CN108850692A - 一种用于鱼类养殖的复合饵料 - Google Patents

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Abstract

一用于鱼类养殖的复合饵料，其特征是所述饵料，由固态发酵的基础日粮和枯草芽孢杆菌组成，所述枯草芽孢杆菌与未经固态发酵的基础日粮的比例为106～107CFU/g，未经固态发酵的基础日粮中含有重量百分比53％～58％的植物油粕和4％～6％的干豆渣，所述植物油粕由重量比为1：0.2～0.3：0.5～0.7的豆粕、花生粕和棉粕组成，所述固态发酵的基础日粮的制备方法为：1)将根霉和总状毛霉分别培养后制成至菌悬液；2)将植物油粕粉碎后，将总状毛霉菌悬液和根霉菌悬液分别以106～107CFU/g的比例与植物油粕和干豆渣充分混合，并调节含水量为35％～45％后，置于28℃～30℃下固态发酵24h～36h，将基础日粮其余组分与经固态发酵的植物油粕和干豆渣混合后，再置于24℃～26℃下固态发酵36h～48h。

Description

一种用于鱼类养殖的复合饵料
技术领域
本发明属于水产药物，具体的说涉及一种用于鲤科家鱼的复合饵料。
背景技术
在经济家鱼的养殖中，如何改进饵料，从而提高鱼体的生长性能成为现有新型饵料研制中的重点，然而，为了提高养殖的效益，并不能单纯提高饵料的生长性能，还需要提高鱼体的免疫力，以适应高密度的养殖环境和我国现有的参差不齐的养殖条件，同时可以减少抗生素等药物的使用。在饲料中添加益生菌或者对部分饲料成分进行生物发酵是现有的改进饵料的手段。如枯草芽孢杆菌等已经被批准作为饲料添加剂使用。此外，现有的饵料中作为蛋白质来与的主要物质为豆粕，然而我国的豆粕大量依赖进口，其价格波动较大。我国自产植物油粕如花生粕、棉粕等，尤其是棉粕由于抗营养因子含量较大，在鱼类养殖的应用收到限制。因此将现有的饲料改性手段综合优化，提供一种能够提高鱼体生长性能并能提高鱼体免疫力同时还能对棉粕在内的杂粕进行利用的新型饵料成为现有技术中亟待解决的问题。
发明内容
中国专利文献CN101508960A公开了一种根霉菌株(Rhizopus sp.B1219，CCTCCNO：M209007)并指出该菌株可以用于发酵生产苯基乳酸，中国专利文献CN104087511A公开了一总状毛霉菌株(Mucorracemosus，CGMCC No.8700)并指出其可以用于豆制品发酵，在研究中我们发现采用上述两种菌株对优选配比的基础日粮中的植物油粕和干豆渣进行固态发酵，不但能够提高鲫鱼等鲤科家鱼的生长性能，还能显著提高鱼体的免疫力。
基于此发现，本发明提供了一用于鱼类养殖的复合饵料，其特征是所述饵料，由固态发酵的基础日粮和枯草芽孢杆菌组成，所述枯草芽孢杆菌与未经固态发酵的基础日粮的比例为106～107CFU/g，未经固态发酵的基础日粮中含有重量百分比53％～58％的植物油粕和4％～6％的干豆渣，所述植物油粕由重量比为1：0.2～0.3：0.5～0.7的豆粕、花生粕和棉粕组成，所述固态发酵的基础日粮的制备方法为：
1)将根霉((Rhizopus sp.B1219，CCTCC NO：M209007))和总状毛霉(Mucorracemosus，CGMCC No.8700)分别培养后制成至菌悬液；
2)将植物油粕粉碎后，将总状毛霉菌悬液和根霉菌悬液分别以106～107CFU/g的比例与植物油粕充分混合，并调节含水量为35％～45％后，置于28℃～30℃下固态发酵24h～36h，将基础日粮其余组分与经固态发酵的植物油粕和干豆渣混合后，再置于24℃～26℃下固态发酵36h～48h。
所述的一种用于鱼类养殖的复合饵料，其特征是所述基础日粮由植物油粕、干豆渣、鱼粉、植物油、预混料、面粉和糠麸组成。所述糠麸为米糠和麦麸，所述植物油为豆油
所述鱼粉、植物油、预混料、面粉和糠麸的比例为6～8:3～5:0.7～1.3:12～18：12～18:1～1.5。所述糠麸为米糠和麦麸，所述植物油为豆油。
所述的一用于鱼类养殖的复合饵料，其特征是所述植物油粕由重量比为1：0.25:0.6的豆粕、花生粕和棉粕组成，所述干豆渣在未经发酵的基础日粮中所占重量百分比为5％。
所述的一用于鱼类养殖的复合饵料，其特征是所述鱼类优选鲤鱼、鲫鱼和罗非鱼。
本发明提供的一种用于鱼类养殖的复合饵料，通过配方和菌种筛选，采用了优选的菌种对特定配比的植物油粕及干豆渣进行固态发酵处理后，与常规加入枯草芽孢杆菌的饵料相比，在能够显著提高鲫鱼等鲤科家鱼的生长性能的基础上，还能显著提高鱼体的免疫力。在方案筛选中发现，虽然现有技术中认为在饵料中添加一定量的枯草芽孢杆菌可以提高鲫鱼等家鱼的生长性能和免疫力，但在筛选中我们意外的发现在饲料中添加特定的根霉与总状毛霉菌株并经优选条件的固态发酵后，再与一定量枯草芽孢杆菌混合，得到的饵料在提高鲫鱼等家鱼的生长性能的同时，还能显著提高其免疫力。改变菌种，大幅度改变基础日粮的配比或改变固态发酵条件均会对上述性能产生负面影响。
