CN108434285B - 一种开郁曲的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种开郁曲的制备方法，它包括如下步骤：(1)原料药的称取：(2)煎汁；(3)发酵；(4)出曲。本发明还公开了制备得到的开郁曲产品。实验结果表明，采用本发明方法可显著提高提取物出膏率及开郁曲中活性物质阿魏酸含量，并且可以减少开郁曲炮制时间、杂霉生长，得到的开郁曲具有较优的品质，应用前景良好。

Description

一种开郁曲的制备方法
技术领域
本发明涉及一种开郁曲的制备方法，属于医药领域。
背景技术
我国发酵技术应用历史悠久，也是传统中药加工炮制的重要方法之一，一般主要是起到中药复合炮制的作用。即将药材与辅料拌和，一定温度和湿度下通过微生物的发酵达到提高药效、改变药性、降低毒副作用等目的。直到现在，临床仍在应用的发酵中药，如六神曲、淡豆豉、建曲、沉香曲、半夏曲、红曲、豆黄等，均是利用炮制环境中的野生微生物(多为霉菌、酵母、细菌等)进行多菌种固体发酵而成。
半夏(Pinellia ternata)是常用中药之一，由于具有毒性，临床入药多用其炮制品。半夏可燥湿痰，润肾燥，散结除痞，宣通阴阳，前贤针对痰邪的不同性质，把半夏或用药汁浸或加其它药物制成曲，使半夏更能发挥功效。“韩飞霞造曲十法”记载了10种半夏炮制品，开郁曲为其中一种，可治郁痰。
目前，开郁曲的发酵工艺多利用自然环境中的微生物进行发酵，靠天然野菌种自然发酵，发酵后提高药效、降低毒性，药物更容易吸收、利用。然而，由于开郁曲受自然因素的影响较大，目前对开郁曲的发酵存在炮制时间长、容易生长较多的杂霉、阿魏酸含量少、提取物出膏率低等问题，无法保证产品品质。
发明内容
本发明的目的在于提供一种开郁曲的制备方法，以解决现有方法炮制时间长、容易生长较多的杂霉、阿魏酸含量少、提取物出膏率低的问题。
本发明提供了一种开郁曲的制备方法，它包括如下步骤：
(1)原料药的称取：取川芎、香附、苍术、清半夏，备用；
(2)煎汁：将川芎、香附、苍术，加水煎煮，过滤，浓缩，得煎汁；
其中，加水煎煮的方法为：加入5.5-7.5倍药材重量的水浸泡30-60min，煎煮0.5-1.5小时，过滤，取药渣加入4-8倍药材重量的水，再煎煮0.5-1.5小时；
(3)发酵：将清半夏，粉碎，加入步骤(2)的煎汁，进行发酵，发酵过程中保持相对湿度60-90％，控制温度25-40℃；
(4)出曲：待步骤(3)所述的发酵物长出白黄色霉衣，取出，干燥，即得开郁曲。
清半夏：为半夏的炮制加工品。质量需符合《中国药典》2015年一部清半夏饮片标准。
其中，步骤(1)中，川芎、香附、苍术、清半夏的重量配比为1-10：1-10：1-10：1-10；进一步地，所述重量配比为1:1:1:1。
其中，步骤(1)中，所述川芎、香附、苍术为片状或颗粒。
其中，步骤(2)中，
所述加水煎煮的次数为1-3次；
所述加水煎煮的方法为：加入7.5倍药材重量的水浸泡60min，煎煮1.5h，过滤，药渣再加入6倍量的水煎煮1.5h，重复两次，合并3次的煎液；或，
加入5.5倍药材重量的水浸泡30min，煎煮0.5小时，过滤，药渣加入4倍量的水煎煮0.5h；重复2次，合并3次的煎液。
其中，步骤(3)中，可加入10％-80％清半夏重量的辅料。
其中，步骤(3)所述的辅料包括麦麸和/或面粉。
其中，步骤(3)中，所述的发酵方法为将混合物平铺成2-6cm的厚度，发酵，保持相对湿度85％，控制温度为30℃；优先地，混合物平铺的厚度为4cm。
其中，步骤(3)中，所述发酵的天数为3-8天。
其中，步骤(4)中，所述干燥前先压制成块。
本发明还提供了上述方法制备得到的开郁曲。
