CN108699093A - 制备2′-o-岩藻糖基乳糖的方法 - Google Patents

制备2′-o-岩藻糖基乳糖的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108699093A
CN108699093A CN201780015318.9A CN201780015318A CN108699093A CN 108699093 A CN108699093 A CN 108699093A CN 201780015318 A CN201780015318 A CN 201780015318A CN 108699093 A CN108699093 A CN 108699093A
Authority
CN
China
Prior art keywords
formula
group
alkyl
compound
methyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201780015318.9A
Other languages
English (en)
Inventor
M·普尔
S·伦茨
A·韦尔弗特
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BASF SE
Original Assignee
BASF SE
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by BASF SE filed Critical BASF SE
Publication of CN108699093A publication Critical patent/CN108699093A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
    • C07H3/08—Deoxysugars; Unsaturated sugars; Osones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B51/00—Introduction of protecting groups or activating groups, not provided for in the preceding groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及制备2'‑O‑岩藻糖基乳糖的方法和用于该方法的式(I)的保护的岩藻糖基供体。该方法包括在活化试剂存在下使下式(I)的岩藻糖衍生物与通式(II)的化合物反应。在式(I)和(II)中，变量各自定义如下:X是Br或S‑结合基团，即‑SCN，‑S(O)n‑RX1或‑S‑RX2，其中RX1优选是任选取代的苯基，RX2优选是C1‑C4‑烷基，2‑唑啉‑2‑基，2‑噻唑啉‑2‑基，苯并唑‑2‑基，苯并噻唑‑2‑基或吡啶‑2‑基；RSi相同或不同并且是式SiRaRbRc的基团，其中Ra，Rb和Rc优选各自为甲基；R1是C(＝O)‑R11基团或SiR12R13R14基团，其中R11优选是甲基，苯基或叔丁基，R12，R13和R14优选各自是甲基；R2相同或不同并且是C1‑C8‑烷基或一起形成直链C3‑C6‑链烷二基，其是未取代的或具有1‑6个甲基作为取代基；R3相同或不同并且是C1‑C8‑烷基或一起形成直链C1‑C4‑链烷二基，其是未取代的或具有1至6个甲基作为取代基。

