CN108865943B - 一种厕所用复合微生物菌剂及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种厕所用复合微生物菌剂及其应用，属于微生物制剂技术领域。包括氧化微杆菌菌液、假单胞菌菌液、土地戈登氏菌菌液、短状杆菌菌液、库克菌菌液、嗜温鞘氨醇杆菌菌液、鞘氨醇单胞菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液、解纤维素芽孢杆菌菌液和酵母菌菌液。本发明提供的复合微生物菌剂能够有效的分解并熟化粪便，得到生物有机肥，同时使厕所无臭味。

Description

一种厕所用复合微生物菌剂及其应用
技术领域
本发明属于微生物制剂技术领域，具体涉及一种厕所用复合微生物菌剂及其应用。
背景技术
生态厕所自上世纪末期开发应用以来，其工艺技术水平不断提升。现在已发展多种生态厕所，包括免水冲式环保厕所、水电自给型环保厕所等。根据处理系统不同又分为生物堆肥发酵系统，循环水微生物分解系统和免水冲机械打包系统。一直以来，与生态厕所相关的研究，多集中于厕所构架及功能组成、厕所处理系统的开发，以及专用菌种的开发和应用。
在菌种开发方面，四川师范大学唐薇薇进行了生态厕所专用除臭菌剂的筛选研究，获得13株具有除臭性能的菌株，再经复筛，获得6株高效除臭菌株，经鉴定为东方伊萨酵母、异常威客汉姆酵母、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、枯草芽孢杆菌、公牛链霉菌。于国峰等也开展了专用菌剂的分离筛选，他们从土壤中分离得到6株菌，对实验菌种鉴定为粪肠球菌、木糖葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、产氨棒杆菌、地衣芽孢杆菌和活动肉杆菌，将其培养成1组复合菌进行降解试验，结果其COD降解率达到59％。
尽管国内一些企业和科研机构对生态厕所专用菌剂进行了相关研究，但绝大部分仅限于实验室水平，国内仅有2～3款菌剂产品投入生产使用，但有机物分解效率低、除臭效果差。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种厕所用复合微生物菌剂及其应用，能够有效地使粪便分解熟化成有机肥，并去除厕所异味。
为了解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：
本发明提供了一种厕所用复合微生物菌剂，包括如下体积份的组分：氧化微杆菌菌液4～5份、假单胞菌菌液4～5份、土地戈登氏菌菌液2～3份、短状杆菌菌液2～3份、库克菌菌液1～2份、嗜温鞘氨醇杆菌菌液1～2份、鞘氨醇单胞菌菌液1～2份、巨大芽孢杆菌菌液2～3份、地衣芽孢杆菌菌液5～6份、枯草芽孢杆菌菌液5～6份、解淀粉芽孢杆菌粉4～5份、解纤维素芽孢杆菌菌液7～8份和酵母菌菌液2～4份；
所述氧化微杆菌菌液的活菌数为1～2×108CFU/mL；所述假单胞菌菌液的活菌数为3～4×108CFU/mL；所述土地戈登氏菌菌液的活菌数为1～2×108CFU/mL；所述短状杆菌菌液的活菌数为1～2×108CFU/mL；所述库克菌菌液的活菌数为3～4×108CFU/mL；所述嗜温鞘氨醇杆菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述鞘氨醇单胞菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述巨大芽孢杆菌菌液的活菌数为3～4×108CFU/mL；所述地衣芽孢杆菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述枯草芽孢杆菌菌液的活菌数为5～8×108CFU/mL；所述解淀粉芽孢杆菌液的活菌数为5～8×108CFU/mL；所述解纤维素芽孢杆菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述酵母菌菌液的活菌数为1～2×109CFU/mL。
优选的，包括如下体积份的组分：氧化微杆菌菌液4.2～4.8份、假单胞菌菌液4.2～4.8份、土地戈登氏菌菌液2.2～2.8份、短状杆菌菌液2.2～2.8份、库克菌菌液1.2～1.8份、嗜温鞘氨醇杆菌菌液1.2～1.8份、鞘氨醇单胞菌菌液1.2～1.8份、巨大芽孢杆菌菌液2.2～2.8份、地衣芽孢杆菌菌液5.2～5.8份、枯草芽孢杆菌菌液5.2～5.8份、解淀粉芽孢杆菌粉4.2～4.8份、解纤维素芽孢杆菌菌液7.2～7.8份和酵母菌菌液2.5～3.5份。
优选的，所述氧化微杆菌菌液的活菌数为1.3～1.7×108CFU/mL；所述假单胞菌菌液的活菌数为3.2～3.8×108CFU/mL；所述土地戈登氏菌菌液的活菌数为1.3～1.7×108CFU/mL；所述短状杆菌菌液的活菌数为1.3～1.7×108CFU/mL；所述库克菌菌液的活菌数为3.2～3.8×108CFU/mL；所述嗜温鞘氨醇杆菌菌液的活菌数为3.5～4.5×108CFU/mL；所述鞘氨醇单胞菌菌液的活菌数为3.5～4.5×108CFU/mL；所述巨大芽孢杆菌菌液的活菌数为3.2～3.8×108CFU/mL；所述地衣芽孢杆菌菌液的活菌数为3.5～4.5×108CFU/mL；所述枯草芽孢杆菌菌液的活菌数为6～7×108CFU/mL；所述解淀粉芽孢杆菌液的活菌数为6～7×108CFU/mL；所述解纤维素芽孢杆菌菌液的活菌数为3.5～4.5×108CFU/mL；所述酵母菌菌液的活菌数为1.3～1.7×109CFU/mL。
