CN108709988A - 一种新型抗原抗体反应增敏剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种新型抗原抗体反应增敏剂,包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、氯化钠溶液和增敏剂,其具体配置试剂方法如下:将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为10g/L的氯化钠溶液和浓度为0.5g/L的增敏剂混合搅拌后,加入浓度为50mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。本发明通过配置的4组试剂分别与测试试剂5进行搭配测试比较,使所产生的聚集反应信号放大数百倍,便于通过肉眼或仪器进行检测,而且所发明的聚合物增敏剂致敏性能高,不会提高反应体系的粘度,重复性和精确度更好,同时该增敏剂在进行试验时,安全性能高,从而达到本发明的目的。
Description
技术领域
本发明涉增敏剂技术领域,特别涉及一种新型抗原抗体反应增敏剂。
背景技术
利用抗原抗体免疫凝集反应检测一种特定的抗原或抗体,已经被广泛应 用在临床检测中。在该方法中,如果被检测物抗原或抗体存在于血清中,与 包被了对应的抗体或抗原的聚苯乙烯胶乳试剂孵育一段时间后,则发生凝集 反应,通过肉眼或仪器进行检测,如果其中不存在被检测物,则不会发生凝 集反应。由于该方法使用了载体聚苯乙烯胶乳,使信号放大数百倍,所以载 体聚苯乙烯胶乳在免疫凝集反应过程中被广泛使用。
在免疫凝集反应过程中,不同的聚合化合物,例如聚乙二醇,聚乙烯吡 咯烷酮等被广泛使用。使用这些聚合物的目的是致敏和稳定抗原抗体的反应。 由于这些聚合物粘稠度很高,非特异反应也被同时增强,所以在免疫凝集反 应过程中,这些聚合物很难被使用。因此,发明一种新型抗原抗体反应增敏 剂来解决上述问题很有必要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新型抗原抗体反应增敏剂,以解决上述背景 技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种新型抗原抗体反应增 敏剂,包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、氯化钠溶液和增敏剂;
其具体配置试剂方法如下:
将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为10g/L的氯化钠溶液和浓度为 0.5g/L的增敏剂混合搅拌后,加入浓度为50mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节, 使试剂的pH=7.0。
优选的,所述增敏剂设置为海藻酸钠、PEG6000、PEG8000和硫酸葡聚糖 中的一种。
优选的,所述增敏剂在所配置的试剂中的浓度为0.01%~0.3%之间。
本发明提供了如下四种试剂:
试剂一
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,海藻酸钠0.5g/L;
试剂二
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,PEG6000 0.5g/L;
试剂三
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,PEG8000 0.5g/L;
试剂四
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,硫酸葡聚糖0.5g/L。
本发明还提供了一种测试试剂,包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、 海藻糖和包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球;
其具体配置试剂方法如下:将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为 50g/L的海藻糖和浓度为0.5g/L的包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球混合搅 拌后,加入浓度为20mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。
本发明还提供了一种测试试剂,包括以下试验:
试剂五
配制试剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖 50g/L、包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L。
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
步骤一:将试剂一和试剂五进行搭配测试;
步骤二:将试剂二和试剂五进行搭配测试;
步骤三:将试剂三和试剂五进行搭配测试;
步骤四:将试剂四和试剂五进行搭配测试;
步骤五:通过肉眼或仪器比较步骤一~步骤四中聚合物对抗原抗体免疫凝 集反应的效果。
本发明的技术效果和优点:
1、本发明通过配置的4组试剂分别与测试试剂5进行搭配测试比较,使 所产生的聚集反应信号放大数百倍,便于通过肉眼或仪器进行检测,而且所 发明的聚合物增敏剂致敏性能高,不会提高反应体系的粘度,重复性和精确 度更好,同时该增敏剂在进行试验时,安全性能高,从而达到本发明的目的;
2、通过采用不同CRP抗原浓度的数据对比,使实验的数据准确性能大大 提高,避免了采用的CRP抗原浓度的数据过少,突出不了各个增敏剂致敏性 能的变化,从而无法客观的反应出新型抗原抗体反应增敏剂增敏效果。
附图说明
图1为本发明的吸光度随CRP抗原浓度变化而所产生的变化示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行 清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而 不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做 出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明提供了如图1所示的一种新型抗原抗体反应增敏剂,包括HEPES 缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、氯化钠溶液和增敏剂;
其具体配置试剂方法如下:
将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为10g/L的氯化钠溶液和浓度为 0.5g/L的增敏剂混合搅拌后,加入浓度为50mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节, 使试剂的pH=7.0。
所述增敏剂设置为海藻酸钠、PEG6000、PEG8000和硫酸葡聚糖中的一种, 所述增敏剂在所配置的试剂中的浓度为0.01%~0.3%之间。
本发明提供了如下四种试剂:
试剂一
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,海藻酸钠0.5g/L;
试剂二
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,PEG6000 0.5g/L;
试剂三
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,PEG8000 0.5g/L;
试剂四
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化 钠10g/L,硫酸葡聚糖0.5g/L。
