CN108530512A - 乙烯磺酰胺链接子及其应用 - Google Patents

乙烯磺酰胺链接子及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN108530512A
CN108530512A CN201810267693.9A CN201810267693A CN108530512A CN 108530512 A CN108530512 A CN 108530512A CN 201810267693 A CN201810267693 A CN 201810267693A CN 108530512 A CN108530512 A CN 108530512A
Authority
CN
China
Prior art keywords
structural formula
ethenesulfonamide
alkyl
drug
link
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810267693.9A
Other languages
English (en)
Inventor
姜标
陈红莉
黄容
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ShanghaiTech University
University of Shanghai for Science and Technology
Original Assignee
University of Shanghai for Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of Shanghai for Science and Technology filed Critical University of Shanghai for Science and Technology
Priority to CN201810267693.9A priority Critical patent/CN108530512A/zh
Publication of CN108530512A publication Critical patent/CN108530512A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
    • C07K1/1072—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups
    • C07K1/1077—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups by covalent attachment of residues other than amino acids or peptide residues, e.g. sugars, polyols, fatty acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6807—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug or compound being a sugar, nucleoside, nucleotide, nucleic acid, e.g. RNA antisense
    • A61K47/6809—Antibiotics, e.g. antitumor antibiotics anthracyclins, adriamycin, doxorubicin or daunomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6845—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a cytokine, e.g. growth factors, VEGF, TNF, a lymphokine or an interferon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
    • A61K49/0058—Antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/11—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic unsaturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies

Abstract

本发明提供了一种乙烯磺酰胺链接子及其应用。所述的乙烯磺酰胺链接子，其特征在于，其结构式为式I： 式I中，X选自C或者N；R选自氢，酰胺，硝基，羟基，烷基羟基，芳香基羟基，胺基，烷基胺基，芳香基胺基，巯基，烷基巯基，芳香基巯基，羧酸，烷基羧酸，芳香基羧酸，炔基，烷基炔基，芳香基炔基，叠氮，烷基叠氮，芳香基叠氮，羰基，烷基羰基，芳香基羰基，醛基，烷基醛基，芳香基醛基，或其中任意组合；R1选自氢，直链、支链或环状烷烃，酸，醛基，直链羰基，苄基或其它芳香苄基，苯基或其它芳香基，或其中任意组合。本发明选择性高，产物稳定性好。

Description

乙烯磺酰胺链接子及其应用
技术领域
本发明属于生物制药及生物技术领域，具体涉及将乙烯基磺酰胺类化合物用于多肽和蛋白质中的半胱氨酸选择性修饰。本发明涉及的选择性修饰方法专一性好，可用于制备靶向示踪诊断试剂、肿瘤靶向治疗药物，包含抗体药物偶联物等。
背景技术
多肽或蛋白质的化学选择性修饰在化学生物学和生物医学研究领域中非常重要。利用蛋白质中天然氨基酸残基进行选择性修饰是非常经济有效的策略。半胱氨酸因其在蛋白质的天然丰度相对较低且其巯基残基具有高度亲核性，而受到广泛关注。马来酰亚胺、α-卤代羰基化合物是常用的用于蛋白质半胱氨酸选择性修饰试剂，但因这些方法具有选择性不够专一、偶联产物不够稳定等问题，生物应用中仍需发展新的半胱氨酸选择性修饰性的方法。
乙烯基磺酰胺与乙烯基砜类化合物类似，可以与亲核试剂发生Micheal加成，但更易于制备。乙烯基磺酰胺已成功的应用在巯基和胺基的修饰中，我们也已报道了乙烯基磺酰胺可用于多肽或蛋白质中赖氨酸残基或N-端的修饰以及双乙烯基磺酰胺用于硫-硫键的桥联。
抗体药物偶联物(ADC)是极具前景的药物，它利用链接子将高生物活性的药物分子连接到抗体上，利用抗体的特异性，有效输送高活性药物到特定靶标，提高药效，降低毒性。目前已有4个ADCs药物被FDA批准上市，分别为：Adcetris(2011年)，Kadcyla(2013年)，Mylotarg(2017年)和Besponsa(2017年)，另有60多个ADCs药物正在进行临床研究。临床研究中的ADCs药物常用的抗体修饰位点主要有赖氨酸残基和半胱氨酸残基两种。上市药物Adcetris由SeattleGenetics公司研发，正是基于半胱氨酸利用马来酰亚胺进行偶联而得到的ADC。近些年研究表明马来酰亚胺作为链接子偶联所得的ADC在体内的稳定性较差。本发明利用乙烯基磺酰胺来进行ADC的制备。现有研究表明，在37℃高浓度GSH条件下，仍旧具有极高的稳定性。
