CN108368116B - Janus激酶抑制剂、其组合物及用途 - Google Patents

Janus激酶抑制剂、其组合物及用途 Download PDF

Info

Publication number
CN108368116B
CN108368116B CN201680072664.6A CN201680072664A CN108368116B CN 108368116 B CN108368116 B CN 108368116B CN 201680072664 A CN201680072664 A CN 201680072664A CN 108368116 B CN108368116 B CN 108368116B
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
compound
group
phenyl
salt
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201680072664.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108368116A (zh
Inventor
Y-X·成
P·吉伯恩斯
T·凯勒
W·李
R·蒙顿卡
P·源
M·E·扎克
L·张
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of CN108368116A publication Critical patent/CN108368116A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108368116B publication Critical patent/CN108368116B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Abstract

本发明公开式(00A)化合物及其盐，其中R1、R2、R3、R4和n如本文所定义，用作一或多个Janus激酶的抑制剂。本发明还公开药用组合物，其包含式(00A)化合物和可药用的载体、辅助剂或赋形剂，本发明还公开治疗患者中对Janus激酶活性的抑制有响应的疾病或病症或减轻其严重性的方法。

Description

Janus激酶抑制剂、其组合物及用途
相关申请的交互参考
本申请要求2015年11月23日提交的国际申请号PCT/CN2015/095310 和2015年11月24日提交的国际申请号PCT/CN/2015/095423的权益，所述申请各自以其全部内容引入本申请中作为参考。
技术领域
本发明涉及式(00A)的化合物，它们是Janus激酶如JAK1的抑制剂，还涉及包含这些化合物的组合物以及使用方法，包括但不限于诊断或治疗患有对JAK激酶的抑制有响应的病症。
背景技术
细胞因子通路介导广泛的生物学功能，包括炎症和免疫的许多方面。 Janus激酶(JAK)(包括JAK1、JAK2、JAK3和TYK2)是细胞质蛋白激酶，其与I型和II型细胞因子受体相关并调节细胞因子信号转导。与同源受体的细胞因子结合触发受体相关JAK的激活，这导致信号转导和转录激活子 (STAT)蛋白的JAK介导的酪氨酸磷酸化，并最终导致特定基因组的转录激活(Schindler等，2007，J.Biol.Chem.282:20059－63)。JAK1、JAK2 和TYK2具有广泛的基因表达模式，而JAK3的表达限于白细胞。细胞因子受体通常作为异二聚体发挥功能，因此，多于一种类型的JAK激酶通常与细胞因子受体复合物相关。与不同细胞因子受体复合物相关的特定JAK 已经在多种情况下通过遗传学研究确定，并由其它实验证据证实。JAK酶的抑制的典型的治疗益处探讨于例如国际申请号WO 2013/014567。
最初在新型激酶筛选中鉴定出JAK1(Wilks A.F.,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.86:1603－1607)。遗传和生物化学研究显示JAK1与I型干扰素(例如IFNα)、II型干扰素(例如IFNγ)和IL-2以及IL-6细胞因子受体复合物在功能和物理上相关(Kisseleva等,2002,Gene 285:1－24；Levy 等,2005,Nat.Rev.mol.Cell Biol.3:651－662；O’Shea等,2002,Cell, 109(suppl.):S121－S131)。JAK1敲除小鼠由于LIF受体信号缺陷而死于围产期(Kisseleva等,2002,Gene 285:1－24；O’Shea等,2002,Cell, 109(suppl.):S121－S131)。源于JAK1敲除小鼠的组织的表征证实了该激酶在IFN、IL-10、IL-2/IL-4和IL-6通路中的关键作用。靶向IL-6通路的人源化单克隆抗体(妥珠单抗(Tocilizumab))被欧洲委员会批准用于治疗中度至重度类风湿性关节炎(Scheinecker等,2009,Nat.Rev.Drug Discov. 8:273－274)。
CD4T细胞通过在肺内产生TH2细胞因子(包括IL-4、IL-9和IL-13) 在哮喘发病机理中起重要作用(Cohn等,2004,Annu.Rev.Immunol. 22:789-815)。L-4和IL-13诱导粘液产生增加、嗜酸性粒细胞向肺的募集和IgE产生增加(Kasaian等,2008,Biochem.Pharmacol.76(2):147－155)。 IL-9导致肥大细胞活化，这加剧了哮喘症状(Kearley等,2011,Am.J.Resp. Crit.Care Med.,183(7):865－875)。当分别与共同γ链或IL-13Rα1链结合时，IL-4Rα链活化JAK1并与IL-4或IL-13结合(Pernis等,2002,J.Clin.Invest.109(10):1279－1283)。共同γ链也可以与IL-9Rα结合以结合IL-9， IL-9Rα也能够激活JAK1(Demoulin等,1996，mol.Cell Biol.16(9):4710－ 4716)。尽管共同γ链能够激活JAK3，但已经显示JAK1优于JAK3，不管JAK3是否具有活性，JAK1的抑制足以通过共同γ链而使得信号传导失活(Haan等,2011,Chem.Biol.18(3):314－323)。通过阻断JAK/STAT信号传导通路抑制IL-4、IL-13和IL-9信号传导可以缓解临床前肺部炎症模型中的哮喘症状(Mathew等,2001,J.Exp.Med.193(9):1087－1096； Kudlacz等,2008,Eur.J.Pharmacol.582(1-3):154－161)。
生物化学和遗传学研究揭示了JAK2与单链(例如EPO)、IL-3和干扰素γ细胞因子受体家族之间的关联(Kisseleva等,2002,Gene 285:1－24； Levy等,2005,Nat.Rev.mol.Cell Biol.3:651－662；O’Shea等,2002,Cell, 109(suppl.):S121－S131)。与此一致，JAK2敲除小鼠死于贫血(O’Shea 等,2002,Cell,109(suppl.):S121－S131)。JAK2中的激酶活化突变(例如 JAK2V617F)与人类中的骨髓增殖性疾病相关。
JAK3仅与γ-共同细胞因子受体链相关联，γ-共同细胞因子受体链存在于IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21细胞因子受体复合物中。JAK3 对于淋巴细胞发育和增殖是非常关键的，JAK3中的突变导致严重的综合性免疫缺陷(SCID)(O’Shea等,2002,Cell,109(suppl.):S121－S131)。基于其在调节淋巴细胞中的作用，JAK3和JAK3介导的通路已经被靶向用于免疫抑制适应症(例如移植排斥和类风湿性关节炎)(Baslund等,2005,Arthritis&Rheumatism 52:2686－2692；Changelian等,2003,Science 302: 875－878)。
TYK2与I型干扰素(例如IFNα)、IL-6、IL-10、IL-12和IL-23细胞因子受体复合物有关((Kisseleva等,2002,Gene 285:1－24；Watford,W.T. &O’Shea,J.J.,2006,Immunity25:695－697)。与此一致，源于TYK2缺陷型人类的原代细胞在I型干扰素、IL-6、IL-10、IL-12和IL-23信号传导中有缺陷。靶向IL-12和IL-23细胞因子的共享p40亚基的完全人单克隆抗体(乌司奴单抗(Ustekinumab))最近被欧洲委员会批准用于治疗中度至重度斑块型银屑病(Krueger等,2007,N.Engl.J.Med.356:580－92；Reich等, 2009,Nat.Rev.DrugDiscov.8:355－356)。另外，靶向IL-12和IL-23通路的抗体经过了用于治疗克罗恩氏病的临床试验(Mannon等,2004,N.Engl. J.Med.351:2069－79)。
国际专利申请公开号WO2011/003065讨论了据报道可用作一种或多种Janus激酶抑制剂的某些吡唑并嘧啶化合物。其中提供了显示抑制 JAK1、JAK2、JAK3和TYK2激酶的某些特定化合物的数据。
目前仍然需要其它的作为Janus激酶抑制剂的化合物。例如，需要具有有用效力的化合物，其作为一或多种Janus激酶(例如JAK1)的抑制剂，同时具有实现有用治疗益处所必需的其它药理学性质。例如，需要对一种 Janus激酶的选择性超过对一般常见其它激酶选择性的有效化合物(例如对 JAK1的选择性超过其它激酶，如富亮氨酸重复激酶2(LRRK2))。还需要对一种Janus激酶的选择性超过对其它Janus激酶选择性的有效化合物(例如，对JAK1的选择性超过对其它Janus激酶的选择性)。对JAK1具有选择性的激酶可以在对抑制JAK1有响应的疾病中提供治疗益处并且副作用较少。此外，目前需要有效的JAK1抑制剂，其具有制剂和吸入给药所必需的其它性质(例如，熔点、pK、溶解度等)。此类化合物可以特别用于治疗疾病，例如哮喘。
本领域需要其它或替代治疗由JAK激酶介导的疾病(例如上述那些疾病)的方法。
发明内容
发明概述
本文提供了能够抑制JAK1激酶的吡唑并嘧啶类。
因此，一个实施方案提供了式(00A)化合物或其盐：
Figure BDA0001692491180000041
其中：
R1为H、C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、–(C0-C3烷基)CN、–(C0-C3烷基)ORa、–(C0-C3烷基)Ra、–(C0-C3烷基)SRa、–(C0-C3烷基)NRaRb、–(C0-C3烷基)OCF3、–(C0-C3烷基)CF3、–(C0-C3烷基)NO2、–(C0-C3烷基)C(O)Ra、–(C0-C3烷基)C(O)ORa、–(C0-C3烷基)C(O)NRaRb、–(C0-C3烷基)NRaC(O)Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1-2Ra、–(C0-C3烷基)NRaS(O)1-2Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1- 2NRaRb、–(C0-C3烷基)(5 －6元杂芳基)或–(C0-C3烷基)苯基，其中R1任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、C1-C3烷基、氧代、–CF3、–(C0-C3烷基)ORc和–(C0-C3烷基)NRcRd；
Ra独立为氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、3－10元杂环基、5－6元杂芳基、–C(O)Rc、–C(O)ORc、–C(O)NRcRd、–NRcC(O)Rd、–S(O)1-2Rc、–NRcS(O)1-2Rd或-S(O)1-2NRcRd，其中Ra的任何C3-C6环烷基、3－10元杂环基和5－6元杂芳基任选被一或多个基团Re所取代；
Rb独立为氢或C1-C3烷基，其中所述烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素和氧代；或者
Rc和Rd独立选自下列基团：氢、3－6元杂环基、C3-C6环烷基和C1-C3烷基，其中Rc和Rd的任何3－6元杂环基、C3-C6环烷基和C1-C3烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素和氧代；或Rc和Rd与它们所连接的原子一起形成3－6元杂环基，任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、-CF3和C1-C3烷基；
每个Re独立选自下列基团：氧代、ORf、NRfRg、卤素、3－10元杂环基、C3-C6环烷基和C1-C6烷基，其中Re的任何C3-C6环烷基和C1-C6烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：ORf、NRfRg、卤素、3 －10元杂环基、氧代和氰基，其中Re的任何3－10元杂环基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、氰基、–CF3、NRhRk、3 －6元杂环基和C1-C3烷基，该烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、ORf和NRhRk；
Rf和Rg各自独立选自下列基团：氢、C1-C6烷基、3－6元杂环基和 C3-C6环烷基，其中Rf和Rg的任何C1-C6烷基、3－6元杂环基和C3-C6环烷基任选被一或多个Rm取代；
每个Rm独立选自下列基团：卤素、氰基、氧代、C3-C6环烷基、3－6 元杂环基、羟基和NRhRk，其中Rm的任何C3-C6环烷基和3－6元杂环基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、氰基和C1-C3烷基；
Rh和Rk各自独立选自下列基团：氢和C1-C6烷基，其任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氰基、3－6元杂环基和氧代；或 Rh和Rk与它们所连接的原子一起形成3－6元杂环基，该杂环基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氰基、氧代、–CF3和C1-C3烷基，该烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素和氧代；
R2为C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、3－6 元杂环基、(C3-C6环烷基)C1-C6烷基、(3－6元杂环基)C1-C6烷基、-C(O)(C3-C6环烷基)或–C(O)(3－6元杂环基)，其中R2任选被一或多个卤素所取代；
n为0、1或2；
R3为H或NH2；
R4为H或CH3；并且
R5为H或NH2。
还提供了药物组合物，其包含式(00A)化合物或其可药用的盐以及可药用的载体、稀释剂或赋形剂。
还提供了式(00A)化合物或其可药用的盐在治疗中的用途，例如用于治疗炎性疾病(例如哮喘)。还提供了式(00A)化合物或其可药用的盐在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。还提供了预防、治疗患者中对Janus激酶活性的抑制有响应的疾病或病症或者减轻其严重性的方法，所述方法包括给予患者治疗有效量的式(00A)化合物或其可药用的盐。
某些式(00A)化合物具有作为一种或多种Janus激酶(例如JAK1)的抑制剂的有益效能。某些化合物还a)具有对于一种Janus激酶的选择性优于对其它激酶的选择性，b)对JAK1的选择性优于对其它Janus激酶的选择性，和/或c)具有制剂和吸入给药所必需的其它性质(例如熔点、pK、溶解度等)。某些式(00A)化合物对于治疗疾病例如哮喘可能特别有用。
附图说明
通过参考以下详细描述并结合附图，前述方面和许多其他优点更加容易理解，其中：
图1说明了本发明的某些化合物(右侧的点)和相应的其中基团-S(O)n-R2被Cl取代的化合物(左侧的点)的配对分析。
发明详述
定义
“卤素”或“卤代”是指F、Cl、Br或I。此外，术语例如“卤代烷基”包括单卤代烷基和多卤代烷基。
术语“烷基”是指饱和的直链或支链单价烃基，其中烷基可以任选被取代。在一个实例中，烷基为为1－8个碳原子(C1-C18)。在另一个实例中，烷基为C0-C6、C0-C5、C0-C3、C1-C12、C1-C10、C1-C8、C1-C6、C1-C5、C1-C4或C1-C3。C0烷基是指键。烷基的实例包括甲基(Me、-CH3)、乙基(Et、 -CH2CH3)、1-丙基(n-Pr、正-丙基、-CH2CH2CH3)、2-丙基(i-Pr、异-丙基、 -CH(CH3)2)、1-丁基(n-Bu、正-丁基、-CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基 (i-Bu、异-丁基、-CH2CH(CH3)2)、2-丁基(s-Bu、叔-丁基、-CH(CH3)CH2CH3)、 2-甲基-2-丙基(t-Bu、叔-丁基、-C(CH3)3)、1-戊基(正-戊基、 -CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基 (-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基 (-CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基 (-CH2CH(CH3)CH2CH3)、1-己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基 (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基 (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、 3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基 (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)、3,3- 二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3、1-庚基和1-辛基。在某些实施方案中，“任选取代的烷基”中的取代基包括下列基团的1－4个实例：F、Cl、Br、 I、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基(piperizinyl)和嘧啶基，其中其烷基、苯基和杂环部分任选被选自该相同列表的1－4个取代基取代。
术语“烯基”是指具有至少一个不饱和位点(即碳－碳双键)的直链或支链一价烃基，其中该烯基可以任选被取代，包括具有“顺式”和“反式”取向的基团，或者“E”和“Z”取向。在一个实例中，烯基为2－18个碳原子(C2 -C18)。在其它实例中，烯基为C2-C12、C2-C10、C2-C8、C2-C6或C2-C3。实例包括但不限于乙烯基或乙烯基(-CH＝CH2)、丙-1-烯基(-CH＝CHCH3)、丙 -2-烯基(-CH2CH＝CH2)、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3- 烯基、丁-1,3-二烯基、2-甲基丁-1,3-二烯、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基和己-1,3-二烯基。在某些实施方案中，“任选取代的烯基”中的取代基包括下列基团的1－4个：F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH2、 NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中其烷基、苯基和杂环部分可以任选被选自该相同列表的1－4个取代基取代。
术语“炔基”是指具有至少一个不饱和位点(即碳－碳三键)的直链或支链一价烃基，其中炔基可以任选被取代。在一个实例中，炔基为2－18个碳原子(C2-C18)。在其它实例中，炔基为C2-C12、C2-C10、C2-C8、C2-C6或 C2-C3。实例包括但不限于乙炔基(-C≡CH)、丙-1-炔基(-C≡CCH3)、丙-2- 炔基(炔丙基、-CH2C≡CH)、丁-1-炔基、丁-2-炔基和丁-3-炔基。在某些实施方案中，“任选取代的炔基”中的取代基包括下列基团的1－4个：F、Cl、 Br、I、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、 COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中其烷基、苯基和杂环部分可以任选被选自该相同列表的1－4个取代基取代。
“亚烷基”是指通过从母体烷烃的相同或两个不同碳原子上除去两个氢原子而衍生的具有两个单价基团中心的饱和的支链或直链烃基。在一个实例中，二价亚烷基为1至18个碳原子(C1-C18)。在其它实例中，二价亚烷基为C0-C6、C0-C5、C0-C3、C1-C12、C1-C10、C1-C8、C1-C6、C1-C5、C1-C4或C1-C3。基团C0亚烷基是指键。典型的亚烷基包括亚甲基(-CH2-)、1,1- 乙基(-CH(CH3)-)、(1,2-乙基(-CH2CH2-)、1,1-丙基(-CH(CH2CH3)-)、2,2- 丙基(-C(CH3)2-)、1,2-丙基(-CH(CH3)CH2-)、1,3-丙基(-CH2CH2CH2-)、1,1- 二甲基乙-1,2-基(-C(CH3)2CH2-)、1,4-丁基(-CH2CH2CH2CH2-)等。
术语“杂烷基”是指直链或支链一价烃基，其由所述数目的碳原子组成，或者如果没有说明，则至多18个碳原子和1－5个选自的O、N、Si和S 的杂原子，其中氮和硫原子可以任选被氧化，氮杂原子可以任选被季铵化。在某些实施方案中，杂原子选自O、N和S，其中氮和硫原子可以任选被氧化，氮杂原子可以任选被季铵化。杂原子可以位于杂烷基的任何内部位置，包括烷基与分子的其余部分的连接位置(例如，-O-CH2-CH3)。实例包括-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N(CH3)-CH3、 -CH2-S-CH2-CH3、-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-Si(CH3)3和 -CH2-CH＝N-OCH3。至多两个杂原子可以是连续的，例如，-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3)3。杂烷基可以任选被取代。在某些实施方案中，“任选取代的杂烷基”中的取代基包括下列基团的1－4个：F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、 SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中其烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如选自该相同列表的1－4个取代基取代。
“氨基”是指任选被取代的伯(即-NH2)、仲(即-NRH)、叔(即-NRR)和季 (即-N(+)RRR)胺，其中每个R是相同或不同的，可以选自烷基、环烷基、芳基和杂环基，其中烷基、环烷基、芳基和杂环基如本文所定义。具体的仲胺和叔胺是烷基胺、二烷基胺、芳基胺、二芳基胺、芳烷基胺和二芳烷基胺，其中烷基和芳基部分可以任选被取代。具体的仲胺和叔胺为甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、苯胺、苄胺、二甲胺、二乙胺、二丙胺和二异丙胺。在某些实施方案中，季胺的R基团各自独立为任选取代的烷基。
“芳基”是指碳环芳族基团，无论是否与一个或多个基团稠合，其具有指定的碳原子数目，或者如果没有指定数目，至多14个碳原子。一个实例包括具有6－14个碳原子的芳基。另一个实例包括具有6－10个碳原子的芳基。芳基的实例包括苯基、萘基、联苯基、菲基、苯并萘基(naphthacenyl)、 1,2,3,4-四氢萘基、1H-茚基、2,3-二氢-1H-茚基等(参见，例如，Lang’s Handbook of Chemistry(朗氏化学手册)(Dean,J.A.等)第13版，表7-2[1985])。特定的芳基为苯基。取代的苯基或取代的芳基是指被1、2、3、4 或5个取代基(例如1－2、1－3或1－4个取代基)取代的苯基或芳基，例如选自本文指定的基团(参见“任选取代的”定义)，例如F、Cl、Br、I、OH、 SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、 SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中其烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如选自该相同列表的1－4个取代基取代。术语“取代的苯基”的实例包括单-或二(卤代)苯基，例如2-氯代苯基、2-溴苯基、4-氯代苯基、 2,6-二氯代苯基、2,5-二氯代苯基、3,4-二氯代苯基、3-氯代苯基、3-溴苯基、 4-溴苯基、3,4-二溴苯基、3-氯代-4-氟苯基、2-氟苯基、2,4-二氟苯基等；单-或二(羟基)苯基，例如4-羟基苯基、3-羟基苯基、2,4-二羟基苯基，其被保护的羟基衍生物等；硝基苯基，例如3-或4-硝基苯基；氰基苯基，例如 4-氰基苯基；单-或二(烷基)苯基，例如4-甲基苯基、2,4-二甲基苯基、2- 甲基苯基、4-(异丙基)苯基、4-乙基苯基、3-(n-丙基)苯基等；单或二(烷氧基)苯基，例如3,4-二甲氧基苯基、3-甲氧基-4-苄基氧基苯基、3-乙氧基苯基、4-(异丙氧基)苯基、4-(叔-丁氧基)苯基、3-乙氧基-4-甲氧基苯基等；3- 或4-三氟甲基苯基；单-或二羧基苯基或(被保护的羧基)苯基，如4-羧基苯基、单-或二(羟基甲基)苯基或(被保护的羟基甲基)苯基，例如3-(被保护的羟基甲基)苯基或3,4-二(羟基甲基)苯基；单-或二(氨基甲基)苯基或(被保护的氨基甲基)苯基，例如2-(氨基甲基)苯基或2,4-(被保护的氨基甲基)苯基；或单-或二(N-(甲基磺酰基氨基))苯基，例如3-(N-甲基磺酰基氨基))苯基。同样，术语“取代的苯基”表示其中取代基是不同的取代的苯基，例如 3-甲基-4-羟基苯基、3-氯代-4-羟基苯基、2-甲氧基-4-溴苯基、4-乙基-2-羟基苯基、3-羟基-4-硝基苯基、2-羟基-4-氯代苯基、2-氯代-5-二氟甲氧基等；还表示其中取代基是不同的三取代的苯基，例如3-甲氧基-4-苄基氧基-6- 甲基磺酰基氨基、3-甲氧基-4-苄基氧基-6-苯基磺酰基氨基；还表示其中取代基是不同的四取代的苯基，例如3-甲氧基-4-苄基氧基-5-甲基-6-苯基磺酰基氨基。在某些实施方案中，芳基(例如苯基)的取代基包含酰胺。例如，芳基(例如苯基)取代基可以是-(CH2)0-4CONR'R”，其中R'和R”各自独立表示包括下列的基团：例如，氢；未取代的C1-C6烷基；C1-C6烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C1-C6杂烷基；C1-C6杂烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C6-C10芳基；C6-C10芳基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基或NR'R”；未取代的3－11元杂环基(例如含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5 －6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；和3－11元杂环基(例如含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；或R'和R”可以与氮原子结合形成3-、4-、5-、 6-或7-元环，其中一个环原子任选被N、O或S代替，其中所述环任选被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”。
“环烷基”是指非芳族、饱和或部分不饱和的烃环基团，其中环烷基基团可以任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。在一个实例中，环烷基具有3－12个碳原子(C3-C12)。在其它实例中，环烷基为C3-C8、C3-C10或C5-C10。在其它实例中，作为单环的环烷基为C3-C8、C3-C6或C5-C6。在另一个实例中，作为双环的环烷基为C7-C12。在另一个实例中，作为螺环系统的环烷基为C5-C12。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、全氘代环己基、1-环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基和环十二烷基。具有7至12个环原子的双环环烷基的示例性排列包括但不限于[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6] 环系。典型的桥接双环环烷基包括但不限于双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2] 辛烷和双环[3.2.2]壬烷。螺环烷基的实例包括螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺 [2.4]庚烷、螺[2.5]辛烷和螺[4.5]癸烷。在某些实施方案中，“任选取代的环烷基”中的取代基包括下列基团的1－4个：F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、 NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中其烷基、芳基和杂环部分可以任选被例如选自该相同列表的1－4个取代基取代。在某些实施方案中，环烷基的取代基包含酰胺。例如，环烷基取代基可以是-(CH2)0-4CONR'R”，其中 R'和R”各自独立表示下列基团：包括，例如，氢；未取代的C1-C6烷基； C1-C6烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C1-C6杂烷基；C1-C6杂烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C6-C10芳基；C6-C10芳基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基或NR'R”；未取代的3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、 N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；和3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N 和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的 4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；或R'和R”可以与氮原子结合形成3-、4-、5-、6-或7-元环，其中一个环原子任选被N、O或S代替，其中所述环任选被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”。
除非另有说明，术语“本发明的化合物”和“本发明化合物”等包括式(00A)、(00B)、(00C)、(00D)、(00E)、(00F)和(00G)化合物，本文中实例的化合物包括其立体异构体(包括阻转异构体)、几何异构体、互变异构体、溶剂化物、代谢物、同位素、盐(例如可药用的盐)和前药。在某些实施方案中，溶剂化物、代谢物、同位素或前药或其任意组合均被排除。
“胍”或“胍基”是指基团-NH-C(NH)-NHR，其中R为氢、烷基、环烷基、芳基或杂环基，其中烷基、环烷基、芳基和杂环基如本文所定义。具体的胍为基团-NH-C(NH)-NH2。
“杂环基团”、“杂环的”、“杂环”、“杂环基”可以互换使用，是指具有 3－20个环原子(例如3－10个环原子)的任何单环、双环、三环或螺环的饱和或不饱和的芳族(杂芳基)或非芳族(例如杂环烷基)环系，其中环原子为碳并且环或环系中至少一个原子选自氮、硫或氧。如果环系的任何环原子为杂原子，则该系统为杂环，无论该环系与分子其余部分的连接点如何。在一个实例中，杂环基包括3－11个环原子(“元”)，包括单环、双环、三环和螺环系统，其中环原子为碳，其中环或环系中至少一个原子为选自氮、硫或氧的杂原子。在一个实例中，杂环基包括1至4个杂原子。在一个实例中，杂环基包括1－3个杂原子。在另一个实例中，杂环基包括具有1－ 2、1－3或1－4个选自氮、硫或氧的杂原子的3-至7-元单环。在另一个实例中，杂环基包括具有1－2、1－3或1－4个选自氮、硫或氧的杂原子的 4-至6元单环。在另一个实例中，杂环基包括3元单环。在另一个实例中，杂环基包括4元单环。在另一个实例中，杂环基包括5－6元单环，例如5 －6元杂芳基。在另一个实例中，杂环基包括3－11元杂环烷基，例如4 －11元杂环烷基。在某些实施方案中，杂环烷基包含至少一个氮。在一个例子中，杂环基包括0至3个双键。任何氮或硫杂原子可以任选地被氧化(例如NO、SO、SO2)。任何氮杂原子可以任选被季铵化(例如，[NR4]+Cl-、 [NR4]+OH-)。典型的杂环例如为环氧乙烷基、氮杂环丙烷基、硫杂环丙烷基(thiiranyl)、氮杂环丁烷基、环氧丁烷基、硫杂环丁烷基、1,2-二硫杂环丁烷基、1,3-二硫杂环丁烷基、吡咯烷基、二氢-1H-吡咯基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、二氢噻吩基、四氢噻吩基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代硫代吗啉基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、六氢噻喃基、六氢嘧啶基、
Figure BDA0001692491180000131
嗪烷基、噻嗪烷基、噻嗯烷基(thioxanyl)、高哌嗪基、高哌啶基、氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基、氧氮杂
Figure BDA0001692491180000132
基、氧氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、1,4-二氮杂环庚烷基、二氮杂
Figure BDA0001692491180000133
基、硫氮杂
Figure BDA0001692491180000134
基、硫氮杂环庚烷基、四氢噻喃基、噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、1,1-二氧代异噻唑烷二酮基、噁唑烷酮基、咪唑烷酮基、4,5,6,7-四氢[2H]吲唑基、四氢苯并咪唑基、4,5,6,7-四氢苯并[d]咪唑基、 1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶基、噻嗪基、噁嗪基、噻二嗪基、噁二嗪基、二噻嗪基、二噁嗪基、噁噻嗪基(oxathiazinyl)、硫杂三嗪基 (thiatriazinyl)、噁三嗪基(oxatriazinyl)、二噻二嗪基、咪唑啉基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、噻喃基(thiapyranyl)、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1,3-二氧戊环基、吡唑啉基、吡唑烷基、二噻烷基、二硫杂环戊烷基(dithiolanyl)、嘧啶酮基、嘧啶二酮基、嘧啶-2,4-二酮基、哌嗪酮基、哌嗪二酮基、吡唑烷基咪唑啉基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚基、6-氮杂双环[3.1.1] 庚基、3-氮杂双环[3.1.1]庚基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、氮杂双环[2.2.2]己基、2-氮杂双环[3.2.1]辛基、8-氮杂双环[3.2.1]辛基、2-氮杂双环[2.2.2]辛基、 8-氮杂双环[2.2.2]辛基、7-氧杂双环[2.2.1]庚烷、氮杂螺环[3.5]壬基、氮杂螺环[2.5]辛基、氮杂螺环[4.5]癸基、1-氮杂螺环[4.5]癸-2-酮基、氮杂螺环[5.5] 十一烷基、四氢吲哚基、八氢吲哚基、四氢异吲哚基、四氢吲唑基、1,1- 二氧代六氢噻喃基。含有硫或氧原子和1－3个氮原子的5元杂环的实例为噻唑基，包括噻唑--2-基和噻唑-2-基N-氧化物；噻二唑基，包括1,3,4-噻二唑-5-基和1,2,4-噻二唑-5-基；噁唑基，例如噁唑-2-基；噁二唑基，例如1,3,4- 噁二唑-5-基和1,2,4-噁二唑-5-基。含有2－4个氮原子的5元环杂环包括咪唑基，例如咪唑-2-基；三唑基，例如1,3,4-三唑-5-基、1,2,3-三唑-5-基、1,2,4- 三唑-5-基；和四唑基，例如1H-四唑-5-基。示例性的苯并-稠合的5元杂环为苯并噁唑-2-基、苯并噻唑--2-基和苯并咪唑-2-基。示例性的6元杂环含有1－3个氮原子和任选的硫或氧原子，例如吡啶基，例如吡啶-2-基、吡啶-3-基和吡啶-4-基；嘧啶基，例如嘧啶-2-基和嘧啶-4-基；三嗪基，例如 1,3,4-三嗪-2-基和1,3,5-三嗪-4-基；哒嗪基，特别是哒嗪-3-基；和吡嗪基。吡啶N-氧化物和哒嗪N-氧化物以及吡啶基、嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、哒嗪基和1,3,4-三嗪-2-基是其它示例性杂环基团。杂环可以任选被取代。例如，“任选取代的杂环”的取代基包括1－4个下列基团：F、Cl、Br、I、OH、 SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、 SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中其烷基、芳基和杂环部分可以任选被例如1－4个选自该相同列表的取代基取代。在某些实施方案中，杂环基团如杂芳基或杂环烷基的取代基包含酰胺。例如，杂环(例如，杂芳基或杂环烷基)取代基可以是-(CH2)0-4CONR'R”，其中R'和R”各自独立表示下列基团：包括，例如，氢；未取代的C1-C6烷基；C1-C6烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C1-C6杂烷基；C1-C6杂烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C6-C10芳基；C6-C10芳基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基或NR'R”；未取代的3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的 5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；和3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5 －6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；或R'和R”可以与氮原子结合形成3-、4-、5-、 6-或7-元环，其中一个环原子任选被N、O或S取代，其中所述环为任选被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”。
“杂芳基”是指其中至少一个环是含有1至4个选自氮、氧和硫的杂原子的5元或6元芳族环的任何单环、双环或三环环系，在一个典型的实施方案中，至少一个杂原子为氮。参见例如Lang’s Handbook of Chemistry (朗氏化学手册)(Dean,J.A.,ed.)第13版，表7－2[1985]。该定义中包括其中任何上述杂芳基环与芳环稠合的任何双环基团，其中芳环或杂芳基环与分子的其余部分连接。在一个实施方案中，杂芳基包括5－6元单环芳族基团，其中一个或多个环原子为氮、硫或氧。杂芳基的实例包括噻吩基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基、四唑基、噻三唑基、噁三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑并[1,5-b]哒嗪基、咪唑并[1,2-a] 嘧啶基和嘌呤基，还包括苯并-稠合的衍生物，例如苯并噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、苯并咪唑基和吲哚基。杂芳基可以任选被取代。在某些实施方案中，“任选取代的杂芳基”的取代基包括1－4个下列基团：F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、 N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基,其中其烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如1－4个选自该相同列表的取代基取代。在某些实施方案中，杂芳基的取代基包含酰胺。例如，杂芳基取代基可以是-(CH2)0-4CONR'R”，其中R'和R”各自独立表示下列基团：包括例如，氢；未取代的C1-C6烷基；C1-C6烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C1-C6杂烷基；C1-C6杂烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C6-C10芳基；C6-C10芳基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基或NR'R”；未取代的3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的 5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；和3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5 －6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；或R'和R”可以与氮原子结合形成3-、4-、5-、 6-或7-元环，其中一个环原子任选被N、O或S取代，其中所述环任选被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”。
在具体的实施方案中，杂环基连接在杂环基的碳原子上。举例来说，碳键合的杂环基包括下列键排列：吡啶环的2、3、4、5或6位；哒嗪环的 3、4、5或6位；嘧啶环的2、4、5或6位；吡嗪环的2、3、5或6位；呋喃、四氢呋喃、硫代呋喃、噻吩、吡咯或四氢吡咯环的2、3、4或5位；噁唑、咪唑或噻唑环的2、4或5位；异
Figure BDA0001692491180000171
唑、吡唑或异噻唑环的3、4或 5位；氮杂环丙烷环的2或3位；氮杂环丁烷环的2、3或4位；喹啉环的 2、3、4、5、6、7或8位；或异喹啉环的1、3、4、5、6、7或8位。
在某些实施方案中，杂环基是N-连接的。作为举例，氮键合的杂环基或杂芳基包括下列键排列：氮杂环丙烯、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2- 吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、 2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氢吲哚、1H-吲唑；异吲哚或异吲哚啉的2位；吗啉的4位；和咔唑或β-咔啉的9位。
术语“烷氧基”是指由式-OR表示的直链或支链一价基团，其中R为如本文所定义的烷基。烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、单-、二-和三-氟甲氧基以及环丙氧基。
“酰基”是指由式-C(O)-R表示的含羰基的取代基，其中R为氢、烷基、环烷基、芳基或杂环基，其中烷基、环烷基、芳基和杂环基如本文所定义。酰基包括链烷酰基(例如乙酰基)、芳酰基(例如苯甲酰基)和杂芳酰基(例如吡啶酰基(pyridinoyl))。
除非另外指明，否则“任选取代的”是指基团可以是未被取代或者被一或多个该基团所列示的取代基取代(例如0、1、2、3、4或5个或更多个，或其中可衍生的任何范围)，其中所述取代基可以相同或不同。在一个实施方案中，任选取代的基团具有1个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有2个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有3 个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有4个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有5个取代基。
