CN108374028A - 一种利用化学表观遗传修饰提高海洋真菌中azaphilone类化合物产量的方法 - Google Patents
一种利用化学表观遗传修饰提高海洋真菌中azaphilone类化合物产量的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108374028A CN108374028A CN201810148388.8A CN201810148388A CN108374028A CN 108374028 A CN108374028 A CN 108374028A CN 201810148388 A CN201810148388 A CN 201810148388A CN 108374028 A CN108374028 A CN 108374028A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fungi
- culture
- genetic modification
- fermentation medium
- modification agent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种利用化学表观遗传修饰提高海洋真菌中azaphilone类化合物产量的方法，具体包括如下步骤：(1)配制真菌种子液；(2)化学表观遗传修饰剂的配制；(3)将步骤(2)配制的表观遗传修饰剂加入发酵培养基中，使得发酵培养基中表观遗传修饰剂的最终浓度为0.1μM‑50mM，将步骤(1)中配制的真菌种子液接入发酵培养基，于15‑25℃，静置培养25‑35天，得发酵物；(4)将步骤(3)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用乙酸乙酯提取，菌体用甲醇提取，合并提取液、蒸除溶剂得发酵提取物。
Description
技术领域
本发明属于海洋真菌次级代谢产物领域，具体涉及一种利用化学表观遗传修饰提高海洋真菌中azaphilone类化合物产量的方法。
背景技术
近年来研究发现，真菌编码次级代谢产物的数量远远大于已经分离获得的化合物数量，表明真菌中某些表达次级代谢产物的基因是沉默的。为了发现更多的结构新颖、活性显著的次级代谢产物，必须想办法激活这些沉默基因。表观遗传修饰法在真菌沉默基因的激活和表达上具有重要作用。表观遗传修饰是在DNA序列没有发生变化的情况下改变基因的表达，主要通过组蛋白修饰、DNA的甲基化和非编码RNA调控等方式达到调控基因表达的目的。研究表明，真核生物的组蛋白乙酰化与去乙酰化、DNA的甲基化均可以影响染色质的状态，而染色质状态的改变可促进基因活化，促进基因转录子的启动，提高沉默基因的表达率，从而影响次级代谢产物的生物合成，增加发现新化合物的几率。近年来，化学表观遗传修饰法被广泛应用于真菌的代谢调控，以激活真菌处于沉默状态的基因簇，进而影响其次级代谢，诱导其产生新化合物或者提高已知化合物的产量。
发明内容
本发明海洋真菌Penicillium sp.HK1-6的菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2016年7月5日；保藏编号：CGMCC No.12762；分类命名：青霉Penicillium sp.。菌株保藏信息可参见，在先中国发明专利申请(申请号CN201610831163.3)。
本发明海洋真菌Penicillium sp.HK1-6来源于红树根际土壤(参见中国专利申请号：CN201610831163.3)。
发明人在先申请(中国专利申请号：CN201711417393.6)中记载了一种利用海洋真菌Penicillium sp.HK1-6制备penicilones A-D的方法，其中penicilones A-D(即化合物1-4)具有如下结构：
详细制备方法，可参见发明人在先申请(CN201711417393.6)或参见本发明具体实施方式中的记载。而且通过前期研究发现，penicilones A-D具有如下理化性质：penicilones A-D经TLC展开并经浓硫酸-香草醛显色后，均显示特征的黄色斑点；经HPLC-UV指纹图谱分析可知penicilones A-D的UV特征吸收峰位于220nm及340nm附近；penicilones A-D的结构类似物分子量应为500左右。
本发明提供一种增加海洋真菌Penicillium sp.HK1-6发酵提取物中化合物penicilones A-D产量的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)配制真菌种子液：将真菌Penicillium sp.HK1-6菌株接入种子培养基，于20-28℃，摇床培养3～5天，得真菌种子液；
(2)化学表观遗传修饰剂的配制：将化学表观遗传修饰剂用蒸馏水配制成一定浓度的溶液，经微孔滤膜过滤除菌后备用；
(3)将步骤(2)配制的表观遗传修饰剂加入发酵培养基中，使得发酵培养基中表观遗传修饰剂的最终浓度为0.1μM-50mM，将步骤(1)中配制的真菌种子液接入发酵培养基，于15-25℃，静置培养25-35天，得发酵物；