发明内容
本发明的目的是提供一种乙烯磺酰胺链接子及其在选择性修饰多肽和蛋白中的半胱氨酸及制备抗体-荧光示踪物质偶联物以及抗体-药物偶联物中的应用。
为达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是：
一种乙烯磺酰胺链接子，其特征在于，其结构式为式I：
式I中，X选自C或者N；R选自氢，酰胺，硝基，羟基，烷基羟基，芳香基羟基，胺基，烷基胺基，芳香基胺基，巯基，烷基巯基，芳香基巯基，羧酸，烷基羧酸，芳香基羧酸，炔基，烷基炔基，芳香基炔基，叠氮，烷基叠氮，芳香基叠氮，羰基，烷基羰基，芳香基羰基，醛基，烷基醛基，芳香基醛基，或其中任意组合；R1选自氢，直链、支链或环状烷烃，酸，醛基，直链羰基，苄基或其它芳香苄基，苯基或其它芳香基，或其中任意组合。
优选地，所述的乙烯磺酰胺链接子的结构式为式1-式3(图1)中的至少一种。
本发明还提供了上述的乙烯磺酰胺链接子在游离巯基的选择性修饰中的应用。
优选地，所述的游离巯基是肽或蛋白质的一部分。
更优选地，所述的游离巯基是抗体的一部分。
优选地，所述的选择性修饰是在体内或体外进行。
优选地，所述的选择性修饰是在有机溶剂中、水性介质中或者在生理条件下，或者它们的组合或其等价形式进行。
更优选地，所述的有机溶剂为乙腈、DMF和DMSO中的至少一种。
本发明还提供了上述的乙烯磺酰胺链接子在制备抗体-荧光偶联物和抗体-药物偶联物中的应用。
本发明还提供了一种偶联物，其特征在于，其结构式为式II：
其中，A是多肽或蛋白；L是示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物。
优选地，所述的A为抗体。更优选地，所述的抗体是指可以结合，反应性关联或者络合受体或抗原的单元，包括但不局限于嵌合抗体，人源化抗体，人抗体或者抗体片段。本发明中所述抗体药物偶联物中的抗体具备能够选择性与抗原结合的特性；更优选为赫赛汀(herceptin)。
优选地，所述的示踪荧光物质包括但不局限于罗丹明类，荧光素类，色素类，香豆素类，更优选为荧光素类，香豆素类；其中活性药物包括但不局限于美登素类(Maytansinoids)，耳抑素肽类(Auristatins)，卡其霉素类(Calicheamicins)，阿霉素类(Doxorubicins)，吡咯并苯二氮卓二聚体类(PBDs)，雷公藤甲素类(Triptolide)，秋水仙碱类(Colchicine)，康普瑞汀类(Combretastatin)，高三尖杉酯碱类(Homoharringtonine)，喜树碱类(Camptothecin)，紫杉醇类(Paclitaxel)。
更优选地，所述的L为美登素类(Maytansinoids)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为耳抑素肽类(Auristatins)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为卡其霉素类(Calicheamicins)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为阿霉素类(Doxorubicins)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为吡咯并苯二氮卓二聚体类(PBDs)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为雷公藤甲素类(Triptolide)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为秋水仙碱类(Colchicine)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为康普瑞汀类(Combretastatin)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为高三尖杉酯碱类(Homoharringtonine)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为喜树碱类(Camptothecin)药物，结构式为：
更优选地，所述的L为紫杉醇类(Paclitaxel)药物，结构式为：
所述的药物并不仅仅局限于上述提到的类别，还包括所有可用于抗体药物偶联物的药物。
优选地，所述的偶联物的结构式为：
本发明还提供了采用上述的乙烯磺酰胺链接子制备上述的偶联物的方法，其特征在于，包括：先将上述的乙烯磺酰胺链接子与示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物偶联后，再与多肽或蛋白偶联，或者，先将上述的乙烯磺酰胺链接子与多肽或蛋白偶联后，再连接示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物。
优选地，将乙烯磺酰胺链接子或乙烯磺酰胺链接子与多肽或蛋白的偶联物与示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物偶联的方法包括：将乙烯磺酰胺链接子或乙烯磺酰胺链接子与多肽或蛋白的偶联物的溶液与示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物的溶液、抗坏血酸钠溶液和硫酸铜溶液混合，避光反应。
优选地，将乙烯磺酰胺链接子或乙烯磺酰胺链接子与示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物的偶联物与多肽或蛋白偶联的方法包括：将多肽或蛋白溶液与乙烯磺酰胺链接子或乙烯磺酰胺链接子与示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物的偶联物的溶液混合，进行反应。
本发明提供了一种简单、高效的方法利用乙烯基磺酰胺对多肽或蛋白质包括抗体上的半胱氨酸进行选择性修饰；本发明侧重于发展乙烯基磺酰胺类化合物在温和的生理条件下选择性修饰多肽或蛋白质，并进一步应用该方法制备抗体药物偶联物。本发明利用乙烯基磺酰胺来进行ADC的制备。现有研究表明，在37℃高浓度GSH条件下，仍旧具有极高的稳定性。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、本发明提供的方法选择性高；
2、本发明提供的方法可用于制备靶向示踪诊断试剂、靶向治疗药物等；