本发明还提供了一种测试试剂,包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、 海藻糖和包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球;
其具体配置试剂方法如下:将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为 50g/L的海藻糖和浓度为0.5g/L的包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球混合搅 拌后,加入浓度为20mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。
实施例1
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
将试剂一和试剂五进行搭配测试,即将配置试剂:50mm HEPES缓冲液, pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,海藻酸钠0.5g/L和配制试 剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、包 被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L进行混合反应,然后通过肉眼或仪器 聚合物观察对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
实施例2
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
将试剂二和试剂五进行搭配测试,即将配置试剂:50mm HEPES缓冲液, pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,PEG6000 0.5g/L和配制试 剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、包 被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L进行混合反应,然后通过肉眼或仪器 聚合物观察对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
实施例3
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
将试剂三和试剂五进行搭配测试,即配置试剂:50mm HEPES缓冲液, pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,PEG8000 0.5g/L和配制试 剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、包 被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L进行混合反应,然后通过肉眼或仪器 聚合物观察对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
实施例4
本发明还提供了一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,包括以下具体 试验步骤:
将试剂四和试剂五进行搭配测试,即配置试剂:50mm HEPES缓冲液, pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,硫酸葡聚糖0.5g/L和配制 试剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、 包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L进行混合反应,然后通过肉眼或仪 器聚合物观察对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
通过实施例1~实施例4观察分析可得到如下数据:
海藻酸钠时,所制得的新型抗原抗体反应增敏剂增敏效果更好。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限 制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的 技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或 者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内,所作 的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种新型抗原抗体反应增敏剂,其特征在于:包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、氯化钠溶液和增敏剂;
其具体配置试剂方法如下:
将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为10g/L的氯化钠溶液和浓度为0.5g/L的增敏剂混合搅拌后,加入浓度为50mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。
2.根据权利要求1所述的一种新型抗原抗体反应增敏剂,其特征在于:所述增敏剂设置为海藻酸钠、PEG6000、PEG8000和硫酸葡聚糖中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种新型抗原抗体反应增敏剂,其特征在于:所述增敏剂在所配置的试剂中的浓度为0.01%~0.3%之间。
4.根据权利要求1-3所述的一种新型抗原抗体反应增敏剂,其特征在于,包括以下四种试剂:
试剂一
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,海藻酸钠0.5g/L;
试剂二
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,PEG6000 0.5g/L;
试剂三
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,PEG8000 0.5g/L;
试剂四
配置试剂:50mm HEPES缓冲液,pH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,氯化钠10g/L,硫酸葡聚糖0.5g/L。
5.根据权利要求1-4所述的一种测试试剂,其特征在于:包括HEPES缓冲溶液、牛血清白蛋白BSA、海藻糖和包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球;
其具体配置试剂方法如下:将浓度为1g/L的牛血清蛋白BSA、浓度为50g/L的海藻糖和浓度为0.5g/L的包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球混合搅拌后,加入浓度为20mm的HEPES缓冲液进行酸碱调节,使试剂的pH=7.0。
6.根据权利要求5所述的一种测试试剂,其特征在于,包括以下试验:
试剂五
配制试剂:20mm HEPES缓冲,PH=7.0,牛血清白蛋白BSA 1g/L,海藻糖50g/L、包被羊抗人CRP聚苯乙烯胶乳微球0.5g/L。
7.根据权利要求4或5所述的一种新型抗原抗体反应增敏剂测试方法,其特征在于,包括以下具体试验步骤:
步骤一:将试剂一和试剂五进行搭配测试;
步骤二:将试剂二和试剂五进行搭配测试;
步骤三:将试剂三和试剂五进行搭配测试;
步骤四:将试剂四和试剂五进行搭配测试;
步骤五:通过肉眼或仪器比较步骤一~步骤四中聚合物对抗原抗体免疫凝集反应的效果。
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