一种复合菌菇提取液及其制备方法和在化妆品中的应用
技术领域
本发明属于化工领域,涉及一种化妆品,具体来说是一种复合菌菇提取液及其制备方法和在化妆品中的应用。
背景技术
抗衰老是化妆品研发领域经久不衰的热门话题。引起皮肤衰老的主要原因是由于皮肤细胞内自由基的过多堆积。起初,皮肤细胞清除自由基的能力和自由基的总量保持着一种动态平衡的状态,然而随着年龄的增长,皮肤细胞清除体内自由基的能力不断下降,越来越多的自由基在细胞内堆积。这些细胞内多余的自由基便会开始攻击皮肤细胞,导致细胞的损伤以及衰亡,令皮肤出现皱纹、松弛、暗淡无光等一系列问题。与此同时,随着年龄的增加,皮肤的保湿能力也不断下降,长期处于干燥缺水状态同样也会引发一定的皮肤衰老问题。因此,解决皮肤的衰老问题的重要措施之一就是通过清除体内过剩的自由基,并充分补水保湿,从而延缓皮肤细胞的衰老。
决定肤色的物质是皮肤角质层中的黑色素含量。黑色素的产生是由于黑色素细胞受到外界环境的刺激,如紫外线的照射、污染物以及自由基的刺激,这些因素激活了黑色素细胞中的酪氨酸酶,并通过一系列的反应产生了黑色素。这些黑色素释放到黑色素细胞外并且沉积在皮肤角质层中,久而久之皮肤就会变黑。因此,抑制黑色素细胞内的酪氨酸酶活性是美白的有效手段之一。
现有技术手段中,常用的一些抗氧化剂和美白剂来达到抗氧化和美白的效果,如VC、谷胱甘肽等物质,但是这些物质功效单一、且稳定性较差,容易受到温度和光照的影响而发生自氧化作用,最终导致产品功效的不稳定。
榆黄菇是一种常见的食用菌,在我国大部分地区都有分布,目前榆黄菇的开发利用主要集中在食品方面,未见榆黄菇应用于化妆品中的相关技术报道。
发明内容
有鉴于此,本发明目的在于提供一种复合菌菇提取液及其制备方法和在化妆品中的应用。本发明提供的复合菌菇提取液稳定性好、抗氧化能力强,具备抗氧化和美白等多种功效,是一种天然多功效化妆品用菌菇提取液。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
一种复合菌菇提取液的制备方法,包括以下步骤:
(1)一个使用水对榆黄菇子实体粉末进行浸提的步骤,将榆黄菇浸提液依次进行减压浓缩和脱色,得到榆黄菇提取液;所述榆黄菇提取液的浓度为0.5~2g/mL;
(2)一个使用水对灵芝子实体粉碎物进行浸提的步骤,将灵芝浸提液进行减压浓缩,得到灵芝提取液;所述灵芝提取液的浓度为0.1~0.3g/mL;
(3)将所述榆黄菇提取液和所述灵芝提取液混合,得到复合菌菇提取液;所述榆黄菇提取液和灵芝提取液的体积比为1:1~1.5;
所述步骤(1)和步骤(2)没有时间顺序的限制。
优选的,所述步骤(1)中浸提的料液比为1g:35~45mL。
优选的,所述步骤(1)中浸提的温度为80~100℃,浸提的时间为30~60min。
优选的,所述在步骤(1)中减压浓缩的温度为50~65℃,减压浓缩的压力为-1~-0.5MPa。
优选的,所述步骤(1)中的脱色为树脂脱色;所述脱色用树脂为阴离子交换树脂。
优选的,所述脱色的时间为20~30h。
优选的,所述步骤(2)中浸提的料液比为1g:20~30mL。
优选的,所述在步骤(2)中减压浓缩的温度为50~65℃,减压浓缩的压力为-1~-0.5MPa。
本发明提供了上述方案所述制备方法制备的复合菌菇提取液,所述复合菌菇提取液中的活性成分包括:蛋白质、多糖、氨基酸、麦角硫因、多肽、多酚类物质和黄酮类物质。
本发明提供了上述方案所述复合菌菇提取液在化妆品中的应用。
本发明提供了一种复合菌菇提取液的制备方法,本发明以榆黄菇子实体为原料,使用水浸提、减压浓缩和脱色的方法制备榆黄菇提取液,以灵芝子实体为原料,通过水浸提和减压浓缩得到灵芝提取液,再将榆黄菇提取液和灵芝提取液复配,得到复合菌菇提取液。本发明制备方法简单,步骤少;最终所得复合菌菇提取液功能性成分种类丰富、具有良好的抗氧化、美白及保湿功能,在高温及光照条件下有良好的稳定性。
本发明和已有技术相比,其技术进步是显著的。实施例结果表明,每毫升复合菌菇提取液中功效成分的含量为:蛋白质41~54mg,多糖24~32mg,总氨基酸13~15mg,麦角硫因2~3mg,多肽15~17mg,总酚1.1~2.3mg,总黄酮0.7~0.9mg;且本发明提供的复合菌菇提取液的过氧化氢清除能力和VC相当,自由基清除能力和还原能力较强,涂抹本发明的复合菌菇提取液后,皮肤的水分增长率可以达到38.9%,说明本发明提供的复合菌菇提取液具有较好的保湿能力。
附图说明
图1为VC对照组的过氧化氢清除能力测试图;
图2为本发明实施例1制备的复合菌菇提取液的过氧化氢清除能力测试图;
图3为VC对照组的羟基自由基清除能力测试图;
图4为本发明实施例1制备的复合菌菇提取液的羟基自由基清除能力测试图;
图5为VC对照组的还原能力测试图;
图6为本发明实施例1制备的复合菌菇提取液的还原能力测试图;
图7为本发明实施例2制备的复合菌菇提取液的保湿能力测试图;
图8为本发明实施例2制备的复合菌菇提取液的光照稳定性测试图;
图9为本发明实施例2制备的复合菌菇提取液的高温稳定性测试图。
具体实施方式
实施例1
本发明提供了一种复合菌菇提取液的制备方法,包括以下步骤:
(1)使用水对榆黄菇子实体粉末进行浸提,将榆黄菇浸提液依次进行减压浓缩和脱色,得到榆黄菇提取液;所述榆黄菇提取液的浓度为0.5~2g/mL;
(2)使用水对灵芝子实体粉碎物进行浸提,将灵芝浸提液进行减压浓缩,得到灵芝提取液;所述灵芝提取液的浓度为0.1~0.3g/mL;
(3)将所述榆黄菇提取液和所述灵芝提取液混合,得到复合菌菇提取液;所述榆黄菇提取液和灵芝提取液的体积比为1:1~1.5;
所述步骤(1)和步骤(2)没有时间顺序的限制。
本发明使用水对榆黄菇子实体粉末进行浸提,将榆黄菇浸提液依次进行减压浓缩和脱色,得到榆黄菇提取液。在本发明中,所述榆黄菇子实体粉末的粒径优选为100~200目,更优选为130~150目;本发明优选将榆黄菇子实体干燥后用粉碎机粉碎,得到榆黄菇子实体粉末;本发明对所述干燥的具体方法没有特殊要求,能够得到干燥的榆黄菇子实体即可;本发明对榆黄菇子实体的来源没有特殊要求,使用市售的榆黄菇子实体即可。
得到榆黄菇子实体粉末后,本发明用水对榆黄菇子实体粉末进行浸提,得到浸提液。在本发明中,所述浸提的料液比优选为1g:35~45mL,更优选为1g:40mL;所述浸提的温度优选为80~100℃,更优选为85~95℃,所述浸提的时间优选为30~60min,更优选为40~50min。在本发明的具体实施例中,优选将榆黄菇子实体粉末充分浸没在水中进行浸提。
浸提完成后,本发明优选将榆黄菇子实体和水的混合物进行减压抽滤,所得滤液即为浸提液。本发明通过浸提将榆黄菇子实体中的可溶性有效成分提取到水相中。
得到浸提液后,本发明将榆黄菇浸提液进行减压浓缩,得到浓缩液。在本发明中,所述减压浓缩的温度优选为50~65℃,更优选为55~60℃,减压浓缩的压力优选为-1~-0.5MPa,更优选为-0.6~-0.8MPa;本发明通过减压浓缩去除浸提液中的部分水分,使有效成分得到浓缩。
得到浓缩液后,本发明对浓缩液进行脱色,得到榆黄菇提取液。在本发明中,所述脱色优选为树脂脱色;所得脱色用树脂优选为阴离子交换树脂,更优选为D303树脂;所述脱色的时间优选为20~30h,更优选为24h;本发明对树脂脱色的具体操作方法没有特殊要求,使用本领域技术人员熟知的操作方法即可。本发明通过脱色将浓缩液中的小分子色素去除。
在本发明中,所述榆黄菇提取液的浓度为0.5~2g/mL(本发明所述提取液的浓度是指0.5~2g样品用水提取后浓缩定容至1mL),优选为1g/mL;所述榆黄菇提取液的主要活性成分为包括多肽、黄酮、总酚、氨基酸、蛋白质、麦角硫因和多糖,这些有效成分使榆黄菇提取液具备良好的抗氧化能力、美白和保湿能力。
本发明使用水对灵芝子实体粉碎物进行浸提,将灵芝浸提液进行减压浓缩,得到灵芝提取液。本发明优选将灵芝子实体干燥后再进行粉碎,本发明对所述干燥的具体条件没有特殊要求,能够得到干燥的灵芝实体即可;本发明选使用粉碎机对灵芝子实体进行粉碎,所得粉碎物为絮状物;本发明对灵芝的来源没有特殊要求,使用市售的灵芝即可,优选为黄山一号灵芝。
得到灵芝子实体粉末后,本发明用水对灵芝子实体粉末进行浸提,得到浸提液。在本发明中,所述浸提的料液比优选为1g:35~45mL,更优选为1g:40mL;所述浸提的温度优选为80~100℃,更优选为85~95℃,所述浸提的时间优选为30~60min,更优选为40~50min。在本发明的具体实施例中,优选将榆黄菇子实体粉末充分浸没在水中进行浸提。
浸提完成后,本发明优选将灵芝子实体和水的混合物进行减压抽滤,所得滤液即为浸提液。
得到浸提液后,本发明将灵芝浸提液进行减压浓缩,得到浓缩液。在本发明中,所述减压浓缩的温度优选为50~65℃,更优选为55~60℃,减压浓缩的压力优选为-1~-0.5MPa,更优选为-0.6~-0.8MPa;本发明通过减压浓缩去除浸提液中的部分水分,使有效成分得到浓缩。
在本发明中,所述灵芝提取液的浓度为0.1~0.3g/mL,优选0.2g/mL,所述灵芝提取液中的主要成分包括多糖、蛋白质、多肽、黄酮、多酚和氨基酸。
得到榆黄菇提取液和灵芝提取液后,本发明将所述榆黄菇提取液和所述灵芝提取液混合,得到复合菌菇提取液。在本发明中,所述榆黄菇提取液和灵芝提取液的体积比为1:1~1.5,优选为1:1。
本发明提供了上述方案所述制备方法制备的复合菌菇提取液,所述复合菌菇提取液中的活性成分包括:蛋白质、多糖、氨基酸、麦角硫因、多肽、多酚类物质和黄酮类物质。本发明将榆黄菇提取液和灵芝提取液复配,所得复合提取液功效成分种类丰富、含量高、同时具备抗氧化、美白、保湿等多重功能,且榆黄菇提取液和灵芝提取液都经过高温提取,稳定性强,不易受到光照和温度的影响,是一种天然多功效的化妆品用复合菌菇提取液。
本发明提供了上述方案所述复合菌菇提取液在化妆品中的应用。本发明对复合菌菇提取液在化妆品中的具体应用方法没有特殊要求,使用本领域技术人员熟知的方法进行应用即可,具体的如将复合菌菇提取液应用于化妆水、乳液或膏霜中。
下面结合实施例对本发明提供的一种复合菌菇提取液及其制备方法和在化妆品中的应用进行详细的说明,但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例2
(1)将干燥的榆黄菇子实体用粉碎机充分粉碎成平均粒径为100目的细粉。
(2)将步骤(1)中得到的50g原料粉末用40倍的纯水充分浸没,控制提取温度为80℃,提取时间为30min。
(3)将步骤(2)中得到的提取液用减压抽滤获得上清液。
(4)将步骤(3)中得到的上清液用旋转蒸发仪浓缩,旋转蒸发仪的压力为-1MPa,蒸发温度为50℃,将提取液浓缩至1g/mL。
(5)将步骤(4)得到的浓缩液用D303脱色树脂脱色24h,所得的浓缩液即为榆黄菇提取液。
(6)将干燥的黄山一号灵芝子实体用粉碎机粉碎成絮状。
(7)取步骤(6)中得到的絮状灵芝子实体50g用20倍的纯水充分浸没,控制提取温度为90℃,提取时间为3h。
(8)将步骤(7)中得到的黄山一号灵芝提取液用减压抽滤获得上清液。
(9)将步骤(8)中得到的上清液用旋转蒸发仪浓缩,旋转蒸发仪的压力为-1MPa,蒸发温度为50℃,将提取液浓缩至0.2g/mL,得到黄山一号灵芝提取液。
(10)将所得榆黄菇提取液和黄山一号灵芝提取液按1:1的比例复配,所得混合液即为复合菌菇提取液。
每毫升复合菌菇提取液中功效成分的含量约为:蛋白质42mg,多糖24mg,总氨基酸13mg,麦角硫因2.1mg,多肽15.4mg,总酚1.1mg,总黄酮0.7mg。
实施例3
(1)将干燥的榆黄菇子实体用粉碎机充分粉碎成平均粒径为150目的细粉。
(2)将步骤(1)中得到的原料粉末用35倍的纯水充分浸没,控制提取温度为90℃,提取时间为40min。
(3)将步骤(2)中得到的榆黄菇提取液用减压抽滤获得上清液。
(4)将步骤(3)中得到的上清液用旋转蒸发仪浓缩,得到榆黄菇水提浓缩液,蒸发压力控制在-0.75MPa,蒸发温度控制为60℃。
(5)将步骤(4)得到的浓缩液用D303脱色树脂脱色24h,所得的浓缩液即为榆黄菇提取液,所得的榆黄菇提取液的浓度为1g/mL。
(6)将干燥的黄山一号灵芝子实体用粉碎机粉碎成絮状。
(7)将步骤(6)中得到的絮状灵芝子实体用25倍的纯水充分浸没,控制提取温度为95℃,提取时间为3.5h。
(8)将步骤(7)中得到的黄山一号灵芝提取液用减压抽滤获得上清液。
(9)将步骤(8)中得到的上清液用旋转蒸发仪浓缩,得到黄山一号灵芝提取液,蒸发压力控制在-0.75MPa,蒸发温度控制为60℃,所得的黄山一号灵芝提取液的浓度为0.2g/mL。
(10)将步骤(5)中得到的榆黄提取液和步骤(8)得到的黄山一号灵芝提取液按1:1的比例复配,所得混合液即为复合菌菇提取液。
每毫升复合菌菇提取液中功效成分的含量约为:蛋白质52mg,多糖30mg,总氨基酸14.4mg,麦角硫因2.9mg,多肽16.8mg,总酚2.1mg,总黄酮0.8mg。
实施例4
(1)将干燥的榆黄菇子实体用粉碎机充分粉碎成平均粒径为200目的细粉。
(2)将步骤(1)中得到的原料粉末用45倍的纯水充分浸没,控制提取温度为100℃,提取时间为60min。
(3)将步骤(2)中得到的榆黄菇提取液用减压抽滤获得上清液。
(4)将步骤(3)中得到的上清液用旋转蒸发仪浓缩,得到榆黄菇水提浓缩液。
(5)将步骤(4)得到的浓缩液用D303脱色树脂脱色24h,所得的浓缩液即为榆黄菇提取液,旋蒸压力控制在-0.5MPa,蒸发温度控制为65℃,所得的榆黄菇提取液的浓度为1g/mL。
(6)将干燥的黄山一号灵芝子实体用粉碎机粉碎成絮状。
(7)将步骤(6)中得到的絮状灵芝子实体用30倍的纯水充分浸没,控制提取温度为100℃,提取时间为4h。
(8)将步骤(7)中得到的黄山一号灵芝提取液用减压抽滤获得上清液。
(9)将步骤(8)中得到的上清液用旋转蒸发仪浓缩,得到黄山一号灵芝提取液,旋蒸压力控制在-0.5MPa,蒸发温度控制为65℃,所得的黄山一号灵芝提取液的浓度为0.2g/mL。
(10)将步骤(5)中和步骤(8)中得到的榆黄提取液和黄山一号灵芝提取液按1:1的比例复配,所得混合液即为复合菌菇提取液。
每毫升符合菌菇提取液中功效成分的含量约为:蛋白质53mg,多糖31mg,总氨基酸15mg,麦角硫因3mg,多肽16mg,总酚2.3mg,总黄酮0.9mg。
复合菌菇提取液性能测试:
(1)美白能力测试(酪氨酸酶抑制能力)
96孔板中加入浓度为2.0mmoL/L的L-酪氨酸180uL,再加入10uL不同浓度的实施例2所得复合菌菇提取液,吹打混匀,30℃保温10min。加入酪氨酸酶溶液10uL,摇匀。30℃保温条件下,475nm处每隔1min测试吸光度值,共测试25min。根据酶促动力学曲线,得出样品组的斜率A1,和空白组斜率A0,抑制率计算公式为:
结果显示,稀释10倍后,复合菌菇提取液的酪氨酸酶抑制能力为16.5%,说明其存在一定的美白能力。
(2)抗氧能力测试
(a)H2O2清除能力测定
采用化学发光仪测定实施例1所得复合菌菇提取液的H2O2清除能力,具体方法如下:配制6%过氧化氢,鲁米诺采用0.1mol/L的Na2CO3配制成1×10-3mol/L,0.05mol/L pH=9.5的NaHCO3-Na2CO3缓冲溶液与1×10-3mol/L的鲁米诺以17:1的比例配制成鲁米诺和碳酸盐缓冲液的混合溶液。测量时向发光池中注入10μL不同稀释倍数的复合菌菇提取液,依次注入H2O2溶液和150μL鲁米诺-碳酸盐缓冲液混合物,反应30s,每隔2秒记录实验数据,得到峰值A1,将去离子水代替试样得到峰值A0,清除率计算公式为:
以VC作为阳性对照,操作方法和上述方法一致。
所得结果如图1~2所示,其中图1为VC的H2O2清除能力测试图,图2为实施例1所得榆黄菇提取液的H2O2清除能力测试图。根据图1~图2可以看出,复合菌菇提取液具有很强的过氧化氢清除能力,清除能力与提取液的浓度呈正比,菌菇提取液在稀释20000倍后,仍具有20%左右的H2O2清除率。由计算可知,VC的IC50值为4.530μg/mL,菌菇提取液稀释4000倍时,与该浓度下的VC具有相当的H2O2清除能力。实验结果表明,化妆品中仅需添加少量复合菌菇提取液即可获得良好的H2O2清除能力。
(b)羟基自由基清除能力测试
采用化学发光仪测定实施例1所得复合菌菇提取液的·OH清除能力,具体方法如下:
浓度为配置6%过氧化氢,1×10-3mol/L的邻菲罗啉溶液,氯化亚铜采用1×10- 3mol/L盐酸配制成1×10-3mol/L的浓度,鲁米诺采用0.1mol/L的Na2CO3配制成1mmol/L,0.05mol/L pH=8.5的NaHCO3-Na2CO3缓冲溶液与1×10-3mol/L的鲁米诺以17:1的比例配制成鲁米诺和碳酸盐缓冲液的混合溶液。测量时向发光池中注入10μL的样品,10μL过氧化氢溶液、10μL氯化亚铜溶液、10μL邻菲罗啉溶液以及150μL的鲁米诺-碳酸盐缓冲液混合物,反应30s,每隔2秒记录实验数据,得到峰值A1,将去离子水代替试样得到峰值A0,清除率计算公式为:
以VC作为阳性对照,操作方法和上述方法一致。
所得结果如图3~4所示,其中图3为VC的·OH清除能力测试图,图4为实施例1所得复合菌菇提取液的·OH清除能力测试图;从图3~4中可以看出,复合菌菇提取液具有一定的·OH自由基清除能力,根据实验数据可得,当原液稀释100倍后,·OH自由基的清除率约为50%,相当于浓度为0.13mg/mL的VC对·OH自由基的清除能力。
(c)还原能力测试
采用分光光度仪测定实施例1所得复合菌菇提取液的还原能力,具体方法如下:
将1mL不同浓度的样品加入2.5mL磷酸缓冲液,再加入2.5mL 1%的K3Fe(CN)6在50℃下培养20min,加入2.5mL 10%的三氯乙酸混合后3000r/min离心10min,取上清液2.5mL,并加2.5mL蒸馏水和0.1%的FeCl3 0.5mL反应10min后,在700nm处测吸光度,吸光度数值越大,还原力越大。
以VC作为阳性对照,操作方法和上述方法一致。
所得结果如图5~6所示,其中图5为VC的还原能力测试图,图6为实施例1所得复合菌菇提取液的还原能力测试图。根据图5~6可以看出,复合菌菇提取液的浓度越大,其还原能力越强,其浓度与还原力呈正比,当复合菌菇提取液的稀释100倍后,还原力的吸光度值为0.5535,相当于VC的浓度达到0.06mg/mL时的还原力,说明菌菇提取液具有良好的还原力,进一步证实了菌菇提取液的抗氧化能力优异。
(3)保湿能力测试
采用CM825皮肤水分测试仪测定实施例2所得复合菌菇提取液的人体保湿能力,具体方法如下:选择25名女性志愿者,进行1h皮肤保湿实验。首先将志愿者的手臂洗净并擦干,在温度为(21±1)℃,相对湿度为55%±5%的室内环境中平衡15min,避免剧烈运动或情绪激动。在各志愿者的手臂上划上3cm×3cm的区域作为测试的区域。用CM825皮肤水分测试仪测定所划区域的皮肤水分含量,记为W0。以水作为空白组,复合菌菇提取液作为测试组,将100μL待测液均匀的涂抹在测试区域,测定10、20、30、40、50、60min时的皮肤水分含量,记为W1。
所得实验结果如图7所示,根据图7可以看出,复合菌菇提取液组的皮肤水分增长率在1h内均大于空白组,说明复合菌菇提取液具有良好的保湿性能。10min时,皮肤中水分含量最高,这是由于短时间内水分被人体皮肤吸收,并未散失,因此此时的皮肤中水分含量充足。在20min时,空白组的水分含量大幅下降,皮肤水分增长率仅为8.6%,说明空白组并不能很好的维持皮肤中所增加的水分。然而,涂抹了复合菌菇提取液的受试区域,其皮肤水分增长率达到了38.9%,下降幅度较小,说明复合菌菇提取液具有能减缓皮肤水分散失的能力。由此可见,复合菌菇提取液可作为化妆品良好的保湿剂。
(4)稳定性测试
稳定性测试以H2O2清除活性为指标考察实施例2所得复合菌菇提取液是否受光照和温度的影响。具体方法如下:
光照的影响:将复合菌菇提取液置于白炽灯光下照射24h,测定实验开始后0h、4h、8h、12h、24h时待测样的H2O2清除活性。H2O2清除活性测定方法同上。
高温的影响:将复合菌菇提取液于100℃加热24h,测定实验开始后0h、1h、2h、4h、8h、12h、24h时待测样的H2O2清除活性。H2O2清除活性测定方法同上。
光照对复合菌菇提取液H2O2清除活性的影响如图8所示。高温对复合菌菇提取液H2O2清除活性的影响如图9所示。由图可见,光照24h内,复合菌菇提取液的抗氧化活性并未受到影响,说明复合菌菇提取液在光照条件下稳定。复合菌菇提取液在100℃高温下加热24h,其H2O2清除活性并未受到高温的破坏而导致活性下降,说明复合菌菇提取液在高温条件下稳定。由此可见,复合菌菇提取液具有良好的光稳定性和热稳定性。
按照相同的方法对实施例3~4所得复合菌菇提取液进行美白能力测试、抗氧化能力测试、保湿能力测试和稳定性测试,所得结果和上述结果相似。
由以上实施例可知,本发明提供的复合菌菇提取液具有多种功效成分,且功效成分含量高,同时具备抗氧化、美白、保湿等多重功能,且复合菌菇提取液稳定性强,不易受到光照和温度的影响,是一种天然多功效的化妆品用复合菌菇提取液。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。