CN108463453A - 用于制备具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于制备具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的改进且重复性好的方法，此外，本发明还涉及柠檬酸恩氯米芬的固体形式。

Description

用于制备具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的方法
技术领域
本发明涉及一种用于制备柠檬酸恩氯米芬的改进的方法。此外，本发明还涉及柠檬酸恩氯米芬的一种固体形式。
背景技术
柠檬酸恩氯米芬是一种用于治疗继发性性腺机能亢进的目前正在III期临床中评估的活性药物成分。此外，它也可潜在地用于患有2型糖尿病的性腺机能减退的男性中的辅助疗法。
式(I)的柠檬酸恩氯米芬：
具有化学名称2-[4-[(1E)-2-氯-1,2-二苯基乙烯基]苯氧基]-N,N-二乙基-乙胺2-羟基-1,2,3-丙烷三甲酸盐(1:1)，具有CAS RN.7599-79-3，并且它也被称为单柠檬酸反式-克罗米芬、柠檬酸E-克罗米芬或单柠檬酸恩氯米芬。
恩氯米芬是化学名称为2-[4-[(2-氯-1,2-二苯基乙烯基)苯氧基]-N,N-二乙基-乙胺的活性药物成分克罗米芬的组分，因为克罗米芬是几何异构体反式-克罗米芬(即恩氯米芬)和顺式-克罗米芬的混合物。
美国专利3,848,030在实施例31和32中公开了一种通过用消旋的联萘基-磷酸制备盐来拆分克罗米芬的几何异构体的方法。
在较晚的文献Acta Cryst.(1976),B32，第291-293页中，通过单晶体X-射线衍射明确地建立了实际的几何异构。
最后，在文献“Analytical profiles of drug substances and excipients”，vol.25，(1998)，第85-121页，特别是第99页中，陈述了在1976年以前，顺式立体化学被错误地指定给克罗米芬的反式异构体(E-克罗米芬或恩氯米芬)，并且只是在上述Acta Cryst.上的文献之后才明确地指定了正确的几何异构。
通过我们的实验确认了这些现有技术中的观察。具体来说，重复美国专利3,848,030的实验31，用消旋的联萘基-磷酸分离到反式-克罗米芬盐而不是如所述专利中所陈述的顺式-克罗米芬，正如通过2D H-NMR分析(NOESY实验)所确认的。因此，US3,848,030的实施例31最终提供了从乙酸乙酯与乙醇的混合物结晶的柠檬酸恩氯米芬，其具有133-135℃的m.p.。相反，实施例32提供了从乙酸乙酯与乙醇的混合物结晶的柠檬酸顺式-克罗米芬，其具有120-126℃的m.p.。
因此，怀着制备柠檬酸恩氯米芬的目的，重新进行了US3,848,030的整个实验31，也从乙酸乙酯与乙醇的混合物进行了产物的结晶，由此提供了分别在114℃和188℃处具有两个DSC峰的非结晶固体，尽管用于所述重做实施例的起始原料是相当纯的物质(HPLC分析(A/A％)为98.95％的恩氯米芬)，并且具有与在现有技术实验中使用的相同的化学纯度(我们的恩氯米芬BPA盐的m.p.为218℃，与此相比现有技术的实施例31的恩氯米芬BPA盐的m.p.为220-222℃)。
专利US2,914,563在实施例3中公开了一种制备含有30％至50％的作为柠檬酸盐的顺式-克罗米芬的柠檬酸反式-克罗米芬的方法，所述方法将1-p-(β-二乙基氨基乙氧基)苯基]-1,2-二苯基乙烯盐酸盐与N-氯琥珀酰亚胺在无水氯仿中、在回流下反应。
在综述Pharmaceutical Chemistry Journal November 1984,Volume 18,Issue11,pag.758-764中，Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal(1984)，18(11)，1318-24英文版(标题：柠檬酸克罗米芬的顺式和反式异构体及其合成的一些中间体的合成和生物学研究(Synthesis and biological study of the cis-and trans-isomers of Clomiphenecitrate and some intermediates of its synthesis))公开了柠檬酸克罗米芬的反式-异构体即柠檬酸恩氯米芬，其特征为：
1H-NMR(MeOD)d 7.4-6.7(m,14H)；4.27(t,2H,-OCH2)；3.51(t,2H,CH2-N)；3.28(q,4H,2xN-CH2))；2.73(2H)；2.78(2H)；1.31(t,6H,2xN-C-CH3))
熔点：138-139℃(通过GLC测定纯度为98％)；
IR光谱，νcm-1(悬浮在矿物油中)：3640,3430,1720,1710(柠檬酸盐),1600-1555(宽带，二苯乙烯系统)；750.
UV光谱：λmax＝243nm,ε21,800，和λmax 300nm,ε11,400。
这些用于制备柠檬酸恩氯米芬的现有技术方法不允许制备具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬，事实上，利用乙酸乙酯与乙醇的混合物的结晶不提供具有针状晶体的结晶固体。
此外，在文献中描述柠檬酸恩氯米芬具有不同的熔点，具体为133-135℃和138-139℃。所述柠檬酸恩氯米芬的固体形式不适用于稳定性研究，并且此外在中性或酸性pH下在水中显示出相对不良的溶解性。
此外，现有技术方法具有与方法和由此获得的固体形式的可重复性差相关的缺点。
发明内容
因此，本发明致力解决的问题是提供一种利用可重复的过程制备具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的方法。
这个问题通过在权利要求书中所概述的制备柠檬酸恩氯米芬的方法得以解决，所述权利要求书的定义是本说明书的有机组成部分。
具体来说，本发明提供了一种用于制备具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的方法：
所述方法借助于用C2-C5烷基醇与水的混合物对式(I)的柠檬酸恩氯米芬进行结晶，其中水的量在10％至40％v/v之间。
另一方面，所述方法提供了柠檬酸恩氯米芬的一种改进的固体形式，所述形式是具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬，其具有下述性质：
-在热力学上更加稳定，
-适用于湿热条件下的稳定性研究，
-在中性或酸性pH值下的水中溶解性更高，
此外，
-和/或采取仅针状晶体的形式并且是均质的固体，
-和/或具有特定的粒度分布。
另一方面，本发明提供了具有特定平均粒度的微粉化的柠檬酸恩氯米芬，所述平均粒度在3至25微米之间的范围内。
另一方面，提供了一种Z-异构体的量低于0.20A/A％的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的制备方法。
从后文中报告的作为本发明的指示而提供的实现本发明的实例的描述，可以看出符合本发明的方法和固体形式的其他特点和优点。
附图说明
图1示出了通过从乙醇与15％v/v水的混合物结晶而获得的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的固体形式的XPRD衍射图。
图2示出了通过从乙醇与15％v/v水的混合物结晶而获得的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的固体形式的DSC曲线。
图3示出了通过从异丙醇与15％v/v水的混合物结晶而获得的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的固体形式的DSC曲线。
图4示出了通过从丙酮与15％v/v水的混合物结晶而获得的具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的固体形式的DSC曲线。
图5示出了通过从乙醇与30％v/v水的混合物结晶而获得的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的晶体的显微术分析，即标尺为50μm的图片(图片上侧中50μm的尺寸)。
图6示出了通过从正丙醇与15％v/v水的混合物结晶而获得的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的晶体的显微术分析，即标尺为50μm的图片(图片上侧中50μm的尺寸)。
图7示出了通过从正丁醇与15％v/v水的混合物结晶而获得的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的晶体的显微术分析，即标尺为50μm的图片(图片上侧中50μm的尺寸)。
图8示出了通过从丙酮与15％v/v水的混合物结晶而获得的具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的显微术分析，即标尺为50μm的图片(图片上侧中50μm的尺寸)。
图9示出了批次722即从丙酮结晶的具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬与批次723即从乙醇结晶的具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的吸附等温线比较。
图10示出了针对时间作图的针状和非针状两种柠檬酸恩氯米芬的固体形式的溶解性的HPLC A/A平均值。
图11示出了针对时间作图的针状和非针状两种柠檬酸恩氯米芬的固体形式的溶解性的HPLC A/A平均值(如图11中所示)。
图12示出了按照本发明的方法用于获得具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的最适温度冷却斜坡。
图13示出了从本发明的方法获得的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的使用PVM探针的iC FBRM分析。
具体实施方式
本发明涉及一种用于制备具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的方法：
所述方法利用C2-C5烷基醇与水的混合物对式(I)的柠檬酸恩氯米芬进行结晶，其中水的量在10％至40％v/v之间。
事实上已令人吃惊地发现，使用其中水的量在10％至40％v/v之间的C2-C5烷基醇与水的混合物对式(I)的柠檬酸恩氯米芬进行结晶，是用于获得具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的重复性好且可靠的方法。
作为本发明的方法的其他优点，可以指出，所述方法提供的柠檬酸恩氯米芬具有尺寸和/或长度大的针状晶体，具体来说，所述针状晶体具有在60μm至120μm范围内的均方权重。
本发明的方法的另一个优点在于它允许生产采取仅针状晶体的形式的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬。本发明的方法事实上提供作为均质固体的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬。
此外，与通过本发明的方法获得的具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬相关的另一个重要优点在于所述固体形式具有最高的热稳定性，正如通过如图9所示和实施例11中所描述的在湿热条件下的稳定性研究所确认的，并且也通过与图4相比图2和图3中所示的最高熔点所确认。