3、本发明提供的方法制备所得抗体-荧光偶联物，抗体-药物偶联物，稳定性好。
附图说明
图1显示了本发明中涉及的典型的乙烯磺酰胺链接子的结构及制备路线；
图2显示了本发明中涉及的乙烯磺酰胺连接子与多肽LFMSCRTWKHYEQ的选择性修饰；而与不含半胱氨酸的多肽LFMSARTWKHYEQ完全不反应；
图3显示了本发明中涉及的图2所得偶联物的HRESIMS谱图；
图4显示了本发明中涉及乙烯磺酰胺链接子与多肽LFMSCRTWKHYEQ的偶联物进一步通过click反应结合荧光物质荧光素，香豆素；药物分子喜树碱以及亲水物质PEG；
图5显示了本发明中涉及的图4所得偶联物的HRESIMS谱图；
图6显示了本发明中涉及的乙烯磺酰胺链接子与蛋白质BSA中巯基的选择性修饰；
图7显示了本发明中涉及的图6所得偶联物的HRESIMS和MS2谱图。
图8显示了本发明中涉及的乙烯磺酰胺链接子-荧光偶联物的制备，及其偶联物与还原后的抗体-赫赛汀中巯基的选择性修饰，而与不含半胱氨酸的赫赛汀完全不反应；
图9显示了本发明中涉及的图8所得偶联物的SDS-PAGE跑胶图。
图10显示了本发明中涉及的图8所得偶联物的HRESIMS谱图。
图11显示了本发明中涉及的图8所得偶联物的稳定性测试图。
图12显示了本发明中涉及的利用乙烯磺酰胺链接子制备抗体药物偶联物；
图13显示了本发明中涉及的利用乙烯磺酰胺链接子制备图12抗体药物偶联物的HRESIMS谱图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅用于说明本发明的一部分实施例，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，视为可以通过市售购买获得的常规产品。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
实施例1
乙烯磺酰胺连接子1-3的制备，如图1所示：
化合物1
将N-甲基苯胺(0.536g，5mmol)溶于二氯甲烷(30mL)中，冰浴下，加入三乙胺(1.518g，15mmol)，充分冷却后缓慢滴加2-氯乙烷磺酰氯(0.978g，6mmol)，冰浴下反应1h。用100mL水稀释反应液后，二氯甲烷萃取(3*20mL)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋转蒸除溶剂后得粗品，加入3mL CH2Cl2和1.5g 60-100目硅胶，拌匀旋干。粗品经硅胶柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)得白色固体1(0.855g，4.34mmol，86.8％)。1H NMR(500MHz，Chloroform-d)δ7.43-7.25(m，5H)，6.47(dd，J＝16.6，9.9Hz，1H)，6.21(d，J＝16.6Hz，1H)，6.03(d，J＝10.0Hz，1H)，3.26(s，3H).13C NMR(126MHz，CDCl3)δ141.22，132.24，129.15，128.50，127.48，126.63，38.09.ESI-HRMS Calculated for C9H12NO2S[M+H]+：198.0589，Found：198.0249.
化合物2a
将4-(N-甲基氨基)苯酚(2.0g，16.2mmol)，二叔丁基碳酸二酯(3.9g，17.9mmol)溶于四氢呋喃(50mL)中，在室温下搅拌反应6h。旋转蒸除溶剂四氢呋喃后得粗品，将固体溶于二氯甲烷(30mL)中，用100mL水稀释反应液后，二氯甲烷萃取(3*20mL)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋转蒸除溶剂后得粉色固体2a(3.45g，15.46mmol，95.4％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.00-6.94(m，2H)，6.67(d，J＝8.8Hz，2H)，3.18(s，3H)，1.46(s，10H).13CNMR(126MHz，CDCl3)δ127.19，115.82，80.62，77.07，76.82，38.12，28.42.ESI-HRMSCalculated for C12H18NO3[M+H]+：224.1287，Found：224.1261.
化合物2b
将化合物2a(1g，4.479mmol)，3-溴丙炔(0.64mg，5.375mmol)，无水碳酸钾(1.86g，13.437mmol)溶于乙腈(20mL)中，在室温下搅拌反应过夜。通过过滤除去碳酸钾固体，旋转蒸除溶剂乙腈后，加入50mL水，乙酸乙酯(3*20mL)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋转蒸除溶剂后得粗品，加入10mL CH2Cl2和5g 60-100目硅胶，拌匀旋干。粗品经硅胶柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)得白色固体2b(1.09g，4.17mmol，93.1％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.14(d，J＝7.8Hz，2H)，6.95-6.89(m，2H)，4.67(d，J＝2.4Hz，2H)，3.21(s，3H)，2.52(t，J＝2.3Hz，1H)，1.43(s，9H).13C NMR(126MHz，CDCl3)δ155.30，155.21，137.87，127.03，115.04，80.26，78.66，75.73，56.18，37.74，28.51.ESI-HRMS Calculated forC15H20NO3[M+H]+：262.1443，Found：262.1864.
化合物2c
将上一步所得化合物2b(0.825g，3.157mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，冰浴下加入三氟乙酸(5mL)，冰浴下反应4h，减压旋转蒸除溶液后得黄色固体2c(0.5mg，3.10mmol，98.24％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.17(d，J＝8.8Hz，2H)，7.00(d，J＝8.9Hz，2H)，4.72(d，J＝2.3Hz，2H)，3.32(s，3H)，2.56(t，J＝2.3Hz，1H).13C NMR(126MHz，CDCl3)δ157.63，134.04，128.64，115.78，115.57，77.93，77.30，77.04，76.79，76.06，56.03，39.82.ESI-HRMS Calculated for C10H12NO[M+H]+：162.0919，Found：162.1024.
