CN108709988A - 一种新型抗原抗体反应增敏剂 - Google Patents

一种新型抗原抗体反应增敏剂 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种新型抗原抗体反应增敏剂,包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、氯化钠溶液和增敏剂,其具体配置试剂方法如下:将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为10g/L的氯化钠溶液和浓度为0.5g/L的增敏剂混合搅拌后,加入浓度为50mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。本发明通过配置的4组试剂分别与测试试剂5进行搭配测试比较,使所产生的聚集反应信号放大数百倍,便于通过肉眼或仪器进行检测,而且所发明的聚合物增敏剂致敏性能高,不会提高反应体系的粘度,重复性和精确度更好,同时该增敏剂在进行试验时,安全性能高,从而达到本发明的目的。

Description

一种新型抗原抗体反应增敏剂
技术领域
本发明涉增敏剂技术领域,特别涉及一种新型抗原抗体反应增敏剂。
背景技术
利用抗原抗体免疫凝集反应检测一种特定的抗原或抗体,已经被广泛应 用在临床检测中。在该方法中,如果被检测物抗原或抗体存在于血清中,与 包被了对应的抗体或抗原的聚苯乙烯胶乳试剂孵育一段时间后,则发生凝集 反应,通过肉眼或仪器进行检测,如果其中不存在被检测物,则不会发生凝 集反应。由于该方法使用了载体聚苯乙烯胶乳,使信号放大数百倍,所以载 体聚苯乙烯胶乳在免疫凝集反应过程中被广泛使用。
在免疫凝集反应过程中,不同的聚合化合物,例如聚乙二醇,聚乙烯吡 咯烷酮等被广泛使用。使用这些聚合物的目的是致敏和稳定抗原抗体的反应。 由于这些聚合物粘稠度很高,非特异反应也被同时增强,所以在免疫凝集反 应过程中,这些聚合物很难被使用。因此,发明一种新型抗原抗体反应增敏 剂来解决上述问题很有必要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新型抗原抗体反应增敏剂,以解决上述背景 技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种新型抗原抗体反应增 敏剂,包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、氯化钠溶液和增敏剂;
其具体配置试剂方法如下:
将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为10g/L的氯化钠溶液和浓度为 0.5g/L的增敏剂混合搅拌后,加入浓度为50mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节, 使试剂的pH=7.0。
优选的,所述增敏剂设置为海藻酸钠、PEG6000、PEG8000和硫酸葡聚糖 中的一种。
优选的,所述增敏剂在所配置的试剂中的浓度为0.01%~0.3%之间。
本发明提供了如下四种试剂:
试剂一
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,海藻酸钠0.5g/L;
试剂二
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,PEG6000 0.5g/L;
试剂三
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,PEG8000 0.5g/L;
试剂四
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,硫酸葡聚糖0.5g/L。
本发明还提供了一种测试试剂,包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、 海藻糖和包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球;
其具体配置试剂方法如下:将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为 50g/L的海藻糖和浓度为0.5g/L的包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球混合搅 拌后,加入浓度为20mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。
本发明还提供了一种测试试剂,包括以下试验:
试剂五
配制试剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖 50g/L、包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L。
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
步骤一:将试剂一和试剂五进行搭配测试;
步骤二:将试剂二和试剂五进行搭配测试;
步骤三:将试剂三和试剂五进行搭配测试;
步骤四:将试剂四和试剂五进行搭配测试;
步骤五:通过肉眼或仪器比较步骤一~步骤四中聚合物对抗原抗体免疫凝 集反应的效果。
本发明的技术效果和优点:
1、本发明通过配置的4组试剂分别与测试试剂5进行搭配测试比较,使 所产生的聚集反应信号放大数百倍,便于通过肉眼或仪器进行检测,而且所 发明的聚合物增敏剂致敏性能高,不会提高反应体系的粘度,重复性和精确 度更好,同时该增敏剂在进行试验时,安全性能高,从而达到本发明的目的;
2、通过采用不同CRP抗原浓度的数据对比,使实验的数据准确性能大大 提高,避免了采用的CRP抗原浓度的数据过少,突出不了各个增敏剂致敏性 能的变化,从而无法客观的反应出新型抗原抗体反应增敏剂增敏效果。
附图说明
图1为本发明的吸光度随CRP抗原浓度变化而所产生的变化示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行 清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而 不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做 出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明提供了如图1所示的一种新型抗原抗体反应增敏剂,包括HEPES 缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、氯化钠溶液和增敏剂;
其具体配置试剂方法如下:
将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为10g/L的氯化钠溶液和浓度为 0.5g/L的增敏剂混合搅拌后,加入浓度为50mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节, 使试剂的pH=7.0。
所述增敏剂设置为海藻酸钠、PEG6000、PEG8000和硫酸葡聚糖中的一种, 所述增敏剂在所配置的试剂中的浓度为0.01%~0.3%之间。
本发明提供了如下四种试剂:
试剂一
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,海藻酸钠0.5g/L;
试剂二
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,PEG6000 0.5g/L;
试剂三
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,PEG8000 0.5g/L;
试剂四
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,硫酸葡聚糖0.5g/L。
本发明还提供了一种测试试剂,包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、 海藻糖和包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球;
其具体配置试剂方法如下:将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为 50g/L的海藻糖和浓度为0.5g/L的包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球混合搅 拌后,加入浓度为20mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。
实施例1
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
将试剂一和试剂五进行搭配测试,即将配置试剂:50mm HEPES缓冲液, pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,海藻酸钠0.5g/L和配制试 剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、包 被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L进行混合反应,然后通过肉眼或仪器 聚合物观察对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
实施例2
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
将试剂二和试剂五进行搭配测试,即将配置试剂:50mm HEPES缓冲液, pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,PEG6000 0.5g/L和配制试 剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、包 被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L进行混合反应,然后通过肉眼或仪器 聚合物观察对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