实验结果表明，采用该方法可显著提高提取物出膏率及开郁曲中阿魏酸含量，并且可以减少开郁曲炮制时间、杂霉得生长，得到的开郁曲具有较优的品质，应用前景良好。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
本发明实验设备及原料如下：
1、本发明实验设备：
高速中药粉碎机 DH-500A 浙江省永康市洗溪岸五金药具厂
恒温恒湿箱 HWS-250 上海精宏实验设备有限公司
电热恒温鼓风干燥箱 DHG-9146A 上海精宏实验设备有限公司
智能控温电热套 SXKW-1000ml/LDHW-10000ml 北京中兴伟业仪器有限公司
小型农用粉碎机 乐山市东洋机电有限公司
2、本发明原料的选择：
清半夏，质量需符合《中国药典》2015年一部清半夏饮片标准，购进单位四川新荷花中药饮片有限公司；
原处方中抚芎，经查阅资料，《中草药与民族药药材图谱》(北京医科大学出版社出版)中“抚芎”项下备注说明“本品为正品川芎的栽培变种，在一些地区与川芎同等入药用，但习惯认为其质量不如正品川芎好”)。现市售药材以川芎为主，抚芎基本无供应。经文献调研，《丹溪心法》卷三中“越鞠丸”组方为苍术、香附、抚芎、神曲、栀子各等分，《中国药典》收载成方制剂品种“越鞠丸”以川芎替代抚芎，故选择川芎代替抚芎作为本品处方原料；所购川芎质量需符合《中国药典》2015年一部川芎药材标准，药材来源成都荷花池药材市场；
苍术，质量需符合《中国药典》2015年一部苍术药材标准，药材来源成都荷花池药材市场；
香附，质量需符合《中国药典》2015年一部香附药材标准，药材来源成都荷花池药材市场；
麦麸，符合《福建省中药材标准》2006版要求，来源于陕西天山西瑞面粉有限公司。
面粉，符合《福建省中药材标准》2006版要求，来源于克明面业股份有限公司。
对照品信息：阿魏酸，中国食品药品检定研究院，110773-201614，含量≥99.0％。
色谱柱：GS-120-5-C18-AP色谱柱(4.6mm×250mm，5μm，Global ChromatographyCo.,Ltd)
Kromasil 100-5 C18 column(250*4.6mm)
实施例1本发明开郁曲的制备
(1)原料前处理：处方中川芎、香附、苍术需煎汁入药，三味药材性质相近，均含有挥发油物质，饮片加工工艺成熟，故可根据中国药典要求，参考饮片加工工艺制定前处理工艺流程：净制→洗润→干燥→粗碎；具体操作如下：
净制：除去杂质及非药用部位；
洗润：将净制后药材用清水洗去泥沙；
干燥：热风循环烘箱，烘干温度60℃～70℃，干燥厚度不大于10cm；
粗碎：采用破碎机将药材破碎成小块或颗粒；
(2)煎汁：经前处理香附、苍术、川芎各50g，分别加入7.5倍水量(包含药材吸水率的1.5倍)，浸泡60min，加热至沸腾后煎煮1.5h，过滤，药渣再6倍量水煎煮，重复3次，分别合并液体，浓缩备用。
(3)发酵：另取清半夏50g，粉碎成粗粉，加入煎液，混合均匀，铺成4cm厚，上盖纱布，置30℃，相对湿度85％条件下发酵；
(4)出曲：待步骤(3)所述的发酵物全都长满白黄色霉衣，取出，低温干燥(按照药典要求，低温干燥一般不超过60℃，干燥程度以水分不超过8％为终点)，即得开郁曲。
实施例2本发明开郁曲的制备
取经前处理香附、苍术、川芎各500g，加入7.5倍量的水浸泡60分钟，煎煮1.5小时，过滤，药渣加入6倍量的水，重复煎煮2次，合并3次的煎液，浓缩备用。
另取清半夏500g，粉碎成粗粉，加入煎液，混合均匀，铺成4cm厚，置30℃，相对湿度85％环境下发酵至遍生白黄色霉衣为度，取出，干燥。
实施例3本发明开郁曲的制备(中试)