具体实施方式
本发明提供的一用于鱼类养殖的复合饵料，以如下方法配制，
1)取根霉菌株(Rhizopus sp.B1219，CCTCC NO：M209007)和总状毛霉菌株(Mucorracemosus，CGMCC No.8700)分别经PDA培养基培养后制成108CFU/g的菌悬液。
2)将植物油粕粉碎后，按照根霉107CFU/g和总状毛霉菌株(Mucorracemosus，CGMCC No.8700)107CFU/g的比例将分别将菌悬液与植物油粕干豆渣充分混合，并调节含水量为40％，置于28～30℃下固态发酵30h得到发酵植物油粕。
3)将基础日粮其余组分与经固态发酵的植物油粕和干豆渣混合后，再置于24℃～26℃下固态发酵36h～48h，
4)向步骤3)得到的发酵产物与基础日粮中的其余组分混合，并加入枯草芽孢杆菌菌剂，充分混合后将混合后物料压制成条状即得，枯草芽孢杆菌与基础日粮(不计菌悬液及后续加入水分)的比例为5×106CFU/g。
实施例及对比例配方见下表(配比均为重量份)
所述预混料采用北京博达生物饲料有限公司生产的鲤鱼1％预混料，每g预混料含有以下营养成分：
维生素A≥400IU，维生素D3100～300IU，维生素E≥7mg，维生素K3≥0.2mg，维生素B1≥0.3mg、维生素B2≥0.5mg、维生素B6≥0.22mg，烟酰胺≥2.5mg、泛酸钙≥2mg、叶酸≥0.2mg、维生素C≥8mg，肌醇≥7mg、铁8～75mg、铜0.875～2.5mg、锌7～20mg、锰2～10mg、碘≥0.03mg、硒0.01～0.05mg，钴0.01～0.2mg。
所述枯草芽孢杆菌菌剂采用乳山韩威生物科技有限公司生产的枯草芽孢杆菌粉剂(有效活菌数≥1010)
对比例1～3的根霉、总状毛霉接种量，固态发酵方法及枯草芽孢杆菌加入量与实施例相同。对比例1中豆粕和花生粕的重量比为1：0.25，对比例2中豆粕和棉粕的重量比为1:0.6。
对比例4
按照实施例5的配方和工艺，但仅加入总状毛霉不加入根霉。
对比例5
按照实施例5的配方和工艺，但仅加入根霉不加入总状毛霉。
对比例6
按照实施例5的配方和工艺。但在步骤3)加入干豆渣后不进行固态发酵。
对比例7
按照实施例5的基础日粮配方，不加入枯草芽孢杆菌，也不加入蓝色犁头霉进行固态发酵。
饲养效果对比例
试验塘为86cm×56cm×48cm的塑料池，试验鲫鱼先在试验塘内暂养，以对比例6(基础日粮)饵料投喂l周后开始正式试验。每天分别在09：00～10：00、16：30～17：00投喂1次，按试验鱼体重4.5％投喂饵料(按基础日粮计算投喂量)。饲养前用强氯精进行消毒。试验期间使用空气压缩24h不间断增氧：试验用水使用经曝气处理后的自来水，pH 6.8-7.5，溶氧8-10mg/L，水温20～24℃；硫化物、非离子氨、重金属Hg、Cd、Cu、Pb、As符合渔业水质标准(GBl1607-89)；每3d换水1次，每次换水1/3。连续饲养42d，检测正式饲养开始前后的鲫鱼体重变化(初、末体重)，增重率、血清SOD活力以及白细胞白细胞吞噬活性
增重倍数＝(平均末质量-平均初质量)/平均初质量
样品采集
每个实验组取鲫鱼5尾。用一次性无菌注射器分别于鱼尾部静脉抽血，将5尾鱼的血液充分混合后分为2份，其中l份以肝素抗凝，制备抗凝血，供检测白细胞吞噬活性；将另1份血液首先在室温下静置lh待其凝固，置4℃冰箱保持4h后，于4℃条件下以4000r/min离心10min，收集上层血清，保存在4℃冰箱中，备用。
血清SOD活力测定采用SOD试剂盒测定，方法参照试剂盒说明书进行。
白细胞吞噬活性测定
取每尾鱼的白细胞悬液25μL，细胞悬液中加入0.5mLHank’s液和100uL浓度为108cfu/mL的A hydrophila活菌液，混匀。置于25"C下孵育40min后，取出以2000r/min离心10min，以分离白细胞和胞外细菌，弃去上层液，下层即为吞噬细菌的细胞层，用Hank’S液洗涤两次后，加入1.mL 2％的Tween20水溶解细胞和lmL MEM，置于25℃温箱孵育16h。之后再加入90μLMTT(四甲基偶氮唑盐)溶液，轻度振荡15min后，用721分光光度计于600nm处比色，检测吸光度(A)。
分组及实验数据情况见下表(n＝5，means±s)：
实验结果表明，采用实施例1～5饵料饲喂的鲫鱼的生长性能显著高于各对比例(P＜0.05)，在各实施例中实施例5鲫鱼的增重率也明显高于实施例1～4。此外血清SOD检测和白细胞吞噬活性检测也表明，采用实施例1～5饵料饲喂的实验组1～5鲫鱼的血清SOD含量和白细胞吞噬活性均高于采用对比例的各实验组，说明实施例提供的饵料能够提高鲫鱼的免疫力。此外，在各对比例中，仅饲喂基础日粮的对比例7其增重率、血清SOD含量和白细胞吞噬活性免疫力均最低。对比例1～6的上述三项指标虽高于对比例6，但也低于个实验组，说明本发明优选的植物油粕配比和菌种、发酵工艺，产生的协同效果，能够明显提高实验鲫鱼的生长性能和免疫力。