单独或作为另一取代基(例如烷氧基)的一部分的烷基以及还各自单独或作为另一取代基的一部分的亚烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂环烷基和环烷基的任选取代基可以是各种基团，如本文所述的那些基团，还包括选自下列的基团：卤素；氧代；CN；NO；N3；-OR'；全氟-C1-C4烷氧基；未取代的C3-C7环烷基；C3-C7环烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、 CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C6-C10芳基(例如，苯基)；C6-C10芳基，其被下列基团取代：卤素、 OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基或NR'R”；未取代的3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6 元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；3 －11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或
NR'R”；-NR'R”；-SR'；-SiR'R”R”'；-OC(O)R'；-C(O)R'；-CO2R'；- CONR'R”；-OC(O)NR'R”；-NR”C(O)R'；-NR”'C(O)NR'R”；-NR”C( O)2R'；-S(O)2R'；-S(O)2NR'R”；-NR'S(O)2R”；-NR”'S(O)2NR'R”；脒基；胍
基；-(CH2)1-4-OR'；-(CH2)1-4-NR'R”；-(CH2)1-4-SR'；-(CH2)1-4-SiR'R”R” '；-(CH2)1-4-OC(O)R'；-(CH2)1-4-C(O)R'；-(CH2)1-4-CO2R'；
和-(CH2)1-4CONR'R”或其组合，数值范围从0至(2m'+1)，其中m'为该基团中碳原子的总数。R'、R”和R”'各自独立表示下列基团：包括例如，氢；未取代的C1-C6烷基；C1-C6烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的 C1-C6杂烷基；C1-C6杂烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C6-C10芳基；C6-C10芳基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基或NR'R”；未取代的3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－4个选自 O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；和3－11元杂环基(例如，含有 1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基含有1－4个选自O、N 和S的杂原子的或4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、 CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”。当 R'和R”与相同的氮原子相连时，它们可以与氮原子结合形成3-、4-、5-、 6-或7-元环，其中一个环原子任选被N、O或S取代，其中所述环任选被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”。例如，-NR'R”应当包括1-吡咯烷基和4-吗啉基。
同样，芳基和杂芳基的任选取代基是各种各样的。在某些实施方案中，芳基和杂芳基的取代基选自：卤素；CN；NO；N3；-OR'；全氟-C1-C4烷氧基；未取代的C3-C7环烷基；C3-C7环烷基，其被下列基团取代：卤素、 OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C6-C10芳基(例如，苯基)；C6-C10芳基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基或NR'R”；未取代的3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的 5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6 元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或
NR'R”；-NR'R”；-SR'；-SiR'R”R”'；-OC(O)R'；-C(O)R'；-CO2R'；- CONR'R”；-OC(O)NR'R”；-NR”C(O)R'；-NR”'C(O)NR'R”；-NR”C( O)2R'；-S(O)2R'；-S(O)2NR'R”；-NR'S(O)2R”；-NR”'S(O)2NR'R”；脒基；胍
基；-(CH2)1-4-OR'；-(CH2)1-4-NR'R”；-(CH2)1-4-SR'；-(CH2)1-4-SiR'R”R” '；-(CH2)1-4-OC(O)R'；-(CH2)1-4-C(O)R'；-(CH2)1-4-CO2R'；
和-(CH2)1-4CONR'R”，或其组合，数值范围从0至(2m'+1)，其中m'为该基团中碳原子的总数。R'、R”和R”'各自独立表示下列基团：包括例如，氢；未取代的C1-C6烷基；C1-C6烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、 CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的C1-C6杂烷基；C1-C6杂烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”；未取代的 C6-C10芳基；C6-C10芳基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基或NR'R”；未取代的3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1 －4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；和3－11元杂环基 (例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－ 4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或 NR'R”。当R'和R”与相同的氮原子相连时，它们可以与氮原子结合形成 3-、4-、5-、6-或7-元环，其中一个环原子任选被N、O或S取代，其中所述环任选被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C1-C6烷基、未取代的C1-C6烷氧基、氧代或NR'R”。例如，-NR'R”应当包括1-吡咯烷基和 4-吗啉基。
术语“氧代”是指＝O或(＝O)2。
如本文使用的与化学结构中的键相交的波浪线
Figure BDA0001692491180000201
表示在化学结构中与波状键连接的原子与分子的其余部分连接的点或与分子片段的其余部分的连接的点。在某些实施方案中，箭头与星号一起以波浪线的方式用于指示连接点。
在某些实施方案中，二价基团进行了一般性描述而没有特定的键合构型。应该理解的是，除非另有说明，否则一般性描述意在包括两种键合构型。例如，在基团R1–R2–R3中，如果基团R2被描述为–CH2C(O)–，那么应该理解，除非另有说明，该基团既可以是R1–CH2C(O)–R3，也可以是 R1–C(O)CH2–R3。
短语“可药用的”是指当适当地施用于动物例如人类时不产生不利的、过敏的或其它不良反应的分子实体和组合物。
本发明化合物可以是盐的形式，例如药学可接受的盐。“可药用的盐”包括酸和碱加成盐。“可药用的酸加成盐”是指能够保留游离碱的生物有效性和性质并且在生物学上或其它方面不是不希望的那些盐，与下列无机酸形成盐：例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等，有机酸可以选自脂肪族、脂环族、芳香族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类的有机酸，例如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、扑酸、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。
“可药用的碱加成盐”包括衍生自无机碱的那些盐，例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等。具体的碱加成盐是铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。衍生自可药用的有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺的盐；取代的胺，包括天然存在的取代胺；环胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、氨丁三醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等。具体的有机无毒碱包括异丙胺、二乙胺、乙醇胺、氨丁三醇、二环己胺、胆碱和咖啡因。
在一些实施方案中，盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、三氟乙酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、硫酸氢盐、苯磺酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、昔萘酸盐(xinafoate)、抗坏血酸盐、油酸盐、烟酸盐、糖精酸盐、己二酸盐、甲酸盐、乙醇酸盐、棕榈酸盐、L-乳酸盐、D-乳酸盐、天冬氨酸盐、苹果酸盐、L-酒石酸盐、D-酒石酸盐、硬脂酸盐、糠酸盐(例如，2-糠酸盐或3-糠酸盐)、萘二磺酸盐(萘-1,5-二磺酸盐或萘-1-(磺酸)-5-磺酸盐、乙二磺酸盐(乙烷-1,2-二磺酸盐或乙烷-1-(磺酸)-2-磺酸盐)、羟乙基磺酸盐(2-羟乙基磺酸盐)、2-均三甲苯磺酸盐 (mesitylenesulphonate)、2-萘磺酸盐、2,5-二氯苯磺酸盐、D-扁桃酸盐、L- 扁桃酸盐、肉桂酸盐、苯甲酸盐、己二酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐(2-均三甲苯磺酸盐)、萘磺酸盐(2-萘磺酸盐)、樟脑磺酸盐(樟脑-10-磺酸盐、例如(1S)-(+)-10-樟脑磺酸盐)、谷氨酸盐、戊二酸盐、马尿酸盐(2-(苯甲酰氨基)乙酸盐)、乳清酸盐、木酸盐(xylate)(对-二甲苯-2-磺酸盐)和双羟萘酸盐(2,2'-二羟基-1,1'-二萘基甲烷-3,3'-二羧酸盐)。
“无菌”制剂是无菌的或不含任何活微生物及其孢子。
“立体异构体”是指具有相同化学组成但在空间中原子或基团的排列方面不同的化合物。立体异构体包括非对映异构体、对映异构体、构象异构体等。
“手性”是指镜像配对分子具有不可重叠性质的分子，术语“非手性”是指其镜像配对分子具有可重叠性的分子。
“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心且其分子彼此不为镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱性质或生物活性。非对映异构体的混合物可以在高分辨率分析方法中分离，例如电泳法和色谱法，如HPLC。
“对映体”是指化合物的两个立体异构体，它们的镜像彼此不可重叠。
本文中使用的立体化学定义和惯例通常遵循S.P.Parker,Ed., McGraw-HillDictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；和Eliel,E.和Wilen,S.,“Stereochemistry of Organic Compounds(有机化合物的立体化学)”,John Wiley&Sons,Inc., New York,1994。许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有旋转平面偏振光的平面的能力。在描述光学活性化合物时，前缀D和L或R 和S用于表示分子关于其手性中心的绝对构型。前缀d和l或(+)和(-)用于表示化合物对平面偏振光旋转的符号，其中(-)或l表示该化合物是左旋的。前缀为(+)或d的化合物是右旋的。对于给定的化学结构，这些立体异构体是相同的，除了它们是彼此的镜像之外。特定的立体异构体也可以被称为对映体，此类异构体的混合物通常被称为对映体混合物。对映异构体的50:50混合物被称为外消旋混合物或外消旋体，其可以出现在化学反应或过程中没有立体选择性或立体特异性的情况下。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指两种对映体物质的等摩尔混合物，没有光学活性。
术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指可以通过低能障互相转化的不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子移变互变异构体)包括通过质子迁移的相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过某些键合电子的重组而相互转化。
本发明的某些化合物可以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在，包括水合形式。“溶剂化物”是指一种或多种溶剂分子与本发明化合物的结合体或复合物。能够形成溶剂化物的溶剂的实例包括水、异丙醇、乙醇、甲醇、 DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。本发明的某些化合物可以以多晶形或无定形形式存在。一般来说，所有的物理形式都应当包含在本发明的范围内。术语“水合物”是指其中溶剂分子是水的复合物。
“代谢物”是指通过特定化合物或其盐在体内代谢产生的产物。此类产物可以例如由施用的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶裂解等而产生。
代谢产物通常可以通过如下方法鉴定：制备本发明化合物的放射性标记的(例如14C或3H)同位素，以可检测的剂量(例如，大于约0.5mg/kg)适用于动物，例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴子或人类，使得有足够的时间进行代谢(通常约30秒至30小时)，从尿液、血液或其它生物样品中分离其转化产物。这些产品因为被标记而易于分离(其它产物可以通过使用能够与代谢物中存在的表位结合的抗体进行分离)。代谢物结构以常规方式确定，例如通过MS、LC/MS或NMR分析。通常，代谢物的分析以本领域技术人员熟知的常规药物代谢研究相同的方式完成。只要它们在体内不另外存在，代谢产物可以用于本发明化合物的治疗剂量的诊断分析。
如本文所用的“氨基保护基团”是指通常用于封闭或保护氨基的基团的衍生物，反应在化合物的其它官能团上进行。这种保护基团的实例包括氨基甲酸酯、酰胺、烷基和芳基和亚胺以及多种N-杂原子衍生物，其可以除去以再生需要的胺基。特别的氨基保护基团为Pmb(对-甲氧基苄基)、Boc (叔-丁基氧基羰基)、Fmoc(9-芴基甲基氧基羰基)和Cbz(羰基苄基氧基)。这些基团的其它实例参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“Protecting Groups inOrganic Synthesis(有机合成中的保护基团),第3版,John Wiley &Sons,Inc.,1999。术语“被保护的氨基”是指被上述氨基-保护基团之一取代的氨基。
如本文所用的“羧基保护基团”是指对在分子的其它位置处进行的反应条件保持稳定的那些基团，其可在适当的点除去而不破坏分子的其余部分，以得到未被保护的羧基。羧基保护基团的实例包括酯基和杂环基。羧酸基团的酯衍生物可用于封闭或保护羧酸基团，同时在化合物上的其它官能团上进行反应。此类酯基的实例包括：取代的芳基烷基，包括取代的苄基，例如4-硝基苄基、4-甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、2,4-二甲氧基苄基、2,4,6-三甲氧基苄基、2,4,6-三甲基苄基、五甲基苄基、3,4-亚甲二氧基苄基、二苯甲基、4,4’-二甲氧基二苯甲基、2,2’,4,4’-四甲氧基二苯甲基；烷基或取代的烷基酯，例如甲基、乙基、叔-丁基烯丙基或叔-戊基、三苯基甲基(三苯甲基)、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-二甲氧基三苯甲基、4,4’,4”-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基；硫酯，例如叔-丁基硫酯；甲硅烷基酯，例如三甲基甲硅烷基、叔-丁基二甲基甲硅烷基酯、苯甲酰甲基、2,2,2-三氯代乙基、β-(三甲基甲硅烷基)乙基、β-(二(正-丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对-甲苯磺酰基乙基、4-硝基苄基磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基等基团。羧基-保护基团的其它实例为杂环基，例如1,3-噁唑啉基。这些基团的其它实例参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts, Protecting Groups in OrganiCSynthesis(有机合成中的保护基团),第3版, John Wiley&Sons,Inc.,1999。术语“被保护的羧基”是指被上述羧基-保护基团之一取代的羧基。
本文使用的“羟基保护基团”是指通常用于封闭或保护羟基的羟基的衍生物，可以同时在化合物上的其它官能团上进行反应。此类保护基团的实例包括四氢吡喃氧基、苯甲酰基、乙酰氧基、氨基甲酰氧基、苄基和甲硅烷基醚(例如TBS、TBDPS)。这些基团的其它实例参见T.W.Greene和 P.G.M.Wuts,Protecting Groups in Organic Synthesis(有机合成中的保护基团),第3版,John Wiley&Sons,Inc.,1999。术语“被保护的羟基”是指被上述羟基-保护基团之一取代的羟基。
“宿主”、“个体”或“患者”为脊椎动物。在某些实施方案中，脊椎动物是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于农场动物(如奶牛)、运动动物、宠物(如豚鼠、猫、狗、兔和马)、灵长类、小鼠和大鼠。在某些实施方案中，哺乳动物为人类。在包含向患者施用式(00A)化合物或其可药用的盐的实施方案中，所述患者需要该施用。
术语“Janus激酶”是指JAK1、JAK2、JAK3和TYK2蛋白激酶。在某些实施方案中，Janus激酶可以进一步定义为JAK1、JAK2、JAK3或 TYK2之一。在任何实施方案中，JAK1、JAK2、JAK3和TYK2中的任意一种可以特别被排除作为Janus激酶。在某些实施方案中，Janus激酶为JAK1。在某些实施方案中，Janus激酶为JAK1和JAK2的组合。
术语“抑制”和“降低”或这些术语的任何变体包括任何可测量的减少或完全抑制以达到期望的结果。例如，活性(例如JAK1活性)降低与正常情况相比，可以减少约、至多约或至少约5％、10％、15％、20％、25％、 30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、 85％、90％、95％、99％或更多或本文可推导的任何范围。
在某些实施方案中，式(00A)的化合物可以选择性地抑制JAK1，超过对JAK3和TYK2的抑制。在某些实施方案中，式(00A)的化合物可以选择性抑制JAK1，超过对JAK2、JAK3或TYK2或者JAK2、JAK3或TYK2 的任何组合的抑制。在某些实施方案中，式(00A)的化合物选择性抑制JAK1 和JAK2，超过对JAK3和TYK2的抑制。在某些实施方案中，式(00A) 的化合物选择性抑制JAK1，超过对JAK3的抑制。“选择性抑制”是指，与另一种特定的Janus激酶(例如JAK3)活性相比，化合物至少为5％、 10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、 65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多或本文可推导的任何范围的更好的特定Janus激酶(例如JAK1)活性抑制剂，或者与另一种特定的Janus激酶(例如JAK3)活性相比，至少为2-、3-、4-、5-、10-、 25-、50-、100-、250-或500-倍更好的特定Janus激酶(例如JAK1)活性抑制剂。
“治疗有效量”是指本发明化合物(例如式(00A)化合物)的量，其可以(i) 治疗或预防特定疾病、病状或病症，或(ii)减弱、改善或消除特定疾病、病状或病症的一或多种症状，和任选(iii)预防或延迟本文所述的特定疾病、病状或病症的一或多种症状的发作。在某些实施方案中，治疗有效量是足以减弱或缓解自身免疫性或炎性疾病(例如哮喘)的症状的量。在某些实施方案中，治疗有效量是足以显着降低B细胞的活性或数量的本文所述化学实体的量。在癌症的情况下，药物的治疗有效量可以减少癌细胞的数量；减小肿瘤的大小；抑制(即，一定程度减慢并且优选阻止)癌细胞浸润到外周器官中；抑制(即，一定程度减慢并且优选阻止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；或在一定程度上减轻与癌症相关的一或多种症状。就药物在一定程度上可能阻止生长或杀死现有癌细胞而言，它可能是细胞抑制剂或细胞毒性的。对于癌症治疗而言，可以例如通过评估疾病进展时间(TTP) 或确定应答率(RR)来判断疗效。
“治疗”(以及治疗的各种变通说法)是指试图改变被治疗的个体或细胞的自然进程的临床干预，可以预防或在临床病理学过程中进行。治疗的理想效果包括预防疾病的发生或复发、缓解症状、降低疾病的任何直接或间接的病理学后果、稳定(即不恶化)疾病状态、减缓疾病进展速度、改善或缓解疾病状态、与不接受治疗的预期生存时间相比延长生存时间、缓解或改善的预后。在某些实施方案中，本发明化合物例如式(00A)化合物可以用于延缓疾病或病症的发展或者减缓疾病或病症的进展。需要治疗的患者包括已经患有病症或疾病的患者以及易于患有该病症或障碍的患者(例如，通过基因突变)或者需要预防该病症或疾病的患者。
“炎性病症”是指其中过度或不受调节的炎症反应导致过度炎性症状、宿主组织损伤或组织功能丧失的任何疾病、病症或综合征。“炎性疾病”也是指由白细胞或嗜中性粒细胞趋化性的汇集而介导的病理状态。
“炎症”是指由于组织损伤或破坏而引起的局部保护性反应，其用来破坏、削弱或杜绝(隔离)有害物质和受伤组织。炎症与白细胞或中性粒细胞趋化性的汇集显著相关。炎症可以由病原生物体和病毒感染引起，也可以由非感染性原因引起，所述非感染性原因如创伤或心肌梗塞后的再灌注或中风、对外源性抗原的免疫应答和自身免疫应答。因此，适合于用本发明化合物如式(00A)化合物治疗的炎性病症包括与特定防御系统的反应以及非特异性防御系统的反应有关的病症。
“特定防御系统”是指对特定抗原的存在起反应的免疫系统组成(组分)。由特定防御系统的反应而导致的炎症的实例包括对外源性抗原的传统反应、自身免疫疾病和由T细胞介导的迟发型超敏反应。慢性炎性疾病、实体移植的组织和器官(例如肾和骨髓移植物)的排斥反应以及移植物抗宿主病(GVHD)是特定防御系统的炎症反应的其它实例。
术语“非特异性防御系统”是指由不能免疫记忆的白细胞(例如粒细胞和巨噬细胞)介导的炎性疾病。至少部分由非特异性防御系统的反应引起的炎症的实例包括与下列疾病有关的炎症，例如成人(急性)呼吸窘迫综合征 (ARDS)或多器官损伤综合征；再灌注损伤；急性肾小球肾炎；反应性关节炎；具有急性炎症成分的皮肤病；急性化脓性脑膜炎或其他中枢神经系统炎症，如中风；热损伤；炎性肠病；粒细胞渗透相关综合征；和细胞因子诱导的毒性。
“自身免疫性疾病”是指其中组织损伤与体液或细胞介导的对身体自身成分的反应相关的任何一组疾病。自身免疫疾病的非限制性实例包括类风湿性关节炎、狼疮和多发性硬化症。
如本文所用，“变应性疾病”是指由变态反应引起的任何症状、组织损伤或组织功能丧失。本文使用的“关节炎性疾病”是指以可归因于各种病因的关节的炎性病变为特征的任何疾病。本文使用的“皮炎”是指以可归因于各种病因的皮肤炎症为特征的皮肤疾病的大家族中的任何一种。本文使用的“移植排斥”是指针对移植组织(例如器官或细胞(例如骨髓))的任何免疫反应，其特征为移植物和周围组织的功能丧失、疼痛、肿胀、白细胞增多和血小板减少。本发明的治疗方法包括治疗与炎性细胞活化相关的病症的方法。
“炎性细胞活化”是指通过增殖性细胞应答的刺激(包括但不限于细胞因子、抗原或自身抗体)的诱导，在炎性细胞(包括但不限于单核细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、粒细胞(即多形核白细胞，如嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞)、肥大细胞、树突细胞、朗格汉斯细胞和内皮细胞)中，产生可溶性介质(包括但不限于细胞因子、氧自由基、酶、前列腺素类或血管活性胺)或者新的或增加数目的介质(包括但不限于主要组织相容性抗原或细胞粘附分子)的细胞表面表达。本领域技术人员应当理解，这些细胞中这些表型的一种或组合的活化可能导致炎性病症的引发、持续或恶化。
在某些实施方案中，可以根据本发明的方法治疗的炎症包括但不限于哮喘、鼻炎(例如过敏性鼻炎)、过敏性气道综合征、异位性皮炎、支气管炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、接触性皮炎、慢性阻塞性肺病和迟发性超敏反应。
术语“癌症”和“癌性”、“赘生物”和“肿瘤”以及相关术语是指或描述了哺乳动物中通常以不受调节的细胞生长为特征的生理状况。“肿瘤”包含一或多种癌细胞。癌症的实例包括癌、母细胞瘤、肉瘤、精原细胞瘤、成胶质细胞瘤、黑素瘤、白血病和骨髓或淋巴恶性肿瘤。此类癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)和肺癌，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(“SCLC”)、肺的腺癌和肺的鳞状细胞癌。其他癌症包括皮肤癌、角化棘皮瘤、滤泡癌、毛细胞白血病、口腔癌、咽(口腔)癌、唇癌、舌癌、口癌、唾液腺癌、食管癌、喉癌、肝细胞癌、胃癌、腹部癌症、小肠癌、大肠癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、泌尿生殖器癌、胆道癌、甲状腺癌、乳头状癌、肝癌、子宫内膜癌、子宫癌、唾液腺癌、肾癌、前列腺癌、睾丸癌、外阴癌、腹膜癌、肛门癌、阴茎癌、骨癌、多发性骨髓瘤、B-细胞淋巴瘤、中枢神经系统癌症、脑癌、头颈癌、霍奇金病以及相关转移。肿瘤性疾病的实例包括骨髓增生性疾病如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化如原发性骨髓纤维化和慢性骨髓性白血病(CML)。
“化疗药物”是用于治疗指定病症的药物，例如癌症或炎性病症。化疗药物的实例在本领域中是公知的，包括描述于例如美国公开申请号 2010/0048557中公开的那些实例，其在此引入本文作为参考。另外，化疗药物包括任何化疗药物的可药用的盐、酸或衍生物以及它们中两种或更多种的组合。
“包装说明书”用于指通常包含在治疗产品的商业包装中的使用说明，其包含关于使用此类治疗产品的适应症、用法、剂量、给药、禁忌症或警告的信息。
除非另有说明，本文描绘的结构包括这样的化合物，这些化合物的区别仅在于在一或多个同位素富集的原子存在时。可以掺入本发明化合物例如式(00A)化合物的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，分别例如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、123I和125I。同位素标记的化合物(例如用3H和14C标记的化合物)可用于化合物或底物组织分布测定。氚化(即3HH)和碳 -14(即14C)同位素使得其易于制备和检测。此外，由于具有较高的代谢稳定性(例如增加体内半衰期或降低剂量需求)，用较重的同位素例如氘(即2H) 取代可以提供某些治疗优势。在某些实施方案中，在式(00A)的化合物中，一或多个氢原子被2H或3H替代，或一或多个碳原子被13C-或14C-富集的碳替代。正电子发射同位素例如15O、13N、11C和18F可用于正电子发射断层扫描(PET)研究以检查底物受体占有率。同位素标记的化合物通常可以根据与流程中或本文实施例中公开的类似方法通过用同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂制备。
需要特别注意的是，与本发明的一个实施方案相关的讨论的任何限制适用于本发明的任何其它实施方案。此外，本发明的任何化合物或组合物可用于本发明的任何方法中，本发明的任何方法可以用于生产或利用本发明的任何化合物或组合物。
除非明确说明替代方案是唯一的或者替代方案是互相排斥的，否则术语“或”的使用意味着“和/或”，尽管本公开支持唯一的替代方案和“和/或”的定义。
在整个申请中，术语“约”用于表示一个数值包括用于确定该值的设备或方法的误差的标准偏差。
除非另外明确指出，本文所使用的“一”或“一个”意指一个或一个以上。本文所使用的“另一个”表示至少第二个或更多个。
本文使用的标题仅用于编写的目的。
JANUS激酶抑制剂
一个实施方案提供了式(00A)化合物或其盐。
在一个实施方案中，R1为H、C1-C6烷基、–(C0-C3烷基)Ra、–(C0-C3烷基)NRaRb、–(C0-C3烷基)C(O)Ra或–(C0-C3烷基)C(O)ORa。
在一个实施方案中，R1为H。
在一个实施方案中，R1为C1-C6烷基。
在一个实施方案中，R1为–(C0-C3烷基)Ra。
在一个实施方案中，R1为–(C0-C3烷基)NRaRb。
在一个实施方案中，R1为–(C0-C3烷基)C(O)Ra。
在一个实施方案中，R1为–(C0-C3烷基)C(O)ORa.
在一个实施方案中，R1选自下列基团：H、甲基、
Figure BDA0001692491180000301
Figure BDA0001692491180000311
Figure BDA0001692491180000321
Figure BDA0001692491180000331
Figure BDA0001692491180000341
在一个实施方案中，R2为C1-C6烷基、C3-C6环烷基或3－6元杂环基。
在一个实施方案中，R2为甲基、乙基、异丙基、环丙基或氧杂环丁基。
在一个实施方案中，n为0。
在一个实施方案中，n为1。
在一个实施方案中，n为2。
一个实施方案提供了式(00B)化合物或其盐：
Figure BDA0001692491180000342
一个实施方案提供了式(00C)化合物或其盐：
Figure BDA0001692491180000351
一个实施方案提供了式(00D)化合物或其盐：
Figure BDA0001692491180000352
其中环A任选被一或多个基团Re所取代。
一个实施方案提供了式(00E)化合物或其盐：
Figure BDA0001692491180000353
其中环A任选被一或多个基团Re所取代。
一个实施方案提供了式(00F)化合物或其盐：
Figure BDA0001692491180000354
一个实施方案提供了式(00G)化合物或其盐：
Figure BDA0001692491180000361
在一个实施方案中，Re选自下列基团：甲基、乙基、
Figure BDA0001692491180000362
Figure BDA0001692491180000371
一个实施方案提供了实施例1－194中所述的化合物及其盐和游离碱。
在一个实施方案中，R1为C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、–(C0-C3烷基)CN、–(C0-C3烷基)ORa、–(C0-C3烷基)Ra、–(C0-C3烷基)SRa、–(C0-C3烷基)NRaRb、–(C0-C3烷基)OCF3、–(C0-C3烷基)CF3、–(C0-C3烷基)NO2、–(C0-C3烷基)C(O)Ra、–(C0-C3烷基)C(O)ORa、–(C0-C3烷基)C(O)NRaRb、–(C0-C3烷基)NRaC(O)Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1-2Ra、–(C0-C3烷基)NRaS(O)1-2Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1-2NRaRb、–(C0-C3烷基)(5－6元杂芳基)或–(C0-C3烷基)苯基，其中R1任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、C1-C3烷基、氧代、–CHF2、 CH2F、–CF3、–(C0-C3烷基)ORc和–(C0-C3烷基)NRcRd。
在一个实施方案中，R3为H。
在一个实施方案中，R4为H。
在一个实施方案中，R5为H。
在一个实施方案中，R3、R4和R5各自为H。
在一个实施方案中，所述化合物为：
Figure BDA0001692491180000381
Figure BDA0001692491180000391
或其盐。
在一个实施方案中，所述化合物为：
Figure BDA0001692491180000401
或其盐。
在一个实施方案中，所述化合物为：
Figure BDA0001692491180000402
或其盐。
在一个实施方案中，所述化合物为：
Figure BDA0001692491180000403
或其盐。
在一个实施方案中，所述化合物为：
Figure BDA0001692491180000404
或其盐。
在一个实施方案中，所述化合物为：
Figure BDA0001692491180000411
或其盐。
在一个实施方案中，所述疾病或病症为癌症、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化、慢性骨髓性白血病(CML)、类风湿性关节炎、炎性肠综合征、克伦病、牛皮癣、接触性皮炎或迟发型超敏反应。
在一个实施方案中，式(00A)化合物或其可药用的盐用于治疗癌症、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化、慢性骨髓性白血病 (CML)、类风湿性关节炎、炎性肠综合征、克隆病、牛皮癣、接触性皮炎或迟发型超敏反应。
在一个实施方案中，提供了配制用于吸入给药的组合物。
在一个实施方案中，提供了包含式(00A)化合物或其可药用的盐的定量吸入器。
在一个实施方案中，式(00A)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为LRRK2抑制剂更有效至少5倍以上。
在一个实施方案中，式(00A)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为LRRK2抑制剂更有效至少10倍以上。
在一个实施方案中，式(00A)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为JAK2抑制剂更有效至少5倍以上。
在一个实施方案中，式(00A)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为JAK2抑制剂更有效至少10倍以上。
在一个实施方案中，式(00A)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为JAK3抑制剂更有效至少5倍以上。
在一个实施方案中，式(00A)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为JAK3抑制剂更有效至少10倍以上。
在一个实施方案中，提供了用于治疗哺乳动物脱发的方法，该方法包括将式(00A)化合物或其可药用的盐给予哺乳动物。
在一个实施方案中，提供了式(00A)化合物或其可药用的盐用于治疗脱发的用途。
在一个实施方案中，提供式(00A)化合物或其可药用的盐在制备用于治疗哺乳动物脱发的药物中的用途。
还提供了合成本发明化合物的方法。例如，提供了制备式(i)化合物的方法：
Figure BDA0001692491180000421
其中：
R1为H、C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、–(C0-C3烷基)CN、–(C0-C3烷基)ORa、–(C0-C3烷基)Ra、–(C0-C3烷基)SRa、–(C0-C3烷基)NRaRb、–(C0-C3烷基)OCF3、–(C0-C3烷基)CF3、–(C0-C3烷基)NO2、–(C0-C3烷基)C(O)Ra、–(C0-C3烷基)C(O)ORa、–(C0-C3烷基)C(O)NRaRb、–(C0-C3烷基)NRaC(O)Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1-2Ra、–(C0-C3烷基)NRaS(O)1-2Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1- 2NRaRb、–(C0-C3烷基)(5－6元杂芳基)或–(C0-C3烷基)苯基，其中R1任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、C1-C3烷基、氧代、–CF3、–(C0-C3烷基)ORc和–(C0-C3烷基)NRcRd；
Ra独立为氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、3－10元杂环基、5－6元杂芳基、–C(O)Rc、–C(O)ORc、–C(O)NRcRd、–NRcC(O)Rd、–S(O)1-2Rc、–NRcS(O)1-2Rd或-S(O)1-2NRcRd，其中Ra的任何C3-C6环烷基、3－10元杂环基和5－6元杂芳基任选被一或多个基团Re所取代；
Rb独立为氢或C1-C3烷基，其中所述烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素和氧代；或者
Rc和Rd独立选自下列基团：氢、3－6元杂环基、C3-C6环烷基和C1-C3烷基，其中Rc和Rd的任何3－6元杂环基、C3-C6环烷基和C1-C3烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素和氧代；或Rc和Rd与它们所连接的原子一起形成3－6元杂环基，任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、-CF3和C1-C3烷基；
每个Re独立选自下列基团：氧代、ORf、NRfRg、卤素、3－10元杂环基、C3-C6环烷基和C1-C6烷基，其中Re的任何C3-C6环烷基和C1-C6烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：ORf、NRfRg、卤素、3 －10元杂环基、氧代和氰基，其中Re的任何3－10元杂环基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、氰基、–CF3、NRhRk、3 －6元杂环基和C1-C3烷基，其任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、ORf和NRhRk；
Rf和Rg各自独立选自下列基团：氢、C1-C6烷基、3－6元杂环基和 C3-C6环烷基，其中Rf和Rg的任何C1-C6烷基、3－6元杂环基和C3-C6环烷基任选被一或多个Rm取代；
每个Rm独立选自下列基团：卤素、氰基、氧代、C3-C6环烷基、3－6 元杂环基、羟基和NRhRk，其中Rm的任何C3-C6环烷基和3－6元杂环基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、氰基和C1-C3烷基；
Rh和Rk各自独立选自下列基团：氢和C1-C6烷基，其任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氰基、3－6元杂环基和氧代；或 Rh和Rk与它们所连接的原子一起形成3－6元杂环基，其任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氰基、氧代、–CF3和C1-C3烷基，其任选被一或多个独立选自卤素和氧代的基团所取代；
R2为C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、3－6元杂环基、(C3-C6环烷基)C1-C6烷基、(3－6元杂环基)C1-C6烷基、-C(O)(C3-C6环烷基)或–C(O)(3－6元杂环基)，其中R2任选被一或多个卤素所取代；
R3为H或NH2；
R4为H或CH3；
R5为H或NH2；并且
PG为保护基团，例如酸不稳定的保护基团(例如，[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基乙缩醛(SEM)、对-甲氧基苄基(PMB)、2,4-或3,4-二甲氧基苄基(DMB))，
其中任何取代基(例如R1、R2、R3、R5)可以被一或多个适当的保护基团保护，其可以是相同或不同的，但不为PG，
所述方法包括使得式(ii)化合物
Figure BDA0001692491180000441
其中X为离去基团，例如卤素、甲苯磺酸酯基(OTs)或三氟甲磺酸酯基(OTf)，
与钠盐R1SNa、
钯催化剂(例如Pd(OAc)2、Pd2(dba)3),
和膦配体(例如Xantphos)反应，
该反应在溶剂(例如非极性的质子惰性溶剂，如甲苯或二氧六环)存在下、在惰性气体环境中进行。参见，例如Mispelaere-Canivet等,Tetrahedron 61:5253－5259(2005)和Fernandez-Rodriguez等,J.Amer.Chem.Soc. 126:2180－2181(2006)。反应条件可以包括加热。
本发明的化合物可以含有一个或多个不对称碳原子。因此，这些化合物可以以非对映异构体、对映异构体或其混合物的形式存在。化合物的合成可以使用外消旋体、非对映体或对映体作为原料或作为中间体。特定非对映体化合物的混合物可以通过色谱或结晶方法分离或富集一种或多种特定的非对映异构体。同样，可以使用相同的技术或本领域已知的其他技术分离对映体混合物或对映体富集。每个不对称碳或氮原子可以为R或S构型，这两种构型均在本发明的范围内。
在本文所示的结构中，在未指定任何特定手性原子的立体化学的情况下，所有立体异构体均被考虑并包括为本发明化合物。当立体化学通过表示特定构型的实心楔线或虚线指定时，则该立体异构体如此指定和定义。除非另有说明，否则使用实心楔线或虚线时，应当是指相对立体化学。
另一方面包括式(00A)化合物的前体药物，包括已知的氨基保护基团和羧基保护基团，其在生理条件下释放(例如水解)以产生本发明化合物。
术语“前药”是指药物活性物质的前体或衍生物形式，其与母体药物相比对患者的疗效较差，能够被酶促或水解活化或转化为更具活性的母体形式。参见例如Wilman,“Prodrugs in Cancer Chemotherapy(癌症化疗中的前药)”Biochemical SocietyTransactions,14,第375－382页,615th Meeting Belfast(1986)和Stella等,“Prodrugs:A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery(前药：靶向药物的化学方法),”Directed Drug Delivery,Borchardt等,(ed.),第247－267页,Humana Press(1985)。前药包括但不限于：含磷酸酯/盐的前药、含硫代磷酸酯/盐的前药、含硫酸酯/ 盐的前药、含肽的前药、D-氨基酸修饰的前药、糖基化的前药、含β-内酰胺的前药、含任选取代的苯氧基乙酰胺的前药或含任选取代的苯乙酰胺的前药以及5-氟胞嘧啶和5-氟尿嘧啶前药。
一类特别的前药是其中氨基、脒基、氨基亚烷基氨基、亚氨基亚烷基氨基或胍基中的氮原子被羟基、烷基羰基(-CO-R)基、烷氧基羰基 (-CO-OR)或(酰氧基烷基-烷氧基羰基(-CO-O-R-O-CO-R)取代的化合物，其中R为一价或二价基团(例如烷基、亚烷基或芳基)或具有式 -C(O)-O-CP1P2-卤代烷基的基团，其中P1和P2可以相同或不同并且为氢、烷基、烷氧基、氰基、卤素、烷基或芳基。在具体的实施方案中，氮原子是式(00A)化合物的脒基的氮原子之一。前药可以通过使式(00A)的化合物与活化的基团如酰基反应从而将例如化合物中的氮原子键合至活化的酰基的典型的羰基来制备。活化的羰基化合物的实例是含有与羰基键合的离去基团的那些化合物，包括例如酰基卤、酰基胺、酰基吡啶鎓盐、酰基醇盐、酰基酚盐，例如对硝基苯氧基酰基、二硝基苯氧基酰基、氟苯氧基酰基和二氟苯氧基酰基。该反应通常在惰性溶剂中在低温如-78℃至约50 ℃下进行。该反应也可以在无机碱(例如碳酸钾或碳酸氢钠)或有机碱(例如胺，包括吡啶、三甲胺、三乙胺、三乙醇胺等)存在下进行。
其它类型的前药也包括在内。例如，式(00A)化合物的游离羧基可以衍生为酰胺或烷基酯。作为另一个实例，包含游离羟基的本发明化合物可以通过将该羟基转化成例如但不限于磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯或磷酰氧基甲氧基羰基的基团而衍生为前药，如描述于Fleisher,D. 等,(1996)Improved oral drug delivery:solubilitylimitations overcome by the use of prodrugs(改进的口服药物递送：通过使用前药克服溶解度限制), Advanced Drug Delivery Reviews,19:115。也包括羟基和氨基的氨基甲酸酯前药以及羟基的碳酸酯前药、磺酸酯和硫酸酯。羟基衍生化为(酰氧基) 甲基和(酰氧基)乙基醚，其中酰基可以是任选被包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代的烷基酯，或者其中酰基为如上所述的氨基酸酯也包含在内。这种类型的前药描述于J.Med.Chem.,(1996),39:10。更具体的实例包括醇基的氢原子被下列基团取代：例如(C1-C6)烷酰基氧基甲基、 1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C1-C6)烷酰基、α-氨基(C1-C4)烷酰基、芳基酰基和α-氨基酰基或α-氨基酰基-α-氨基酰基，其中每个α-氨基酰基独立选自天然存在的L-氨基酸、P(O)(OH)2、 -P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(由除去半缩醛形式的碳水化合物的羟基得到的基团)。
