CN108720009A - 使用花生膜萃取物于制备提升ptprd基因表现的组合物的应用 - Google Patents
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Abstract
一种使用花生膜萃取物于制备一组合物的用途,其中该组合物是用于提升PTPRD基因表现,从而达到预防或治疗与PTPRD基因相关的疾病的效果。
Description
技术领域
本发明是关于花生膜萃取物的应用,尤其是关于花生膜水萃物的应用,包括使用该萃取物于预防或治疗与PTPRD基因表现相关的疾病。
背景技术
花生(学名:Arachishypogaea)是常见的农作物,亦是油料主要作物之一,可制成多种加工食品,如花生糖、花生酱、花生油等。已知花生中含有糖类、脂肪、蛋白质、维生素B、矿物质等营养成分,其中,脂肪约占花生组成分当中的50%,但是以不饱和脂肪酸为主,具有降低人体胆固醇、防止动脉硬化、预防心血管疾病等功效。因此,适量的摄取花生有助于维持人体健康。然而,前述成分与效益均着眼于花生果实,至于花生膜则通常被视为无用的废弃物。
本案发明人通过研究意外发现,花生膜萃取物具有提升PTPRD基因表现的效果。于此,已知PTPRD基因为一抑癌基因(tumor suppressor gene),并已于多种人类肿瘤中发现PTPRD基因的缺失、突变或表现低下,例如肝癌及胃癌等。基于本案发明人的发现,可以将以往被视为废弃物的花生膜,运用于肝癌与胃癌的预防或治疗。
发明内容
本发明的一目的在于提供一种使用花生膜萃取物于制备一组合物的用途,其中该组合物是用于提升PTPRD基因表现。较佳地,该萃取物为花生膜极性溶剂萃取物。更佳地,该萃取物为花生膜水萃物。
根据本发明所提供的组合物可以是一医药组合物或一食品组合物,其中,该医药组合物可用于以下的至少一者:预防肝癌、预防胃癌、治疗肝癌、及治疗胃癌。较佳地,该医药组合物呈一选自以下群组的剂型:口服、静脉注射、及皮下注射。
根据本发明所提供的食品组合物较佳为一健康食品、保健食品、机能性食品、营养补充品、或特殊营养食品。
本发明的另一目的,在于提供一种提升PTPRD基因表现的方法,其包含对一有需要的个体投予一有效量的花生膜萃取物。本发明方法可用于以下的至少一者:预防肝癌、预防胃癌、治疗肝癌、及治疗胃癌。于根据本发明的方法中,所采用的花生膜萃取物可以上述医药或食品组合物的形式投予至该有需要的个体。
本发明的详细技术内容及部分具体实施方式,将描述于以下内容中,以供本发明所属领域具通常知识者据以明了本发明的特征。
附图说明
图1显示花生膜萃取物于提升PTPRD基因表现的效果,其中,“控制组”为于不含花生膜萃取物的细胞培养液中培养48小时的HepG2细胞,“萃取物组”则为于含有花生膜萃取物的细胞培养液中培养48小时的HepG2细胞(*表示与控制组具有显著差异,p<0.05)。
具体实施方式
以下将描述根据本发明的部分具体实施方式;但在不背离本发明精神下,本发明还可以多种不同形式的方式来实践,不应将本发明保护专利范围解释为限于说明书所具体陈述的或权利要求书中所界定的。
除非文中有另外说明,于本说明书中(尤其是在权利要求书中)所使用的“一”、“该”及类似用语应理解为包含单数及复数形式;所谓“预防”是指抑制或防止一具体病况的发作、或维持敏感个体的良好健康状态或建立该个体对疾病的耐受性;所谓“治疗”,不应被解释为治疗一个体直至完全恢复,而应包括将一个体的疾病进展或症状维持在一实质上静态的程度、增加一个体的恢复速率、改善一具体病况的严重性、或提高一患者的生命品质;所谓“个体”是指哺乳动物,该哺乳动物可以为人类或非人动物。
PTPRD基因为一抑癌基因,已于多种人类肿瘤中发现PTPRD基因的缺失、突变或表现低下,例如肝癌、及胃癌等。此可参见例如:PTPRD is homozygously deleted andepigenetically downregulated in human hepatocellular carcinomas. OMICS: A Journal of Integrative Biology. 19(4):220-9 (2015)、及Reduced expression ofPTPRD correlates with poor prognosis in gastric adenocarcinoma. PLOS ONE. 9(11): e113754 (2014),该文献的全文并于此处以供参考。因此,若可有效提升PTPRD基因的表现,即可达到预防或治疗肝癌及胃癌的效果。
本案发明人研究发现,花生膜萃取物具有提升PTPRD基因表现的效果。因此,本发明是关于使用花生膜萃取物以提升PTPRD基因表现的应用,此包括:使用花生膜萃取物于制备一组合物的用途、以及使用该花生膜萃取物的方法,包含对一有需要的个体投予一有效量的花生膜萃取物,以提升该个体的PTPRD基因表现。
根据本发明所采用的花生膜萃取物,可通过以极性溶剂萃取花生膜而提供,其中,该极性溶剂可以为水、醇(例如C1-C4醇类)、或其组合。此外,萃取溶剂的用量并无特殊限制,通常采用可以分散原料的用量。举例言之,可于萃取步骤中采用萃取溶剂:花生膜= 20~1:1的体积比。视需要地,可于萃取过程中搭配例如搅拌、低温超音波震荡等操作,或者在进行萃取之前先细碎花生膜,以提升萃取效果。
于本发明的部分实施方式中,是以10:1(水:花生膜)的体积比混合水与花生膜,并于20~30°C下对所得到的混合物进行超音波震荡历时30~60分钟以完成萃取。其中,该花生膜是于不高于90℃的温度下对新鲜花生进行脱膜而提供。
根据本发明所采用的花生膜萃取物,可以为萃取所得的萃取原液,亦可为视需要对该萃取原液进行例如过滤、灭菌、浓缩、稀释等一或多个步骤所提供的,以提升萃取液的使用便利性。举例言之,通过例如减压浓缩、浓缩干燥、喷雾干燥、或冷冻干燥等操作,可由萃取液得到方便携带或方便储存的浓缩液或粉末。于本发明一具体实施方式中,是于45~70℃温度下对所获得的萃取液进行减压浓缩后,再以喷雾干燥方式移除水分,以提供所需的花生膜萃取物。
根据本发明所提供的组合物为一医药组合物或一食品组合物。其中,该根据本发明所提供的医药组合物可用于预防或治疗肝癌或胃癌。
根据本发明所提供的医药组合物可呈任何合宜的形式,并无特殊限制,视所欲的用途而呈对应的合宜剂型。举例言之,但不以此为限,该医药组合物可以口服或非经口服(例如:静脉注射及皮下注射)的投药方式施用至有需要的个体上。其中,视使用形式及用途而定,可选用合宜的载剂以提供该医药组合物,其中,该载剂包括赋形剂、稀释剂、辅助剂、安定剂、吸收延迟剂、崩散剂、增溶剂、乳化剂、抗氧化剂、粘合剂、结合剂、增粘剂、分散剂、悬浮化剂、润滑剂、吸湿剂等。
以适于口服的剂型为例,于根据本发明所提供的医药组合物中可含有任何不会不利影响活性成分(即,花生膜萃取物)的所欲效益的医药上可接受的载剂,例如:水、食盐水、葡萄糖(dextrose)、甘油、乙醇或其类似物、纤维素、淀粉、糖膨润土(sugar bentonite)、及前述的组合。可利用任何合宜的方法,将该医药组合物以适于口服投药的剂型提供,例如:锭剂(如糖衣锭)、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、流浸膏剂、溶液剂、糖浆剂、悬液剂、酊剂等。
至于适于皮下或静脉注射的针剂或点滴剂,则可于根据本发明所提供的医药组合物中含有一或多种例如等张溶液、盐类缓冲液(如磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液)、增溶剂、乳化剂、5%糖溶液、以及其他载剂等成分,以静脉输注液、乳剂静脉输注液、干粉注射剂、悬液注射剂、或干粉悬液注射剂等剂型提供该医药组合物。或者,将该医药组合物制备成一注射前固体,以可溶于其他溶液或悬浮液中的剂型、或可乳化的剂型提供该注射前固体,并于投予至有需要的个体之前,将该注射前固体溶于其他溶液或悬浮液中或将其乳化,以提供所欲的注射剂。
根据本发明所提供的医药组合物可以一日一次、一日多次、或数日一次等不同投药频率施用,视投予个体的需求、年龄、体重、及健康状况而异。于根据本发明所提供的医药组合物中,可视实际应用需求,调整花生膜萃取物于组合物中的含量比例。此外,该医药组合物可视需要另含一或多种其他活性成分,或者与含该一或多种其他活性成分的药物并用,以进一步加强该医药组合物的功效或增加制剂配方的运用灵活性与调配度,只要该其他活性成分对本发明活性成分(即,花生膜萃取物)的效益没有不利的影响即可。
视需要地,可于根据本发明所提供的医药组合物或食品组合物中另含有合宜用量的添加剂,例如可提高该医药组合物或食品组合物于服用时的口适感及视觉感受的调味剂、调色剂、着色剂等,以及可改善该医药组合物或食品组合物的稳定性及储存性的缓冲剂、保存剂、防腐剂、抗菌剂、抗真菌剂等。
根据本发明所提供的食品组合物可以是健康食品、保健食品、机能性食品、营养补充品、或特殊营养食品,且可制成例如乳制品、肉类加工品、面包类、面食类、饼干、口含锭、胶囊、果汁类、茶类、运动饮料、营养饮料等产品,但不以此为限。较佳地,根据本发明所提供的食品组合物以健康食品的形式提供。
根据本发明所提供的食品组合物可以一日一次、一日多次、或数日一次等不同频率食用,视投予个体的年龄、体重、及健康状况而异。亦可针对特定族群的需要,调整据本发明所提供的食品组合物中的花生膜萃取物的含量,例如,调整至每日应服用的量。
针对根据本发明所提供的健康食品、保健食品、机能性食品、营养补充品及/或特殊营养食品,可于其外包装上标示建议使用量、特定族群(例如癌症患者、孕妇等)的使用标准及条件、或与其他食品或医药共同服用的建议事项等,以利使用者在无医师、药师或相关执事人员的指导下自行服用而无安全顾虑。于根据本发明所提供的食品组合物中,有关该花生膜萃取物的实施方式以及相关的应用,如上述的说明。
本发明亦提供一种提升PTPRD基因表现的方法,其包含对一有需要的个体投予一有效量的花生膜萃取物。较佳地,该方法是用于以下的至少一者:预防肝癌、预防胃癌、治疗肝癌、及治疗胃癌。于根据本发明的方法中,所采用的花生膜萃取物可以一组合物的形式投予至该有需要的个体。有关该组合物的投予方式、投予途径、投予形式、施用频率、以及相关的应用,均如上述的说明。
现以下列实施例进一步例示说明本发明。其中这些实施例仅提供作为说明,而非用以限制本发明的保护范围。本发明保护范围如权利要求书所示。
实施例
制备实施例]
A. 花生膜萃取物的制备
将花生脱壳、筛去土块及不良品,再经由脱膜机进行脱膜(温度不超过90℃)后,将花生膜碾碎以提供花生膜原料。
对上述花生膜原料进行以下操作处理,以提供花生膜萃取物:
1. 将花生膜原料与水均匀混和(花生膜原料与水的体积比为1:10),并于25℃下进行超音波萃取,历时45分钟,以提供一粗萃液;
2. 过滤该粗萃液,以提供一滤液;
3. 以每分钟4,800转的条件对该滤液进行离心,收集上清液;
4. 于45~70℃,对该上清液进行减压浓缩,直到该上清液体积减少为原体积的十分之一,以提供一浓缩萃取液;
5. 以超高温商业灭菌法(ultra high temperature processing,UHT)对该浓缩萃取液进行灭菌,其后进行喷雾干燥,以提供一干燥粉末。
实施例1:花生膜萃取物于提升PTPRD基因表现的效果
将杜氏改良依格尔培养液(Dulbecco's Modified Eagle's Medium,DMEM;购自Gibco)及胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS;购自Gibco)以体积比9:1的比例均匀混和,以提供本实施例所使用的细胞培养液(以下称“DMEM培养液”)。
于6孔盘的各孔中加入2毫升的DMEM培养液,再于各孔中加入1x105个HepG2细胞(一人类肝癌细胞株;购自ATCC,产品编号:HB-8065™),将6孔盘置于37℃下培养24小时后,将细胞分成控制组及萃取物组,并分别进行以下处理:
1. 控制组:更换新鲜的DMEM培养液,继续培养48小时;以及
2. 萃取物组:更换新鲜的DMEM培养液,于其中加入用量为0.75毫克/毫升的由[制备实施例A]所获得的粉末(以干重计),继续培养48小时。
分别收集上述各组细胞,以RNA萃取套组(RNA extraction kit;购自Geneaid)进行RNA萃取,再以反转录酶套组(SuperScript™ Reverse Transcriptase kit;购自Invitrogen)将各组RNA反转录为cDNA。接着,以qPCR套组(KAPA SYBR FAST qPCR Kit(2x);购自KAPA Biosystems)及ABI StepOne Plus™ System对前述的cDNA进行qPCR(quantitative polymerase chain reaction),以检测各组细胞的PTPRD基因的表现量。
上述实验进行三重复,将该三重复的结果平均后,再以控制组的结果为基准(即,将控制组的PTPRD基因表现量设定为1倍),计算萃取物组的细胞的基因相对表现量。结果示于图1。
由图1结果可知,相较于控制组,萃取物组的PTPRD基因表现量显著上升,显示本发明花生膜萃取物可有效提升PTPRD基因表现,故可用于以下的至少一者:预防肝癌、预防胃癌、治疗肝癌、及治疗胃癌。
Claims (10)
1.一种使用花生膜萃取物于制备一组合物的用途,其特征在于:该组合物用于提升PTPRD基因表现。
2.如权利要求1所述的用途,其特征在于:该萃取物为一极性溶剂萃取物。
3.如权利要求1所述的用途,其特征在于:该萃取物为一水萃物。
4.如权利要求1至3中任一项所述的用途,其特征在于:该组合物为一医药组合物或食品组合物。
5.如权利要求4所述的用途,其特征在于:该组合物为医药组合物,用于预防或治疗肝癌。
6.如权利要求4所述的用途,其特征在于:该组合物为医药组合物,用于预防或治疗胃癌。
7.如权利要求5所述的用途,其特征在于:该组合物为医药组合物,且该医药组合物呈一选自以下群组的剂型:口服、静脉注射、及皮下注射。
8.如权利要求6所述的用途,其特征在于:该组合物为医药组合物,且该医药组合物呈一选自以下群组的剂型:口服、静脉注射、及皮下注射。
9.如权利要求4所述的用途,其特征在于:该组合物为食品组合物。
10.如权利要求9所述的用途,其特征在于:该食品组合物为一健康食品、保健食品、机能性食品、营养补充品或特殊营养食品。
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