CN108835510A - 一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法 - Google Patents
一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108835510A CN108835510A CN201810738205.8A CN201810738205A CN108835510A CN 108835510 A CN108835510 A CN 108835510A CN 201810738205 A CN201810738205 A CN 201810738205A CN 108835510 A CN108835510 A CN 108835510A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rice
- cadmium
- rice protein
- woven fabric
- polypropylene non
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
- A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
- A23L5/27—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification by chemical treatment, by adsorption or by absorption
- A23L5/273—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification by chemical treatment, by adsorption or by absorption using adsorption or absorption agents, resins, synthetic polymers, or ion exchangers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/14—Vegetable proteins
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cereal-Derived Products (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法，属于食品加工技术领域。本发明结合除镉装置，利用聚丙烯无纺布负载对镉有吸附功能的植物乳杆菌，可以高效地脱除镉。本发明工艺流程操作简单，成本较低，能够有效的得到镉含量很低的大米蛋白，同时也适合大规模生产和推广。
Description
技术领域
本发明涉及一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法，属于食品加工技术领域。
背景技术
大米蛋白是一种高营养、低过敏性的优质谷物蛋白，有良好的氨基酸配比，含有人体所必须的八种氨基酸，非常适合作为老人、婴儿、病人的蛋白补充剂。它的主要成分为谷蛋白、球蛋白、清蛋白和醇溶蛋白。
近年来由于环境的污染，大米中所含的镉等重金属含量普遍偏高，导致现在大米蛋白镉含量严重超标。镉是毒性很强的重金属，当镉的含量超过1.0mg/kg时会严重危害人体的健康。镉很容易蓄积在人体的肾脏、骨组织、眼睛和其他器官和组织中，尤其是在肾脏和骨组织中的蓄积现象最为严重，可引发肾衰竭，易碎性骨折等疾病。
研究表明，大米蛋白中镉等重金属主要以和蛋白质络合的形式存在，而酸可以使重金属镉与蛋白络合的键断开，从而游离出镉。我国食品中镉限量卫生标准中规定大米制品中镉的量要小于等于0.2mg/kg，而目前以大米为原料制作的大米蛋白镉含量普遍超过1.0mg/kg，因此，大米蛋白中的镉超标已成为亟需解决的技术问题。
现有技术中，已有一些去除大米蛋白中镉的方法，如利用微生物发酵来降低大米蛋白中镉含量，该法除镉效果较好，但过程复杂，稳定性不佳，后续分离纯化繁琐；将蛋白水解液调节pH，通过强酸型阳离子交换树脂柱吸附置换来降低镉含量，该法成本较高，对操作要求也较高，难以实现规模化生产；还有些将大米蛋白通过化学试剂和盐酸等处理达到降低镉含量的目的，虽然效果较好，但会影响大米蛋白的品质，难以满足大米蛋白商品的要求。
发明内容
本发明提供了一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法，所述方法主要包括以下步骤：
(1)在常温下，将镉含量超标的大米在0.01～0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡8～10h，固液比为1:(6～8)(g/L)，浸泡过程中在微波功率为3±1W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热3～5s，停止加热45～60s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用食用酸将上清pH调节到6.5-7.0，使大米蛋白沉淀，静置30～60min后离心，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：(2.5～3)，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30～35％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，50～100rpm下搅拌3～4h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，200-300rpm下搅拌30-60min后滤去液体，重复2-3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7-9％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4-6m3/h，进水量为0.5-1.0m3/h。
步骤(3)中米浆的离心条件为：8000rpm，离心10min。
步骤(3)所述食用酸包括柠檬酸、乳酸、醋酸。
步骤(6)之后还包括将灭菌的样品进行脱水、干燥，得到大米蛋白成品。
所述除镉装置中的聚丙烯无纺布的纤维直径在微米级别，聚丙烯无纺布克重为15—50g/m2、聚丙烯无纺布的纤维外径为2.5—10.8μm、微孔孔径约0.05—1.9μm、孔隙率约30—80％。
所述负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体，是取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，灭菌，将植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无菌无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
所述除镉装置中的聚丙烯无纺布球体自然堆放。
本发明的有益效果
(1)本发明在常温下对含镉大米进行浸泡软化，避免了高温浸泡的能耗；浸泡过程中辅以合适的微波加热方式，能够促进镉的脱除；
(2)本发明结合除镉装置，利用聚丙烯无纺布负载对镉有吸附功能的植物乳杆菌，可以高效地脱除镉，同时避免了传统的反复调pH来溶出镉元素的复杂步骤；植物乳杆菌是一种益生菌，少量进入大米蛋白粉的菌体在后续灭菌过程中将被灭活，不影响食用，是一种环保安全的方法；
(3)本发明除镉装置中的不锈钢桶、聚丙烯无纺布球体均可以反复利用，节省成本；
(4)本发明对镉的去除率极好，可以将镉的含量降低到0.02mg/kg以下；远低于现有的水平；
(5)本发明工艺流程操作简单，成本较低，能够有效的得到镉含量很低的大米蛋白，同时也适合大规模生产和推广。
具体实施方式
检测大米蛋白中镉含量的方法：采用湿法消解法：称取1.0-2.0g大米蛋白样品置于锥形瓶中，加盖小漏斗，加入体积比为5:1的硝酸高氯酸混合消化液15mL，于电热板上缓慢加热，反应趋于缓和后，加入1mL过氧化氢，继续加热消化直至溶液澄清，冷却后转移至25mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀静置，上石墨炉原子吸收光谱仪测定，同时做试剂空白。
石墨炉原子吸收光谱仪测定条件：波长228.8nm，狭缝0.5-1.0nm，灯电流8-10mA，干燥温度120℃，20s；灰化温度350℃，15-20s，原子化温度1700-2300℃，4-5s，背景矫正为氘灯。
MRS培养基：酪蛋白胨10.0g，牛肉浸取物10.0g，酵母提取液5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸二胺2.0g，吐温80 1.0g，磷酸氢二钾2.0g，七水硫酸镁0.2g，七水硫酸锰0.05g，碳酸钙20.0g，蒸馏水1.0L，pH6.8。
实施例1
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养2次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.01mol/L氢氧化钠溶液中浸泡8h，固液比为1:6(g/L)，浸泡过程中在微波功率为3W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热3s，停止加热60s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到6.5，使大米蛋白沉淀，静置60min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：2.5，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，50rpm下搅拌3h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，200rpm下搅拌30min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.5m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。大米蛋白的镉含量为0.024mg/kg。
实施例2
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养3次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡9h，固液比为1:7(g/L)，浸泡过程中在微波功率为4W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热5s，停止加热50s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到7.0，使大米蛋白沉淀，静置50min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：2.5，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，70rpm下搅拌4h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，250rpm下搅拌40min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.5m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。大米蛋白的镉含量为0.019mg/kg。
实施例3
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养2次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.01～0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡8～10h，固液比为1:8(g/L)，浸泡过程中在微波功率为3W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热5s，停止加热60s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到7.0，使大米蛋白沉淀，静置30min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：3，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的35％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，50rpm下搅拌3h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，200rpm下搅拌40min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为9％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为6m3/h，进水量为1.0m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。大米蛋白的镉含量为0.020mg/kg。
实施例4
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养2次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.02mol/L氢氧化钠溶液中浸泡8h，固液比为1:(6～8)(g/L)，浸泡过程中在微波功率为3±1W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热5s，停止加热50s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到6.5，使大米蛋白沉淀，静置30min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：3，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的35％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，60rpm下搅拌3h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，220rpm下搅拌45min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.8m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。大米蛋白的镉含量为0.022mg/kg。
实施例5
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养2次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.01mol/L氢氧化钠溶液中浸泡10h，固液比为1:6(g/L)，浸泡过程中在微波功率为3W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热3s，停止加热50s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到6.8，使大米蛋白沉淀，静置35min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：3，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的33％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，50rpm下搅拌3h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，250rpm下搅拌40min后滤去液体，重复2次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.5m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。大米蛋白的镉含量为0.022mg/kg。
实施例6
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养2次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.01～0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡8～10h，固液比为1:7(g/L)，浸泡过程中在微波功率为4W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热3s，停止加热45s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到7.0，使大米蛋白沉淀，静置45min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：3，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，80rpm下搅拌3.5h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，300rpm下搅拌30min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为9％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为6m3/h，进水量为1.0m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。大米蛋白的镉含量为0.020mg/kg。
对比例1
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养3次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡9h，固液比为1:7(g/L)；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到7.0，使大米蛋白沉淀，静置50min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：2.5，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，70rpm下搅拌4h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，250rpm下搅拌40min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.5m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。结果表明，省略微波加热的步骤后，大米蛋白的镉含量为0.17mg/kg。
对比例2
A植物乳杆菌的培养：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养3次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡9h，固液比为1:7(g/L)，浸泡过程中在微波功率为3W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热1s，停止加热40s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到7.0，使大米蛋白沉淀，静置50min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：2.5，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，70rpm下搅拌4h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，250rpm下搅拌40min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.5m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。调整微波加热的条件，大米蛋白的镉含量变为0.19mg/kg。
对比例3
A植物乳杆菌的培养：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养3次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡9h，固液比为1:7(g/L)，浸泡过程中在微波功率为3W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热6s，停止加热60s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到7.0，使大米蛋白沉淀，静置50min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：2.5，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，70rpm下搅拌4h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，250rpm下搅拌40min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.5m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。调整微波加热的条件，大米蛋白的镉含量为0.49mg/kg。
对比例4
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养3次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡9h，固液比为1:7(g/L)，浸泡过程中在微波功率为4W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热5s，停止加热50s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到7.0，使大米蛋白沉淀，静置50min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：2，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，70rpm下搅拌4h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，250rpm下搅拌40min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.5m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。调整不锈钢桶的高径比为1：2后，脱镉效率有所下降，大米蛋白的镉含量为0.074mg/kg。
对比例5
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养3次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡9h，固液比为1:7(g/L)，浸泡过程中在微波功率为4W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热5s，停止加热50s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到7.0，使大米蛋白沉淀，静置50min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：2，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，70rpm下搅拌4h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，250rpm下搅拌40min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.5m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。调整不锈钢桶的高径比为1：5后，脱镉效率也有所下降，大米蛋白的镉含量为0.151mg/kg。
对比例6
A负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体的制备：
将冷冻保存的植物乳杆菌接种于MRS培养基中，37℃下培养24h，再经MRS培养液传代培养3次后，按2％(V/V)的接种量接种于液体MRS中培养18h得到种子液。
取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，121℃灭菌20min。植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，取出聚丙烯无纺布球体，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
B制备除镉大米蛋白
(1)在常温下，将镉含量超标(1.5mg/kg)的大米在0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡9h，固液比为1:7(g/L)，浸泡过程中在微波功率为4W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热5s，停止加热50s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用柠檬酸、乳酸、醋酸将上清pH调节到7.0，使大米蛋白沉淀，静置50min后，8000rpm离心10min，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：2.5，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的20％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，70rpm下搅拌4h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，250rpm下搅拌40min后滤去液体，重复3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4m3/h，进水量为0.5m3/h。
(7)将步骤(6)得到的样品烘干，检测样品中镉含量。缩小聚丙烯无纺布球体的直径，脱镉效率有所下降，大米蛋白的镉含量为0.108mg/kg，可能是过小的聚丙烯无纺布球体在搅拌过程中运动幅度太大，植物乳杆菌容易脱落。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
Claims (8)
1.一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：
(1)在常温下，将镉含量超标的大米在0.01～0.03mol/L氢氧化钠溶液中浸泡8～10h，固液比为1:(6～8)(g/L)，浸泡过程中在微波功率为3±1W/g的功率下采用间歇式加热的方式对物料进行加热，加热3～5s，停止加热45～60s，此为一个周期；
(2)将经过步骤(1)处理过的大米湿磨成浆，磨浆后的颗粒小于100μm；
(3)将步骤(2)得到的米浆离心，得到沉淀即为大米淀粉，上清液为大米蛋白；用食用酸将上清pH调节到6.5-7.0，使大米蛋白沉淀，静置30～60min后离心，离心所得沉淀即为大米蛋白粉；
(4)利用除镉装置对大米蛋白粉进行除镉，所述除镉装置为圆柱形的不锈钢桶，高径比为1：(2.5～3)，不锈钢桶内放置有负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体；所述聚丙烯无纺布球体是中空的，通过不锈钢丝网定型，聚丙烯无纺布球体的直径为不锈钢桶高的30～35％；将步骤(3)得到的大米蛋白粉过胶体磨两遍，磨浆后的浆液的颗粒小于20μm，将所得浆液放入除镉装置中，50～100rpm下搅拌3～4h；搅拌结束后，将聚丙烯无纺布球体取出；
(5)将步骤(4)处理过的大米蛋白粉溶于清水，200-300rpm下搅拌30-60min后滤去液体，重复2-3次；
(6)将步骤(5)得到的样品用水调整料液质量浓度为7-9％，用旋流设备进行除杂，得到的样品置于灭菌锅中进行灭菌处理；旋流设备的进料量为4-6m3/h，进水量为0.5-1.0m3/h。
2.根据权利要求1所述的一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法，其特征在于，步骤(3)中米浆的离心条件为：8000rpm，离心10min。
3.根据权利要求1或2所述的一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法，其特征在于，步骤(3)所述食用酸包括柠檬酸、乳酸、醋酸。
4.根据权利要求1～3任一所述的一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法，其特征在于，所述除镉装置中的聚丙烯无纺布的克重为15—50g/m2、聚丙烯无纺布的纤维外径为2.5—10.8μm、微孔孔径0.05—1.9μm、孔隙率30—80％。
5.根据权利要求1所述的一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法，其特征在于，所述负载了植物乳杆菌的聚丙烯无纺布球体，是取克重为20g/m2的聚丙烯熔喷无纺布，灭菌，将植物乳杆菌种子液按照3％的接种量接入MRS液体培养基，于37℃，培养1h之后放入无菌无纺布并使其浸没在培养液中，继续吸附培养1h，在生理盐水中放置1min，取出即可备用。
6.根据权利要求1所述的一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法，其特征在于，所述除镉装置中的聚丙烯无纺布球体自然堆放。
7.根据权利要求1～6任一所述方法制备得到的大米蛋白。