“离去基团”是指化学反应中的第一反应物的一部分，其在化学反应中从第一反应物中被置换。离去基团的实例包括但不限于卤素原子、烷氧基和磺酰氧基。典型的磺酰氧基包括但不限于烷基磺酰氧基(例如甲基磺酰氧基(甲磺酸酯基)和三氟甲基磺酰氧基(三氟甲磺酸酯基))和芳基磺酰氧基(例如对甲苯磺酰氧基(甲苯磺酸酯基)和对硝基磺酰氧基(硝基苯磺酸酯基))。
JANUS激酶抑制剂化合物的合成
化合物可以通过本文所述的合成路线合成。在某些实施方案中，除了本文所包含的描述或者根据本文所包含的描述，可以采用化学领域公知的方法进行合成。原料通常可从商业来源例如Aldrich Chemicals(Milwaukee, Wis.)获得，或者使用本领域技术人员熟知的方法容易地制备(例如，通过下列文献中所述常规方法制备：Louis F.Fieser和MaryFieser,Reagents for Organic Synthesis(有机合成试剂),1－19卷,Wiley,N.Y.(1967－1999ed.)； Beilsteins Handbuch der organischen Chemie,4,Aufl.ed.Springer-Verlag, Berlin,包括增补版(也可以通过Beilstein在线数据库获得))；或Comprehensive Heterocyclic Chemistry(综合杂环化学),Katrizky和Rees 编辑,Pergamon Press,1984。
化合物可以单独制备或作为包含至少2种化合物(例如5－1,000种化合物或10－100种化合物)的化合物库制备。通过本领域技术人员已知的方法，可以通过组合的“拆分和混合(‘split and mix’)”方法或者通过使用液相或固相化学的多重平行合成来制备化合物库。因此，根据本发明的另一方面，提供了包含至少2种本发明化合物的化合物库，例如式(00A)化合物。
为了说明的目的，下面描述的反应流程提供了合成本发明的化合物以及关键中间体的路线。各个反应步骤的更详细说明，参阅下面的实施例部分。本领域技术人员应当理解，可以使用其他合成路线。尽管在流程中描述了一些具体的原料和试剂并在下面进行了讨论，但是可以用其它原料和试剂替代从而提供各种衍生物或反应条件。另外，根据下述方法制备的许多化合物可以根据本公开内容使用本领域技术人员熟知的常规化学进一步修饰。
在制备本发明化合物时，可能需要保护中间体的远端官能团(例如伯胺或仲胺)。是否需要此类保护取决于远端官能团的性质以及制备方法的条件。适当的氨基保护基团包括乙酰基、三氟乙酰基、苄基、苯磺酰基、叔丁氧基羰基(Boc)、苄氧基羰基(CBz)和9-芴基亚甲氧基羰基(Fmoc)。本领域技术人员很容易确定是否需要此类保护。关于保护基团及其用途的一般描述，参见T.W.Greene,Protective Groups in Organic Synthesis(有机合成中的保护基团),John Wiley&Sons,New York,1991。
在本发明化合物的合成中常用的并且可以使用各种试剂和条件进行的其它转化包括以下：
(1)羧酸与胺反应形成酰胺。此类转化可以使用本领域技术人员已知的各种试剂实现，但全面评述可以参见Tetrahedron 2005,61,10827－10852。
(2)伯胺或仲胺与芳基卤化物或拟卤化物(例如三氟甲磺酸酯)的反应，通常称为“Buchwald-Hartwig交叉偶联”，可以使用各种催化剂、配体和碱来实现。这些方法的综述参见Comprehensive Organic Name Reactions and Reagents(综合有机名称反应和试剂)，2010，575－581。
(3)芳基卤与乙烯基硼酸或硼酸酯之间的钯交叉偶联反应。这种转化是一种“Suzuki-Miyaura交叉偶联”，此类反应详细地描述于Chemical Reviews,1995，95(7)，2457－2483。
(4)酯水解生成相应的羧酸是本领域技术人员熟知的，条件包括：对于甲酯和乙酯，使用强碱水溶液(如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾)或强无机酸水溶液(如HCl)；对于叔丁酯，可以使用酸进行水解，例如HCl的二氧六环溶液或者三氟乙酸(TFA)的二氯甲烷(DCM)溶液。
反应流程1
Figure BDA0001692491180000491
如流程1所示，2型的化合物可以通过适当的酚(如化合物1)与2-氯-2,2- 二氟乙酸钠盐在升高的温度下、在碱(例如Cs2CO3)存在下并在适当的溶剂中反应而制备。化合物3与碱(例如LHMDS)反应、然后与ZnCl2反应，然后暴露于钯催化剂例如Pd(PPh3)4和2型的化合物，产生4型的化合物。硝基还原产生5型的化合物，然后可将其与适当的羧酸如6偶联以生成7 型酰胺。在适当的钯催化剂、膦配体和溶剂存在下，将化合物如7暴露于硫醇盐，然后产生8型化合物。将8暴露于酸性脱保护条件下除去SEM保护基团以产生9型化合物。
反应流程2
Figure BDA0001692491180000501
如流程2所示，2型的化合物可以通过1型的化合物与硫醇盐在钯催化剂、膦配体和溶剂存在下反应而制备。然后经硝基还原、酰胺键形成和 SEM脱保护产生6型的化合物。
反应流程3
Figure BDA0001692491180000502
Figure BDA0001692491180000511
如流程3所示，2型的化合物可以通过1型的化合物与硫醇盐在钯催化剂、膦配体和溶剂存在下反应而制备。SEM脱保护获得3型的化合物。在碱如DIPEA存在下，使3型化合物与适当的亲电子试剂如烷基溴反应，然后产生各种比例的4a和4b型的化合物，所述比例取决于反应条件，如亲电子试剂、碱、溶剂的性质和反应温度。在某些情况下，区域异构体4a 和4b可以通过诸如色谱法或结晶的方法分离，或者可以将混合物转移到随后的步骤中，可以在合成顺序的稍后阶段分离。经4a的硝基还原，随后偶联至适当的羧酸如6，产生7型的化合物。将叔丁基酯脱保护，然后偶合至适当的胺，产生9型的化合物。
反应流程4
Figure BDA0001692491180000512
如流程4所示，2型的化合物可以通过1型的化合物与适当的亲电子试剂如烷基溴在碱存在下反应而获得。将异丁基酯脱保护，然后偶合至合适的胺，产生4型的化合物。
反应流程5
Figure BDA0001692491180000521
如流程5所示，2型的化合物可以通过1型的化合物与适当的亲电子试剂如烷基卤在碱的存在下反应而获得。4型的化合物可以通过用适当的胺进行单一还原胺化获得，或者通过用适当的胺进行初始还原胺化制备3 型的化合物，然后用适当的醛进行第二次还原胺化来获得。
反应流程6
Figure BDA0001692491180000531
如流程6所示，3型的化合物可以通过卤代乙酰卤与适当的胺如2的反应而获得。1型化合物与3型的化合物在碱存在下的烷基化产生4型的化合物。
反应流程7
Figure BDA0001692491180000532
如流程7所示，1型化合物与1,2-二溴乙烷在碱存在下反应生成2型化合物。2型化合物与适当的胺反应产生3型化合物。
反应流程8
Figure BDA0001692491180000533
Figure BDA0001692491180000541
如流程8所示，在碱存在下，用适当的亲电子试剂烷基化1型化合物产生2型化合物。在某些情况下，R4为保护基团，其可被去除以释放3型的反应性胺。3型的化合物可以在还原胺化、烷基化或酰化条件下与适当的亲电子试剂反应产生4型化合物。
反应流程9
Figure BDA0001692491180000542
2型化合物可以在酰胺键形成条件下与取代的哌嗪反应以产生2和4 型的化合物。含有被保护的哌嗪的2型化合物可以脱保护以释放3型化合物。存在于3型化合物中的反应性胺可以与多种亲电子试剂(在还原胺化的情况下，还加入还原剂)反应以产生4型化合物。
反应流程10
Figure BDA0001692491180000551
3型化合物可以在碱存在下通过使1型化合物与适当的亲电子试剂如2 反应获得。除去保护基团如氨基甲酸叔丁酯获得具有反应性胺的4型化合物。4型化合物与适当的亲电子试剂反应(在还原胺化的情况下，还加入还原剂)获得5型化合物。
反应流程11
Figure BDA0001692491180000552
3型化合物可以在碱存在下通过使1型化合物与Michael受体如化合物2反应，随后在酸性条件下除去保护基团而获得。3型化合物与适当的亲电试剂反应(在还原胺化的情况下，还加入还原剂)获得4型的化合物。
反应流程12
Figure BDA0001692491180000561
如流程12中所示，2型化合物可以在碱存在下通过使得1型型化合物与炔丙基卤化物反应而获得。在添加剂例如碘化铜的存在下，2与叠氮化物如3反应产生三唑如4。在钯催化剂和膦配体存在下，4与硫醇盐的反应获得5型化合物。在酸性条件下除去保护基，然后使暴露的胺与适当的亲电试剂反应(在还原胺化的情况下，还加入还原剂)获得6型化合物。
反应流程13
Figure BDA0001692491180000571
如流程13所示，2型化合物可以在碱存在下通过1型的化合物与炔丙基卤化物反应而获得。在添加剂例如碘化铜的存在下，2与叠氮化物如3 反应产生三唑如4。在酸性条件下除去4中存在的保护基团，接着使暴露的胺与适当的亲电子试剂反应(在还原胺化的情况下还加入还原剂)产生6 型化合物。
反应流程14
Figure BDA0001692491180000581
如流程14中所示，2型化合物可以通过使1型化合物与四氟硼酸三甲氧鎓反应而获得。4型的化合物可以在适当的钯催化剂和膦配体存在下通过将化合物例如2暴露于硫醇盐而获得。或者，化合物2可以在适当的钯催化剂和膦配体存在下用硅烷保护的硫醇处理，产生3型化合物。在氟化物源(TBAF)存在下，用烷基卤或烷基卤等价物处理3可以获得4型化合物。
应该理解的是，在存在适当的官能团的情况下，可以通过采用缩合、取代、氧化、还原或裂解反应的一或多种标准合成方法将各种分子式的化合物或其制备中使用的任何中间体进一步衍生化。特定的取代方法包括常规的烷基化、芳基化、杂芳基化、酰化、磺酰化、卤化、硝化、甲酰化和偶联方法。
在另一个实例中，伯胺或仲胺基团可以通过酰化转化成酰胺基团 (-NHCOR'或-NRCOR')。酰化可以在碱例如三乙胺存在下、在适当的溶剂例如二氯甲烷中通过与适当的酰氯反应获得，或者在适当的偶联剂例如 HATU(HATU(O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐)存在下、在适当的溶剂例如二氯甲烷中通过与适当的羧酸反应获得。同样，在适当的碱例如三乙胺存在下、在适当的溶剂例如二氯甲烷中，通过与适当的磺酰氯反应，可以将胺基团转化为磺酰胺基团(-NHSO2R’或–NR”SO2R’)。在适当的碱例如三乙胺存在下、在适当的溶剂例如二氯甲烷中，通过与适当的异氰酸酯反应，可以将伯或仲胺基团转化为脲基团 (-NHCONR’R”或–NRCONR’R”)。
胺(-NH2)可以通过硝基(-NO2)的还原而获得，例如通过催化氢化，例如在金属催化剂(例如在载体如碳上的钯)存在下、在溶剂如乙酸乙酯或醇 (如甲醇)中使用氢进行。或者，转化可以在酸(例如盐酸)存在下通过使用例如金属(例如锡或铁)的化学还原进行。
在其它的实例中，胺(-CH2NH2)基团可以通过腈(-CN)的还原获得，例如通过在金属催化剂(例如在载体如碳上的钯或者雷尼镍)存在下使用例如氢的催化氢化进行，该反应在溶剂例如醚(例如环醚，如四氢呋喃)中、在适当的温度下(例如约-78℃至溶剂的回流温度下)进行。
在其它实例中，胺(-NH2)基团可以获自羧酸基团(-CO2H)，通过转化为相应的酰基叠氮化物(-CON3)、Curtius重排并将获得的异氰酸酯(-N＝C＝O) 的水解进行。
通过采用胺和硼氢化物(例如三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠)在溶剂(例如卤代烃(如二氯甲烷)或醇(如乙醇))中进行还原胺化，可以将醛基 (-CHO)转化为胺基(-CH2NR’R”)，如果必要，反应在环境温度下、在酸(如乙酸)存在下进行。
在另一个实例中，醛基可以被转化为烯基(-CH＝CHR')，在本领域技术人员已知的标准条件下根据Wittig或Wadsworth-Emmons反应采用适当的正膦或膦酸酯进行。
醛基可以在适当的溶剂(如甲苯)中使用二异丁基氢化铝通过酯基团(例如–CO2Et)或腈(-CN)的还原而获得。或者，醛基可以通过使用本领域技术人员已知的任何适当的氧化剂氧化醇基来获得。
根据R的性质，通过酸或碱催化水解，可以将酯基团(-CO2R’)转化成相应的酸基团(-CO2H)。如果R为叔丁基，则可以实现酸催化的水解，例如在水性溶剂中通过用有机酸(如三氟乙酸)处理，或者在水性溶剂中通过用无机酸(如盐酸)处理。
在适当的偶联剂例如HATU存在下，在适当的溶剂例如二氯甲烷中，通过与适当的胺反应，可以将羧酸基团(-CO2H)转化为酰胺(CONHR’或–CONR’R”)。
在另一个实例中，通过转化为相应的酰氯(-COCl)然后进行 Arndt-Eistert合成，羧酸可以被一个碳同系化(homologated)(即–CO2H转化为–CH2CO2H)。
在另一个实例中，可以通过采用例如复合金属氢化物(如氢化铝锂)在乙醚或四氢呋喃中或者硼氢化钠在溶剂(例如甲醇)中还原，从相应的酯(例如-CO2R’)或醛(-CHO)生成-OH基团。或者，醇可以通过相应的酸(-CO2H) 的还原制备，采用氢化铝锂在溶剂(如四氢呋喃)中或者采用硼烷在溶剂(如四氢呋喃)中进行。
采用本领域技术人员已知的条件，醇基团可以转化为离去基团，例如卤素原子或磺酰基氧基，例如烷基磺酰基氧基(例如三氟甲基磺酰基氧基) 或芳基磺酰基氧基(例如对-甲苯磺酰基氧基)。例如，醇可以与亚硫酰氯在卤代烃(例如二氯甲烷)中反应，得到相应的氯化物。在该反应中也可以使用碱(例如三乙胺)。
在另一个实例中，在溶剂(如四氢呋喃)中、在膦(如三苯基膦)和活化剂 (如二乙基-、二异丙基-或二甲基-偶氮二羧酸酯)存在下，醇、酚或酰胺基团可以通过使得苯酚或酰胺与醇的偶联而烷基化。或者，可以通过采用适当的碱(例如氢化钠)去质子化，随后加入烷基化剂(例如烷基卤)来实现烷基化。
任选在低温下，例如约-78℃，在溶剂如四氢呋喃中，通过采用碱(例如锂碱，如正丁基锂或异丁基锂)处理，然后用亲电子试剂猝灭以引入需要的取代基，可以使得化合物中的芳族卤素取代基进行卤素-金属交换。因此，例如，可以通过使用N,N-二甲基甲酰胺作为亲电子试剂引入甲酰基。或者芳族卤素取代基可以经过金属(例如钯或铜)催化的反应，从而引入例如酸、酯、氰基、酰胺、芳基、杂芳基、烯基、炔基、硫代或氨基取代基。可以采用的适当的方法包括由Heck、Suzuki、Stille、Buchwald或Hartwig描述的那些方法。
芳族卤素取代基也可以经过亲核置换，随后与适当的亲核试剂(如胺或醇)反应。有利的是，此类反应可以在微波照射存在下在升高的温度下进行。
分离方法
在每个示例性流程中，将反应产物彼此分离或从原料中分离可能是有益的。通过本领域常用的技术将每个步骤或一系列步骤的需要产物分离或纯化(在下文中分离)为期望的均匀程度。通常，这种分离涉及多相萃取、从溶剂或溶剂混合物中结晶或研磨、蒸馏、升华或色谱法。色谱法可能涉及许多方法，包括例如：反相和正相；体积排阻；离子交换；超临界流体；高、中和低压液相色谱方法和装置；小规模分析(small scale analytical)；模拟移动床(SMB)和制备性薄层或厚层色谱，以及小规模薄层和快速色谱技术。
另一类分离方法包括用选择的试剂处理混合物，以使其与所需产物、未反应原料、反应副产物等结合或使其分离。此类试剂包括吸附剂例如活性炭、分子筛、离子交换介质等。或者，所述试剂在碱性物质的情况下可以为酸，在酸性物质的情况下可以为碱，结合试剂例如抗体、结合蛋白、选择性螯合剂如冠醚、液/液离子萃取试剂(LIX)等。
适当的分离方法的选择取决于所涉及材料的性质。典型的分离方法包括蒸馏和升华中的沸点和分子量、色谱法中极性官能团的存在或不存在、材料在多相萃取中酸性和碱性介质中的稳定性等。本领域技术人员可以应用最有可能实现所需分离的技术。
根据其物理化学性质的差异，非对映异构体混合物可以通过本领域技术人员熟知的方法例如通过色谱法或分步结晶分离成它们各自的非对映异构体。对映体可以如下分离：通过与适当的光学活性化合物(例如手性助剂，如手性醇或Mosher酰氯)反应，将对映异构体混合物转化为非对映异构体混合物，分离非对映异构体并将单一的非对映异构体转化(例如水解)为相应的纯对映体。此外，本发明的某些化合物可以是阻转异构体(例如取代的联芳基化合物)，其也被认为是本发明的一部分。对映体也可以通过使用手性HPLC柱或超临界流体色谱法分离。
基本上不含其立体异构体的单一立体异构体(例如对映异构体)可以通过使用拆分外消旋混合物来获得，例如采用光学活性的拆分剂形成非对映异构体的方法(Eliel,E.和Wilen,S.,Stereochemistry of Organic Compounds(有机化合物的立体化学),JohnWiley&Sons,Inc.,New York, 1994；Lochmuller,C.H.,J.Chromatogr.,113(3):283－302(1975))。本发明的手性化合物的外消旋混合物可通过任何适当的方法分离(separated)和分开(isolated)，包括：(1)与手性化合物形成离子非对映体盐并通过分步结晶或其它方法分离，(2)与手性衍生剂形成非对映体化合物，分离非对映异构体并转化为纯的立体异构体，和(3)在手性条件下直接分离基本上纯的或富集的立体异构体。参见：DrugStereochemistry,Analytical Methods and Pharmacology(药物立体化学、分析方法和药理学),Irving W.Wainer,Ed., Marcel Dekker,Inc.,New York(1993)。
非对映体盐可以通过对映体纯的手性碱(例如马钱子碱、奎宁、麻黄碱、士的宁、α-甲基-β-苯基乙基胺(苯丙胺)等)与携有酸官能团的不对称化合物 (如羧酸和磺酸)反应而形成。可以通过分步结晶或离子色谱诱导非对映体盐分离。为了分离氨基化合物的光学异构体，加入手性羧酸或磺酸(如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸)可以形成非对映体盐。
或者，待拆分的底物与手性化合物的一种对映体反应以形成非对映异构体对(Eliel,E.和Wilen,S.,Stereochemistry of Organic Compounds(有机化合物的立体化学),John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994,第322页)。非对映异构体化合物可以如下形成：使不对称化合物与对映异构体纯的手性衍生试剂(如薄荷基衍生物)反应，随后分离非对映异构体并水解，得到纯的或富集的对映异构体。确定光学纯度的方法涉及在外消旋混合物的碱或Mosher酯(α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基乙酸酯)存在下制备手性酯(Jacob,J.Org.Chem.47:4165(1982))，例如薄荷酯，如(-)氯甲酸薄荷酯，分析NMR 光谱中两种阻转异构对映异构体或非对映异构体的存在。阻转异构化合物的稳定的非对映异构体可以根据用于分离阻转异构的萘基-异喹啉的方法 (WO96/15111，引入本文作为参考)通过正相和反相色谱进行分离。通过方法(3)，两种对映体的外消旋混合物可以通过使用手性固定相的色谱法分离 (Chiral Liquid Chromatography(手性液相色谱)W.J.Lough,Ed., Chapmanand Hall,New York,(1989)；Okamoto,J.of Chromatogr. 513:375-378(1990))。富含或纯化的对映异构体可以通过用于区分具有不对称碳原子的其它手性分子的方法来区分，例如旋光性和圆二色性。手性中心和对映体的绝对立体化学可以通过X-射线晶体学确定。
用于合成它们的位置异构体和中间体可以通过表征方法如NMR和分析型HPLC观察测定。对于互变能垒足够高的某些化合物，E和Z异构体可以例如通过制备型HPLC分离。
药用组合物和给药
与本发明有关的化合物为JAK激酶抑制剂，例如JAK1抑制剂，可用于治疗多种疾病，例如炎性疾病如哮喘。
因此，另一个实施方案提供了药物组合物或含有本发明化合物例如式 (00A)化合物或其可药用的盐以及可药用的载体、稀释剂或赋形剂的药物，还提供了使用本发明化合物制备此类组合物和药物的方法。
在一个实例中，式(00A)化合物或其可药用的盐可以于环境温度下、在适当的pH下以及以期望的纯度通过与生理学上可接受的载体(即，在用于盖仑制剂给药形式的剂量和浓度下对接受者是无毒的)混合而配制。制剂的 pH主要取决于具体用途和化合物的浓度，但通常在约3至约8的范围内。在一个实例中，式(00A)化合物或其可药用的盐在pH 5的乙酸盐缓冲液中配制。在另一个实施方案中，本发明的化合物例如式(00A)的化合物是无菌的。化合物可以例如以固体或无定形组合物、冻干制剂或水溶液的形式储存。
组合物以符合良好医疗实践的方式配制、给药和施用。在本文中考虑的因素包括被治疗的具体病症、被治疗的具体哺乳动物、个体患者的临床状况、疾病的原因、药物传递的部位、给药方法、给药时间表以及医师已知的其它因素。
应当理解，对于任何特定患者的具体剂量水平取决于多种因素，包括使用的具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄率、药物组合以及正在接受治疗的具体疾病的严重程度。如制药领域所要求的，最佳剂量水平和给药频率将通过临床试验确定。通常，人口服给药的日剂量范围在约0.001mg至约100mg/kg体重的范围内，通常为0.01mg至约50mg/kg，例如0.1至10mg/kg，单次或分次剂量给药。通常，人吸入给药的日剂量范围在约0.1μg至约1mg/kg体重的范围内，优选0.1μg至50μg/kg，以单剂量或分剂量给药。另一方面，在某些情况下可能有必要使用这些限定以外的剂量。
本发明的化合物，例如式(00A)化合物或其可药用的盐可以通过任何适当的模式给药，包括口服、局部(包括口腔和舌下)、直肠、阴道、透皮、肠胃外、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内、吸入和硬膜外以及鼻内途径给药，如果需要局部治疗，病灶内给药。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。在某些实施方案中，采用吸入给药。
本发明化合物例如式(00A)化合物或其可药用的盐可以以任何方便的给药形式给药，例如片剂、粉剂、胶囊剂、锭剂、颗粒剂、溶液剂、分散剂、悬浮液、糖浆剂、喷雾剂、汽化剂(vapors)、栓剂、凝胶剂、乳剂、贴剂等。此类组合物可以含有药物制剂中常规的组分，例如稀释剂(例如葡萄糖、乳糖或甘露醇)、载体、pH调节剂、缓冲剂、甜味剂、填充剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、芳香剂、矫味剂、其它已知添加剂以及其它活性剂。
适当的载体和赋形剂是本领域技术人员众所周知的，详细描述于例如 Ansel,Howard C.等,Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(Ansel药物剂型和药物传递系统)。Philadelphia: Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.等Remington: The Science and Practice of Pharmacy(药物科学和实践)。Philadelphia: Lippincott,Williams&Wilkins,2000；和Rowe,RaymondC.Handbook of Pharmaceutical Excipients(药用辅料手册)。Chicago,PharmaceuticalPress,2005。例如，载体包括溶剂、分散介质、包衣剂、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如抗菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、盐、防腐剂、药物、药物稳定剂、凝胶剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、矫味剂、染料等物质及其组合，如本领域技术人员已知的(参见例如，Remington's Pharmaceutical Sciences(雷明顿药物科学),第1289－ 1329页,1990)。除了任何与活性成分不相容的常规载体之外，还应当考虑其在治疗或药物组合物中的用途。示例性的赋形剂包括磷酸二钙、甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁或其组合。药物组合物可以包含不同类型的载体或赋形剂，这取决于其是以固体、液体或气雾剂形式给药，以及对于此类给药途径是否需要无菌。
例如，用于口服给药的片剂和胶囊剂可以是单位剂量形式，可以含有常规赋形剂，例如粘合剂，如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、黄蓍胶或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇或甘氨酸；压片润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅；崩解剂，如马铃薯淀粉；或可接受的润湿剂，如月桂基硫酸钠。片剂可根据常规药学实践中众所周知的方法进行包衣。口服液体制剂可以是例如水性或油性混悬剂、溶液剂、乳剂、糖浆剂或酏剂的形式，或者可以作为干燥产品，在使用前用水或其它适当的载体重新配制。此类液体制剂可以含有常规添加剂，例如助悬剂，如山梨糖醇、糖浆、甲基纤维素、葡萄糖糖浆、明胶氢化的食用脂肪；乳化剂，例如卵磷脂，脱水山梨糖醇油酸酯或阿拉伯胶；非水载体(其可以不含食用油)，例如杏仁油、分馏的椰子油、油性酯如甘油、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，如果需要时，还包含常规矫味剂或着色剂。
对于皮肤局部给药，可将化合物制成霜剂、洗剂或软膏。可用于药物的霜剂或软膏制剂是本领域公知的常规制剂，例如如药剂学标准教科书如 British Pharmacopoeia中所述。
本发明的化合物，例如式(00A)化合物或其可药用的盐，也可配制成用于吸入的剂型，例如作为鼻腔喷雾剂或者干粉或气雾吸入剂。对于通过吸入的传递，化合物通常为微粒形式，其可以通过各种技术制备，包括喷雾干燥、冷冻干燥和微粉化。采用例如压力驱动式喷射雾化器或超声波雾化器(例如通过使用抛射剂驱动的计量气溶胶)或无抛射剂的微粉化化合物的给药(例如吸入胶囊或其它“干粉”传递系统)，可以实现气雾剂的产生。
举例来说，本发明的组合物可制备成悬浮液，用于从喷雾器传递或作为液体抛射剂中的气雾剂传递，例如用于加压计量吸入器(PMDI)中。适用于PMDI的抛射剂是本领域技术人员已知的，包括CFC-12、HFA-134a、 HFA-227、HCFC-22(CCl2F2)和HFA-152(CH4F2和异丁烷)。
在某些实施方案中，本发明的组合物为干粉形式，用于使用干粉吸入器(DPI)传递。已知有许多类型的DPI。
用于给药传递的微粒可以用辅助传递和释放的赋形剂配制。例如，在干粉制剂中，微粒可以与有助于从DPI进入肺中的较大的载体颗粒一起配制。适当的载体颗粒是已知的，包括乳糖颗粒；它们可以具有例如大于90μm 的总气体动力学中位数直径。
在气溶胶类制剂的情况下，一个实例为：
本发明化合物＊ 24mg/罐
卵磷脂,NF Liq.Conc. 1.2mg/罐
三氯氟甲烷,NF 4.025g/罐
二氯二氟甲烷,NF 12.15g/罐.
＊例如式(00A)化合物或其可药用的盐。
根据所使用的吸入器系统，化合物如式(00A)化合物或其可药用的盐可以如所述进行给药。除了化合物之外，给药形式可以另外含有如上所述的赋形剂，或者含有例如推进剂(例如在计量气雾剂的情况下为Frigen)、表面活性物质、乳化剂、稳定剂、防腐剂、调味剂、填充剂(例如粉末吸入器中的乳糖)，或者如果适当的话，含有其它活性化合物。
为了吸入的目的，许多系统可以使用，其可以产生和施用最佳粒度的气雾剂，采用适合于患者的吸入技术。除了使用适配器(隔器，膨胀器)和梨形容器(例如
Figure BDA0001692491180000661
)以及放射喷雾的自动设备
Figure BDA0001692491180000662
外，对于计量气溶胶而言，在使用粉末吸入器的情况下，有多种技术解决方案可供选择(例如
Figure BDA0001692491180000663
或例如如美国专利号5,263,475中所述的吸入器，引入本文作为参考)。另外，本发明的化合物例如式(00A)的化合物或其可药用的盐可以在多室装置中传递，从而可以传递组合药物。
化合物如式(00A)化合物或其可药用的盐也可以在无菌介质中经肠胃外给药。取决于使用的载体和浓度，化合物可以悬浮或溶解在载体中。有利的是，辅助剂例如局部麻醉剂、防腐剂或缓冲剂可以溶解在载体中。
靶向吸入药物传递
最近综述了通过局部(吸入)给药传递至肺部的药物的优化(Cooper,A. E.等，Curr.Drug Metab.2012,13,457－473)。由于传递装置的局限性，吸入药物的剂量在人体中很可能较低(约<1mg/天)，这需要高度有效的分子。对于必须要通过干粉吸入传递的化合物，还需要能够产生晶体形式的化合物，其可以微粉化至1－5μm的大小。此外，该化合物需要在指定的时间内在肺中维持足够的浓度，以便于能够发挥期望的持续时间的药理学作用，对于其中不希望产生全身性抑制的所述靶点的药理学靶点具有较低的全身暴露。肺对较大的分子(蛋白质，肽类)以及伴有短肺半衰期的小分子具有固有的高渗透性，因此有必要通过修饰这些化合物的一或多种特征以减弱肺吸收速率：使得膜渗透性最小化、降低溶出度或者向化合物中引入一定程度的碱性以增强与富含磷脂的肺组织的结合或者通过酸性亚细胞区室如溶酶体(pH 5)捕获。因此，在某些实施方案中,本发明化合物具有一或多个这些特征。
JANUS激酶抑制剂的治疗方法和用途
本发明化合物如式(00A)化合物或其可药用的盐能够抑制Janus激酶如JAK1激酶的活性。例如，式(00A)的化合物或其可药用的盐可以通过 JAK1激酶以及STAT介导的细胞因子的产生而抑制信号转导子和转录激活子(STATs)的磷酸化。本发明的化合物可用于通过细胞因子途径抑制细胞中JAK1激酶活性，所述途径例如IL-6、IL-15、IL-7、IL-2、IL-4、IL-9、 IL-10、IL-13、IL-21、G-CSF、IFNα、IFNβ或IFNγ的途径。因此，在一个实施方案中，提供了使细胞与式(00A)化合物或其可药用的盐接触以抑制细胞中的Janus激酶活性(例如JAK1活性)的方法。
所述化合物可用于治疗由异常IL-6、IL-15、IL-7、IL-2、IL-4、 IL9、IL-10、IL-13、IL-21、G-CSF、IFNα、IFNβ或IFNγ细胞因子信号导致的免疫性疾病。
因此，一个实施方案包括式(00A)化合物或其可药用的盐，用于治疗。
在某些实施方案中，提供了式(00A)的化合物或其可药用的盐在治疗炎性疾病中的用途。还提供了式(00A)化合物或其可药用的盐在制备用于治疗炎性疾病(例如哮喘)的药物中的用途。还提供了用于治疗炎性疾病如哮喘的式(00A)化合物或其可药用的盐。
另一个实施方案包括预防、治疗或减轻疾病或病症(例如哮喘)严重程度的方法，所述疾病或病症响应于患者中的Janus激酶活性(例如JAK1激酶活性)的抑制。该方法可以包括给予患者治疗有效量的式(00A)化合物或其可药用的盐的步骤。在一个实施方案中，响应于Janus激酶(例如JAK1 激酶)抑制的疾病或病症为哮喘。
在一个实施方案中，所述疾病或病症是癌症、中风、糖尿病、肝肿大、心血管疾病、多发性硬化、阿尔茨海默病、囊性纤维化、病毒性疾病、自身免疫性疾病、动脉粥样硬化、再狭窄、牛皮癣、类风湿性关节炎、炎性肠病、哮喘、过敏性疾病、炎症、神经疾病、激素相关疾病、与器官移植相关的病症(例如移植排斥)、免疫缺陷疾病、破坏性骨病、增生性疾病、感染性疾病、与细胞死亡相关的病症、凝血酶诱导的血小板聚集、肝脏疾病、涉及T细胞活化的病理性免疫疾病、CNS疾病或骨髓增生性疾病。
在一个实施方案中，炎性疾病为类风湿性关节炎、牛皮癣、哮喘、炎性肠病、接触性皮炎或迟发型超敏反应。在一个实施方案中，自身免疫性疾病为类风湿性关节炎、狼疮或多发性硬化症。
在一个实施方案中，所述癌症为下列癌症：乳房癌、卵巢癌、子宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、阴茎癌、泌尿生殖道癌、精原细胞瘤癌、食道癌、喉癌、胃(gastric)癌、胃(stomach)癌、胃肠癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、滤泡癌、黑素瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌、肺鳞状细胞癌、结肠癌、胰腺癌、甲状腺癌、乳头状癌、膀胱癌、肝癌、胆道癌、肾癌、骨癌、骨髓疾病、淋巴样疾病、毛细胞癌、口腔和咽喉(口腔)癌、唇癌、舌癌、口癌、唾液腺癌、咽癌、小肠癌、结肠癌、直肠癌、肛门癌、肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、大肠癌、子宫内膜癌、子宫癌、脑癌、中枢神经系统癌、腹膜癌、肝细胞癌、头癌、颈癌、霍奇金病或白血病。
在一个实施方案中，所述疾病为骨髓增生性疾病。在一个实施方案中，所述骨髓增生性疾病为真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化或慢性粒骨髓性白血病(CML)。
另一个实施方案包括式(00A)化合物或其可药用的盐在制备用于治疗本文所述疾病(例如炎性病症、免疫学疾病或癌症)的药物中的用途。在一个实施方案中，本发明提供了通过靶向抑制JAK激酶如JAK1治疗如本文所述的疾病或病症(例如炎性病症、免疫学疾病或癌症)的方法。
组合治疗
所述化合物可以单独使用或与其它治疗药物组合使用。药物组合物或给药方案的第二化合物通常对本发明化合物具有补充活性，这样使得它们不会产生相互不利地影响。这些药物适当的以对预期目的有效的量组合存在。这些化合物可以在单一的药物组合物中一起给药或分别给药，当分别给药时，可以同时或按顺序给药。此类按顺序给药在时间上可能是接近或较远的。
例如，其它化合物可以与式(00A)化合物或其可药用的盐组合用于预防或治疗炎性疾病如哮喘。用于组合疗法的适当的治疗药物包括但不限于：腺苷A2A受体拮抗剂；抗感染药；非甾体类糖皮质激素受体(GR受体)激动剂；抗氧化剂；β2肾上腺素受体激动剂；CCR1拮抗剂；趋化因子拮抗剂(非CCR1)；皮质类固醇；CRTh2拮抗剂；DP1拮抗剂；甲酰肽受体拮抗剂；组蛋白脱乙酰酶活化剂；氯通道hCLCA1阻断剂；上皮细胞钠通道阻断剂(ENAC阻断剂)；细胞间粘附分子1阻断剂(ICAM阻断剂)；IKK2 抑制剂；JNK抑制剂；环氧合酶抑制剂(COX抑制剂)；脂氧合酶抑制剂；白三烯受体拮抗剂；双向β2肾上腺素能受体激动剂/M3受体拮抗剂(MABA 化合物)；MEK-1抑制剂；髓过氧化物酶抑制剂(MPO抑制剂)；毒蕈碱拮抗剂；p38MAPK抑制剂；磷酸二酯酶PDE4抑制剂；磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂(PI3-激酶δ抑制剂)；磷脂酰肌醇3-激酶γ抑制剂(PI3-激酶γ抑制剂)；过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂(PPARγ激动剂)；蛋白酶抑制剂；视黄酸受体调节剂(RARγ调节剂)；他汀类药物；血栓素拮抗剂；TLR7受体激动剂；或血管扩张剂。
另外，式(00A)化合物或其可药用的盐可以与下列药物组合：(1)皮质类固醇类，例如二丙酸阿氯松、阿洛米松、二丙酸倍氯米松、布地奈德、丙酸布替可特、biclesonide、丙酸氯倍他索(blobetasol propionate)、异丁酰基环索奈德、地塞米松、二氯丙烯酸双氯乙酸酯、醋酸氟轻松、糠酸氟替卡松、丙酸氟替卡松、依碳酸氯替泼诺(局部用)或糠酸莫米松；(2)β2-肾上腺受体激动剂，例如柳丁胺醇、沙丁胺醇、特布他林、非诺特罗、比托洛尔、卡比特罗、克仑特罗、吡布特罗、林莫特罗、特布他林、曲托喹酚、妥布特罗；长效β2-肾上腺素受体激动剂，例如异丙喘宁(Metaproterenol)、异丙肾上腺素(isoproterenol)、异丙肾上腺素(isoprenaline)、沙美特罗、茚达特罗、福莫特罗(包括富马酸福莫特罗)、阿福特罗、卡莫特罗、阿贝特罗、三氟甲磺酸维兰特罗、奥达特罗；(3)皮质类固醇/长效β2激动剂组合产品，例如沙美特罗/丙酸氟替卡松(
Figure BDA0001692491180000701
也以
Figure BDA0001692491180000702
销售)、福莫特罗/布地奈德
Figure BDA0001692491180000703
福莫特罗/丙酸氟替卡松
Figure BDA0001692491180000704
福莫特罗/环索奈德、福莫特罗/糠酸莫米松、茚达特罗/糠酸莫米松、三氟甲磺酸维兰特罗/糠酸氟替卡松或阿福特罗/环索奈德；(4)抗胆碱能药，例如毒蕈碱-3(M3)受体拮抗剂，例如异丙托溴铵、噻托溴铵、aclidinium (LAS-34273)、格隆溴铵、乌美溴铵(umeclidinium bromide)；(5)M3-抗胆碱能/β2-肾上腺素受体激动剂组合产品，例如维兰特罗/乌美溴铵
Figure BDA0001692491180000705
Figure BDA0001692491180000706
奥达特罗/噻托溴铵、格隆溴铵/茚达特罗((
Figure BDA0001692491180000707
也以
Figure BDA0001692491180000708
销售)、氢溴酸非诺特罗/异丙托溴铵
Figure BDA0001692491180000709
硫酸沙丁胺醇 /异丙托溴铵
Figure BDA00016924911800007010
富马酸福莫特罗/格隆溴铵或阿地溴铵/福莫特罗；(6)双向药理M3-抗胆碱能/β2-肾上腺素受体激动剂，例如batefenterol succinate、AZD-2115或LAS-190792；(7)白三烯调节剂，例如白三烯拮抗剂，例如孟鲁司特、扎鲁司特或普仑司特，或者白三烯生物合成抑制剂，例如齐留通，或LTB4拮抗剂，例如阿米巴特(amelubant)，或FLAP抑制剂，例如fiboflapon、GSK-2190915；(8)磷酸二酯酶-IV(PDE-IV)抑制剂(口服或吸入)，例如罗氟司特、西洛司特、奥曲米斯特(oglemilast)、咯利普兰、替托司特、AVE-8112、雷莫司特(revamilast)、CHF 6001；(9)抗组胺药，例如选择性组胺-1(H1)受体拮抗剂，例如非索非那定、西替利嗪、氯雷他定或阿司咪唑，或双向H1/H3受体拮抗剂，例如GSK835726或 GSK1004723；(10)镇咳药，例如可待因或右美芬沙(dextramorphan)；(11) 化痰剂，例如N-乙酰半胱氨酸或福多司坦；(12)祛痰药/粘膜运动调节剂，例如氨溴索、高渗溶液(例如盐水或甘露醇)或表面活性剂；(13)粘液溶解肽，例如重组人脱氧核糖核酸酶I(dornase-α和rhDNase)或螺杀菌素 (helicidin)；(14)抗生素，例如阿奇霉素、妥布霉素或氨曲南；(15)非选择性COX-1/COX-2抑制剂，例如布洛芬或酮洛芬；(16)COX-2抑制剂，例如塞来昔布和罗非昔布；(17)VLA-4拮抗剂，例如WO97/03094和 WO97/02289中所述的那些，各自引入本文作为参考；(18)TACE抑制剂和 TNF-α抑制剂，例如抗TNF单克隆抗体，例如
Figure BDA0001692491180000711
和CDP-870、 TNF受体免疫球蛋白分子、
Figure BDA0001692491180000712
(19)基质金属蛋白酶抑制剂，例如 MMP-12；(20)人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂，例如BAY-85-8501或 WO2005/026124、WO2003/053930和WO06/082412中所述的那些，各自引入本文作为参考；(21)A2b拮抗剂，例如在WO2002/42298中描述的那些，引入本文作为参考；(22)趋化因子受体功能的调节剂，例如CCR3和 CCR8的拮抗剂；(23)调节其它前列腺素类受体作用的化合物，例如血栓烷 A2拮抗剂；DP1拮抗剂，例如拉罗皮兰(laropiprant)或asapiprant；CRTH2 拮抗剂，例如OC000459、非维匹仑(fevipiprant)、ADC3680或ARRY 502； (24)PPAR激动剂，包括PPARα激动剂(如非诺贝特)、PPARδ激动剂、PPARγ激动剂，例如吡格列酮、罗格列酮和巴格列酮；(25)甲基黄嘌呤类，例如茶碱或氨茶碱、甲基黄嘌呤/皮质类固醇组合，例如茶碱/布地奈德、茶碱/丙酸氟替卡松、茶碱/环索奈德、茶碱/糠酸莫米松和茶碱/倍氯米松二丙酸酯；(26)A2a激动剂，例如EP1052264和EP1241176中描述的那些； (27)CXCR2或IL-8拮抗剂，例如AZD-5069、AZD-4721、danirixin；(28)IL-R 信号调节剂，例如kineret和ACZ 885；(29)MCP-1拮抗剂，例如ABN-912； (30)p38MAPK抑制剂，例如BCT197、JNJ49095397、losmapimod或 PH-797804；(31)TLR7受体激动剂，例如AZD 8848；(32)PI3-激酶抑制剂，例如RV1729或GSK2269557。
在某些实施方案中，式(00A)化合物或其可药用的盐可以与一种或多种另外的药物组合使用，例如抗过度增生药物、抗癌剂、细胞抑制剂、细胞毒性药物、抗炎药物或化疗药物，如美国公开申请号2010/0048557中公开的那些药物，引入本文作为参考。如本领域已知的，式(00A)化合物或其可药用的盐也可以与放射疗法或手术组合使用。
制品
另一个实施方案包括用于治疗对Janus激酶(例如JAK1激酶)的抑制有响应的疾病或病症的制品(例如套盒)。该套盒可以包含：
(a)第一药用组合物，其包含式(00A)化合物或其可药用的盐；和
(b)使用说明书。
在另一个实施方案中，所述套盒还包括：
(c)第二药用组合物，例如包含用于上述治疗的药用组合物，例如用于治疗炎性疾病的药物或化疗药物。
在一个实施方案中，说明书描述了将所述第一和第二药物组合物同时、顺序或分别施用给需要的患者。
在一个实施方案中，第一和第二组合物包含在不同的容器中。在另一个实施方案中，第一和第二组合物包含在相同的容器中。
使用的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器、泡罩包装等。容器可以由多种材料制成，例如玻璃或塑料。该容器包括用于有效治疗疾病的式(00A) 化合物或其可药用的盐，可以具有无菌进入孔(例如该容器可以是具有皮下注射针可刺透的塞子的静脉溶液袋或小瓶)。标签或包装说明书表明该化合物用于治疗所选择的疾病，如哮喘或癌症。在一个实施方案中，标签或包装说明书表明该化合物可用于治疗的疾病。此外，标签或包装说明书可以表明待治疗的患者是具有以过度活跃或异常Janus激酶活性为特征的疾病的患者，如过度活跃或异常的JAK1活性。标签或包装说明书也可以表明该化合物可用于治疗其它疾病。
或者或此外，所述套盒可以进一步包含第二(或第三)容器，其包含可药用的缓冲液，例如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液或葡萄糖溶液。它还可以包括从商业和用户观点来看所需的其它材料，包括其它缓冲液、稀释剂、过滤器、针头和注射器。
为了说明本发明，提供了以下实施例。然而，应该理解，这些实施例并不限制本发明，仅意在提供实施本发明的方法。本领域技术人员应当理解，所描述的化学反应可以容易地适用于制备本发明的其它化合物，用于制备该化合物的替代方法也包含在本发明的范围内。例如，本发明的非示例化合物的合成可以根据本领域技术人员显而易见的变通方法而成功地进行，例如通过利用本领域已知的除了所描述的那些之外的其它适当的试剂，或者通过对反应条件进行常规修改，适当地保护干扰基团。或者，本文公开的或本领域已知的其它反应将被认为适用于制备本发明的其它化合物。
实施例
通用实验细节
除非另有说明，所有溶剂和商业试剂均按原样使用。在通过硅胶色谱纯化产物的情况下，使用手动填充硅胶(Kieselgel 60,220－440目，35－ 75μm)或
Figure BDA0001692491180000731
SPE SiII柱的玻璃柱进行该操作。“Isolute SPE Si柱”是指包含具有平均粒径为50μm和标称
Figure BDA0001692491180000732
孔隙率的不规则颗粒的未键合活化二氧化硅的预填充聚丙烯柱。在使用
Figure BDA0001692491180000733
SCX-2柱的情况下，“
Figure BDA0001692491180000734
SCX-2”是指包含未封端的丙磺酸官能团化的二氧化硅强阳离子交换吸附剂的预填充聚丙烯柱。
方法和LCMS条件
方法A(LCMS15)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×3mM XtimateTM-C18,2.2μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水+0.05％三氟乙酸；溶剂B：乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000735