Claims (3)

1.一用于鱼类养殖的复合饵料，其特征是所述饵料，由固态发酵的基础日粮和枯草芽孢杆菌组成，所述枯草芽孢杆菌与未经固态发酵的基础日粮的比例为106～107CFU/g，未经固态发酵的基础日粮中含有重量百分比53％～58％的植物油粕和4％～6％的干豆渣，所述植物油粕由重量比为1：0.2～0.3：0.5～0.7的豆粕、花生粕和棉粕组成，所述固态发酵的基础日粮的制备方法为：
1)将根霉((Rhizopus sp.B1219，CCTCC NO：M209007))和总状毛霉(Mucorracemosus，CGMCC No.8700)分别培养后制成至菌悬液；
2)将植物油粕粉碎后，将总状毛霉菌悬液和根霉菌悬液分别以106～107CFU/g的比例与植物油粕充分混合，并调节含水量为35％～45％后，置于28℃～30℃下固态发酵24h～36h，将基础日粮其余组分与经固态发酵的植物油粕和干豆渣混合后，再置于24℃～26℃下固态发酵36h～48h。
2.如权利要求1所述一用于鱼类养殖的复合饵料，所述基础日粮由植物油粕、干豆渣、鱼粉、植物油、预混料、面粉和糠麸组成。
3.如权利要求2所述的一用于鱼类养殖的复合饵料，其特征是所述糠麸为米糠和麦麸，所述植物油为豆油。
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