CN108617779B - 一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物，以骆驼奶和牛磺酸以特定的比例进行复配，组合物中蛋白质含量≥20%，11.5%≥牛磺酸含量≥8.3%。与现有技术相比，本发明制备的驼奶片能够在提高骆驼奶对化学性肝损伤保护作用效果的同时保证其效果的稳定性，并且缩短起效时间，缩短达最大药效时间，降低骆驼奶使用量、降低生产成本，对化学性肝损伤具有显著保护作用，对保健食品加工技术领域具有广泛的实用性。

Description

一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物

技术领域

本发明涉及食品加工技术领域，具体的，涉及一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物的技术领域。

技术背景

近年来，由于长期大量饮酒引起的酒精性肝病变、服用药物引起药物性肝损害及环境毒物或其他物质引起的肝损伤等一系列化学性肝损伤己越来越成为威胁人类健康的疾病。目前，我国对化学性肝损伤有保护功能的保健食品有3类：第1类是由灵芝、大豆、枸杞、茶、黄芪、芦笋、当归、山楂、香菇、葛根等中草药制成。从中医角度看，这类植物具有活血化瘀、清肝解毒、强肝益肝作用，从有效成分看，这些保健食品中含多糖、黄酮、苷类、萜类等成分，如大豆皂苷、银杏黄酮、香菇多糖，具有提高免疫力、抗脂质过氧化、抗肿瘤、抗衰老等活性，该类保健食品制备成本较高，而且中药味浓、口感较差，并且可能存在毒性成分会增加肝脏负担；第2类为目前公认的具有抗氧化、促进细胞增殖、提高免疫能力的营养物质，如维生素E、维生素C等，维生素类治疗化学性肝损伤有见效慢的缺点，需要和其他药物长期辅助食用；第3类是由一些特殊动物如牡蛎、毛虫甘苦参、甲鱼、蚂蚁等研制而成，这一类产品的原材料不易获取。

骆驼奶营养构成独特，易于消化吸收，富含乳铁蛋白、免疫球蛋白、过氧化物酶、溶菌酶等保护性蛋白，具有极高的营养和保健价值。《本草纲目》记载：“骆驼奶，冷，无毒。补中益气，壮筋骨，令人不饥”。《维吾尔常用药材》记载：“骆驼奶，性味甘醇、无黏胶感、属微辛，大补益气，补五脏七损，强壮筋骨，填精髓，耐饥饿，止消渴”。现代药理学研究表明，骆驼奶具有保肝、抗氧化、抗炎、抗菌等作用，还可用于治疗肺结核、女性疾病，辅助治疗癌症、糖尿病，预防儿童佝偻病等。

牛磺酸是广泛存在于人和动物组织细胞内的游离氨基酸，具有广泛的生物学效应，是调节机体正常生理功能的重要物质，体内缺乏会导致多种疾病的病理过程。临床和基础研究已经证明，牛磺酸对肝损伤有保护作用。但是，牛磺酸用于预防化学性肝损伤不仅服用量大，而且服用时间较长，有的长达12周(梁健等.世界华人消化杂志， 2003.)，即使联合用药也有服用长达6-24周的(谭实美等.中国实验方剂学杂志，2015.曹雯等.中国实验方剂学杂志，2015.)。

骆驼奶在保肝方面虽有益处，但在对化学性肝损伤辅助保护作用的保健食品中还未见应用。并且，受品种、产地、产期、饲养条件等多种因素的影响，骆驼乳成分会有较大波动进而导致发挥肝保护作用的剂量与时间并不稳定。骆驼奶粉发挥肝保护作用的有效剂量范围很大，可达15000mg/kg·d甚至更高，这也与苏德奇等的报道一致(苏德奇等.毒理学杂志，2013.)。对于资源相对稀缺、价格较贵的驼奶来说，较高的服用量显然不利于其在相关保健食品中的广泛应用。牛磺酸在对化学性肝损伤辅助保护作用保健食品中的应用往往是与甘草、葛根等中草药或维生素C、肌醇、烟酰胺等配伍，中草药配方本身可能含有一些毒性成分增加肝脏负担，维生素类配方则需要长期服用。针对上述问题，本发明首次将骆驼奶和牛磺酸配伍，反复筛选确定最优配比，明显提升组合物对化学性肝损伤的辅助保护作用，在减少服用时间与服用量的同时，保证组合物发挥保健功效的稳定性。此外，本发明组合物完全保留了食品性质及特有风味，易于接受，长期服用也没有安全隐患。