化合物2
将上一步所得化合物2c(0.5g，3.10mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，冰浴下，加入三乙胺(0.941g，9.3mmol)，充分冷却后缓慢滴加2-氯乙烷磺酰氯(0.606g，3.72mmol)，冰浴下反应1h。用100mL水稀释反应液后，二氯甲烷萃取(3*20mL)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋转蒸除溶剂后得粗品，加入3ml CH2Cl2和3g 60-100目硅胶，拌匀旋干。粗品经硅胶柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)得金黄色固体2(0.238g，0.947mmol，30.56％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.23(d，J＝8.0Hz，2H)，6.93(d，J＝8.0Hz，2H)，6.45(ddd，J＝16.5，10.0，0.7Hz，1H)，6.15(dd，J＝16.6，1.1Hz，1H)，6.00(dd，J＝10.0，0.7Hz，1H)，4.66(s，2H)，3.17(s，3H)，2.53(s，1H).13C NMR(126MHz，CDCl3)δ156.77，134.67，132.18，128.62，128.25，115.35，78.25，76.01，56.02，38.43.ESI-HRMSCalculated for C12H14NO3S[M+H]+：252.0694，Found：252.0506.
化合物3a
将4-(N-甲基氨基)苯甲酸(1.663g，11mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中，加入N’N-二异丙基乙胺(1.65mL，10mmol)搅拌至固体全部溶解，然后加入炔丙胺(0.551g，10mmol)，HOBt(0.811g，6.0mmol)，EDCl(2.30g，12.0mmol)，N’N-二异丙基乙胺(1.98mL，12mmol)，在室温下搅拌反应过夜。减压旋转蒸除溶剂四氢呋喃后得粗品，将固体溶于二氯甲烷(30mL)中，用100mL水稀释反应液后，二氯甲烷萃取(3*20mL)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋转蒸除溶剂后得粗品，加入15mL CH2Cl2和8g 60-100目硅胶，拌匀旋干。粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝10：1)得黄色固体3a(1.799g，9.55mmol，95.57％)。1H NMR(500MHz，MeOD)δ7.71-7.55(m，2H)，6.61-6.53(m，2H)，4.11(d，J＝2.5Hz，2H)，2.79(s，3H)，2.55(t，J＝2.5Hz，1H).13CNMR(126MHz，MeOD)δ168.68，153.15，128.66，120.17，110.62，79.91，70.33，48.17，47.99，47.82，47.65，47.48，47.31，47.14，28.64，28.39.ESI-HRMSCalculated for C11H13N2O[M+H]+：189.1028，Found：189.1019.
化合物3
将上一步所得化合物3a(1g，5.31mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，冰浴下，加入三乙胺(1.613g，15.94mmol)，充分冷却后缓慢滴加2-氯乙烷磺酰氯(1.04g，6.37mmol)，冰浴下反应1h。用100mL水稀释反应液后，二氯甲烷萃取(3*20mL)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋转蒸除溶剂后得粗品，加入10mL CH2Cl2和5g 60-100目硅胶，拌匀旋干。粗品经硅胶柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)得金黄色固体3(1.390g，5mmol，94.16％)。1H NMR(500MHz，MeOD)δ7.86-7.81(m，2H)，7.49-7.42(m，2H)，6.65(dd，J＝16.5，10.0Hz，1H)，6.10(dd，J＝13.2，12.4Hz，2H)，4.15(d，J＝2.5Hz，2H)，3.26(s，3H)，2.61(t，J＝2.5Hz，1H).13CNMR(126MHz，MeOD)δ167.38，144.55，132.36，132.10，128.42，127.84，125.66，79.32，70.76，48.15，47.98，47.81，47.64，47.47，47.30，47.13，36.75，28.60.ESI-HRMSCalculated for C13H15N2O3S[M+H]+：279.0803，Found：279.0800.
实施例2
乙烯磺酰胺连接子1，2，3与多肽LFMSCRTWKHYEQ的选择性修饰，如图2所示：
将多肽LFMSCRTWKHYEQ(吉尔生化)溶于PBS(pH＝7.4)缓冲溶液(商品号Cat.NO.SH30256.0)配成1mM的溶液，将乙烯磺酰胺连接子溶于乙腈配成6mM的溶液。在微孔板(330uL LABTIDE 96Round Well)的三个不同的孔中均加入200uL的多肽LFMSCRTWKHYEQ溶液，然后分别加入100uL的3个不同的乙烯磺酰胺连接子溶液，微孔板振荡器上室温反应2小时后用HPLC(型号Waters 1525和SHIMADZU LC-30AD，固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，0～10分钟)分析，用HRMS-ESI判断产物峰，如图3所示。
将多肽LFMSARTWKHYEQ(吉尔生化)溶于PBS(pH＝7.4)缓冲溶液(商品号Cat.NO.SH30256.0)配成1mM的溶液，将乙烯磺酰胺连接子溶于乙腈配成6mM的溶液。在微孔板(330uL LABTIDE 96Round Well)的三个不同的孔中均加入200uL的多肽LFMSCRTWKHYEQ溶液，然后分别加入100uL的3个不同的乙烯磺酰胺连接子溶液，微孔板振荡器上室温反应2小时后用HPLC(型号Waters 1525和SHIMADZU LC-30AD，固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，0～10分钟)分析反应情况。
实施例3
