CN108522545B - 一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA‑60)和α‑烯基磺酸钠的组合、聚乙烯吡咯烷酮‑K30、气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12的组合、脱脂奶粉或壳聚寡糖、吸水树脂SAP和硅藻土组成。本发明的优点在于采用了低成本和高耐逆的发酵、干燥和孢子粉制备工艺;在生物相容性和润湿性、分散性和悬浮性试验的基础上筛选了最佳的制剂表面活性剂;本发明提高了制剂在低湿度条件下的侵染和萌发能力。有效提升了玫烟色棒束孢可湿性粉剂的制剂性能,延长了制剂的货架期和改善了制剂的田间药效与持效性。

Description

一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂及其制备方法
技术领域
本发明属于生物农药制剂领域,具体说是涉及一种以虫生真菌玫烟色棒束孢分生孢子为活性物的可湿性粉剂及其制备方法,主要用于防治温室刺吸式口器害虫(如烟粉虱等)。
背景技术
和传统化学农药防治相比,生物防治对人、其他生物以及环境安全,而且害虫不易产生抗药性,有持久控制害虫的效果。生物防治包括天敌昆虫、昆虫病原微生物、昆虫信息素等的利用。昆虫病原真菌作为一类昆虫病原微生物,在害虫生物防治中起着非常重要的作用,其中尤以真菌农药技术的应用效果最为显著。真菌农药具有寄主范围广、药效显著、对环境安全、防治害虫不产生抗药性等优点,具有广阔的发展前景。
玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea(以前称为玫烟色拟青霉Paecilomycesfumosoroseus)作为一种重要的丝孢类昆虫病原真菌,近十年来倍受研究者关注,主要作为对付粉虱、蚜虫等刺吸式口器害虫的真菌杀虫剂而被研究和开发。
在真菌农药技术应用中,高性能制剂技术的开发是关键。农药可湿性粉剂作为一种固体农药剂型具有加工简单、易于贮运、使用方便等特点比较适合作为真菌杀虫剂的剂型,目前世界真菌杀虫剂剂型中约50%以上为可湿性粉剂(WP)。作为生物体,真菌对外界环境如温度、湿度、光照等较为敏感,因此真菌杀虫剂剂型的加工比化学杀虫剂更为复杂。目前真菌杀虫剂普遍存在药效慢、效果不稳定、产品货架期短、受田间环境制约因素多导致药效差等缺陷。目前市售的真菌杀虫可湿性粉剂生产和使用普遍存在的问题有:(1)虫生真菌培养与孢子干燥收集工艺复杂且生产成本高;(2)制剂兑水形成悬浮液粒径较大或悬浮性能不佳容易堵塞喷头;(3)制剂中普遍缺少适宜的促生助剂和微生态助剂,导致虫生真菌的侵染能力受环境湿度影响很大,制约药效的发挥;(4)虫生真菌孢子对紫外照射十分敏感,制剂施用后的抗紫外能力不足,影响药剂的田间持效性。
真菌杀虫剂制剂技术可以克服这些缺陷,经过优化培养和合理加工的生物防菌制剂有利于昆虫病原真菌的存活与侵染,能够大幅提高防效。
发明内容
本发明目的在于提供一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂及其制备方法。
本发明是通过如下技术方案实现的:
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉10-30重量份、分散剂2-4重量份、润湿剂2-4重量份、悬浮稳定剂1-2重量份、紫外光保护剂1-2重量份、营养促生助剂0.3-0.5重量份、保水促生助剂0.1-0.3重量份和载体35-105重量份组成。
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉16-24重量份、分散剂2.4-3.6重量份、润湿剂2.4-3.6重量份、悬浮稳定剂1.2-1.8重量份、紫外光保护剂1.2-1.8重量份、营养促生助剂0.32-0.48重量份、保水促生助剂0.16-0.24重量份和载体56-84重量份组成。
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉20重量份、分散剂3重量份、润湿剂3重量份、悬浮稳定剂1.5重量份、紫外光保护剂1.5重量份、营养促生助剂0.4重量份、保水促生助剂0.2重量份和载体70重量份组成。
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉12重量份、分散剂3.5重量份、润湿剂2.5重量份、悬浮稳定剂1.8重量份、紫外光保护剂1.2重量份、营养促生助剂0.45重量份、保水促生助剂0.15重量份和载体100重量份组成。
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉28重量份、分散剂2.5重量份、润湿剂3.5重量份、悬浮稳定剂1.2重量份、紫外光保护剂1.8重量份、营养促生助剂0.35重量份、保水促生助剂0.25重量份和载体40重量份组成。
所述分散剂为木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合,其组合比例按重量份比为2:1,浓度为2%-4%;所述润湿剂为异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合物,其组合比例按重量份比1:1-2;所述悬浮稳定剂为聚乙烯吡咯烷酮-K30,浓度为1.5-2.0%;所述紫外光保护剂为气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12的组合物,其组合比例按重量份比1:0.02-0.04;所述营养促生助剂为脱脂奶粉或壳聚寡糖的浓度为0.3-0.4%;所述保水促生助剂为吸水树脂SAP,其浓度为0.2-0.3%,所述载体为经过加工的硅藻土。
所述分散剂为木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合的浓度优选为3%;所述异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的重量份比优选为1:2;所述悬浮稳定剂聚乙烯吡咯烷酮-K30的浓度优选为2.0%;所述气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12的重量份比优选为1:0.03;所述营养促生助剂脱脂奶粉或壳聚寡糖的浓度优选为0.3%;所述保水促生助剂吸水树脂SAP的浓度为0.25%。
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉20重量份、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合3重量份、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合3重量份、聚乙烯吡咯烷酮-K30 1.5重量份、气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12的组合1.5重量份物、脱脂奶粉或壳聚寡糖0.4重量份、吸水树脂SAP0.2重量份和硅藻土70重量份组成。
所述木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的重量份比为2:1,浓度为3%;所述异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的重量份比为1:2;所述聚乙烯吡咯烷酮-K30的浓度为2.0%;所述气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12的重量份比1:0.03;所述脱脂奶粉或壳聚寡糖的浓度为0.3%;所述吸水树脂SAP的浓度为0.25%。
所述酸性黄25和直接冻黄12的分子式为:
Figure GDA0002792810390000031
所述玫烟色棒束孢为玫烟色棒束孢菌株IF1106,该菌株分离自温室烟粉虱虫体。该菌株于2013年4月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7514,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,所述玫烟色棒束孢孢子粉的制备方法如下:将保藏于超低温冰箱的玫烟色棒束孢IF1106菌种从保藏管取出,在无菌条件下取出小磁珠并在PDA培养基平板中均匀涂划,后置于25-30℃全黑培养5-9天活化。取活化后的菌株接种在PDA培养基中上,在25-30℃、不封口、全黑暗条件下培养6-10天产孢,用0.1%吐温80无菌水将PDA培养基上的分生孢子刮洗下来,以无菌滤布过滤并以血球计数板调整浓度至1×107孢子/ml备用;取300-700重量份大米加入等量去离子水浸泡8-12小时,后滤除大米多余水分并平铺于托盘中高温灭菌,以灭菌喷雾器将接种液均匀喷洒在大米培养基上,用保鲜膜封口置于25-30℃培养箱中培养6-10天后产孢,将产孢后的托盘揭去保鲜膜置于20-30℃气流干燥箱中干燥18-22小时,后置于30-35℃气流干燥箱中再干燥0.5-1.5小时,使水分含量低于5%,将物料放入超微气流粉碎机粉碎,过400目筛,即得玫烟色棒束孢IF1106孢子粉。
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,所述玫烟色棒束孢孢子粉的制备方法如下:将保藏于超低温冰箱的玫烟色棒束孢IF1106菌种从保藏管取出,在无菌条件下取出小磁珠并在PDA培养基平板中均匀涂划,后置于25℃全黑培养7天活化;取活化后的菌株接种在PDA培养基中上,在25℃、不封口、全黑暗条件下培养8天产孢,用0.1%吐温80无菌水将PDA培养基上的分生孢子刮洗下来,以无菌滤布过滤并以血球计数板调整浓度至1×107孢子/ml备用;取大米500重量份加入等量去离子水浸泡10小时,后滤除大米多余水分并平铺于托盘中高温灭菌,以灭菌喷雾器将接种液均匀喷洒在大米培养基上,用保鲜膜封口置于25℃培养箱中培养8天后产孢,将产孢后的托盘揭去保鲜膜置于26℃气流干燥箱中干燥20小时,后置于35℃气流干燥箱中再干燥1小时,使水分含量低于5%,将物料放入超微气流粉碎机粉碎,过400目筛,即得玫烟色棒束孢IF1106孢子粉。
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,所述该粉剂的制备方法为:将载体硅藻土置于60-65℃的烘箱中干燥直至水分含量低于1%后使用超微粉碎机粉碎,再以500目不锈钢筛网过滤,不符合粒径的载体继续粉碎直至过筛备用;取玫烟色棒束孢孢子粉、分散剂木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、润湿剂异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠、悬浮稳定剂聚乙烯吡咯烷酮-K30和上述加工过的载体硅藻土,置于混合器中混合均匀后干燥;将干燥后的物料置于气流粉碎机中粉碎;粉碎后的物料加入紫外光保护剂气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12、营养促生助剂脱脂奶粉或壳聚寡糖和保水促生助剂吸水树脂SAP混合均匀即可。
本发明玫烟色棒束孢可湿性粉剂的优点在于使用自有的对刺吸式口器害虫侵染能力强的玫烟色棒束孢菌株IF1106为活性物;采用了低成本和高耐逆的发酵、干燥和孢子粉制备工艺;在生物相容性和润湿性、分散性和悬浮性试验的基础上筛选了最佳的制剂表面活性剂方案;在生物相容性和抗紫外光保护效果试验的基础上,筛选并优化了喷雾液滴紫外光保护助剂的方案与配比;筛选了适宜温湿条件下的营养及保水促生助剂。本发明玫烟色棒束孢可湿性粉剂提高了制剂在低湿度条件下的侵染和萌发能力。通过以上措施在降低生产成本的同时有效提升了玫烟色棒束孢可湿性粉剂的制剂性能,尤其是延长了制剂的货架期和改善了制剂的田间药效与持效性。
下面实验例用于进一步说明本发明,但不限于本发明。
实验例一、分散剂的筛选试验
在农药可湿性粉剂中,分散剂的主要作用是吸附在活性成分微粒表面,改变微粒原有的表面疏水特性,同时使活性成分微粒带上电荷和形成一定的空间位阻,从而有效阻止了微粒间的相互聚集,这是可湿性粉剂兑水后在形成相对稳定的可供喷雾的悬浮液。可湿性粉剂为兑水喷雾制剂,要求其在兑水后能在一定时间内具备稳定悬浮的性能。可湿性粉剂分散剂的筛选通常以所配制悬浮液的悬浮率来评价,这种方法仅能反映所使用表面活性剂的即时分散能力,但不能未能反映出其在喷雾过程中的悬浮/沉降性能,而可湿性粉剂为兑水后形成低浓度低粘度悬浮液极易沉降,因此兑水分散液的经时稳定是可湿性粉剂性能的重要指标,直接决定了制剂的药效发挥。基于此,本发明在生物相容性基础上首先测定分散体系6小时内的相对浊度变化情况来筛选适宜的分散剂种类,之后再测定不同分散剂浓度条件下分散体系6小时内相对浊度变化情况,以确定最佳分散剂浓度。具体试验方法为:配制相应的浓度的表面活性剂溶液,加入一定量的孢子粉,配制成孢子粉浓度为3g/L的分散体系,经超声波分散后进行浊度扫描,试验结果如下:
表1使用不同分散剂的玫烟色棒束孢分散体系在0-6小时内的相对浊度比较
