮中加入乙醇，升温至80℃，进行醇提反应，反应3h后过滤、浓缩、干燥，即得到所述陈皮提取物；其中，陈皮、纤维素酶、果胶酶、乙醇的质量比为100：2：1：50。
7.根据权利要求6所述的利用酶法制备羊骨粉的方法，其特征在于，所述纤维素酶和果胶酶的酶活性均为8000U/g。
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| PB01 | Publication | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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