如图4所示，乙烯磺酰胺连接子2与多肽LFMSCRTWKHYEQ的偶联物进一步与荧光物质荧光素7，香豆素9；药物分子喜树碱8以及亲水物质PEG 10的偶联：
将多肽LFMSCRTWKHYEQ(吉尔生化)溶于PBS(pH＝7.4)缓冲溶液(商品号Cat.NO.SH30256.0)配成1mM的溶液，乙烯磺酰胺连接子2溶于CH3CN中配成6mM的溶液，将叠氮试剂荧光物质荧光素7和香豆素9，药物分子喜树碱8和亲水物质PEG聚合物10(分子量2000)溶于DMSO配成10mM的溶液，L-抗坏血酸钠溶于H2O中配成200mM的溶液，硫酸铜CuSO4溶于H2O中配成100mM的溶液，TBTA溶于1：4DMSO-叔丁醇溶液中配成10mM的溶液。
在微孔板(330uL LABTIDE 96Round Well)的4个不同孔中加入100uL的多肽LFMSCRTWKHYEQ溶液，50uL的乙烯磺酰胺连接子2的溶液。然后放在微孔板振荡器上室温反应12h后。然后分别加入2uL的功能性小分子7、8、9和10，1uL的L-抗坏血酸钠溶液，1uL的硫酸铜溶液和1uL的TBTA溶液，放在微孔板振荡器上室温避光反应1小时，通过HPLC(型号Waters 1525，固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，0～10分钟)分析，用HRMS-ESI判断产物峰，如图5所示。
实施例4
如图6所示，乙烯磺酰胺连接子2与蛋白质BSA的选择性修饰：
将蛋白质BSA(Yeasen)溶于PBS(pH＝10)缓冲溶液配成2mg/mL的溶液，将乙烯磺酰胺连接子2溶于乙腈配成50mM的溶液。在微量离心管(Thermo 1.5mL微量离心管)中加入1mL的BSA溶液，然后加入0.6uL的乙烯磺酰胺连接子2溶液，在hulamixer上室温振荡反应5小时后用UPLC-MS(型号ABsciex4600)判断产物峰，如图7所示。
实施例5
如图8所示，乙烯磺酰胺连接子-荧光偶联物19的制备：
化合物17的合成
将化合物7(27.83mg，0.0585mmol)、化合物2(17.65mg，0.0702mmol)、抗坏血酸钠(10.31mg，0.0585mmol)和硫酸铜(9.31mg，0.0585mmol)溶于6mLtBuOH/H2O/DMF(1/1/1)中。室温下避光反应1h后用制备HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，26分钟)分离得到产物黄色固体(13mg，0.0179mmol)，产率30％。ESI-HRMS Calculated forC35H31N6O8S2[M+H]+：727.1645，Found：727.1799。用HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，10分钟)分析产物的纯度，纯度为96.1％。
将赫赛汀18(Roche)溶于PBS(pH＝7.4)缓冲溶液(商品号Cat.NO.SH30256.0)配成5mg/mL的溶液，在微孔板(330uL LABTIDE 96Round Well)的一个孔中加入100uL的赫赛汀溶液，1.69uL的TCEP(10mM的水溶液，用NaOH/H3PO4调节pH为7.0)，然后放在微孔板振荡器上室温反应2小时。随后加入6.76uL乙烯磺酰胺连接子2-荧光化合物即化合物17(10mM的CH3CN溶液)，然后放在微孔板振荡器上室温避光反应12小时后，通过Zeba脱盐柱(ZebaTMSpin Desalting Columns，7K MWCO，0.5mL)除去过量的小分子化合物。用UPLC-MS(型号ABsciex 4600)分析反应结果，如图10所示。
将赫赛汀18(Roche)溶于PBS(pH＝7.4)缓冲溶液(商品号Cat.NO.SH30256.0)配成5mg/mL的溶液，在微孔板(330uL LABTIDE 96Round Well)的一个孔中加入100uL的赫赛汀溶液，6.76uL化合物17(10mM的CH3CN溶液)，然后放在微孔板振荡器上室温避光反应12小时后，通过Zeba脱盐柱(ZebaTM Spin Desalting Columns，7K MWCO，0.5mL)除去过量的小分子化合物。用UPLC-MS(型号ABsciex 4600)分析反应结果。
实施例6
乙烯磺酰胺连接子-荧光偶联物19的SDS-PAGE检测：
将上述所得的乙烯磺酰胺连接子-荧光抗体偶联物即化合物19通过Zeba脱盐柱(ZebaTMSpin Desalting Columns，7K MWCO，0.5mL)除去小分子化合物。取20uL处理后的样品加入10uL的4X LDS Sample buffer(NuPAGE)和1uL的DTT(100mM)的水溶液，将此混合物在95℃下孵育5min。取10uL的混合样品通过4％-12％的SDS-PAGE分析，如图9所示。
实施例7
乙烯磺酰胺连接子-荧光偶联物19的稳定性测试：
将赫赛汀18(Roche)溶于PBS(pH＝7.4)缓冲溶液(商品号Cat.NO.SH30256.0)配成5mg/mL的溶液，在微孔板(330uL LABTIDE 96Round Well)的三个孔中加入100uL的赫赛汀溶液，1.69uL的TCEP(10mM的水溶液，用NaOH/H3PO4调节PH为7.0)，然后放在微孔板振荡器上室温反应2小时。随后分别加入6.76uL乙烯磺酰胺连接子2-荧光化合物即化合物17(10mM的CH3CN溶液)，然后放在微孔板振荡器上室温避光反应12小时后，通过Zeba脱盐柱(ZebaTMSpin Desalting Columns，7K MWCO，0.5mL)除去过量的小分子化合物得到三份处理后的乙烯磺酰胺连接子-荧光抗体偶联物19，分别为A、B和C。
将A在室温条件下避光保存，每隔3h取出10uL样品避光保存在-80℃冰箱；B中加入33.8uL的GSH(10mM的水溶液)，在室温条件下避光保存，每隔3h取出13uL样品避光保存在-80℃冰箱；C中加入33.8uL的GSH(10mM的水溶液)，在37℃条件下避光保存，每隔3h取出13uL样品避光保存在-80℃冰箱。将冻存在-80℃冰箱的样品取出，加入10uL的4X LDS Samplebuffer(NuPAGE)和1uL的DTT(100mM)的水溶液，将此混合物在95℃下孵育5min。取10uL的混合样品通过4％-12％的SDS-PAGE分析，如图11所示。
实施例8
乙烯磺酰胺连接子制备抗体药物偶联物：
化合物20的合成