取经前处理香附、苍术、川芎各5kg，加入7.5倍量的水浸泡60分钟，煎煮1.5小时，过滤，药渣加入6倍量的水，重复煎煮2次，合并3次的煎液，煎液浓缩备用。
另取清半夏5kg，粉碎成粗粉，加入煎液，混合均匀，置30℃，相对湿度85％环境下发酵至遍生白黄色霉衣为度，取出，干燥。
实施例4本发明开郁曲的制备(中试)
(1)原料前处理：取川芎、香附、苍术，除去杂质及非药用部位，将净制后药材用适量清水洗去泥沙，热风循环烘箱，烘干温度60℃～70℃，干燥厚度不大于10cm；采用破碎机将药材破碎成小块或颗粒；
(2)煎汁：经前处理香附、苍术、川芎各5kg，加入5.5倍量的水浸泡30分钟，煎煮0.5小时，过滤，药渣加入4倍量的水，重复煎煮2次，合并3次的煎液，煎液浓缩备用。
(3)发酵：另取清半夏5kg，粉碎成粗粉，加入煎液，混合均匀，铺成4cm厚，置30℃，相对湿度85％环境下发酵；
(4)出曲：待步骤(3)所述的发酵物全都长满白黄色霉衣，取出，干燥，即得开郁曲。
实施例5本发明开郁曲的制备
(1)原料前处理：取川芎、香附、苍术，除去杂质及非药用部位，将净制后药材用适量清水洗去泥沙，热风循环烘箱，烘干温度60℃～70℃，干燥厚度不大于10cm；采用破碎机将药材破碎成小块或颗粒；
2)煎汁：经前处理香附、苍术、川芎各400kg，加入7.5倍量的水浸泡60分钟，煎煮1.5小时，过滤，药渣加入6倍量的水煎煮，重复煎煮2次，合并3次的煎液，煎液浓缩备用。
(3)发酵：另取清半夏400kg，粉碎成粗粉，加入煎液，混合均匀，铺成4cm厚，上盖纱布，置30℃，相对湿度85％环境下发酵；
(4)出曲：待步骤(3)所述的发酵物全都长满白黄色霉衣，取出，混合均匀，用模具压制成型，干燥后重量控制为每块重10g，水分含量不得超过8％(曲剂项下规定，九册附1页)，即得开郁曲。
实施例5本发明开郁曲的制备
(1)原料前处理：取川芎、香附、苍术，除去杂质及非药用部位，将净制后药材用适量清水洗去泥沙，热风循环烘箱，烘干温度60℃～70℃，干燥厚度不大于10cm；采用破碎机将药材破碎成小块或颗粒；
2)煎汁：经前处理香附、苍术、川芎各400kg，加入7.5倍量的水浸泡60分钟，煎煮1.5小时，过滤，药渣加入6倍量的水煎煮，重复煎煮2次，合并3次的煎液，煎液浓缩备用。
(3)发酵：另取清半夏400kg，粉碎成粗粉，加入10％-80％清半夏重量的麦麸或面粉及煎液，混合均匀，铺成4cm厚，上盖纱布，置30℃，相对湿度85％环境下发酵；
(4)出曲：待步骤(3)所述的发酵物全都长满白黄色霉衣，取出，混合均匀，用模具压制成型，干燥后重量控制为每块重10g，水分含量不得超过8％(曲剂项下规定，九册附1页)，即得开郁曲。
以下通过实验例证明本发明的有益效果。
实验例1采用不同煎汁参数所得出膏率及总酚酸的对比
1、药材吸水率的考察
取经前处理药材各3份，每份含川芎、香附、苍术各100g，加入8倍水量，浸泡30min，加热至沸腾后煎煮1h(观察断面是否透心)，滤去多余液体，称定煎煮后药渣重量，计算吸水率，结果见表1。
表1吸水率实验结果
原药材重量 吸水后重量 吸水率
实验1 300.1g 760.1g 153％
实验2 300.1g 777.9g 159％
实验3 300.1g 788.4g 163％
由表1中数据可知，药材吸水率相对稳定，后期药材煎汁相关实验需加入吸水的部分，确定吸水部分加水量为1.5倍药材量。
2、煎汁参数的筛选
取经前处理药材各11份，每份含川芎、香附、苍术各100g，按照表2安排实验，收集并浓缩煎液，转移至1000ml容量瓶中，并用水稀释至刻度(后期煎液检测均按照该比例制备)。