优选的，还包括载体，所述载体为麸皮、稻壳或木屑中的一种或多种。
优选的，所述氧化微杆菌菌液、假单胞菌菌液、土地戈登氏菌菌液、短状杆菌菌液、库克菌菌液、嗜温鞘氨醇杆菌菌液、鞘氨醇单胞菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液、解纤维素芽孢杆菌菌液和酵母菌菌液的总质量与载体的质量比为1:4～6。
优选的，所述氧化微杆菌菌液、假单胞菌菌液、土地戈登氏菌菌液、短状杆菌菌液、库克菌菌液、嗜温鞘氨醇杆菌菌液、鞘氨醇单胞菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液、解纤维素芽孢杆菌菌液和酵母菌菌液的制备方法独立包括：
将氧化微杆菌、假单胞菌、土地戈登氏菌、短状杆菌、库克菌、嗜温鞘氨醇杆菌、鞘氨醇单胞菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、解纤维素芽孢杆菌和酵母菌独立扩大培养后离心得到上述菌液。
优选的，所述离心的转速为3000～5000r/min，离心的时间为5～15min。
本发明提供了一种上述方案所述的复合微生物菌剂在处理厕所粪便中的应用。
本发明提供了一种厕所用复合微生物菌剂，包括氧化微杆菌菌液、假单胞菌菌液、土地戈登氏菌菌液、短状杆菌菌液、库克菌菌液、嗜温鞘氨醇杆菌菌液、鞘氨醇单胞菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液、解纤维素芽孢杆菌菌液和酵母菌菌液。本发明中，所述菌株间协同作用，利用菌种的特性，将粪便中蛋白质、纤维素、糖类快速分解，分解过程中的臭味再通过菌株代谢利用而去除，从而有效分解并熟化粪便，而且降解过程无臭味。实施例结果表明：添加本发明制备得到的复合微生物菌剂后，NH3和H2S相较于对照组分别下降了72％～77％和81％～84％。同时，将本发明制备得到的微生物菌剂投放到生态厕所中，经3个月后，能够得到生物有机肥，同时厕所无臭味。
具体实施方式
本发明提供了一种厕所用复合微生物菌剂，包括如下体积份的组分：氧化微杆菌菌液4～5份、假单胞菌菌液4～5份、土地戈登氏菌菌液2～3份、短状杆菌菌液2～3份、库克菌菌液1～2份、嗜温鞘氨醇杆菌菌液1～2份、鞘氨醇单胞菌菌液1～2份、巨大芽孢杆菌菌液2～3份、地衣芽孢杆菌菌液5～6份、枯草芽孢杆菌菌液5～6份、解淀粉芽孢杆菌粉4～5份、解纤维素芽孢杆菌菌液7～8份和酵母菌菌液2～4份；
所述氧化微杆菌菌液的活菌数为1～2×108CFU/mL；所述假单胞菌菌液的活菌数为3～4×108CFU/mL；所述土地戈登氏菌菌液的活菌数为1～2×108CFU/mL；所述短状杆菌菌液的活菌数为1～2×108CFU/mL；所述库克菌菌液的活菌数为3～4×108CFU/mL；所述嗜温鞘氨醇杆菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述鞘氨醇单胞菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述巨大芽孢杆菌菌液的活菌数为3～4×108CFU/m；所述地衣芽孢杆菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述枯草芽孢杆菌菌液的活菌数为5～8×108CFU/mL；所述解淀粉芽孢杆菌液的活菌数为5～8×108CFU/mL；所述解纤维素芽孢杆菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述酵母菌菌液的活菌数为1～2×109CFU/mL。
本发明，所述厕所用复合微生物菌剂，优选包括如下体积份的组分：氧化微杆菌菌液4.2～4.8份、假单胞菌菌液4.2～4.8份、土地戈登氏菌菌液2.2～2.8份、短状杆菌菌液2.2～2.8份、库克菌菌液1.2～1.8份、嗜温鞘氨醇杆菌菌液1.2～1.8份、鞘氨醇单胞菌菌液1.2～1.8份、巨大芽孢杆菌菌液2.2～2.8份、地衣芽孢杆菌菌液5.2～5.8份、枯草芽孢杆菌菌液5.2～5.8份、解淀粉芽孢杆菌粉4.2～4.8份、解纤维素芽孢杆菌菌液7.2～7.8份和酵母菌菌液2.5～3.5份，更优选包括如下体积份的组分：氧化微杆菌菌液4.5份、假单胞菌菌液4.5份、土地戈登氏菌菌液2.5份、短状杆菌菌液2.5份、库克菌菌液1.5份、嗜温鞘氨醇杆菌菌液1.5份、鞘氨醇单胞菌菌液1.5份、巨大芽孢杆菌菌液2.5份、地衣芽孢杆菌菌液5.5份、枯草芽孢杆菌菌液5.5份、解淀粉芽孢杆菌粉4.5份、解纤维素芽孢杆菌菌液7.5份和酵母菌菌液3份。