将MMAE(100mg，0.139mmo1)、7-叠氮庚酸(26.23mg，0.153mmol)、N-甲基吗啉NMM(140.6mg，1.39mmol)、EDCl(53.48mg，0.279mmol)和HOAt(37.92mg，0.279mmol)溶于DMF(5mL)中，室温下反应过夜。用制备HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，22分钟)分离得到产物白色固体20(94mg，0.107mmol)，产率76％。ESI-HRMSCalculated for C46H79N8O8[M+H]+：871.6021，Found：871.6844。
化合物22的合成
化合物20(54.3mg，0.0623mmol)、化合物2(18.796mg，0.0748mmol)、L-抗坏血酸钠(10.977mg，0.0623mmol)和硫酸铜(9.915mg，0.623mmol)溶于6mL tBuOH/H2O/DMF(1/1/1)中。室温下反应1h后用制备HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，21分钟)分离得到产物白色固体22(48mg，0.0427mmol)，产率68.6％。ESI-HRMS Calculatedfor C58H92N9O11S[M+H]+：1122.6637，Found：1122.6931。用HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，10分钟)分析产物的纯度，纯度为99％。
化合物24的合成
化合物20(54.3mg，0.0623mmol)、化合物3(20.818mg，0.0748mmol)、抗坏血酸钠(10.977mg，0.0623mmol)和硫酸铜(9.915mg，0.623mmol)溶于6mLtBuOH/H2O/DMF(1/1/1)中。室温下反应1h后用制备HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，21分钟)分离得到产物白色固体24(38mg，0.0331mmo1)，产率53.06％。ESI-HRMS Calculatedfor C59H93N10O11S[M+H]+：1149.6746，Found：1149.5661。用HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，10分钟)分析产物的纯度，纯度为99.3％。
化合物21的合成
将MMAE(100mg，0.139mmol)、2-(2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基)乙酸(28.99mg，0.153mmol)、N-甲基吗啉NMM(140.6mg，1.39mmol)、EDCl(53.48mg，0.279mmol)和HOAt(37.92mg，0.279mmol)溶于DMF(5mL)中，室温下反应过夜。用制备HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，26分钟)分离得到产物白色固体21(89.57mg，0.1mmol)，产率73％。ESI-HRMS Calculated for C45H77N8O10[M+H]+：889.5763，Found：889.5544。
化合物23的合成
化合物21(43mg，0.049mmol)、化合物3(14.575mg，0.058mmol)、抗坏血酸钠(8.517mg，0.049mmol)和硫酸铜(7.795mg，0.049mmol)溶于6mLtBuOH/H2O/DMF(1/1/1)中。室温下反应1h后用制备HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，21分钟)分离得到产物白色固体23(28mg，0.0245mmol)，产率50.1％。ESI-HRMS Calculated forC57H90N9O13S[M+H]+：1140.6379，Found：1140.5633。用HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，10分钟)分析产物的纯度，纯度为98.6％。
化合物25的合成
化合物21(43mg，0.049mmol)、化合物3(16.143mg，0.058mmol)、抗坏血酸钠(8.517mg，0.049mmol)和硫酸铜(7.795mg，0.049mmol)溶于6mLtBuOH/H2O/DMF(1/1/1)中。室温下反应1h后用制备HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，21分钟)分离得到产物白色固体25(56mg，0.0479mmol)，产率97.89％。ESI-HRMS Calculated forC58H91N10O13S[M+H]+：1167.6488，Found：1167.5753。用HPLC(固定相为C-18硅胶柱，流动相为CH3CN/H2O＝10～100％，10分钟)分析产物的纯度，纯度为97.9％。
将化合物22-25分别溶于DMSO配成10mM的溶液，将赫赛汀18(Roche)溶于PBS(pH＝7.4)缓冲溶液(商品号Cat.NO.SH30256.0)配成5mg/mL的溶液，TCEP溶于纯水配成10mM的溶液(用NaOH/H3PO4调节PH为7.0)。
在微孔板(330uL LABTIDE 96Round Well)的四个孔中加入100uL的赫赛汀溶液，1.69uL的TCEP水溶液，然后放在微孔板振荡器上室温反应2小时。随后分别加入3.38uL乙烯磺酰胺连接子化合物即化合物22-25，然后放在微孔板振荡器上37℃反应12小时后，通过Zeba脱盐柱(ZebaTM Spin Desalting Columns，7K MWCO，0.5mL)除去过量的小分子化合物。用UPLC-MS(型号ABsciex 4600)分析反应结果，如图13所示。
在微孔板(330uL LABTIDE 96Round Well)的四个孔中加入100uL的赫赛汀溶液，1.69uL的TCEP水溶液，然后放在微孔板振荡器上室温反应2小时。随后分别加入3.38uL乙烯磺酰胺连接子化合物即化合物22-25，然后放在微孔板振荡器上室温反应12小时后，通过Zeba脱盐柱(ZebaTM Spin Desalting Columns，7K MWCO，0.5mL)除去过量的小分子化合物。用UPLC-MS(型号ABsciex 4600)分析反应结果，如图13所示。
序列表
<110> 上海科技大学
<120> 一种乙烯磺酰胺链接子及其应用
<130> 1
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 13
<212> PRT
<213> artificial sequence(人工序列)