(4)将步骤(3)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用乙酸乙酯提取，菌体用甲醇提取，合并提取液、蒸除溶剂得发酵提取物。
本发明所述种子培养基和发酵培养基各自独立地选自液体或固体的GPY培养基、或液体或固体的PDA培养基。
固体PDA培养基：每1000mL水中，土豆200g(煮沸取汁)，葡萄糖15-20g，海水素(或粗海盐)20-40g，琼脂12-20g。
液体PDA培养基：每1000mL水中，土豆200g(煮沸取汁)，葡萄糖15-20g，海水素(或粗海盐)20-40g。
固体GPY培养基：每1000mL水中，蛋白胨3-5g，酵母膏1-2g，葡萄糖15-20g，海水素(或粗海盐)20-40g，琼脂12-20g。
液体GPY培养基：每1000mL水中，蛋白胨3-5g，酵母膏1-2g，葡萄糖15-20g，海水素(或粗海盐)20-40g。
本发明所述的化学表观遗传修饰剂选自组蛋白去乙酰化酶抑制剂或DNA甲基化转移酶抑制剂，其中组蛋白去乙酰化酶抑制剂优选丁酸钠、辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)、伏立诺他(Vorinostat)、烟酰胺、丙戊酸钠、4-苯基丁酸、4-苯基丁酸钠、曲古抑菌素A(TSA)；DNA甲基化转移酶抑制剂优选5-氮杂胞苷(5-Aza-c)、5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dc)、RG-108、西奈芬净、地西他滨。
步骤(1)中所述摇床培养的转速为120-180转/分钟。
步骤(2)中所述微孔滤膜优选0.22μm的微孔滤膜。
步骤(3)中表观遗传修饰剂的最终浓度为优选0.5μM、1μM、10μM、5mM。
步骤(4)中乙酸乙酯和甲醇提取次数优选2-4次。
本发明所述的表观遗传修饰剂的最终浓度是指每升发酵培养基中含表观遗传修饰剂的摩尔数。
附图说明
图1是真菌Penicillium sp.HK1-6在丁酸钠(5mM)影响下发酵提取物的HPLC分析图
图2是真菌Penicillium sp.HK1-6在丁酸钠(5mM)影响下发酵提取物的HPLC-UV分析图
图3是真菌Penicillium sp.HK1-6在5-Aza-c(1μM)影响下发酵提取物的HPLC分析图
具体实施方式
为了便于对本发明的进一步理解，下面提供的实施例对其做了更详细的说明。但是这些实施例仅供更好的理解发明而并非用来限定本发明的范围或实施原则，本发明的实施方式不限于以下内容。
实施例1
(1)配制真菌种子液：首先将种子培养基倒入玻璃培养皿中，制成培养基平板，然后将真菌菌株Penicillium sp.(HK1-6)接种于培养基平板中，在20℃下摇床培养5天，得真菌种子液，备用。其中种子培养基的配方为每1000mL水中加入：土豆200g煮沸取汁，葡萄糖15g，海水素30g，琼脂12g；摇床培养转速为120转/分钟；
(2)化学表观遗传修饰剂的配制：将丁酸钠(组蛋白去乙酰化酶抑制剂)用蒸馏水配制一定浓度的母液，用0.22μm的水相滤膜过滤除菌，备用；
(3)分别将不同体积的步骤(2)配制的丁酸钠母液加入5组发酵培养基中，使得5组发酵培养基中丁酸钠的最终浓度分别达到2.5、5、10、25和50mM，将步骤(1)中配制的真菌种子液分别接入上述含有5种不同浓度的丁酸钠的发酵培养基中，于20℃，静置培养28天，得发酵物；
(4)将步骤(3)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用乙酸乙酯提取2次，菌体用甲醇提取2次，合并提取液、蒸除溶剂得发酵提取物。
取少量步骤(4)得到的发酵提取物以适量的甲醇溶解，高速离心后取上清液进行TLC，HPLC-UV和HPLC-MS分析，经过分析发现，本发明比相同条件下不加表观遗传修饰剂的对照组产生更多的penicilones A-D，即通过在海洋真菌Penicillium sp.HK1-6的发酵培养基中添加化学表观遗传修饰剂，使penicilones A-D的产量得到了很大的提高。
在丁酸钠添加组中，添加终浓度为5mM时，代谢变化最为显著(图1)；结合azaphilone类化合物的UV吸收特征及该条件下的HPLC-UV指纹图谱(图2)，可知该浓度下penicilones A-D的产量也显著提高(3-5倍)。丁酸钠添加浓度较低(2.5mM)或较高(10mM)时，也有相似的代谢变化，但不如5mM时显著；而浓度过高(25mM，50mM)时，penicilones A-D的产量均降低，推测高浓度丁酸钠可能对真菌生长产生了抑制作用。
实施例2
(1)配制真菌种子液：首先将种子培养基倒入玻璃培养皿中，制成培养基平板，然后将真菌菌株Penicillium sp.(HK1-6)接种于培养基平板中，在28℃下摇床培养3天，得真菌种子液，备用。其中种子培养基的配方为每1000mL水中加入：土豆200g煮沸取汁，葡萄糖20g，海水素40g；摇床培养转速为180转/分钟；
(2)化学表观遗传修饰剂的配制：将5-Aza-c(DNA甲基化转移酶抑制剂)用蒸馏水配制一定浓度的母液，用0.22μm的水相滤膜过滤除菌，备用；
(3)分别将不同体积的步骤(2)配制的5-Aza-c母液加入4组发酵培养基中，使得4组发酵培养基中5-Aza-c的最终浓度分别达到0.5，1，10和50μM，将步骤(1)中配制的真菌种子液分别接入上述含有4种不同浓度的5-Aza-c的发酵培养基中，于25℃，静置培养30天，得发酵物；