最后，按照本发明的方法生产的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的另一个相关特点是它的溶解性，特别是所述固体形式与具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬相比在中性或酸性pH值下在水中的溶解性更高。所述溶解性研究表明具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬具有更高的生物可利用性。
本发明的方法提供式(I)的柠檬酸恩氯米芬，其也被命名为单柠檬酸恩氯米芬；具体来说，术语柠檬酸盐或单柠檬酸盐意味着1摩尔柠檬酸用于1摩尔恩氯米芬。
本发明的方法利用式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶来进行。在这种情况下，所述结晶是从其中已预先制备和/或溶解有式(I)的柠檬酸恩氯米芬的溶液形成固体晶体的过程。具体来说，本发明的方法的术语结晶意味着结晶或重结晶。
重结晶是一种用于纯化化学化合物和/或用于获得不同固体形式(例如同质多晶体)的技术，具体来说，将固体化合物溶解在适合的溶剂中，然后利用加热和随后的冷却处理或通过溶解在适合的溶剂中并添加反溶剂，使所述化合物重新变成固体，通常为固体晶体。
因此，本发明的方法可以例如从柠檬酸恩氯米芬开始并通过加热/冷却处理使它重结晶来进行，或者可以通过获得溶液形式的柠檬酸恩氯米芬，然后例如通过冷却或通过添加反溶剂或通过其他方式结晶所述产物来进行。
根据本发明的方法，式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶使用C2-C5烷基醇与水的混合物来进行，其中水的量在10％至40％v/v之间。
其中水的量在10％至40％v/v之间的C2-C5烷基醇与水的混合物，意味着水的体积为所述溶剂混合物的整个体积的10％至40％。例如，1升乙醇与10％v/v水的混合物意味着900mL乙醇和100mL水。同样地，10mL异丙醇与40％v/v水的混合物意味着与4ml水混合的6ml异丙醇。
根据本发明的方法的优选实施方式，术语C2-C5烷基醇，即上述混合物的组分，意味着选自下述各项的一种烷基醇：无水乙醇，乙醇；异丙醇或2-丙醇；1-丙醇；1-丁醇；2-丁醇；2-甲基-2-丙醇；2-甲基-1-丙醇；1-戊醇；3-甲基-1-丁醇；2-甲基-1-丁醇；2-甲基-2-丁醇；2-戊醇；3-戊醇；2,2-二甲基-1-丙醇；3-甲基-2-丁醇。
根据本发明的方法的更优选的实施方式，所述C2-C5烷基醇是乙醇或异丙醇。
实施例6提供了本发明的效果的清晰的比较性证据，事实上，利用丙酮与15％v/v水的混合物对式(I)的柠檬酸恩氯米芬进行结晶而制备的式(I)的柠檬酸恩氯米芬不具有针状晶体，因为它明显地具有不同的晶体形态(参见图8与图5、6和7的比较)。
两种固体形式，一种使用丙酮与15％v/v水的混合物结晶来获得(非针状晶体)，另一种使用乙醇与15％v/v水的混合物来获得(针状晶体)，它们的不同晶体习性事实上通过显微术分析得到良好的证实。
具体来说，通过显微术分析获取的图8与图5、6和7中图片的比较，为所述两种形式的不同晶体习性提供了更好的进一步证据。
此外，图5-7清楚地示出了利用其中水的量在10％至40％v/v之间的C2-C5烷基醇与水的混合物对式(I)的柠檬酸恩氯米芬进行结晶而获得的柠檬酸恩氯米芬的针状晶体习性。
具体来说，具有针形状的晶体、即针状晶体是薄、圆柱形晶体，通常但不必定在末端具有尖点。
根据本发明的方法的优选实施方式，所述C2-C5烷基醇与水的混合物中水的量在10％至30％v/v之间。
根据本发明的方法的更优选的实施方式，所述C2-C5烷基醇与水的混合物中水的量在12％至20％v/v之间。
根据本发明的方法的又一个更优选的实施方式，所述C2-C5烷基醇与水的混合物中水的量为15％v/v。
根据本发明的方法的优选实施方式，式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶在乙醇或异丙醇与水的混合物中进行，所述混合物中水的量在10％至30％v/v之间。
根据本发明的方法的优选实施方式，式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶在乙醇或异丙醇与水的混合物中进行，所述混合物中水的量在12％至20％v/v之间。
根据本发明的方法的更优选的实施方式，式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶在乙醇或异丙醇与水的混合物中进行，其中水的量为15％v/v。
根据本发明的方法的优选实施方式，式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶在一定量的C2-C5烷基醇与水的混合物中进行，所述量相对于柠檬酸恩氯米芬(I)的量在10至15倍体积之间。
上述C2-C5烷基醇与水的混合物的体积是相对于柠檬酸恩氯米芬(I)的量。柠檬酸恩氯米芬的量可以是起始原料柠檬酸恩氯米芬的重量，或者可以假定所有恩氯米芬被转化成柠檬酸恩氯米芬，通过化学计量计算来确定。
体积意味着作为柠檬酸恩氯米芬的重量的每单位产物的溶剂体积。因此，例如，1倍体积是每1千克1升，或每1克1mL，或每1毫克1微升。因此，10倍体积意味着例如每1毫克物质10微升，在这种情况下所述物质是式(I)的化合物。
本发明的方法可以在20℃至100℃之间的温度下进行。
根据本发明的方法的优选实施方式，式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶在所述结晶开始的温度下进行，所述温度在60℃至70℃之间。
根据本发明的方法的更优选的实施方式，式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶在65℃的所述结晶开始的温度下进行。
根据本发明的方法的优选实施方式，在式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶期间，将温度在3小时内从60℃至70℃范围内的温度降低到0℃的温度。
所述温度冷却斜坡是逐步的：一开始缓慢冷却，然后逐渐更快地冷却直至0℃，具体来说，所述冷却如下述步骤所述来进行(也参见图10)：
在80分钟的时间内温度从65℃达到60℃，
在50分钟的时间内温度从60℃达到55℃，
在30分钟的时间内温度从55℃达到30℃，
在30分钟的时间内温度从30℃达到0℃。
根据本发明的方法的优选实施方式，使用其中水的量在10％至40％v/v之间的C2-C5烷基醇与水的混合物进行的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶，在60℃至55℃之间的温度下用具有针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬接种。
具有针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的种晶的量相对于柠檬酸恩氯米芬(I)的总量为0.20％w/w至0.50％w/w。
柠檬酸恩氯米芬化合物可以使用各种不同的方法来获得，例如将式(II)的恩氯米芬溶解在C2-C5烷基醇与水的混合物中，其中水的量在10％至40％v/v之间，由此获得式(II)的恩氯米芬的溶液，然后添加柠檬酸或柠檬酸单水合物。
或者，柠檬酸恩氯米芬通过将固体恩氯米芬BPA盐转化成溶液形式的式(II)的恩氯米芬，然后添加单水合或无水柠檬酸来形成。所述柠檬酸的添加可以作为固体形式，或在C2-C5烷基醇与10％至40％v/v水的混合物的溶液中。
此外，柠檬酸的添加量在0.97至1.12摩尔当量的范围内，优选地在1.00至1.10摩尔当量的范围内。
式(II)的恩氯米芬的溶液可以通过将固体形式的式(II)的恩氯米芬溶解在溶剂中来制备，或者可以通过将固体形式的恩氯米芬BPA盐转化成溶液形式的式(II)的恩氯米芬来制备。
根据本发明的方法的优选实施方式，式(I)的柠檬酸恩氯米芬通过向式(II)的恩氯米芬在C2-C5烷基醇与10％至40％v/v水的混合物中的溶液添加固体柠檬酸或柠檬酸单水合物来制备。
根据本发明的方法的更优选的实施方式，式(I)的柠檬酸恩氯米芬通过向式(II)的恩氯米芬的溶液添加柠檬酸或柠檬酸单水合物来制备，其中将恩氯米芬和所述柠檬酸两者溶解在C2-C5烷基醇与水的混合物中，其中水的量在10％至40％v/v之间。
根据本发明的方法的更优选的实施方式，所述式(II)的恩氯米芬的溶液和所述其中溶解有柠檬酸的溶液是相同的溶液，其是其中水的量在10％至40％v/v之间的C2-C5烷基醇与水的混合物。
具体来说，上面提到的C2-C5烷基醇与水的混合物对于所述式(II)的恩氯米芬的溶液和所述含有柠檬酸的溶液两者来说是相同的。
根据本发明的方法的另一个优选实施方式，其中水的量在10％至40％v/v之间的C2-C5烷基醇与水的混合物的量，相对于柠檬酸恩氯米芬(I)的量在5至6倍体积之间。
上述式(II)的恩氯米芬的溶液的C2-C5烷基醇与水的混合物的体积是相对于柠檬酸恩氯米芬(I)的量，其可以是所述起始原料的重量，或者可以假定所有式(II)的恩氯米芬被转化成柠檬酸恩氯米芬(I)，通过化学计量计算来确定。
根据本发明的方法的优选实施方式，式(I)的柠檬酸恩氯米芬的结晶通过向式(II)的恩氯米芬的溶液添加柠檬酸来进行，所述柠檬酸的添加在在60℃至70℃之间的温度下进行。
符合本发明的方法从式(II)的恩氯米芬开始的摩尔得率在90％至96％之间。
根据本发明的优选实施方式，所述方法包括下述其他步骤：
a)将起始原料式(III)的恩氯米芬BPA盐：
转化成式(II)的恩氯米芬：
b)将在步骤a)中获得的式(II)的恩氯米芬转化成式(I)的柠檬酸恩氯米芬。
恩氯米芬BPA盐可以通过向克罗米芬在溶剂中的溶液添加消旋BPA酸来制备。消旋BPA酸是消旋的联萘基-磷酸，即(±)-1,1'-联萘基-2,2'-二基磷酸氢盐。
或者，恩氯米芬BPA盐通过向克罗米芬在溶剂中的溶液添加手性BPA来制备。可以向克罗米芬的溶液添加手性BPA，即联萘基-磷酸的单一对映异构体，即(+)-1,1'-联萘基-2,2'-二基磷酸氢盐或(-)-1,1'-联萘基-2,2'-二基磷酸氢盐，获得与使用消旋BPA形式所获得的基本上相同的结果。其中BPA酸是消旋形式的方法是优选的，因为它是在经济上更有利的方法。
所述式(III)的恩氯米芬BPA盐可以在步骤a)中转化成式(II)的恩氯米芬，例如通过将恩氯米芬BPA盐(III)悬浮在甲基叔丁基醚(MTBE)、异丙醇(IPA)和水中并添加30重量％氨溶液，由此获得式(II)的恩氯米芬。
然后，在通过轻微蒸馏除去MTBE后，通过向式(II)的恩氯米芬在C2-C5烷基醇与10％至40％v/v水的混合物中的溶液添加柠檬酸，进行在步骤a)中获得的式(II)的恩氯米芬向式(I)的柠檬酸恩氯米芬的化合物转化。
根据本发明的方法的优选实施方式，在步骤a)中获得的式(II)的恩氯米芬不被分离为固体。
具体来说，本发明的方法可以一锅法进行，即从步骤a)开始并继续到步骤b)，由此产生固体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬，在步骤a)中获得的式(II)的恩氯米芬化合物保持在溶液中，即不以固体形式将其分离。
根据优选实施方式，本发明的方法包括所述式(III)的恩氯米芬BPA盐的其他纯化步骤，所述步骤通过式(III)的恩氯米芬BPA盐的重结晶而进行或通过将所述盐转化成式(II)的恩氯米芬、然后重新制备式(III)的恩氯米芬BPA盐而进行。
所述式(III)的恩氯米芬BPA盐的其他纯化步骤可以利用通过加热/冷却处理或通过添加反溶剂对式(III)的恩氯米芬BPA盐进行重结晶来进行。具体来说，将式(III)的恩氯米芬BPA盐的固体形式在高温下溶解在二甲基甲酰胺(DMF)和甲醇的溶液中。然后，在添加反溶剂即甲醇后，将所述溶液冷却，由此获得纯化的式(III)的恩氯米芬BPA盐。
或者，所述式(III)的恩氯米芬BPA盐可以通过将式(III)的恩氯米芬BPA盐转化成式(II)的恩氯米芬，然后重新制备式(III)的恩氯米芬BPA盐来纯化。
式(III)的恩氯米芬BPA盐可以通过将式(III)的恩氯米芬BPA盐转化成式(II)的恩氯米芬来纯化，所述式(II)的恩氯米芬可以被分离或不被分离，在后一种情况下，因此保留在溶液中。
根据本发明的优选实施方式，式(III)的恩氯米芬BPA盐向式(II)的恩氯米芬的转变在甲基叔丁基醚(MTBE)、异丙醇(IPA)和水中并在晚些时候通过添加氨溶液来进行，用于获得不作为固体被分离的式(II)的恩氯米芬。
随后，式(III)的恩氯米芬BPA盐的重新制备通过向先前制备的在有机溶剂即甲醇中的式(II)的恩氯米芬添加消旋联萘基-磷酸来进行，由此最终获得纯化的式(III)的恩氯米芬BPA盐。按照上述实施方式纯化的恩氯米芬BPA盐含有低于0.15％(HPLC A/A％)的顺式-克罗米芬。
本发明的方法提供具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬。具体来说，本发明的方法提供具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬，其具有在60μm至120μm范围内的均方权重和/或采取仅针状晶体的形式。
所述均方权重平均值通过式(I)的柠檬酸恩氯米芬的弦长度分布分析来确定，具体来说，通过PVM探针。
本发明的方法有利地提供具有大尺寸和/或长度的针状晶体的柠檬酸恩氯米芬，具体来说，通过弦长度分布分析所确定的粒度分布在60μm至120μm的范围内。
符合本发明的使用恩氯米芬BPA盐作为起始原料的方法的摩尔得率在80％至90％之间，通常为约87％。
本发明的方法提供具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬，即柠檬酸恩氯米芬针状晶体。所述柠檬酸恩氯米芬(I)也通过下述参数来描述。
具体来说，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬具有用2-Theta值(2θ)表示的下述特征峰的特征性X-射线粉末衍射图案：5.8，11.5，每个峰±0.1。
更具体来说，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬具有用2-Theta值(2θ)表示的下述特征峰的特征性X-射线粉末衍射图案：5.8，11.5，12.7，14.9和24.9，每个峰±0.1。
更具体来说，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬具有用2-Theta值(2θ)表示的下述特征峰的特征性X-射线粉末衍射图案：5.8，9.7，10.9，11.5，12.7，14.9，17.1，20.6，21.8，23.6，23.7和24.9，每个峰±0.1。
图4与图2的DSC曲线的比较提供了可能具有相同多晶形的具有两种不同晶体习性、分别为非针状和针状晶体的两种柠檬酸恩氯米芬的固体形式的不同热行为的清楚的证据。
通过DSC测量，用其中水的量在10％至40％v/v之间的C2-C5烷基醇与水的混合物对所述柠檬酸恩氯米芬进行结晶而获得的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的固体形式，具有149℃的熔点(起始)(参见图2)。
此外，通过DSC测量，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬在151℃处显示出峰。
因此，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬具有149℃的熔点，其高于具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的146℃的熔点，两者都通过DSC测量(起始)(分别参见图2和图4)。
这种不同的热行为也由DSC分析中不同的峰得以确认：具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬在151℃处显示出峰，与具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬在149℃处的峰相比温度更高。
因此，上述DSC比较性研究证实了作为针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的结晶习性在热力学上比非针状晶体的晶体习性更加稳定，因为前者的熔点高于后者(151℃相比于149℃(峰)和149℃相比于146℃(起始))，并且两种形式都具有比文献中为柠檬酸恩氯米芬公开的133-135℃和138-139℃更高的熔点。
还应该注意到，正如上面参考现有技术所讨论的，具有非针状结晶习性和146℃的m.p.的多晶形应该已被鉴定为在热力学上更稳定的柠檬酸恩氯米芬的多晶形。然而，具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬是具有最高热稳定性的固体形式。这由具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬所显示的最高熔点所证实。
具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的较高热稳定性通过比较性稳定性研究得以确认，事实上，在室温和95％RH下17天后，这种晶体形式仍然在热力学上稳定，而具有非针状结晶习性的固体未能通过稳定性研究。具体来说，在室温和95％RH下17天和30天后，XPRD衍射图的峰强度具有非常显著的下降，分别为下降到初始强度的约50％和30天后初始强度的约30％。所述分析允许假设一部分晶体的无定形化。这种行为也与图9中示例的吸湿性研究和行为相符，其中具有非针状晶体的恩氯米芬在暴露于高于65％RH的湿度值下时吸收相当量的水。
考虑到需要遵守的管控要求，显然具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的提高的热稳定性，是用于提供符合与稳定性、包括吸湿性行为相关的制药要求的产品的关键的固体形式。
因此，作为在热力学上更稳定的固体形式的具有针状结晶习性的柠檬酸恩氯米芬表现出更好的储存稳定性，并且可以更容易地配制在药品的药物组合物中。
具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的较高的热稳定性不是这种产品的唯一的有利性质。
事实上，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬与具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬、即从丙酮与15％v/v水的混合物结晶的柠檬酸恩氯米芬相比，在水中、特别是在pH4.5的水中显示出高得多的溶解性。
具体来说，实施例10提供了明显的证据，即具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬与具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬相比在水中显示出几乎两倍的溶解性，并且在pH4.5下的溶解性比非针状晶体习性高4倍。
这种溶解性研究表明，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬与具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬相比具有更高的生物可利用性。
因此，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬也适用于柠檬酸恩氯米芬的快速释放药物组合物。
此外，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬显示出好得多的吸湿性行为，特别是与通过从丙酮结晶而获得的具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬相比(参见实施例11和图9)。
因此，另一方面是一种具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬：
其具有在60μm至120μm范围内的均方权重。
根据优选实施方式，所述柠檬酸恩氯米芬具有在80μm至100μm范围内的均方权重。
通过本发明的方法获得的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的针状晶体的尺寸和/或长度特别大。事实上，所述柠檬酸恩氯米芬针状晶体的长度在50至150微米之间，正如在图5、6和7中所示。
此外，通过本发明的方法获得的柠檬酸恩氯米芬针状晶体的最大部分的长度在70至130微米之间。
所述固体形式在上面为针状晶体形式所描述的热稳定性、吸湿性和溶解性方面显示出同样有利的行为(也参见实施例10和11)。
根据本发明的优选实施方式，具有针状晶体习性并具有在60μm至120μm范围内的均方权重的柠檬酸恩氯米芬采取仅针状晶体的形式。所述固体形式具有是均质固体的优点，因此特别是在加工性能方面非常适合于制备包含柠檬酸恩氯米芬的药物组合物。
因此，另一方面是一种具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬：
其中所述柠檬酸恩氯米芬(I)采取仅针状晶体的形式。
事实上，本发明的方法允许生产采取仅针状晶体的形式的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬。这意味着所述固体形式不含具有不同形态的晶体，而是只含有针状晶体。
因此，采取仅针状晶体的形式的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬不含任何软的团块或任何其他具有不同形态的晶体。
此外，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬是均质固体。
具有针状晶体习性并且采取仅针状晶体的形式的柠檬酸恩氯米芬可以被适合地用于药物组合物的制备。
根据优选实施方式，所述具有针状晶体习性并且采取仅针状晶体的形式的柠檬酸恩氯米芬(I)具有在60μm至120μm范围内的均方权重。
根据更优选的实施方式，所述柠檬酸恩氯米芬(I)具有在80μm至100μm范围内的均方权重。
根据另一个优选实施方式，具有针状晶体习性并且采取仅针状晶体的形式的柠檬酸恩氯米芬(I)具有在3至25微米范围内的平均粒度。
平均粒度意味着通过激光衍射所确定的与粒子的平均直径相关的度量。
所述固体形式也在上面为针状晶体形式所描述的热稳定性、吸湿性和溶解性方面显示出同样有利的行为(也参见实施例10和11)。
本发明的另一个目的是一种药物组合物，其包含采取仅针状晶体形式的式(I)的柠檬酸恩氯米芬和一种或多种可药用赋形剂。
包含符合本发明的柠檬酸恩氯米芬的适合的药物组合物的实例是在WO2006102232A2、WO2010054248A1,、WO2013020017A1、WO2013123218A1或WO2013130832A1中所公开的那些药物组合物，区别在于使用具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬代替所公开的具有非针状晶体习性的恩氯米芬。
药物组合物具有不同剂型，其可以包括例如胶囊、片剂、粉剂、悬液或任何其他适合的剂型。在所述剂型中，可以将具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬(I)与一种或多种可药用赋形剂、载体或稀释剂例如甘露糖醇、含硅衍生物或糖组合。
如上所述的通过使用其中水的量在10％至40％v/v之间的C2-C5烷基醇与水的混合物对式(I)的柠檬酸恩氯米芬进行结晶而获得的具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬或前文提到的药物组合物，可用于医药中。
式(I)的柠檬酸恩氯米芬针状晶体或上面提到的药物组合物可用于治疗继发性性腺机能亢进和2型糖尿病。
具体来说，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬可用于治疗排卵机能障碍或多囊卵巢综合征。
本发明的方法可以包括另一个微粉化的步骤，其是任选的。
另一方面，采取微粉化形式的式(I)的柠檬酸恩氯米芬：
被用于在疗法中提供有利的药物效果。
术语微粉化的式(I)的柠檬酸恩氯米芬意味着具有在3至25微米范围内的平均粒度的柠檬酸恩氯米芬。所述柠檬酸恩氯米芬(I)可以有效地用于药物组合物的制备。
具有在3至25微米范围内的平均粒度的式(I)的柠檬酸恩氯米芬事实上提供了具有更好的生物可利用性的药物。根据优选实施方式，柠檬酸恩氯米芬具有在10至20微米范围内的平均粒度。
根据优选实施方式，具有在3至25微米或10至20微米范围内的平均粒度的柠檬酸恩氯米芬具有针状晶体习性。在这种情况下，特别是在所述晶体习性不利于药物产品的制造过程的情况下，小的粒度分布提供了非常积极的效果，由此平衡了所述两种效果，并提供了作为柠檬酸恩氯米芬的更稳定的固体形式的产物。
根据优选实施方式，具有在3至25微米或10至20微米范围内的平均粒度的柠檬酸恩氯米芬，采取仅针状晶体的形式。这种产品是特别均匀的，并因此似乎是最容易用于制备药物产品的制造过程的产物。此外，它允许更好地控制在用于制备药物产品的过程中添加的活性物质的量，特别是与未微粉化的产物相比。
可以制备包含微粉化的式(I)的柠檬酸恩氯米芬和一种或多种可药用赋形剂的药物组合物。
所述含有微粉化的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的药物组合物，可以具有与前文与包含未微粉化的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的药物组合物相关所描述的相同的给药途径和剂型。
此外，微粉化的式(I)的柠檬酸恩氯米芬或含有所述微粉化的柠檬酸恩氯米芬(I)的药物组合物可用于医药中，此外它们可用于治疗如前文与式(I)的柠檬酸恩氯米芬的用途相关所描述的特定疾病。
根据优选实施方式，微粉化的式(I)的柠檬酸恩氯米芬或所提到的药物组合物可用于继发性性腺机能亢进和2型糖尿病的治疗。
另一方面，提供了一种用于制备Z-异构体的量低于0.20A/A％的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的方法：
所述方法包括下述步骤：
A)将式(III)的恩氯米芬BPA盐重结晶：
B)将在步骤A)中获得的重结晶的式(III)的恩氯米芬BPA盐转化成式(I)的柠檬酸恩氯米芬；
或者包括下述步骤：
1.从恩氯米芬BPA盐开始并获得式(II)的恩氯米芬的溶液，
2.向在步骤1中获得的溶液添加BPA酸，
3.分离式(III)的恩氯米芬BPA盐，
4.将在步骤3中获得的分离的式(III)的恩氯米芬BPA盐转化成式(I)的柠檬酸恩氯米芬。
已令人吃惊地发现，上面提到的方法允许制备具有低于0.20％A/A％的非常低的量的式(IV)的Z-异构体杂质的的式(I)的柠檬酸恩氯米芬：
所述杂质也被称为Z-克罗米芬，它是用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的方法中的常见杂质，非常难以除去。
用于制备Z-异构体的量低于0.20A/A％的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法，利用步骤A)中式(III)的恩氯米芬BPA盐的重结晶来进行。
所述步骤A)的重结晶是从预先溶解有式(III)的恩氯米芬BPA盐固体的溶液形成式(III)的恩氯米芬BPA盐固体的过程。实施例2是所述步骤A)的具体实施方式。
因此，上面提到的方法可以例如从式(III)的恩氯米芬BPA盐开始进行，并通过加热/冷却处理对它进行重结晶，或者获得溶液中的式(III)的恩氯米芬BPA盐，然后例如通过冷却或通过添加反溶剂或通过其他方式来结晶所述产物。
所述式(III)的恩氯米芬BPA盐按照前文描述的用于获得所述化合物的各种不同方法来生产。
根据所述方法的优选实施方式，步骤A)的式(III)的恩氯米芬BPA盐的重结晶通过二甲基甲酰胺(DMF)与C1-C4烷基醇的混合物来进行。
根据所述方法的优选实施方式，作为上面提到的混合物的组分的C1-C4烷基醇意味着选自下述各项的一种烷基醇：甲醇，无水乙醇，乙醇，异丙醇或2-丙醇，1-丙醇，1-丁醇，2-丁醇，2-甲基-2-丙醇，2-甲基-1-丙醇。
根据所述方法的优选实施方式，步骤A)的式(III)的恩氯米芬BPA盐的重结晶通过二甲基甲酰胺与C1-C4烷基醇的混合物来进行，其中C1-C4烷基醇是甲醇。
根据所述方法的优选实施方式，步骤A)的式(III)的恩氯米芬BPA盐的重结晶通过二甲基甲酰胺与C1-C4烷基醇的混合物来进行，其中二甲基甲酰胺的体积量在1.5至2.5倍之间，并且C1-C4烷基醇的体积量在4至6倍之间，两者都相对于式(III)的恩氯米芬BPA盐的量。
上面提到的二甲基甲酰胺与C1-C4烷基醇的混合物的体积是相对于式(III)的恩氯米芬BPA盐的量，所述恩氯米芬BPA盐的量可以是起始原料恩氯米芬BPA盐的重量，或者可以假设所有恩氯米芬BPA盐(III)都转变成式(III)的恩氯米芬BPA盐而通过化学计量计算来确定。
最后，在步骤B)中，在步骤A)中获得的重结晶的式(III)的恩氯米芬BPA盐向式(I)的柠檬酸恩氯米芬的转化，可以按照前面给出的教导或按照US3,848,030的实施例31来进行。
或者，用于制备Z-异构体的量低于0.20A/A％的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法，包括在前面段落中所公开的不同步骤。
根据所述方法的变化形式，在步骤1中，将起始原料BPA盐用碱处理，以给出式(II)的恩氯米芬的溶液。
根据所述方法的优选实施方式，在步骤2中，向在步骤1中获得的所述溶液添加BPA酸，以获得式(III)的恩氯米芬BPA盐。
在步骤3中，通过例如过滤或离心分离式(III)的恩氯米芬BPA盐。
在步骤4中，将在步骤3中获得的分离的式(III)的恩氯米芬BPA盐转化成式(I)的柠檬酸恩氯米芬；所述转化如前所述来进行。
最后描述的用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的方法，提供了具有不同形状的晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬晶体，例如针状、非针状、棱柱、长菱形、菱形、矩形或正方形晶体。
根据所述方法的优选实施方式，用于提供式(I)的柠檬酸恩氯米芬的步骤B)或步骤4使用C2-C5烷基醇与水的混合物来进行，所述混合物中水的量包含在10％至40％v/v之间。
根据优选实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的化合物具有低于0.10A/A％的式(IV)的Z-异构体的量。
根据优选实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的化合物具有高的化学纯度，即高于99.90％A/A％。
根据优选实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的化合物具有高的化学纯度，即高于99.90％A/A％，以及低于0.10A/A％的式(IV)的Z-异构体的量。
根据优选实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的化合物具有针状晶体习性。
根据所述方法的优选实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的化合物采取仅针状晶体的形式，所述固体是均质固体。
根据更优选的实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的柠檬酸恩氯米芬具有柠檬酸恩氯米芬中低于0.10A/A％的Z-异构体的量和针状晶体习性。
根据更特别优选的实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的柠檬酸恩氯米芬具有柠檬酸恩氯米芬中低于0.10A/A％的Z-异构体的量、针状晶体习性并且采取仅针状晶体的形式。
上面提到的方法可以包括另一个微粉化的步骤，其是任选的。
根据优选实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的柠檬酸恩氯米芬具有在3至25微米范围内的平均粒度。
根据更优选的实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的柠檬酸恩氯米芬具有柠檬酸恩氯米芬中低于0.10A/A％的Z-异构体的量、针状晶体习性，并具有在3至25微米范围内的平均粒度。
根据更特别优选的实施方式，用于制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬的所述方法提供的式(I)的柠檬酸恩氯米芬具有柠檬酸恩氯米芬中低于0.10A/A％的Z-异构体的量、针状晶体习性，具有在3至25微米范围内的平均粒度并且采取仅针状晶体的形式。
此外，用于制备具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的所述改进的方法允许制备具有高化学纯度、即以HPLC A/A％计高于99.90％的柠檬酸恩氯米芬，并且残留的顺式-克罗米芬杂质的含量以HPLC A/A％计低于0.10％。
实验部分
起始原料柠檬酸克罗米芬可以按照公知的现有技术方法或例如PCT/EP2015/074746的实施例1中所描述来制备，或者可以在市场上购买。
实施例1：从柠檬酸克罗米芬开始，用消旋联萘基-磷酸制备恩氯米芬的盐
在圆底烧瓶中装入100gr柠檬酸克罗米芬(HPLC分析(A/A％)：65.21％恩氯米芬，34.06％Z-克罗米芬)和1000mL甲醇。将所述悬液在30℃下搅拌直至完全溶解。然后添加30gr(0.515eq)消旋联萘基-磷酸(简称为BPA)在30mL DMF中的溶液。在添加结束时，将混合物在30℃搅拌1h。将得到的悬液过滤，并将固体用100mL甲醇洗涤。
得到50.4gr恩氯米芬BPA盐(III)。
HPLC分析(A/A％)：97.04％恩氯米芬，2.5％Z-克罗米芬。
实施例1b：从柠檬酸克罗米芬开始，用消旋联萘基-磷酸制备恩氯米芬的盐
在圆底烧瓶中装入50gr柠檬酸克罗米芬和500mL甲醇。将所述悬液在40-45℃下加热并搅拌，直至完全溶解。然后添加BPA 15gr(0.515eq)在300mL甲醇中的溶液。在添加结束时，将混合物在20℃下搅拌1h。将得到的悬液过滤，并将固体用100mL甲醇洗涤。
得到24.1gr恩氯米芬BPA盐。
HPLC分析(A/A％)：98.96％恩氯米芬，0.69％Z-克罗米芬。
实施例1c：从柠檬酸克罗米芬开始，用消旋联萘基-磷酸制备恩氯米芬的盐
在圆底烧瓶中装入100gr柠檬酸克罗米芬和1000mL甲醇。将所述悬液在40-45℃下加热并搅拌，直至完全溶解。然后添加BPA 30gr(0.515eq)在1000mL甲醇中的溶液。在添加结束时，将混合物在20℃下搅拌1h。将得到的悬液过滤，并将固体用100mL甲醇洗涤。
得到47.9gr恩氯米芬BPA盐。
HPLC分析(A/A％)：98.81％恩氯米芬，0.79％Z-克罗米芬。
实施例1d：从柠檬酸克罗米芬开始，用消旋联萘基-磷酸制备恩氯米芬的盐
在圆底烧瓶中装入150gr柠檬酸克罗米芬和1500mL甲醇。将所述悬液在40-45℃下加热并搅拌，直至完全溶解。然后添加BPA 45gr(0.515eq)在900mL甲醇中的溶液。在添加结束时，将混合物在20℃下搅拌1h。将得到的悬液过滤，并将固体用100mL甲醇洗涤。
得到76.4gr E-克罗米芬BPA盐。
HPLC分析(A/A％)：98.82％恩氯米芬，0.80％Z-克罗米芬。
实施例2：式(III)的恩氯米芬BPA盐的重结晶(步骤A)
在装备有搅拌桨、温度探头、冷凝器的适合的0.5L反应器中，将含有的Z-异构体为1.64％的恩氯米芬BPA盐(III)(50g)悬浮在DMF(2.1L/Kg恩氯米芬BPA(III))和甲醇(1.4L/Kg恩氯米芬BPA盐(III))中。将所述悬液加热至回流(～76-79℃)。为了提高起始原料的溶解性，可能需要另外的DMF(0.1L/Kg恩氯米芬BPA(III))。在所述起始原料完全溶解后，添加作为反溶剂的甲醇(3.5L/Kg恩氯米芬BPA(III))。将温度降低至60℃并将混合物搅拌2–3h。然后，将温度进一步降低至20℃并过滤。将湿滤饼用甲醇(1.5L/Kg恩氯米芬BPA盐(III))洗涤两次。将产物在60–70℃下真空干燥12–24h。干燥时间可以延长，直至残留的DMF<2500ppm。
上面提到的实施例的最终产品和从遵照相同过程的重复获得的相同产品的质量分析，示出在下表中：
实施例3：从式(III)的恩氯米芬BPA盐开始，制备具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬
在装备有搅拌桨、温度探头、冷凝器的适合的4L反应器中，将式(III)的恩氯米芬BPA盐(400g，测定为99.8重量％0.528mol，1equiv.)悬浮在甲基叔丁基醚(MTBE，2L)、异丙醇(IPA，0.5L)和水(2L)中。将所述混合物搅拌15分钟，然后添加0.48L 30重量％的氨溶液并将混合物继续搅拌1小时。分离水性相，并将有机层用30重量％氨溶液(0.12L)和水(0.6L)的溶液洗涤。分离水相，并将有机层最后用水(0.6L)洗涤。将所述有机溶液在60-65℃下真空蒸发至干。将残留物溶解在1.36L无水乙醇中。所述溶液的分析在这个阶段通过电位滴定来确定，结果是15.125重量％作为式(II)的恩氯米芬(0.466mol)。然后添加0.24L水并将溶液加热到65℃。同时，将柠檬酸单水合物(100.8g，0.475mol，1.02equiv.)溶解在无水乙醇(1.7L)和水(0.3L)中，并将所述溶液加热至65℃。将所述柠檬酸溶液滴加到恩氯米芬(II)的溶液中，同时维持65℃。所述滴加在30-40分钟内进行。将内部温度在80分钟内非常缓慢地降低到60℃，然后将它在40分钟内进一步降低到55℃。当内部温度在60-55℃的范围内(通常在58℃)时，将结晶混合物用针状柠檬酸恩氯米芬接种，白色产物开始沉淀。在达到55℃后，将温度在30分钟内进一步降低到30℃，然后在30分钟内进一步降低到0℃。将所述浆液在0℃搅拌至少2小时，然后将它过滤，并将湿滤饼用0.4L无水乙醇洗涤。将产物在65℃下真空干燥。在干燥结束时，分离到269g作为针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬，对应于91.8％摩尔得率。
HPLC分析(A/A％)：99.79％恩氯米芬，0.04％Z-克罗米芬(即Z-异构体)。
实施例4：使用其中水的量为15％的乙醇与水的混合物制备具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬
在装备有搅拌桨、温度探头、冷凝器的适合的1L反应器中，将式(II)的恩氯米芬(15,0g，测定为99.9重量％0.0369mol，1equiv.)溶解在无水乙醇(102mL，6.8mL/g游离碱)中，然后添加18mL(1.2mL/g游离碱)水，并将溶液加热至65℃。同时，将柠檬酸单水合物(7.92g，0.0377mol，1.02equiv.)溶解在无水乙醇(127mL)和水(23mL)中，并将所述溶液加热至65℃。将所述柠檬酸溶液滴加到所述恩氯米芬(II)的溶液中，同时维持65℃。所述滴加在30-40分钟内进行。将内部温度在80分钟内非常缓慢地降低到60℃，然后将它在40分钟内进一步降低到55℃。当内部温度在60-55℃的范围内(通常在58℃)时，将结晶混合物用针状柠檬酸恩氯米芬接种，白色产物开始沉淀。在达到55℃后，将温度在30分钟内进一步降低到30℃，然后在30分钟内进一步降低到0℃。将所述浆液在0℃搅拌至少2小时，然后将它过滤，并将湿滤饼用30mL无水乙醇洗涤。将产物在65℃下真空干燥。在干燥结束时，分离到20.2g作为针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬，对应于91.4％摩尔得率。
HPLC分析(A/A％)：99.86％恩氯米芬，0.03％Z-克罗米芬。
实施例4a：使用其中水的量为15％的异丙醇与水的混合物制备具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬
在装备有搅拌桨、温度探头、冷凝器的适合的1L反应器中，将式(II)的恩氯米芬(40,0g，测定为99.9重量％0.0985mol，1equiv.)溶解在异丙醇(272mL，6.8mL/g游离碱)中，然后添加48mL(1.2mL/g游离碱)水，并将溶液加热至65℃。同时，将柠檬酸单水合物(21.10g，0.100mol，1.02equiv.)溶解在异丙醇(340mL，8.5mL/g游离碱)和水(60mL，1.5mL/g游离碱)中，并将所述溶液加热至65℃。将所述柠檬酸溶液滴加到所述恩氯米芬(II)的溶液中，同时维持65℃。所述滴加在30-40分钟内进行。将内部温度在80分钟内非常缓慢地降低到60℃，然后将它在40分钟内进一步降低到55℃。当内部温度在60-55℃的范围内(通常在58℃)时，将结晶混合物用针状柠檬酸恩氯米芬接种，白色产物开始沉淀。在达到55℃后，将温度在30分钟内进一步降低到30℃，然后在30分钟内进一步降低到0℃。将所述浆液在0℃搅拌至少2小时，然后将它过滤，并将湿滤饼用30mL异丙醇洗涤。将产物在65℃下真空干燥。在干燥结束时，分离到56.5g作为针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬，对应于95.9％摩尔得率。
实施例4b：使用其中水的量为15％的正丙醇与水的混合物制备具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬
在装备有搅拌桨、温度探头、冷凝器的适合的0.5L反应器中，将式(II)的恩氯米芬(9,0g，测定为99.9重量％0.0985mol，1equiv.)溶解在正丙醇(61mL，6.8mL/g游离碱)中，然后添加11mL(1.2mL/g游离碱)水，并将溶液加热至65℃。同时，将柠檬酸单水合物(4.70g，0.0224mol，1.02equiv.)溶解在正丙醇(77mL，8.5mL/g游离碱)和水(14mL，1.5mL/g游离碱)中，并将所述溶液加热至65℃。将所述柠檬酸溶液滴加到所述恩氯米芬(II)的溶液中，同时维持65℃。所述滴加在30-40分钟内进行。将内部温度在80分钟内非常缓慢地降低到60℃，然后将它在40分钟内进一步降低到55℃。当内部温度在60-55℃的范围内(通常在58℃)时，将结晶混合物用针状柠檬酸恩氯米芬接种，白色产物开始沉淀。在达到55℃后，将温度在30分钟内进一步降低到30℃，然后在30分钟内进一步降低到0℃。将所述浆液在0℃搅拌至少2小时，然后将它过滤，并将湿滤饼用30mL正丙醇洗涤。将产物在65℃下真空干燥。在干燥结束时，分离到11.7g作为针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬，对应于88.1％摩尔得率。
实施例4c：使用其中水的量为15％的正丁醇与水的混合物制备具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬
在装备有搅拌桨、温度探头、冷凝器的适合的0.5L反应器中，将式(II)的恩氯米芬(9,0g，测定为99.9重量％0.0985mol，1equiv.)溶解在正丁醇(61mL，6.8mL/g游离碱)中，然后添加11mL(1.2mL/g游离碱)水，并将溶液加热至65℃。同时，将柠檬酸单水合物(4.70g，0.0224mol，1.02equiv.)溶解在正丁醇(77mL，8.5mL/g游离碱)和水(14mL，1.5mL/g游离碱)中，并将所述溶液加热至65℃。将所述柠檬酸溶液滴加到所述恩氯米芬(II)的溶液中，同时维持65℃。所述滴加在30-40分钟内进行。将内部温度在80分钟内非常缓慢地降低到60℃，然后将它在40分钟内进一步降低到55℃。当内部温度在60-55℃的范围内(通常在58℃)时，将结晶混合物用针状柠檬酸恩氯米芬接种，白色产物开始沉淀。在达到55℃后，将温度在30分钟内进一步降低到30℃，然后在30分钟内进一步降低到0℃。将所述浆液在0℃搅拌至少2小时，然后将它过滤，并将湿滤饼用30mL正丁醇洗涤。将产物在65℃下真空干燥。在干燥结束时，分离到11.6g作为针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬，对应于87.4％摩尔得率。
实施例4d：使用其中水的量为15％的叔丁醇与水的混合物制备具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬
在装备有搅拌桨、温度探头、冷凝器的适合的0.5L反应器中，将式(II)的恩氯米芬(9,0g，测定为99.9重量％0.0985mol，1equiv.)溶解在叔丁醇(61mL，6.8mL/g游离碱)中，然后添加11mL(1.2mL/g游离碱)水，并将溶液加热至65℃。同时，将柠檬酸单水合物(4.70g，0.0224mol，1.02equiv.)溶解在叔丁醇(77mL，8.5mL/g游离碱)和水(14mL，1.5mL/g游离碱)中，并将所述溶液加热至65℃。将所述柠檬酸溶液滴加到所述恩氯米芬(II)的溶液中，同时维持65℃。所述滴加在30-40分钟内进行。将内部温度在80分钟内非常缓慢地降低到60℃，然后将它在40分钟内进一步降低到55℃。当内部温度在60-55℃的范围内(通常在58℃)时，将结晶混合物用针状柠檬酸恩氯米芬接种，白色产物开始沉淀。在达到55℃后，将温度在30分钟内进一步降低到30℃，然后在30分钟内进一步降低到0℃。将所述浆液在0℃搅拌至少2小时，然后将它过滤，并将湿滤饼用30mL叔丁醇洗涤。将产物在65℃下真空干燥。在干燥结束时，分离到11.2g作为针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬，对应于84.4％摩尔得率。
实施例5：具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的制备。种晶的制备。
在装备有搅拌桨、温度探头、冷凝器的适合的1L反应器中，将式(II)的恩氯米芬(15,0g，测定为99.9重量％0.0369mol，1equiv.)溶解在无水乙醇(102mL，6.8mL/g游离碱)中，然后添加18mL(1.2mL/g游离碱)水，并将溶液加热至65℃。同时，将柠檬酸单水合物(7.92g，0.0377mol，1.02equiv.)溶解在无水乙醇(127mL，8.5mL/g游离碱)和水(23mL，1.5mL/g游离碱)中，并将所述溶液加热至50℃。将所述柠檬酸溶液滴加到所述恩氯米芬(II)的溶液中，同时维持50℃。所述滴加在30-40分钟内进行。在所述滴加结束时，将搅拌关闭并允许所述混合物在不搅拌的情况下冷却至室温。产物在40-30℃下开始结晶。在达到20-25℃后，将搅拌打开并在30分钟内将温度进一步降低到0℃。将所述浆液在0℃搅拌至少2小时，然后将它过滤，并将湿滤饼用30mL无水乙醇洗涤。将产物在65℃下真空干燥。在干燥结束时，分离到13.9g式(I)的柠檬酸恩氯米芬，对应于62.3％摩尔得率。
实施例6：使用其中水的量为15％的丙酮与水的混合物制备具有非针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬
本发明的比较例(参见图8)和证据实例
遵照与实施例4中所描述的相同的过程，将乙醇溶剂用丙酮溶剂代替。从15,0g式(II)的恩氯米芬开始，遵照上面提高的过程，分离到22.3g式(I)的柠檬酸恩氯米芬，对应于94.2％摩尔得率的产物。对于晶体的形态，参见图8。
事实上，所述显微术分析提供了实施例6的柠檬酸恩氯米芬(I)的晶体习性的进一步的更好证据(参见图8)，其具有与按照上述实施例即4、4a、4b、4c、4d获得的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬(I)(参见图5、6和7)更加不同的形式。
HPLC分析(A/A％)：99.63％恩氯米芬，0.20％Z-克罗米芬。
实施例7：鉴定和定量式(II)的恩氯米芬或式(I)的柠檬酸恩氯米芬或式(III)的恩氯米芬BPA盐中的式(IV)的Z-克罗米芬和用于确定化学纯度的分析方法
色谱条件：
柱尺寸：250mm x 4.6mm，5μm
固定相：丁基硅烷(USP相L26，推荐Vydac 4C)
柱温：室温
流动相：甲醇/水/三乙胺55:45:0.3v/v
用磷酸调整到pH 2.5
流速：1.0mL/min
检测器：UV，233nm，
进样体积：10μL
样品稀释液：流动相。
使用上述条件，预期的保留时间如下所示：
化合物 RRT
Z-克罗米芬 1.00
恩氯米芬 1.09
实施例8：按照实施例6制备的作为软的多晶团块的具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的固体形式的表征
晶体习性
所述柠檬酸恩氯米芬的固体形式具有非针状晶体习性。此外，柠檬酸恩氯米芬显示出作为软多晶团块的结晶习性。
DSC
DSC分析使用Mettler DSC822e来记录。将3.2140mg样品称重到带有针孔盖子的40μL铝制坩埚中，并在氮气(50mL/min)下以10℃/min的速率从30℃加热至300℃。
柠檬酸恩氯米芬的固体形式的特征在于通过DSC分析(10℃/min)测量的在146.31℃开始的对应于熔点的吸热峰(熔化晗-98.96J/g)。在148.91℃(起始)开始宽的吸热峰。
实施例8-bis：式(I)的柠檬酸恩氯米芬的晶体习性的显微术分析
将产物在Leica MZ16F立体显微镜中观察，并使用Leica DCF 300FX相机获得图片。如果使用反射光获取到非指定的图像，则使用反射和透射光。对于每张图像，标尺在图片本身中注明。
1.m.p.为146℃(通过DSC)的具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬(如实施例6中所制备)的显微术分析
使用丙酮与15％v/v水的混合物结晶的m.p.为146℃(通过DSC)的柠檬酸恩氯米芬(如实施例6中所制备)表现出形成软多晶团块的晶体习性(参见图8)。片段是板状或薄片状。所述固体不是透明的并且不存在光滑侧面。由于尺寸小，不可能观察到单个晶体的形状。
2.m.p.为149℃(通过DSC)的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬(如实施例4中所制备)的显微术分析
使用乙醇与15％v/v水的混合物结晶的m.p.为149℃(通过DSC)的具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬(I)(如实施例4中所制备)表现出长针状晶体的晶体习性(参见图5、6和7)。单个晶体仅类似针，特别是长针状。针的量极大并且具有大的尺寸和/或长度，事实上，如图8所示，它们是交叠的，但它们是单晶。
3.具有针状和具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬(I)的形态和尺寸比较
这两种柠檬酸恩氯米芬产物当在显微镜下观察时表现出多晶结构，在一种情况下所述长的晶体是针(来自于乙醇与10％v/v至40％v/v水的混合物的晶体)，在另一种情况下(来自于丙酮与15％v/v水的混合物的晶体)晶体形状未被确定，但是所述两种形式的晶体形状是不同的。
总而言之，显微术分析显示，使用乙醇与10％v/v至40％v/v水的混合物获得的晶体表现出由大/长的针形成的结构。
实施例9：具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的表征
XRPD分析使用带有Cu Kα辐射的PANalytical X'Pert衍射仪以Bragg-Brentano几何形式进行。所述系统装备有一维实时多带检测器。衍射图以每秒0.0205°的扫描速率从3°至40°(2θ)记录。
2.分析具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬(即如实施例4中所制备)，并且在轻柔粉碎处理之前和之后获取的XRPD衍射图(为了确认结晶形态不受实际发生的轻柔粉碎处理影响)示出在图1中。
具体来说，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬具有用2-Theta值(2θ)表示的下述特征峰的特征性X-射线粉末衍射图案：5.8，11.5，每个峰±0.1。
更具体来说，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬具有用2-Theta值(2θ)表示的下述特征峰的特征性X-射线粉末衍射图案：5.8，11.5，12.7，14.9和24.9，每个峰±0.1。
再更具体来说，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬具有用2-Theta值(2θ)表示的下述特征峰的特征性X-射线粉末衍射图案：5.8，9.7，10.9，11.5，12.7，14.9，17.1，20.6，21.8，23.6，23.7和24.9，每个峰±0.1。
具体来说，使用2-Theta值(2θ)为12.7°的峰作为峰强度参比，可以明显看出具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的样品在5.8°和11.5°(2θ)处的峰与具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的样品相比具有高得多的相对强度，而其他峰具有相似的强度。
在具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的情况下，这种强度差异来自于由针状引起的晶体的取向偏好性。
实施例10：柠檬酸恩氯米芬晶体习性形式的溶解性研究
为了确定柠檬酸恩氯米芬的不同固体形式的晶体尺寸和形态对溶解性的影响，在水和缓冲的水溶液中进行了动力学溶解性研究。溶解性通过HPLC分析，通过比较对应于恩氯米芬HPLC峰的面积来确定。
对于每项溶解性研究来说，监测下述参数：
-测定的每个平行样的恩氯米芬峰的强度
-平均值
-标准偏差
实验程序
为了进行溶解性研究，将400mg每种产物(未研磨)在水(24ml，60v)中，在相同的搅拌速度(使用2cm“橄榄球状”搅拌棒以1000rpm进行磁力搅拌)、所使用的烧瓶(容量为50ml、颈为29/32的圆底烧瓶)等的条件下搅拌。在不同时间过滤约6ml悬液的等分试样：15，45，90和180min。在过滤后，通过HPLC(每项分析做2份平行样)直接分析母液并确定它的pH。通过XRPD分析过滤的固体。为每种产物重复所述溶解性分析，并通过HPLC面积的不同来比较溶解性。
下述HPLC方法允许快速确定恩氯米芬溶解性：
使用这些HPLC条件进行溶解性分析。
在水中的溶解性研究
一开始，柠檬酸恩氯米芬在水中的溶解性进行了两份平行试验。然而，因为我们在两份平行试验之间观察到某些HPLC分析的高的标准差，因此这些测定进行了三份平行试验。对于每种柠檬酸恩氯米芬样品，结果示出在下述表中：表1关于具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬(m.p.146℃)批号722，表2关于具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬(m.p.149℃)批号723。
表1.具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的水溶解性研究的结果：
表2.具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的水溶解性研究的结果：
将柠檬酸恩氯米芬的两种固体形式的溶解性的HPLC a/a平均值针对时间作图(示出在图10中)。
在3小时内，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的溶解性高于具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬，尽管这种溶解性的差异似乎随时间减小。事实上，针状晶体的溶解性似乎随时间降低，并且考虑到来自于不同平行样的实验误差(SD)，在3小时后可能与非针状晶体的溶解性相近。因此，具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的晶体尺寸和习性似乎产生更高的动力学溶解性，所述溶解性随时间降低，在3小时后产生与具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬相近的溶解性。然而，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬与具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬相比溶解性更高(几乎两倍)。
在pH 4.5下的溶解性研究
在微酸性介质中的溶解性在pH 4.5下确定，使用的缓冲液是按照USP说明书制备的乙酸/乙酸钠混合物。
具有非针状和针状晶体的柠檬酸恩氯米芬在pH 4.5缓冲液中的溶解性进行两份平行试验。在这种情况下，重复性比在使用水的柠檬酸盐分析中更好。
结果示出在下面的表中(表3关于具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬批号722，表4关于具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬批号723)。
表3.具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬在pH＝4.5下的溶解性研究的结果
表4.具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬在pH＝4.5下的溶解性研究的结果
将柠檬酸恩氯米芬的两种固体形式的溶解性的HPLC A/A平均值针对时间进行作图(示出在图11中)。
从上述图中，可以观察到两种柠檬酸恩氯米芬晶体习性形式之间的非常不同的溶解曲线。具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬(批号723)的溶解性比具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬(批号722)的溶解性高约4至5倍，并且这种溶解性差异似乎随时间增加或维持。因此，在这种情况下，晶体尺寸和习性的差异在确定柠檬酸恩氯米芬的溶解性中发挥关键作用。
因此，在pH 4.5下，本发明的具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬比具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的溶解性更高，具体来说溶解性高约4至5倍。
因此，在水和pH 4.5任一者中，本发明的具有针状晶体的柠檬酸恩氯米芬比具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬的溶解性更高。然而，这种效果的程度在pH 4.5的缓冲溶液中比在纯水中明显得多。
实施例11：柠檬酸恩氯米芬晶体习性的吸湿性研究
不同批次的柠檬酸恩氯米芬的吸湿性使用Q5000TA仪器通过DVS(动态蒸气吸附)来确定。这是一种重量分析技术，其测量在不同相对湿度(RH)下有多少水被样品吸附或解吸。在每种RH下，必须允许样品料团达到重量分析平衡(或超过时间限度)，然后再前进到下一个湿度水平。吸附和解吸附等温线将在0–95％RH的范围内，在25℃下进行。吸附等温线的类型由材料的孔眼尺寸和表面特点来确定。
DVS使用12.2509mg柠檬酸恩氯米芬批号722和13.5772mg柠檬酸恩氯米芬批号723，使用下述条件来进行：
-在25℃–0％RH下进行重量分析平衡
-当在20min后重量分析变动低于0.01％或者当平衡时间超过300min的时间限度时，提高到下一个RH％水平。
批次722–具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬
批次722的DVS分析表明在0％至65％RH之间存在显著的水分吸附(+2％重量)。然后在95％RH下，水摄取更剧烈增加至达到6％重量。吸附和解吸曲线基本上重叠，指示在较高湿度下的水分“摄取”应该被吸附在材料的表面上并且不影响它的内部结构。
吸附具有II型等温线的S形形状特征。在较低相对压力下吸附的蒸汽的量快速增加，显示出相对于x-轴凹陷的曲线。在较高相对压力下，所述曲线采取相对于x-轴凸起的形状。曲线的拐点通常被认为是表面上的被吸附物的单分子层的完成和多分子层形成的开始。
批次723-具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬
批次723的DVS分析表明在0％至95％RH之间存在显著的水分吸附(+2.33％重量)。吸附和解吸曲线重叠，指示在较高湿度下的水分“摄取”应该被吸附在材料的表面上并且不影响它的内部结构。
与柠檬酸恩氯米芬批次722相同，吸附具有II型等温线的S形形状特征。
批次722与723的比较
在0至65％RH之间，柠檬酸恩氯米芬批次722和723的吸湿性一致。然后，在批次722、即具有非针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的情况下吸湿性剧烈增加，在95％RH下高达6％，而在批次723、即具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬的情况下它适度增加，在95％RH下达到2.3％(参见图9)。
因此，与具有非针状晶体的柠檬酸恩氯米芬相比，具有针状晶体习性的柠檬酸恩氯米芬显示出好得多的吸湿性行为，特别是在高于65％的相对湿度下。
实施例12：具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬通过弦长度分布分析的表征
弦长度分布分析是一种使用聚焦光束反射测量(FBRM)的粒度分析类型。具体来说，通过特定探针测量对维度、形状和计数的变化敏感的粒子系统的指纹分布。实时测量追踪粒子的变化，因为它们天然存在于所述过程中，因此消除了对离线取样的需要。
具体来说，式(I)的柠檬酸恩氯米芬的弦长度分布使用PVM探针，通过带有的ParticleTrack G400来确定，这是一种由Mettler-Toledo提供的用于实时定量测量的技术。
重复在实施例4中描述的过程并在开始时添加PVM探针，因此反应器装备有搅拌桨、温度探头、冷凝器和所述PVM探针，收集到下述结果。
使用PVM探针通过获得的最终分布示出在图13中，并且相对数据报告在下表中：
统计量
均方权重 87.30
计数/秒No Wt 1-1000 29,108.35
计数/秒No Wt 1-50 27,104.27
计数/秒n No Wt 50-150 1,912.88
计数/秒No Wt 150-1000 91.20
因此，本申请中描述的均方权重按照本实施例中描述的程序来测量。
实施例13：具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的微粉化
将具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬(300g)装入微粉化喷气研磨机中(型号：MICRONETTE da LABORATORIO“M.100”，由Nuova Guseo(Villanova sull’Arda(PC),Italy)提供)，然后进行微粉化。
通过粒度分布(PSD)来分析所述微粉化的柠檬酸恩氯米芬。
具体来说，使用装备有通用液体模块的Beckman Coulter LS13320装置确定粒度分布。
微粉化的柠檬酸恩氯米芬的粒度分布显示出高斯分布，均值为12μm。D50值为10μm。

Claims (39)

1.一种用于制备具有针状晶体习性的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的方法：
所述方法利用C2-C5烷基醇与水的混合物对式(I)的柠檬酸恩氯米芬进行结晶，其中水的量为10％到40％v/v。
2.根据权利要求1的方法，其中所述C2-C5烷基醇是乙醇或异丙醇。
3.根据权利要求1至2任一项的方法，其中水的量为12％到20％v/v。
4.根据权利要求1至3任一项的方法，其中水的量为15％v/v。
5.根据权利要求1至4任一项的方法，其中相对于柠檬酸恩氯米芬(I)的量，所述C2-C5烷基醇与水的混合物的量为10到15倍体积。
6.根据权利要求1至5任一项的方法，其中所述结晶开始的温度为60℃到70℃。
7.根据权利要求1至6任一项的方法，其中在所述结晶期间，温度在3小时内从60℃至70℃范围内的温度降低到0℃的温度。
8.根据权利要求1至7任一项的方法，其中所述结晶在60℃和55℃之间的温度下用具有针状晶体的式(I)的柠檬酸恩氯米芬接种。
9.根据权利要求1至8任一项的方法，其中通过向式(II)的恩氯米芬的溶液添加柠檬酸来制备式(I)的柠檬酸恩氯米芬：
其中所述溶液是权利要求1至4任一项的C2-C5烷基醇与水的混合物。
10.权利要求9的方法，其中所述柠檬酸被溶解在权利要求1至4任一项的C2-C5烷基醇与水的混合物中。
11.根据权利要求9至10任一项的方法，其中所述式(II)的恩氯米芬的溶液和所述其中溶解有柠檬酸的溶液是权利要求1至4任一项的C2-C5烷基醇与水的相同混合物。
12.根据权利要求9至11任一项的方法，其中相对于柠檬酸恩氯米芬(I)的量，所述式(II)的恩氯米芬的溶液的C2-C5烷基醇与水的混合物的量为5到6倍体积。
13.根据权利要求9至12任一项的方法，其中柠檬酸的添加在60℃至70℃的温度进行。
14.根据权利要求1至13任一项的方法，其还包括下述步骤：
a)将起始原料式(III)的恩氯米芬BPA盐：
转化成式(II)的恩氯米芬：
b)将在步骤a)中获得的式(II)的恩氯米芬转化成式(I)的柠檬酸恩氯米芬。
15.根据权利要求14的方法，其中在步骤a)中获得的式(II)的恩氯米芬不作为固体分离。
16.根据权利要求14至15任一项的方法，其还包括通过式(III)的恩氯米芬BPA盐的重结晶或通过将所述盐转化成式(II)的恩氯米芬然后重新制备式(III)的恩氯米芬BPA盐来纯化所述式(III)的恩氯米芬BPA盐的步骤。
17.根据权利要求1至16任一项的方法，其中所述式(I)的柠檬酸恩氯米芬具有针状晶体习性并具有在60μm至120μm范围内的均方权重和/或采取仅针状晶体的形式。
18.柠檬酸恩氯米芬，其由式(I)表示：
其具有针状晶体习性并具有在60μm至120μm范围内的均方权重。
19.根据权利要求18的柠檬酸恩氯米芬，其具有在80μm至100μm范围内的均方权重。
20.根据权利要求18至19任一项的柠檬酸恩氯米芬，其中所述产品采取仅针状晶体的形式。
21.柠檬酸恩氯米芬，其由式(I)表示：
其具有针状晶体习性，其中所述柠檬酸恩氯米芬(I)采取仅针状晶体的形式。
22.根据权利要求21的柠檬酸恩氯米芬，其中所述柠檬酸恩氯米芬(I)具有在60μm至120μm范围内的均方权重。
23.根据权利要求21和22任一项的柠檬酸恩氯米芬，其具有在80μm至100μm范围内的均方权重。
24.根据权利要求21的柠檬酸恩氯米芬，其中所述柠檬酸恩氯米芬(I)具有在3至25微米范围内的平均粒度。
25.柠檬酸恩氯米芬，其由式(I)表示：
其具有在3至25微米范围内的平均粒度。
26.根据权利要求24的柠檬酸恩氯米芬，其中所述平均粒度在10至20微米的范围内。
27.根据权利要求24至25任一项的柠檬酸恩氯米芬，其中所述柠檬酸恩氯米芬具有针状晶体习性。
28.根据权利要求26的柠檬酸恩氯米芬，其中所述柠檬酸恩氯米芬(I)采取仅针状晶体的形式。
29.一种药物组合物，其包含根据权利要求18至28任一项的由式(I)表示的柠檬酸恩氯米芬和一种或多种可药用赋形剂。
30.根据权利要求18至28任一项的由式(I)表示的柠檬酸恩氯米芬或根据权利要求29的药物组合物，其用于药物中。
31.根据权利要求18至28任一项的由式(I)表示的柠檬酸恩氯米芬或根据权利要求29的药物组合物，其用于治疗继发性性腺机能亢进和2型糖尿病。
32.用于制备Z-异构体的量低于0.20A/A％的式(I)的柠檬酸恩氯米芬的方法：
所述方法包括下述步骤：
A)式(III)的恩氯米芬BPA盐的重结晶：
B)将在步骤A)中获得的重结晶的式(III)的恩氯米芬BPA盐转化成式(I)的柠檬酸恩氯米芬；
或者包括下述步骤：
1.从恩氯米芬BPA盐开始并获得式(II)的恩氯米芬的溶液，
2.向在步骤1中获得的溶液添加BPA酸，
3.分离式(III)的恩氯米芬BPA盐，
4.将在步骤3中获得的分离的式(III)的恩氯米芬BPA盐转化成式(I)的柠檬酸恩氯米芬。
33.根据权利要求32的方法，其中所述步骤A)的重结晶通过二甲基甲酰胺与C1-C4烷基醇的混合物来进行。
34.根据权利要求33的方法，其中所述C1-C4烷基醇是甲醇。
35.根据权利要求32至34任一项的方法，其中相对于式(III)的恩氯米芬BPA盐的量，二甲基甲酰胺的体积量为1.5至2.5倍，以及C1-C4烷基醇的体积量为4至6倍。
36.根据权利要求32至35任一项的方法，其中柠檬酸恩氯米芬中Z-异构体的量低于0.10A/A％。
37.根据权利要求32至36任一项的方法，其中所述式(I)的柠檬酸恩氯米芬具有针状晶体习性。
38.根据权利要求37的方法，其中所述式(I)的柠檬酸恩氯米芬采取仅针状晶体的形式。
39.权利要求32至38任一项的方法，其中所述式(I)的柠檬酸恩氯米芬具有在3至25微米范围内的平均粒度。
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Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2914563A (en) * 1957-08-06 1959-11-24 Wm S Merrell Co Therapeutic composition
GB879792A (en) * 1956-11-06 1961-10-11 Richardson Merrell Inc Preparation of substituted triphenylethylenes
DE1155436B (de) * 1956-11-06 1963-10-10 Richardson Merrell Inc Verfahren zur Herstellung von 1-[p-(ª‰-Diaethylaminoaethoxy)-phenyl]-1, 2-diphenyl-2-chloraethylen
DE2224240B2 (de) * 1971-05-18 1974-09-12 Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar, Budapest Verfahren zur Herstellung von 1eckige Klammer auf p-(beta-DiäthylaminoäthoxyVphenyl eckige Klammer zu-1,2-diphenyl-2-chlorät hy len beziehungsweise dessen therapeutisch brauchbaren Salzen
US3848030A (en) * 1971-03-18 1974-11-12 Richardson Merrell Spa Optical isomers of binaphthyl-phosphoric acids
WO2010124520A1 (zh) * 2009-05-01 2010-11-04 常州高新技术产业开发区三维工业技术研究所有限公司 一种治疗能量代谢异常的药物组合物和其应用
CN103351304A (zh) * 2013-07-01 2013-10-16 暨明医药科技（苏州）有限公司 一种克罗米芬的合成方法
CN104582686A (zh) * 2012-08-21 2015-04-29 利普生物药剂公司 反式克罗米酚(trans-clomiphene)调配物和其用途
WO2015138340A1 (en) * 2014-03-11 2015-09-17 Repros Therapeutics Inc. Clomiphene synthesis using a single solvent
EP3083552A1 (en) * 2014-10-28 2016-10-26 F.I.S.- Fabbrica Italiana Sintetici S.p.A. Stable solid forms of enclomiphene and enclomiphene citrate

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5118832A (en) 1991-06-14 1992-06-02 Dowelanco Process for the preparation of alkyl 3-chloroanthranilates
FI982733A (fi) 1998-12-17 2000-06-18 Orion Yhtymae Oyj Trifenyylietyleeniantiestrogeenien liukoisia koostumuksia
RU2297218C2 (ru) 2001-07-09 2007-04-20 Зонаджен, Инк. Способы и материалы для лечения тестостероновой недостаточности у мужчин
JP5785680B2 (ja) 2005-03-22 2015-09-30 リプロス セラピューティクス インコーポレイテッド トランス−クロミフェン用の投与レジメン
TW201500041A (zh) 2008-11-07 2015-01-01 Repros Therapeutics Inc 用於代謝症候群與第２型糖尿病的反式氯米芬
UA113291C2 (xx) 2011-08-04 2017-01-10 Метаболіти транскломіфену і їх застосування
MX2014009154A (es) 2012-02-14 2014-08-27 Repros Therapeutics Inc Moduladores selectivos del receptor estrogenico con vidas medias cortas y usos de los mismos.
ES2681023T3 (es) 2012-02-29 2018-09-11 Repros Therapeutics Inc. Terapia de combinación para tratar el déficit de andrógenos
EP3015453B1 (en) 2014-10-28 2016-10-12 F.I.S.- Fabbrica Italiana Sintetici S.p.A. Process for the preparation of Clomiphene

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB879792A (en) * 1956-11-06 1961-10-11 Richardson Merrell Inc Preparation of substituted triphenylethylenes
DE1155436B (de) * 1956-11-06 1963-10-10 Richardson Merrell Inc Verfahren zur Herstellung von 1-[p-(ª‰-Diaethylaminoaethoxy)-phenyl]-1, 2-diphenyl-2-chloraethylen
US2914563A (en) * 1957-08-06 1959-11-24 Wm S Merrell Co Therapeutic composition
US3848030A (en) * 1971-03-18 1974-11-12 Richardson Merrell Spa Optical isomers of binaphthyl-phosphoric acids
DE2224240B2 (de) * 1971-05-18 1974-09-12 Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar, Budapest Verfahren zur Herstellung von 1eckige Klammer auf p-(beta-DiäthylaminoäthoxyVphenyl eckige Klammer zu-1,2-diphenyl-2-chlorät hy len beziehungsweise dessen therapeutisch brauchbaren Salzen
WO2010124520A1 (zh) * 2009-05-01 2010-11-04 常州高新技术产业开发区三维工业技术研究所有限公司 一种治疗能量代谢异常的药物组合物和其应用
CN104582686A (zh) * 2012-08-21 2015-04-29 利普生物药剂公司 反式克罗米酚(trans-clomiphene)调配物和其用途
CN103351304A (zh) * 2013-07-01 2013-10-16 暨明医药科技（苏州）有限公司 一种克罗米芬的合成方法
WO2015138340A1 (en) * 2014-03-11 2015-09-17 Repros Therapeutics Inc. Clomiphene synthesis using a single solvent
EP3083552A1 (en) * 2014-10-28 2016-10-26 F.I.S.- Fabbrica Italiana Sintetici S.p.A. Stable solid forms of enclomiphene and enclomiphene citrate

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A. RICHARDSON,等: "Stereochemistries of Geometric Isomers of", 《J. PHARRN. SCI.》 *
FRANK P. PALOPOLI，等: "Substituted Aminoalkoxytriarylhaloethylenes1", 《JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》 *
P. NARASIMHA RAO，等: "SYNTHESIS OF CARBON-14 IARELED CLOMIPHENE", 《JOURNAL OF LABELLED COMPOUNDS AND RADIOPHARRNOCEURICALS》 *

Also Published As

Publication number Publication date
US10364212B2 (en) 2019-07-30
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US20180362444A1 (en) 2018-12-20
WO2017182097A1 (en) 2017-10-26
CA2989364C (en) 2021-07-20
CA2989364A1 (en) 2017-10-26

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