<400> 1
Leu Phe Met Ser Cys Arg Thr Trp Lys His Tyr Glu Gln
1 5 10
<210> 2
<211> 13
<212> PRT
<213> artificial sequence(人工序列)
<400> 2
Leu Phe Met Ser Ala Arg Thr Trp Lys His Tyr Glu Gln
1 5 10

Claims (10)

1.一种乙烯磺酰胺链接子，其特征在于，其结构式为式I：
式I中，X选自C或者N；R选自氢，酰胺，硝基，羟基，烷基羟基，芳香基羟基，胺基，烷基胺基，芳香基胺基，巯基，烷基巯基，芳香基巯基，羧酸，烷基羧酸，芳香基羧酸，炔基，烷基炔基，芳香基炔基，叠氮，烷基叠氮，芳香基叠氮，羰基，烷基羰基，芳香基羰基，醛基，烷基醛基，芳香基醛基，或其中任意组合；R1选自氢，直链、支链或环状烷烃，酸，醛基，直链羰基，苄基或其它芳香苄基，苯基或其它芳香基，或其中任意组合。
2.如权利要求1所述的乙烯磺酰胺链接子，其特征在于，所述的乙烯磺酰胺链接子的结构式为式1-式3中的至少一种。
3.权利要求1或2所述的乙烯磺酰胺链接子在游离巯基的选择性修饰中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的游离巯基是肽或蛋白质的一部分。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的游离巯基是抗体的一部分。
6.权利要求1或2所述的乙烯磺酰胺链接子在制备抗体-荧光偶联物和抗体-药物偶联物中的应用。
7.一种偶联物，其特征在于，其结构式为式II：
其中，A是多肽或蛋白；L是示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物。
8.如权利要求7所述的偶联物，其特征在于，所述的L为美登素类药物，结构式为：
耳抑素肽类药物，结构式为：
卡其霉素类药物，结构式为：
阿霉素类药物，结构式为：
吡咯并苯二氮卓二聚体类药物，结构式为：
雷公藤甲素类药物，结构式为：
秋水仙碱类药物，结构式为：
康普瑞汀类药物，结构式为：
高三尖杉酯碱类药物，结构式为：
喜树碱类药物，结构式为：
或
紫杉醇类药物，结构式为：
9.如权利要求7所述的偶联物，其特征在于，所述的偶联物的结构式为：
10.采用权利要求1或2所述的乙烯磺酰胺链接子制备权利要求7-9所述的偶联物的方法，其特征在于，包括：将权利要求1或2所述的乙烯磺酰胺链接子先与示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物偶联后，再与多肽或蛋白偶联，或者，将权利要求1或2所述的乙烯磺酰胺链接子先与多肽或蛋白偶联后，再连接示踪荧光物质或者活性药物或者它们的衍生物。
CN201810267693.9A 2018-03-28 2018-03-28 乙烯磺酰胺链接子及其应用 Pending CN108530512A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810267693.9A CN108530512A (zh) 2018-03-28 2018-03-28 乙烯磺酰胺链接子及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810267693.9A CN108530512A (zh) 2018-03-28 2018-03-28 乙烯磺酰胺链接子及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108530512A true CN108530512A (zh) 2018-09-14

Family

ID=63481598

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810267693.9A Pending CN108530512A (zh) 2018-03-28 2018-03-28 乙烯磺酰胺链接子及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108530512A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110251680A (zh) * 2019-07-03 2019-09-20 上海科技大学 一种哌嗪类二乙烯基磺酰胺类链接子及其制备方法与应用
CN110269943A (zh) * 2019-07-29 2019-09-24 上海科技大学 一种靶向于egfr的抗体-药物偶联物及其制备方法与应用
CN112209990A (zh) * 2020-11-10 2021-01-12 上海科技大学 康普瑞汀类衍生物及其抗体药物偶联物
CN112979509A (zh) * 2021-03-10 2021-06-18 江西师范大学 一种三氟甲磺酰基炔酰胺类化合物及其制备方法和用途
WO2022166719A1 (zh) * 2021-02-08 2022-08-11 四川百利药业有限责任公司 一种ca4衍生物及其配体-药物偶联物

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008033475A2 (en) * 2006-09-15 2008-03-20 Onconova Therapeutics, Inc. Activated cytotoxic compounds for attachment to targeting molecules for the treatment of mammalian disease conditions
CN104689335A (zh) * 2015-02-12 2015-06-10 中国科学院上海高等研究院 烯基磺酰胺基作为连接子的抗体药物偶联物及其应用
CN107400072A (zh) * 2017-06-30 2017-11-28 上海科技大学 一种双乙烯磺酰胺连接子及其制备和应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008033475A2 (en) * 2006-09-15 2008-03-20 Onconova Therapeutics, Inc. Activated cytotoxic compounds for attachment to targeting molecules for the treatment of mammalian disease conditions