Figure GDA0002792810390000051
注:Tr=Ti/T0(Ti为沉降时间为i时分散体的浊度值,T0为沉降时间为0时分散体系的浊度值)
试验结果显示:分散体系的经时相对浊度因使用的分散剂种类不同的差异较大,其中使用CMN与NNO组合物(2:1)作为分散剂的分散体系在0-360min的时间内Tr值变化最小,表明使用该分散剂的分散体系具有更好的稳定性。
表2使用不同浓度分散剂的玫烟色棒束孢分散体系在0-6小时内的相对浊度比较
Figure GDA0002792810390000052
Figure GDA0002792810390000061
注:Tr=Ti/T0(Ti为沉降时间为i时分散体的浊度值,T0为沉降时间为0时分散体系的浊度值)
分散剂为木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合物,其组合比例为2:1。
试验结果显示:分散体系的经时相对浊度因使用的分散剂浓度不同的差异较大,当分散剂浓度在2%-4%时,分散体系在6h后相对浊度Tr值均大于60%,表明当分散剂浓度在2%-4%时分散体系具有更好的稳定性。
实验例二、润湿剂的筛选试验
农药可湿性粉剂中润湿型有两层含义,一是制剂入水形成可喷雾悬浮液时表现出的再润湿性能,二是喷雾液溅落在靶标表面对靶标表面的润湿铺展能力。第一层作用大部分表面活性剂在较低浓度时即可实现且对制剂药效发挥性能不大,因此基于喷雾液对靶标的润湿能力对润湿剂进行筛选更为重要。本发明通过测量药液对番茄叶面的初始接触角对不同的润湿剂种类和用量进行了筛选,具体试验方法为:分别配制不同浓度飞表面活性剂溶液,摘取新鲜的番茄叶,以接触角测量仪测取几种表面活性剂的不同浓度溶液对番茄叶面的初始润湿角,试验结果如下:
表3不同种类润湿剂在不同浓度下的喷雾液对番茄叶面的初始润湿接触角
Figure GDA0002792810390000062
注:OP-10为辛基酚聚氧乙烯醚;NP-15为壬基酚聚氧乙烯醚;SDS为十二烷基硫酸钠;AOS为α-烯基磺酸钠;CA-60为异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚
农药制剂的防治效果与药液对靶标表面的润湿和持留有关,而药液的持留能力与药液的表面张力、药液在叶面上的接触角等有关。润湿接触角多被用来评判药液对靶标的润湿程度好坏,通常θ<60°表明润湿性能好,60°≤θ<80°润湿性中等,80°≤θ<100°润湿性差。如表3所示AOS(α-烯基磺酸钠)与AOS与CA-60组合物在浓度大于2%时初始润湿角均小于60°,这表明在浓度这两种润湿剂具有较高的润湿效率。但是使用AOS润湿剂在其浓度较高时,喷雾液容易产生大量泡沫影响喷雾效果,而使用CA-60与AOS组合物1:2作为润湿剂在喷雾液起泡性最低,优选作为玫烟色棒束孢可湿性粉剂的润湿剂。
表4润湿剂组合物不同组合比例在不同浓度下的喷雾液对番茄叶面的初始润湿接触角比较
Figure GDA0002792810390000071
注:润湿剂为CA-60与AOS的组合物
试验结果显示:当润湿剂组合物的组合比例为1:1-1:2时,润湿剂浓度在2%-5%之间时,药液在番茄叶面的初始润湿角θ<60°,这表明此时的润湿剂具有较高的润湿效率。
实验例三、悬浮稳定剂的筛选试验
农药可湿性粉剂中的悬浮稳定剂主要以水溶性高分子材料为主,其在分散体系中主要提供空间位阻作用以达到使活性成分颗粒稳定悬浮。本发明以所形成分散液的悬浮率为依据,在生物相容性的基础上考察了多种水溶性高分子材料对孢子粉的悬浮稳定作用,并对适应的使用浓度进行了筛选,其试验结果如下。
表5不同种类悬浮稳定剂在不同浓度下的玫烟色棒束孢孢子粉分散体系的悬浮率
Figure GDA0002792810390000081
注:PVP-K30聚乙烯吡咯烷酮K30;PVP-K15聚乙烯吡咯烷酮K15;PEG-4000为聚乙二醇4000;PEG-2000为聚乙二醇2000;CMC-Na为羧甲基纤维素钠;CMS-Na为羧甲基淀粉钠。
试验结果显示:分散体系中加入高分子类稳定剂可有效改善体系的悬浮性能,尤其是聚乙烯吡咯烷酮K30(PVP-K30),当其浓度大于1.5%时,体系的悬浮率可达80%以上,当浓度为2%以上时体系悬浮率可达90%以上,但同时喷雾液黏度也显著增大,进而影响药液的喷雾性能,因此聚乙烯吡咯烷酮K30可作为本制剂的悬浮稳定剂,当浓度为1.5-2.0%时,喷雾液的悬浮率可达80%以上,此时药液黏度增加不明显不影响药液的喷雾性能。同时优选PVP-K30浓度在1.7-2.0%时,制剂喷雾液的悬浮率可达85%以上。
实验例四、营养促生助剂的筛选试验
真菌孢子在贮存一定时间后因氧化作用其孢子萌发率会逐渐降低,严重影响真菌农药制剂的货架期。增加贮存后孢子的萌发率主要通过活性封装制剂以提高孢子存活率和提供萌发营养物质促进孢子在施用后的迅速萌发。其中孢子营养促生助剂可通过测定贮存一定时间(6个月)后孢子在一定条件下的萌发率来筛选。具体试验方法为:将孢子粗粉与表6中的各营养促生助剂按20:0.4的比例混合后抽真空封装,置于25℃条件下贮存6个月,取贮存后的孢子粉配制成浓度为1×106孢子/ml的悬浮液,取悬浮液0.02ml在载玻片上涂匀,自然风干后将载玻片置于直径9cm的灭菌的玻璃培养皿中,并在培养皿中放入装有无菌水的直径5cm的塑料培养皿,于25℃条件下保持24h后镜检200个孢子的萌发情况,计算萌发率,试验结果如下。
表6不同种类营养促生助剂在不同浓度下对玫烟色棒束孢孢子贮存萌发率的影响
Figure GDA0002792810390000091
试验结果显示:在孢子粉中加入脱脂奶粉和壳聚寡糖可显著改善孢子粉在贮存后的萌发率,当脱脂奶粉和壳聚寡糖浓度大于0.2%时,贮存后孢子萌发率均在80%以上,其中优选脱脂奶粉和壳聚寡糖浓度为0.3-0.4%时,孢子贮存后萌发率可达90%以上。
实验例五、保水促生助剂的筛选试验
真菌孢子的侵染作用受环境湿度影响很大,试验表明玫烟色棒束孢在环境湿度低于70%时基本不萌发。加入保水促生助剂的主要作用在于为真菌孢子提供微环境,以促进其在低湿度环境下的萌发。保水促生助剂主要使用粉碎后的高吸水性树脂SAP,具体验证试验方法为:首先将保水助剂粉碎过500目筛,并与孢子粉按一定比例混合,取一定量的混合物配制成浓度为1×106孢子/ml的悬浮液,取悬浮液0.02ml在载玻片上涂匀,自然风干后将载玻片置于直径9cm的灭菌的玻璃培养皿中,采用饱和盐控制空气相对湿度,具体为在培养皿中放入直径5cm的塑料培养皿,在小培养皿中分别加入葡萄糖、亚硝酸钠、氯化钠饱和盐溶液控制湿度,使相对湿度分别为55%、65%、75%和85%,浓度在0.1-0.4之间,置于25℃条件下保持24h后镜检200个孢子的萌发情况计算孢子萌发率,试验结果如下:
表7保水促生助剂对玫烟色棒束孢分生孢子在不同湿度条件下的萌发率影响
Figure GDA0002792810390000092
Figure GDA0002792810390000101
试验结果显示:在孢子粉中加入浓度为0.1-0.3%的保水促生助剂吸水树脂SAP后,孢子在75%的湿度条件下萌发率均达到70%以上,显著高于不使用该助剂时的38.4%,表明生防菌孢子在低湿度环境中的萌发率显著提高。同时当该助剂浓度在0.2-0.3之间时,孢子在65%的湿度条件下萌发率可达50%以上,在55%湿度条件下萌发率仍有30%以上的萌发率。同时当环境湿度为85%时,孢子均有80%以上的萌发率,表明高湿度环境下孢子可保持萌发率,因此保水助剂主要用于保证低湿度条件下孢子的萌发。
实验例六、载体的筛选试验
真菌孢子作为一种活体农药活性物质,其与各种助剂的生物相容性是影响制剂贮存稳定性和毒力稳定性的关键因素之一。生物农药助剂与其活性成分之间的生物相容性是一般是指载体材料与活性成分之间的相容性,由于可湿性粉剂中载体的含量最高,因此其余生防菌孢子的生物相容性筛选中首要考虑的问题,也是形成高效稳定制剂配方的基础。具体试验方法为:称取定量孢子粉按比例与一定量载体混合均匀,取上述孢子载体混合物加入PDB培养基并使培养基中孢子浓度为1×106孢子/ml。将以上接种培养液置于温度为25℃、转速为150rpm,全黑震荡培养12小时,使用显微观察每200个离散孢子中形成发芽管孢子的数目计算萌发率。试验结果如下:
表8几种无机载体与玫烟色棒束孢分生孢子的生物相容性
Figure GDA0002792810390000102
试验结果显示:以上无机载体均与玫烟色棒束孢有较好的生物相容性,其中尤其以硅藻土和滑石粉与该菌株相容性更好,表现为随着载体浓度增加,萌发率没有显著降低均保持在70%以上。另一方面由于硅藻土较滑石粉具有更好的吸附能力与分散作用,因此本发明选择以硅藻土作为载体。
实验例七、本发明玫烟色棒束孢可湿性粉剂的性能指标测定试验
1、试验材料
1)本发明1(按照实施例1方法制备),性能指标测定见表9。
2)本发明2(按照实施例2方法制备),性能指标测定见表10。
3)对照组1专利申请号201310721138.6(按照说明书实施例12方法制备),性能指标测定见表11。
4)对照组2专利申请号201510015670.5(按照说明书实施例3方法制备),性能指标测定见表12。
表9本发明1性能指标测定
Figure GDA0002792810390000111
表10本发明2性能指标测定
Figure GDA0002792810390000112
Figure GDA0002792810390000121
表11对照组1及其性能指标
Figure GDA0002792810390000122
表12对照组2及其性能指标
Figure GDA0002792810390000123
表13本发明与对照组制剂性能指标对比
Figure GDA0002792810390000131
表14本发明与对照组喷雾液性能指标对比
Figure GDA0002792810390000132
试验结果显示:本发明主要技术指标均高于对照组,其中悬浮率指标明显高于对照组。通过实施例与对照组喷雾液性能指标比较可以看出,本发明做形成的喷雾液具有更高的经时稳定性,可保证在喷雾过程中的保持较高的悬浮率进而实现喷雾液的均匀稳定喷施,同时本发明喷雾液较对照组对番茄叶面的润湿性能更强,表明喷雾液滴在叶面具有更好的铺展性能和持留效应。
八、药效测定:
1、试验材料
本发明1(按照实施例1方法制备)。
本发明2(按照实施例2方法制备)。
本发明3(按照实施例3方法制备)。
对照组1专利申请号201310721138.6(按照说明书实施例12方法制备)。
对照组2专利申请号201510015670.5(按照说明书实施例3方法制备)。
表15室内药效测定
Figure GDA0002792810390000141
注:(1)温室烟粉虱(2龄若虫)和白粉虱(2龄若虫)室内药效测定参照《农药生物活性测试标准操作规范SOP-SC-2090温室白粉虱若虫测定法》;(2)桃蚜(成虫)和朱砂叶螨(幼虫)室内药效参照《农药生物活性测试标准操作规范SOP-SC-2068叶螨叶碟喷雾法》
试验结果显示,由表15可以看出,本发明1、2、3组的效果优于对照组1和2,尤其是本发明1组与对照组1和2比较有显著差异。
表16本发明防治温室番茄烟粉虱田间药效测定
Figure GDA0002792810390000142
注:测定方法参照《中华人民共和国农业行业标准NY/T1464.43-2012农药田间药效试验准则43部分:杀虫剂防治蔬菜烟粉虱》。
试验结果显示,由表16可以看出,本发明1组的防治效果明显优于对照组1和2,这种比较有显著差异。
具体实施方式
下面的实施例仅用于进一步说明本发明但不限于本发明。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明范围。
实施例1:
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉20kg、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)3kg、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合3kg、聚乙烯吡咯烷酮-K30 1.5kg、气相二氧化硅和酸性黄25的组合物1.5kg、脱脂奶粉0.4kg、吸水树脂SAP0.2kg和硅藻土70kg组成。
上述木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的比例为2:1,浓度为3%;上述异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的比例为1:2;上述聚乙烯吡咯烷酮-K30的浓度为2.0%;上述气相二氧化硅和酸性黄25的比例为1:0.03;上述脱脂奶粉的浓度为0.3%;上述吸水树脂SAP的浓度为0.25%。
上述酸性黄25的分子式为:
Figure GDA0002792810390000151
上述玫烟色棒束孢为玫烟色棒束孢菌株IF1106,该菌株分离自温室烟粉虱虫体。该菌株于2013年4月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7514,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
上述玫烟色棒束孢孢子粉的制备方法为:将保藏于超低温冰箱的玫烟色棒束孢IF1106菌种从保藏管取出,在无菌条件下取出小磁珠并在PDA培养基平板中均匀涂划,后置于25℃全黑培养7天活化;取活化后的菌株接种在PDA培养基中上,在27℃、不封口、全黑暗条件下培养8天产孢,用0.1%吐温80无菌水将PDA培养基上的分生孢子刮洗下来,以无菌滤布过滤并以血球计数板调整浓度至1×107孢子/ml备用;取大米500kg加入等量去离子水浸泡10小时,后滤除大米多余水分并平铺于托盘中高温灭菌,以灭菌喷雾器将接种液均匀喷洒在大米培养基上,用保鲜膜封口置于25℃培养箱中培养8天后产孢,将产孢后的托盘揭去保鲜膜置于26℃气流干燥箱中干燥20小时,后置于35℃气流干燥箱中再干燥1小时,使水分含量低于5%,将物料放入超微气流粉碎机粉碎,过400目筛,即得玫烟色棒束孢IF1106孢子粉。
上述玫烟色棒束孢可湿性粉剂的制备方法为:将硅藻土置于60-65℃的烘箱中干燥直至水分含量低于1%后使用超微粉碎机粉碎,再以500目不锈钢筛网过滤,不符合粒径的硅藻土继续粉碎直至过筛备用;取玫烟色棒束孢孢子粉、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠、聚乙烯吡咯烷酮-K30和上述加工过的载体硅藻土,置于混合器中混合均匀后干燥;将干燥后的物料置于气流粉碎机中粉碎;粉碎后的物料加入气相二氧化硅和酸性黄25、脱脂奶粉和吸水树脂SAP混合均匀即可。
实施例2:
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉20kg、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合3kg、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合3kg、聚乙烯吡咯烷酮-K30 1.5kg、气相二氧化硅和直接冻黄12的组合物1.5kg、壳聚寡糖0.4kg、吸水树脂SAP0.2kg和硅藻土70kg组成。
上述木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的比例为2:1,浓度为3%;上述异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的比例为1:2;上述聚乙烯吡咯烷酮-K30的浓度为2.0%;上述气相二氧化硅和直接冻黄12的比例为1:0.03;上述壳聚寡糖的浓度为0.3%;上述吸水树脂SAP的浓度为0.25%。
上述直接冻黄12的分子式为:
Figure GDA0002792810390000161
上述玫烟色棒束孢为玫烟色棒束孢菌株IF1106,该菌株分离自温室烟粉虱虫体。该菌株于2013年4月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7514,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
上述玫烟色棒束孢孢子粉的制备方法为:将保藏于超低温冰箱的玫烟色棒束孢IF1106菌种从保藏管取出,在无菌条件下取出小磁珠并在PDA培养基平板中均匀涂划,后置于26℃全黑培养7天活化;取活化后的菌株接种在PDA培养基中上,在25℃、不封口、全黑暗条件下培养8天产孢,用0.1%吐温80无菌水将PDA培养基上的分生孢子刮洗下来,以无菌滤布过滤并以血球计数板调整浓度至1×107孢子/ml备用;取大米400kg加入等量去离子水浸泡10小时,后滤除大米多余水分并平铺于托盘中高温灭菌,以灭菌喷雾器将接种液均匀喷洒在大米培养基上,用保鲜膜封口置于27℃培养箱中培养8天后产孢,将产孢后的托盘揭去保鲜膜置于26℃气流干燥箱中干燥20小时,后置于35℃气流干燥箱中再干燥1小时,使分含量低于5%,将物料放入超微气流粉碎机粉碎,过400目筛,即得玫烟色棒束孢IF1106孢子粉。
上述玫烟色棒束孢可湿性粉剂的制备方法为:将硅藻土置于60-65℃的烘箱中干燥直至水分含量低于1%后使用超微粉碎机粉碎,再以500目不锈钢筛网过滤,不符合粒径的硅藻土继续粉碎直至过筛备用;取玫烟色棒束孢孢子粉、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠、聚乙烯吡咯烷酮-K30和上述加工过的硅藻土,置于混合器中混合均匀后干燥;将干燥后的物料置于气流粉碎机中粉碎;粉碎后的物料加入气相二氧化硅和直接冻黄12、壳聚寡糖和吸水树脂SAP混合均匀即可。
实施例3
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉12kg、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)3.5kg、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合2.5kg、聚乙烯吡咯烷酮-K30 1.8kg、气相二氧化硅和酸性黄25的组合物1.2kg、脱脂奶粉0.45kg、吸水树脂SAP0.15kg和硅藻土100kg组成。
上述木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的比例为2:1,浓度为2%;上述异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的比例为1:1;上述聚乙烯吡咯烷酮-K30的浓度为1.5%;上述气相二氧化硅和酸性黄25的比例为1:0.02;上述脱脂奶粉的浓度为0.4%;上述吸水树脂SAP的浓度为0.3%。上述酸性黄25的分子式为:
Figure GDA0002792810390000171
上述玫烟色棒束孢为玫烟色棒束孢菌株IF1106,该菌株分离自温室烟粉虱虫体。该菌株于2013年4月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7514,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
上述玫烟色棒束孢孢子粉的制备方法为:将保藏于超低温冰箱的玫烟色棒束孢IF1106菌种从保藏管取出,在无菌条件下取出小磁珠并在PDA培养基平板中均匀涂划,后置于25℃全黑培养6天活化;取活化后的菌株接种在PDA培养基中上,在25℃、不封口、全黑暗条件下培养9天产孢,用0.1%吐温80无菌水将PDA培养基上的分生孢子刮洗下来,以无菌滤布过滤并以血球计数板调整浓度至1×107孢子/ml备用;取大米600kg加入等量去离子水浸泡9小时,后滤除大米多余水分并平铺于托盘中高温灭菌,以灭菌喷雾器将接种液均匀喷洒在大米培养基上,用保鲜膜封口置于25℃培养箱中培养7天后产孢,将产孢后的托盘揭去保鲜膜置于26℃气流干燥箱中干燥18小时,后置于35℃气流干燥箱中再干燥0.6小时,使水分含量低于5%,将物料放入超微气流粉碎机粉碎,过400目筛,即得玫烟色棒束孢IF1106孢子粉。
上述玫烟色棒束孢可湿性粉剂的制备方法为:将硅藻土置于60-65℃的烘箱中干燥直至水分含量低于1%后使用超微粉碎机粉碎,再以500目不锈钢筛网过滤,不符合粒径的硅藻土继续粉碎直至过筛备用;取玫烟色棒束孢孢子粉、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠、聚乙烯吡咯烷酮-K30和上述加工过的硅藻土,置于混合器中混合均匀后干燥;将干燥后的物料置于气流粉碎机中粉碎;粉碎后的物料加入气相二氧化硅和酸性黄25、脱脂奶粉和吸水树脂SAP混合均匀即可。
实施例4
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉28kg、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合2.5kg、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合3.5kg、聚乙烯吡咯烷酮-K30 1.2kg、气相二氧化硅和直接冻黄12的组合物1.8kg、脱脂奶粉或壳聚寡糖0.35kg、吸水树脂SAP0.25kg和硅藻土40kg组成。
上述木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的比例为2:1,浓度为4%;上述异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的比例为1:1.5;上述聚乙烯吡咯烷酮-K30的浓度为1.7%;上述气相二氧化硅和直接冻黄12的比例为1:0.04;上述壳聚寡糖的浓度为0.3%;上述吸水树脂SAP的浓度为0.4%。
上述直接冻黄12的分子式为:
Figure GDA0002792810390000191
上述玫烟色棒束孢为玫烟色棒束孢菌株IF1106,该菌株分离自温室烟粉虱虫体。该菌株于2013年4月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7514,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
上述玫烟色棒束孢孢子粉的制备方法为:将保藏于超低温冰箱的玫烟色棒束孢IF1106菌种从保藏管取出,在无菌条件下取出小磁珠并在PDA培养基平板中均匀涂划,后置于25℃全黑培养9天活化;取活化后的菌株接种在PDA培养基中上,在25℃、不封口、全黑暗条件下培养7天产孢,用0.1%吐温80无菌水将PDA培养基上的分生孢子刮洗下来,以无菌滤布过滤并以血球计数板调整浓度至1×107孢子/ml备用;取大米450kg加入等量去离子水浸泡11小时,后滤除大米多余水分并平铺于托盘中高温灭菌,以灭菌喷雾器将接种液均匀喷洒在大米培养基上,用保鲜膜封口置于25℃培养箱中培养11天后产孢,将产孢后的托盘揭去保鲜膜置于26℃气流干燥箱中干燥21小时,后置于32℃气流干燥箱中再干燥1.3小时,使水分含量低于5%,将物料放入超微气流粉碎机粉碎,过400目筛,即得玫烟色棒束孢IF1106孢子粉。
上述玫烟色棒束孢可湿性粉剂的制备方法为:将硅藻土置于60-65℃的烘箱中干燥直至水分含量低于1%后使用超微粉碎机粉碎,再以500目不锈钢筛网过滤,不符合粒径的硅藻土继续粉碎直至过筛备用;取玫烟色棒束孢孢子粉、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠、聚乙烯吡咯烷酮-K30和上述加工过的硅藻土,置于混合器中混合均匀后干燥;将干燥后的物料置于气流粉碎机中粉碎;粉碎后的物料加入气相二氧化硅和直接冻黄12、壳聚寡糖和吸水树脂SAP混合均匀即可。
实施例5:
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉16kg、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)3.6kg、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合2.4kg、聚乙烯吡咯烷酮-K30 1.8kg、气相二氧化硅和酸性黄25的组合物1.2kg、脱脂奶粉0.48kg、吸水树脂SAP0.16kg和硅藻土86kg组成。
上述木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的比例为2:1,浓度为3%;上述异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的比例为1:2;上述聚乙烯吡咯烷酮-K30的浓度为2.0%;上述气相二氧化硅和酸性黄25的比例为1:0.03;上述脱脂奶粉的浓度为0.3%;上述吸水树脂SAP的浓度为0.25%。
上述酸性黄25的分子式为:
Figure GDA0002792810390000201
上述玫烟色棒束孢为玫烟色棒束孢菌株IF1106,该菌株分离自温室烟粉虱虫体。该菌株于2013年4月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7514,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
上述玫烟色棒束孢孢子粉的制备方法为:将保藏于超低温冰箱的玫烟色棒束孢IF1106菌种从保藏管取出,在无菌条件下取出小磁珠并在PDA培养基平板中均匀涂划,后置于25℃全黑培养7天活化;取活化后的菌株接种在PDA培养基中上,在30℃、不封口、全黑暗条件下培养8天产孢,用0.1%吐温80无菌水将PDA培养基上的分生孢子刮洗下来,以无菌滤布过滤并以血球计数板调整浓度至1×107孢子/ml备用;取大米650kg加入等量去离子水浸泡10小时,后滤除大米多余水分并平铺于托盘中高温灭菌,以灭菌喷雾器将接种液均匀喷洒在大米培养基上,用保鲜膜封口置于25℃培养箱中培养8天后产孢,将产孢后的托盘揭去保鲜膜置于26℃气流干燥箱中干燥20小时,后置于33℃气流干燥箱中再干燥1小时,使水分含量低于5%,将物料放入超微气流粉碎机粉碎,过400目筛,即得玫烟色棒束孢IF1106孢子粉。
上述玫烟色棒束孢可湿性粉剂的制备方法为:将硅藻土置于60-65℃的烘箱中干燥直至水分含量低于1%后使用超微粉碎机粉碎,再以500目不锈钢筛网过滤,不符合粒径的硅藻土继续粉碎直至过筛备用;取玫烟色棒束孢孢子粉、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠、聚乙烯吡咯烷酮-K30和上述加工过的硅藻土,置于混合器中混合均匀后干燥;将干燥后的物料置于气流粉碎机中粉碎;粉碎后的物料加入气相二氧化硅和酸性黄25、脱脂奶粉和吸水树脂SAP混合均匀即可。
实施例6:
一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉24kg、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合2.4kg、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合3.6kg、聚乙烯吡咯烷酮-K30 1.2kg、气相二氧化硅和直接冻黄12的组合物1.8kg、壳聚寡糖0.32kg、吸水树脂SAP0.24kg和硅藻土56kg组成。
上述木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的比例为2:1,浓度为3%;上述异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的比例为1:2;上述聚乙烯吡咯烷酮-K30的浓度为2.0%;上述气相二氧化硅和直接冻黄12的比例为1:0.03;上述壳聚寡糖的浓度为0.3%;上述吸水树脂SAP的浓度为0.25%。
上述直接冻黄12的分子式为:
Figure GDA0002792810390000211
上述玫烟色棒束孢为玫烟色棒束孢菌株IF1106,该菌株分离自温室烟粉虱虫体。该菌株于2013年4月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7514,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
上述玫烟色棒束孢孢子粉的制备方法为:将保藏于超低温冰箱的玫烟色棒束孢IF1106菌种从保藏管取出,在无菌条件下取出小磁珠并在PDA培养基平板中均匀涂划,后置于27℃全黑培养7天活化;取活化后的菌株接种在PDA培养基中上,在27℃、不封口、全黑暗条件下培养8天产孢,用0.1%吐温80无菌水将PDA培养基上的分生孢子刮洗下来,以无菌滤布过滤并以血球计数板调整浓度至1×107孢子/ml备用;取大米500kg加入等量去离子水浸泡10小时,后滤除大米多余水分并平铺于托盘中高温灭菌,以灭菌喷雾器将接种液均匀喷洒在大米培养基上,用保鲜膜封口置于25℃培养箱中培养8天后产孢,将产孢后的托盘揭去保鲜膜置于26℃气流干燥箱中干燥20小时,后置于32℃气流干燥箱中再干燥1小时,待物料水分含量低于5%时放入超微气流粉碎机粉碎,过400目筛,即得玫烟色棒束孢IF1106孢子粉。
上述玫烟色棒束孢可湿性粉剂的制备方法为:将硅藻土置于60-65℃的烘箱中干燥直至水分含量低于1%后使用超微粉碎机粉碎,再以500目不锈钢筛网过滤,不符合粒径的硅藻土继续粉碎直至过筛备用;取玫烟色棒束孢孢子粉、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠、聚乙烯吡咯烷酮-K30和上述加工过的硅藻土,置于混合器中混合均匀后干燥;将干燥后的物料置于气流粉碎机中粉碎;粉碎后的物料加入气相二氧化硅和直接冻黄12、壳聚寡糖和吸水树脂SAP混合均匀即可。

Claims (9)

1.一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,其特征在于,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉10-30重量份、分散剂2-4重量份、润湿剂2-4重量份、悬浮稳定剂1-2重量份、紫外光保护剂1-2重量份、营养促生助剂0.3-0.5重量份、保水促生助剂0.1-0.3重量份和载体35-105重量份组成;所述玫烟色棒束孢菌株为玫烟色棒束孢IF1106;所述分散剂为木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合物,其组合比例按重量份比为2:1;所述润湿剂为异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合物,其组合比例按重量份比1:1-2;所述悬浮稳定剂为聚乙烯吡咯烷酮-K30;所述紫外光保护剂为气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12的组合物,其组合比例按重量份比1:0.02-0.04;所述营养促生助剂为脱脂奶粉或壳聚寡糖;所述保水促生助剂为吸水树脂SAP;所述载体为经过加工的硅藻土;所述加工过的硅藻土为:将硅藻土置于60-65℃的烘箱中干燥直至水分含量低于1%后使用超微粉碎机粉碎,再以500目不锈钢筛网过滤,不符合粒径的硅藻土继续粉碎直至过筛。
2.如权利要求1所述的可湿性粉剂,其特征在于,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉16-24重量份、分散剂2.4-3.6重量份、润湿剂2.4-3.6重量份、悬浮稳定剂1.2-1.8重量份、紫外光保护剂1.2-1.8重量份、营养促生助剂0.32-0.48重量份、保水促生助剂0.16-0.24重量份和载体56-84重量份组成。
3.如权利要求1或2所述的可湿性粉剂,其特征在于,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉20重量份、分散剂3重量份、润湿剂3重量份、悬浮稳定剂1.5重量份、紫外光保护剂1.5重量份、营养促生助剂0.4重量份、保水促生助剂0.2重量份和载体70重量份;
或玫烟色棒束孢孢子粉12重量份、分散剂3.5重量份、润湿剂2.5重量份、悬浮稳定剂1.8重量份、紫外光保护剂1.2重量份、营养促生助剂0.45重量份、保水促生助剂0.15重量份和载体100重量份;
或玫烟色棒束孢孢子粉28重量份、分散剂2.5重量份、润湿剂3.5重量份、悬浮稳定剂1.2重量份、紫外光保护剂1.8重量份、营养促生助剂0.35重量份、保水促生助剂0.25重量份和载体40重量份组成。
4.如权利要求1所述的可湿性粉剂,其特征在于,所述分散剂由木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)按重量份比2:1组成;所述润湿剂由异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠按重量份比1:2组成;所述紫外光保护剂由气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12按重量份比1:0.03组成。
5.一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂,其特征在于,该粉剂由玫烟色棒束孢孢子粉20重量份、木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的组合物3重量份、异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的组合物3重量份、聚乙烯吡咯烷酮-K301.5重量份、气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12的组合物1.5重量份、脱脂奶粉或壳聚寡糖0.4重量份、吸水树脂SAP0.2重量份和硅藻土70重量份组成;所述玫烟色棒束孢菌株为玫烟色棒束孢IF1106。
6.如权利要求5所述的可湿性粉剂,其特征在于,所述木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)的重量份比为2:1;所述异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠的重量份比为1:2;所述气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12的重量份比1:0.03。
7.如权利要求4-6任一所述的可湿性粉剂,其特征在于,所述酸性黄25和直接冻黄12的分子式为:
Figure FDA0002939109080000021
8.如权利要求1、2或5任一所述的可湿性粉剂,其特征在于,所述玫烟色棒束孢孢子粉的制备方法如下:将保藏于超低温冰箱的玫烟色棒束孢IF1106菌种从保藏管取出,在无菌条件下取出小磁珠并在PDA培养基平板中均匀涂划,后置于25℃全黑培养7天活化;取活化后的菌株接种在PDA培养基中上,在25℃、不封口、全黑暗条件下培养8天产孢,用0.1%吐温80无菌水将PDA培养基上的分生孢子刮洗下来,以无菌滤布过滤并以血球计数板调整浓度至1×107孢子/ml备用;取大米500重量份加入等量去离子水浸泡10小时,后滤除大米多余水分并平铺于托盘中高温灭菌,以灭菌喷雾器将接种液均匀喷洒在大米培养基上,用保鲜膜封口置于25℃培养箱中培养8天后产孢,将产孢后的托盘揭去保鲜膜置于26℃气流干燥箱中干燥20小时,后置于35℃气流干燥箱中再干燥1小时,使水分含量低于5%,将物料放入超微气流粉碎机粉碎,过400目筛,即得玫烟色棒束孢IF1106孢子粉。
9.如权利要求4或6任一所述的可湿性粉剂,其特征在于,所述该粉剂的制备方法为:将载体硅藻土置于60-65℃的烘箱中干燥直至水分含量低于1%后使用超微粉碎机粉碎,再以500目不锈钢筛网过滤,不符合粒径的载体继续粉碎直至过筛备用;取玫烟色棒束孢孢子粉、分散剂木质素磺酸钠(CMN)和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)、润湿剂异辛醇聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚(CA-60)和α-烯基磺酸钠、悬浮稳定剂聚乙烯吡咯烷酮-K30和上述加工过的载体硅藻土,置于混合器中混合均匀后干燥;将干燥后的物料置于气流粉碎机中粉碎;粉碎后的物料加入紫外光保护剂气相二氧化硅和酸性黄25或者直接冻黄12、营养促生助剂脱脂奶粉或壳聚寡糖和保水促生助剂吸水树脂SAP混合均匀即可。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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CN111269840B (zh) * 2020-03-06 2022-02-22 山西农业大学 一种玫烟色棒束孢发酵与孢子粉制备工艺
CN114403138A (zh) * 2021-12-16 2022-04-29 山西农业大学 一种真菌杀虫剂专用桶混增效助剂及其制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103451113A (zh) * 2013-09-02 2013-12-18 山西农业大学 一种玫烟色棒束孢菌菌株的分离及培养方法
CN103749441A (zh) * 2013-12-24 2014-04-30 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂及其制备方法和应用
CN104642392A (zh) * 2015-01-13 2015-05-27 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢菌分生孢子可湿性粉剂及其应用
CN106417282A (zh) * 2016-09-22 2017-02-22 江西天祥通用航空股份有限公司 一种玫烟色拟青霉颗粒剂及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103451113A (zh) * 2013-09-02 2013-12-18 山西农业大学 一种玫烟色棒束孢菌菌株的分离及培养方法
CN103749441A (zh) * 2013-12-24 2014-04-30 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢可湿性粉剂及其制备方法和应用
CN104642392A (zh) * 2015-01-13 2015-05-27 华南农业大学 一种玫烟色棒束孢菌分生孢子可湿性粉剂及其应用
CN106417282A (zh) * 2016-09-22 2017-02-22 江西天祥通用航空股份有限公司 一种玫烟色拟青霉颗粒剂及其制备方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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