CN108815304A - 一种增强免疫力的中草药剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种提高免疫力的中草药剂,主要由以下重量份的原料制成:大鲵肉33‑37份、枸杞子7‑11份、桔梗8‑12份、甘草10‑15份、鸡内金2‑5份。其制备方法是先将除大鲵肉和鸡内金意外的中草药用乙醇水溶液渗漉提取,过滤,药渣再经水高压提取,合并提取液,减压浓缩得中草药浓缩提取液;将大鲵肉蒸煮后与金内金粉碎,酶解得可溶性大鲵酶解液;将中草药浓缩提取液和可溶性大鲵酶解液混合,杀菌,灌装即成。本发明利用中医君臣佐使的组方原则,使药物达到理想的增强免疫力效果,从而大大提高药物增强免疫力的功效。
Description
技术领域
本发明属于中医药技术领域,具体是一种增强免疫力的中草药制品、保健品及其制备方法。
背景技术
免疫力是人体自身的防御机制,是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等),处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。各种原因使免疫系统不能正常发挥保护作用,在此情况下,极易招致细菌、病毒、真菌等感染,因此免疫力低下最直接的表现就是容易生病。因经常患病,加重了机体的消耗,所以一般有体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现,生病、打针吃药便成了家常便饭。每次生病都要很长时间才能恢复,而且常常反复发作。长此以往会导致身体和智力发育不良,还易诱发重大疾病。目前,用于提高人体免疫力的药品和保健品种类繁多,中国专利申请公开的一种“一种增强机体免疫力的中药保健品及其制”(201710666902.2),由鹿茸、沙棘、黄精、玉竹、黄芪、白术、防风、蛹、 西洋参、丹参、槐花、枸杞子、山楂按一 定比例进行组方制成,能够起到增强免疫力的作用。
大鲵又被叫做娃娃鱼,属两栖纲有尾目,隐鳃鲵科大鲵属,是世界上最大的两栖动物,是一种处于水生到陆生之间的过渡物种大鲵几乎是和恐龙同一个时代的物种,进化十分原始,被称为“活化石”, 为我国的珍稀、濒危物种,属于国家二级保护动物,已被列入濒危野生动植物种国际贸易公约(CITES)附录I中。国家批准大鲵(娃娃鱼)子二代可以进行经营和开发利用。而对于大鲵的深度研究技术中,大鲵的食用价值和功效已经得到证实和应用,并且已经有大量的文献将大鲵的相关部位,如肉、骨头研磨成粉后,加入到中药材粉剂中进行配合制作成治疗某种疾病的制剂,如CN201410125185.9公开的“一种治疗乙型肝炎的大鲵中药复方制剂”,通过大鲵粉与中药材粉末进行混合后,配制成治疗乙型肝炎的复方制剂。现代科学研究证明,大鲵体内含有50多种天然活性物,能够促进人体生理活性,改善人体生理代谢水平,促进人体蛋白质合成,提高人体免疫功能,增强抗病能力。但仅靠食用大鲵增强人体免疫力的作用毕竟有限,其与其它中草药配合将会有更好的提高人体免疫力的功效。而在有现技术中,将大鲵与中药材组合制作成增强免疫力的药品或保健品未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高免疫力的重要组合物,其以大鲵肉配以中草药制成,具有很好的提高人体免疫力的作用。
为实现上述目的,本发明的实施方案为:一种增强免疫力的中草药剂,主要由以下重量份的原料制成:大鲵肉33-37份、枸杞子7-11份、桔梗8-12份、甘草10-15份、鸡内金2-5份。
作为优化的实施方式,该增强免疫力的大鲵中药组合物,由以下重量份的原料制成:大鲵肉35份、枸杞子9份、桔梗10份、甘草12份、鸡内金3份。
本发明的制备方法包括以下步骤:
(1)称取除大鲵肉和鸡内金意外的中草药,分别清洗、晾干、粉碎后合并,投入至渗滤器中,加入15-18倍重量的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得中草药渗漉提取液和中草药渗漉提取残渣;
(2)将中草药渗漉提取残渣加入5-7倍重量的水,投入至高压锅中,高压煎煮20-30min,过滤,获得中草药高压提取液和中草药高压提取残渣;
(3)将中草药渗漉提取液和中草药高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的10-15%,获得中草药浓缩提取液;
(4)将大鲵肉清洗、切段,蒸煮30—45分钟,然后取出冷却至室温;