CN104689335A (zh) * 2015-02-12 2015-06-10 中国科学院上海高等研究院 烯基磺酰胺基作为连接子的抗体药物偶联物及其应用
CN107400072A (zh) * 2017-06-30 2017-11-28 上海科技大学 一种双乙烯磺酰胺连接子及其制备和应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
RONG HUANG等: "N‐Phenyl‐N‐aceto‐vinylsulfonamides as Efficient and Chemoselective Handles for N‐Terminal Modification of Peptides and Proteins", 《EUR. J. ORG. CHEM》 *
刘清等: "巯基-烯/炔点击化学研究进展", 《有机化学 综述与进展》 *
刘磊等: "《高校核心实验课程丛书 化学生物学实验》", 31 August 2015 *
曹刚等: "抗体药物偶联物", 《化学进展》 *
谭惠民: "《北京理工大学教育基金会•教授文库 固体推进剂化学与技术》", 30 September 2015 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110251680A (zh) * 2019-07-03 2019-09-20 上海科技大学 一种哌嗪类二乙烯基磺酰胺类链接子及其制备方法与应用
CN110251680B (zh) * 2019-07-03 2022-10-18 上海科技大学 一种哌嗪类二乙烯基磺酰胺类链接子及其制备方法与应用
CN110269943A (zh) * 2019-07-29 2019-09-24 上海科技大学 一种靶向于egfr的抗体-药物偶联物及其制备方法与应用
CN110269943B (zh) * 2019-07-29 2023-03-24 上海科技大学 一种靶向于egfr的抗体-药物偶联物及其制备方法与应用
CN112209990A (zh) * 2020-11-10 2021-01-12 上海科技大学 康普瑞汀类衍生物及其抗体药物偶联物
CN112209990B (zh) * 2020-11-10 2022-10-14 上海科技大学 康普瑞汀类衍生物及其抗体药物偶联物
WO2022166719A1 (zh) * 2021-02-08 2022-08-11 四川百利药业有限责任公司 一种ca4衍生物及其配体-药物偶联物
CN112979509A (zh) * 2021-03-10 2021-06-18 江西师范大学 一种三氟甲磺酰基炔酰胺类化合物及其制备方法和用途
CN112979509B (zh) * 2021-03-10 2022-04-22 江西师范大学 一种三氟甲磺酰基炔酰胺类化合物及其制备方法和用途

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108530512A (zh) 乙烯磺酰胺链接子及其应用
CN106177977B (zh) 一种抗肿瘤药物三元偶联物及合成和应用
CN104853781B (zh) 从含二硫化物的蛋白质制备缀合物的方法
JP2010254696A (ja) 癌治療用分子複合体
MX2008014735A (es) Compuestos de aziridinil-epotilona.
MX2008014788A (es) Conjugados de analogos de aziridinil-epotilona y composiciones farmaceuticas que comrprenden los mismos.
CN112047996A (zh) 一种通过炔丙基型锍盐选择性修饰半胱氨酸的方法
CN102627615A (zh) 一种新化合物l-4-四嗪-苯丙氨酸及其制备方法和应用
CN107400072A (zh) 一种双乙烯磺酰胺连接子及其制备和应用
Ohm et al. Diversity-oriented A3-macrocyclization for studying influences of ring-size and shape of cyclic peptides: CD36 receptor modulators
CN113557228A (zh) 位点特异性的抗体偶联和作为其具体实例的抗体-药物偶联物
Yang et al. Estrogen receptor sensing in living cells by a high affinity turn-on fluorescent probe
CN112209990B (zh) 康普瑞汀类衍生物及其抗体药物偶联物
CN105916860A (zh) 6-单乙酰吗啡类似物的合成和使用方法
CN107033043B (zh) N-取代苯磺酰基-取代苯甲酰胺类化合物及其制备药物的用途
CN107501142B (zh) 还原响应型含双二硫键的化学连接物及其制备与用途
CN110759897A (zh) 含三氮唑基的疏水金刚烷类选择性雄激素受体降解剂及其制备方法
Gilad et al. Synthesis of Novel Protected N α (ω-Drug) Amino Acid Building Units for Facile Preparation of Anticancer Drug-Conjugates
CN111269164B (zh) 酮类化合物及其制备方法和应用、定点修饰含有半胱氨酸残基或二硫键的蛋白质的方法
CN110117293A (zh) 多氟取代的Largazole类似物、其制备方法和用途
CN109305936A (zh) 一种化合物及其制备方法和在抗体药物偶联物制备中的用途
Wang et al. Synthesis and biological activity of conjugates between paclitaxel and the cell delivery vector penetratin
CN110167917B (zh) 一种具有抗癌作用的化合物及其制备方法和应用
CN114409563B (zh) 一类连接子用于蛋白质标记及其在生物药中的应用
CN110269943A (zh) 一种靶向于egfr的抗体-药物偶联物及其制备方法与应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20180914

RJ01 Rejection of invention patent application after publication