本发明中，所述氧化微杆菌菌液的活菌数优选为1.3～1.7×108CFU/mL，更优选为1.5×108CFU/mL。本发明中，所述假单胞菌菌液的活菌数优选为3.2～3.8×108CFU/mL，更优选为3.5×108CFU/mL。本发明中，所述土地戈登氏菌菌液的活菌数优选为1.3～1.7×108CFU/mL，更优选为1.5×108CFU/mL。本发明中，所述短状杆菌菌液的活菌数优选为1.3～1.7×108CFU/mL，更优选为1.5×108CFU/mL。本发明总，所述库克菌菌液的活菌数优选为3.2～3.8×108CFU/mL，更优选为3.5×108CFU/mL。本发明中，所述嗜温鞘氨醇杆菌菌液的活菌数优选为3.5～4.5×108CFU/mL，更优选为4×108CFU/mL。本发明中，所述鞘氨醇单胞菌菌液的活菌数优选为3.5～4.5×108CFU/mL，更优选为4×108CFU/mL。本发明中，所述巨大芽孢杆菌菌液的活菌数优选为3.2～3.8×108CFU/mL，更优选为3.5×108CFU/mL。本发明中，所述地衣芽孢杆菌菌液的活菌数优选为3.5～4.5×108CFU/mL，更优选为4×108CFU/mL。本发明中，所述枯草芽孢杆菌菌液的活菌数优选为6～7×108CFU/mL，更优选为6.5×108CFU/mL。本发明中，所述解淀粉芽孢杆菌液的活菌数优选为6～7×108CFU/mL，更优选为6.5×108CFU/mL。本发明中，所述解纤维素芽孢杆菌菌液的活菌数优选为3.5～4.5×108CFU/mL，更优选为4×108CFU/mL。本发明中，所述酵母菌菌液的活菌数优选为1.3～1.7×109CFU/mL，更优选为1.5×109CFU/mL。
本发明中，所述菌株间协同作用，利用菌种的特性，将粪便中蛋白质、纤维素、糖类快速分解，分解过程中的臭味再通过菌株代谢利用而去除，从而有效分解并熟化粪便，而且降解过程无臭味。
本发明中，所述氧化微杆菌菌液、假单胞菌菌液、土地戈登氏菌菌液、短状杆菌菌液、库克菌菌液、嗜温鞘氨醇杆菌菌液、鞘氨醇单胞菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液、解纤维素芽孢杆菌菌液和酵母菌菌液的制备方法独立包括：将氧化微杆菌、假单胞菌、土地戈登氏菌、短状杆菌、库克菌、嗜温鞘氨醇杆菌、鞘氨醇单胞菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、解纤维素芽孢杆菌和酵母菌独立扩大培养后离心。本发明中，所述离心的转速优选为3000～5000r/min，更优选为4000r/min。所述离心的时间优选为5～15min，更优选为10min。
本发明中，所述氧化微杆菌扩大培养的方式优选为:将氧化微杆菌接种至培养基中在25℃条件下好氧培养30h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.5。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为150rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述培养基每1L优选包括如下含量的组分：葡萄糖15g，牛肉膏30g，蛋白胨20g，NaCl1.0g，KH2PO4 0.5g，MgSO4 0.5g，蒸馏水定容至1L，pH值7.0。本发明对所述氧化微杆菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号为：1.7107。
本发明中，所述假单胞菌扩大培养的方式优选为:将假单胞菌接种至培养基中在28℃条件下好氧培养30h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.5。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为180rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述培养基每1L优选包括如下含量的组分葡萄糖20g，玉米浆20g，KH2PO4 1.5g，MgSO4 0.5g，蛋白胨3g，牛肉膏2g，氯化钠2g，蒸馏水定容至1L，pH值7.0～7.2。本发明对所述氧化微杆菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)菌株编号：1.15316。
本发明中，所述土地戈登氏菌扩大培养的方式优选为:将土地戈登氏菌接种至培养基中在25℃条件下好氧培养24h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.4。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为150rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述培养基每1L优选包括如下含量的组分：蔗糖20g，硝酸钾4g，MgSO4 0.4g，FeSO415mg，KH2PO4 2g，Na2HPO4 3g，柠檬酸钠2g，蒸馏水定容至1L，pH为7.2。本发明对所述土地戈登氏菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号:1.15894。
本发明中，所述短状杆菌扩大培养的方式优选为：将短状杆菌接种至培养基中在25℃条件下好氧培养30h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.5。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为150rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述培养基每1L优选包括如下含量的组分：蛋白胨5g，牛肉膏30g，NaCl 5g，蒸馏水定容至1L，pH值为7.0～7.2。本发明对所述短状杆菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号：1.838。
本发明中，所述库克菌扩大培养的方式优选为：将库克菌种至培养基中在25℃条件下好氧培养24h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.4。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为150rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述培养基每1L优选包括如下含量的组分：牛肉膏4g，甘油10mL,NH4H2PO4 5g，MnSO4 0.01g，K2HPO42g,MgSO4 0.1g,蛋白胨8g，ZnSO4 0.008g，蒸馏水定容至1L，pH值为7.2。本发明对所述库克菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号1.10539。
本发明中，所述嗜温鞘氨醇杆菌扩大培养的方式优选为：将嗜温鞘氨醇杆菌接种至LB培养基中在37℃条件下好氧培养24h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.5。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为150rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述LB培养基每1L优选包括如下含量的组分:胰蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl10g，蒸馏水定容至1L，pH值为7.0。本发明对所述嗜温鞘氨醇杆菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国典型培养物保藏管理中心(CCTCC)，菌株编号：AB2010003T。
本发明中，所述鞘氨醇单胞菌扩大培养的方式优选为：将鞘氨醇单胞菌接种至培养基中在25℃条件下好氧培养28h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.4。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为150rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述LB培养基每1L优选包括如下含量的组分:葡萄糖40g，豆饼粉2.0g，NaCl0.85g，K2HPO4 1.5g，MgSO4 0.12g，MnCl2 0.0075g，FeSO4 0.002g，蒸馏水定容至1L,pH值7.0。本发明对所述鞘氨醇单胞菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号：1.12824。
本发明中，所述巨大芽孢杆菌扩大培养的方式优选为为：将巨大芽孢杆菌接种至LB培养基中在30℃条件下好氧培养28h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.5。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为200rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述LB培养基每1L优选包括如下含量的组分:胰蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl10g，蒸馏水定容至1L，pH值为7.2。本发明对所述巨大芽孢杆菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号：1.7416。
本发明中，所述地衣芽孢杆菌扩大培养的方式优选为：将地衣芽孢杆菌至LB培养基中在30℃条件下好氧培养30h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.5。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为200rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述LB培养基每1L优选包括如下含量的组分:胰蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，蒸馏水定容至1L，pH值为7.2。本发明对所述地衣芽孢杆菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号：1.8791。
本发明中，所述枯草芽孢杆菌扩大培养的方式优选为：将枯草芽孢杆菌接种至LB培养基中在30℃条件下好氧培养30h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.5。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为200rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述LB培养基每1L优选包括如下含量的组分:胰蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl10g，蒸馏水定容至1L，pH值为7.2。本发明对所述枯草芽孢杆菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号：1.9083。
本发明中，所述解淀粉芽孢杆菌扩大培养的方式优选为：将解淀粉芽孢杆菌接种至LB培养基中在30℃条件下好氧培养30h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.5。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为200rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述LB培养基每1L优选包括如下含量的组分:胰蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl10g，蒸馏水定容至1L，pH值为7.2。本发明对所述解淀粉芽孢杆菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号：1.15674。
本发明中，所述解纤维素芽孢杆菌扩大培养的方式优选为：将解纤维素芽孢杆菌接种至LB培养基中在30℃条件下好氧培养30h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.4。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为200rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述LB培养基每1L优选包括如下含量的组分:胰蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，蒸馏水定容至1L，pH值为7.2。本发明对所述解纤维素芽孢杆菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，菌株编号：1.15312。
本发明中，所述酵母菌扩大培养的方式优选为：将酵母菌接种至至LB培养基中在30℃条件下好氧培养24h。所述好氧培养时的通风比优选为1:0.5。所述好氧培养时采用搅拌的方式控制氧气。所述搅拌的转速优选为180rpm。所述好氧培养优选在发酵罐中进行。所述LB培养基每1L优选包括如下含量的组分:胰蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，蒸馏水定容至1L，pH值为7.2。本发明对所述酵母菌的菌种来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。本发明实施例中购买自中国农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)，菌株编号：20165。
本发明中，所述复合微生物菌剂优选还包括载体。所述载体优选为麸皮、稻壳或木屑中的一种或多种。所述氧化微杆菌菌液、假单胞菌菌液、土地戈登氏菌菌液、短状杆菌菌液、库克菌菌液、嗜温鞘氨醇杆菌菌液、鞘氨醇单胞菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液、解纤维素芽孢杆菌菌液和酵母菌菌液的总质量与载体的质量比优选为1:3～5，更优选为1:4。
本发明对所述麸皮、稻壳或木屑的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。
本发明中，复合微生物菌剂的制备方法优选包括以下步骤：将复合微生物菌液和载体混合，干燥。所述混合的方式优选为搅拌。所述搅拌的时间优选为10～15min，更优选为13min。所述搅拌的转速优选为500～1500r/min，更优选为1000r/min。所述干燥的温度优选为25～35℃，更优选为30℃。所述干燥后的复合微生物菌剂的含水量优选为10～15％，更优选为12％。
本发明提供了一种上述方案所述的复合微生物菌剂在处理厕所粪便中的应用。
所述复合微生物菌剂在处理厕所粪便时的具体应用方法优选为将复合微生物菌剂投放到厕位中。所述投放量优选为1.5～2.5Kg/位，更优选为2.0Kg/位。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
将氧化微杆菌在发酵罐好氧培养，培养基为：葡萄糖15g，牛肉膏30g，蛋白胨20g，NaCl 1.0g，KH2PO4 0.5g，，MgSO4 0.5g，蒸馏水定容至1L,调pH至7.0，通风比1:0.5，搅拌转速150rpm，25℃培养30小时，将得到的培养液以4000r/min的转速离心10min，得到氧化微杆菌菌液。
将假单胞菌在发酵罐好氧培养，培养基为葡萄糖20g，玉米浆20g，KH2PO4 1.5g，MgSO4 0.5g，蛋白胨3g，牛肉膏2g，氯化钠2g，蒸馏水定容至1L，调pH至7.0-7.2，通风比1:0.5，搅拌转速180rpm，28℃培养30小时，将得到的培养液以4000r/min的转速离心10min，得到假单胞菌菌液。
将土地戈登氏菌在发酵罐好氧培养，通风比1:0.4，搅拌转速150rpm，25℃培养24小时，培养基为蔗糖20g，硝酸钾4g，MgSO4 0.4g，FeSO4 15mg，KH2PO4 2g，Na2HPO4 3g，柠檬酸钠2g，蒸馏水定容至1L，调pH至7.2。将得到的培养液以5000r/min的转速离心10min，得到土地戈登氏菌菌液。
将短状杆菌在发酵罐好氧培养，通风比1:0.5，搅拌转速150rpm，25℃培养30小时，培养基为蛋白胨5g，牛肉膏30g，NaCl 5g，蒸馏水定容至1L，调pH至7.0-7.2。将得到的培养液以4000r/min的转速离心5min，得到短状杆菌菌液。
将库克菌在发酵罐好氧培养、通风比1:0.4，搅拌转速150rpm，25℃培养24小时，培养基为牛肉膏4g，甘油10mL,NH4H2PO4 5g，MnSO4 0.01g，K2HPO4 2g，MgSO4 0.1g，蛋白胨8g，ZnSO4 0.008g，蒸馏水定容至1L，调pH至7.2。将得到的培养液以3000r/min的转速离心10min，得到库克菌菌液。
将嗜温鞘氨醇杆菌在发酵罐好氧培养、通风比1:0.5，搅拌转速150rpm，37℃培养24小时，培养基为LB培养基：胰蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，蒸馏水定容至1L,调pH至7.0。将得到的培养液以3000r/min的转速离心15min，得到嗜温鞘氨醇杆菌菌液。
将鞘氨醇单胞菌在发酵罐好氧培养、通风比1:0.4，搅拌转速150rpm，25℃培养28小时，培养基为葡萄糖40g，豆饼粉2.0g，NaCl 0.85g，K2HPO4 1.5g，MgSO4 0.12g，MnCl20.0075g，FeSO4 0.002g，蒸馏水定容至1L，调pH至7.0。将得到的培养液以3000r/min的转速离心10min，得到鞘氨醇单胞菌菌液。
将巨大芽孢杆菌在发酵罐好氧培养、通风比1:0.5，搅拌转速200rpm，30℃培养28小时，培养基为LB培养基，调pH至7.2。将得到的培养液以3000r/min的转速离心5min，得到巨大芽孢杆菌菌液。
将地衣芽孢杆菌在发酵罐好氧培养、通风比1:0.5，搅拌转速200rpm，30℃培养30小时，培养基为LB培养基，调pH至7.2。将得到的培养液以3000r/min的转速离心10min，得到地衣芽孢杆菌菌液。
将枯草芽孢杆菌在发酵罐好氧培养、通风比1:0.5，搅拌转速200rpm，30℃培养30小时，培养基为LB培养基，调pH至7.2。将得到的培养液以3000r/min的转速离心10min，得到枯草芽孢杆菌粉。
将解淀粉芽孢杆菌在发酵罐好氧培养、通风比1:0.5，搅拌转速200rpm，30℃培养30小时，培养基为LB培养基，调pH至7.2。将得到的培养液以4000r/min的转速离心10min，得到解淀粉芽孢杆菌菌液。
将解纤维素芽孢杆菌在发酵罐好氧培养、通风比1:0.4，搅拌转速200rpm，30℃培养30小时，培养基为LB培养基，调pH至7.2。将得到的培养液以4000r/min的转速离心10min，得到解纤维素芽孢杆菌菌液。
将酵母菌在发酵罐好氧培养、通风比1:0.5，搅拌转速180rpm，30℃培养24小时，培养基为LB培养基，调pH至7.2。将得到的培养液以3000r/min的转速离心5min，得到酵母菌菌液。
实施例2
取400mL实施例1制备得到的氧化微杆菌菌液(调节活菌数为1.5×108CFU/mL)、500mL实施例1制备得到的假单胞菌菌液(调节活菌数为3.4×108CFU/mL)、200mL实施例1制备得到的土地戈登氏菌菌液(调节活菌数为1×108CFU/mL)、200mL实施例1制备得到的短状杆菌菌液(调节活菌数为2×108CFU/mL)、100mL实施例1制备得到的库克菌菌液(调节活菌数为3×108CFU/mL)、150mL实施例1制备得到的嗜温鞘氨醇杆菌菌液(调节活菌数为4.0×108CFU/mL)、200mL实施例1制备得到的鞘氨醇单胞菌菌液(调节活菌数为4.2×108CFU/mL)、200mL实施例1制备得到的巨大芽孢杆菌菌液(调节活菌数为3.2×108CFU/mL)、500mL实施例1制备得到的地衣芽孢杆菌菌液(调节活菌数为4.2×108CFU/mL)、500mL实施例1制备得到的枯草芽孢杆菌菌液(调节活菌数为6.9×108CFU/mL)、400mL实施例1制备得到的解淀粉芽孢杆菌菌液(调节活菌数为7.2×108CFU/mL)、700mL实施例1制备得到的解纤维素芽孢杆菌菌液(调节活菌数为3×108CFU/mL)和300mL实施例1制备得到的酵母菌菌液(调节活菌数为1.8×109CFU/mL)，将上述菌液混合后，与13Kg稻壳混合，以500r/min的转速搅拌15min后再于25℃下通风干燥至含水量为15％，得到复合微生物菌剂。
实施例3
取500mL实施例1制备得到的氧化微杆菌菌液(调节活菌数为1×108CFU/mL)、400mL实施例1制备得到的假单胞菌菌液(调节活菌数为4×108CFU/mL)、300mL实施例1制备得到的土地戈登氏菌菌液(调节活菌数为2×108CFU/mL)、250mL实施例1制备得到的短状杆菌菌液(调节活菌数为1×108CFU/mL)、150mL实施例1制备得到的库克菌菌液(调节活菌数为4×108CFU/mL)、200mL实施例1制备得到的嗜温鞘氨醇杆菌菌液(调节活菌数为5.0×108CFU/mL)、150mL实施例1制备得到的鞘氨醇单胞菌菌液(调节活菌数为5×108CFU/mL)、250mL实施例1制备得到的巨大芽孢杆菌菌液(调节活菌数为4×108CFU/mL)、550mL实施例1制备得到的地衣芽孢杆菌菌液(调节活菌数为5×108CFU/mL)、550mL实施例1制备得到的枯草芽孢杆菌菌液(调节活菌数为8×108CFU/mL)、500mL实施例1制备得到的解淀粉芽孢杆菌菌液(调节活菌数为5×108CFU/mL)、750mL实施例1制备得到的解纤维素芽孢杆菌菌液(调节活菌数为5×108CFU/mL)和400mL实施例1制备得到的酵母菌菌液(调节活菌数为1×109CFU/mL),上述菌液混合后，与20.5Kg麸皮混合，以1500r/min的转速搅拌10min后再于35℃下通风干燥至含水量为10％，得到复合微生物菌剂。
实施例4
取450mL实施例1制备得到的氧化微杆菌菌液(调节活菌数为1.5×108CFU/mL)、450mL实施例1制备得到的假单胞菌菌液(调节活菌数为3.5×108CFU/mL)、250mL实施例1制备得到的土地戈登氏菌菌液(调节活菌数为1.5×108CFU/mL)、250mL实施例1制备得到的短状杆菌菌液(调节活菌数为1.5×108CFU/mL)、150mL实施例1制备得到的库克菌菌液(调节活菌数为3.5×108CFU/mL)、150mL实施例1制备得到的嗜温鞘氨醇杆菌菌液(调节活菌数为4.0×108CFU/mL)、100mL实施例1制备得到的鞘氨醇单胞菌菌液(调节活菌数为4.2×108CFU/mL)、300mL实施例1制备得到的巨大芽孢杆菌菌液(调节活菌数为3.5×108CFU/mL)、600mL实施例1制备得到的地衣芽孢杆菌菌液(调节活菌数为4×108CFU/mL)、600mL实施例1制备得到的枯草芽孢杆菌菌液(调节活菌数为6.9×108CFU/mL)、450mL实施例1制备得到的解淀粉芽孢杆菌菌液(调节活菌数为7.2×108CFU/mL)、800mL实施例1制备得到的解纤维素芽孢杆菌菌液(调节活菌数为4×108CFU/mL)和350mL实施例1制备得到的酵母菌菌液(调节活菌数为1.5×109CFU/mL),上述菌液混合后，与19.6Kg麸皮混合，以1000r/min的转速搅拌13min后再于30℃下通风干燥至含水量为12％，得到复合微生物菌剂。
实施例5
取人鲜粪便3.6公斤，平均分成12份，每三份随机分为一组，共分为4组，分别置于可封闭的塑料培养皿中。其中三组分别加入实施例2～4制备得到的复合微生物菌剂50g并与粪便充分混合，另一组不加作为对照。各培养皿于室温(20～25℃)封闭培养3天后测定各皿内NH3和H2S浓度。具体结果如表1所示。
表1 不同处理后的NH3和H2S浓度
NH<sub>3</sub>(g/Kg) H<sub>2</sub>S(mg/Kg)
实施例2 0.026 4.9
实施例3 0.022 4.7
实施例4 0.020 4.0
对照组 0.093 25.8
由表1可以看出，添加本发明制备得到的复合微生物菌剂后，NH3和H2S浓度分别为0.020～0.026g/Kg和4.0～4.9mg/Kg，相较于对照组分别下降了72％～77％和81％～84％。实验结果表明：本发明制备得到复合微生物菌剂能够有效地降低NH3和H2S浓度，能够使粪便充分降解腐熟，并降低厕所臭味。
实施例6
将本发明实施例3制备得到的复合微生物菌剂按照每个厕位2公斤的投放量投放生态厕所的3个厕位的固体反应器中，经3个月运行后，厕所环境中无臭味，得到生物有机肥78公斤。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种厕所用复合微生物菌剂，其特征在于，为如下体积份的组分：氧化微杆菌菌液4～5份、假单胞菌菌液4～5份、土地戈登氏菌菌液2～3份、短状杆菌菌液2～3份、库克菌菌液1～2份、嗜温鞘氨醇杆菌菌液1～2份、鞘氨醇单胞菌菌液1～2份、巨大芽孢杆菌菌液2～3份、地衣芽孢杆菌菌液5～6份、枯草芽孢杆菌菌液5～6份、解淀粉芽孢杆菌粉4～5份、解纤维素芽孢杆菌菌液7～8份和酵母菌菌液2～4份；
所述氧化微杆菌菌液的活菌数为1～2×1088CFU/mL；所述假单胞菌菌液的活菌数为3～4×108CFU/mL；所述土地戈登氏菌菌液的活菌数为1～2×108CFU/mL；所述短状杆菌菌液的活菌数为1～2×108CFU/mL；所述库克菌菌液的活菌数为3～4×108CFU/mL；所述嗜温鞘氨醇杆菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述鞘氨醇单胞菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述巨大芽孢杆菌菌液的活菌数为3～4×108CFU/mL；所述地衣芽孢杆菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述枯草芽孢杆菌菌液的活菌数为5～8×108CFU/mL；所述解淀粉芽孢杆菌液的活菌数为5～8×108CFU/mL；所述解纤维素芽孢杆菌菌液的活菌数为3～5×108CFU/mL；所述酵母菌菌液的活菌数为1～2×109CFU/mL；
所述氧化微杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.7107；所述假单胞菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号：1.15316；所述土地戈登氏菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.15894；所述短状杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.838；所述库克菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.10539；所述嗜温鞘氨醇杆菌购自中国典型培养物保藏管理中心，菌株编号为：AB2010003T；所述鞘氨醇单胞菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.12824；所述巨大芽孢杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.7416；所述地衣芽孢杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.8791；所述枯草芽孢杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.9083；所述解淀粉芽孢杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.15674；所述解纤维素芽孢杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：1.15312；所述酵母菌购自中国农业微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为：20165。
2.根据权利要求1所述的复合微生物菌剂，其特征在于，为如下体积份的组分：氧化微杆菌菌液4.2～4.8份、假单胞菌菌液4.2～4.8份、土地戈登氏菌菌液2.2～2.8份、短状杆菌菌液2.2～2.8份、库克菌菌液1.2～1.8份、嗜温鞘氨醇杆菌菌液1.2～1.8份、鞘氨醇单胞菌菌液1.2～1.8份、巨大芽孢杆菌菌液2.2～2.8份、地衣芽孢杆菌菌液5.2～5.8份、枯草芽孢杆菌菌液5.2～5.8份、解淀粉芽孢杆菌粉4.2～4.8份、解纤维素芽孢杆菌菌液7.2～7.8份和酵母菌菌液2.5～3.5份。
3.根据权利要求1或2所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述氧化微杆菌菌液的活菌数为1.3～1.7×108CFU/mL；所述假单胞菌菌液的活菌数为3.2～3.8×108CFU/mL；所述土地戈登氏菌菌液的活菌数为1.3～1.7×108CFU/mL；所述短状杆菌菌液的活菌数为1.3～1.7×108CFU/mL；所述库克菌菌液的活菌数为3.2～3.8×108CFU/mL；所述嗜温鞘氨醇杆菌菌液的活菌数为3.5～4.5×108CFU/mL；所述鞘氨醇单胞菌菌液的活菌数为3.5～4.5×108CFU/mL；所述巨大芽孢杆菌菌液的活菌数为3.2～3.8×108CFU/m；所述地衣芽孢杆菌菌液的活菌数为3.5～4.5×108CFU/mL；所述枯草芽孢杆菌菌液的活菌数为6～7×108CFU/mL；所述解淀粉芽孢杆菌液的活菌数为6～7×108CFU/mL；所述解纤维素芽孢杆菌菌液的活菌数为3.5～4.5×108CFU/mL；所述酵母菌菌液的活菌数为1.3～1.7×109CFU/mL。
4.根据权利要求1或2所述的复合微生物菌剂，其特征在于，还包括载体，所述载体为麸皮、稻壳或木屑中的一种或多种。
5.根据权利要求4所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述氧化微杆菌菌液、假单胞菌菌液、土地戈登氏菌菌液、短状杆菌菌液、库克菌菌液、嗜温鞘氨醇杆菌菌液、鞘氨醇单胞菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液、解纤维素芽孢杆菌菌液和酵母菌菌液的总质量与载体的质量比为1:4～6。
6.根据权利要求1、2和5任意一项所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述氧化微杆菌菌液、假单胞菌菌液、土地戈登氏菌菌液、短状杆菌菌液、库克菌菌液、嗜温鞘氨醇杆菌菌液、鞘氨醇单胞菌菌液、巨大芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、解淀粉芽孢杆菌菌液、解纤维素芽孢杆菌菌液和酵母菌菌液的制备方法独立包括：
将氧化微杆菌、假单胞菌、土地戈登氏菌、短状杆菌、库克菌、嗜温鞘氨醇杆菌、鞘氨醇单胞菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、解纤维素芽孢杆菌和酵母菌独立扩大培养后离心得到上述菌液。
7.根据权利要求6所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述离心的转速为3000～5000r/min，离心的时间为5～15min。
8.权利要求1～7任意一项所述的复合微生物菌剂在处理厕所粪便中的应用，其特征在于，将所述复合微生物菌剂投入厕所进行除臭。
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