CN108410567A - 一种药材甲脂肪的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物大分子提取技术领域，尤其涉及一种药材甲脂肪的提取方法，本发明提取药材甲的脂肪方法，通过使用溶液1进行混合，改变了细胞的通透性，通过液氮速冻，粉碎，随后使用混合提取溶剂进行提取，并加入蒸馏水，溶解了部分蛋白质、色素，得到的脂肪较纯，提取量较大。

Description

一种药材甲脂肪的提取方法
技术领域
本发明属于生物大分子提取技术领域，尤其涉及一种药材甲脂肪的提取方法。
背景技术
药材甲[Stegobiumpaniceum(L.)]隶属于鞘翅目(Coleoptera)窃蠹科(Anobiidae)，是一种典型的世界性分布储藏物甲虫，在美国、德国、印度等地大面积发生和危害，对多种储藏物造成严重损失；在我国的广东、山西、山东、贵州等地区均有发生，且是中药材储藏期害虫的优势种。药材甲成虫体型较小，幼虫在寄主组织内生存。药材甲其防治主要依赖化学药剂熏蒸，但熏蒸剂的残留性使得储藏物的管理面临危机，昆虫对药剂抗性的问题则使得储藏物害虫的防治形势越发严峻。CO2气调技术作为一种有效、安全、无残留的储藏物害虫防治措施，受到广泛关注。研究表明，气调处理能够有效控制药材甲及烟草甲危害，但两者对气调胁迫的敏感性不同，其原因可能与昆虫相关酶的活力变化有关。另有研究指出，昆虫的能源物质、脂肪、蛋白质、糖类在其应对气调胁迫是也起着重要作用，幼虫体内的多糖、可溶性蛋白质及脂肪含量，均随着时间的延长，CO2的升高，其含量逐渐降低，说明CO2胁迫导致了昆虫能源物质的消耗，可能是引起昆虫死亡的重要原因，但目前其作用机理尚未研究清楚，因此对于药材甲能源物质的研究是其研究的基础，本发明重在提供一种药材甲的脂肪提取方法。
发明内容
本发明为了解决以上技术问题，本发明提供了一种药材甲脂肪的提取方法。
具体是通过以下技术方案来实现的：
一种药材甲脂肪的提取方法，包括以下步骤：
1)取药材甲，加入溶液1，冻干，备用；
2)将步骤1)得到的药材甲与提取溶剂混合，加入蒸馏水，高速分散器混合，
3)将步骤2)得到的混合溶液离心，取脂肪层，沉淀采用步骤2)的方法再重复提取1-2次，离心合并脂肪层；
4)将步骤3)合并后的脂肪层，真空旋转蒸发；
5)将旋转蒸发得到的油脂进行碱炼，水化，真空干燥，真空脱色，抽滤，蒸汽蒸馏脱臭，真空冷却，即得。
进一步，所述的溶液1为0.2-0.4mol/L的氯化钠、0.1-0.3mol/L的磷酸二氢钠、2-4％的甘油，0.3-0.5％的甲酸混合溶液。
进一步，所述的加入溶液1，是将溶液1与药材甲按照质量比2-3:1.5-1.7混合，室温放置2-3h。
进一步，所述的冻干，是将溶液1处理过的药材甲用液氮速冻。
进一步，所述的提取溶剂为氯仿、甲醇、石油醚、丙酮混合而成。
进一步，所述的提取溶剂为氯仿、甲醇、石油醚、丙酮按照质量比0.5-1:2-3:3-7:0.5-1.2。
进一步，所述的提取溶剂，其加入量为药材甲质量的20-35倍。
进一步，所述的蒸馏水的加入量为提取溶剂的30-35％。
进一步，所述的碱炼，硅酸钠的加入量为真空旋转蒸发得到的油脂质量的0.2-0.3％，碱液浓度为25Be，碱炼初温为55℃，碱超量为0.035％。
有益效果，本发明提取药材甲的脂肪方法，通过使用溶液1进行混合，改变了细胞的通透性，通过液氮速冻，粉碎，随后使用混合提取溶剂进行提取，并加入蒸馏水，溶解了部分蛋白质、色素，得到的脂肪较纯，最大程度的提出药材甲中的油脂，为后续的精炼做较好的基础，通过后面精炼，最后得到的油脂其色泽(罗维朋比色计)，《黄35，红2，气味、滋味：具有药材甲固有的香味和滋味，无异味，酸价(mgKOH/g)≤1.05，水分及挥发物(％)≤0.03％，杂质(％)≤0.02，加热试验(280℃)，油色不变深，无析出物，含皂量(％)≤0.01，此外，对成虫进行提取也能达到同样的效果。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明，但本发明并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
实施例1
一种药材甲脂肪的提取方法，包括以下步骤：
1)取药材甲，加入溶液1，冻干，备用；
2)将步骤1)得到的药材甲与提取溶剂混合，加入蒸馏水，高速分散器混合；
3)将步骤2)得到的混合溶液离心，取脂肪层，沉淀采用步骤2)的方法再重复提取1-2次，离心合并脂肪层；
4)将步骤3)合并后的脂肪层，真空旋转蒸发，即可；
5)将旋转蒸发得到的油脂进行碱炼，水化，真空干燥，真空脱色，抽滤，蒸汽蒸馏脱臭，真空冷却，即得。
所述的溶液1为0.2mol/L的氯化钠、0.1mol/L的磷酸二氢钠、2％的甘油，0.3％的甲酸混合溶液。
所述的加入溶液1，是将溶液1与药材甲按照质量比2:1.5混合，室温放置2h。
所述的冻干，是将溶液1处理过的药材甲用液氮速冻。
所述的提取溶剂为氯仿、甲醇、石油醚、丙酮按照质量比0.5:2:3:0.5。
所述的提取溶剂，其加入量为药材甲质量的20倍。
所述的蒸馏水的加入量为提取溶剂的30％。
所述的碱炼，硅酸钠的加入量为真空旋转蒸发得到的油脂质量的0.2％，碱液浓度为25Be，碱炼初温为55℃，碱超量为0.035％。
实施例2
一种药材甲脂肪的提取方法，包括以下步骤：
1)取药材甲，加入溶液1，冻干，备用；
2)将步骤1)得到的药材甲与提取溶剂混合，加入蒸馏水，高速分散器混合；
3)将步骤2)得到的混合溶液离心，取脂肪层，沉淀采用步骤2)的方法再重复提取1-2次，离心合并脂肪层；
4)将步骤3)合并后的脂肪层，真空旋转蒸发，即可；
5)将旋转蒸发得到的油脂进行碱炼，水化，真空干燥，真空脱色，抽滤，蒸汽蒸馏脱臭，真空冷却，即得。
所述的溶液1为0.3mol/L的氯化钠、0.2mol/L的磷酸二氢钠、3％的甘油，0.4％的甲酸混合溶液。
所述的加入溶液1，是将溶液1与药材甲按照质量比2.3:1.6混合，室温放置2.3h。
所述的冻干，是将溶液1处理过的药材甲用液氮速冻。
所述的提取溶剂为氯仿、甲醇、石油醚、丙酮按照质量比0.7:2.3:5:1.0。
所述的提取溶剂，其加入量为药材甲质量的30倍。
所述的蒸馏水的加入量为提取溶剂的34％。
所述的碱炼，硅酸钠的加入量为真空旋转蒸发得到的油脂质量的0.25％，碱液浓度为25Be，碱炼初温为55℃，碱超量为0.035％。
实施例3
一种药材甲脂肪的提取方法，包括以下步骤：
1)取药材甲，加入溶液1，冻干，备用；
2)将步骤1)得到的药材甲与提取溶剂混合，加入蒸馏水，高速分散器混合；
3)将步骤2)得到的混合溶液离心，取脂肪层，沉淀采用步骤2)的方法再重复提取1-2次，离心合并脂肪层；
4)将步骤3)合并后的脂肪层，真空旋转蒸发，即可；
5)将旋转蒸发得到的油脂进行碱炼，水化，真空干燥，真空脱色，抽滤，蒸汽蒸馏脱臭，真空冷却，即得。
所述的溶液1为0.4mol/L的氯化钠、0.3mol/L的磷酸二氢钠、4％的甘油，0.5％的甲酸混合溶液。
所述的加入溶液1，是将溶液1与药材甲按照质量比3:1.7混合，室温放置3h。
所述的冻干，是将溶液1处理过的药材甲用液氮速冻。
所述的提取溶剂为氯仿、甲醇、石油醚、丙酮按照质量比1:3:7:1.2。
所述的提取溶剂，其加入量为药材甲质量的35倍。
所述的蒸馏水的加入量为提取溶剂的35％。
所述的碱炼，硅酸钠的加入量为真空旋转蒸发得到的油脂质量的0.3％，碱液浓度为25Be，碱炼初温为55℃，碱超量为0.035％。
实施例4
实施例4提取药材甲脂肪采用索氏提取法(国标)进行。
实施例5
实施例5与实施例2的区别在，步骤1)取药材甲，冻干，备用；其它提取步骤与实施例2相同。
实验例
1、脂肪含量计算
脂肪含量计算公式:脂肪含量＝(m1-m0)/m样，式中m0为真空旋转蒸发前试管重量，m1为真空旋转蒸发后试管重量，m样品为样品重量。
皂化值＝[c(v0-v1)M]/m，式中c为盐酸标准溶液的实际浓度；V0为空白试验消耗盐酸标准溶液的体积；V1为试样消耗盐酸标准溶液的体积；m＝m1-m0；M(KOH)为氢氧化钾的摩尔质量(56.1g/mol)。
按照实施例1-5的方法提取药材甲幼虫的脂肪，测定其含量和皂化值，每个实施例重复3次，求平均值，结果如表1所示。
表1药材甲脂肪含量
脂肪含量μg/头 皂化值
实施例1 37.65 188
实施例2 39.23 180
实施例3 40.00 185
实施例4 33.12 183
实施例5 31.08 125
通过以上分析发现，本发明提取药材甲的脂肪方法，通过使用溶液1进行混合，改变了细胞的通透性，通过液氮速冻，粉碎，随后使用混合提取溶剂进行提取，并加入蒸馏水，溶解了部分蛋白质、色素，得到的脂肪较纯，为后续的精炼做较好的基础，通过后面精炼，最后得到的油脂其色泽(罗维朋比色计)，《黄35，红2，气味、滋味：具有药材甲固有的香味和滋味，无异味，酸价(mgKOH/g)≤1.05，水分及挥发物(％)≤0.03％，杂质(％)≤0.02，加热试验(280℃)，油色不变深，无析出物，含皂量(％)≤0.01。

Claims (7)

1.一种药材甲脂肪的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)取药材甲，加入溶液1，冻干，备用；
2)将步骤1)得到的药材甲与提取溶剂混合，加入蒸馏水，高速分散器混合；
3)将步骤2)得到的混合溶液离心，取脂肪层，沉淀采用步骤2)的方法再重复提取1-2次，离心合并脂肪层；
4)将步骤3)合并后的脂肪层，真空旋转蒸发，即可；
5)将旋转蒸发得到的油脂进行碱炼，水化，真空干燥，真空脱色，抽滤，蒸汽蒸馏脱臭，真空冷却，即得。
2.如权利要求1所述的药材甲脂肪的提取方法的，其特征在于，所述的溶液1为0.2-0.4mol/L的氯化钠、0.1-0.3mol/L的磷酸二氢钠、2-4％的甘油，0.3-0.5％的甲酸混合溶液。
3.如权利要求1所述的药材甲脂肪的提取方法的，其特征在于，所述的加入溶液1，是将溶液1与药材甲按照质量比2-3:1.5-1.7混合，室温放置2-3h。
4.如权利要求1所述的药材甲脂肪的提取方法的，其特征在于，所述的冻干，是将溶液1处理过的药材甲用液氮速冻。
5.如权利要求1所述的药材甲脂肪的提取方法的，其特征在于，所述的提取溶剂为氯仿、甲醇、石油醚、丙酮按照质量比0.5-1:2-3:3-7:0.5-1.2。
6.如权利要求1所述的药材甲脂肪的提取方法的，其特征在于，所述的提取溶剂，其加入量为药材甲质量的20-35倍。
7.如权利要求1所述的药材甲脂肪的提取方法的，其特征在于，所述的蒸馏水的加入量为提取溶剂的30-35％。
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