(4)将步骤(3)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用乙酸乙酯提取3次，菌体用甲醇提取1次，合并提取液、蒸除溶剂得发酵提取物。
取少量步骤(4)得到的发酵提取物以适量的甲醇溶解，高速离心后取上清液进行TLC，HPLC-UV和HPLC-MS分析，经过分析发现，本发明比相同条件下不加表观遗传修饰剂的对照组产生更多的penicilones A-D，即通过在海洋真菌Penicillium sp.HK1-6的发酵培养基中添加化学表观遗传修饰剂，使penicilones A-D的产量得到了很大的提高。
5-Aza-c的添加对真菌中azaphilone类化合物的代谢也产生了较大的影响，特别是当添加浓度为1μM时(图3)，penicilones A-D的产量显著提高(3-5倍)。5-Aza-c的添加浓度过高时，该真菌产azaphilone类化合物的能力受到抑制。
实施例3
按照实施例1-2中记载的类似的方法，还可采用如下表所示的表观遗传修饰剂的添加方案。
实验结果表明，SAHA和5-Aza-dc的添加，均能增加penicilones A-D的产量，尤其是SAHA浓度为0.5和1μM以及5-Aza-dc为1和10μM时，penicilones A-D的产量显著提高，可增加4-6倍。
实施例4
(1)海洋真菌Penicillium sp.HK1-6菌种的培养
真菌Penicillium sp.(HK1-6)的菌种培养所用的培养基为固体PDA培养基(每1000mL水中加入：土豆200g煮沸取汁，葡萄糖15g，海水素30g，琼脂12g)；使用时倒入玻璃培养皿中，制成培养基平板。真菌菌株Penicillium sp.(HK1-6)接种于培养基平板中，在25℃下摇床培养5天。
(2)海洋真菌Penicillium sp.HK1-6的发酵
真菌Penicillium sp.HK1-6的发酵培养所用的发酵培养基为液体PDA培养基，每1000mL水中加入：土豆200g煮沸取汁，葡萄糖20g，海水素35g；使用时分装于锥形瓶中。真菌菌株接种于锥形瓶的培养基中，于15-20℃静置培养28天。
(3)发酵物中成分的初步分离
取步骤(2)所得的发酵物30L，将发酵液和菌体分离后，发酵液用乙酸乙酯萃取3～5次，萃取液减压浓缩得到发酵液浸膏；菌体用甲醇浸提3～5次，减压浓缩得到菌体浸膏；合并发酵液浸膏和菌体浸膏，先进行减压硅胶柱层析，所述减压硅胶柱层析采用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，洗脱剂中石油醚所占的体积百分比依次为100％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、10％、0％，每个梯度洗脱3-6个柱体积，并将其按照极性大小分成10个组分Fr.1～Fr.10(即100％石油醚洗脱为组分Fr.1，80％石油醚洗脱为组分Fr.2，依此类推，0％石油醚洗脱组分为Fr.10)。
(4)Penicilones A-D(即化合物1-4)的分离提取
将步骤(3)得到的组分Fr.4先经Sephadex LH-20凝胶柱层析，洗脱剂为CHCl3∶MeOH＝1∶1，再经ODS反相硅胶柱层析，洗脱剂为MeOH∶H2O＝85∶15，最后得到penicilone D即化合物4(135mg)；组分Fr.5先经正相硅胶柱层析，洗脱剂为乙酸乙酯∶石油醚＝1∶6至1∶3或者甲醇∶二氯甲烷＝1∶30至1∶15，再经高效液相色谱HPLC制备(所用色谱柱为AgilentC18，9.4×250mm，7μm，流速为2mL/min，流动相为MeOH∶H2O＝85∶15)，最后得到peniciloneB即化合物2(702mg)；组分Fr.8先经Sephadex LH-20凝胶柱层析，洗脱剂为CHCl3∶MeOH＝1∶1，再经ODS反相硅胶柱层析，洗脱剂MeOH∶H2O＝75∶25，最后经高效液相色谱HPLC制备(所用色谱柱为Agilent C18，9.4×250mm，7μm，流速为2mL/min，流动相为MeOH∶H2O＝85∶15)，分别得到penicilone A即化合物1(1.55g)和penicilone C即化合物3(121mg)。
Penicilone A(1)：HRESIMS m/z 497.2536(calcd for C29H37O7，497.2534)，519.2353(calcd for C29H36O7Na，519.2353)；Penicilone B(2)：HRESIMS m/z 479.2437(calcd for C29H35O6，479.2428)；Penicilone C(3)：HRESIMS m/z 531.2152(calcd forC29H36ClO7，531.2144)，553.1973(calcd for C29H35ClO7Na，553.1964)；Penicilone D(4)：HRESIMS m/z 513.2057(calcd for C29H34ClO6，513.2038)。Penicilones A-D的结构确证数据与中国专利申请号：CN201711417393.6中记载的一致。