发明内容

目前，尚没有骆驼奶和牛磺酸配伍制备对化学性肝损伤有辅助保护功能的保健食品。本发明通过筛选牛磺酸添加量使其与骆驼奶的协同保护作用达到最大，加速乙醇代谢、提升抗氧化应激作用、促进肝脏脂类代谢。与现有技术相比，本发明驼奶组合物服用时间短，服用量少，辅助保护效果好且稳定，还有利于降低骆驼奶使用量和生产成本，并且本发明驼奶组合物完全保留食品性质，即使长期服用也没有安全隐患，在保健食品加工技术领域具有广泛的实用性。

本发明为实现以上技术目的，提供一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物，按照重量份数计，包括骆驼奶粉85份-95份，牛磺酸5份-15份。

优选的，骆驼奶粉87份-92份，牛磺酸8份-13份。组合物中，蛋白质含量≥20％，其中α-乳白蛋白、乳铁蛋白、免疫球蛋白含量之和≥6％。

更加优选的，驼奶组合物中骆驼奶粉88.5份-91.5份，牛磺酸8.5 份-11.5份。组合物中蛋白质含量≥20％，11.5％≥牛磺酸含量≥8.3％。

同时，本发明提供一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物的制备方法，具体包括如下步骤：

(1)选择合格新鲜骆驼乳经过滤利用净乳机净乳，根据骆驼乳检测结果调整脂肪含量、加蔗糖进行标准化；

(2)标准化后均质，杀菌，浓缩后进行喷雾干燥，经过喷雾干燥的骆驼奶粉晾凉，筛分即得驼奶粉；

(3)将驼奶粉和牛磺酸按照等量递增的方法充分混合。

优选的，本发明中新鲜骆驼乳调节净乳参数使得净乳结束以后最终温度控制在6℃-8℃，均质后采用超高压杀菌，真空浓缩到原体积的1/4，真空浓缩后乳温在47℃—50℃，进行喷雾干燥，喷雾干燥条件为进风温度为120℃，进料速度为10.4mL/min，经过喷雾干燥的骆驼奶粉凉到25℃以下，筛分即得驼奶粉，将驼奶粉和牛磺酸按照等量递增的方法充分混合后压片，压力控制在58-65MPa，每片厚度为 5士0.5mm压片。

通过实施本发明具体的发明内容，可以达到以下效果:

(1)本发明通过骆驼奶和牛磺酸的合理配伍，充分发挥组合物的协同保护作用，加速乙醇代谢、提升抗氧化应激作用、促进肝脏脂类代谢，缩短服用时间，减少服用量。试验证明，本发明驼奶组合物给药20d即起效(P<0.05)，给药40d效果明显提升(P<0.01)，而驼奶粉给药30d起效(P<0.05)，在试验剂量下给药时间延长效果并未见到明显提升。本发明驼奶组合物的起效时间及保护效果均明显优于单独使用驼奶粉。动物实验证明，经口给予小鼠500、1000mg/kg 的本发明驼奶组合物30d，能够明显降低酒精性肝损伤模型小鼠肝脏匀浆中MDA含量(P<0.05)，升高GSH含量(P<0.05)，降低TG 含量(P<0.01)，1000mg/kg组还能够减轻酒精性肝损伤小鼠肝细胞脂肪变性作用(P<0.05)。这一服用量也明显小于苏德奇等报道的 5000、15000mg/kg(苏德奇等.毒理学杂志，2013.)，本发明组合物对化学性肝损伤的保护作用比单独使用驼奶粉更佳。

(2)牛磺酸虽然具有肝保护作用，但是其协同作用因配方组成、添加量不同而表现出较大差异。本发明中牛磺酸与驼奶配伍，其协同保护作用并不是随组合物中牛磺酸添加量的增加而增强，而是在较低添加量范围内，协同保护作用随牛磺酸添加量的增加而增强，但当达到一定量，其协同作用反而随牛磺酸添加量的增加而明显下降。因而，本发明中牛磺酸的添加量是其与驼奶发挥协同增效作用的关键点。通过反复筛选、对比最终确定了牛磺酸的最优添加量，从而能够保证组合物对化学性肝损伤辅助保护作用的加强，保证服用时间与服用量的减少。