(5)将蒸煮后的大鲵肉和鸡内金用绞肉机进行粗绞,然后细磨至20-40μm;
(6)将细磨后大鲵肉和鸡内金加水放入生化反应罐中,加热至95-100℃,保温15—25分钟,然后冷却至45—55℃,调整浆液pH值为7—9,加入浆液重量2—3‰的蛋白酶酶解10-15小时;
(7)酶解完成后,加热至90-95℃,保温进行灭菌处理,冷却后离心分离除去殘渣,取上清液制成可溶性酶解液;
(8)将可溶性酶解液和步骤(3)所得中草药浓缩提取液混合均匀,过滤,杀菌、灌装;
将步骤(8)所得混合液,喷雾干燥,将所得药物颗粒分量包装即得颗粒剂;将所得药物颗粒装入胶囊,即得胶囊剂;将所得药物可以通过与淀粉等药物载体压制成片,可得片剂。
本发明还可与其它药物载体制成其它各种剂型。所述药物载体是药学上可接受的溶剂、悬浮剂或赋形剂。载体可以是液体或固体。
作为优化,步骤(1)中,乙醇水溶液的乙醇浓度为60-90%。
作为优化,步骤(3)中,高压煎煮的压力为70-80kP。
作为优化,步骤(6)中,酶解最佳条件为:温度50℃,pH值7.5,加酶量为浆液重量的2.5‰,酶解时间12小时。
本发明还提供一种上述中药制剂在制备具有免疫功效的保健品或食品方面的应用。
本发明利用中医君臣佐使的组方原则,使药物达到理想的增强免疫力效果。其中有补气、养血、益智、滋补、强壮之功效,为君药;枸杞子具有精明目的作养阴补血、滋补肝肾、益用,为臣药;桔梗具有宣肺祛痰、利咽排脓的功效,特别具有良好的抗炎和降血糖功能,为佐药;鸡内金健胃消食,涩精止遗,其与桔梗同为佐药;甘草补脾益气,清热解毒,并具有调和诸药的作用,为使药。上述药物配合,协同作用,可以大大提高药物增强免疫力的功效。
具体实施方式
下面结合实施详细说明本发明。
实施例1:一种增强免疫力的大鲵中药组合物,由以下配比的原料和方法制成:
(1)首先称取以下原料:大鲵肉35kg、枸杞子9客观、桔梗10kg、甘草12kg、鸡内金3kg;
(2)将枸杞子、桔梗和甘草,分别清洗、晾干、粉碎后合并,投入至渗滤器中,加入15-18倍重量的浓度为85%的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得中草药渗漉提取液和中草药渗漉提取残渣;
(3)将渗漉提取残渣加入5-7倍重量的水,投入至高压锅中,高压煎煮25min(压力80kP),过滤,获得中草药高压提取液和中草药高压提取残渣;
(4)将中草药渗漉提取液和中草药高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的10%,获得中草药浓缩提取液;
(5)将大鲵肉清洗、切段,蒸煮40分钟,然后取出冷却至室温;将蒸煮后的富硒大鲵肉和鸡内金用绞肉机进行粗绞,然后细磨至20-40μm;
(6)将细磨后富硒大鲵肉和鸡内金加水放入生化反应罐中,加热至95-100℃,保温20分钟,然后冷却至50℃,调整浆液PH值为8,加入浆液重量2.5‰的蛋白酶进行12小时的酶解;
(7)酶解完成后,加热至95℃,保温进行灭菌处理,冷却后送入离心分离机除去殘渣,取上清液制成可溶性酶解液;
(8)将可溶性酶解液和步骤(4)所得中草药浓缩提取液,混合均匀后送入双联过滤器过滤、搅拌均匀,然后杀菌、灌装即成。
实施例2:一种增强免疫力的大鲵中药组合物,由以下配比的原料和方法制成:
(1)大鲵肉33kg、枸杞子11kg、桔梗8kg、甘草15kg、鸡内金2kg;
(2)将枸杞子、桔梗和甘草,分别清洗、晾干、粉碎后合并,投入至渗滤器中,加入550kg浓度为90%的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得中草药渗漉提取液和中草药渗漉提取残渣;
(3)将中草药渗漉提取残渣加入200kg的水,投入至高压锅中,高压煎煮25min,过滤,获得中草药高压提取液和中草药高压提取残渣;
(4)将渗漉提取液和高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的10%,获得中草药浓缩提取液;
(5)将大鲵肉清洗、切段,蒸煮40分钟,然后取出冷却至室温;将蒸煮后的富硒大鲵肉和鸡内金用绞肉机进行粗绞,然后细磨至20-40μm;
(6)将细磨后富硒大鲵肉和鸡内金加水放入生化反应罐中,加热至95-100℃,保温20分钟,然后冷却至50℃,调整浆液PH值为8,加入浆液重量2.5‰的蛋白酶进行12小时的酶解;
(7)酶解完成后,加热至95℃,保温进行灭菌处理,冷却后送入离心分离机除去殘渣,取上清液制成可溶性酶解液;
(8)将可溶性酶解液和步骤(4)所得中草药浓缩提取液,混合均匀后,喷雾干燥,分量包装,制得增强免疫力的中草药颗粒剂。
实施例3:一种增强免疫力的大鲵中药组合物,由以下配比的原料和方法制成:
(1)称取以下原料:大鲵肉37份、枸杞子7份、桔梗12份、甘草10份、鸡内金5份。
(2)将枸杞子、桔梗和甘草,分别清洗、晾干、粉碎后合并,投入至渗滤器中,加入500kg浓度为90%的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得中草药渗漉提取液和中草药渗漉提取残渣;
(3)将中草药渗漉提取残渣加入180kg的水,投入至高压锅中,高压煎煮25min,过滤,获得中草药高压提取液和中草药高压提取残渣;
(4)将中草药渗漉提取液和中草药高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的10%,获得中草药浓缩提取液;
(5)将大鲵肉清洗、切段,蒸煮40分钟,然后取出冷却至室温;将蒸煮后的富硒大鲵肉和鸡内金用绞肉机进行粗绞,然后细磨至20-40μm;
(6)将细磨后富硒大鲵肉和鸡内金加水放入生化反应罐中,加热至95-100℃,保温20分钟,然后冷却至50℃,调整浆液PH值为7.5,加入浆液重量3‰的蛋白酶进行12小时的酶解;
(7)酶解完成后,加热至95℃,保温进行灭菌处理,冷却后送入离心分离机除去殘渣,取上清液制成可溶性酶解液;
(8)将可溶性酶解液和步骤(4)所得中草药浓缩提取液,混合均匀后,喷雾干燥,装入胶囊,制得增强免疫力的中草药胶囊剂。
实施例4:
药效学试验,观察本发明含药血清对 SAMP8 小鼠脾淋巴细胞免疫功能影响。
1.实验材料
动物:SPF级昆明小鼠,5~6 月龄。药物:本发明实施例1所制备的中草药剂。
2.实验方法
2.1含药血清制备:取20只小鼠随机分成2组,每组 10 只,每组分别以本发明实施例1提供的中草药剂和生理盐水灌胃,每日 20ml·kg -1,每日一次,连续给药 14 次,末次灌胃2小时后眼球摘除取血,分别标记,室温下静置至待血液分层,移至4℃冰箱内放置1小时,离心, 收集血清,将同组血清混合均匀后热水浴灭活,微孔滤器过滤,除菌后分装,-80℃下保存。
2.2小鼠脾脏淋巴细胞悬液的制备:将小鼠处死后浸泡在80%的酒精中5分钟,在培养皿中加入4mL小鼠淋巴细胞分离液,将尼龙膜放置于培养皿上,取出小鼠脾脏放置于尼龙膜上,研磨脾脏。将培养皿内的液体吹匀,转移至离心管中,沿管壁缓慢加入400μL 的RPMI-1640培养液形成界面,1500rpm离心45分钟,吸取液体中部云雾状淋巴细胞,移至另一个离心管中,并加入RPMI-1640培养液至10mL,1500rmp离心10分钟。离心后弃上清液,沉淀中加1mL RPMI-1640培养液,吹匀重悬,得到小鼠脾淋巴细胞悬液,用生理盐水稀释后计数。
2.3检测ConA诱导脾脏淋巴细胞增殖能力: 取小鼠脾淋巴细胞悬液,调整细胞浓度为5×106个/mL,加入96孔板中,每孔50μL。将各组含药血清以含10%胎牛血清的完全培养液稀释至最佳培养浓度40%, 将稀释后的最佳浓度含药血清及含10%牛血清的完全培养液分别加入到小鼠的脾淋巴细胞悬液中,每孔50μL,每组10个复孔,其中5孔加100μL ConA(浓度为20μg/mL),5个孔 不加 CnoA。设只加入完全RPMI-1640培养液的空白对照孔。将96孔板放入CO2培养箱中培养 72小时。培养结束前4小时向各孔中加入20μLMTT(浓度为 5mg/mL),继续放入培养箱中孵育4小时。培养结束后每孔加入10% SDS 100μL吹匀,37℃过夜。第二日用酶标仪570nm处检测 吸光度值,并用完全培养液的空白对照孔调零,结果以OD值表示,刺激指数=ConA实验孔OD 值/无ConA对照孔OD值。
2.4检测培养上清液中IL-2、IFN-γ含量。将ELISA检测试剂盒取出,使试剂平衡至室温。溶解稀释标准品及配制其他工作液,标准品浓度梯度为:500pg/ mL、250pg/mL、125pg/mL、62 .5pg/mL、31 .3pg/mL、15 .6pg/mL、7 .8pg/mL。将每个浓度标准品 依次加入标准品孔,每孔100μL,将各组细胞培养上清液加入样品孔,每孔100μL,设置空白 对照孔。加入检测抗体每孔50μL,混匀后盖上封板膜,37℃恒温温育90分钟。扣去96孔板内 液体,并在滤纸上轻轻拍干。加入洗液每孔300μL,1分钟后弃去板内液体并拍干,重复洗板4 次。加入每孔100μL稀释后的Streptavidin-HRP,贴上封膜,置于37℃恒温温育箱内30分钟。 洗板5次后加入显色液每孔100μL,37℃避光温育5-30分钟之间,根据孔内颜色的深浅(深蓝 色)来判定终止反应。最后迅速加入每孔100μL终止液终止反应。终止后10分钟内,用酶标仪 在波长450nm处读值。
2.5.统计处理:所得数据以X±S表示,均用SPSS 21软件进行处理。组间比较在检验方差齐性后采 用单因素方差分析,P<0.05为有统计学意义。
3.实验结果
3.1 含药血清对ConA诱导的SAMP8小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力的影响。
如表1所示,本发明含药血清组与空白血清组相比较,自身增殖、 ConA诱导增殖能力和刺激指数均有提升(P<0.05),差异有统计学意义。
3.2含药血清对小鼠脾脏淋巴细胞培养上清液中IL-2、IFN-γ含量的影响
如表2所示,与空白血清组比较含该增强免疫力保健品含药血清组的IL-2 和IFN- γ分泌量均明显升高(P<0.05)。
4、结论
实验表明,本发明提供的增强免疫力的中草药剂含药血清能增强小鼠脾脏淋巴细胞的体外增殖能力,促进IL-2及IFN-γ的分泌,促 进SAMP8小鼠脾淋巴细胞增殖活化,改善SAMP8 小鼠衰老时脾淋巴细胞的免疫功能。
Claims (10)
1.一种增强免疫力的中草药剂,其特征在于,主要由以下重量份的原料制成:大鲵肉33-37份、枸杞子7-11份、桔梗8-12份、甘草10-15份、鸡内金2-5份。
2.根据权利要求1所述的增强免疫力的中草药剂,其特征在于,由以下重量份的原料制成:大鲵肉35份、枸杞子9份、桔梗10份、甘草12份、鸡内金3份。
3.一种如权利要求1所述的增强免疫力的中草药剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)称取除大鲵肉和鸡内金意外的中草药,分别清洗、晾干、粉碎后合并,投入至渗滤器中,加入15-18倍重量的乙醇水溶液进行渗漉提取,获得中草药渗漉提取液和中草药渗漉提取残渣;
(2)将中草药渗漉提取残渣加入5-7倍重量的水,投入至高压锅中,高压煎煮20-30min,过滤,获得中草药高压提取液和中草药高压提取残渣;
(3)将中草药渗漉提取液和中草药高压提取液合并,减压蒸发浓缩为原体积的10-15%,获得中草药浓缩提取液;
(4)将大鲵肉清洗、切段,蒸煮30—45分钟,然后取出冷却至室温;
(5)将蒸煮后的大鲵肉和鸡内金用绞肉机进行粗绞,然后细磨至20-40μm;
(6)将细磨后大鲵肉和鸡内金加水放入生化反应罐中,加热至95-100℃,保温15—25分钟,然后冷却至45—55℃,调整浆液pH值为7—9,加入浆液重量2—3‰的蛋白酶酶解10-15小时;
(7)酶解完成后,加热至90-95℃,保温进行灭菌处理,冷却后离心分离除去殘渣,取上清液制成可溶性大鲵酶解液;
(8)将可溶性大鲵酶解液和步骤(3)所得中草药浓缩提取液混合均匀,过滤,杀菌、灌装。
4.根据权利要求3所述的增强免疫力的中草药剂的制备方法,其特征在于,将步骤(8)所得混合液,喷雾干燥,分量包装得颗粒剂。
5.根据权利要求4所述的增强免疫力的中草药剂的制备方法,其特征在于,将所得颗粒剂装入胶囊,即得胶囊剂。
6.根据权利要求4所述的增强免疫力的中草药剂的制备方法,其特征在于,将所得颗粒剂通过与淀粉压制成片,可得片剂。
7.根据权利要求3所述的增强免疫力的中草药剂的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,乙醇水溶液的乙醇浓度为60-90%。
8.根据权利要求3所述的增强免疫力的中草药剂的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,高压煎煮的压力为70-80kP。
9.根据权利要求3所述的增强免疫力的中草药剂的制备方法,其特征在于,,步骤(6)中,酶解最佳条件为:温度50℃,pH值7.5,加酶量为浆液重量的2.5‰,酶解时间12小时。
10.一种如权利要求1所述的增强免疫力的中草药剂在制备具有免疫功效的保健品方面的应用。
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- 2018-09-10 CN CN201811048704.0A patent/CN108815304A/zh active Pending
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