Description

制备2′-O-岩藻糖基乳糖的方法
本发明涉及制备2'-O-岩藻糖基乳糖的新方法和用于该方法的保护的岩藻糖基供体。
背景技术
2'-O-岩藻糖基乳糖(CAS号:41263-94-9:α-L-吡喃岩藻糖基)-(1→2)-O-β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-D-吡喃葡萄糖)是一种低聚糖，在母乳中含量较大。已经有各种报道，母乳中存在的2'-O-岩藻糖基乳糖因果关系地降低了母乳喂养的新生儿感染的风险(参见例如Weichert等，Nutrition Research，33(2013)，第10卷，831-838；Jantscher-Krenn等，Minerva Pediatr.2012，64(1)83-99；Morrow等，J.Pediatr.145(2004)297-303)。因此，2'-O-岩藻糖基乳糖作为食品补充剂的组分特别受到关注，特别是作为人源化乳制品的添加剂，特别是用于婴儿营养品。
通过经典化学或生物化学方法制备2'-O-岩藻糖基乳糖已在文献中进行了不同的描述(参见例如Carbohydrate Res.88(1)(1981)51，Carbohydrate Res.154(1986)93-101，Carbohydrate Res.212(1991)C1-C3，J.Org.Chem.(1997)62,992，Heterocycles 84(1)(2012)637，US 5,438,124，WO 2010/115934，WO 2010/115935，WO 2010/070616，WO2012/113404和WO2013/48294)。化学制备通常基于用活化的岩藻糖基供体将适当保护的受体岩藻糖基化，所述适当保护的受体即部分受保护的乳糖衍生物，其在半乳糖基部分的2-位带有唯一的未保护的羟基，例如，4-O-(6-O-乙酰基-3,4-异亚丙基-β-D-吡喃半乳糖基)-2,3；5,6-双-O-异亚丙基-茚-D-葡萄糖二甲基缩醛，所述活化的岩藻糖基供体具有例如硫代烷基，链烯氧基，三氯乙酰亚胺酸酯或溴原子代替异头OH基，如甲基-1-硫代-2,3,4-三-O-苄基-β-L-吡喃岩藻糖苷(fucopyranoside)，甲基-3,4-O-异亚丙基-2-O-(4-甲氧基苄基)-1-硫代-L-吡喃岩藻糖苷，戊烯基-3,4-O-异亚丙基-2-O-(4-甲氧基苄基)-β-L-吡喃岩藻糖苷，苯基-1-硫代-2,3,4-三-O-苄基-β-L-吡喃岩藻糖苷，2,3,4-三-O-苄基-β-L-吡喃岩藻糖基溴，或2,3,4-三-O-苄基-β-L-吡喃岩藻糖基三氯乙酰亚胺酯(关于岩藻糖供体，参见上文引用的文献和Tetrahedron Lett.31(1990)4325)。特别的缺点是必须使用含重金属的催化剂通过氢解除去岩藻糖基化试剂的苄基保护基团，这导致产物中难以除去和食品不可接受的杂质。
例如，R.K.Jain等人，Carbohydrate Research，212(1991)，pp.C1-C3描述了使用甲基3,4-O-异亚丙基-2-O-(4-甲氧基苄基)-1-硫代-β-L-吡喃岩藻糖苷或戊基3,4-O-异亚丙基-2-O-(4-甲氧基苄基)-β-L-呋喃岩藻糖苷作为岩藻糖基化试剂通过将4-O-(6-O-乙酰基-3,4-异亚丙基-β-D-吡喃半乳糖基)-2,3；5,6-双-O-异亚丙基-D-葡萄糖二甲基缩醛岩藻糖基化制备2'-O-岩藻糖基乳糖的途径。然而，这些岩藻糖基化试剂制备起来很复杂，并且在岩藻糖基化步骤后需要氢解脱苄基化。类似的合成描述于J.Org.Chem.1997,62,992。
WO2010/115934和WO2012/113404描述了使用2-O-苄基化岩藻糖基供体制备2-岩藻糖基乳糖。岩藻糖基供体的制备相当复杂，此外，在岩藻糖基化步骤后获得的受保护的三糖需要氢解脱保护。从WO2010/070616中已知类似的方法。
Ott等人，J.Carbohydr.Chem.2001,20(7&8)，611-636，尤其描述了使用三甲硅烷基化岩藻糖基结构单元合成2'-L-岩藻糖基乳酸类似物，然而，其用间隔基结构部分修饰。
因此，迄今已知的岩藻糖基化方法通常产生含有杂质的2'-O-岩藻糖基乳糖，所述杂质不能被完全除去，例如来自氢解除去苄基保护基团的过渡材料和芳族化合物，以及不希望的三糖，例如2'-O-岩藻糖基乳糖的β-异构体，即β-L-吡喃岩藻糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-D-吡喃葡萄糖。如果2'-O-岩藻糖基乳糖用于人类营养，特别是婴儿营养，则这些杂质特别成问题。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种制备2'-O-岩藻糖基乳糖的方法，该方法不涉及现有技术的问题。该方法应特别允许使用易于制备的起始材料，特别是容易获得的岩藻糖基供体。该方法应进一步确保岩藻糖基化的良好收率和良好的立体选择性。此外，该方法应该是合适的，以避免在过渡金属催化剂上通过氢解除去任何保护基团。
已经发现，通过使具有异头离去基团的三甲硅烷基化岩藻糖衍生物与适当的乳糖受体(即下面更详细定义的通式(II)化合物)在活化剂存在下反应，以高产率和高选择性得到相应的通式(III)的受保护的2'-O-岩藻糖基乳糖衍生物，其然后可以以本身已知的方式脱保护得到2'-O-岩藻糖基乳糖，而不需要氢化步骤，所述三甲硅烷基化岩藻糖衍生物作为岩藻糖基供体并且具有下式(I)，
其中
RSi是合适的甲硅烷基保护基团，和
X是合适的离去基团。
因此，本发明首先涉及一种制备2'-O-岩藻糖基乳糖的方法，包括以下步骤:
a)使通式(I)的岩藻糖衍生物与通式(II)的化合物反应
其中
RSi是式SiRaRbRc的相同或不同的基团，其中Ra，Rb和Rc相同或不同并且选自C1-C8-烷基，C3-C8-环烷基，苯基和C3-C8-环烷基-C1-C4-烷基；
X选自Br和S-结合基团，即-SCN，-S(O)n-RX1或-S-RX2，其中
n是0，1或2，
RX1是芳基，其是未取代的或任选地具有1-5个选自卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4-卤代烷氧基的取代基，和
RX2选自C1-C6-烷基，C1-C6-卤代烷基，苄基，和5-或6-元杂环基，其中苄基的苯基结构部分是未取代的或任选地具有1-5个选自卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4-卤代烷氧基的取代基，所述杂环基在相对于连接点的邻位具有氮原子，并且任选地在另一个邻位具有选自O和S的第二杂原子，其中杂环基可任选带有稠合的苄基结构部分；
其中
R1是基团C(＝O)-R11或基团SiR12R13R14，其中
R11为氢，C1-C8-烷基，C1-C8-卤代烷基，C3-C8-环烷基，C3-C8-环烷基-C1-C4-烷基或苯基，其中所述苯基是未取代的或任选地具有1至5个选自卤素，CN，NO2，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4烷氧基的取代基，和
R12，R13和R14相同或不同并且选自C1-C8-烷基，C3-C8-环烷基，苯基和C3-C8-环烷基-C1-C4-烷基；
R2可以相同或不同并且是C1-C8-烷基，或连接在同一碳原子上的两个基团R2一起形成直链C3-C6-链烷二基，其是未取代的或具有1-6个甲基作为取代基；
R3可以相同或不同并且是C1-C8-烷基或一起形成直链C1-C4-链烷二基，其是未取代的或具有1-6个甲基作为取代基；和
b)使步骤a)中获得的通式(III)的偶合产物脱保护获得2'-O-岩藻糖基乳糖
其中RSi，R1，R2和R3如上所定义
通过在一个步骤中除去所有保护基团，或者通过在两个或多个步骤中连续除去保护基团，可以在本发明方法的步骤b)中将式(III)化合物脱保护。在后一种情况下，可以获得以下部分保护的通式(IIIa)，(IIIb)和(IIIc)的2'-O-岩藻糖基乳糖衍生物作为中间体:
其中R1，R2，R3和R11如式(II)所定义。
本发明还涉及具有Br基团或S-结合基团作为异头离去基团的2,3,4-三甲硅烷基化岩藻糖基供体。在这方面，从Y.-C.Ko等人，J.Am.Chem.Soc.，2014,136(41)，14425-31中已知1-(4-甲基-苯硫基)-2,3,4-O-三甲基甲硅烷基-L-吡喃岩藻糖。1-亚磺酰基苯基-2,3,4-O-三乙基甲硅烷基-L-吡喃岩藻糖公开于US 5,700,916，1-硫代乙基-2,3,4-O-三乙基甲硅烷基-L-吡喃岩藻糖和1-乙硫基-2,3,4-O-三-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-L-吡喃岩藻糖从R.Daly等人，J.Org.Chem.2013,78(3)，1080-90中已知，和1-溴-2,3,4-O-三-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-L-吡喃岩藻糖从现有技术中已知。因此，本发明特别涉及通式(I)的岩藻糖衍生物，其中
RSi是式SiRaRbRc的相同或不同的基团，其中
Ra，Rb和Rc相同或不同并且选自C1-C8-烷基，C3-C8-环烷基，苯基和C3-C8-环烷基-C1-C4-烷基；
X选自Br和S-结合基团，即SCN，-S(O)n-RX1或-S-RX2，其中n是0，1或2，
RX1是芳基，其是未取代的或任选地具有1-5个选自卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4-卤代烷氧基的取代基，和
RX2选自C1-C6-烷基，C1-C6-卤代烷基，苄基，和5-或6-元杂环基，其中苄基的苯基结构部分是未取代的或任选地具有1-5个选自卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4-卤代烷氧基的取代基，所述杂环基在相对于连接点的邻位具有氮原子，并且任选地在另一个邻位具有选自O和S的第二杂原子，其中杂环基可任选带有稠合的苄基结构部分；
除式(I)化合物外，其中，
-RSi是三甲基甲硅烷基，X是-S-(4-甲基-苯基)，
-RSi是三乙基甲硅烷基，X是-S-乙基或-S(O)-苯基，或
-RSi是叔丁基二甲基甲硅烷基，X是Br或-S-乙基。
本发明的方法与一系列优点有关。该方法以良好的收率和良好的立体选择性得到式(III)的主偶合产物。在温和的水解条件下除去式(III)化合物中的保护基团是可能的，而不需要在过渡金属催化剂上进行氢解。所得的式(III)中间体，特别是式(IIIa)和(IIIb)的中间体是稳定的，特别是在储存期间是稳定的，并且可以是纯化的。另外，该方法可以容易地以相对大的规模进行。另一个优点是，与已知2'-O-岩藻糖基乳糖相比，通过本发明方法可获得的2'-O-岩藻糖基乳糖不包含或仅包含低得多的那些不能被除去的杂质，例如由氢化产生的重金属和重金属化合物，以及通过苄基保护基团的氢化形成的烷基芳族化合物。此外，通过本发明的方法，不形成或仅非常低程度地形成不需要的β-异构体，其远低于现有技术方法中形成的β-异构体的量。实际上，通过式(I)化合物与式(II)化合物的反应，式(III)化合物的不希望的β-异构体以如此低的量形成，即β-异构体(III-β)与α-异构体(III-α)的摩尔比不超过1:7，特别是约1:10，即在约1:8至1:15的范围内。因此本发明方法允许产生所需的2'-O-岩藻糖基乳糖，其任选地在进一步纯化后含有小于1.5％重量，特别是小于1.0％重量不需要的β-异构体。
通过根据本发明的方法获得的2'-O-岩藻糖基乳糖的质量使其特别适合于制备食品。因此，本发明还涉及
-在本文所述方法中使用的式(I)的2,3,4-三甲硅烷基化岩藻糖基供体；
-可通过本文所述方法获得的2'-O-岩藻糖基乳糖；
-可通过本文所述方法获得的2'-O-岩藻糖基乳糖在食品中或作为食品添加剂的用途；和
-食品或食品添加剂，其包含2'-O-岩藻糖基乳糖，可通过本文所述的方法获得，和至少一种适用于食品的载体。
具体实施方式
在本发明的上下文中，一般使用的术语定义如下:
前缀Cx-Cy表示特定情况下可能的碳原子数。
在每种情况下，术语“卤素”表示氟，溴，氯或碘，特别是氟，氯或溴。
术语“C1-C4-烷基”表示包含1至4个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基，乙基，丙基，1-甲基乙基(异丙基)，丁基，1-甲基丙基(仲丁基)，2-甲基丙基(异丁基)或1,1-二甲基乙基(叔丁基)。
术语“C1-C8-烷基”表示包含1至8个碳原子的直链或支链烷基。除了对C1-C4-烷基提及的基团外，实例是正戊基，正己基，正庚基，正辛基，2-戊基，2-己基，2-庚基，2-辛基，3-戊基，3-己基，3-庚基，3-辛基，2,2-二甲基丙基，2-甲基丁基，3-甲基丁基，2-乙基丁基，3-乙基丁基，2-甲基戊基，3-甲基戊基，4-甲基戊基，2-乙基戊基，3-乙基戊基，4-乙基戊基，2-乙基己基及其位置异构体。
术语“C1-C8-卤代烷基”表示包含1至8个碳原子，特别是1至4个碳原子(C1-C4-卤代烷基)的直链或支链烷基，其中一个或多个或所有氢原子已被卤素原子，特别是氟或氯原子替代。用于此目的的实例是氯甲基，二氯甲基，三氯甲基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，氯氟甲基，二氯氟甲基，氯二氟甲基，2,2-二氟乙基，2,2,2-三氟乙基，1,1,2,2-四氟乙基，五氟乙基，2,2-二氟丙基，3,3-二氟丙基，3,3,3-三氟丙基，2,2,3,3,3-五氟丙基，七氟丙基等。
术语“C1-C4-烷氧基”表示通过氧原子键合的包含1-4个碳原子的直链或支链饱和烷基。C1-C4-烷氧基的实例是甲氧基，乙氧基，正丙氧基，1-甲基乙氧基(异丙氧基)，正丁氧基，1-甲基丙氧基(仲丁氧基)，2-甲基丙氧基(异丁氧基)和1,1-二甲基乙氧基(叔丁氧基)。
术语“C1-C4-卤代烷氧基”表示通过氧原子键合的包含1-4个碳原子的直链或支链饱和卤代烷基。在这种情况下的实例是氟甲氧基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，1-氟乙氧基，2-氟乙氧基，2,2-二氟乙氧基，2,2,2-三氟乙氧基，1,1,2,2-四氟乙氧基，五氟乙氧基，3,3,3-三氟丙基-1-氧基，1,1,1-三氟丙-2-氧基，1-氟丁氧基，2-氟丁氧基，3-氟丁氧基，4-氟丁氧基等。
术语“C3-C8-环烷基”表示包含3至8个碳原子的环状饱和烃基。实例是环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基和环辛基。
术语“C3-C8-环烷基-C1-C4-烷基”表示包含1至4个碳原子的直链或支链烷基，其中一个氢原子已被如上定义的C3-C8-环烷基取代。
术语“直链C1-C4-链烷二基”表示具有1-4个碳原子的直链二价烃基，例如亚甲基，乙烷-1,2-二基，丙烷-1,3-二基和丁烷-1,4-二基。
术语“直链C3-C6-链烷二基”表示具有3至6个碳原子的直链二价烃基二基，例如丙烷-1,3-二基，丁烷-1,4-二基，戊烷-1,5-二基和己烷-1,6-二基。
术语“5-或6-元杂环基，其在相对于连接点的邻位具有氮原子，并且任选地在另一个邻位具有选自O和S的第二杂原子，其中杂环基可任选带有稠合的苄基结构部分”指相对于杂环对分子其余部分的连接点的邻位具有氮原子的5-或6-元饱和，部分不饱和或芳族杂环，其可以或可以不被氢原子取代。在另一个邻位，杂环任选带有选自O和S的第二个杂原子。这种杂环的实例是2-吡咯烷基，2-唑烷基，2-噻唑烷基，2-哌啶基，1,3-嗪-2-基，1,3-噻嗪-2-基，1-吡咯-2-基，1-吡咯-5-基，2吡咯-2-基，2-吡咯-5-基，3-吡咯-2-基，2-唑啉-2-基，3-唑啉-2-基，4-唑啉-2-基，2-噻唑啉-2-基，3-噻唑啉-2-基，4-噻唑啉-2-基，1,4-二氢吡啶-2-基，5,6-二氢-4H-1,3-嗪-2-基，5,6-二氢-2H-1,3-嗪-2-基，2,3-二氢-6H-1,3-嗪-2-基，2,3二氢-4H-1,3-嗪-2-基，5,6-二氢-4H-1,3-噻嗪-2-基，5,6-二氢-2H-1,3-噻嗪-2-基，2,3-二氢-6H-1,3-噻嗪-2-基，2,3-二氢-4H-1,3-噻嗪-2-基，2H-1,3-嗪-2-基，4H-1,3-嗪-2-基，6H-1,3-嗪-2-基，2H-1,3-噻嗪-2-基，4H-1,3-噻嗪-2-基，6H-1,3-噻嗪-2-基，2-吡咯基，2-唑基，2-噻唑基和2-吡啶基。这些杂环可任选带有稠合的苄基结构部分，即杂环和苄基结构部分共有两个相邻的碳原子。带有稠合苄基结构部分的这种杂环的实例是二氢吲哚-2-基，异二氢吲哚-1-基，苯并唑啉-2-基，苯并噻唑啉-2-基，1,2,3,4-四氢-喹啉-2-基，吲哚-2-基，异吲哚-1-基，苯并唑-2-基，苯并噻唑-2-基，喹啉-2-基，2H-1,3-苯并嗪-2-基和2H-1,3-苯并噻嗪-2-基。
术语“食品”或“食物”表示旨在并适合作为哺乳动物，特别是人类的营养的组合物和制剂。在本发明的上下文中，它们包括基于天然产物(例如乳制品)以及人工制备的制剂(例如用于膳食或药物营养)的两种组合物，其可以直接使用或在使用前通过添加液体任选地必须转化为即用制剂。
术语“食品添加剂”表示与食品混合以实现化学，物理或生理作用的物质。
关于根据本发明的方法和式(II)，(III)，(IIIa)和(IIIb)的化合物，一种式中的变量R2优选在每种情况下具有相同的定义。R2特别是C1-C4-烷基，尤其是甲基，或者连接在同一碳原子上的两个基团R2一起是1,5-戊二基，因此与它们所连接的碳原子形成环己烷-1,1-二基残基。所有基团R2尤其是甲基。
关于根据本发明的方法和式(II)，(III)，(IIIa)和(IIIb)的化合物，一种式中的变量R3优选在每种情况下具有相同的定义。R3特别是C1-C4-烷基，尤其是甲基。
关于根据本发明的方法和式(I)和(III)的化合物，一种式中的变量RSi优选在每种情况下具有相同的定义。RSi特别是三(C1-C4-烷基)甲硅烷基，特别是三甲基甲硅烷基，即在SiRaRbRc基团中，基团Ra，Rb和Rc相同或不同，特别是C1-C4-烷基，尤其是甲基。
本发明优选的第一实施方案涉及一种方法，其中在式(I)化合物中，基团X是Br。
优选的第二实施方案涉及一种方法，其中在式(I)化合物中，基团X是不同于Br的S-结合基团，优选-S-RX1或-S-RX2，其中
RX1是苯基，其是未取代的或任选地具有1，2或3个选自卤素，C1-C4-烷基和C1-C4-烷氧基的取代基，和
RX2选自C1-C4-烷基，2-唑啉-2-基，2-噻唑啉-2-基，苯并唑-2-基，苯并噻唑-2-基和吡啶-2-基。
换句话说，根据该实施方案，基团X优选选自C1-C4-烷硫基，2-唑啉-2-基硫基，2-噻唑啉-2-基硫基，苯并唑-2-基硫基，苯并噻唑-2-基硫基，吡啶-2-基硫基和苯硫基，其中苯基结构部分是未取代的或任选地具有1，2或3个选自卤素，C1-C4-烷基和C1-C4-烷氧基的取代基。此外，根据该实施方案，基团X尤其选自C1-C4-烷硫基和苯硫基，其中苯基结构部分是未取代的或任选地具有1，2或3个选自Br，Cl，C1-C4-烷基和C1-C2-烷氧基的取代基，尤其是甲硫基，乙硫基或苯硫基。
第三个实施方案涉及一种方法，其中在式(II)和(III)的化合物中，基团R1是SiR12R13R14基团，特别是三(C1-C4-烷基)甲硅烷基，特别是三甲基甲硅烷基，即在SiR12R13R14基团中，基团R12，R13和R14相同或不同，特别是C1-C4-烷基，尤其是甲基。根据该实施方案，式(IIIa)中的基团R1是三(C1-C4-烷基)甲硅烷基，尤其是三甲基甲硅烷基。
第四个优选的实施方案涉及一种方法，其中在式(II)和(III)的化合物中，基团R1是-C(＝O)-R11基团，其中R11如上所定义，特别是氢，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基或苯基，其可以被一个或两个选自卤素，甲基和乙基的取代基取代，特别是甲基，叔丁基，苯基，4-氯苯基或4-甲基苯基，具体而言是甲基，叔丁基或苯基。因此，在该实施方案中，基团R1特别是乙酰基，新戊酰基，苯甲酰基，4-氯苯甲酰基或4-甲基苯甲酰基，特别是乙酰基，新戊酰基或苯甲酰基。在该实施方案的上下文中，式(IIIc)中的基团R11也具有与上述优选相同的含义。
在本发明的某些实施方案中，R11不同于甲基。在特定的实施方案组中，R11是甲基。在进一步特定的实施方案组中，R11是叔丁基或苯基。
特别优选的式(I)化合物的实例是式(I)化合物，其中所有基团RS1是三甲基甲硅烷基，基团X是Br。
进一步特别优选的式(I)化合物的实例是
-式(I)化合物，其中所有基团RS1是三甲基甲硅烷基，基团X是甲硫基；
-式(I)化合物，其中所有基团RS1是三甲基甲硅烷基，基团X是乙硫基；和
-式(I)化合物，其中所有基团RS1是三甲基甲硅烷基，基团X是苯硫基。
在本发明的方法中，式(I)化合物原则上可以以其α-端基异构体(I-α)或其β-端基异构体(I-β)的形式使用，或者以其α-端基异构体(I-α)和其β-端基异构体(I-β)的混合物的形式使用。
然而，本发明方法中使用的化合物I的异构性通常不会显着影响新形成的糖苷键的异构性，即式(III)化合物中岩藻糖基结构部分的连接是否在α-或β配置。
特别优选的式(II)化合物的实例是式(II)化合物，其中所有基团R2是甲基，所有基团R3是甲基，并且R1是三甲基甲硅烷基。
进一步特别优选的式(II)化合物的实例还是式(II)化合物，其中所有基团R2是甲基，所有基团R3是甲基，并且R1是乙酰基。
另一个特别优选的式(II)化合物的另一个实例也是式(II)化合物，其中所有基团R2是甲基，所有基团R3是甲基，并且R1是苯甲酰基。
另一个特别优选的式(II)化合物的另一个实例也是式(II)化合物，其中所有基团R2是甲基，所有基团R3是甲基，并且R1是新戊酰基，即-C(＝O)-C(CH3)3。
特别优选的式(III)化合物的实例是
-式(III)化合物，其中所有基团R2为甲基，所有基团R3为甲基，所有基团RS1为三甲基甲硅烷基，且R1为三甲基甲硅烷基；
-式(III)化合物，其中所有基团R2为甲基，所有基团R3为甲基，所有基团RS1为三甲基甲硅烷基，且R1为乙酰基；
-式(III)化合物，其中所有基团R2为甲基，所有基团R3为甲基，所有基团RS1为三甲基甲硅烷基，R1为新戊酰基。
特别优选的式(IIIa)化合物的实例是，其中R1是C(＝O)-R11基团
-具有R1＝-C(＝O)-R11的式(IIIa)化合物，其中所有基团R2为甲基，所有基团R3为甲基，并且R11为甲基；
-具有R1＝-C(＝O)-R11的式(IIIa)化合物，其中所有基团R2为甲基，所有基团R3为甲基，并且R11为苯基；
-具有R1＝-C(＝O)-R11的式(IIIa)化合物，其中所有基团R2为甲基，所有基团R3为甲基，并且R11为叔丁基。
特别优选的式(IIIb)化合物的实例是
-式(IIIb)化合物，其中所有基团R2为甲基，并且所有基团R3为甲基。
特别优选的式(IIIc)化合物的实例是
-式(IIIc)化合物，其中R11是甲基；
-式(IIIc)化合物，其中R11是乙基；
-式(IIIc)化合物，其中R11是苯基；
-式(IIIc)化合物，其中R11是叔丁基。
在根据本发明的方法的步骤a)中，式(I)的岩藻糖衍生物(其作为岩藻糖基供体)在活化试剂的存在下与式(II)的化合物反应，得到式(III)化合物的岩藻糖基化的化合物。根据是否使用根据第一或第二实施方案的式(I)的岩藻糖衍生物，即基团X是Br还是S-结合基团，步骤a)中的岩藻糖基化反应在下文中也分别称为方法A和方法B。
对于方法A和B，原则上，任何试剂都适合作为现有技术中已知的活化试剂，以使用糖基供体促进糖基化，所述糖基供体在方法A的情况下携带Br基团，或者在方法B的情况下携带S-结合基团，作为异头离去基团。使用这种糖基供体的糖基化例如在AlexeiV.Demchenko编辑的“Handbook of Chemical Glycosylation”，2008，Wiley-VCH Verlag，Weinheim，Germany和其中引用的文献中公开。
对于方法B的岩藻糖基化，即步骤a)使用X为S-结合基团的式(I)化合物的反应，活化试剂优选选自以下糖基化促进试剂:
i)氯胺T，即N-氯-4-甲基苯磺酰胺的钠盐，如例如在A.K.Misra等人，Carbohydr.RES.2004，339，885-890中所描述；
ii)碘二可力丁高氯酸盐(iodonium dicollidine perchlorate)，如例如在R.U.Lemieux等人，Canadian Journal of Chemistry 1965，43，2205和G.H.Veeneman等人，Tetrahedron Lett.1990，31，275-278和Ott等人，J.Carbohydr.chem.2001，20(7&8)，611-636中所描述；
iii)二甲基(甲硫基)锍三氟甲磺酸盐，如例如在P.Fugedi等人，Carbohydr.RES.1986，149，C9-C12和Ott等，J.Carbohydr.Chem.2001，20(7&8)，611-636；
iv)N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)，如例如在K.C.Nicolaou等人，J.Am.Chem.Soc.105(1983)，2430-34中所描述；
v)N-碘代琥珀酰亚胺(NIS)；
vi)N-溴代琥珀酰亚胺加三氟甲磺酸(TfOH)，如例如在M.Sasaki等人，Tetrahedron Lett.1991，32，6873-76中所描述；
vii)N-溴代琥珀酰亚胺加三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(TMSOTf)，如例如在Z.H.Qin等人，Carbohydr.RES.2002，337，31-36中所描述；
viii)N-碘代琥珀酰亚胺加三氟甲磺酸，如例如在G.H.Veeneman等人，Tetrahedron Lett.1990，31，1331-34和P.Konradsson等人，Tetrahedron Lett.1990，31，4313-16中所描述；
ix)N-碘代琥珀酰亚胺加三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，如例如在G.H.Veeneman等人，Tetrahedron Lett.1990，31，1331-34和P.Konradsson等人，TetrahedronLett.1990，31，4313-16中所描述；
x)溴(Br2)加银(I)三氟甲磺酸盐(AgTf)，如例如在J.O.Kihlberg等人，J.Org.Chem.1990，55，2860-63中所描述；
xi)二苯基亚砜(Ph2SO)加三氟甲磺酸酐(TfO2)，如例如在J.D.C.Codee等人，Tetrahedron 2004，60，1057-64和J.D.C.Codee等人，Organic Letters 2003，5，1519-22中所描述；
xii)碘(I2)加六甲基二硅氮烷(HMDS)，如例如在P.Cura等人，Synlett 2000，1279-80和K.P.R.Kartha等人，Tetrahedron:Asymmetry 2000，11，581-593中所描述；和
xiii)溴化铜(II)(CuBr2)和四(C1-C6-烷基)溴化铵((C1-C6-烷基)4NBr)，如例如在J.O.Kihlberg等人，J.Org.Chem.1990，55，2860-63和S.Sato等人，Carbohydr.Res.1986，155，C6-C10中所描述。
这些试剂或糖基化促进剂特别适用于方法B的岩藻糖基化，其使用式(I)的岩藻糖衍生物，其中基团X选自C1-C4-烷硫基，2-唑啉-2-基硫基，2-噻唑啉-2-基硫基，苯并唑-2-基硫基，苯并噻唑-2-基硫基，吡啶-2-基硫基和苯硫基，尤其是甲硫基，乙硫基和苯硫基。
如果方法B中使用的活化试剂是试剂i)至v)中的一种，其各自由单一组分组成，则其通常以每1摩尔式(I)化合物0.05至2摩尔当量，优选0.5至1.5摩尔当量，特别是0.8至1.2摩尔当量的量使用。
如果方法B中使用的活化试剂是试剂vi)至xiii)中的一种，其各自由两种不同的组分组成，则通常以这样的量使用，使得每1摩尔式(I)化合物，存在1至2摩尔当量，优选1至1.5摩尔当量第一种提到的组分，即NBS，NIS，Br2，Ph2SO，I2或CuBr2，和0.01至2摩尔当量，优选0.05至1.5摩尔当量第二种提到的组分，即TfOH，TMSOTf，AgTf，TfO2，HMDS或(C1-C6-烷基)4NBr。
在某些情况下，以每摩尔式(I)化合物通常1至2摩尔当量，特别是1至1.5摩尔当量使用试剂vi)至xiii)的第二种提到的组分可能是有益的。然而，在其他情况下，以每摩尔式(I)化合物通常0.01至0.25摩尔当量，特别是0.05至0.1摩尔当量使用试剂vi)至xiii)的第二种提到的组分可能是有益的。
更优选地，方法B的岩藻糖基化在选自促进剂iv)至xiii)的活化试剂存在下进行，特别是选自促进剂iv)至xi)，特别是选自促进剂vi)，vii)，viii和ix)的活化试剂，即NBS加三氟甲磺酸，NBS加三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，NIS加三氟甲磺酸和NIS加三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯。
对于方法A的岩藻糖基化，即步骤a)使用X＝Br的式(I)化合物的反应，活化试剂是糖基化促进剂，其优选选自碱土金属溴化物和四-(C1-C6)-烷基)溴化铵，特别是四正丁基铵。
在方法A中，活化试剂的用量通常为每摩尔式(I)化合物0.05至2摩尔当量，优选0.5至1.5摩尔当量，特别是0.8至1.2摩尔当量。
在本发明方法的步骤a)中，即在方法A以及方法B中，式(I)和(II)的化合物以式(I)化合物与式(II)化合物下述摩尔比彼此反应：通常为1:3至3:1，特别是1:2至2:1，特别优选1:1.5至1.5:1，特别是1:1.1至1.1:1。
步骤a)，即式(I)的岩藻糖衍生物与式(II)化合物的反应，通常在惰性有机溶剂或稀释剂中进行。优选非质子溶剂，特别是具有低含量的质子杂质例如水，醇或酸的那些。溶剂中质子杂质的含量优选小于1000ppm。优选地，在用于根据本发明的方法之前，通过用合适的吸收剂处理，例如用孔径为3至4埃的分子筛处理非质子溶剂以降低质子杂质，特别是水的含量。优选的非质子有机溶剂是卤代烷，如二氯甲烷，三氯甲烷，二氯乙烷，芳烃，如甲苯和二甲苯，非环和环醚，如乙醚，二甲氧基乙烷，四氢呋喃(THF)和1,4-二烷，脂肪族羧酸的二甲基酰胺，例如二甲基甲酰胺(DMF)和二甲基乙酰胺，以及烷基腈，例如乙腈，以及上述溶剂的混合物。特别优选的非质子有机溶剂是二氯甲烷，乙腈，DMF，甲苯，THF，乙醚，二甲氧基乙烷，1,4-二烷及其混合物。另外，对于步骤a)中的反应，优选选择溶剂使得所有组分以溶解形式存在。
步骤a)中的反应优选在-100至30℃的温度范围内进行，特别是在-20至0℃的范围内。反应可在环境压力，降低或升高的压力下进行。该反应通常在900至1100毫巴的压力下进行。
通过步骤a)中的反应获得的式(III)化合物可以通过常规后处理方法分离，并任选地通过结晶和/或色谱法纯化。或者，可以将通过步骤a)中的反应获得的式(III)化合物直接进行至少部分或完全脱保护，从而获得式(IIIa)，(IIIb)或(IIIc)化合物之一，或2'-O-岩藻糖基乳糖。
令人惊奇地发现式(I)的岩藻糖衍生物，其中变量X是Br，可以通过使相应的式(I)的岩藻糖衍生物(其中X是S-结合基团，特别是甲硫基，乙硫基或苯硫基)与元素溴反应而方便地制备。为此目的，溴通常以每摩尔其中X是S结合基团的式(I)岩藻糖衍生物0.8至2摩尔，优选1至1.8摩尔，特别是1.1至1.5摩尔的量使用。
其中X为S-结合基团的式(I)化合物通常在-100至40℃的温度范围内与溴反应，特别是在-80至10℃的温度范围内，特别是在-20至0℃的范围内。反应可在环境压力下或在降低或升高的压力下进行。通常，反应在900至1100毫巴的压力下进行。
式(I)化合物(其中X是S-结合基团)与溴的反应通常在上述惰性有机溶剂或稀释剂之一中进行。这里优选上述非质子溶剂，特别是具有低含量，优选小于1000ppm的质子杂质如水、醇或酸的那些。在本文中特别优选的溶剂是二氯甲烷，乙腈，DMF，甲苯，THF，乙醚，二甲氧基乙烷，1,4-二烷及其混合物。
如上所述，其中X＝Br的式(I)化合物是适用于制备式(III)化合物的本发明方法中的岩藻糖基供体。因此，本发明的一个具体方面涉及本发明方法，其中步骤a)包括使式(I)化合物(其中基团X是不同于Br的S-结合基团)与溴反应以获得式(I)化合物，其中X为Br，然后在活化试剂存在下使式(I)化合物(其中X为Br)与式(II)化合物反应，得到式(III)化合物。
由式(I)化合物(其中X是S-结合基团)与溴反应得到的反应产物优选不分离，但不经进一步分离或纯化而与前面本文详细讨论的本发明方法步骤a)中的式(II)化合物反应。因此，可以原位制备其中X＝Br的式(I)化合物，然后将式(II)化合物以及活化试剂直接加入由此获得的反应混合物以引发步骤a)的岩藻糖基化。或者，也可以纯化或分离由式(I)化合物(其中X是S-结合基团)与溴反应得到的反应产物，例如通过除去反应混合物的挥发性成分，优选在降低的压力情况下，以及可能的其他步骤，例如结晶和/或色谱法。
在本发明方法的步骤b)中，式(III)化合物的脱保护与已知脱保护反应类似地实现，并且优选通过水解方法进行。裂解这些保护基团的条件是本领域技术人员熟悉的，例如，来自P.G.M.Wuts等，“Greene's Protecting Groups in Organic Synthesis”，第4版，Wiley 2006，以及其中引用的文献，或制备2'-O-岩藻糖基乳糖的开头处引用的参考文献。
根据本发明的第一实施方案b.1)，在酸存在下用水处理式(III)化合物。以这种方式，通常实现所有保护基团与式(III)化合物的完全裂解，并获得2'-O-岩藻糖基乳糖。
合适的酸是无机酸，例如盐酸，硫酸，磷酸，无机酸的酸性盐，例如碱金属磷酸氢盐和磷酸二氢盐或碱金属硫酸氢盐，例如磷酸二氢钠或磷酸氢钾，以及有机羧酸，如乙酸，丙酸，二氯乙酸，三氯乙酸或三氟乙酸，和有机磺酸，如甲磺酸。酸通常用作稀酸水溶液，例如，以5至70重量％浓度的溶液计。通常，稀释的含水酸与合适的有机溶剂组合使用。其实例是与水混溶的有机溶剂，例如C1-C4-链烷醇，例如甲醇，乙醇，异丙醇，1-丁醇或叔丁醇，环醚如四氢呋喃或二烷，以及与水仅具有有限混溶性的有机溶剂，例如卤代烷，如二氯甲烷，三氯甲烷，二氯乙烷，芳烃，如甲苯和二甲苯，以及二烷基醚，如乙醚，二异丙醚或甲基叔丁基醚。所需的反应条件是本领域技术人员已知的，例如，来自P.G.M.Wuts等人，同上和其中引用的文献，或制备2'-O-岩藻糖基乳糖的开头处所引用的参考文献。除去保护基团后，通常中和酸，然后通过除去水分离产物。中和可以通过使用通常用于此目的的碱来实现，包括碱金属氢氧化物，碱金属碳酸盐和碱金属碳酸氢盐。中和也可以通过使用碱性或强碱性离子交换树脂来实现，因为这将允许中和而不在产物溶液中形成盐。
在实施方案b.1)中，还可以通过在水性介质中的酸性离子交换树脂实现保护基团的裂解。由此，可以避免单独的中和步骤。
根据本发明的另一实施方案b.2)，首先用脱甲硅烷基化试剂处理式(III)化合物，其中R1是-SiR12R13R14基团，其中获得式(IIIb)化合物:
脱甲硅烷基化可以在一个步骤中进行，使得-SiR12R13R14基团和-SiRaRbRc基团同时被切除。如果SiR12R13R14和SiRaRbRc基团具有不同的反应性，它也可以连续进行。
用于脱甲硅烷基化的合适试剂是，例如，上述C1-C4醇，特别是甲醇，加入或不加水，以及碱金属或碱土金属碳酸盐和碳酸氢盐，如碳酸锂，碳酸钠，碳酸钾，碳酸氢钠和碳酸氢钾，优选在上述C1-C4醇之一的溶液中，特别是甲醇，加入或不加水。合适的脱甲硅烷基化试剂也是四烷基氟化铵，它们优选用于极性非质子有机溶剂，例如环醚，如四氢呋喃或二烷，或在脂族羧酸的二-C1-C4烷基酰胺如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，或烷基腈如乙腈或上述极性非质子有机溶剂的混合物中。所需的反应条件是本领域技术人员已知的，例如，来自P.G.M.Wuts等人，同上和其中引用的文献。
随后，通过在酸存在下用水处理式(IIIb)化合物除去剩余的保护基团。这可以以对实施方案b.1)描述的方式实现。
根据本发明的另一实施方案b.3)，其中R1为-C(O)R11基团的式(III)化合物首先用脱甲硅烷基化试剂处理，其中获得式(IIIa')化合物:
式(IIIa')化合物对应于式(IIIa)化合物，其中R1是-C(O)R11基团。随后，同时或相继除去-C(O)-R11基团和剩余的保护基团。
通过用脱甲硅烷基化试剂处理化合物(III)，类似于实施方案b.2)实现式(III)化合物的脱甲硅烷基化，其中R1是-C(O)R11基团。脱甲硅烷基化所需的反应条件是本领域技术人员已知的，例如，来自P.G.M.Wuts等人，同上和其中引用的文献。
通过碱性皂化或通过碱催化或酶催化的酯交换以本身已知的方式实现酯基-C(O)-R11的裂解。用于此目的的方法是已知的，例如，来自P.G.M.Wuts等人，同上，或者来自Kociensky等人，“Protective groups”，第3版，4.6章，Thieme 2005。然后以本身已知的方式除去剩余的C(R2)2和OR3保护基，例如，通过用含水酸处理，如已结合实施方案b.1)所述。
根据另一实施方案b.4)，该方法也可以是这样的，即C(R2)2和OR3保护基团最初从式(IIIa')化合物中除去，例如，通过用含水酸处理，如已结合实施方案b.1)所述，其中如前所述获得通式(IIIc)化合物。然后可以以本身已知的方式从式(IIIc)化合物上裂去酯基-C(＝O)-R11，例如通过碱性皂化或碱性酯交换或通过酶催化的酯交换。
根据特别优选的实施方案b.5)，其中R1为-C(O)R11基团的式(III)化合物首先用C1-C4-链烷醇和碱金属碱处理，由此得到式(IIIb)化合物，然后在酸性条件下除去剩余的保护基团。在该实施方案中，R11优选为C1-C4-烷基，例如甲基，乙基或叔丁基。因此，酯基-C(O)-R11的脱甲硅烷基化和除去可以彼此连接，并且可以在单个步骤中进行。这里合适的试剂又是上述的C1-C4-链烷醇(如甲醇)中的碱金属氢氧化物和碳酸盐作为溶剂。为此目的，甲醇与碳酸钠或碳酸钾的组合是特别有用的。为此目的所需的反应条件是本领域技术人员熟悉的，并且可以通过常规实验确定。优选地，同时脱甲硅烷基化和除去酯基-C(O)-R11可以通过在C1-C4-链烷醇如甲醇中用碱金属碱在20至50℃的温度范围内处理式(III)化合物来实现。碱金属碱，特别是碱金属碳酸盐的量，基于化合物(III)，优选为3至10当量，特别是4至7当量，即在碱金属碳酸盐的情况下1.5至5摩尔，特别是2至3.5摩尔每摩尔化合物(III)。保护基团C(R2)2和OR3的裂解可以通过类似于b.1)中描述的方法实现。
除去保护基团后得到的2'-O-岩藻糖基乳糖可以用常规的纯化方法纯化，如色谱法或结晶法，任选地借助于添加剂，如木炭，二氧化硅或聚乙烯吡咯烷酮。2'-O-岩藻糖基乳糖结晶的典型条件可参见Chem.Ber.1956，11，2513。根据反应条件和纯化方法，所得的2'-O-岩藻糖基乳糖可含有乳糖，例如基于产物的重量，其量为1％至20％。2'-O-岩藻糖基乳糖(-乳糖(minus lactose))的化学纯度通常为至少90％，特别是至少95％或更高。然而，乳糖不是有问题的杂质，因为乳糖的量对于在食物中使用2'-O-岩藻糖基乳糖没有问题。
特别地，本发明的方法允许以某种方式生产2'-O-岩藻糖基乳糖，使得即使在后处理之前，不需要的β-异构体β-2'O-岩藻糖基乳糖(＝β-L-吡喃岩藻糖基)-(1→2)-O-β-D-吡喃半乳糖糖基-(1→4)-D吡喃葡萄糖)的量也是如此之低以至于反应产物的纯化产生2'-O-岩藻糖基乳糖，其基于2'-O-岩藻糖基乳糖的总量包含小于1重量％，特别是小于0.5重量％的β-2'-O-岩藻糖基乳糖。到目前为止这是不可能的。与现有技术的方法相反，本发明的方法不需要过渡金属催化剂用于苄基保护基的氢解裂解，因此，通过本发明的方法可获得的2'-O-岩藻糖基乳糖中过渡金属的浓度通常小于1ppm，特别是低于检测水平。
在根据本发明方法的步骤a)中使用的式(I)化合物，其中X是S-结合基团，可以通过以下反应步骤顺序制备:
1)L-吡喃岩藻糖的过酰化(peracylation)；
2)在异头碳原子上引入S-结合基团；
3)去除酰基保护基团；和
4)硫代岩藻糖苷的2，3和4位上羟基的甲硅烷基化。
在步骤1)中，L-吡喃岩藻糖以本领域本身已知的方式转化成相应的过酰化岩藻糖，如例如P.G.W.Wuts等人，“Greene's Protecting Groups in Organic Synthesis”，第4版，Wiley 2006，D.Lloyd等，J.Org.chem.2014，79，9826-29，WO2010/115934，WO2010/115935和其中引用的文献所述。通常如方案1中所述进行反应。
方案1:
式(IV)的L-吡喃岩藻糖在碱存在下用式(VI)的酰化剂处理，其中LG是合适的离去基团，并且基团Ra优选是C1-C4-烷基或任选取代的苯基。式(VI)的酰化试剂通常是羧酸或其活化衍生物，例如相应的酸酐或酰氯。优选地，酰化试剂(VI)是乙酰氯，即LG是Cl，Ra是甲基，乙酰基酐，即LG是CH3C(O)O-，Ra是甲基，或苯甲酰氯，即LG是Cl，Ra是苯基，特别是乙酰基酐。因此，式(V)化合物优选为1,2,3,4-O-四乙酰基-L-吡喃岩藻糖或1,2,3,4-O-四苯甲酰基-L-吡喃岩藻糖，特别是1,2,3,4-O-四乙酰基-L-吡喃岩藻糖。用于步骤1)的过酰化的碱通常是叔胺，例如特别是吡啶。该反应可以在无水惰性溶剂中进行，例如氯代烃，如二氯甲烷或二氯乙烷，醚，如四氢呋喃或1,4-二烷。然而，也可以省略这样的溶剂，例如，如果以还可以起到溶剂的量使用合适的碱，例如吡啶。步骤1)通常在-20℃至50℃的温度范围内进行，优选在-10至30℃的温度范围内进行。
步骤2)的反应类似于从各自的过乙酰化糖开始制备硫代糖苷的既定方法进行，如例如Alexei V.Demchenko编辑的“Handbook of Chemical Glycosylation”，2008，Wiley-VCH Verlag，Weinheim，Germany，D.Lloyd等，J.Org.Chem.2014，79，9826-29，WO2010/115934，WO2010/115935和其中引用的文献所述。该反应通常根据方案2中描述的途径通过将式(V)的过酰化岩藻糖转化为相应的式(VII)的三酰化硫代岩藻糖苷来进行。
方案2:
式(V)的过酰化岩藻糖与式(VIII)的硫醇反应，其中基团Rb是如上文所定义的基团RX1或RX2，并且优选为甲基，乙基或苯基。硫醇(VIII)可以用其合适的前体之一代替，这些前体是本领域已知的。然而，优选地，硫醇(VIII)用于反应中。路易斯酸通常选自三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，三氟化硼二乙基醚合物，氯化锡(IV)，四氯化钛，氯化铁(III)，氯化锆(IV)，MoO2Cl2和对甲苯磺酸，其中三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯和三氟化硼乙醚合物是优选的。该反应通常在惰性溶剂中进行，例如氯化烃，如三氯甲烷，二氯甲烷和二氯乙烷，或醚，例如四氢呋喃或1,4-二烷。步骤2)通常在-20℃至40℃的温度范围内进行，优选在-10至25℃的温度范围内进行。
在步骤3)中，通过方案3中描述的反应使式(VII)的三酰化硫代岩藻糖苷脱酰化，得到相应的未保护的式(IX)的硫代岩藻糖苷。该转化以本领域本身已知的方式进行，如例如P.G.W.Wuts等人，“Greene's Protecting Groups in Organic Synthesis”，第4版，Wiley 2006，D.Lloyd等，J.Org.Chem.2014，79，9826-29，WO2010/115934，WO2010/115935和其中引用的文献所述。
方案3:
为了除去酰基保护基，通常在10至50℃的温度下用碱，特别是甲醇中的甲醇钠处理式(VII)的三酰化硫代岩藻糖苷。
在步骤4)中，通过方案4中描述的途径将式(IX)的硫代岩藻糖苷转化为式(X)的相应的三甲硅烷基化硫代岩藻糖苷。
方案4:
式(IX)的硫代岩藻糖苷通常通过使其与式(XI)的甲硅烷基化试剂反应而甲硅烷基化，其中基团RSi代表如前文所定义的基团-SiR12R13R14，其中R12，R13和R14具有先前的确定的含义，特别是甲基。LG*基团是合适的离去基团，通常是卤素，特别是氯。与甲硅烷基化试剂的反应优选在碱存在下进行，例如特别是叔脂族胺，尤其是三甲胺或吡啶。反应温度通常为-20至20℃，特别是-5至5℃，例如约0℃。步骤4)的转化通常在非质子溶剂中进行，特别是具有低含量的质子杂质例如水，醇或酸的溶剂。优选的非质子溶剂是卤代烷，如二氯甲烷，三氯甲烷或二氯乙烷，芳烃，如甲苯和二甲苯，二烷基醚，如乙醚和二异丙醚，以及环醚，如四氢呋喃和二烷。
或者，式(I)化合物，其中X是S-结合基团，可以类似于Y.-C.Ko等人，J.Am.Chem.Soc.，2014，136(41)，14425-31中公开的方法制备，首先将L-吡喃岩藻糖过甲硅烷基化，然后通过与合适的硫醇衍生物反应在异头碳原子上引入S-结合基团。
其中R1是C(＝O)-R11残基的式(II)化合物是已知的，例如，来自开头引用的参考文献，或来自Tetrahedron Letters，1981，22(50)，5007-5010，WO2010/115934，WO2010/115935和Carbohydrate Research 88(1981)，5160，或者可以类似本文描述的方法制备。
其中R1是SiR12R13R14基团的式(II)化合物可以通过选择性甲硅烷基化CH2-OH基团以简单的方式由式(IIb)化合物制备。
式(IIb)中的R2和R3如上所定义，特别定义如下:
R2特别是C1-C4-烷基，特别是甲基，或连接在同一碳原子上的两个R2残基一起是1,5-戊二基，因此与它们所连接的碳原子形成环己烷-1,1二基残基。所有R2残基特别是甲基。
R3特别是C1-C4-烷基，尤其是甲基。
对于选择性甲硅烷基化，式(IIb)化合物通常与合适的甲硅烷基化试剂反应，例如，式SiXR12R13R14的化合物，其中R12，R13和R14如前所定义，特别是甲基，X是卤素，特别是氯。与甲硅烷基化试剂的反应优选在碱存在下进行。
对于选择性甲硅烷基化，通常每摩尔式(IIb)化合物使用0.9至2摩尔，特别是1至1.5摩尔，特别是约1.1摩尔的甲硅烷基化试剂。
为了使反应选择性地进行，(IIb)的反应优选在-40至+40℃的温度范围内进行，特别是在-20至+20℃的温度范围内，特别优选在-5到+5℃的范围内，例如在约0℃。
合适的碱主要是胺碱，特别是仲胺和叔胺，尤其是吡啶碱和叔脂族或脂环族胺。合适的吡啶碱是，例如，吡啶，喹啉和C1-C6-烷基取代的吡啶，特别是单-，二-和三-(C1-C6-烷基)吡啶，例如2,6-二(C1-C6-烷基)吡啶和可力丁。合适的脂族或脂环族胺是三(C1-C6-烷基)胺，如三乙胺，二异丙基甲胺，三正丁胺或异丙基二甲胺，C3-C8-环烷基-二(C1-C6-烷基)胺，如环己基二甲胺，N-(C1-C6-烷基)哌啶，例如N-甲基哌啶和二(C3-C8-环烷基)-C1-C6-烷基胺，例如双环己基甲基胺。
碱的用量通常为每摩尔式(IIb)化合物0.9至2摩尔，特别是1至1.5摩尔。
式(IIb)化合物与甲硅烷基化试剂反应，通常在惰性有机溶剂或稀释剂中反应。优选非质子溶剂，特别是具有低含量质子杂质例如水，醇或酸的溶剂。优选的有机溶剂是卤代烷，如二氯甲烷，三氯甲烷，二氯乙烷，芳烃，如甲苯和二甲苯，二烷基醚，如乙醚，二异丙醚，甲基叔丁基醚，环醚，如四氢呋喃或二烷，脂族羧酸的二烷基酰胺，例如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，以及烷基腈，例如乙腈，以及上述溶剂的混合物。优选选择溶剂使得所有组分以溶解形式存在。基于所有试剂的总重量，式(I)和(II)化合物的总浓度优选为5-50重量％，特别是10-40重量％。
其中R1是SiR12R13R14基团的式(II)化合物可以通过过滤，萃取或在某些情况下通过蒸馏进行后处理。
式(IIb)化合物是已知的，例如，来自Carbohydrate Research，212(1991)，pp.C1-C3；Tetrahedron Lett.，31(1990)4325；Carbohydrate Research，75(1979)C11；Carbohydrate Research，88(1981)51；Chem.5(1999)1512；WO2010/070616，WO2012/113404，WO2010/115934和WO2010/115935或可通过本文描述的方法制备。
如已经提到的，与已知的2'-O-岩藻糖基乳糖相比，通过本发明的方法可获得的2'-O-岩藻糖基乳糖的特征在于它不包含或仅包含低得多的那些不能除去的杂质。特别地，通过根据本发明的方法可获得的2'-O-岩藻糖基乳糖不包含显着量的杂质，特别是不含氢化产生的杂质，这将在食品中使用是关注的。
因此，这种2'-O-岩藻糖基乳糖本身适合作为食品，也适合作为食品添加剂。其中可以使用2'-O-岩藻糖基乳糖的食品的实例是本领域技术人员熟悉的，例如，来自开头所引用的现有技术。这里，这可以采取基于天然产物如乳制品以及人工制备的制剂如用于膳食或药物营养的组合物的形式。后者可以是即用型制剂，可以直接使用，也可以采用浓缩制剂的形式，例如液体或半固体浓缩物，或固体产品，如颗粒，薄片或粉末，其在使用前通过加入液体，特别是水而转化成即用型制剂，或其加入常规食品中。
浓缩物和即用型制剂可以是固体，液体或半固体制剂。
特别地，其中使用根据本发明的2'-O-岩藻糖基乳糖的食品是用于儿童营养的食品组合物，特别是在幼儿配方食品，尤其是婴儿配方食品中。
通常，其中使用根据本发明的2'-O-岩藻糖基乳糖的食品是固体，半固体或液体食品组合物，特别是半固体或尤其是液体食品组合物。
食品组合物，即即用型食品组合物和浓缩物，可以以本身已知的方式通过将根据本发明可获得的2'-O岩藻糖基乳糖掺入食品配方中来制备。除了2'-O-岩藻糖基乳糖之外，该食品配方可以包含其他营养素，并且通常包含至少一种适用于食品的载体，其中食品可以是固体，液体或半固体。载体可以是食品或具有营养价值的物质，或者它可以是本身没有营养价值的物质，例如，膳食纤维或水。
以下实施例用于说明本发明。
使用以下缩写:
d:双峰
dd:双重偶极子
ps-q:伪四重峰
s:单峰
t:三重峰
m:多重峰
mc.:居中的多重峰
CHCl3:三氯甲烷
CHE:环己烷
DCM:二氯甲烷，优选用戊烯或不用任何稳定剂稳定
DMF:二甲基甲酰胺
of th.:理论值的
EE:乙酸乙酯
BF3*Et2O:三氟化硼二乙基醚合物
MgSO4:硫酸镁
MeOH:甲醇
NaHCO3:碳酸氢钠
RT:室温，约22℃
如果没有相反说明，2'-O-岩藻糖基乳糖是指α端基异构体。
使用Agilent Series 1200和Luna-NH2柱(3μm；250×4.6mm，)进行HPLC分析。将柱保持在35℃并在204巴下操作。
使用乙腈/水82.5/17.5v/v作为洗脱液；使用RID检测器进行检测。流速为1mL/min，运行时间为10至40min。样品体积为5μL。
对于样品制备，在每种情况下将100mg样品溶解在50/50体积比的10mL乙腈/水中。
各化合物的保留时间随时间变化，变化的原因包括柱降解和样品组成。在测量之前，始终测量所讨论的起始材料的参考样品，所讨论的产物和所讨论的副产物以确定实际保留时间。
实施例:
制备实施例1:1-乙硫基-2,3,4-三-O-乙酰基-L-吡喃岩藻糖的制备
将47.1g(0.14mol)四乙酰基岩藻糖在200mL CHCl3中的溶液冷却至0℃，然后缓慢加入13.3g(0.21mol)乙硫醇。然后，在0℃下在15分钟内滴加26.2g(0.18mol)BF3*Et2O。将反应混合物在室温下搅拌24小时，然后通过用100mL DCM稀释进行后处理。依次用100mL饱和NaHCO3溶液和100mL水洗涤如此获得的混合物。将有机相用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩至干。将残余物重新溶解在EE/CHE 8:2(v/v)中，并将溶液通过硅胶垫过滤(250mL)。收集含有产物的级分并在减压下浓缩至干。产量:32.6克(理论值的69％)。
制备实施例2:1-乙硫基-L-吡喃岩藻糖的制备
在室温下将32.6g(0.097mol)1-乙硫基-2,3,4-三-O-乙酰基-L-吡喃岩藻糖溶于350ml甲醇中。加入1.76g甲醇钠后，将所得混合物在室温下搅拌6天。然后加入2g离子交换树脂(Amberlite IR120，H+形式，强酸性)，并将混合物在室温下搅拌15分钟。随后，通过过滤除去离子交换树脂，然后将滤液在减压下浓缩至干。将残余物溶于20mL正庚烷/EE 1:1(v/v)中，并在0℃下在搅拌下经2小时结晶。过滤并用10mL正庚烷洗涤晶体，得到16g固体产物。
实施例1:1-乙硫基-2,3,4-三-O-三甲基甲硅烷基-L-吡喃岩藻糖的制备
向9.5g(0.046mol)1-乙硫基-L-吡喃岩藻糖在30mL DMF中的溶液中加入15.23g三甲胺，然后在0℃下滴加16.7g氯三甲基硅烷。在0℃下继续搅拌4小时后，加入75mL正戊烷，然后滴加50mL水。随后，分离有机相并用3×25mL水，25mL饱和NaCl溶液洗涤，然后在减压下浓缩至干，得到17.3g油状产物。
1H-NMR(CD2Cl2):δ5.2(d)；4.2(d)；4,1(ps-q)；3.9(dd)；3.6-3.5(m)；3.5(ps-q)；3.3(m)；2.6-2.3(m)；1.1(m)；1.0(m)；0.5-0.0(m)
制备实施例3:1-苯硫基-2,3,4-三-O-乙酰基-L-吡喃岩藻糖的制备
向24.1g四乙酰岩藻糖在24g甲苯中的溶液中加入10.2g苯硫酚，并将溶液冷却至0℃。然后滴加15.6g BF3*Et2O，并将所得混合物搅拌12小时。用50mL饱和NaHCO3溶液萃取后，分离有机层并用2×50mL水洗涤，用Na2SO4干燥，最后在减压下浓缩至干，得到29g粗标题化合物。
制备实施例4:1-苯硫基-L-吡喃岩藻糖的制备
将29g粗1-苯硫基-2,3,4-三-O-乙酰基-L-吡喃岩藻糖溶解在60mL甲醇中，并加入1.6g甲醇钠。在室温下搅拌24小时后，加入6g离子交换树脂(Amberlite IRA 120，H+形式，强酸性)，并将混合物在室温下搅拌15分钟。随后，通过过滤除去离子交换树脂，然后将滤液在减压下浓缩至干，得到17.5g粗标题化合物。
实施例2:1-苯硫基-2,3,4-三-O-三甲基甲硅烷基-L-吡喃岩藻糖的制备
向17.4g粗1-苯硫基-L-吡喃岩藻糖在50mL DMF中的悬浮液中加入22.7g三乙胺(3.3当量)，然后在-5℃至0℃的温度下缓慢加入24.6g(3.3当量)氯三甲基硅烷。在0℃下继续搅拌4小时后，加入100mL正戊烷，然后通过加入70mL水淬灭反应。将水层用50mL戊烷再萃取，并将合并的有机萃取物用Na2SO4干燥。减压浓缩至干，得到10g标题化合物，其以α-和β-异构体的混合物形式存在，如13C-NMR光谱所示。
13C NMR(CD2Cl2，126MHz):δ(ppm)136.04，135.71，132.12，132.12，130.33，130.33，129.47，129.47，129.07，129.07，127.02，126.71，90.25，89.35，77.42，75.82，75.67，75.08，72.70，70.52，69.42，68.19，17.32，16.74，0.78，0.78，0.78，0.69，0.69，0.69，0.55，5.55，0.55，0.50，0.50，0.50，0.28，0.28，0.28，0.28，0.28，0.28。
制备实施例5:4-O-(6-O-新戊酰基-3,4-异亚丙基-β-D-吡喃半乳糖基)-2,3；5,6-双-O-异亚丙基-D-葡萄糖-二甲基缩醛的制备
(式(II-1)化合物:式(II)化合物，其中R1＝C(＝O)C(CH3)3，R2＝CH3，且R3＝CH3)
将150g(280mmol)4-O-(3,4-异亚丙基-β-D-吡喃半乳糖基)-2,3；5,6-双-O-异亚丙基-D-葡萄糖-二甲基缩醛加入190mL DCM中。向其中加入57.19g(565mmol)三乙胺。在2小时内加入49.56g(411mmol)新戊酰氯在35mL DCM中的溶液，使温度保持在27℃以下。然后，将反应混合物加热至回流21小时(内部温度：49℃)。冷却后，将悬浮液倒入410mL冰水中，搅拌所得混合物10分钟。分离有机相，水相用95mL DCM萃取一次。将合并的有机相依次用95mL水，95mL饱和NaCl溶液洗涤，用45g Na2SO4干燥，滤出固体。通过旋转蒸发(40℃，5毫巴)蒸发滤液，得到188.65g产物，其包含79.2重量％的标题化合物(理论值的89.2％)。
13C NMR(CD2Cl2，500MHz):δ(PPM)178.24，110.40，110.30，108.55，105.65，103.95，79.36，78.35，78.12，76.72，75.62，74.60，73.60，71.36，64.99，63.09，56.51，53.54，38.98，28.25，27.35，27.26，27.26，27.26，26.68，26.39，25.82，24.51。
实施例3:式(III)化合物的制备，其中R1＝C(＝O)C(CH3)3，R2＝CH3，R3＝CH3且RS1＝三甲基甲硅烷基
首先将0.3mmol式(II-1)的岩藻糖基受体(参见制备实施例3)，0.45mmol 1-乙硫基-2,3,4-三-O-三甲基甲硅烷基-L-吡喃岩藻糖和0.45mmol N-碘代琥珀酰亚胺在25mLDCM中的溶液与约2g分子筛搅拌1小时，然后在-25℃下加入0.05mmol三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯的1mL DCM溶液。在该温度下继续搅拌16小时，然后通过用0.5mL三甲胺淬灭终止反应。将混合物用30mL DCM稀释，有机相用2×10mL饱和亚硫酸氢钠和10mL水洗涤。用45g Na2SO4干燥并滤出固体后，将滤液减压浓缩。将粗产物再溶解于CHE/EE 5:1(v/v)中，用1体积％的三乙胺处理并转移到硅胶柱的顶部(柱的尺寸:直径d＝9cm，高度h＝37厘米，体积V～2,3L)。在轻微压力下洗脱柱子。合并产物级分并通过旋转蒸发在45℃和5毫巴下浓缩，然后通过油泵真空浓缩1小时，得到标题化合物。
13C NMR(CD2Cl2，500MHz):δ(PPM)178.18，110.26，110.12，108.96，105.84，101.80，97.96，80.26，78.01，77.56，76.29，75.94，75.37，75.23，73.80，71.23，70.96，69.25，66.98，65.98，6278，56.23，5340，39.01，27.92，27.41，27.32，27.27，27.27，27.27，27.16，26.35，25.66，17.08，0.77，0.77，0.77，0.62，0.62，0.62，0.26，0.26，0.26。
实施例4:2'-O-岩藻糖基乳糖的制备
将1g实施例3中得到的粗产物在20mL甲醇中的溶液用0.2g K2CO3处理并搅拌16小时。蒸馏出甲醇，然后加入20mL DCM，并用10mL水洗涤混合物。有机相经Na2SO4干燥，浓缩至干并溶于25mL 0.5N HCl中，并将混合物在室温下搅拌8小时。随后，通过装有5mL离子交换剂IMAC HP 661的柱子洗脱来中和混合物，然后用3×3mL水重新洗涤，并将合并的水相用6mL DCM洗涤。真空蒸发后，得到无定形产物，通过比较其HPLC保留时间与2'-O-岩藻糖基乳糖真实样品的保留时间(HPLC如上所述进行)，证实其为标题产物。

Claims (23)

1.一种制备2'-O-岩藻糖基乳糖的方法，包括以下步骤:
a)使通式(I)的岩藻糖衍生物与通式(II)的化合物在活化试剂存在下反应
其中
RSi是式SiRaRbRc的相同或不同的基团，其中Ra，Rb和Rc相同或不同并且选自C1-C8-烷基，C3-C8-环烷基，苯基和C3-C8-环烷基-C1-C4-烷基；
X选自Br和S-结合基团，即-SCN，-S(O)n-RX1或-S-RX2，其中
n是0，1或2，
RX1是芳基，其是未取代的或任选地具有1-5个选自卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4-卤代烷氧基的取代基，和
RX2选自C1-C6-烷基，C1-C6-卤代烷基，苄基，和5-或6-元杂环基，其中苄基的苯基结构部分是未取代的或任选地具有1-5个选自卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4-卤代烷氧基的取代基，所述杂环基在相对于连接点的邻位具有氮原子，并且任选地在另一个邻位具有选自O和S的第二杂原子，其中杂环基可任选带有稠合的苄基结构部分；
其中
R1是基团C(＝O)-R11或基团SiR12R13R14，其中
R11为氢，C1-C8-烷基，C1-C8-卤代烷基，C3-C8-环烷基，C3-C8-环烷基-C1-C4-烷基或苯基，其中所述苯基是未取代的或任选地具有1至5个选自卤素，CN，NO2，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4卤代烷氧基的取代基，和
R12，R13和R14相同或不同并且选自C1-C8-烷基，C3-C8-环烷基，苯基和C3-C8-环烷基-C1-C4-烷基；
R2可以相同或不同并且是C1-C8-烷基，或连接在同一碳原子上的两个基团R2一起形成直链C3-C6-链烷二基，其是未取代的或具有1-6个甲基作为取代基；
R3可以相同或不同并且是C1-C8-烷基或一起形成直链C1-C4-链烷二基，其是未取代的或具有1-6个甲基作为取代基；
和
b)使步骤a)中获得的通式(III)的偶合产物脱保护获得2'-O-岩藻糖基乳糖
其中RSi，R1，R2和R3如上所定义。
2.根据权利要求1的方法，其中式(I)中的X不同于Br。
3.根据权利要求2的方法，其中式(I)中的X是-S-RX1或-S-RX2，其中
RX1是苯基，其是未取代的或任选地具有1，2或3个选自卤素，C1-C4烷基和C1-C4-烷氧基的取代基，和
RX2选自C1-C4-烷基，2-唑啉-2-基，2-噻唑啉-2-基，苯并唑-2-基，苯并噻唑-2-基和吡啶-2-基。
4.根据权利要求3的方法，其中式(I)中的X选自甲硫基，乙硫基和苯硫基。
5.根据权利要求2至4中任一项所述的方法，其中所述活化试剂选自由以下试剂i)至xv)组成的组:
i)氯胺T，
ii)碘二可力丁高氯酸盐，
iii)二甲基(甲硫基)锍三氟甲磺酸盐，
iv)N-溴代琥珀酰亚胺，
v)N-碘代琥珀酰亚胺，
vi)N-溴代琥珀酰亚胺加三氟甲磺酸，
vii)N-溴代琥珀酰亚胺加三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，
viii)N-碘代琥珀酰亚胺加三氟甲磺酸，
ix)N-碘代琥珀酰亚胺加三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，
x)溴加银(I)三氟甲磺酸盐，
xi)二苯基亚砜加三氟甲磺酸酐，
xii)碘加六甲基二硅氮烷，和
xiii)溴化铜(II)加四(C1-C6-烷基)溴化铵。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述活化试剂选自试剂vi)，vii)，viii)和ix)。
7.根据权利要求5的方法，其中活化试剂是试剂i)至v)之一，其以每1摩尔式(I)化合物0.05至2摩尔当量，优选0.5至1.5摩尔当量的量使用。
8.根据权利要求5或6的方法，其中活化试剂是试剂vi)至xiii)之一，其以这样的量使用，使得每1摩尔式(I)化合物存在1至2摩尔当量，优选1至1.5摩尔当量的第一种提到的组分，和0.01至2摩尔当量，优选0.05至1.5摩尔当量的第二种提到的组分。
9.根据权利要求1的方法，其中步骤a)包括使其中基团X是不同于Br的S-结合基团的式(I)化合物与溴反应以获得其中X为Br的式(I)化合物，然后在活化试剂存在下使其中X为Br的式(I)化合物与式(II)化合物反应。
10.根据权利要求9的方法，其中活化试剂选自碱金属溴化物，碱土金属溴化物和四(C1-C6-烷基)溴化铵。
11.根据权利要求10所述的方法，其中活化试剂是四正丁基溴化铵。
12.根据权利要求10或11的方法，其中活化试剂的用量为每摩尔式(I)化合物0.05至2摩尔，优选0.5至1.5摩尔，特别是0.8至1.2摩尔。
13.根据前述权利要求中任一项的方法，其中式(I)化合物和式(II)化合物以摩尔比(I):(II)在1:3至3:1，优选1:2至2:1，特别是1:1.5至1.5:1的范围内反应。
14.根据前述权利要求中任一项的方法，其中步骤a)的反应在非质子溶剂中进行，所述非质子溶剂选自二氯甲烷，乙腈，DMF，甲苯，THF，乙醚，二甲氧基乙烷，1,4-二烷或其混合物。
15.根据前述权利要求中任一项的方法，其中步骤a)的反应在-40至60℃，优选-20至40℃的温度下进行。
16.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，在步骤b)中
b.1)在酸存在下用水处理式(III)化合物；
或者
b.2)首先用脱甲硅烷基化试剂处理其中R1为基团SiR12R13R14的式(III)化合物，其中得到式(III b)化合物:
随后通过在酸存在下用水处理式(IIIb)化合物除去剩余的保护基团；
或者
b.3)首先用脱甲硅烷基化试剂处理其中R1为基团C(O)R11的式(III)化合物，其中得到式(IIIa')化合物:
随后依次除去C(O)-R11基团和剩余的保护基团；
或者
b.4)首先从其中R1为基团C(O)R11的式(III)化合物中除去保护基团C(R2)2和OR3，其中得到式(IIIc)化合物:
随后除去C(O)-R11基团，
或者
b.5)首先用C1-C4-链烷醇和碱金属碱处理其中R1为基团C(O)-R11的式(III)化合物，由此得到式(IIIb)化合物，随后通过在酸性反应条件下处理式(IIIb)化合物除去剩余的保护基团。
17.根据前述权利要求中任一项的方法，其中式(I)和(III)中的基团RSi是三甲基甲硅烷基。
18.根据前述权利要求中任一项的方法，其中式(II)和(III)中的基团R1是三甲基甲硅烷基。
19.根据权利要求1-17中任一项的方法，其中式(II)和(III)中的基团R1选自乙酰基，新戊酰基，苯甲酰基，4-氯苯甲酰基和4-甲基苯甲酰基，优选乙酰基，新戊酰基和苯甲酰基。
20.根据前述权利要求中任一项的方法，其中式(II)和(III)中的基团R2是甲基。
21.根据前述权利要求中任一项的方法，其中式(II)和(III)中的基团R3是甲基。
22.通式(I)的岩藻糖衍生物
其中
RSi是式SiRaRbRc的相同或不同的基团，其中
Ra，Rb和Rc相同或不同并且选自C1-C8-烷基，C3-C8-环烷基，苯基和C3-C8-环烷基-C1-C4-烷基；
X选自Br和S-结合基团，即SCN，-S(O)n-RX1或-S-RX2，其中
n是0，1或2，
RX1是芳基，其是未取代的或任选地具有1-5个选自卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4-卤代烷氧基的取代基，和
RX2选自C1-C6-烷基，C1-C6-卤代烷基，苄基，和5-或6元杂环基，其中苄基的苯基结构部分是未取代的或任选地具有1-5个选自卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基和C1-C4-卤代烷氧基的取代基，所述杂环基在相对于连接点的邻位具有氮原子，并且任选地在另一个邻位具有选自O和S的第二杂原子，其中杂环基可任选带有稠合的苄基结构部分；
除式(I)化合物外，其中，
-RSi是三甲基甲硅烷基，X是-S-(4-甲基-苯基)，
-RSi是三乙基甲硅烷基，X是-S-乙基或-S(O)-苯基，或
-RSi是叔丁基二甲基甲硅烷基，X是Br或-S-乙基。
23.根据权利要求22的岩藻糖衍生物，其中式(I)中的RSi是三甲基甲硅烷基，X选自Br，甲硫基，乙硫基和苯硫基。
CN201780015318.9A 2016-03-09 2017-03-08 制备2′-o-岩藻糖基乳糖的方法 Pending CN108699093A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP16159434.6 2016-03-09
EP16159434 2016-03-09
PCT/EP2017/055403 WO2017153452A1 (en) 2016-03-09 2017-03-08 Method for preparing 2'-o-fucosyllactose

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108699093A true CN108699093A (zh) 2018-10-23

Family

ID=55521604

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201780015318.9A Pending CN108699093A (zh) 2016-03-09 2017-03-08 制备2′-o-岩藻糖基乳糖的方法

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20190100547A1 (zh)
EP (1) EP3426669A1 (zh)
JP (1) JP2019509285A (zh)
CN (1) CN108699093A (zh)
WO (1) WO2017153452A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110835361A (zh) * 2019-10-21 2020-02-25 山东大学 一类唾液酸糖基给体及其制备方法和应用

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3867258A1 (en) 2018-10-18 2021-08-25 Basf Se Method for obtaining crystalline 2'-fucosyllactose

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994019360A1 (en) * 1993-02-23 1994-09-01 The Trustees Of Princeton University Solution and solid-phase formation of glycosidic linkages
CN102256988A (zh) * 2008-12-18 2011-11-23 意纳科有限公司 用于合成l-岩藻糖基二糖或寡糖的方法及其新颖的2,3,4-三苄基-岩藻糖基衍生物中间体
CN102459294A (zh) * 2009-04-07 2012-05-16 格礼卡姆股份公司 2’-o-岩藻糖基乳糖的合成

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5438124A (en) 1991-07-16 1995-08-01 Health Research, Inc. Glycosylating reagent for the synthesis of linear and other α-L-fucosyl oligosaccharides
EP2678347A4 (en) 2011-02-21 2014-10-08 Glycom As CATALYTIC HYDROGENOLYSIS OF A COMPOSITION FROM A MIXTURE OF OLIGOSACCHARIDE PROBLEMS AND APPLICATIONS THEREOF
US10851174B2 (en) * 2011-03-03 2020-12-01 University Of Maryland, Baltimore Core fucosylated glycopeptides and glycoproteins: chemoenzymatic synthesis and uses thereof
WO2013048294A1 (en) 2011-09-30 2013-04-04 Volvo Technology Corporation Exhaust gas after treatment system comprising multiple catalytic objects

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994019360A1 (en) * 1993-02-23 1994-09-01 The Trustees Of Princeton University Solution and solid-phase formation of glycosidic linkages
CN102256988A (zh) * 2008-12-18 2011-11-23 意纳科有限公司 用于合成l-岩藻糖基二糖或寡糖的方法及其新颖的2,3,4-三苄基-岩藻糖基衍生物中间体
CN102459294A (zh) * 2009-04-07 2012-05-16 格礼卡姆股份公司 2’-o-岩藻糖基乳糖的合成

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ANDREJ-JAKOB OTT,等: "SYNTHESIS AND APPLICATION OF SPACERMODIFIED L-FUCOSE ANALOGUES", 《J. CARBOHYDRATE CHEMISTRY》 *
GUAN-NAN WANG,等: "Bi- to tetravalent glycoclusters: synthesis, structure–activity profiles as lectin inhibitors and impact of combining both valency and headgroup tailoring on selectivity", 《ORG. BIOMOL. CHEM.》 *
ROBIN DALY,等: "Development of Fully and Partially Protected Fucosyl Donors for Oligosaccharide Synthesis", 《J. ORG. CHEM.》 *
YEN-CHUN KO,等: "Microwave-Assisted One-Pot Synthesis of 1,6-Anhydrosugars and Orthogonally Protected Thioglycosides", 《J. AM. CHEM. SOC.》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110835361A (zh) * 2019-10-21 2020-02-25 山东大学 一类唾液酸糖基给体及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
JP2019509285A (ja) 2019-04-04
US20190100547A1 (en) 2019-04-04
WO2017153452A1 (en) 2017-09-14
EP3426669A1 (en) 2019-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2417143B1 (en) Synthesis of 2'-o-fucosyllactose
CN103703012A (zh) 乳糖-n-四糖的制造
US5830871A (en) Inhibitors of E-, P- and L-selectin binding
ES2635413T3 (es) Un proceso eficiente y escalable para la fabricación de fondaparinux sódico
CN103958537A (zh) Hmo核心结构的合成
CA2960056A1 (en) Method for preparing 2'-o-fucosyllactose
CN108699093A (zh) 制备2′-o-岩藻糖基乳糖的方法
Yamada et al. Syntheses and Vero toxin-binding activities of carbosilane dendrimers periphery-functionalized with galabiose
Suthagar et al. Unexpected furanose/pyranose equilibration of N-glycosyl sulfonamides, sulfamides and sulfamates
Skelton et al. Investigations into the Chemistry of Some 1, 6-Epithio and 1, 6-Episeleno ß-D-Glucopyranoses
Chen et al. Studies on the stereoselective synthesis of a protected α-d-Gal-(1→ 2)-d-Glc fragment
CN108602845A (zh) 生产2’-o-岩藻糖基乳糖的方法
CA1247608A (fr) Derives a structure acide uronique, leur preparation et leurs applications biologiques
JP3163359B2 (ja) 硫酸化オリゴ糖化合物
KR100966986B1 (ko) １，２―트랜스글리코시드 화합물의 제조방법
CN106608893B (zh) 磷酰甘露五糖及其衍生物，及其制备方法和应用
CN106565800B (zh) 三糖对甲氧基苯酚苷类化合物及其制备方法
Nagai et al. Regio-and chemoselective manipulation under mild conditions on glucosamine derivatives for oligosaccharide synthesis and its application toward N-acetyl-d-lactosamine and Lewis X trisaccharide
Ando et al. Renewed synthetic approach to gangliosides exploiting versatile and powerful synthetic units
TWI737687B (zh) 具有硫酸基及/或磷酸基之糖之製造方法
JP3163358B2 (ja) 硫酸化オリゴ糖化合物
Nisic Stereoselective Synthesis of Glycosyl Amides by Traceless Staudinger Ligation of Glycosyl Azides
JP3101710B2 (ja) 硫酸化オリゴ糖化合物
Capozzi et al. Selective Glycosidation Reactions and Their Use in Medicinal Chemistry
Grey Developing a Sacrificial Protective Group to Deliver the 1, 2 cis Glycoside

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20181023