(3)目前，驼奶粉的市场价格为1500元/公斤左右，而牛磺酸的价格仅为30-40元/公斤。通过组方发挥二者的协同作用，减少服用量与服用时间，一定程度上也有利于降低生产成本和消费成本。

具体实施方式

下面，举实施例说明本发明，但是，本发明并不限于下述的实施例。

本发明中使用的原料和试剂:骆驼奶、牛磺酸、CCl₄为市场常见原料，通过购买即可获得。

本发明中使用的仪器ALT试剂盒、AST试剂盒、低温高速离心机、电子称、电子天平、手术器械、JY92-Ⅱ型超声波细胞粉碎仪、离心机、MD酶标仪、振荡器、恒温水浴箱、AU-640生化分析仪、无水乙醇、甘油三酯(TG)试剂盒、总蛋白(TP)试剂盒、丙二醛 (MDA)试剂盒、还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒、冷冻切片机。

另外，在下述的说明中，如无特别说明，％皆指m/m质量百分比，本发明中选用的所有试剂、原料和仪器都为本领域熟知选用的，均可从市场购买获得，但不限制本发明的实施，其他本领域熟知的一些试剂和设备都可适用于本发明以下实施方式的实施。

实施例一：

本发明提供一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物的制备方法，具体采用如下步骤制备：新鲜采集的骆驼乳经净乳和标准化后，进行均质、杀菌、浓缩、喷雾干燥、凉粉、筛分即得驼奶粉。将充分混合，即得。该混合物可以制备成片剂等各种固体制剂，也以杀菌后的驼奶与牛磺酸直接配伍制成各种液体制剂。

本实施例中，骆驼奶粉为85g-95g，牛磺酸为5g-15g。通过使用本实施例提供的方法，制备的组合物对化学性肝损伤保护作用明显增强，能缩短服用时间、减少驼奶服用量，对保健食品加工技术领域具有广泛的实用性。

实施例二：

将新鲜采集的骆驼乳经净乳和标准化后，进行均质、杀菌、浓缩、喷雾干燥、凉粉、筛分即得骆驼奶粉。将驼奶粉和牛磺酸按照等量递增的方法充分混合，即得。

本实施例中，骆驼奶粉为85g，牛磺酸为15g，组合物中，蛋白质含量≥20％。

实施例三：

将新鲜采集的骆驼乳经净乳和标准化后，进行均质、杀菌、浓缩、喷雾干燥、凉粉、筛分即得驼奶粉。将驼奶粉、牛磺酸按照比例充分混合，即得。

本实施例中，驼奶粉为88.5g，牛磺酸为11.5g，组合物中，蛋白质含量≥20％，其中α-乳白蛋白、乳铁蛋白、免疫球蛋白含量之和≥6％， 11.5％≥牛磺酸含量≥8.3％。

实施例四：

将新鲜采集的骆驼乳经净乳和标准化后，进行均质、杀菌、浓缩、喷雾干燥、凉粉、筛分即得驼奶粉。将驼奶粉和牛磺酸按照等量递增的方法充分混合，即得。

本实施例中，驼奶粉为95g，牛磺酸为5g。

实施例五：

将新鲜采集的骆驼乳经净乳和标准化后，进行均质、杀菌、浓缩、喷雾干燥、凉粉、筛分即得驼奶粉。将驼奶粉、牛磺酸按照比例充分混合，即得。

本实施例中，驼奶粉为91.5g，牛磺酸为8.5g。

实施例六：

将新鲜采集的骆驼乳经净乳和标准化后，进行均质、杀菌、浓缩、喷雾干燥、凉粉、筛分即得驼奶粉。将驼奶粉、牛磺酸按照比例充分混合，即得。

本实施例中，87g，牛磺酸13g。组合物中，蛋白质含量≥20％，其中α-乳白蛋白、乳铁蛋白、免疫球蛋白含量之和≥6％。

实施例七：

将新鲜采集的骆驼乳经净乳和标准化后，进行均质、杀菌、浓缩、喷雾干燥、凉粉、筛分即得驼奶粉。将驼奶粉、牛磺酸按照比例充分混合，即得。

本实施例中，92g，牛磺酸8g。组合物中，蛋白质含量≥20％，其中α-乳白蛋白、乳铁蛋白、免疫球蛋白含量之和≥6％。

实施例八：

将新鲜采集的骆驼乳利用净乳机净乳，调节净乳参数使得净乳结束以后最终温度控制在6℃-8℃均质，均质后采用超高压杀菌，真空浓缩到原体积的1/4，真空浓缩后乳温在47℃-50℃，进行喷雾干燥，喷雾干燥条件为进风温度为120℃，进料速度为10.4mL/min，经过喷雾干燥的骆驼奶粉凉到25℃以下，筛分即得驼奶粉，将驼奶粉和牛磺酸按照等量递增的方法充分混合后压片，压力控制在 58MPa-65MPa，每片厚度为5士0.5mm压片。

本实施例中，本实施例中，驼奶粉为88.5g，牛磺酸为11.5g，组合物中，蛋白质含量≥20％，其中α-乳白蛋白、乳铁蛋白、免疫球蛋白含量之和≥6％，11.5％≥牛磺酸含量≥8.3％。

实施例九：驼奶组合物与驼奶粉对CCl₄肝损伤小鼠血清转氨酶活性的影响

1.动物与分组：选择昆明种小鼠，雌雄各半，随机分空白组、模型组和给药组，给药组分为本发明驼奶组合物组和驼奶粉组(10d、 20d、30d、40d、50d)，每组6只。给药量1000mg/kg。

2.试验方法：各组小鼠正常饮食，光照12h。各组腹腔注射 0.1％CCl₄橄榄油溶液。药物组末次给药后2h注射，空白对照组给予等体积的生理盐水。造模24h后摘小鼠眼球取血测定ALT、AST活性。

3.结果：不同给药时间对CCl₄肝损伤小鼠血清转氨酶活性的影响结果见表1。与空白组比较，模型组血清转氨酶显著升高(P<0.01)。与模型组比较，本发明驼奶组合物与驼奶粉给药10d降转氨酶效果均不显著(P>0.05)，本发明驼奶组合物组给药20dALT、AST显著降低(P<0.05)，给药40d效果增强(P<0.01)，而驼奶粉组给药30dALT、 AST才显著降低(P<0.05)，在该剂量下给药时间延长至50d效果并未明显改变。此外，本发明驼奶组合物给药50d组与起效的20d组比较ALT有显著性改善(P<0.01)。本发明驼奶组合物的预服时间明显少于驼奶粉，效果也优于驼奶粉，通过配伍达到了减少服用时间、提升保护效果的目的。

表1不同给药时间对CCl₄肝损伤小鼠血清转氨酶活性的影响(n＝6)

*与模型组比较P<0.05,**与模型组比较P<0.01；+与起效时比较比较P<0.05，++与起效时比较比较 P<0.01。

实施例十：本发明驼奶组合物对小鼠肝损伤辅助保护验证试验

1.动物与分组：健康雄性ICR种清洁级小鼠，体重18-22g，随机分为5组，每组12只。设本发明驼奶组合物低、中、高剂量组500、 1000、3000mg/kg、溶剂对照组和模型对照组。灌胃量20ml/kg·bwt。全部动物均给予灭菌鼠饲料和无菌水自由取用。

2.试验方法：给予受试物结束后样品剂量组和模型对照组依次灌胃给予50％乙醇14ml/kg·bwt，溶剂对照组给予纯净水，禁食16h，处死动物取同一部位肝脏进行肝脏组织病理学检查及肝组织匀浆测定各项生化指标，并进行肝脏组织病理学检查。

3.结果

(1)各组对动物体重的影响

试验前后各组小鼠体重差异均无显著性(P>0.05)，各组样品对小鼠体重的增长无明显影响。

(2)各组对小鼠肝匀浆中丙二醛(MDA)含量的影响

由表2可知，模型对照组小鼠肝匀浆中MDA含量与溶剂对照组相比显著升高(P<0.01)。样品各剂量组小鼠肝匀浆中MDA值与模型对照组值相比均有降低，其中低、中剂量组差异有显著性(P<0.05)。

表2各组小鼠肝匀浆中MDA含量(n＝12)

组别	MDA(nmol/mg蛋白)
		模型对照组	2.01±0.63
低剂量组	1.28±0.50*
		中剂量组	1.25±0.67*
高剂量组	1.43±0.70
		溶剂对照组	1.08±0.40

(3)各组对小鼠肝匀浆中还原型谷胱甘肽(GSH)含量的影响

由表3可知，模型对照组小鼠肝匀浆中GSH含量与溶剂对照组相比显著降低(P<0.01)。样品各剂量组小鼠肝匀浆中GSH含量与模型对照组相比均有增加，其中低、中剂量组差异具有显著性 (P<0.05)。