实施例5Penicilones A-D的抗菌活性测试
按照文献方法(Pierce C.G.；Uppuluri P.；Teistan A.R.；Wormley Jr.F.L.；Mowat E.；Ramage G.；Lopez-ribot J.L.Nat.Protoc.2008，3，1494-1500)，测试6株革兰氏阳性菌：耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌2株：S.aureus ATCC43300和S.aureus ATCC33591，敏感型金黄色葡萄球菌2株：S.aureus ATCC25923和S.aureus ATCC29213，耐万古霉素的粪肠球菌1株：E.faecalis ATCC51299，敏感型屎肠球菌1株：E.faecium ATCC35667；1株革兰氏阴性菌：大肠杆菌E.coli ATCC25922。化合物1-4对大肠杆菌E.coli ATCC25922没有明显抗菌效果，但是对革兰氏阳性菌，尤其是对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌：S.aureusATCC43300和S.aureus ATCC33591以及万古霉素耐药的粪肠球菌：E.faecalis ATCC51299均显示出很强的抗菌活性，其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)均小于或等于12.5μg/mL(表3中仅列出化合物2-4的详细抗菌活性数据)，尤其是化合物2对E.faecalis ATCC51299的MIC比阳性药万古霉素强一倍，显示出了将其开发作为抗耐药菌药物、药物先导化合物以及候选药物的良好前景。
表3本发明的化合物2-4的抗菌活性数据
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考文献，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。本发明中所使用的中英文简称、代号等均可在参考文献或现有技术的技术手册、教科书、工具书中找到。此外应理解，在阅读了本发明的上述内容之后，本领域的技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
Claims (9)
1.一种增加海洋真菌Penicillium sp.HK1-6发酵提取物中化合物penicilones A-D产量的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)配制真菌种子液：将真菌Penicillium sp.HK1-6菌株接入种子培养基，于20-28℃，摇床培养3～5天，得真菌种子液；
(2)化学表观遗传修饰剂的配制：将化学表观遗传修饰剂用蒸馏水配制成一定浓度的溶液，经微孔滤膜过滤除菌后备用；
(3)将步骤(2)配制的表观遗传修饰剂加入发酵培养基中，使得发酵培养基中表观遗传修饰剂的最终浓度为0.1μM-50mM，将步骤(1)中配制的真菌种子液接入发酵培养基，于15-25℃，静置培养25-35天，得发酵物；
(4)将步骤(3)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用乙酸乙酯提取，菌体用甲醇提取，合并提取液、蒸除溶剂得发酵提取物；
所述化合物penicilones A-D具有如下结构：
2.权利要求1所述的方法，其特征在于所述种子培养基和发酵培养基各自独立地选自液体或固体的GPY培养基、或液体或固体的PDA培养基。
3.权利要求2所述的方法，其特征在于培养基的配方如下：
固体PDA培养基：每1000mL水中，土豆200g(煮沸取汁)，葡萄糖15-20g，海水素(或粗海盐)20-40g，琼脂12-20g；液体PDA培养基：每1000mL水中，土豆200g(煮沸取汁)，葡萄糖15-20g，海水素(或粗海盐)20-40g；固体GPY培养基：每1000mL水中，蛋白胨3-5g，酵母膏1-2g，葡萄糖15-20g，海水素(或粗海盐)20-40g，琼脂12-20g；液体GPY培养基：每1000mL水中，蛋白胨3-5g，酵母膏1-2g，葡萄糖15-20g，海水素(或粗海盐)20-40g。
4.权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于所述的化学表观遗传修饰剂选自组蛋白去乙酰化酶抑制剂或DNA甲基化转移酶抑制剂。
5.权利要求4所述的方法，其特征在于组蛋白去乙酰化酶抑制剂优选丁酸钠、辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)、伏立诺他(Vorinostat)、烟酰胺、丙戊酸钠、4-苯基丁酸、4-苯基丁酸钠、曲古抑菌素A(TSA)；DNA甲基化转移酶抑制剂优选5-氮杂胞苷(5-Aza-c)、5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dc)、RG-108、西奈芬净、地西他滨。
6.权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中所述摇床培养的转速为120-180转/分钟。