选择不同的加水量、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数进行提取，将所得出膏率及总酚酸进行对比。
出膏率的测定方法：精密量取25ml稀释后煎液，置于已恒重的蒸发皿中，水浴蒸发至浓稠，于105℃干燥3h，称定重量，计算出膏率；
总酚酸的测定方法：
1)检测波长的选择
精密吸取阿魏酸对照品溶液1ml，用甲醇定容至50ml棕色容量瓶内，摇匀，备用。以甲醇作为空白，阿魏酸选择315nm作为检测波长。
2)线性关系考察
精密吸取0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45ml对照品溶液，分别置于10ml棕色量瓶中，用甲醇定容，摇匀。以甲醇作为空白，依照紫外一可见分光光度法(《中国药典》2015年版四部附录VA)，于315nm波长下进行测定。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y＝0.0715x+0.0507(r＝0.9993)，阿魏酸浓度在4.08～9.18μg/ml范围内成良好的线性关系。
3)样品中总酚酸含量测定
煎液中总酚酸(以阿魏酸计)检测方法如下：
对照品溶液的配制：精密称取10.2mg阿魏酸对照品，置于50ml棕色容量瓶中，加适量甲醇，超声溶解，取出，用甲醇定容，摇匀，即得每1ml中含阿魏酸0.204mg的对照品溶液。
标准曲线制备：精密吸取0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45ml对照品溶液，分别置于10ml棕色量瓶中，用甲醇定容，摇匀。以甲醇作为空白，依照紫外一可见分光光度法(《中国药典》2015年版四部附录VA)，于315nm波长下进行测定。
测定法：精密吸取供试品溶液1ml，用甲醇定容至100ml棕色量瓶中，过滤，取续滤液，照线性关系项制备项下的方法测定吸光度。根据标准曲线计算供试品溶液中总酚酸含量(以阿魏酸计)。
4)方法学考察
精密度实验：精密吸取对照品溶液2ml，用甲醇定容到50ml，照线性关系项制备项下的方法，测定6次。结果见表2，RSD值为0.21％，表明仪器精密度良好。
表2精密度考察结果
Figure GDA0002968289920000071
稳定性实验：精密吸取6号样品1ml，用甲醇定容至100ml棕色容量瓶，过滤，取续滤液，分别于0h、1h、2h、4h、6h、8h后，照线性关系项制备项下的方法测定吸光度。结果见表3，经计算RSD值为1.54％，表明供试品在8h内稳定。
表3稳定性考察结果
Figure GDA0002968289920000072
Figure GDA0002968289920000081
重复性实验：精密吸取6号样品6份，每份1ml，用甲醇定容至100ml棕色量瓶中，过滤，取续滤液，照线性关系项制备项下的方法测定吸光度。实验结果见表4，经计算RSD值为0.69％，表明本方法重复性良好。
表4重复性考察结果
Figure GDA0002968289920000082
加样回收率实验：精密吸取9份已知含量的样品(6号)，分别加入适量阿魏酸对照品溶液，定容至100ml，过滤，取续滤液，照线性关系项制备项下的方法测定吸光度。按公式[回收率＝(实测值-原有量)/加入量×100％]计算加样回收率，结果见表5，RSD值为1.72％，表明：回收率的重现性好，该测定方法测定的结果准确。
表5加样回收率考察结果
Figure GDA0002968289920000083
Figure GDA0002968289920000091
出膏率及总酚酸测定结果见表6。
表6出膏率及总酚酸对比
Figure GDA0002968289920000092
实验结果表明：
提取工艺6：加入7.5倍水量，浸泡60min，加热至沸腾后煎煮1.5h，滤去多余液体；药渣再加入6倍量的水煎煮1.5h，重复两次(具体做法：药渣再加入6倍量的水煎煮1.5h，收集滤液，再加6倍量的水煎煮1.5h；)，合并3次的煎液；
提取工艺11：加入5.5倍量的水浸泡30min，煎煮0.5小时，过滤，药渣加入4倍量的水煎煮0.5小时，重复煎煮2次，合并3次的煎液。
提取工艺6和提取工艺11都能获得较高的出膏率及总酚酸，尤其是都具有较高的总酚酸含量。然而，综合加水量、浸泡时间、煎煮时间因素考虑，发现提取工艺11比提取工艺6在较大程度上节约了用水量、浸泡时间和煎煮时间，更适合于工业生产。
综上，采用本发明方法可显著提高出膏率及开郁曲中活性物质阿魏酸含量，并且可以减少开郁曲炮制时间、杂霉生长，得到的开郁曲具有较优的品质，应用前景良好。

Claims (9)

1.一种开郁曲的制备方法，其特征在于：它包括如下步骤：
(1)原料药的称取：取川芎、香附、苍术、清半夏，备用；
(2)煎汁：将川芎、香附、苍术，加水煎煮，过滤，浓缩，得煎汁；其中，加水煎煮的方法为：加入5.5-7.5倍药材重量的水浸泡30-60min，煎煮0.5-1.5小时，过滤，取药渣加入4-6倍药材重量的水，再煎煮0.5-1.5小时；
(3)发酵：将清半夏，粉碎，加入步骤(2)的煎汁，进行发酵，发酵过程中保持相对湿度60-90％，控制温度25-40℃；
(4)出曲：待步骤(3)所述的发酵物长出白黄色霉衣，取出，干燥，即得开郁曲；
步骤(1)中，川芎、香附、苍术、清半夏的重量配比为1:1:1:1；
步骤(3)中，所述的发酵方法为将混合物平铺成2-6cm的厚度，发酵，保持相对湿度85％，控制温度为30℃。
2.如权利要求1所述开郁曲的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述川芎、香附、苍术为片状或颗粒。
3.如权利要求1所述开郁曲的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述加水煎煮的方法为：加入7.5倍药材重量的水浸泡60min，煎煮1.5h，过滤，药渣再加入6倍量的水煎煮1.5h，重复两次，合并3次的煎液；或，
加入5.5倍药材重量的水浸泡30min，煎煮0.5小时，过滤，药渣加入4倍量的水煎煮0.5h；重复2次，合并3次的煎液。
4.如权利要求1所述开郁曲的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，加入10％-80％清半夏重量的辅料。
5.如权利要求4所述开郁曲的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述的辅料包括麦麸和/或面粉。
6.如权利要求1所述开郁曲的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，混合物平铺的厚度为4cm。
7.如权利要求1所述开郁曲的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，所述发酵的天数为3-8天。
8.如权利要求1所述开郁曲的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，所述干燥前先压制成块。
9.权利要求1～8任意一项所述方法制备得到的开郁曲。
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