表3各组小鼠肝匀浆中GSH含量(n＝12)

组别	GSH(mg/g蛋白)
		模型对照组	4.43±2.29
低剂量组	6.93±2.45*
		中剂量组	6.97±2.35*
高剂量组	6.76±2.75
		溶剂对照组	7.22±0.97

(4)各组对小鼠肝匀浆中甘油三酯(TG)含量的影响

由表4可知，模型对照组小鼠肝匀浆中TG含量与溶剂对照组相比显著增高(P<0.01)。样品各剂量组小鼠肝匀浆中TG含量与模型对照组相比均有下降，且各剂量组差异均有显著性(P<0.01)。

表4各组小鼠肝匀浆中TG含量(n＝12)

(5)各组对小鼠肝脏组织病理学变化的影响

由表5可知，除溶剂对照组外各组小鼠均出现不同程度的肝细胞脂肪变性，模型对照组肝细胞脂肪变性与溶剂对照组比较，差异有显著性(P<0.01)。样品各剂量组小鼠与模型对照组小鼠相比肝细胞脂肪变性不同程度减轻，其中中剂量组差异有显著性(P<0.05)，本发明驼奶组合物具有减轻酒精性肝损伤小鼠肝细胞脂肪变性作用。

表5各组对小鼠肝脏组织病理学变化的影响(n＝12)

经口给予小鼠不同剂量的本发明驼奶组合物30d，500、 1000mg/kg组能够明显降低酒精性肝损伤模型小鼠肝脏匀浆中MDA 含量(P<0.05)，升高GSH含量(P<0.05)，降低TG含量(P<0.01)， 1000mg/kg组还能够减轻酒精性肝损伤小鼠肝细胞脂肪变性作用 (P<0.05)，本发明制备的驼奶组合物对酒精引起的肝损伤具有很好的辅助保护作用。

本发明旨在于以骆驼奶和牛磺酸以特定的比例进行复配，充分发挥协同增效作用，提供一种对化学性肝损伤有稳定的辅助保护作用的驼奶组合物。与驼奶粉相比，本发明制备的驼奶组合物对化学性肝损伤保护作用效果明显提升并且明显缩短了预服时间，其预服时间相比牛磺酸的12周(梁健等.世界华人消化杂志，2003.)更是有了明显改善，本发明不仅获得了一种效果稳定的肝保护产品，而且驼奶粉服用量的减少也有利于降低骆驼奶使用量和生产成本，在保健食品加工技术领域具有广泛的实用性。

上述实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种改变和改进，均应落入本发明确定的保护范围内。

Claims (4)

1.一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物，其特征在于，按照重量份数计，驼奶组合物包括骆驼奶粉85份-95份，牛磺酸5份-15份，其中所述组合物中蛋白质含量≥20%，11.5%≥牛磺酸含量≥8.3%；

所述的驼奶组合物中，α-乳白蛋白、乳铁蛋白、免疫球蛋白含量之和≥6%；

所述的驼奶组合物制备方法包括如下步骤：

（1）选择合格新鲜骆驼乳经过滤利用净乳机净乳，根据骆驼乳检测结果调整脂肪含量、加蔗糖进行标准化；

（2）标准化后均质，杀菌，浓缩后进行喷雾干燥，经过喷雾干燥的骆驼奶粉晾凉，筛分即得驼奶粉；

（3）将驼奶粉和牛磺酸按照等量递增的方法充分混合；

调节净乳参数使得净乳结束以后最终温度控制在6℃-8℃，均质后采用超高压杀菌，真空浓缩到原体积的1/4，真空浓缩后乳温在47℃-50℃，进行喷雾干燥，喷雾干燥条件为进风温度为120℃，进料速度为10.4mL/min，经过喷雾干燥的骆驼奶粉凉到25℃以下，筛分即得驼奶粉。

2.如权利要求1所述的一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物，其特征在于，按照重量份数计，驼奶组合物包括骆驼奶粉87份-92份，牛磺酸8份-13份。

3.如权利要求1所述的一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物，其特征在于，按照重量份数计，驼奶组合物包括骆驼奶粉88.5份-91.5份，牛磺酸8.5份-11.5份。

4.如权利要求1所述的一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的驼奶组合物的制备方法，其特征在于，将驼奶粉和牛磺酸按照等量递增的方法充分混合后压片，压力控制在58MPa-65MPa，每片厚度为5±0.5mm压片。