实施例3
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
将试剂三和试剂五进行搭配测试,即配置试剂:50mm HEPES缓冲液, pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,PEG8000 0.5g/L和配制试 剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、包 被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L进行混合反应,然后通过肉眼或仪器 聚合物观察对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
实施例4
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
将试剂四和试剂五进行搭配测试,即配置试剂:50mm HEPES缓冲液, pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,硫酸葡聚糖0.5g/L和配制 试剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、 包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L进行混合反应,然后通过肉眼或仪 器聚合物观察对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
通过实施例1~实施例4观察分析可得到如下数据:
海藻酸钠时,所制得的新型抗原抗体反应增敏剂增敏效果更好。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限 制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的 技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或 者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内,所作 的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种新型抗原抗体反应增敏剂,其特征在于:包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、氯化钠溶液和增敏剂;
其具体配置试剂方法如下:
将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为10g/L的氯化钠溶液和浓度为0.5g/L的增敏剂混合搅拌后,加入浓度为50mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。
2.根据权利要求1所述的一种新型抗原抗体反应增敏剂,其特征在于:所述增敏剂设置为海藻酸钠、PEG6000、PEG8000和硫酸葡聚糖中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种新型抗原抗体反应增敏剂,其特征在于:所述增敏剂在所配置的试剂中的浓度为0.01%~0.3%之间。
4.根据权利要求1-3所述的一种新型抗原抗体反应增敏剂,其特征在于,包括以下四种试剂:
试剂一
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,海藻酸钠0.5g/L;
试剂二
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,PEG6000 0.5g/L;
试剂三
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,PEG8000 0.5g/L;
试剂四
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,硫酸葡聚糖0.5g/L。
5.根据权利要求1-4所述的一种测试试剂,其特征在于:包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、海藻糖和包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球;
其具体配置试剂方法如下:将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为50g/L的海藻糖和浓度为0.5g/L的包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球混合搅拌后,加入浓度为20mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。
6.根据权利要求5所述的一种测试试剂,其特征在于,包括以下试验:
试剂五
配制试剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L。
7.根据权利要求4或5所述的一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,其特征在于,包括以下具体试验步骤:
步骤一:将试剂一和试剂五进行搭配测试;
步骤二:将试剂二和试剂五进行搭配测试;
步骤三:将试剂三和试剂五进行搭配测试;
步骤四:将试剂四和试剂五进行搭配测试;
步骤五:通过肉眼或仪器比较步骤一~步骤四中聚合物对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112649598A (zh) * 2020-12-29 2021-04-13 上海云泽生物科技有限公司 一种测定万古霉素的胶乳增强免疫比浊试剂盒
CN112858687A (zh) * 2020-12-30 2021-05-28 宁波职业技术学院 一种血清淀粉样蛋白a检测试剂及其制备方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008071737A1 (en) * 2006-12-13 2008-06-19 Arcom Scientific Bvba Avian antibodies in immunological antigen-antibody interactions
CN104655843A (zh) * 2014-05-19 2015-05-27 宁波普瑞柏生物技术有限公司 一种胃癌检测方法、试剂以及其试剂盒
CN106093407A (zh) * 2016-05-31 2016-11-09 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 一种测定脂蛋白(a)的试剂盒及其制备方法
CN106324239A (zh) * 2016-07-28 2017-01-11 武汉景川诊断技术股份有限公司 C‑反应蛋白免疫胶乳微球制备方法及应用
CN107533050A (zh) * 2015-03-31 2018-01-02 美迪恩斯生命科技株式会社 凝血酶‑抗凝血酶复合体的测定试剂及测定方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008071737A1 (en) * 2006-12-13 2008-06-19 Arcom Scientific Bvba Avian antibodies in immunological antigen-antibody interactions
CN104655843A (zh) * 2014-05-19 2015-05-27 宁波普瑞柏生物技术有限公司 一种胃癌检测方法、试剂以及其试剂盒
CN107533050A (zh) * 2015-03-31 2018-01-02 美迪恩斯生命科技株式会社 凝血酶‑抗凝血酶复合体的测定试剂及测定方法
CN106093407A (zh) * 2016-05-31 2016-11-09 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 一种测定脂蛋白(a)的试剂盒及其制备方法
CN106324239A (zh) * 2016-07-28 2017-01-11 武汉景川诊断技术股份有限公司 C‑反应蛋白免疫胶乳微球制备方法及应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
S OTSUJI ET AL.: "A Rapid Turbidimetric Immunoassay for Serum antistreptolysin-O", 《J CLIN LAB ANAL.》 *
熊琰: "视黄醇结合蛋白抗体免疫胶乳的制备及其在临床自动化检测中的应用", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库(电子期刊)医药卫生科技辑》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112649598A (zh) * 2020-12-29 2021-04-13 上海云泽生物科技有限公司 一种测定万古霉素的胶乳增强免疫比浊试剂盒
CN112858687A (zh) * 2020-12-30 2021-05-28 宁波职业技术学院 一种血清淀粉样蛋白a检测试剂及其制备方法
CN112858687B (zh) * 2020-12-30 2023-09-15 宁波职业技术学院 一种血清淀粉样蛋白a检测试剂及其制备方法

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