8.应用权利要求7所述大米蛋白制备得到的蛋白补充剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810738205.8A CN108835510A (zh) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | 一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810738205.8A CN108835510A (zh) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | 一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108835510A true CN108835510A (zh) | 2018-11-20 |
Family
ID=64200414
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810738205.8A Pending CN108835510A (zh) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | 一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108835510A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101554211A (zh) * | 2009-01-05 | 2009-10-14 | 王艺瑾 | 超临界多元流体精制稻米工艺及工业装置 |
| CN103340414A (zh) * | 2013-07-12 | 2013-10-09 | 普洱永吉生物技术有限责任公司 | 一种大米蛋白的除镉方法 |
| CN104585563A (zh) * | 2015-01-12 | 2015-05-06 | 湖南农业大学 | 一种利用复配乳酸菌发酵脱除大米中重金属镉的方法 |
| CN104663933A (zh) * | 2015-02-17 | 2015-06-03 | 杭州艺福堂茶业有限公司 | 一种免洗茶加工工艺 |
| CN106472807A (zh) * | 2015-08-31 | 2017-03-08 | 哈尔滨鑫红菊食品科技有限公司 | 一种去除重金属的采用大米加工蛋白粉的工艺流程 |
| CN107410869A (zh) * | 2017-08-21 | 2017-12-01 | 湖南农业大学 | 利用罗伊氏乳杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌混合发酵消减大米粉中重金属镉的方法 |
-
2018
- 2018-07-06 CN CN201810738205.8A patent/CN108835510A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101554211A (zh) * | 2009-01-05 | 2009-10-14 | 王艺瑾 | 超临界多元流体精制稻米工艺及工业装置 |
| CN103340414A (zh) * | 2013-07-12 | 2013-10-09 | 普洱永吉生物技术有限责任公司 | 一种大米蛋白的除镉方法 |
| CN104585563A (zh) * | 2015-01-12 | 2015-05-06 | 湖南农业大学 | 一种利用复配乳酸菌发酵脱除大米中重金属镉的方法 |
| CN104663933A (zh) * | 2015-02-17 | 2015-06-03 | 杭州艺福堂茶业有限公司 | 一种免洗茶加工工艺 |
| CN106472807A (zh) * | 2015-08-31 | 2017-03-08 | 哈尔滨鑫红菊食品科技有限公司 | 一种去除重金属的采用大米加工蛋白粉的工艺流程 |
| CN107410869A (zh) * | 2017-08-21 | 2017-12-01 | 湖南农业大学 | 利用罗伊氏乳杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌混合发酵消减大米粉中重金属镉的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 王蕾，等: "微生物法削减大米粉中镉的工艺研究及品质分析", 《武汉轻工大学学报》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109875009A (zh) | 一种臭黄荆叶果冻的制备方法 | |
| WO2020042557A1 (zh) | 一种从西瓜中提取瓜氨酸的方法 | |
| CN110122886A (zh) | 一种柑橘膳食纤维的制备方法 | |
| CN111733472A (zh) | 氧化石墨烯与黑色素组成的复合材料及其制备方法和用途 | |
| CN104745664A (zh) | 一种动物胎盘提取物的制备工艺 | |
| CN111978417B (zh) | 一种大麻多糖的提取方法及其产品和应用 | |
| CN108835510A (zh) | 一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法 | |
| CN110407956A (zh) | 一种低温速溶琼脂及其制备方法 | |
| JPH0577681B2 (zh) | ||
| CN103936639A (zh) | 一种利用毛发提取胱氨酸的生产工艺 | |
| CN108575922A (zh) | 桑蚕喂食纳米CaCO3制备多肽螯合钙和高强度蚕丝的方法 | |
| CN102133231B (zh) | 鲨鱼软骨制备的补钙和促进软骨代谢发育的产品及其制法 | |
| CN108888806B (zh) | 基于鱼皮胶原聚集体的骨诱导性材料及其制备方法和用途 | |
| CN105907824A (zh) | 一种以食用豆粕为原料生产糖肽的方法 | |
| CN114031695B (zh) | 一种具有抗肿瘤功效的高纯度鲨鱼硫酸软骨素的制备工艺 | |
| CN115093921A (zh) | 一种用于保健酒的中药提取物的制备方法 | |
| CN112876396B (zh) | 一种利用旋转陶瓷膜设备制备浓缩胡萝卜素的方法 | |
| CN109156704A (zh) | 一种去除大米蛋白中镉的方法 | |
| CN114159422B (zh) | 一种含镁水溶性欧米伽3脂肪酸在促进小肠吸收能力中的应用 | |
| CN109438584B (zh) | 一种具有淀粉酶抑制活性基团的抗性淀粉的制备方法及应用 | |
| CN107674904A (zh) | 苦瓜活性肽、组合物及制备方法 | |
| CN114560927A (zh) | 亚临界水提辅助鱼鳞生产胶原蛋白肽的方法及其应用 | |
| CN107893095A (zh) | 一种海洋来源蛋白制备高f值寡肽的方法 | |
| CN108850422A (zh) | 一种以含镉大米为原料制备大米蛋白的方法 | |
| CN107400175A (zh) | 一种高纯度桃胶的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20191121 Address after: 410600 room 1502, Chuangye building, Jinzhou Avenue, Chengjiao street, Ningxiang City, Changsha City, Hunan Province Applicant after: Hunan Diandao Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 421800 Dongjiang Industrial Park, Leiyang Economic Development Zone, Hunan 1, China Applicant before: HUNAN HUISHENG BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20181120 |