7.权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中所述微孔滤膜优选0.22μm的微孔滤膜。
8.权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于所述步骤(3)中表观遗传修饰剂的最终浓度为优选0.5μM、1μM、10μM、5mM。
9.权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于所述步骤(4)中乙酸乙酯和甲醇提取次数优选2-4次。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2017101058802 | 2017-02-27 | ||
| CN201710105880 | 2017-02-27 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108374028A true CN108374028A (zh) | 2018-08-07 |
| CN108374028B CN108374028B (zh) | 2021-05-11 |
Family
ID=63017973
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810148388.8A Active CN108374028B (zh) | 2017-02-27 | 2018-02-02 | 一种利用化学表观遗传修饰提高海洋真菌中azaphilone类化合物产量的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108374028B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109182409A (zh) * | 2018-09-04 | 2019-01-11 | 浙江海洋大学 | 一种提高A.terreus次级代谢产物中单体化合物产量的方法 |
| CN114774480A (zh) * | 2022-03-28 | 2022-07-22 | 江西师范大学 | 经表观遗传学改造利用内生真菌生产6-甲基水杨酸的方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002003812A2 (en) * | 2000-07-11 | 2002-01-17 | Bolla Robert I | Animal feed containing polypeptides |
| CN103952368A (zh) * | 2014-03-28 | 2014-07-30 | 安徽农业大学 | 一种促进猪体细胞克隆胚胎体外发育的培养液 |
| CN103992955A (zh) * | 2014-05-17 | 2014-08-20 | 青岛科技大学 | 一株黑曲霉ny-1及提高其杀虫活性的改进技术和应用 |
| WO2017031399A1 (en) * | 2015-08-20 | 2017-02-23 | Genomatica, Inc. | Compositions and multiplexed systems for coupled cell-free transcription-translation and protein synthesis and methods for using them |
-
2018
- 2018-02-02 CN CN201810148388.8A patent/CN108374028B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002003812A2 (en) * | 2000-07-11 | 2002-01-17 | Bolla Robert I | Animal feed containing polypeptides |
| CN103952368A (zh) * | 2014-03-28 | 2014-07-30 | 安徽农业大学 | 一种促进猪体细胞克隆胚胎体外发育的培养液 |
| CN103992955A (zh) * | 2014-05-17 | 2014-08-20 | 青岛科技大学 | 一株黑曲霉ny-1及提高其杀虫活性的改进技术和应用 |
| WO2017031399A1 (en) * | 2015-08-20 | 2017-02-23 | Genomatica, Inc. | Compositions and multiplexed systems for coupled cell-free transcription-translation and protein synthesis and methods for using them |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| HAO-YU TANG等: "Miniolins A–C, novel isomeric furanones induced by epigenetic manipulation of Penicillium minioluteum", 《RSC ADVANCES》 * |
| MIN CHEN等: "Penicilones A–D, Anti-MRSA Azaphilones from the Marine-Derived Fungus Penicillium janthinellum HK1-6", 《JOURNAL OF NATURAL PRODUCTS》 * |
| 周锐等: "丝状真菌次级代谢产物生物合成的表观遗传调控", 《生物工程学报》 * |
| 张伟等: "化学表观遗传修饰方法在真菌次级代谢产物研究中的应用", 《中国海洋药物》 * |
| 沈南星: "南海红树根际土壤真菌的分离、筛选与抗菌活性物质研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109182409A (zh) * | 2018-09-04 | 2019-01-11 | 浙江海洋大学 | 一种提高A.terreus次级代谢产物中单体化合物产量的方法 |
| CN114774480A (zh) * | 2022-03-28 | 2022-07-22 | 江西师范大学 | 经表观遗传学改造利用内生真菌生产6-甲基水杨酸的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108374028B (zh) | 2021-05-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103497980A (zh) | 尼日利亚菌素的制备方法 | |
| CN107501086B (zh) | 一种来自解淀粉芽孢杆菌sqr9产生的十六碳链脂肪酸类拮抗物质及其应用 | |
| CN105130963A (zh) | 一种新型群体感应抑制剂的分离提取、结构鉴定及其应用 | |
| CN108374028A (zh) | 一种利用化学表观遗传修饰提高海洋真菌中azaphilone类化合物产量的方法 | |
| CN108300677A (zh) | 一株白色链霉菌及其在制备微生物源防腐剂中的应用 | |
| CN111072670B (zh) | 一种二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途 | |
| Zhang et al. | Unusual acylation of chloramphenicol in Lysobacter enzymogenes, a biocontrol agent with intrinsic resistance to multiple antibiotics | |
| US20230313247A1 (en) | Kind of antimycin compound and methods of making and using it | |
| CN115109023B (zh) | 大环内酯类化合物fwyz52-a、其发酵菌株、发酵方法及应用 | |
| CN110357788B (zh) | 一种聚酮类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN115974672B (zh) | 一种新的二酮化合物及其在抗菌药物中的应用 | |
| CN108101778B (zh) | 一种来自解淀粉芽孢杆菌sqr9产生的十四碳链脂肪酸类拮抗物质及其应用 | |
| CN114907367B (zh) | 大环内酯类化合物fw-z、其发酵菌株、发酵方法及应用 | |
| CN108949610B (zh) | 一种链霉菌和以链霉菌产生的angucycline类化合物及其制备与应用 | |
| CN109762046B (zh) | 环肽类抗生素及其制备方法和在制备抗结核分枝杆菌药物中的应用 | |
| CN107312014B (zh) | 一种格菲罗霉素类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN107973803B (zh) | 一种七元内酯并呋喃衍生物及其制备方法和应用 | |
| CN105017267A (zh) | 一种抗生素及其制备和应用 | |
| CN105886421B (zh) | 一株拟无枝菌酸菌及利用该菌制备特戊依罗霉素的方法 | |
| CN115504990B (zh) | 一种含糖-螺环-大环内酯类化合物fw-5-39及制备方法与应用 | |
| CN116874417B (zh) | 一种吡啶类生物碱及其在抗肿瘤药物制备中的应用 | |
| CN110343639B (zh) | 一株产15(s)-o-乙基雷帕霉素的链霉菌 | |
| CN111285828B (zh) | 化合物proximicin及其制备方法和应用 | |
| CN108285453A (zh) | 一种抗菌化合物及其纯化制备方法和应用 | |
| CN108660169A (zh) | 一种发酵制备棘孢菌素类抗生素的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |