CN108761065A - 一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液及其制备方法 - Google Patents

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金可心
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Abstract

本发明公开了一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液及其制备方法，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸二氢钠66～88份，磷酸氢二钾56～78份，乙醇胺11～18份，氯化钙15～19份，枸橼酸7～14份，精氨酸9～17份，吐温‑20 1～4份，封闭剂18～25份，稳定剂11～15份，去离子水400～500份。本发明利用各组分之间的协同作用，制备获得的稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，在抗体‑抗原结合反应是能有效封闭多余位点，降低非特异性结合，降低干扰，且适合标识碱性磷酸酶的抗原长期保存。

Description

一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液及其制备方法
技术领域
本发明涉及体外诊断领域，尤其涉及一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液及其制备方法。
背景技术
体外诊断技术是指通过对人体血液、体液等样本在体外进行检测，从而获得对应的临床信息，进而判断疾病情况或协助诊断。体外诊断主要分为放射免疫、胶体金、酶联免疫、化学发光等，其中放射免疫因其污染较大以逐步被市场淘汰，酶联免疫因其成本低、处理量大作为现有主流；但是随着化学发光平台的不断升级优化，其自身灵敏度高、特异性强、测试速度快、自动化程度高等优势逐步体现，并成为主流发展趋势。化学发光平台，主要研究集中在发光物或原料的制备，而忽视了抗体/抗原稀释液的功能，合适的稀释液才能保证抗原-抗体配对更持久，降低非特异性结合，减少干扰。
发明内容
本发明解决的技术问题：为了获得一种适合碱性磷酸酶标识抗原用稀释液，不影响抗原-抗体结合，降低非特异性结合，减少干扰，适合碱性磷酸酶标识抗原长期保存，本发提供了一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液及其制备方法。
技术方案：一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸二氢钠66～88份，磷酸氢二钾56～78份，乙醇胺11～18份，氯化钙15～19份，枸橼酸7～14份，精氨酸9～17份，吐温-20 1～4份，封闭剂18～25份，稳定剂11～15份，去离子水400～500份。
优选的一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸二氢钠77份，磷酸氢二钾66份，乙醇胺15份，氯化钙18份，枸橼酸12份，精氨酸16份，吐温-20 2份，封闭剂21份，稳定剂13份，去离子水450份。
优选的，所述封闭剂为BSA或胎牛血清。
优选的，所述稳定剂由柳硫汞与明胶组成。
一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、乙醇胺、氯化钙、枸橼酸、精氨酸在搅拌速度为100～160rpm的情况下依次加入水中，搅拌至澄清，调节pH至6.3～7.5；
第2步、在第1步所得溶液中加入吐温-20和封闭剂，并以80～120rpm的速度搅拌50～80min；
第3步、将稳定剂加入第2步所得溶液内，搅拌速度为100～130rpm搅拌20～40min，即可制得稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液。
优选的，第1步中将磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、乙醇胺、氯化钙、枸橼酸、精氨酸在搅拌速度为150rpm的情况下依次加入水中，搅拌至澄清，调节pH至7.2。
优选的，第2步中在第1步所得溶液中加入吐温-20和封闭剂，并以100rpm的速度搅拌60min。
优选的，第3步中将稳定剂加入第2步所得溶液内，搅拌速度为120rpm搅拌30min，即可制得稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液。
有益效果：本发明利用各组分之间的协同作用，制备获得的稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，在抗体-抗原结合反应是能有效封闭多余位点，降低非特异性结合，降低干扰，且适合标识碱性磷酸酶的抗原长期保存。
具体实施方式
实施例1
一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸二氢钠77份，磷酸氢二钾66份，乙醇胺15份，氯化钙18份，枸橼酸12份，精氨酸16份，吐温-20 2份，封闭剂21份，稳定剂13份，去离子水450份。
所述封闭剂为胎牛血清。
所述稳定剂由柳硫汞与明胶组成。
一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、乙醇胺、氯化钙、枸橼酸、精氨酸在搅拌速度为150rpm的情况下依次加入水中，搅拌至澄清，调节pH至7.2；
第2步、在第1步所得溶液中加入吐温-20和封闭剂，并以100rpm的速度搅拌30min；
第3步、将稳定剂加入第2步所得溶液内，搅拌速度为120rpm搅拌30min，即可制得稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液。
实施例2
一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸二氢钠71份，磷酸氢二钾63份，乙醇胺15份，氯化钙17份，枸橼酸10份，精氨酸12份，吐温-20 3份，封闭剂21份，稳定剂12份，去离子水400份。
优选的，所述封闭剂为BSA。
优选的，所述稳定剂由柳硫汞与明胶组成。
一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、乙醇胺、氯化钙、枸橼酸、精氨酸在搅拌速度为150rpm的情况下依次加入水中，搅拌至澄清，调节pH至6.9；
第2步、在第1步所得溶液中加入吐温-20和封闭剂，并以100rpm的速度搅拌70min；
第3步、将稳定剂加入第2步所得溶液内，搅拌速度为120rpm搅拌25min，即可制得稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液。
实施例3
一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸二氢钠71份，磷酸氢二钾69份，乙醇胺16份，氯化钙18份，枸橼酸11份，精氨酸15份，吐温-20 3份，封闭剂22份，稳定剂14份，去离子水460份。
优选的，所述封闭剂为BSA。
优选的，所述稳定剂由柳硫汞与明胶组成。
一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、乙醇胺、氯化钙、枸橼酸、精氨酸在搅拌速度为150rpm的情况下依次加入水中，搅拌至澄清，调节pH至7.2；
第2步、在第1步所得溶液中加入吐温-20和封闭剂，并以110rpm的速度搅拌75min；
第3步、将稳定剂加入第2步所得溶液内，搅拌速度为110rpm搅拌35min，即可制得稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液。
实施例4
将实施例1～3制备获得的稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液用于已标识碱性磷酸酶抗原母液稀释，对其进行空白试验、加速试验、重复性试验，结果如下：
热加速稳定性试验(37℃加速7天) 空白试验(counts) 重复性试验(％)
实施例1 91.1％ 5243 7.3
实施例2 85.9％ 8234 9.9
实施例3 87.2％ 7342 8.7

Claims (8)

1.一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，其特征在于，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸二氢钠66～88份，磷酸氢二钾56～78份，乙醇胺11～18份，氯化钙15～19份，枸橼酸7～14份，精氨酸9～17份，吐温-20 1～4份，封闭剂18～25份，稳定剂11～15份，去离子水400～500份。
2.根据权利要求1所述一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，其特征在于，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸二氢钠77份，磷酸氢二钾66份，乙醇胺15份，氯化钙18份，枸橼酸12份，精氨酸16份，吐温-20 2份，封闭剂21份，稳定剂13份，去离子水450份。
3.根据权利要求1所述一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，其特征在于，所述封闭剂为BSA或胎牛血清。
4.根据权利要求1所述一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液，其特征在于，所述稳定剂由柳硫汞与明胶组成。
5.权利要求1所述一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
第1步、将磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、乙醇胺、氯化钙、枸橼酸、精氨酸在搅拌速度为100～160rpm的情况下依次加入水中，搅拌至澄清，调节pH至6.3～7.5；
第2步、在第1步所得溶液中加入吐温-20和封闭剂，并以80～120rpm的速度搅拌50～80min；
第3步、将稳定剂加入第2步所得溶液内，搅拌速度为100～130rpm搅拌20～40min，即可制得稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液。
6.根据权利要求5所述一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液的制备方法，其特征在于，第1步中将磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、乙醇胺、氯化钙、枸橼酸、精氨酸在搅拌速度为150rpm的情况下依次加入水中，搅拌至澄清，调节pH至7.2。
7.根据权利要求5所述一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液的制备方法，其特征在于，第2步中在第1步所得溶液中加入吐温-20和封闭剂，并以100rpm的速度搅拌60min。
8.根据权利要求5所述一种稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液的制备方法，其特征在于，第3步中将稳定剂加入第2步所得溶液内，搅拌速度为120rpm搅拌30min，即可制得稀释碱性磷酸酶标识抗原用溶液。
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