Figure BDA0001692491180000741
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法B(LCMS30)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×2.1mM XtimateTM-C18,2.6μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水+0.05％三氟乙酸；溶剂B：乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：溶剂A：水/0.05％TFA；溶剂 B：乙腈/0.05％TFA:
Figure BDA0001692491180000742
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法C(LCMS33)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×3mM XtimateTM-C18,2.2μm粒径)，洗脱剂为：溶剂A：水+0.1％甲酸；溶剂 B：乙腈+0.05％甲酸。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000743
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法D(LCMS34)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×3mM Gemini-NX 3μ-C18110A,3.0μm粒径)，洗脱液为：溶剂A:水/5mM NH4HCO3；溶剂B:乙腈。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000751
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法E(LCMS39)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50× 2.1mM XtimateTM-C18,2.7μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水/ 0.1％FA；溶剂B：乙腈/0.1％FA：
Figure BDA0001692491180000752
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法F(LCMS45)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(30× 2.1mM AscentisExpress C18,2.7μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水+ 0.05％三氟乙酸；溶剂B：乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000753
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法G(LCMS45)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×2.1mM XtimateTM-C18,2.7μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水+0.05％三氟乙酸；溶剂B：乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000761
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法H(LCMS45)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×2.1mM XtimateTM-C18,2.7μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水+0.05％三氟乙酸；溶剂B：乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000762
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法I(LCMS53)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50× 3.0mM XtimateTM XB-C18,2.6μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水/ 0.05％TFA；溶剂B：乙腈/0.05％TFA。
Figure BDA0001692491180000763
Figure BDA0001692491180000771
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法J(LCMS34)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×3mm, Gemini-NX 3μ-C18 110A,3.0μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水/5mM NH4HCO3；溶剂B：乙腈。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000772
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法K(LCMS15)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×3mM Shim-Pack XR-ODS,2.2μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水+0.05％三氟乙酸；溶剂B：乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000773
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法L(LCMS34)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×3mm, Gemini-NX 3μ-C18 110A,3.0μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水/5mM NH4HCO3；溶剂B：乙腈。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000774
Figure BDA0001692491180000781
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法M(LCMS34)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×3mm, Gemini-NX 3μ-C18 110A,3.0μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水/5mM NH4HCO3；溶剂B：乙腈。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000782
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法N(LCMS40)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×2.1mM AsentisExpress C18,2.7μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水/0.1％FA；溶剂B：乙腈/0.05％FA:
Figure BDA0001692491180000783
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法O(LCMS53)
实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50× 2.1mM AscentisExpress C18,2.7μm粒径)，洗脱液为：溶剂A：水+ 0.05％三氟乙酸；溶剂B：乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：
Figure BDA0001692491180000791
检测-UV(220和254nm)和ELSD
方法P
在采用ESI作为电离源的配备Agilent MSD(6140)的Agilent 1290 UHPLC质谱仪上进行实验。LC分离采用Phenomenex XB-C18,1.7mm, 50×2.1mm柱，流速为0.4ml/分钟。溶剂A为含有0.1％FA的水，溶剂B 为含有0.1％FA的乙腈。梯度洗脱为：2－98％溶剂B洗脱7分钟，保持 98％B 1.5分钟，随后平衡1.5分钟后。LC色谱柱温度为40℃。在220nm 和254nm收集UV吸收度。
常用缩写列表
ACN 乙腈
Brine 饱和的氯化钠水溶液
CH3OD 氘化甲醇
CDCl3 氘化氯仿
DCM 二氯甲烷
DIEA或DIPEA 二异丙基乙胺
DMA 二甲基乙酰胺
DMAP 4-二甲基氨基吡啶
DMF 二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
DMSO-d6 氘化二甲基亚砜
EDC或EDCI 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
FA 甲酸
HOAc 乙酸
g 克
h 小时
HATU (O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐)
HCl 盐酸
HOBt 羟基苯并三唑
HPLC 高效液相色谱
IMS 工业甲基化酒精
L 升
LCMS 液相色谱-质谱
LiHMDS或LHMDS 六甲基二硅基氨化锂
MDAP 基于质量的自动化纯化
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
min 分钟
mg 毫克
mL 毫升
NMR 核磁共振谱
Pd2(dba)3.CHCl3 三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)-氯仿加合物
PE 石油醚
Prep-HPLC 制备性高效液相色谱
SCX-2 强阳离子交换
TBAF 四-正-丁基氟化铵
THF 四氢呋喃
TFA 三氟乙酸
Xantphos 4,5-二(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨
实施例1
Figure BDA0001692491180000811
N-(3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向4-溴-2-碘酚(282g,943.447mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2000ml)和水 (500mL)溶液中加入2-氯代-2,2-二氟乙酸钠(216g,1.417mol)、Cs2CO3(617g, 1.894mol)。将获得的混合物于120℃搅拌过夜，使其冷却至室温，倒入冰水中(3000ml)。将获得的溶液用乙酸乙酯萃取(3×1500ml)，合并有机层。乙酸乙酯萃取液用盐水洗涤(1000ml)，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯/石油醚(1:10)洗脱，获得300g(91％)的4-溴-1-(二氟甲氧基)-2-碘苯，为黄色油状物。1H NMR(300MHz, CDCl3)δ:(ppm)7.96(dd,J＝5.7Hz,2.4Hz,1H),7.45(dd,J＝8.7Hz,2.4Hz, 1H),7.03(d,J＝8.7Hz,1H),6.39(t,J＝72.9Hz,1H)。
于-70℃、氮气环境中、搅拌下，向4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(100g,410.95mmol)的无水THF(1000mL)溶液中滴加 LiHMDS(490ml,1.0mol/L的THF溶液)。将获得的溶液于-50℃搅拌1h，然后冷却至-70℃。于-70℃滴加ZnCl2(500ml,0.7mol/L的THF溶液)。将获得的溶液温热至室温，于室温下搅拌1h。向该混合物中加入4-溴-1-(二氟甲氧基)-2-碘苯(150g,859.818mmol)、Pd(PPh3)4(24g,20.769mmol)。将获得的溶液回流加热过夜。将获得的混合物真空浓缩。将该反应重复二次。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(1:20)洗脱。总共获得300 g(79％)的5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑，为浅黄色固体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:(ppm) 8.27(s,1H),7.68(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.62(d,J＝2.4Hz,1H),7.19(d,J＝8.4 Hz,1H),6.39(t,J＝72.5Hz,1H),5.44-5.19(m,2H),3.72-3.54(m,2H), 0.94-0.89(m,2H),0.02(s,9H)。
向氮气冲洗并维持惰性环境的1000mL圆底烧瓶中加入甲苯(500ml)、 5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(60g,129.21mmol)、NaSMe(26g,371mmol)、Pd2(dba)3.CHCl3 (6.7g,6.47mmol)、XantPhos(7.5g,12.96mmol)。将获得的混合物于85℃搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。将该反应重复三次。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(1:20)洗脱。合并适当的组分，真空浓缩。总共获得171g的5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑，为黄色固体。LC/MS(方法F,ESI): [M+H]+＝432.1,RT＝1.23min；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:(ppm)8.25(s, 1H),7.42(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.34(d,J＝2.1Hz,1H),7.23(d,J＝8.7Hz, 1H),6.39(t,J＝72.9Hz,1H),5.36-5.22(m,2H),3.74-3.55(m,2H),2.51(s,3H), 0.94-0.90(m,2H),0.02(s,9H)。
向5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(171g,407.851mmol)、乙醇(2000ml)、水(200mL) 的混合物中加入铁粉(228g,4.083mol)、NH4Cl(120g,2.243mol)。将反应混合物在氮气环境中于回流下搅拌3h，冷却至室温。过滤固体。将滤液真空浓缩。将残留物溶于3000ml乙酸乙酯，用1×500ml的盐水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。获得148g的5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-胺，为黄色油状物。LC/MS(方法F,ESI):[M+H]+＝402.1,RT＝0.93min。
向3000-mL 3-颈圆底烧瓶中加入DMA(1500ml)、5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4- 胺(148g)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸(102g)、HATU(325g)、4-二甲基氨基吡啶(4.5g)、DIPEA(142g)。将获得的溶液于60℃搅拌3h，倒入冰水中(2000ml)，用3×2000ml的乙酸乙酯萃取，合并有机层。将获得的混合物用1×1000ml的盐水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(4:1)洗涤，获得200g的N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H- 吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法A, ESI):[M+H]+＝547.2,RT＝1.10min；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ: (ppm)9.63(s,1H),8.77(dd,J＝7.0,1.7Hz,1H),8.73(s,1H),8.51(dd,J＝4.2,1.8Hz,1H),8.38(s,1H),7.50(d,J＝2.4Hz,1H),7.39(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H), 7.30(d,J＝8.7Hz,1H),6.98(dd,J＝6.9,4.2Hz,1H),6.39(t,J＝73.2Hz,1H), 5.46-5.38(m,2H),3.70-3.59(m,2H),2.52(s,3H),0.92-0.85(m,2H),0.03(s, 9H)。
向N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60g)的甲醇 (600mL)溶液中加入浓HCl溶液(300ml)。将混合的溶液于35℃搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。过滤收集固体。将固体悬浮于200ml水中。采用饱和的碳酸氢钠将溶液的pH值调节至8。过滤收集产物，干燥，获得30 g(66％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法G,ESI): [M+H]+＝417.0,RT＝0.80min；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ: (ppm)13.02(s,1H),9.71(s,1H),9.33(dd,J＝6.9,1.5Hz,1H),8.68(dd,J＝4.1, 1.4Hz,1H),8.66(s,1H),8.24(s,1H),7.47-7.36(m,3H),7.27(dd,J＝6.9,4.2 Hz,1H),7.17(t,J＝73.8Hz,1H),2.51(s,3H)。
中间体1
Figure BDA0001692491180000831
2-(3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-4-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)乙酸
向氮气冲洗并维持惰性环境的250mL圆底烧瓶加入饱和的氯化氢的二氧六环溶液(150ml)、5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-硝基 -1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(10.0g,23.2mmol)。将获得的溶液于室温搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。然后将反应物通过加入 300ml碳酸氢钠骤冷。将获得的溶液采用5×500ml的乙酸乙酯萃取，合并有机层，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(30％)洗脱。获得4.01g(57％)的3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-硝基-1H-吡唑，为黄色固体。LC/MS(方法G,ESI): [M+H]+＝302.3,RT＝0.89min。
向100mL圆底烧瓶中加入N,N-二甲基甲酰胺(30ml)、3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-硝基-1H-吡唑(3.50g,11.6mmol)、2-溴乙酸叔- 丁基酯(4.50g,23.1mmol)。随后加入DIPEA(4.50g,34.8mmol)。30将获得的溶液于室温下搅拌3h。然后将反应物通过加入100ml的水/冰骤冷。将获得的溶液用3×200ml的乙酸乙酯萃取，合并有机层，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(20％)洗脱。合并收集的组分，真空浓缩。获得4.01g(83％)的2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-硝基-1H-吡唑-1-基]乙酸叔-丁基酯，为黄色油状物。 LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝416.4,RT＝1.10min。
向100mL圆底烧瓶中加入乙醇(30ml)、水(5ml)、2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-硝基-1H-吡唑-1-基]乙酸叔-丁基酯(1.00g, 2.41mmol)、Fe(1.35g,24.2mmol)、NH4Cl(640mg,12.0mmol)。将获得的溶液于95℃在油浴中搅拌2h。过滤固体。将获得的混合物真空浓缩。将残留物溶于200ml的EtOAc。将获得的混合物用1×100ml的盐水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。获得800mg(86％)的2-[4-氨基-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-1-基]乙酸叔-丁基酯，为黄色油状物。LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝386.1,RT＝0.82min。
向100mL 3-颈圆底烧瓶中加入DMA(30ml)、2-(4-氨基-3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1H-吡唑-1-基)乙酸叔-丁基酯(2.00g,5.19mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(1.44g,8.83mmol)、HATU(4.59g,8.83mmol)、4-二甲基氨基吡啶(0.06g,0.52mmol)、DIPEA(2.01g,15.6mmol)。将获得的溶液于60℃在油浴中搅拌3h。然后将反应物通过加入200ml的水/冰骤冷。将获得的溶液用3×200ml的乙酸乙酯萃取，合并有机层。将获得的混合物用 1×100ml的盐水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(80％)洗脱。合并收集的组分，真空浓缩。获得2.51g(92.6％)的N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝531.2,RT＝1.06 min。
向100mL圆底烧瓶中加入二氯甲烷(40ml)、2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸叔-丁基酯(1.80g,3.39mmol)、三氟乙酸(20ml)。将获得的溶液于室温下搅拌5h。将获得的混合物真空浓缩。然后将反应物通过加入50ml水骤冷。过滤收集固体。获得1.11g(68％)的2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸，为黄色固体。LC/MS (方法A,ESI):[M+H]+＝475.1,RT＝0.81min；1H NMR(300MHz, DMSO-d6)δ(ppm)9.77(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.73-8.65(m,2H), 8.39(s,1H),7.49-7.38(m,3H),7.31(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),7.23(t, J＝73.8Hz，1H),5.07(s,2H),2.51(s,3H)。
中间体2
Figure BDA0001692491180000851
2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸
在氮气环境中，向5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(5.01g,10.8mmol)、(丙烷-2-基硫烷基)钠 (3.17g,32.3mmol)的二氧六环(10mL)悬浮液中加入 Pd2(dba)3.CHCl3(557mg,0.538mmol)和XantPhos(623mg,1.08mmol)。将获得的溶液于85℃在油浴中氮气环境中搅拌14h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/石油醚(3/1)洗脱，获得3.79g(77％) 的5-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑，为浅黄色粗品固体。1H-NMR(300 MHz,CDCl3):δ(ppm)8.26(s,1H),7.62-7.58(m,1H),7.49(d,J＝2.1Hz,1H), 7.23(dd,J＝6.6,1.2Hz,1H),6.38(t,J＝73.8Hz,1H),5.37-5.23(m,2H), 3.71-3.54(m,2H),3.42-3.34(m,1H),1.32(d,J＝6.6Hz,6H),0.95-0.86(m,2H), 0.01(s,9H)。
向5-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(3.81g,8.27mmol)的二氯甲烷(24mL)溶液中加入TFA(6.0ml)。将获得的溶液于室温下搅拌2h。将获得的混合物真空浓缩。获得2.98g(粗品)的3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4- 硝基-1H-吡唑，为浅黄色固体。TLC:PE/EtOAC＝2/1,Rf＝0.1。
于室温下，向3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-硝基-1H- 吡唑(2.98g,9.11mmol)和DIPEA(5.71g,44.2mmol)的N,N-二甲基甲酰胺 (30mL)溶液中加入2-溴乙酸叔-丁基酯(5.17g,26.5mmol)。将获得的溶液于此温度下搅拌14h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物溶于 EtOAc(100ml)，将混合物用水和盐水洗涤。将获得的混合物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/石油醚(3/1)洗脱，获得2.64g(64％)的2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-硝基 -1H-吡唑-1-基]乙酸叔-丁基酯，为浅黄色固体。TLC:PE/EtOAC＝4/1, Rf＝0.3。
向2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-硝基-1H-吡唑-1- 基]乙酸叔-丁基酯(2.60g,5.86mmol)的乙醇(30mL)溶液中加入NH4Cl (940mg,17.6mmol)、Fe(1.64g,29.4mmol)和水(3.0ml)。将获得的溶液于90 ℃在油浴中搅拌1h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物悬浮于100ml 的EtOAc中。滤除固体。将滤液用水和盐水洗涤，再经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(1/2)洗脱，获得1.72g(70％)的2-[4-氨基-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1H- 吡唑-1-基]乙酸叔-丁基酯，为浅黄色固体。TLC:PE/EtOAc＝1/1,Rf＝0.1。
向2-[4-氨基-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-1- 基]乙酸叔-丁基酯(1.70g,4.11mmol)和吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(1.01g, 6.19mmol)的DMA(30mL)溶液中加入4-二甲基氨基吡啶(100mg, 0.822mmol)、DIPEA(1.59g,12.3mmol)和PyAOP(3.21g,6.17mmol)。将获得的溶液于45℃在油浴中搅拌14h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物溶于300ml的EtOAc。将获得的混合物用2×100ml的水和1×100ml的盐水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(2/1)洗脱，获得2.05g(87％)的2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基] 乙酸叔-丁基酯，为浅黄色固体。LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝575.3,RT＝ 1.18min。
向2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸叔-丁基酯(2.01g,3.58mmol)的二氧六环 (20mL)溶液中加入氯化氢的二氧六环溶液(20ml,15％w/w)。将获得的溶液于室温下搅拌3h。将获得的混合物真空浓缩。获得1.68g(粗品)的 2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸，为浅黄色固体。LC/MS(方法D,ESI):[M+H]+＝503.2,RT＝1.20min；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.70(s, 1H),9.34(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.69-8.67(m,2H),8.25(s,1H),7.53(dd, J＝8.4,2.4Hz,1H),7.50(d,J＝2.4Hz,1H),7.40(d,J＝8.0Hz,1H),7.28(dd, J＝7.0,4.2Hz,1H),7.25(t,J＝73.6Hz,1H),4.62(s,2H),3.52-3.42(m,1H), 1.22(d,J＝6.8Hz,6H)。
中间体3
Figure BDA0001692491180000881
N-(5-(5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向5-(5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基)-4-硝基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基) 甲基)-1H-吡唑(50.1g,108mmol)的乙醇(2000ml)和水(200mL)溶液中加入 Fe(60.1g,1.07mol)和NH4Cl(28.0g,0.523mol)。将获得的溶液于100℃在油浴中搅拌3h。过滤固体。将滤液真空浓缩。将残留物溶于3000ml的乙酸乙酯。将获得的混合物用1×500ml的盐水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得50.1g的粗品产物5-(5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-胺，为黄色油状物。LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝434.2,RT＝0.93min。
向5-(5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-胺(50.1g,115mmol)的DMA(1500mL)溶液中加入吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酸(32.1g,196.0mmol)、PyAOP(102g,196mmol)、 DMAP(1.41g,11.0mmol)和DIPEA(44.1g,0.341mol)。将获得的溶液于60 ℃在油浴中搅拌3h。然后将反应物通过加入2000ml的水/冰骤冷。将获得的溶液用3×2000ml的乙酸乙酯萃取，合并有机层。将获得的混合物用1 ×1000ml的盐水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(80％)洗脱。合并收集的组分，真空浓缩。将固体与150ml的H2O一起于室温下搅拌。过滤收集固体。空气干燥。获得60.1g(91％)的N-(5-(5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。 LCMS(方法G,ESI):[M+H]+＝579.1&581.1,RT＝1.10min。1H NMR(300 MHz,CDCl3):δ(ppm)9.62(s,1H),8.80(dd,J＝6.9,1.7Hz,1H),8.73(s,1H), 8.53(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.38(s,1H),7.79(d,J＝2.4Hz,1H),7.67(dd, J＝8.8,2.5Hz,1H),7.29(d,J＝1.4Hz,1H),7.00(dd,J＝6.9,4.2Hz,1H),6.43(t, J＝72.6Hz,1H),5.53–5.27(m,2H),3.73–3.50(m,2H),0.88(ddd,J＝9.5,6.4, 4.4Hz,2H),0.00(s,9H)。
中间体4
Figure BDA0001692491180000891
N-[3-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
于室温下，向N-[5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(10.1g,17.3mmol) 的二氯甲烷(200mL)溶液中加入Me3OBF4(2.81g,18.9mmol)。将获得的溶液于室温下搅拌2h。然后向反应混合物中加入EtOH 10ml，将反应混合物搅拌1h。向该溶液中加入5.0ml的HCl(con.)，搅拌1h，将获得的混合物真空浓缩。采用碳酸氢钠(20％)将溶液的pH值调节至8。将获得的溶液用3×300ml的乙酸乙酯萃取，合并有机层，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(80％)洗脱，获得5.5 g(69％)的N-[3-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-基]吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3): δ(ppm)9.86(s,1H),8.80(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.74(s,1H),8.60(dd,J＝4.2, 1.6Hz,1H),8.32(s,1H),7.85(d,J＝2.4Hz,1H),7.58(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.24(d,J＝8.8Hz,1H),7.02(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.49(t,J＝74.0Hz,1H), 4.01(s,3H)。
实施例5
Figure BDA0001692491180000901
N-(3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1-(2-(4-吗啉代哌啶-1-基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在氮气环境中，向2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(700mg,1.48mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(20mL)的溶液中加入EDC.HCl(564mg,2.94mmol)、HOBt(400mg, 2.96mmol)、DIPEA(762mg,5.90mmol)和4-(哌啶-4-基)吗啉(502mg, 2.95mmol)。将产生的溶液于室温下搅拌过夜。加入另外量的EDC.HCl (564mg,2.94mmol)、HOBt(400mg,2.96mmol)和DIPEA(762mg, 5.90mmol)。将产生的溶液于室温下搅拌过夜，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(20/1～5/1)洗脱。合并适当的组分，真空浓缩。残留物通过制备性HPLC进一步纯化：柱,XBridgePrep C18OBD柱, 19＊150mm,5um；流动相，水与10mM NH4HCO3和MeCN(在7min内 20.0％MeCN直到50.0％)；检测器,UV 254nm，收集适当的组分，真空浓缩。残留物在乙酸乙酯和己烷的混合物中重结晶，获得361.5mg(39％)的 N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-[4-(吗啉-4-基)哌啶-1- 基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为灰白色固体。LC/MS(方法A,ESI):[M+H]+＝627.3,RT＝1.47min；1H NMR(400 MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.08(dd,J＝7.1,1.7Hz,1H),8.69-8.53(m,2H), 8.36(s,1H),7.54(d,J＝2.4Hz,1H),7.46(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.36(d,J＝8.7 Hz,1H),7.20(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.75(t,J＝74.1Hz,1H),5.34-5.18(m, 2H),4.57-4.54(m,1H),4.11-4.07(m,1H),3.75-3.65(m,4H),3.25-3.08(m,1H), 2.89-2.69(m,1H),2.62-2.59(m,4H),2.56(s,3H),2.55-2.45(m,1H), 2.03-1.96(m,2H),1.54-1.45(m,2H)。
实施例11
Figure BDA0001692491180000911
(R)-N-(3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1-(2-((四氢呋喃-3-基)氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向氮气冲洗并维持惰性环境的500-mL圆底烧瓶中加入N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺 (5.00g,12.0mmol)、四氢呋喃(150ml)、Cs2CO3(15.7g,48.2mmol,)、1,2-二溴乙烷(45.0g,240mmol)。将反应混合物于80℃搅拌2h，冷却至室温，真空浓缩。粗品产物在3/1的己烷/乙酸乙酯的混合溶剂中重结晶。过滤收集固体。获得5.80g(92％)的N-[1-(2-溴乙基)-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基) 苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法A,ESI):[M+H]+＝525.1,RT＝1.48min.
向氮气冲洗并维持惰性环境的100mL圆底烧瓶中加入CH3CN(25ml)、 N-[1-(2-溴乙基)-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg,0.382mmol)、DIPEA(247mg, 1.91mmol)、(3R)-环氧戊烷(oxolan)-3-胺(100mg,1.15mmol)。将混合的溶液于80℃搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(10/1)洗脱。粗品产物(200mg)通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridge RP18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相A：水与10mM NH4HCO3,流动相B：ACN；(32％B增加至B:64％B,8min)；检测器,UV 254nm。获得27.2mg(13％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-(2-[[(3R)-环氧戊烷-3-基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法A,ESI):[M+H]+＝530.2, RT＝1.46min；1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ(ppm)9.73(s,1H),9.34(dd, J＝6.9,1.8Hz,1H),8.68(d,J＝1.5Hz,1H),8.66(s,1H),8.35(s,1H), 7.46-7.36(m,3H),7.27(dd,J＝6.9Hz,4.2Hz,1H),7.17(t,J＝73.8Hz,1H), 4.24(s,2H),3.74-3.31(m,3H),3.10-3.04(m,2H),3.16-2.96(m,2H),2.51(s, 3H),2.01-1.92(m,1H),1.68-1.62(m,1H)。
实施例12
Figure BDA0001692491180000921
(S)-N-(3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1-(1-甲基哌啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向Cs2CO3(1.93g,5.92mmol)、N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(820mg,1.97mmol)的 DMF(12mL)混合物中加入(3R)-3-(甲磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯 (1.10g,3.94mmol)。将获得的溶液于60℃搅拌过夜，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(3/2)和乙酸乙酯洗脱。合并适当的组分，真空浓缩。获得330mg(24％)的3-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基) 苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为浅黄色油状物。TLC:乙酸乙酯,Rf＝0.4。
将(3S)-3-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(330mg,0.550mmol)、二氯甲烷(6.0ml)、三氟乙酸(4.0mL)的混合物于室温下搅拌4h。将获得的混合物真空浓缩。获得400mg(粗品)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[(3S)-哌啶-3-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色油状物。TLC:二氯甲烷/甲醇＝5/1,Rf＝0.4。
将N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[(3S)-哌啶-3-基]-1H- 吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(400mg,0.801mmol)、甲醇(10ml)、甲醛(700mg,37％水溶液)的混合物于室温下搅拌过夜。加入NaBH3CN (202mg,3.214mmol)。将获得的溶液于室温下再搅拌4h，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(20/1－10/1)洗脱。合并适当的组分，真空浓缩。粗品产物通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridge Shield RP18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,水与10mM NH4HCO3和 MeCN(20.0％MeCN直到55.0％MeCN，9min)；检测器,UV 254nm。获得19.5mg(5％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[(3S)-1-甲基哌啶-3-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。 LC/MS(方法H,ESI):[M+H]+＝514.2,RT＝1.37min；1H NMR(300MHz, CD3OD-d4):δ(ppm)9.08(dd,J＝7.1,1.7Hz,1H),8.64(dd,J＝4.2,1.5Hz,1H),8.63(s,1H),8.38(s,1H),7.49-7.43(m,2H),7.33(d,J＝8.7Hz,1H),7.19(dd, J＝7.2,4.2Hz,1H),6.74(t,J＝74.1Hz,1H),4.50-4.36(m,1H),3.28-3.19(m, 1H),2.95-2.83(m,1H),2.52(s,3H),2.50-2.44(m,1H),2.39(s,3H), 2.30-2.10(m,2H),2.04-1.70(m,3H)。
实施例25
Figure BDA0001692491180000931
N-(3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1-(2-(4-((4-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向氮气冲洗并维持惰性环境的100mL圆底烧瓶中加入2-溴-N,N-二甲基乙酰胺(1.10g,6.63mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(30ml)、哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯(1.24g,6.66mmol)、DIPEA(2.58g,20.0mmol)。将获得的溶液于室温下搅拌5h，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(10/1) 洗脱。获得1.61g(89％)的4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯，为浅黄色固体。TLC:MeOH/DCM＝1/5.Rf＝0.4。
将4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯(1.61g,5.90mmol) 的二氯甲烷(20ml)和三氟乙酸(10mL)溶液于室温下搅拌4h。将获得的混合物真空浓缩。获得900mg(粗品)的N,N-二甲基-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺，为黄色油状物。TLC:MeOH/DCM＝1/5,Rf＝0.1。
向TFA盐的N,N-二甲基-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺(1.75g)和4-甲酰基哌啶 -1-甲酸叔-丁基酯(3.27g,15.3mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入NaBH3CN (960mg,15.276mmol)。将获得的溶液于室温下搅拌过夜，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(8％MeOH)洗脱。获得1.31g(35％) 的4-([4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-基]甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为无色油状物。TLC:二氯甲烷/甲醇＝8/1,Rf＝0.4。
向50-mL圆底烧瓶中加入4-([4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-基] 甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(1.20g,3.26mmol)、饱和的HCl二氧六环溶液 (4.0ml)。将获得的溶液于室温下搅拌3h。将获得的混合物真空浓缩。获得 850mg(97％)的N,N-二甲基-2-[4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-基]乙酰胺HCl 盐，为白色固体。
向50-mL圆底烧瓶中加入2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(150mg,0.316mmol)、 N,N-二甲基甲酰胺(20ml)、EDC.HCl(121mg,0.632mmol)。随后加入 HOBt(85.4mg,0.632mmol)。向其中加入DIPEA(164mg,1.27mmol)、N,N- 二甲基-2-[4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-基]乙酰胺HCl盐(170mg)。将混合的溶液于室温下搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用DCM/MeOH(8％MeOH)洗脱。粗品产物通过采用下列条件的 Prep-HPLC进一步纯化：柱,XBridge Prep C18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,ACN/H2O(10mM NH4HCO3)＝18％增加至ACN/H2O(10mM NH4HCO3)＝41％，8min；检测器,UV 254nm，获得3.6mg(2％)的 N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-[4-([4-[(二甲基氨基甲酰基) 甲基]哌嗪-1-基]甲基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a] 嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法A,ESI):[M+H]+＝725.3,RT＝2.37 min；1H NMR(400MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.09(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H), 8.66-8.65(m,2H),8.36(s,1H),7.55(d,J＝2.4Hz,1H),7.45(dd,J＝8.8,2.4Hz, 1H),7.35(d,J＝8.4Hz,1H),7.20(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),6.74(t,J＝74Hz,1H), 5.31-5.17(m,2H),4.53-4.50(m,1H),4.05-4.02(m,1H),3.37-3.33(m,1H), 3.32-3.24(m,2H),3.20-3.15(m,1H),3.11(s,3H),2.95(s,3H),2.77-2.74((m,1H),2.59-2.53(m,10H),2.27-2.25(m,2H),1.92-1.83(m,3H),1.20-1.14(m, 2H)。
实施例46
Figure BDA0001692491180000951
N-(3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1-(2-(4-(甲基(环氧丁烷-3-基)氨基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向1000mL圆底烧瓶中加入哌啶-4-酮盐酸盐(50g,368.753mmol)、二氯甲烷(200ml)、碳酸氢钠(62.2g,0.741mol)。将反应混合物于室温下搅拌4h，反应混合物通过冰浴冷却。向在冰浴中冷却的该冷却的反应混合物中滴加纯2-溴乙酰溴(74.1g,367mmol)。将反应物温热至室温，于室温下搅拌过夜。过滤固体。真空浓缩滤液。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚 (1/1)洗脱。获得23.8g(29％)的1-(2-溴乙酰基)哌啶-4-酮。LC/MS(方法I, ESI):[M+H]+＝220.0,RT＝0.54min。
向500-mL圆底烧瓶中加入N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(10.0g,24.0mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(250ml)、Cs2CO3(15.7g,48.1mmol)、1-(2-溴乙酰基)哌啶-4-酮 (10.5g,47.9mmol)。将获得的溶液于60℃搅拌80min，真空浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯(200ml)、采用水(2×100ml)、盐水(1×100ml)顺序洗涤，干燥并减压浓缩。获得固体11.2g(84％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-氧代哌啶-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。LC/MS(方法I,ESI):[M+H]+＝556.0,RT＝0.92min。
向氮气冲洗并维持惰性环境的50-mL圆底烧瓶中加入N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-氧代哌啶-1-基)乙基]-1H-吡唑-4- 基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(170mg,0.306mmol)、乙醇(8.0ml)、环氧丁烷-3-胺(45.0mg,0.616mmol)、Ti(OiPr)4(177mg,0.623mmol)。将混合物溶液于60℃搅拌3h。将溶液冷却至室温。然后向混合物溶液中加入 AcOH(0.03ml,0.524mmol)和NaBH3CN(39.0mg,0.621mmol)。将获得的溶液于60℃搅拌5h，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(9/1)洗脱。合并适当的组分，真空浓缩。获得107mg(57％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-(2-[4-[(环氧丁烷-3-基)氨基]哌啶-1- 基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法I，ESI):[M+H]+＝613.0,RT＝0.81min。
向氮气冲洗并维持惰性环境的25-mL圆底烧瓶中加入N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-(2-[4-[(环氧丁烷-3-基)氨基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(86.0mg,0.140mmol)、甲醇(5.0ml)、甲醛(186mg,37％水溶液,2.30mmol)、NaBH3CN(13.4mg, 0.213mmol)。将获得的溶液于25℃搅拌5h，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(9/1)洗脱。粗品产物通过采用下列条件的 Prep-HPLC进一步纯化：柱,XBridge Prep C18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,ACN/H2O(10mM NH4HCO3)＝18％增加至ACN/H2O(10mM NH4HCO3)＝41％，8min；检测器,UV 254nm，获得12.4mg(14％)的 N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-(2-[4-[甲基(环氧丁烷-3-基)氨基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法D,ESI):[M+H]+＝627.1,RT＝1.45min；1H NMR (400MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.10(dd,J＝7.2,2.0Hz,1H),8.66-8.65(m, 2H),8.37(s,1H),7.55(d,J＝2.4Hz,1H),7.46(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.36(d, J＝8.8Hz,1H),7.21(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),6.76(t,J＝73.6Hz,1H), 5.34-5.17(m,1H),4.69-4.61(m,5H),4.13-4.09(m,2H),3.21-3.14(m,1H), 2.73-2.67(m,2H),2.54(s,3H),2.30-2.22(m,3H),1.85-1.76(m,2H), 1.58-1.46(m,2H)。
实施例55
Figure BDA0001692491180000971
N-[1-(2-[4-[(3S)-3-氰基哌啶-1-基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
(S)-异构体N-[1-(2-[4-[(3S)-3-氰基哌啶-1-基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺根据同样的方法制备自N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基) 苯基]-1-[2-氧代-2-(4-氧代哌啶-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-甲酰胺和(3S)-哌啶-3-甲腈。LC/MS(方法A,ESI):[M+H]+＝650.3, RT＝1.50min；1H NMR(300MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.07(dd,J＝6.9,1.5 Hz,1H),8.65–8.63(m,2H),8.35(s,1H),7.54(d,J＝2.4Hz,1H),7.44(dd,J＝8.6,2.6Hz,1H),7.34(d,J＝8.4Hz,1H),7.18(dd,J＝6.9,4.2Hz,1H),6.73(t, J＝74.1Hz,1H),5.27(d,J＝16.2Hz,1H),5.17(d,J＝16.8Hz,1H),4.59– 4.56(m,1H),4.08–3.98(m,1H),3.30–3.19(m,1H),2.89–2.85(m,2H),2.77 –2.69(m,5H),2.52(s,3H),1.86–1.50(m,8H)。
实施例58
Figure BDA0001692491180000972
N-[1-(2-[4-[(3R)-3-氰基哌啶-1-基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-氧代哌啶 -1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.00g,1.80mmol)的乙醇(15mL)溶液中加入Ti(OiPr)4(1.02g,3.60mmol)和(3R)-哌啶-3-甲腈 (595mg,5.40mmol)。将获得的溶液于60℃搅拌过夜。然后加入AcOH(0.1ml, 1.75mmol)和NaBH3CN(114mg,1.81mmol)。将获得的溶液于60℃搅拌5h，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用DCM/MeOH(92/8)洗脱。粗品产物(700mg)通过采用下列条件的Prep-HPLC进一步纯化：柱,XBridgeShield RP18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,ACN/H2O(10mM NH4HCO3)＝24％增加至ACN/H2O(10mM NH4HCO3)＝54％，7min；检测器,UV 254nm。获得366.5mg(31％)的N-[1-(2-[4-[(3R)-3-氰基哌啶-1- 基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法A,ESI): [M+H]+＝650.3,RT＝1.51min；1H NMR(400MHz,CD3OD-d4): δ(ppm)8.96(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.53–8.51(m,2H),8.25(s,1H),7.43(d, J＝2.4Hz,1H),7.33(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.24(d,J＝8.8Hz,1H),7.09(dd, J＝7.0,4.2Hz,1H),6.64(t,J＝74.0Hz,1H),5.17(d,J＝16.4Hz,1H),5.06(d, J＝16.4Hz,1H),4.45–4.40(m,1H),4.00–3.87(m,1H),3.07–2.95(m,1H), 2.78–2.45(m,7H),2.41(s,3H),1.76–1.47(m,8H)。
实施例63
Figure BDA0001692491180000981
N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基) 哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-氧代哌啶 -1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(150mg,0.270mmol) 的乙醇(10mL)溶液中加入1-甲基哌嗪(54.1mg,0.539mmol)和Ti(OiPr)4 (156mg,0.549mmol)。将获得的溶液于60℃搅拌2h。然后加入 AcOH(0.031ml,0.524mmol)和NaBH3CN(34.1mg,0.541mmol)。将获得的溶液在搅拌下于60℃再反应2h。然后将反应物通过加入2ml的水骤冷。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(4/1) 洗脱。合并收集的组分，真空浓缩。然后将残留物通过采用下列条件的 Prep-HPLC进一步纯化：柱,XBridge Prep苯基OBD柱,19＊150mm, 5um；流动相,水(0.05％NH3H2O)和ACN(20％ACN直到50.0％，12min 内)；检测器,UV 254nm，获得71.7mg(42％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑 -4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS(方法J,ESI): [M+H]+＝640.3,RT＝2.67min；1H NMR(300MHz,CD3OD-d4): δ(ppm)8.98(dd,J＝6.9,1.5Hz,1H),8.53–8.51(m,2H),8.25(s,1H),7.42(d, J＝2.4Hz,1H),7.33(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.23(d,J＝8.4Hz,1H),7.07(dd, J＝6.9,4.2Hz,1H),6.63(t,J＝74.1Hz,1H),5.16(d,J＝16.2Hz,1H),5.05(d, J＝16.2Hz,1H),4.43–4.40(m,1H),3.96–3.94(m,1H),3.24–3.08(m,1H), 2.64–2.54(m,5H),2.54–2.41(m,8H),2.17(s,3H),1.95–1.80(m,2H),1.55 –1.29(m,2H)。
实施例71
Figure BDA0001692491180000991
N-(3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1-(2-(4-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙氧基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
于室温下、氮气环境中，将氢化钠(1.00g,60％的矿物油分散液, 25.00mmol)分次加入4-羟基哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(5.00g,24.84mmol)的无水THF(25mL)溶液中。氢气溢出停止后，滴加2-溴乙酸乙酯(8.40g, 50.3mmol)。将获得的溶液室温下于搅拌过夜。然后将反应物通过加入水骤冷。将获得的溶液用乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/ 石油醚(1/4)洗脱。获得5.00g(70％)的4-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为无色油状物。TLC:乙酸乙酯/己烷＝1/4,Rf＝0.3。
向100mL圆底烧瓶中加入4-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(5.00g,17.4mmol)、氢氧化钠(3.00g,75.0mmol)、水(20ml)、乙醇(20ml)。将获得的溶液于室温下搅拌2天。将获得的混合物真空浓缩。采用 HCl(3mol/L)将溶液的pH值调节至2。将获得的溶液用乙酸乙酯萃取(2×)，合并有机层，真空浓缩。获得4.00g(89％)的2-([1-[(叔-丁氧基)羰基]哌啶-4- 基]氧基)乙酸，为油状物。TLC:DCM/MeOH＝5/1,Rf＝0.4。
向100mL圆底烧瓶中加入2-([1-[(叔-丁氧基)羰基]哌啶-4-基]氧基)乙酸(2.00g,7.71mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(30ml)、1-甲基哌嗪(1.55g, 15.5mmol)、HATU(5.90g,15.5mmol)、DIPEA(3.99g,30.9mmol)。将获得的溶液于室温下搅拌3h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷洗脱。获得3.00g(粗品)的4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙氧基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为黄色油状物。LC/MS(方法E,ESI): [M+H]+＝342.0,RT＝0.79min。
向100mL圆底烧瓶中加入4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙氧基]哌啶 -1-甲酸叔-丁基酯(3.00g,8.79mmol)、饱和的HCl的二氧六环溶液(10ml)。将混合的溶液于室温下搅拌过夜，真空浓缩。获得3.00g(粗品)需要的产物。 TLC:MeOH/DCM＝1/5,Rf＝0.05。
向50-mL圆底烧瓶中加入2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(300mg,0.632mmol)、 N,N-二甲基甲酰胺(15ml)、1-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-(哌啶-4-基氧基)乙烷-1- 酮(263mg,1.09mmol)、EDC.HCl(243mg,1.27mmol)、HOBt(171mg, 1.27mmol)、DIPEA(327mg,2.53mmol)。将混合的溶液于室温下搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(9/1) 洗脱。粗品产物(300mg)通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱, XBridgePrep RP18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相A：水与10mM NH4HCO3,流动相B：ACN；(18％B增加至40％B，7min内；检测器,UV 254nm。获得90.4mg(20％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-(2-[4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙氧基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-1H- 吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法F, ESI):[M+H]+＝698.4,RT＝2.52min；1H NMR(300MHz,CD3OD-d4): δ(ppm)9.04(dd,J＝7.2,1.5Hz,1H),8.62-8.61(m,2H),8.33(s,1H),7.52(s,1H), 7.41(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.32(d,J＝8.7Hz,1H),7.15(dd,J＝6.9,4.2Hz, 1H),6.72(t,J＝74.1Hz,1H),5.29-5.22(m,2H),4.35-4.12(m,2H), 3.70-3.47(m,9H),2.50(s,3H),2.42-2.30(m,4H),2.24(d,J＝10.2Hz,3H), 1.92-1.79(m,3H),1.59-1.41(m,1H)。
实施例76
Figure BDA0001692491180001011
N-(1-(3-(氰基甲基)-1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向30-mL密封的试管中加入N-[1-[3-(氰基甲基)氮杂环丁烷-3- 基]-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.196mmol)、二氯甲烷(6.0ml)、HCHO(100mg,37％水溶液)。将获得的溶液于室温下搅拌过夜。加入NaBH(OAc)3(63.0mg, 0.297mmol)。将获得的溶液在搅拌下于室温下再反应6h。将获得的混合物真空浓缩。将获得的混合物用水洗涤。将获得的溶液用二氯甲烷萃取，合并有机层，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(95/5)洗脱。粗品产物(100mg)通过采用下列条件的 Prep-HPLC纯化：柱,XBridge Prep C18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,流动相A：水与10mM NH4HCO3,流动相B：CAN，12％B增加至 82％B，8min内；检测器,UV 254nm。获得15.9mg(15％)的N-[1-[3-(氰基甲基)-1-甲基氮杂环丁烷-3-基]-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法 F,ESI):[M+H]+＝525.2,RT＝2.07min；1H NMR(400MHz,DMSO-d6): δ(ppm)9.79(s,1H),9.35(d,J＝6.8,1H),8.70-8.68(m,2H),8.55(s,1H),7.46-7.41(m,2H),7.38-7.30(m,2H),7.19(t,J＝74.0Hz,1H),3.64(d,J＝9.2Hz, 2H),3.59(d,J＝8.8Hz,2H),3.52(s,2H),2.51(s,3H),2.36(s,3H)。
实施例77
Figure BDA0001692491180001021
N-(1-(3-(氰基甲基)氮杂环丁烷-3-基)-3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向100mL圆底烧瓶中加入N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(2g,4.803mmol)、3-(氰基亚甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔-丁基酯(933mg,4.80mmol)、CH3CN(30ml)、 DBU(512mg,3.36mmol)。将获得的溶液于50℃搅拌7h，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(1/1)洗脱。获得1.5g(51％)的 3-(氰基甲基)-3-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔-丁基酯，为浅黄色固体。 LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝611.2,RT＝1.18min。
将3-(氰基甲基)-3-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔-丁基酯(200mg, 0.328mmol)的二氯甲烷(8.0ml)和三氟乙酸(4.0mL)溶液于室温下搅拌5h，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用DCM/MeOH(9/1)洗脱。粗品产物(100mg)通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridge Prep C18 OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,A：水与10mM NH4HCO3,流动相B：ACN,12％B增加至82％B，8min内；检测器,UV 254nm，获得19.8 mg(12％)的N-[1-[3-(氰基甲基)氮杂环丁烷-3-基]-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。 LC/MS(方法F,ESI):[M+H]+＝511.1,RT＝2.03min；1H NMR(400MHz, DMSO-d6):δ(ppm)9.80(s,1H),9.35(d,J＝6.8Hz,1H),8.69(d,J＝3.2Hz,1H),8.68(s,1H),8.55(s,1H),7.47(d,J＝6.4Hz,1H),7.46(s,1H),7.41(d, J＝6.8Hz,1H),7.29(dd,J＝6.8,4.4Hz,1H),7.19(t,J＝73.2Hz,1H),4.05(d, J＝8.8Hz,2H),3.68(d,J＝8.8Hz,2H),3.57(s,2H),2.51(s,3H)。
实施例81
Figure BDA0001692491180001031
N-(3-(2-(二氟甲氧基)-5-(甲硫基)苯基)-1-((1-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将3-氯代丙-1-炔(351mg,4.711mmol)加至N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.00g, 2.40mmol)和Cs2CO3(1.57g,4.81mmol)的DMF(30ml)混合物中。将反应混合物于50℃搅拌3h，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/ 石油醚(3/2)洗脱。合并适当的组分，真空浓缩。获得600mg(55％)的 N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-(丙-2-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基] 吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS(方法B,ESI): [M+H]+＝455.0.RT＝1.62min。
向4-溴哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(1.00g,3.79mmol)的DMF(20mL)溶液中加入NaN3(739mg,11.4mmol)和NaI(113mg,0.754mmol)。将获得的溶液于 60℃搅拌20h，倒入饱和的碳酸氢钠(50ml)中，用乙酸乙酯萃取(3×)，合并有机层。有机萃取液用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(1/19)洗脱。合并适当的组分，真空浓缩。获得620mg(72％)的4-叠氮哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为黄色油状物。 TLC:PE/EA＝4/1,Rf＝0.3。
向50-mL圆底烧瓶中加入N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-(丙-2-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(500mg, 1.10mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(10ml)、4-叠氮哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(125mg, 0.552mmol)、CuI(38.0mg,0.200mmol)、DIPEA(284mg,2.20mmol)。将获得的溶液于25℃搅拌15h，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯洗脱。合并适当的组分，真空浓缩。获得228mg(30％)的4-[4-([3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1- 基]甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为黄色固体。LC/MS (方法I,ESI):[M+H]+＝681.2.RT＝1.52min。
将4-[4-([3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-氨基]-1H-吡唑-1-基]甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯 (200mg,0.294mmol)的甲醇(10ml)和浓盐酸(3.0mL)混合物于25℃搅拌15 h。将获得的混合物真空浓缩。获得220mg(粗品)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[1-(哌啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS(方法D,ESI): [M+H]+＝581.2.RT＝1.41min。
将N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[1-(哌啶-4- 基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺 (193mg,0.332mmol)、环氧已烷-4-酮(133mg,1.33mmol)的DCM(15mL)混合物于25℃搅拌15h。加入NaBH(OAc)3(706mg,3.33mmol)。将获得的溶液于25℃再搅拌4h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(9/1)洗脱。合并收集的组分，真空浓缩。获得51.9 mg(23％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-([1-[1-(环氧已烷 -4-基)哌啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为灰白色固体。LC/MS(方法C,ESI):[M+H]+＝665.0,RT＝1.48 min；1H NMR(300MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.07(dd,J＝7.1,1.7Hz,1H), 8.63(dd,J＝4.2,1.5Hz,1H),8.62(s,1H),8.38(s,1H),8.09(s,1H),7.49(d, J＝2.4Hz,1H),7.43(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.33(d,J＝8.4Hz,1H),7.18(dd, J＝7.2,4.2Hz,1H),6.72(t,J＝74.1Hz,1H),5.52(s,2H),4.64-4.45(m,1H), 4.03-3.98(m,2H),3.45-3.33(m,2H),3.19-3.14(m,2H),2.68-2.54(m,1H), 2.51(s,3H),2.49-2.42(m,2H),2.29-2.06(m,4H),1.86-1.83(m,2H), 1.62-1.56(m,2H)。
实施例101
Figure BDA0001692491180001051
N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在氮气环境中，向N-[5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg, 0.345mmol)的二氧六环(5.0mL)溶液中加入(丙烷-2-基硫烷基)钠(102mg, 1.04mmol)、Pd2(dba)3.CHCl3(31.6mg,0.0305mmol)、XantPhos(39.9mg, 0.0690mmol)。将获得的溶液于100℃氮气环境中搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(1/1)洗脱。获得103mg(52％)的N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基-]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝575.3,RT＝1.18 min。
向N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(103mg, 0.179mmol)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入TFA(3.1ml)。将获得的溶液于室温下搅拌3h，真空浓缩。粗品产物通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridge Prep C18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相, CH3CN/H2O＝20％增加至CH3CN/H2O＝46％，6min内；检测器,UV 254 nm，获得13.6mg(17％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为灰白色固体。LC/MS(方法A,ESI):[M+H]+＝445.2,RT＝1.84min；1HNMR(300MHz,DMSO-d6): δ(ppm)13.04(s,1H),9.68(s,1H),9.33(dd,J＝7.1,1.4Hz,1H),8.68–8.65(m, 2H),8.27(s,1H),7.56–7.53(m,2H),7.37(d,J＝8.4Hz,1H),7.28(dd,J＝7.2, 4.2Hz,1H),7.23(t,J＝73.5Hz,1H),3.50–3.45(m,1H),1.23(d,J＝6.6Hz, 6H)。
实施例129
Figure BDA0001692491180001061
N-(1-[2-[4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向4-氧代哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(1.00g,5.02mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入NaOAc(412mg,5.02mmol)和氮杂环丁烷-3-甲腈盐酸盐(714mg, 6.02mmol)。将混合物于室温下搅拌过夜，然后加入NaBH3CN(315mg, 5.02mmol)。将获得的溶液于室温下搅拌2h，真空浓缩。将残留物溶于 EtOAc，用水和盐水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(95/5)洗脱。获得1.41g(粗品)的4-(3- 氰基氮杂环丁烷-1-基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为白色固体。LC/MS(方法 I,ESI):[M+H]+＝266.4,RT＝0.71min。
向4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(1.41g,5.30mmol) 的二氧六环(4.0ml)溶液中加入HCl的二氧六环溶液(4.0ml,15％w/w)。将获得的溶液于室温下搅拌3h。将获得的混合物真空浓缩。获得1.32g(粗品) 的1-(哌啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲腈盐酸盐，为白色固体。LC/MS(方法G, ESI):[M+H]+＝166.2,RT＝0.17min；1H-NMR(300MHz,CD3OD-d4): δ(ppm)4.52–4.30(m,4H),3.67–3.54(m,4H),3.08(t,J＝12.75Hz,2H),2.39 –2.17(m,2H),1.18–1.69(m,2H)。
向2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(1.11g,2.19mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(7.0mL)溶液中加入EDC.HCl(842mg,4.39mmol)、HOBt(592mg,4.38mmol) 和DIPEA(1131mg,8.75mmol)。将反应混合物搅于室温下拌0.5小时，然后加入1-(哌啶-4-基)氮杂环丁烷-3-甲腈盐酸盐(663mg,3.286mmol)。将获得的溶液于45℃搅拌12h。将获得的溶液用50ml的乙酸乙酯稀释。将获得的混合物用水和盐水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(95/5)洗脱，然后通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridgePrep C18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,水(10mM NH4HCO3)和ACN(28.0％CAN直到42.0％，13min内)；检测器,UV 254/220nm，获得产物在乙醇中结晶，获得419.8mg(30％)的 N-(1-[2-[4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS(方法D,ESI):[M+H]+＝650.3,RT＝1.72min；1H-NMR(300MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.09(dd,J＝7.2,1.8Hz,1H),8.64– 8.62(m,2H),8.34(s,1H),7.67(d,J＝2.4Hz,1H),7.58(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H), 7.35(d,J＝8.4Hz,1H),7.19(dd,J＝6.9,4.2Hz,1H),6.79(t,J＝73.8Hz,1H),5.27–5.20(m,2H),4.24–4.20(m,1H),3.95–3.90(m,1H),3.67–3.51(m, 2H),3.50–3.36(m,4H),3.29–3.17(m,1H),3.05-3.08(m,1H),2.49-2.45(m, 1H),1.90–1.68(m,2H),1.28–1.18(m,8H)。
实施例144
Figure BDA0001692491180001081
N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4- 基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在氮气环境中，向N-[3-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4- 基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(350mg,0.756mmol)的甲苯(10mL)溶液中加入(丙烷-2-基硫烷基)钠(222mg,2.26mmol)、Pd2(dba)3.CHCl3(34.1mg, 0.0331mmol)和XantPhos(34.1mg,0.0591mmol)。将混合的溶液于85℃在油浴中搅拌过夜。将反应重复二次。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚洗脱。粗品产物通过在乙酸乙酯中重结晶纯化，获得356.8mg(52％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。 (方法A,ESI,m/z):[M+H]+＝459.2RT＝2.02min；1H NMR(400MHz, CDCl3):δ(ppm)9.88(s,H),8.79(dd,J＝6.8,1.6Hz,1H),8.74(s,1H),8.59(dd, J＝4.0,1.6Hz,1H),8.32(s,1H),7.72(d,J＝2.4Hz,1H),7.47(dd,J＝8.4,2.4Hz, 1H),7.29(d,J＝2.8Hz,1H),7.02(dd,J＝6.8,4.0Hz,1H),6.50(t,J＝74.4Hz, 1H),4.02(s,3H),3.46–3.39(m,1H),1.31(d,J＝6.4Hz,6H)。
实施例150
Figure BDA0001692491180001082
4-[[1-(2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]甲基]哌嗪-1-甲酸甲酯
于室温下，向2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(200mg,0.398mmol)和4-(哌啶-4- 基甲基)哌嗪-1-甲酸甲酯(192mg,0.796mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL) 溶液中加入EDC.HCl(153mg,0.796mmol)、HOBt(108mg,0.796mmol)、 DIPEA(206mg,1.59mmol)。将获得的溶液于45℃搅拌12h。将获得的溶液用50ml的乙酸乙酯稀释。将获得的混合物水和盐水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯 /THF(90/10)洗脱。粗品产物在1/5的甲醇/异丙基醚中重结晶，获得136.8 mg(47％)的4-[[1-(2-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]甲基]哌嗪-1-甲酸甲酯，为白色固体。LC/MS(方法D,ESI):[M+H]+＝726.4,RT＝1.85min；1H-NMR(300MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.09(dd,J＝6.9,1.8Hz,1H),8.63– 8.61(m,2H),8.34(s,1H),7.67(d,J＝2.1Hz,1H),7.56(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H), 7.35(d,J＝8.4Hz,1H),7.18(dd,J＝6.9,4.2Hz,1H),6.79(t,J＝73.8Hz,1H), 5.26(d,J＝16.5Hz,1H),5.15(d,J＝16.5Hz,1H),5.38–5.07(m,2H),4.53– 4.48(m,1H),4.08–3.98(m,1H),3.68(s,3H),3.56–3.38(m,5H),3..22– 3.15(m,1H),2.79–2.70(m,1H),2.38(t,J＝5.1Hz,4H),2.23(d,J＝6.9Hz, 2H),1.91–1.83(m,3H),1.27(d,J＝6.6Hz,6H),1.22–1.12(m,2H)。
实施例156
Figure BDA0001692491180001091
N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1-([1-[1-(环氧戊烷-3-基)哌啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-甲酰胺
于室温下，向N-[3-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(2.00g,4.45mmol)和Cs2CO3(1.74g,5.34mmol)的N,N- 二甲基甲酰胺(30mL)悬浮液中滴加3-氯代丙-1-炔(400mg,5.37mmol)。将获得的溶液于室温下搅拌12h。将获得的混合物用50ml的乙酸乙酯稀释。获得的混合物用水和盐水洗涤，再经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/乙酸乙酯(4/6)洗脱，获得1.83g(84％)的 N-[3-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(丙-2-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS(方法I,ESI):[M+H]+＝487.1, RT＝1.14min.
于室温下，向4-(甲磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(1.50g,5.37mmol) 的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入叠氮化钠(771mg,11.9mmol)。将获得的溶液于100℃在油浴中搅拌12h。将获得的混合物用100ml的乙酸乙酯稀释。乙酸乙酯溶液用水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。获得1.30g(粗品)的4-叠氮基哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为黄色油状物。粗品产物无需任何进一步纯化可以直接使用。
于室温下、氮气环境中，向N-[3-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(丙-2- 炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(2.00g,4.11mmol)的 N,N-二甲基甲酰胺(80mL)溶液中加入4-叠氮基哌啶-1-甲酸叔-丁基酯 (1.86g,8.22mmol)、CuI(779mg,4.11mmol)和DIPEA(1.06g,8.20mmol)。将获得的溶液于室温下、氮气环境中搅拌12h，用200ml的乙酸乙酯稀释。将获得的混合物用水和盐水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(96/4)洗脱，获得1.02g(35％) 的4-[4-([3-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为棕色固体。 LC/MS(方法G ESI):[M+H]+＝657.2,RT＝0.99min.
在氮气环境中，向4-[4-([3-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a] 嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(300mg,0.420mmol)的甲苯(15mL)溶液中加入(丙烷-2-基硫烷基)钠 (124mg,1.26mmol)、Pd2(dba)3.CHCl3(21.8mg,0.0211mmol)和 XantPhos(24.3mg,0.0419mmol)。将获得的溶液于80℃在油浴中、氮气环境中搅拌12h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(95/5)洗脱，获得273mg(92％)的4-[4-([3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基] 甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为黄色固体。LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝709.4,RT＝1.16min。
于室温下，向4-[4-([3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(273mg,0.385mmol)的二氧六环(5.0mL)溶液中加入HCl的二氧六环溶液(5.0ml,15％,w/w)。将反应混合物搅拌2小时。过滤收集固体。获得257mg(粗品)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1-[[1-(哌啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a] 嘧啶-3-甲酰胺盐酸盐，为黄色固体。LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝609.4, RT＝0.74min。
向N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1-[[1-(哌啶-4- 基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺 (257mg,0.422mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入环氧戊烷-3-酮(145mg, 1.69mmol)和NaOAc(36.1mg,0.442mmol)。将获得的溶液于室温下搅拌4 h。然后一次性加入NaBH(OAc)3(179mg,0.844mmol)。将获得的溶液在搅拌下于室温下再反应12h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(95/5)洗脱。粗品产物(178mg)通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridge Shield RP18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,水(10mM NH4HCO3)和ACN(25.0％ACN直到50.0％，8min内)；检测器,UV 220nm,254nm，获得53.1mg(18％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙烷-2-基硫烷基)苯基]-1-([1-[1-(环氧戊烷-3-基)哌啶-4-基]-1H-1,2,3- 三唑-4-基]甲基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。 LC/MS(方法M,ESI):[M+H]+＝679.4,RT＝2.69min；1H NMR(400MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.10(dd,J＝6.8,1.6Hz,1H),8.65–8.64(m,2H), 8.39(s,1H),8.12(s,1H),7.64(d,J＝2.4Hz,1H),7.57(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H), 7.35(d,J＝8.8Hz,1H),7.22(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.80(t,J＝73.6Hz,1H), 5.54(s,2H),4.68–4.48(m,1H),4.03–3.84(m,2H),3.85–3.61(m,2H),3.54 –3.39(m,1H),3.24–3.02(m,2H),2.97–2.92(m,1H),2.39–2.36(m,2H), 2.23–2.14(m,5H),1.90–1.83(m,1H),1.28(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例159
Figure BDA0001692491180001121
N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-[(1,3-二氟丙烷-2-基)硫烷基]苯基]-1-甲基-1H- 吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
于室温下、氮气环境中，向氢化钠(260mg,10.8mmol)的甲苯(40mL) 悬浮液中滴加三(丙烷-2-基)硅烷硫醇(1.23g,6.47mmol)。将混合物于此温度下搅拌1小时直到混合物变得澄清。然后于室温下、氮气环境中，加入 N-[3-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3- 甲酰胺(2.50g,5.40mmol)、Pd2(dba)3.CHCl3(184mg,0.178mmol)和Xantphos (250mg,0.432mmol)。将获得的溶液于90℃氮气环境中搅拌30min。然后将反应物通过加入50ml的NH4Cl水溶液骤冷。将获得的溶液用100ml的EA 稀释。分离有机层，用3×50ml的水和2×50ml的盐水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(1/1) 洗脱，获得2.35g(76％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-[[三(丙烷-2-基)甲硅烷基] 硫烷基]苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为灰白色固体。TLC:PE/EA＝1/1,Rf＝0.4。
于0℃，向1,3-二氟丙烷-2-醇(102mg,1.04mmol)和DIPEA(134mg, 1.04mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中滴加甲磺酰氯(144mg,1.25mmol)。然后将获得的溶液于室温下搅拌2h，用水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。获得112mg(粗品产物)的1,3-二氟丙烷-2-基三氟甲磺酸盐，为黄色油状物。获得的产物无需任何纯化可以直接使用。
向N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-[[三(丙烷-2-基)甲硅烷基]硫烷基]苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(150mg,0.262mmol)的N,N- 二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入1,3-二氟丙烷-2-基三氟甲磺酸酯(110mg, 0.482mmol)。然后于室温下滴加四丁基氟化铵四氢呋喃溶液(0.26ml,1M的 THF溶液,0.26mmol)。将获得的溶液于此温度下搅拌12h。将获得的溶液用50ml的乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，真空浓缩。粗品产物通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridge Prep C18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,A：水(10mM NH4HCO3)流动相B：ACN；(33％B增加至67％B，9min内；检测器,UV 254nm，获得 13.9mg(11％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-[(1,3-二氟丙烷-2-基)硫烷基]苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS (方法D,ESI):[M+H]+＝495.2,RT＝1.71min；1H NMR(300MHz,DMSO-d6): δ(ppm)9.69(s,1H),9.33(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.68–8.66(m,2H),8.30(s, 1H),7.70–7.66(m,2H),7.41(d,J＝8.4Hz,1H),7.29(dd,J＝6.9,4.2Hz,1H), 7.28(t,J＝73.2Hz,1H),4.70(d,J＝5.7Hz,2H),4.54(d,J＝5.4Hz,2H),3.94(s, 3H),3.89–3.76(m,1H)。
实施例160
Figure BDA0001692491180001131
N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
于室温下、氮气环境中，向氢化钠(310mg,12.9mmol)的甲苯(80mL) 悬浮液中滴加环丙烷硫醇(960mg,12.9mmol)。将获得的悬浮液于此温度下搅拌6h。然后在氮气环境中加入N-[5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺 (5.00g,8.63mmol)、Pd2(dba)3.CHCl3(450mg,0.435mmol)和 XantPhos(500mg,0.864mmol)。将获得的溶液在搅拌下再反应12h，同时在油浴中氮气环境中保持温度于85℃。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/己烷(1/1)洗脱，获得3.87g(78％)的 N-[5-5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS (方法G,ESI):[M+H]+＝573.2,RT＝1.12min。
于室温下，向N-[5-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺 (120mg,0.210mmol)的甲醇(12mL)溶液中加入浓HCl(6ml,12M)。将获得的溶液于室温下搅拌2h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用PE/EA洗脱。产物(150mg)通过采用下列条件的Prep-HPLC进一步纯化：柱,XBridge Shield RP18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相, ACN/H2O(10mM NH4HCO3)＝21％增加至ACN/H2O(10mM NH4HCO3)＝ 50％，9min内；检测器,UV 254nm，获得49.7mg(54％)的N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为灰白色固体。LC/MS(方法N,ESI):[M+H]+＝443.2,RT＝3.12min；1H NMR(400MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.09(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.66– 8.64(m,2H),8.27(s,1H),7.62(d,J＝2.4Hz,1H),7.53(dd,J＝8.8,2.4Hz,1 H),7.36(d,J＝8.8Hz,1H),7.22(dd,J＝6.8,4.4Hz,1H),6.74(t,J＝73.8Hz，1 H),2.31–2.23(m,1H),1.12–1.02(m,2H),0.70–0.64(m,2H)。
实施例163
Figure BDA0001692491180001141
N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(吗啉-4-基)乙基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
于0℃向4-[2-(哌嗪-1-基)乙基]吗啉(500mg,2.51mmol)和DIPEA (81.0mg,0.627mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中滴加2-溴乙酰溴(660mg, 3.27mmol)的DCM(5.0mL)溶液。将获得的溶液于0℃搅拌10min。用盐酸将溶液的pH值调节至2。将获得的溶液用3×50ml的水萃取，合并水层。采用碳酸氢钠将pH调节至8。将获得的溶液用3×100ml的二氯甲烷萃取，合并有机层，用Na2SO4干燥。过滤固体。将获得的混合物真空浓缩，获得745mg(93％)的2-溴-1-[4-[2-(吗啉-4-基)乙基]哌嗪-1-基]乙烷-1-酮，为黄色固体。LC/MS(方法G,ESI):[M+H]+＝322.1,RT＝0.15min.
向N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.226mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入Cs2CO3(147mg,0.451mmol)。然后分次加入2-溴-1-[4-[2-(吗啉-4- 基)乙基]哌嗪-1-基]乙烷-1-酮(360mg,1.12mmol)。将获得的溶液搅于60℃拌6h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷 /甲醇(4/1)洗脱。合并收集的组分，真空浓缩。产物(80mg)通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridge Shield RP18OBD柱,19＊150mm, 5um；流动相,水与10mM NH4HCO3和MeCN(13.0％MeCN直到50.0％， 13min内)；检测器,UV 254nm，获得7.61mg(5％)的N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(吗啉-4-基)乙基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法D,ESI):[M+H]+＝682.3,RT＝1.54min；1H NMR(400MHz,CD3OD-d4): δ(ppm)9.09(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.66–8.65(m,2H),8.37(s,1H),7.65(d, J＝2.4Hz,1H),7.56(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.36(d,J＝8.8Hz,1H),7.21(dd, J＝6.8,4.4Hz,1H),6.75(t,J＝74.0Hz,1H),5.25(s,2H),3.72–3.67(m,8H), 2.61–2.55(m,12H),2.30–2.26(m,1H),1.13–1.08(m,2H),0.70–0.63(m, 2H)。
实施例167
Figure BDA0001692491180001161
N-[1-(2-[4-[(2-氰基-2,2-二甲基乙基)氨基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a] 嘧啶-3-甲酰胺
向N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(700mg,1.58mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入Cs2CO3(1.01g,3.07mmol)。然后分次加入1-(2-溴乙酰基)哌啶-4-酮 (694mg,3.15mmol)。将获得的溶液于60℃在油浴中搅拌2h。将反应混合物冷却。将混合的溶液用100ml的H2O冷却。将获得的溶液用3x100ml 的二氯甲烷萃取，合并有机层，真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇(20/1～10/1)洗脱。合并收集的组分，真空浓缩。获得950mg 的N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-氧代哌啶 -1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。 LC/MS(方法I,ESI):[M+H]+＝582.2,RT＝0.99min。
向N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-氧代哌啶-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(150mg, 0.258mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入3-氨基-2,2-二甲基丙烷腈 (38.1mg,0.387mmol)。将混合的溶液于室温下搅拌过夜。然后加入 NaBH(OAc)3(82.1mg,0.387mmol)。将获得的溶液于室温、在搅拌下再反应2h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用二氯甲烷 /甲醇(10/1)洗脱。合并收集的组分，真空浓缩。粗品产物通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridge Shield RP18OBD柱,19＊150mm, 5um；流动相,水与10mM NH4HCO3和MeCN(15.0％MeCN直到50.0％， 10min内)；检测器,UV 254nm，获得64.2mg(38％)的N-[1-(2-[4-[(2-氰基 -2,2-二甲基乙基)氨基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。 LC/MS(方法K,ESI):[M+H]+＝664.4,RT＝2.66min。1H NMR(300MHz, CD3OD-d4):δ(ppm)9.08(dd,J＝6.9,1.5Hz,1H),8.64–8.62(m,2H),8.35(s, 1H),7.63(d,J＝2.4Hz,1H),7.52(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.34(d,J＝8.7Hz, 1H),7.18(dd,J＝6.9,4.2Hz,1H),6.74(t,J＝74.1Hz,1H),5.33–5.17(m,2H), 4.42–4.28(m,1H),4.08–3.92(m,1H),3.30–3.20(m,1H),3.02–2.89(m,1 H),2.88–2.68(m,3H),2.32–2.20(m,1H),2.08–1.90(m,2H),1.51– 1.25(m,8H),1.15–1.04(m,2H),0.71–0.55(m,2H)。
实施例175
Figure BDA0001692491180001171
N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(环氧丁烷-3-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在氮气环境中，向N-[5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg, 0.345mmol)的甲苯(16mL)溶液中加入Pd2(dba)3.CHCl3(40.1mg, 0.0387mmol)、Xantphos(36.0mg,0.0622mmol)、碳酸钾(143mg,1.04mmol) 和氧杂环丁烷-3-硫醇(156mg,1.73mmol)。将混合的溶液于100℃在油浴中搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/PE(70％EA)洗脱，获得120mg(59％)的N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(环氧丁烷-3-基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4- 基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色油状物。LC/MS(方法G,ESI): [M+H]+＝581.1，RT＝0.99min。
向N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(环氧丁烷-3-基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(120mg, 0.204mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入三氟乙酸(6.0ml)。将混合的溶液于室温下搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。粗品产物(120mg)通过采用下列条件的Prep-HPLC纯化：柱,XBridge PrepPhenyl OBD柱, 19＊150mm,5um；流动相,水(0.05％NH3H2O)和ACN(20.0％ACN直到 50.0％，12min内)；检测器,UV 220nm,254nm。获得18.7mg(20％)的 N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(环氧丁烷-3-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并 [1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法A,ESI):[M+H]+＝459.1， RT＝1.59min；1H NMR(300MHz,CD3OD-d4):δ(ppm)9.08(dd,J＝6.9,1.5 Hz,1H),8.66–8.63(m,2H),8.28(s,1H),7.50–7.36(m,3H),7.19(dd,J＝6.9, 4.2Hz，1H),6.78(t,J＝73.8Hz,1H),5.15–5.01(m,2H),4,62–4.57(m,3H)。
实施例179
Figure BDA0001692491180001181
N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(环氧丁烷-3-基硫烷基)苯基]-1-(2-[[反式-3-羟基环丁基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(环氧丁烷-3-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基] 吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(500mg,1.09mmol)的四氢呋喃(14mL)溶液中加入Cs2CO3(1.42g,4.37mmol)和1,2-二溴乙烷(4.083g,21.7mmol)。将获得的溶液于80℃在油浴中搅拌4.5h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物溶于H2O和二氯甲烷。合并有机层，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得 520mg(84％)的N-[1-(2-溴乙基)-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(环氧丁烷-3-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。 LC/MS(方法A,ESI):[M+H]+＝565.0,RT＝1.39min。
向N-[1-(2-溴乙基)-3-[2-(二氟甲氧基)-5-(环氧丁烷-3-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(520mg,0.920mmol)的 CH3CN(18mL)溶液中加入DIPEA(595mg,4.60mmol)和反式-3-氨基环丁 -1-醇(241mg,2.76mmol)。将混合的溶液于80℃在油浴中搅拌过夜。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用DCM/MeOH(85/15) 洗脱。然后粗品产物通过采用下列条件的Prep-HPLC进一步纯化：柱, XBridgeShield RP18OBD柱,19＊150mm,5um；流动相,ACN/H2O (10mM NH4HCO3)＝12％增加至ACN/H2O(10mM NH4HCO3)＝38％，8 min内；检测器,UV 254nm，获得356.7mg(68％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(环氧丁烷-3-基硫烷基)苯基]-1-(2-[[反式-3-羟基环丁基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法O,ESI):[M+H]+＝572.2,RT＝0.98min。1H NMR(300MHz,CD3OD-d4): δ(ppm)9.10(d,J＝7.2Hz,1H),8.66–8.63(m,2H),8.32(s,1H),7.51(d,J＝2.1 Hz,1H),7.44(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),7.36(d,J＝8.4Hz,1H),7.19(dd,J＝7.2, 4.2Hz,1H),6.80(t,J＝73.8Hz,1H),5.06–5.03(m,2H),4.67–4.52(m,3H), 4.42–4.32(m,3H),3.55–3.45(m,1H),3.05(t,J＝6.2Hz,2H),2.18–2.13(m, 4H)。
实施例193
Figure BDA0001692491180001191
N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(乙基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在氮气环境中，向N-[5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg, 0.345mmol)的甲苯(5mL)溶液中加入Pd2(dba)3.CHCl3(31.6mg, 0.0305mmol)、XantPhos(39.9mg,0.0690mmol)和(乙基硫烷基)钠(145mg, 1.73mmol)。将获得的溶液于90℃在油浴中氮气环境中搅拌14h。将获得的混合物真空浓缩。将残留物上样于硅胶柱，采用乙酸乙酯/石油醚(1/1)洗脱，获得101mg(52％)的N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(乙基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶 -3-甲酰胺，为浅黄色固体。LC/MS(方法A,ESI):[M+H]+＝561.3,RT＝1.77 min。
于室温下，向N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(乙基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(101mg, 0.178mmol)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入CF3COOH(0.51mL)。将获得的溶液于室温下搅拌2h。将获得的混合物真空浓缩。残留物通过采用下列条件的Prep-HPLC进一步纯化：柱,XBridge PrepC18OBD,19＊150mm, 5um；流动相,CH3CN/H2O＝25％增加至CH3CN/H2O＝44％，8min内；检测器,UV 254nm，获得33.3mg(43％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(乙基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。 LC/MS(方法L,ESI):[M+H]+＝431.1,RT＝3.15min；1H NMR(300MHz, CD3OD-d4):δ(ppm)9.09(d,J＝6.9Hz,1H),8.71–8.61(m,2H),8.28(s,1H), 7.54(s,1H),7.48(d,J＝8.7Hz,1H),7.32(d,J＝8.4Hz,1H),7.17(dd,J＝6.6,4.5 Hz,1H),6.76(t,J＝73.7Hz,1H),2.94(q,J＝7.2Hz,2H),1.27(t,J＝7.2Hz, 3H)。
下列代表性的式(I)化合物采用类似于本文流程和实施例中所述方法制备。
Figure BDA0001692491180001201
Figure BDA0001692491180001211
Figure BDA0001692491180001221
Figure BDA0001692491180001231
Figure BDA0001692491180001241
Figure BDA0001692491180001251
Figure BDA0001692491180001261
Figure BDA0001692491180001271
Figure BDA0001692491180001281
Figure BDA0001692491180001291
Figure BDA0001692491180001301
Figure BDA0001692491180001311
Figure BDA0001692491180001321
Figure BDA0001692491180001331
Figure BDA0001692491180001341
Figure BDA0001692491180001351
Figure BDA0001692491180001361
Figure BDA0001692491180001371
Figure BDA0001692491180001381
Figure BDA0001692491180001391
Figure BDA0001692491180001401
Figure BDA0001692491180001411
Figure BDA0001692491180001421
Figure BDA0001692491180001431
Figure BDA0001692491180001441
Figure BDA0001692491180001451
Figure BDA0001692491180001461
Figure BDA0001692491180001471
Figure BDA0001692491180001481
Figure BDA0001692491180001491
Figure BDA0001692491180001501
Figure BDA0001692491180001511
Figure BDA0001692491180001521
Figure BDA0001692491180001531
酶试验
JAK酶试验如下进行：
分离的重组JAK1和JAK2激酶结构域的活性通过采用Caliper
Figure BDA0001692491180001541
technology(Caliper Life Sciences,Hopkinton,MA)监测来源于JAK3的肽(Val-Ala-Leu-Val-Asp-Gly-Tyr-Phe-Arg-Leu-Thr-Thr,采用5- 羧基荧光素在N-末端上进行荧光标记)磷酸化测定。为确定抑制常数(Ki)，将化合物在DMSO中连续稀释，添加至含有纯化酶(1.5nMJAK1或0.2nM JAK2)、100mM HEPES缓冲液(pH7.2)、0.015％Brij-35、1.5μM肽底物、 ATP(25μM)、10mM MgCl2、4mM DTT的50μL激酶反应物，最终DMSO 的浓度为2％。将反应物于22℃在384孔聚丙烯微量板中温育30分钟，然后通过加入25μL含EDTA的溶液(100mM HEPES缓冲液(pH 7.2)、
0.015％Brij-35、150mM EDTA)终止，使得EDTA最终浓度为50mM。在激酶反应终止后，根据制造商说明书采用Caliper
Figure BDA0001692491180001542
3000测定作为总肽底物的一部分的磷酸化产物的比例。然后使用Morrison紧密结合模型测定Ki值(Morrison,J.F.,Biochim.Biophys.Acta.185:269－296(1969)； William,J.W.和Morrison,J.F.,Meth.Enzymol.,63:437－467(1979))，修饰用于ATP-竞争抑制[Ki＝Ki,app/(1+[ATP]/Km,app)]。代表性化合物的数据如表2所示。
在细胞系中如下进行JAK1通路试验：
在设计用于测定JAK1依赖性STAT磷酸化的细胞类试验中测定抑制效能(EC50)。如上所述，通过阻断Jak/Stat信号传导通路而抑制IL-4、IL-13 和IL-9信号传导可以缓解临床前肺部炎症模型中的哮喘症状(Mathew等, 2001,J Exp Med 193(9):1087－1096；Kudlacz等,2008,Eur J.Pharmacol 582(1－3):154－161)。
在一种试验方法中，采用自美国典型培养物保藏中心(American Type CultureCollection(ATCC；Manassas,VA))获得的TF-1人红白血病细胞测定IL-13刺激的下游的JAK1依赖性STAT6磷酸化。在用于测定之前，将TF-1细胞在补充有0.5％活性炭/葡聚糖脱色(stripped)的胎牛血清 (FBS)、0.1mM非必需氨基酸(NEAA)和1mM丙酮酸钠的OptiMEM培养基(Life Technologies,Grand Island,NY)中在缺乏GM-CSF的情况下生长过夜。试验在无血清OptiMEM培养基中在384孔板中进行，每孔使用 300,000个细胞。在第二种测定方法中，在实验前一天，将获自ATCC的 BEAS-2B人支气管上皮细胞以每孔100,000个细胞接种于96孔板。 BEAS-2B试验在完全生长培养基(支气管上皮基础培养基+bulletkit； Lonza；Basel,瑞士)中进行。
试验化合物在DMSO中以1:2系列稀释，然后在即将使用前在培养基中以1:50稀释。将稀释的化合物加入到细胞中，最终的DMSO浓度为 0.2％，于37℃温育30分钟(对于TF-1试验法)或1小时(对于BEAS-2B试验法)。然后，用人类重组细胞因子以各自的EC90浓度刺激细胞，该浓度如以前对各个批次所测定。将细胞用IL-13(R&D Systems,Minneapolis, MN)于37℃刺激15分钟。通过直接加入10×裂解缓冲液(Cell Signaling Technologies,Danvers,MA)终止TF-1细胞反应，而通过除去培养基并加入1×裂解缓冲液终止BEAS-2B细胞培养。获得的样品于-80℃下在板中冷冻。使用MesoScale Discovery(MSD)技术(Gaithersburg,MD)在细胞裂解物中测定化合物介导的STAT6磷酸化的抑制。测定EC50值，作为相对于DMSO对照测定的STAT磷酸化抑制达50％所需的化合物浓度。代表性化合物的数据如表2所示。
表2：
Figure BDA0001692491180001551
Figure BDA0001692491180001561
Figure BDA0001692491180001571
Figure BDA0001692491180001581
Figure BDA0001692491180001591
Figure BDA0001692491180001601
LRRK2试验
测量IC50值的LRRK2试验条件根据Life TechnologiesTM
Figure BDA0001692491180001602
AssayConditions的方法采用SelectScreen Profiling(75μMATP；10点曲线，具有3倍稀释度(10μM-0.508nM)的试验化合物由10μM浓度开始试验)。
下表显示了化合物对JAK1和LRRK2的效能。
5-硫烷基苯基化合物D、E、F、G较它们的5-氯苯基匹配对A对JAK1 比对LRRK2具有更高的选择性。同样，5-硫烷基苯基化合物H较它们的 5-氯苯基匹配对B对JAK1比对LRRK2具有更高的选择性，5-硫烷基苯基化合物较它们的5-氯苯基匹配对C对JAK1比对LRRK2具有更高的选择性。5-硫烷基苯基化合物J、K、L、M和N对JAK1的选择性高于对 LRRK2的选择性。
Figure BDA0001692491180001611
Figure BDA0001692491180001621
Figure DEST_PATH_GDA0002860132760000011
Figure BDA0001692491180001641
另外，图1比较了式(00A)(右边的点)和其中基团-S(O)n-R2被Cl替代的相应的化合物(左边的点)之间的LRRK2抑制作用。Y轴表示在0.1μM 的试验浓度下对LRRK2的％抑制。连接点表示仅在基团-S(O)n-R2和Cl 之间不同的匹配对。与其中基团-S(O)n-R2被Cl替代的相应的化合物相比，每个式(00A)化合物均表现出对LRRK2的抑制作用降低。

Claims (35)

1.式(00A)化合物或其盐：
Figure FDA0002972807620000011
其中：
R1为H、C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、–(C0-C3烷基)CN、–(C0-C3烷基)ORa、–(C0-C3烷基)Ra、–(C0-C3烷基)SRa、–(C0-C3烷基)NRaRb、–(C0-C3烷基)OCF3、–(C0-C3烷基)CF3、–(C0-C3烷基)NO2、–(C0-C3烷基)C(O)Ra、–(C0-C3烷基)C(O)ORa、–(C0-C3烷基)C(O)NRaRb、–(C0-C3烷基)NRaC(O)Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1-2Ra、–(C0-C3烷基)NRaS(O)1-2Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1-2NRaRb、–(C0-C3烷基)(5－6元杂芳基)或–(C0-C3烷基)苯基，其中R1任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、C1-C3烷基、氧代、–CF3、–(C0-C3烷基)ORc和–(C0-C3烷基)NRcRd；
Ra独立为氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、3－10元杂环基、5－6元杂芳基、–C(O)Rc、–C(O)ORc、–C(O)NRcRd、–NRcC(O)Rd、–S(O)1-2Rc、–NRcS(O)1-2Rd或-S(O)1-2NRcRd，其中Ra的任何C3-C6环烷基、3－10元杂环基和5－6元杂芳基任选被一或多个基团Re所取代；
Rb独立为氢或C1-C3烷基，其中所述烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素和氧代；或者
Rc和Rd独立选自下列基团：氢、3－6元杂环基、C3-C6环烷基和C1-C3烷基，其中Rc和Rd的任何3－6元杂环基、C3-C6环烷基和C1-C3烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素和氧代；或Rc和Rd与它们所连接的原子一起形成3－6元杂环基，任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、-CF3和C1-C3烷基；
每个Re独立选自下列基团：氧代、ORf、NRfRg、卤素、3－10元杂环基、C3-C6环烷基和C1-C6烷基，其中Re的任何C3-C6环烷基和C1-C6烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：ORf、NRfRg、卤素、3－10元杂环基、氧代和氰基，其中Re的任何3－10元杂环基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、氰基、–CF3、NRhRk、3－6元杂环基和C1-C3烷基，所述烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、ORf和NRhRk；
Rf和Rg各自独立选自下列基团：氢、C1-C6烷基、3－6元杂环基和C3-C6环烷基，其中Rf和Rg的任何C1-C6烷基、3－6元杂环基和C3-C6环烷基任选被一或多个Rm取代；
每个Rm独立选自下列基团：卤素、氰基、氧代、C3-C6环烷基、3－6元杂环基、羟基和NRhRk，其中Rm的任何C3-C6环烷基和3－6元杂环基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氧代、氰基和C1-C3烷基；
Rh和Rk各自独立选自下列基团：氢和C1-C6烷基，该烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氰基、3－6元杂环基和氧代；或Rh和Rk与它们所连接的原子一起形成3－6元杂环基，该杂环基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、氰基、氧代、–CF3和C1-C3烷基，该烷基任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素和氧代；
R2为C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、3－6元杂环基、(C3-C6环烷基)C1-C6烷基、(3－6元杂环基)C1-C6烷基、-C(O)(C3-C6环烷基)或–C(O)(3－6元杂环基)，其中R2任选被一或多个卤素所取代；
n为0、1或2；
R3为H或NH2；
R4为H或CH3；并且
R5为H或NH2。
2.权利要求1的化合物或其盐，其中R1为H、C1-C6烷基、–(C0-C3烷基)Ra、–(C0-C3烷基)NRaRb、–(C0-C3烷基)C(O)Ra或–(C0-C3烷基)C(O)ORa。
3.权利要求1的化合物或其盐，其中R1为H。
4.权利要求1的化合物，其中R1为C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、–(C0-C3烷基)CN、–(C0-C3烷基)ORa、–(C0-C3烷基)Ra、–(C0-C3烷基)SRa、–(C0-C3烷基)NRaRb、–(C0-C3烷基)OCF3、–(C0-C3烷基)CF3、–(C0-C3烷基)NO2、–(C0-C3烷基)C(O)Ra、–(C0-C3烷基)C(O)ORa、–(C0-C3烷基)C(O)NRaRb、–(C0-C3烷基)NRaC(O)Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1-2Ra、–(C0-C3烷基)NRaS(O)1-2Rb、–(C0-C3烷基)S(O)1-2NRaRb、–(C0-C3烷基)(5－6元杂芳基)或–(C0-C3烷基)苯基，其中R1任选被一或多个独立选自下列的基团所取代：卤素、C1-C3烷基、氧代、–CF3、–(C0-C3烷基)ORc和–(C0-C3烷基)NRcRd。
5.权利要求1的化合物或其盐，其中R1为C1-C6烷基。
6.权利要求1的化合物或其盐，其中R1为–(C0-C3烷基)Ra。
7.权利要求1的化合物或其盐，其中R1为–(C0-C3烷基)NRaRb。
8.权利要求1的化合物或其盐，其中R1为–(C0-C3烷基)C(O)Ra。
9.权利要求1的化合物或其盐，其中R1为–(C0-C3烷基)C(O)ORa。
10.权利要求1的化合物或其盐，其中R1选自下列基团：H、甲基、
Figure FDA0002972807620000031
Figure FDA0002972807620000041
Figure FDA0002972807620000051
Figure FDA0002972807620000061
Figure FDA0002972807620000071
11.权利要求1－10中任一项的化合物或其盐，其中R2为C1-C6烷基、C3-C6环烷基或3－6元杂环基。
12.权利要求1－10中任一项的化合物或其盐，其中R2为甲基、乙基、异丙基、环丙基或氧杂环丁基。
13.权利要求1－10中任一项的化合物或其盐，其中n为1。
14.权利要求1－10中任一项的化合物或其盐，其中n为2。
15.权利要求1的化合物或其盐，其为式(00B)化合物：
Figure FDA0002972807620000081
16.权利要求1的化合物或其盐，其为式(00C)化合物：
Figure FDA0002972807620000082
17.权利要求1的化合物或其盐，其为式(00D)化合物：
Figure FDA0002972807620000083
其中环A任选被一或多个基团Re所取代。
18.权利要求1的化合物或其盐，其为式(00E)化合物：
Figure FDA0002972807620000091
其中环A任选被一或多个基团Re所取代。
19.权利要求1的化合物或其盐，其为式(00F)化合物：
Figure FDA0002972807620000092
20.权利要求1的化合物或其盐，其为式(00G)化合物：
Figure FDA0002972807620000093
21.权利要求15－20中任一项的化合物或其盐，其中R2为C1-C6烷基、C3-C6环烷基或3－6元杂环基。
22.权利要求15－20中任一项的化合物或其盐，其中R2为甲基、乙基、异丙基、环丙基或氧杂环丁基。
23.权利要求17－20中任一项的化合物，其中Re选自下列基团：甲基、乙基、
Figure FDA0002972807620000101
Figure FDA0002972807620000111
24.权利要求1－10和15-20中任一项的化合物或其盐，其中R3为H。
25.权利要求1－10和15-20中任一项的化合物或其盐，其中R4为H。
26.权利要求1－10和15-20中任一项的化合物或其盐，其中R5为H。
27.化合物或其盐，所述化合物选自：
Figure FDA0002972807620000121
Figure FDA0002972807620000131
Figure FDA0002972807620000141
Figure FDA0002972807620000151
Figure FDA0002972807620000161
Figure FDA0002972807620000171
Figure FDA0002972807620000181
Figure FDA0002972807620000191
Figure FDA0002972807620000201
Figure FDA0002972807620000211
Figure FDA0002972807620000221
Figure FDA0002972807620000231
Figure FDA0002972807620000241
Figure FDA0002972807620000251
Figure FDA0002972807620000261
Figure FDA0002972807620000271
Figure FDA0002972807620000281
Figure FDA0002972807620000291
Figure FDA0002972807620000301
Figure FDA0002972807620000311
Figure FDA0002972807620000321
Figure FDA0002972807620000331
Figure FDA0002972807620000341
28.化合物或其盐，所述化合物选自：
Figure FDA0002972807620000342
Figure FDA0002972807620000351
29.权利要求1的化合物或其盐，所述化合物为：
Figure FDA0002972807620000361
30.权利要求1的化合物或其盐，所述化合物为：
Figure FDA0002972807620000362
31.权利要求1的化合物或其盐，所述化合物为：
Figure FDA0002972807620000363
32.权利要求1的化合物或其盐，所述化合物为：
Figure FDA0002972807620000364
33.权利要求1的化合物或其盐，所述化合物为：
Figure FDA0002972807620000371
34.药用组合物，该药用组合物包含权利要求1－33中任一项的化合物或其盐以及可药用的载体、稀释剂或赋形剂。
35.权利要求1－33中任一项的化合物或其盐在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。
CN201680072664.6A 2015-11-23 2016-11-23 Janus激酶抑制剂、其组合物及用途 Active CN108368116B (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2015095310 2015-11-23
CNPCT/CN2015/095310 2015-11-23
CNPCT/CN2015/095423 2015-11-24
CN2015095423 2015-11-24
PCT/EP2016/078544 WO2017089390A1 (en) 2015-11-23 2016-11-23 Janus kinases inhibitors, compositions thereof and use thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108368116A CN108368116A (zh) 2018-08-03
CN108368116B true CN108368116B (zh) 2021-06-11

Family

ID=57389459

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680072664.6A Active CN108368116B (zh) 2015-11-23 2016-11-23 Janus激酶抑制剂、其组合物及用途

Country Status (7)

Country Link
US (3) US20180265515A1 (zh)
EP (1) EP3380474B1 (zh)
JP (1) JP6914933B2 (zh)
CN (1) CN108368116B (zh)
HK (1) HK1258764A1 (zh)
TW (1) TW201720828A (zh)
WO (1) WO2017089390A1 (zh)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017087905A1 (en) 2015-11-20 2017-05-26 Denali Therapeutics Inc. Compound, compositions, and methods
US11028080B2 (en) 2016-03-11 2021-06-08 Denali Therapeutics Inc. Substituted pyrimidines as LRKK2 inhibitors
KR20230107407A (ko) 2016-06-16 2023-07-14 데날리 테라퓨틱스 인크. 신경퇴행성 장애의 치료에서 사용하기 위한 lrrk2 저해제로서피리미딘-2-일아미노-1h-피라졸
CN110114343B (zh) 2016-12-29 2022-09-06 豪夫迈·罗氏有限公司 吡唑并嘧啶化合物及其使用方法
JP7228318B6 (ja) * 2017-05-22 2023-03-10 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 処置用化合物及び組成物、並びにその使用方法
CN110650959B (zh) 2017-05-22 2023-04-18 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗化合物和组合物及其使用方法
JP7339263B2 (ja) 2018-01-15 2023-09-05 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー Ｊａｋ阻害剤としてのピラゾロピリミジン化合物
CN113677347A (zh) * 2019-02-07 2021-11-19 温缇克斯生物科学公司 Tyk2假激酶配体
MA56518A (fr) 2019-06-18 2022-04-27 Hoffmann La Roche Inhibiteurs de sulfone pyrazolopyrimidine de jak kinases et leurs utilisations
WO2020257142A1 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Genentech, Inc. Tetrazole-substituted pyrazolopyrimidine inhibitors of jak kinases and uses thereof
CN114008050A (zh) 2019-06-18 2022-02-01 豪夫迈·罗氏有限公司 Jak激酶的吡唑并嘧啶芳基醚抑制剂及其用途
WO2021138386A1 (en) * 2020-01-04 2021-07-08 Cai Gu Huang Propellant-free formulation for inhalation

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090093477A1 (en) * 2006-05-04 2009-04-09 Nicholas Charles Ray Tetrahydropyrrolopyrimidinediones and their use in therapy
CN102271515A (zh) * 2008-10-31 2011-12-07 健泰科生物技术公司 吡唑并嘧啶jak抑制剂化合物和方法
CN102482284A (zh) * 2009-07-02 2012-05-30 健泰科生物技术公司 作为jak抑制剂的吡唑并嘧啶化合物和方法

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU650953B2 (en) 1991-03-21 1994-07-07 Novartis Ag Inhaler
US5543523A (en) 1994-11-15 1996-08-06 Regents Of The University Of Minnesota Method and intermediates for the synthesis of korupensamines
AU6311996A (en) 1995-07-06 1997-02-05 Zeneca Limited Peptide inhibitors of fibronectine
US6248713B1 (en) 1995-07-11 2001-06-19 Biogen, Inc. Cell adhesion inhibitors
YU25500A (sh) 1999-05-11 2003-08-29 Pfizer Products Inc. Postupak za sintezu analoga nukleozida
GB0028383D0 (en) 2000-11-21 2001-01-03 Novartis Ag Organic compounds
EP1241176A1 (en) 2001-03-16 2002-09-18 Pfizer Products Inc. Purine derivatives for the treatment of ischemia
CA2470813A1 (en) 2001-12-20 2003-07-03 Bayer Healthcare Ag 1,4-dihydro-1,4-diphenylpyridine derivatives
SE0302487D0 (sv) 2003-09-18 2003-09-18 Astrazeneca Ab Novel compounds
GB0502258D0 (en) 2005-02-03 2005-03-09 Argenta Discovery Ltd Compounds and their use
RU2560153C2 (ru) 2008-06-20 2015-08-20 Дженентек, Инк. Триазолпиридиновые соединения, ингибирующие jak, и способы
US20130064870A1 (en) * 2010-05-20 2013-03-14 Sun Pharma Advanced Research Company Limited Dry powder inhalation composition
US8575336B2 (en) 2011-07-27 2013-11-05 Pfizer Limited Indazoles
WO2015177326A1 (en) * 2014-05-23 2015-11-26 F. Hoffmann-La Roche Ag 5-chloro-2-difluoromethoxyphenyl pyrazolopyrimidine compounds which are jak inhibitors
JP7228318B6 (ja) * 2017-05-22 2023-03-10 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 処置用化合物及び組成物、並びにその使用方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090093477A1 (en) * 2006-05-04 2009-04-09 Nicholas Charles Ray Tetrahydropyrrolopyrimidinediones and their use in therapy
CN102271515A (zh) * 2008-10-31 2011-12-07 健泰科生物技术公司 吡唑并嘧啶jak抑制剂化合物和方法
CN102482284A (zh) * 2009-07-02 2012-05-30 健泰科生物技术公司 作为jak抑制剂的吡唑并嘧啶化合物和方法

Also Published As

Publication number Publication date
US20220204517A1 (en) 2022-06-30
US20180265515A1 (en) 2018-09-20
HK1258764A1 (zh) 2019-11-22
US20200165260A1 (en) 2020-05-28
JP6914933B2 (ja) 2021-08-04
CN108368116A (zh) 2018-08-03
TW201720828A (zh) 2017-06-16
EP3380474B1 (en) 2019-08-21
JP2018535985A (ja) 2018-12-06
EP3380474A1 (en) 2018-10-03
WO2017089390A1 (en) 2017-06-01
WO2017089390A8 (en) 2018-01-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108368116B (zh) Janus激酶抑制剂、其组合物及用途
JP7041198B2 (ja) Ｊａｋ阻害剤である５－クロロ－２－ジフルオロメトキシフェニルピラゾロピリミジン化合物
US11155557B2 (en) Pyrazolopyrimidine compounds and methods of use thereof
CN108473501B (zh) 治疗化合物、其组合物及使用方法
CN110678467A (zh) 治疗化合物和组合物及其使用方法
US20230242530A1 (en) 8-(azetidin-1-yl)-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridinyl compounds, compositions and methods of use thereof
JP7339263B2 (ja) Ｊａｋ阻害剤としてのピラゾロピリミジン化合物
CN110494434B (zh) 吡唑并氯苯基化合物、其组合物及其使用方法
CN109476638B (zh) 吡唑衍生物、其组合物及治疗用途
JP2018507236A (ja) トリアゾロピリジン化合物及びその使用法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1258764

Country of ref document: HK

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant