CN108473501B - 治疗化合物、其组合物及使用方法 - Google Patents

Abstract

本文描述了式(I)化合物及其盐以及它们用作Janus激酶抑制剂的方法。

Description

治疗化合物、其组合物及使用方法

技术领域

本发明涉及作为Janus激酶例如JAK1抑制剂的化合物，涉及含有这些化合物的组合物，涉及使用方法，包括但不限于诊断或治疗患有对JAK激酶的抑制有响应的疾病。

背景技术

细胞因子通路介导广泛的生物学功能，包括炎症和免疫的许多方面。Janus激酶(JAK)(包括JAK1、JAK2、JAK3和TYK2)是细胞质蛋白激酶，其与I型和II型细胞因子受体相关并调节细胞因子信号转导。与同源受体的细胞因子结合触发受体相关JAK的激活，这导致信号转导物和转录激活子(STAT)蛋白的JAK介导的酪氨酸磷酸化，最终导致特定基因组的转录激活(Schindler等,2007,J.Biol.Chem.282:20059－63)。JAK1、JAK2和TYK2具有广泛的基因表达模式，而JAK3的表达限于白细胞。细胞因子受体通常作为异二聚体发挥功能，因此，多于一种类型的JAK激酶通常与细胞因子受体复合物相关。与不同细胞因子受体复合物相关的特定JAK已经在多种情况下通过遗传学研究确定，并由其它实验证据证实。JAK酶的抑制的典型的治疗益处探讨于例如国际申请号WO 2013/014567。

最初在新型激酶筛选中鉴定出JAK1(Wilks A.F.,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.86:1603－1607)。遗传和生物化学研究显示JAK1与I型干扰素(例如IFNα)、II型干扰素(例如IFNγ)和IL-2以及IL-6细胞因子受体复合物在功能和物理上相关(Kisseleva等,2002,Gene 285:1－24；Levy等,2005,Nat.Rev.mol.Cell Biol.3:651－662；O’Shea等,2002,Cell,109(suppl.)：S121－S131)。JAK1敲除小鼠由于LIF受体信号缺陷而死于围产期(Kisseleva等,2002,Gene 285:1－24；O’Shea等,2002,Cell,109(suppl.)：S121－S131)。源于JAK1敲除小鼠的组织的表征证实了该激酶在IFN、IL-10、IL-2/IL-4和IL-6通路中的关键作用。靶向IL-6通路的人源化单克隆抗体(妥珠单抗(Tocilizumab))最近被欧洲委员会批准用于治疗中度至重度类风湿性关节炎(Scheinecker等,2009,Nat.Rev.Drug Discov.8:273－274)。

CD4T细胞通过在肺内产生TH2细胞因子(包括IL-4、IL-9和IL-13)在哮喘发病机理中起重要作用(Cohn等,2004,Annu.Rev.Immunol.22:789－815)。IL-4和IL-13诱导粘液产生增加、嗜酸性粒细胞向肺的募集和IgE产生增加(Kasaian等,2008,Biochem.Pharmacol.76(2)：147－155)。IL-9导致肥大细胞活化，这加剧了哮喘症状(Kearley等,2011,Am.J.Resp.Crit.Care Med.,183(7)：865－875)。当分别与共同γ链或IL-13Rα1链结合时，IL-4Rα链活化JAK1并与IL-4或IL-13结合(Pernis等,2002,J.Clin.Invest.109(10):1279－1283)。共同γ链也可以与IL-9Rα结合以结合IL-9，IL-9Rα也能够激活JAK1(Demoulin等，1996，Mol.Cell Biol.16(9):4710－4716)。尽管共同γ链能够激活JAK3，但已经显示JAK1优于JAK3，不管对JAK3是否具有活性，JAK1的抑制足以通过共同γ链而使得信号传导失活(Haan等,2011,Chem.Biol.18(3):314－323)。通过阻断JAK/STAT信号传导通路抑制IL-4、IL-13和IL-9信号传导可以缓解临床前肺部炎症模型中的哮喘症状(Mathew等,2001,J.Exp.Med.193(9)：1087－1096；Kudlacz等,2008,Eur.J.Pharmacol.582(1－3)：154－161)。

生物化学和遗传学研究揭示了JAK2与单链(例如EPO)、IL-3和干扰素γ细胞因子受体家族之间的关联(Kisseleva等,2002,Gene 285:1－24；Levy等,2005,Nat.Rev.mol.Cell Biol.3:651－662；O’Shea等,2002,Cell,109(suppl.)：S121－S131)。与此一致，JAK2敲除小鼠死于贫血(O’Shea等,2002,Cell,109(suppl.)：S121－S131)。JAK2中的激酶活化突变(例如JAK2V617F)与人类中的骨髓增殖性疾病相关。

JAK3仅与γ-共同细胞因子受体链相关，γ-共同细胞因子受体链存在于IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21细胞因子受体复合物中。JAK3对于淋巴细胞发育和增殖是非常关键的，JAK3中的突变导致严重的综合性免疫缺陷(SCID)(O’Shea等,2002,Cell,109(suppl.)：S121－S131)。基于其在调节淋巴细胞中的作用，JAK3和JAK3介导的通路已经被靶向用于免疫抑制适应症(例如移植排斥和类风湿性关节炎)(Baslund等,2005,Arthritis&Rheumatism 52:2686－2692；Changelian等,2003,Science 302:875－878)。

TYK2与I型干扰素(例如IFNα)、IL-6、IL-10、IL-12和IL-23细胞因子受体复合物有关(Kisseleva等,2002,Gene 285:1－24；Watford,W.T.&O’Shea,J.J.,2006,Immunity 25:695－697)。与此一致，源于TYK2缺陷型人类原代细胞在I型干扰素、IL-6、IL-10、IL-12和IL-23信号传导中有缺陷。靶向IL-12和IL-23细胞因子的共享p40亚基的完全人单克隆抗体(Ustekinumab)最近被欧洲委员会批准用于治疗中度至重度斑块型银屑病(Krueger等,2007,N.Engl.J.Med.356:580－92；Reich等,2009,Nat.Rev.Drug Discov.8:355－356)。另外，靶向IL-12和IL-23通路的抗体经过了用于治疗克罗恩氏病的临床试验(Mannon等,2004,N.Engl.J.Med.351:2069－79)。

目前仍然需要其它的作为Janus激酶抑制剂的化合物。例如，需要具有有效力的化合物，其作为一或多种Janus激酶(例如JAK1)的抑制剂，同时具有实现有用治疗益处所必需的其它药理学性质。例如，需要对一种Janus激酶的选择性超过对一般常见其它激酶选择性的有效化合物(例如对JAK1的选择性超过其它激酶，如富亮氨酸重复激酶2(LRRK2))。还需要对一种Janus激酶的选择性超过对其它Janus激酶选择性的有效化合物(例如，对JAK1的选择性超过对其它Janus激酶的选择性)。对JAK1具有选择性的激酶可以在对抑制JAK1有响应的疾病中提供治疗益处并且副作用较少。此外，目前需要有效的JAK1抑制剂，其具有制剂和吸入给药所必需的其它性质(例如，熔点、pK、溶解度等)。此类化合物可以特别用于治疗疾病，例如哮喘。

发明内容

发明概述

本发明的一个方面包括本发明的化合物，其为式(I)化合物或其盐，

其中：

R¹为C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基、–(C₀-C₃烷基)CN、–(C₀-C₃烷基)OR^a、–(C₀-C₃烷基)R^a、–(C₀-C₃烷基)SR^a、–(C₀-C₃烷基)NR^aR^b、–(C₀-C₃烷基)OCF₃、–(C₀-C₃烷基)CF₃、–(C₀-C₃烷基)NO₂、–(C₀-C₃烷基)C(O)R^a、–(C₀-C₃烷基)C(O)OR^a、–(C₀-C₃烷基)C(O)NR^aR^b、–(C₀-C₃烷基)NR^aC(O)R^b、–(C₀-C₃烷基)S(O)_1-2R^a、–(C₀-C₃烷基)NR^aS(O)_1-2R^b、–(C₀-C₃烷基)S(O)_1-2NR^aR^b、–(C₀-C₆烷基)(5－6元杂芳基)或–(C₀-C₆烷基)苯基，其中R¹任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素、C₁-C₃烷基、氧代、–CF₃、–(C₀-C₃烷基)OR^c和–(C₀-C₃烷基)NR^cR^d；

R^a独立为氢、C₁-C₆烷基、C₃-C₆环烷基、3–10元杂环基、–C(O)R^c、–C(O)OR^c、–C(O)NR^cR^d、-NR^cC(O)R^d、–S(O)_1-2R^c、-NR^cS(O)_1-2R^d或-S(O)_1-2NR^cR^d，其中R^a的任何C₃-C₆环烷基和3–10元杂环基任选被一或多个基团R^e取代；

R^b独立为氢或C₁-C₃烷基，其中所述烷基任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素和氧代；

R^c和R^d各自选自下列基团：氢、3–6元杂环基、C₃-C₆环烷基和C₁-C₃烷基，其中R^c和R^d的任何3–6元杂环基、C₃-C₆环烷基和C₁-C₃烷基任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素和氧代；或R^c和R^d与它们所连接的原子一起形成3–6元杂环基，任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素、氧代、-CF₃和C₁-C₃烷基；

每个R^e独立选自下列基团：氧代、OR^f、NR^fR^g、卤素、3–10元杂环基、C₃-C₆环烷基和C₁-C₆烷基，其中R^e的任何C₃-C₆环烷基和C₁-C₆烷基任选被一或多个独立选自下列的基团取代：OR^f、NR^fR^g、卤素、3–10元杂环基、氧代和氰基，其中R^e的任何3–10元杂环基和在R^e的C₃-C₆环烷基或C₁-C₆烷基上取代的任何3–10元杂环基任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素、氧代、氰基、–CF₃、NR^hR^k、3–6元杂环基和C₁-C₃烷基，其任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素、氧代、OR^f和NR^hR^k；

R^f和R^g各自独立选自下列基团：氢、C₁-C₆烷基、3–6元杂环基和C₃-C₆环烷基，其中R^f和R^g的任何C₁-C₆烷基、3–6元杂环基和C₃-C₆环烷基任选被一或多个R^m取代；

R^h和R^k各自独立选自下列基团：氢和C₁-C₆烷基，其任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素、氰基、3–6元杂环基和氧代；或R^h和R^k与它们所连接的原子一起形成3–6元杂环基，其任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素、氰基、氧代、–CF₃和C₁-C₃烷基，该烷基任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素和氧代；

每个R^m独立选自下列基团：卤素、氰基、氧代、C₃-C₆环烷基、羟基和NR^hR^k，其中R^m的任何C₃-C₆环烷基任选被一或多个独立选自下列的基团取代：卤素、氧代、氰基和C₁-C₃烷基；

R²为苯基、C₃-C₆环烷基或3–10元杂环基，其中R²任选被1－5个Rⁿ取代；

每个Rⁿ独立为C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基、氧代、卤素、–(C₀-C₃烷基)CN、–(C₀-C₃烷基)OR^o、–(C₀-C₃烷基)SR^o、–(C₀-C₃烷基)NR^oR^p、–(C₀-C₃烷基)OCF₃、–(C₀-C₃烷基)CF₃、–(C₀-C₃烷基)NO₂、–(C₀-C₃烷基)C(O)R^o、–(C₀-C₃烷基)C(O)OR^o、–(C₀-C₃烷基)C(O)NR^oR^p、–(C₀-C₃烷基)NR℃(O)R^p、–(C₀-C₃烷基)S(O)_1-2R^o、–(C₀-C₃烷基)NR^oS(O)_1-2R^p、–(C₀-C₃烷基)S(O)_1-2NR^oR^p、–(C₀-C₃烷基)(C₃-C₆环烷基)、–(C₀-C₃烷基)(3–6元杂环基)、–(C₀-C₃烷基)C(O)(3–6元杂环基)或–(C₀-C₃烷基)苯基，其中R⁵独立任选被下列基团取代：卤素、C₁-C₃烷基、氧代、–CF₃、–(C₀-C₃烷基)OR^r或–(C₀-C₃烷基)NR^rR^s；或两个Rⁿ一起形成–O(CH₂)_1-3O–；

R³为H、卤素、氰基、C₁-C₃烷基、C₂-C₃链烯基、C₂-C₃炔基、-NH₂或–OR^t；

R⁴为H、卤素、氰基、C₁-C₃烷基、C₂-C₃链烯基、C₂-C₃炔基、-NH₂或–OR^t；

R⁵为H、卤素、氰基、C₁-C₃烷基、C₂-C₃链烯基、C₂-C₃炔基、-NH₂或–OR^t；

R⁶为H、卤素、氰基、C₁-C₃烷基、C₂-C₃链烯基、C₂-C₃炔基、-NH₂或–OR^t；

R^o独立为氢、C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基、C₃-C₆环烷基、3–6元杂环基、(C₃-C₆环烷基)C₁-C₆烷基、(3–6元杂环基)C₁-C₆烷基、-C(O)(C₃-C₆环烷基)或–C(O)(3–6元杂环基)、–C(O)R^r、–C(O)OR^r、–C(O)NR^rR^s、–NR^rC(O)R^s、–S(O)_1-2R^r、–NR^rS(O)_1-2R^s或–S(O)_1-2NR^rR^s，其中所述烷基、环烷基和杂环基各自任选被下列基团取代：氧代、C₁-C₃烷基、OR^r、NR^rR^s或卤素；R^p独立为氢或C₁-C₃烷基，其中所述烷基各自任选被卤素或氧代取代；

或R^o和R^p与它们所连接的原子一起形成3–6元杂环基，其任选被下列基团取代：卤素、氧代或任选被卤素取代的C₁-C₃烷基；

R^r和R^s各自为氢或选被卤素或氧代取代的C₁-C₃烷基；或R^r和R^s与它们所连接的原子一起形成3–6元杂环基，其任选被下列基团取代：卤素、氧代或任选被卤素取代的C₁-C₃烷基；并且

每个R^t独立为H、C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基或–(C₀-C₃烷基)苯基。

还提供了药用组合物，其包含本发明的化合物和可药用的载体、稀释剂或赋形剂。

另一方面包括用于治疗的本发明的化合物，例如治疗炎性疾病或癌症。

另一方面包括预防、治疗对患者中Janus激酶(例如JAK1激酶)活性的抑制有响应的疾病或病症或减轻其严重性的方法。该方法包括给予患者治疗有效量的本发明化合物。

另一方面包括本发明化合物在生产药物中的用途，所述药物用于治疗对Janus激酶(例如JAK1激酶)活性的抑制有响应的疾病。

另一方面包括用于治疗对Janus激酶(例如JAK1激酶)的抑制有响应的疾病或病症的套盒。所述套盒包含含有本发明化合物的第一药用组合物和使用说明书。

某些本发明化合物具有作为一种或多种Janus激酶(例如JAK1)的抑制剂的有益效能。某些化合物还a)具有对于一种Janus激酶的选择性优于对其它激酶的选择性，b)对JAK1的选择性优于对其它Janus激酶的选择性，和/或c)具有制剂和吸入给药所必需的其它性质(例如熔点、pK、溶解度等)。某些式(I)化合物对于治疗疾病例如哮喘可能特别有用。

发明详述

定义

“卤素”或“卤代”是指F、Cl、Br或I。此外，术语例如“卤代烷基”是指包括单卤代烷基和多卤代烷基。

术语“烷基”是指饱和的直链或支链单价烃基，其中烷基可以任选被取代。在一个示例中，烷基为1－8个碳原子(C₁-C₁₈)。在另一个示例中，烷基为C₀-C₆、C₀-C₅、C₀-C₃、C₁-C₁₂、C₁-C₁₀、C₁-C₈、C₁-C₆、C₁-C₅、C₁-C₄或C₁-C₃。C₀烷基是指键。烷基的示例包括甲基(Me、-CH₃)、乙基(Et、-CH₂CH₃)、1-丙基(n-Pr、正-丙基、-CH₂CH₂CH₃)、2-丙基(i-Pr、异-丙基、-CH(CH₃)₂)、1-丁基(n-Bu、正-丁基、-CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-甲基-1-丙基(i-Bu、异-丁基、-CH₂CH(CH₃)₂)、2-丁基(s-Bu、叔-丁基、-CH(CH₃)CH₂CH₃)、2-甲基-2-丙基(t-Bu、叔-丁基、-C(CH₃)₃)、1-戊基(正-戊基、-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃)、3-戊基(-CH(CH₂CH₃)₂)、2-甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH₂CH₃)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH₃)CH(CH₃)₂)、3-甲基-1-丁基(-CH₂CH₂CH(CH₃)₂)、2-甲基-1-丁基(-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃)、1-己基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-己基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₂CH₃)、3-己基(-CH(CH₂CH₃)(CH₂CH₂CH₃))、2-甲基-2-戊基(-C(CH₃)₂CH₂CH₂CH₃)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH(CH₃)CH₂CH₃)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂)、3-甲基-3-戊基(-C(CH₃)(CH₂CH₃)₂)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH₂CH₃)CH(CH₃)₂)、2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH(CH₃)₂)、3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH₃)C(CH₃)₃、1-庚基和1-辛基。在某些实施方案中，“任选取代的烷基”中的取代基包括下列基团的1－4个：F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基(piperizinyl)和嘧啶基，其中其烷基、苯基和杂环部分任选被选自该相同列表的1－4个取代基取代。

“芳基”是指碳环芳族基团，无论是否与一个或多个基团稠合，其具有指定的碳原子数目，或者如果没有指定数目，至多14个碳原子。一个示例包括具有6－14个碳原子的芳基。另一个示例包括具有6－10个碳原子的芳基。芳基的示例包括苯基、萘基、联苯基、菲基、苯并萘基(naphthacenyl)、1,2,3,4-四氢萘基、1H-茚基、2,3-二氢-1H-茚基等(参见，例如，Lang’s Handbook of Chemistry(Lang氏化学手册)(Dean,J.A.等)第13版，表7－2[1985])。特定的芳基为苯基。取代的苯基或取代的芳基是指被1、2、3、4或5个取代基(例如1－2、1－3或1－4个取代基)取代的苯基或芳基，例如选自本文指定的基团(参见“任选取代的”定义)，例如F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中其烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如选自该相同列表的1－4个取代基取代。术语“取代的苯基”的示例包括单-或二(卤代)苯基，例如2-氯代苯基、2-溴苯基、4-氯代苯基、2,6-二氯代苯基、2,5-二氯代苯基、3,4-二氯代苯基、3-氯代苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、3,4-二溴苯基、3-氯代-4-氟苯基、2-氟苯基、2,4-二氟苯基等；单-或二(羟基)苯基，例如4-羟基苯基、3-羟基苯基、2,4-二羟基苯基，其被保护的羟基衍生物等；硝基苯基，例如3-或4-硝基苯基；氰基苯基，例如4-氰基苯基；单-或二(烷基)苯基，例如4-甲基苯基、2,4-二甲基苯基、2-甲基苯基、4-(异丙基)苯基、4-乙基苯基、3-(n-丙基)苯基等；单或二(烷氧基)苯基，例如3,4-二甲氧基苯基、3-甲氧基-4-苄基氧基苯基、3-乙氧基苯基、4-(异丙氧基)苯基、4-(叔-丁氧基)苯基、3-乙氧基-4-甲氧基苯基等；3-或4-三氟甲基苯基；单-或二羧基苯基或(被保护的羧基)苯基，如4-羧基苯基、单-或二(羟基甲基)苯基或(被保护的羟基甲基)苯基，例如3-(被保护的羟基甲基)苯基或3,4-二(羟基甲基)苯基；单-或二(氨基甲基)苯基或(被保护的氨基甲基)苯基，例如2-(氨基甲基)苯基或2,4-(被保护的氨基甲基)苯基；或单-或二(N-(甲基磺酰基氨基))苯基，例如3-(N-甲基磺酰基氨基))苯基。同样，术语“取代的苯基”表示其中取代基是不同的取代的苯基，例如3-甲基-4-羟基苯基、3-氯代-4-羟基苯基、2-甲氧基-4-溴苯基、4-乙基-2-羟基苯基、3-羟基-4-硝基苯基、2-羟基-4-氯代苯基、2-氯代-5-二氟甲氧基等；还表示其中取代基是不同的三取代的苯基，例如3-甲氧基-4-苄基氧基-6-甲基磺酰基氨基、3-甲氧基-4-苄基氧基-6-苯基磺酰基氨基；还表示其中取代基是不同的四取代的苯基，例如3-甲氧基-4-苄基氧基-5-甲基-6-苯基磺酰基氨基。

除非另有说明，术语“本发明的化合物”和“本发明化合物”等包括式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ij)、(Ik)、(Im)、(In)化合物，本文中实施例的化合物包括其立体异构体(包括阻转异构体)、几何异构体、互变异构体、溶剂化物、代谢物、同位素、盐(例如可药用的盐)和前药。在某些实施方案中，溶剂化物、代谢物、同位素或前药或其任意组合均被排除。

“环烷基”是指非芳族、饱和或部分不饱和的烃环基团，其中环烷基基团可以任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。在一个示例中，环烷基具有3－12个碳原子(C₃-C₁₂)。在其它示例中，环烷基为C₃-C₈、C₃-C₁₀或C₅-C₁₀。在其它示例中，作为单环的环烷基为C₃-C₈、C₃-C₆或C₅-C₆。在另一个示例中，作为双环的环烷基为C₇-C₁₂。在另一个示例中，作为螺环系统的环烷基为C₅-C₁₂。单环环烷基的示例包括环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、全氘代环己基、1-环己-1-烯基、1-环己基-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基和环十二烷基。具有7至12个环原子的双环环烷基的示例性排列包括但不限于[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]环系。典型的桥接双环环烷基包括但不限于双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷和双环[3.2.2]壬烷。螺环烷基的实例包括螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[2.4]庚烷、螺[2.5]辛烷和螺[4.5]癸烷。在某些实施方案中，“任选取代的环烷基”中的取代基包括1－4个下列基团：F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中其烷基、芳基和杂环部分可以任选被例如选自该相同列表的1－4个取代基取代。

“杂环基团”、“杂环的”、“杂环”、“杂环基”可以互换使用，是指具有3－20个环原子的任何单环、双环、三环或螺环的饱和或不饱和的芳族(杂芳基)或非芳族(例如杂环烷基)环系，其中环原子为碳并且环或环系中至少一个原子选自氮、硫或氧。如果环系的任何环原子为杂原子，则该系统为杂环，无论该环系与分子其余部分的连接点如何。在一个示例中，杂环基包括3－10个环原子(“元”)，包括单环、双环、三环和螺环系统，其中环原子为碳，其中环或环系中至少一个原子为选自氮、硫或氧的杂原子。在一个示例中，杂环基包括1至4个杂原子。在一个示例中，杂环基包括1－3个杂原子。在另一个示例中，杂环基包括具有1－2、1－3或1－4个选自氮、硫或氧的杂原子的3－7元单环。在另一个示例中，杂环基包括具有1－2、1－3或1－4个选自氮、硫或氧的杂原子的4－6元单环。在另一个示例中，杂环基包括3元单环。在另一个示例中，杂环基包括4元单环。在另一个示例中，杂环基包括5－6元单环，例如5－6元杂芳基。在另一个示例中，杂环基包括3－11元杂环烷基，例如4－11元杂环烷基。在某些实施方案中，杂环烷基包含至少一个氮。在一个示例中，杂环基包括0至3个双键。任何氮或硫杂原子可以任选地被氧化(例如NO、SO、SO₂)，任何氮杂原子可以任选被季铵化(例如，[NR₄]⁺Cl^-、[NR₄]⁺OH^-)。典型的杂环例如为环氧乙烷基、氮杂环丙基、硫杂环丙基(thiiranyl)、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、1,2-二硫杂环丁烷基、1,3-二硫杂环丁烷基、吡咯烷基、二氢-1H-吡咯基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、二氢噻吩基、四氢噻吩基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代硫代吗啉基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、六氢噻喃基、六氢嘧啶基、

嗪烷基、噻嗪烷基、噻嗯烷基(thioxanyl)、高哌嗪基、高哌啶基、氮杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂

基、氧氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、1,4-二氮杂环庚烷基、二氮杂

基、硫氮杂

基、硫氮杂环庚烷基、四氢噻喃基、

唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、1,1-二氧代异噻唑烷二酮基、

唑烷酮基、咪唑烷酮基、4,5,6,7-四氢[2H]吲唑基、四氢苯并咪唑基、4,5,6,7-四氢苯并[d]咪唑基、1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶基、噻嗪基、

嗪基、噻二嗪基、

二嗪基、二噻嗪基、二

嗪基、

噻嗪基(oxathiazinyl)、硫杂三嗪基(thiatriazinyl)、

三嗪基(oxatriazinyl)、二噻二嗪基、咪唑啉基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、噻喃基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二

烷基、1,3-二氧戊环基、吡唑啉基、吡唑烷基、二噻烷基、二硫杂环戊烷基(dithiolanyl)、嘧啶酮基、嘧啶二酮基、嘧啶-2,4-二酮基、哌嗪酮基、哌嗪二酮基、吡唑烷基、咪唑啉基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚基、6-氮杂双环[3.1.1]庚基、3-氮杂双环[3.1.1]庚基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、氮杂双环[2.2.2]己基、2-氮杂双环[3.2.1]辛基、8-氮杂双环[3.2.1]辛基、2-氮杂双环[2.2.2]辛基、8-氮杂双环[2.2.2]辛基、7-氧杂双环[2.2.1]庚烷、氮杂螺环[3.5]壬基、氮杂螺环[2.5]辛基、氮杂螺环[4.5]癸基、1-氮杂螺环[4.5]癸-2-酮基、氮杂螺环[5.5]十一烷基、四氢吲哚基、八氢吲哚基、四氢异吲哚基、四氢吲唑基、1,1-二氧代六氢噻喃基。含有硫或氧原子和1－3个氮原子的5元杂环的实例为噻唑基，包括噻唑--2-基和噻唑-2-基N-氧化物；噻二唑基，包括1,3,4-噻二唑-5-基和1,2,4-噻二唑-5-基；

唑基，例如

唑-2-基；

二唑基，例如1,3,4-

二唑-5-基和1,2,4-

二唑-5-基。含有2-4个氮原子的5元环杂环包括咪唑基，例如咪唑-2-基；三唑基，例如1,3,4-三唑-5-基、1,2,3-三唑-5-基、1,2,4-三唑-5-基；和四唑基，例如1H-四唑-5-基。典型的苯并-稠合的5元杂环为苯并

唑-2-基、苯并噻唑--2-基和苯并咪唑-2-基。典型的6元杂环含有1－3个氮原子和任选的硫或氧原子，例如吡啶基，例如吡啶-2-基、吡啶-3-基和吡啶-4-基；嘧啶基，例如嘧啶-2-基和嘧啶-4-基；三嗪基，例如1,3,4-三嗪-2-基和1,3,5-三嗪-4-基；哒嗪基，特别是哒嗪-3-基；和吡嗪基。吡啶N-氧化物和哒嗪N-氧化物以及吡啶基、嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、哒嗪基和1,3,4-三嗪-2-基是其它示例性杂环基团。杂环可以任选被取代。例如，“任选取代的杂环”的取代基包括1－4个下列基团：F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中其烷基、芳基和杂环部分可以任选被例如1－4个选自该相同列表的取代基取代。在某些实施方案中，杂环基团如杂芳基或杂环烷基的取代基包含酰胺。例如，杂环(例如，杂芳基或杂环烷基)取代基可以是-(CH₂)_{0- 4}CONR'R″，其中R'和R″各自独立表示下列基团：包括，例如，氢；未取代的C_1-C₆烷基；C_1-C₆烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R″；未取代的C_1-C₆杂烷基；C_1-C₆杂烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R″；未取代的C_6-C₁₀芳基；C_6-C₁₀芳基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R″；未取代的3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；和3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R″；或R'和R″可以与氮原子结合形成3-、4-、5-、6-或7元环，其中一个环原子任选被N、O或S取代，其中所述环为任选被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R″。

“杂芳基”是指其中至少一个环是含有1至4个选自氮、氧和硫的杂原子的5元或6元芳族环的任何单环、双环或三环环系，在一个示例性实施方案中，至少一个杂原子为氮。参见例如Lang’s Handbook of Chemistry(郎氏化学手册)(Dean,J.A.,ed.)第13版，表7－2[1985]。该定义中包括其中任何上述杂芳基环与芳环稠合的任何双环基团，其中芳环或杂芳基环与分子的其余部分连接。在一个实施方案中，杂芳基包括5－6元单环芳族基团，其中一个或多个环原子为氮、硫或氧。杂芳基的实例包括噻吩基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、

唑基、异

唑基、三唑基、噻二唑基、

二唑基、四唑基、噻三唑基、

三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑并[1,5-b]哒嗪基、咪唑并[1,2-a]嘧啶基和嘌呤基，还包括苯并-稠合的衍生物，例如苯并

唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、苯并咪唑基和吲哚基。杂芳基可以任选被取代。在某些实施方案中，“任选取代的杂芳基”的取代基包括1－4个下列基团：F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异-丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基,其中其烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如1－4个选自该相同列表的取代基取代。在某些实施方案中，杂芳基的取代基包含酰胺。例如，杂芳基取代基可以是-(CH₂)_0-4CONR'R″，其中R'和R″各自独立表示下列基团：包括例如，氢；未取代的C_1-C₆烷基；C_1-C₆烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R″；未取代的C_1-C₆杂烷基；C_1-C₆杂烷基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R″；未取代的C_6-C₁₀芳基；C_6-C₁₀芳基，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R″；未取代的3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)；和3－11元杂环基(例如，含有1－4个选自O、N和S的杂原子的5－6元杂芳基或含有1－4个选自O、N和S的杂原子的4－11元杂环烷基)，其被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R″；或R'和R″可以与氮原子结合形成3-、4-、5-、6-或7-元环，其中一个环原子任选被N、O或S取代，其中所述环为任选被下列基团取代：卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R″。

在具体的实施方案中，杂环基连接在杂环基的碳原子上。举例来说，碳键合的杂环基包括下列键排列：吡啶环的2、3、4、5或6位；哒嗪环的3、4、5或6位；嘧啶环的2、4、5或6位；吡嗪环的2、3、5或6位；呋喃、四氢呋喃、硫代呋喃、噻吩、吡咯或四氢吡咯环的2、3、4或5位；

唑、咪唑或噻唑环的2、4或5位；异

唑、吡唑或异噻唑环的3、4或5位；氮杂环丙烷环的2或3位；氮杂环丁烷环的2、3或4位；喹啉环的2、3、4、5、6、7或8位；或异喹啉环的1、3、4、5、6、7或8位。

在某些实施方案中，杂环基是N-连接的。作为举例，氮键合的杂环基或杂芳基包括下列键排列：氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氢吲哚、1H-吲唑的1位；异吲哚或异吲哚啉的2位；吗啉的4位；和咔唑或β-咔啉的9位。

术语“烷氧基”是指由式-OR表示的直链或支链一价基团，其中R为如本文所定义的烷基。烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、单-、二-和三-氟甲氧基以及环丙氧基。

术语“烷酰基”是指基团(烷基)-C(＝O)-，其中烷基如本文所定义。例如，C₁-C₆烷酰基是指式(C₁-C₅烷基)-C(＝O)-的基团。烷酰基包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、3-甲基戊酰基和己酰基。

除非另外指明，“任选取代的”是指基团可以是未被取代或者被一或多个该基团所列示的取代基取代(例如0、1、2、3、4或5个或更多个，或其中可衍生的任何范围)，其中所述取代基可以相同或不同。在一个实施方案中，任选取代的基团具有1个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有2个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有3个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有4个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有5个取代基。

如本文使用的与化学结构中的键相交的波浪线

表示在化学结构中与波状键连接的原子与分子的其余部分连接的点或与分子片段的其余部分的连接的点。在某些实施方案中，箭头与星号一起以波浪线的方式用于指示连接点。

在某些实施方案中，对二价基团进行了一般性描述而没有特定的键合构型。应该理解的是，除非另有说明，否则一般性描述意在包括两种键合构型。例如，在基团R¹–R²–R³中，如果基团R²被描述为–CH₂C(O)–，那么应该理解，除非另有说明，该基团可以既可以是R¹–CH₂C(O)–R³，也可以是R¹–C(O)CH₂–R³。

短语“可药用的”是指当适当地施用于动物例如人类时不产生不利的、过敏的或其它不良反应的分子实体和组合物。

本发明化合物可以是盐的形式，例如药学可接受的盐。“可药用的盐”包括酸和碱加成盐。“可药用的酸加成盐”是指能够保留游离碱的生物有效性和性质并且在生物学上或其它方面不是不希望的那些盐，与下列无机酸形成盐：例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸酸、磷酸等，有机酸可以选自脂肪族、脂环族、芳香族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类的有机酸，例如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、扑酸、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。

“可药用的碱加成盐”包括衍生自无机碱的那些盐，例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等。具体的碱加成盐是铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。衍生自可药用的有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺的盐；取代的胺，包括天然存在的取代胺；环胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、氨丁三醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等。具体的有机无毒碱包括异丙胺、二乙胺、乙醇胺、氨丁三醇、二环己胺、胆碱和咖啡因。

在一些实施方案中，盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、三氟乙酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、硫酸氢盐、苯磺酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、昔萘酸盐、抗坏血酸盐、油酸盐、烟酸盐、糖精酸盐、己二酸盐、甲酸盐、乙醇酸盐、棕榈酸盐、L-乳酸盐、D-乳酸盐、天冬氨酸盐、苹果酸盐、L-酒石酸盐、D-酒石酸盐、硬脂酸盐、糠酸盐(例如，2-糠酸盐或3-糠酸盐)、萘二磺酸盐(萘-1,5-二磺酸盐或萘-1-(磺酸)-5-磺酸盐、乙二磺酸盐(乙烷-1,2-二磺酸盐或乙烷-1-(磺酸)-2-磺酸盐)、羟乙基磺酸盐(2-羟乙基磺酸盐)、2-均三甲苯磺酸盐(mesitylenesulphonate)、2-萘磺酸盐、2,5-二氯苯磺酸盐、D-扁桃酸盐、L-扁桃酸盐、肉桂酸盐、苯甲酸盐、己二酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐(2-均三甲苯磺酸盐)、萘磺酸盐(2-萘磺酸盐)、樟脑磺酸盐(樟脑-10-磺酸盐、例如(1S)-(+)-10-樟脑磺酸盐)、谷氨酸盐、戊二酸盐、马尿酸盐(2-(苯甲酰氨基)乙酸盐)、乳清酸盐、木酸盐(xylate)(对-二甲苯-2-磺酸盐)和双羟萘酸盐(2,2'-二羟基-1,1'-二萘基甲烷-3,3'-二羧酸盐)。

“无菌”制剂是无菌的或不含所有活微生物及其孢子的。

“立体异构体”是指具有相同化学组成但在空间中原子或基团的排列方面不同的化合物。立体异构体包括非对映异构体、对映异构体、构象异构体等。

“手性”是指镜像配对分子具有不可重叠性质的分子，术语“非手性”是指其镜像配对分子具有可重叠性的分子。

“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心且其分子彼此不为镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱性质或生物活性。非对映异构体的混合物可以在高分辨率分析方法中分离，例如电泳法和色谱法如HPLC。

“对映体”是指化合物的两个立体异构体，它们的镜像彼此不可重叠。

本文中使用的立体化学定义和惯例通常遵循S.P.Parker,Ed.,McGraw-HillDictionary of Chemical Terms(McGraw-Hill化学术语词典)(1984)McGraw-Hill BookCompany,纽约；和Eliel,E.和Wilen,S.,“Stereochemistry of Organic Compounds(有机化合物的立体化学)”,John Wiley&Sons,Inc.,纽约,1994。许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有旋转平面偏振光的平面的能力。在描述光学活性化合物时，前缀D和L或R和S用于表示分子关于其手性中心的绝对构型。前缀d和l或(+)和(-)用于表示化合物对平面偏振光旋转的符号，其中(-)或l表示该化合物是左旋的。前缀为(+)或d的化合物是右旋的。对于给定的化学结构，这些立体异构体是相同的，除了它们是彼此的镜像之外。特定的立体异构体也可以被称为对映体，此类异构体的混合物通常被称为对映体混合物。对映异构体的50:50混合物被称为外消旋混合物或外消旋体，其可以出现在化学反应或过程中没有立体选择性或立体特异性的情况下。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指两种对映体物质的等摩尔混合物，没有光学活性。

术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指可以通过低能障互相转化的不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子移变互变异构体)包括通过质子迁移的相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过某些键合电子的重组而相互转化。

本发明的某些化合物可以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在，包括水合形式。“溶剂化物”是指一种或多种溶剂分子与本发明化合物的结合体或复合物。能够形成溶剂化物的溶剂的实例包括水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。本发明的某些化合物可以以多晶形或无定形形式存在。一般来说，所有的物理形式都应当包含在本发明的范围内。术语“水合物”是指其中溶剂分子是水的复合物。

“代谢物”是指通过特定化合物或其盐在体内代谢产生的产物。此类产物可以例如由施用的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶裂解等而产生。

代谢产物通常可以通过如下方法鉴定：制备本发明化合物的放射性标记的(例如¹⁴C或³H)同位素，以可检测的剂量(例如，大于约0.5mg/kg)适用于动物，例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴子或人类，允许有足够的时间进行代谢(通常约30秒至30小时)，从尿液、血液或其它生物样品中分离其转化产物。这些产品因为被标记而易于分离(其它产物可以通过使用能够与代谢物中存在的表位结合的抗体进行分离)。代谢物结构以常规方式确定，例如通过MS、LC/MS或NMR分析。通常，代谢物的分析以本领域技术人员熟知的常规药物代谢研究相同的方式完成。只要它们在体内不另外存在，代谢产物可以用于本发明化合物的治疗剂量的诊断分析。

如本文所用的“氨基保护基团”是指通常用于封闭或保护氨基的基团的衍生物，反应在化合物的其它官能团上进行。这种保护基团的实例包括氨基甲酸酯、酰胺、烷基和芳基和亚胺以及多种N-杂原子衍生物，其可以除去以再生需要的胺基。具体的氨基保护基团为Pmb(对-甲氧基苄基)、Boc(叔-丁基氧基羰基)、Fmoc(9-芴基甲基氧基羰基)和Cbz(羰基苄基氧基)。这些基团的其它示例参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“Protecting Groups inOrganic Synthesis(有机合成中的保护基团),第3版,John Wiley&Sons,Inc.,1999。术语“被保护的氨基”是指被上述氨基-保护基团之一取代的氨基。

如本文所用的“羧基保护基团”是指对分子其它位置处随后进行反应的条件保持稳定的那些基团，其可在适当的点除去而不破坏分子的其余部分以产生未被保护的羧基。羧基保护基团的实例包括酯基和杂环基。羧酸基团的酯衍生物可用于封闭或保护羧酸基团，同时在化合物上的其它官能团上进行反应。此类酯基的实例包括：取代的芳基烷基，包括取代的苄基，例如4-硝基苄基、4-甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、2,4-二甲氧基苄基、2,4,6-三甲氧基苄基、2,4,6-三甲基苄基、五甲基苄基、3,4-亚甲二氧基苄基、二苯甲基、4,4’-二甲氧基二苯甲基、2,2’,4,4’-四甲氧基二苯甲基；烷基或取代的烷基酯，例如甲基、乙基、叔-丁基烯丙基或叔-戊基、三苯基甲基(三苯甲基)、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-二甲氧基三苯甲基、4,4’,4”-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基；硫酯，例如叔-丁基硫酯；甲硅烷基酯，例如三甲基甲硅烷基、叔-丁基二甲基甲硅烷基酯、苯甲酰甲基、2,2,2-三氯代乙基、β-(三甲基甲硅烷基)乙基、β-(二(正-丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对-甲苯磺酰基乙基、4-硝基苄基磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基等基团。羧基-保护基团的其它示例为杂环基，例如1,3-

唑啉基。这些基团的其它示例参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts,Protecting Groups in Organic Synthesis(有机合成中的保护基团),第3版,John Wiley&Sons,Inc.,1999。术语“被保护的羧基”是指被上述羧基-保护基团之一取代的羧基。

本文使用的“羟基保护基团”是指通常用于封闭或保护羟基的羟基的衍生物，反应可以同时在化合物上的其它官能团上进行。此类保护基团的实例包括四氢吡喃氧基、苯甲酰基、乙酰氧基、氨基甲酰氧基、苄基和甲硅烷基醚(例如TBS、TBDPS)。这些基团的其它示例参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts,Protecting Groups in Organic Synthesis(有机合成中的保护基团),第3版,John Wiley&Sons,Inc.,1999。术语“被保护的羟基”是指被上述羟基-保护基团之一取代的羟基。

本发明的化合物可以含有一个或多个不对称碳原子。因此，所述化合物可以以非对映异构体、对映异构体或其混合物的形式存在。化合物的合成可以使用外消旋体、非对映体或对映体作为原料或作为中间体。特定非对映体化合物的混合物可以通过色谱或结晶方法分离或富集一种或多种特定的非对映异构体。同样，可以使用相同的技术或本领域已知的其他技术分离对映体混合物或对映体富集。每个不对称碳或氮原子可以为R或S构型，这两种构型均在本发明的范围内。

在本文所示的结构中，在未指定任何特定手性原子的立体化学的情况下，所有立体异构体均被考虑并包括为本发明化合物。当立体化学通过表示特定构型的实心楔线或虚线指定时，则该立体异构体如此指定和定义。除非另有说明，使用实心楔线或虚线时，是指相对立体化学。

另一方面包括本发明化合物的前体药物，包括已知的氨基保护基团和羧基保护基团，其在生理条件下释放(例如水解)以产生本发明化合物。

术语“前药”是指药物活性物质的前体或衍生物形式，其与母体药物相比对患者的疗效较差，能够被酶促或水解活化或转化为更具活性的母体形式。参见例如Wilman,“Prodrugs in Cancer Chemotherap_y(癌症化疗中的前药)”Biochemical SocietyTransactions,14,第375－382页,615th Meeting Belfast(1986)和Stella等,“Prodrugs:A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery(前药：靶向药物的化学方法),”Directed Drug Delivery,Borchardt等,(ed.),第247－267页,Humana Press(1985)。前药包括但不限于：含磷酸酯/盐的前药、含硫代磷酸酯/盐的前药、含硫酸酯/盐的前药、含肽的前药、D-氨基酸修饰的前药、糖基化的前药、含β-内酰胺的前药、含任选取代的苯氧基乙酰胺的前药或含任选取代的苯乙酰胺的前药以及5-氟胞嘧啶和5-氟尿嘧啶前药。

一类特别的前药是其中氨基、脒基、氨基亚烷基氨基、亚氨基亚烷基氨基或胍基中的氮原子被羟基、烷基羰基(-CO-R)、烷氧基羰基(-CO-OR)或酰氧基烷基-烷氧基羰基(-CO-O-R-O-CO-R)取代的化合物，其中R为一价或二价基团(例如烷基、亚烷基或芳基)或具有式-C(O)-O-CP1P2-卤代烷基的基团，其中P1和P2可以相同或不同并且为氢、烷基、烷氧基、氰基、卤素、烷基或芳基。在具体的实施方案中，氮原子是本发明化合物的脒基的氮原子之一。前药可以通过使本发明化合物与活化的基团如酰基反应从而将例如化合物中的氮原子键合至活化的酰基的典型的羰基来制备。活化的羰基化合物的实例是含有与羰基键合的离去基团的那些化合物，包括例如酰基卤、酰基胺、酰基吡啶

盐、酰基醇盐、酰基酚盐，例如对硝基苯氧基酰基、二硝基苯氧基酰基、氟苯氧基酰基和二氟苯氧基酰基。该反应通常在惰性溶剂中在低温如-78℃至约50℃下进行。该反应也可以在无机碱(例如碳酸钾或碳酸氢钠)或有机碱(例如胺，包括吡啶、三甲胺、三乙胺、三乙醇胺等)存在下进行。

其它类型的前药也包括在内。例如，本发明化合物的游离羧基可以衍生为酰胺或烷基酯。作为另一个示例，包含游离羟基的本发明化合物可以通过将该羟基转化成例如但不限于磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯或磷酰氧基甲氧基羰基而衍生为前药，如描述于Fleisher,D.等,(1996)Improved oral drug delivery:solubility limitationsovercome by the use of prodrugs(改进的口服药物递送：通过使用前药克服溶解度限制),Advanced Drug Delivery Reviews,19:115。也包括羟基和氨基的氨基甲酸酯前药以及羟基的碳酸酯前药、磺酸酯和硫酸酯。羟基衍生化为(酰氧基)甲基和(酰氧基)乙基醚，其中酰基可以是任选被包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代的烷基酯，或者其中酰基为如上所述的氨基酸酯也包含在内。这种类型的前药描述于J.Med.Chem.,(1996),39:10。更具体的实例包括醇基的氢原子被下列基团取代：例如(C_1-C₆)烷酰基氧基甲基、1-((C_1-C₆)烷酰基氧基)乙基、1-甲基-1-((C_1-C₆)烷酰基氧基)乙基、(C_1-C₆)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C_1-C₆)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C_1-C₆)烷酰基、α-氨基(C_1-C₄)烷酰基、芳基酰基和α-氨基酰基或α-氨基酰基-α-氨基酰基，其中每个α-氨基酰基独立选自天然存在的L-氨基酸、P(O)(OH)₂、-P(O)(O(C_1-C₆)烷基)₂或糖基(由除去半缩醛形式的碳水化合物的羟基得到的基团)。

“离去基团”是指化学反应中的第一反应物的一部分，其在化学反应中从第一反应物中被置换。离去基团的实例包括但不限于卤素原子、烷氧基和磺酰氧基。典型的磺酰氧基包括但不限于烷基磺酰氧基(例如甲基磺酰氧基(甲磺酸酯基)和三氟甲基磺酰氧基(三氟甲磺酸酯基))和芳基磺酰氧基(例如对甲苯磺酰氧基(甲苯磺酸酯基)和对硝基磺酰氧基(硝基苯磺酸酯基))。

“宿主”、“个体”或“患者”为脊椎动物。在某些实施方案中，脊椎动物是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于农场动物(如奶牛)、运动动物、宠物(如豚鼠、猫、狗、兔和马)、灵长类、小鼠和大鼠。在某些实施方案中，哺乳动物为人类。在包含向患者施用化合物的实施方案中，所述患者通常需要该施用。

术语“Janus激酶”是指JAK1、JAK2、JAK3和TYK2蛋白激酶。在某些实施方案中，Janus激酶可以进一步定义为JAK1、JAK2、JAK3或TYK2之一。在任何实施方案中，JAK1、JAK2、JAK3和TYK2中的任意一种可以特别被排除作为Janus激酶。在某些实施方案中，Janus激酶为JAK1。在某些实施方案中，Janus激酶为JAK1和JAK2的组合。

术语“抑制”和“降低”或这些术语的任何变通表述包括任何可测量的减少或完全抑制以达到期望的结果。例如，活性(例如JAK1活性)降低与正常情况相比，可以减少约、至多约或至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多或本文可推导的任何范围。

在某些实施方案中，式(I)化合物可以选择性地抑制JAK1，超过对JAK3和TYK2的抑制。在某些实施方案中，式(I)化合物可以选择性抑制JAK1，超过对JAK2、JAK3或TYK2或者JAK2、JAK3或TYK2的任何组合的抑制。在某些实施方案中，式(I)化合物选择性抑制JAK1和JAK2，超过对JAK3和TYK2的抑制。在某些实施方案中，式(I)化合物选择性抑制JAK1，超过对JAK3的抑制。“选择性抑制”是指，与另一种特定的Janus激酶(例如JAK3)活性相比，化合物至少为5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多或本文可推导的任何范围的更好的特定Janus激酶(例如JAK1)活性抑制剂，或者与另一种特定的Janus激酶(例如JAK3)活性相比，至少为2-、3-、4-、5-、10-、25-、50-、100-、250-或500-倍更好的特定Janus激酶(例如JAK1)活性抑制剂。

“治疗有效量”是指本发明化合物(例如式0、I、Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig或II化合物或实施例1-1至1-303、2-1至2-486或3-1任一个中的化合物)的量，其可以(i)治疗或预防特定疾病、病状或病症，或(ii)减弱、改善或消除特定疾病、病状或病症的一或多种症状，和任选(iii)预防或延迟本文所述的特定疾病、病状或病症的一或多种症状的发作。在某些实施方案中，治疗有效量是足以减弱或缓解自身免疫性或炎性疾病(例如哮喘)的症状的量。在某些实施方案中，治疗有效量是足以显著降低B细胞的活性或数量的本文所述化学实体的量。在癌症的情况下，药物的治疗有效量可以减少癌细胞的数量；减小肿瘤的大小；抑制(即，一定程度减慢并且优选停止)癌细胞浸润到外周器官中；抑制(即，一定程度减慢并且优选停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；或在一定程度上减轻与癌症相关的一或多种症状。就药物在一定程度上可能阻止生长或杀死现有癌细胞而言，它可能是细胞抑制剂或细胞毒性的。对于癌症治疗而言，可以例如通过评估疾病进展时间(TTP)或确定应答率(RR)来判断疗效。

“治疗”(以及治疗的变体)是指试图改变被治疗的个体或细胞的自然进程的临床干预，可以预防或在临床病理学过程中进行。治疗的理想效果包括预防疾病的发生或复发、缓解症状、降低疾病的任何直接或间接的病理学后果、稳定(即不恶化)疾病状态、减缓疾病进展速度、改善或缓解疾病状态、与不接受治疗的预期生存时间相比延长生存时间、缓解或改善的预后。在某些实施方案中，本发明化合物可以用于延缓疾病或病症的发展或者减缓疾病或病症的进展。需要治疗的患者包括已经患有病症或疾病的患者以及易于患有该病症或障碍的患者(例如，通过基因突变)或者需要预防该病症或疾病的患者。

“炎性病症”是指其中过度或不受调节的炎症反应导致过度炎性症状、宿主组织损伤或组织功能丧失的任何疾病、病症或综合征。“炎性疾病”也是指由白细胞或嗜中性粒细胞趋化性的汇集而介导的病理状态。

“炎症”是指由于组织损伤或破坏而引起的局部保护性反应，其用来破坏、削弱或杜绝(隔离)有害物质和受伤组织。炎症与白细胞或中性粒细胞趋化性的汇集显著相关。炎症可以由病原生物体和病毒以及非感染性原因引起，所述非感染性原因如创伤或心肌梗塞后的再灌注或中风、对外源性抗原的免疫应答和自身免疫应答。因此，适合于用本发明化合物(例如式0、I、Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig或II化合物或实施例1-1至1-303、2-1至2-486或3-1任一个中的化合物)治疗的炎性病症包括与特定防御系统的反应以及非特异性防御系统的反应有关的病症。

“特定防御系统”是指对特定抗原的存在起反应的免疫系统组成(组分)。由特定防御系统的反应而导致的炎症的实例包括对外源性抗原的传统反应、自身免疫疾病和由T细胞介导的迟发型超敏反应。慢性炎性疾病、实体移植的组织和器官(例如肾和骨髓移植物)的排斥反应以及移植物抗宿主病(GVHD)是特定防御系统的炎症反应的其它示例。

术语“非特异性防御系统”是指由不能免疫记忆的白细胞(例如粒细胞和巨噬细胞)介导的炎性疾病。至少部分由非特异性防御系统的反应引起的炎症的实例包括与下列疾病有关的炎症，例如成人(急性)呼吸窘迫综合征(ARDS)或多器官损伤综合征；再灌注损伤；急性肾小球肾炎；反应性关节炎；具有急性炎症成分的皮肤病；急性化脓性脑膜炎或其他中枢神经系统炎症，如中风；热损伤；炎性肠病；粒细胞输血相关综合征；和细胞因子诱导的毒性。

“自身免疫性疾病”是指其中组织损伤与体液或细胞介导的对身体自身成分的反应相关的任何一组疾病。自身免疫疾病的非限制性实例包括类风湿性关节炎、狼疮和多发性硬化症。

如本文所用，“变应性疾病”是指由变态反应引起的任何症状、组织损伤或组织功能丧失。本文使用的“关节炎性疾病”是指以可归因于各种病因的关节的炎性病变为特征的任何疾病。本文使用的“皮炎”是指以可归因于各种病因的皮肤炎症为特征的皮肤疾病的大家族中的任何一种。本文使用的“移植排斥”是指针对移植组织(例如器官或细胞(例如骨髓))的任何免疫反应，其特征为移植物和周围组织的功能丧失、疼痛、肿胀、白细胞增多和血小板减少。本发明的治疗方法包括治疗与炎性细胞活化相关的病症的方法。

“炎性细胞活化”是指通过刺激(包括但不限于细胞因子、抗原或自身抗体)诱导增殖性细胞应答，在炎性细胞(包括但不限于单核细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、粒细胞(即多形核白细胞，如嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞)、肥大细胞、树突细胞、朗格汉斯细胞和内皮细胞)中，产生可溶性介质(包括但不限于细胞因子、氧自由基、酶、前列腺素类或血管活性胺)或者新的或增加数目的介质(包括但不限于主要组织相容性抗原或细胞粘附分子)在细胞表面的表达。本领域技术人员应当理解，这些细胞中这些表型的一种或组合的活化可能导致炎性病症的引发、持续或恶化。

在某些实施方案中，可以根据本发明的方法治疗的炎症包括但不限于哮喘、鼻炎(例如过敏性鼻炎)、过敏性气道综合征、异位性皮炎、支气管炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、接触性皮炎、慢性阻塞性肺病和迟发性超敏反应。

术语“癌症”和“癌性”、“赘生物”和“肿瘤”以及相关术语是指或描述了哺乳动物中通常以不受调节的细胞生长为特征的生理状况。“肿瘤”包含一或多种癌细胞。癌症的实例包括癌、母细胞瘤、肉瘤、精原细胞瘤、成胶质细胞瘤、黑素瘤、白血病和骨髓或淋巴恶性肿瘤。此类癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)和肺癌，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(“SCLC”)、肺的腺癌和肺的鳞状细胞癌。其他癌症包括皮肤癌、角化棘皮瘤、滤泡癌、毛细胞白血病、口腔癌、咽(口腔)癌、唇癌、舌癌、口癌、唾液腺癌、食管癌、喉癌、肝细胞癌、胃癌、腹部癌症、小肠癌、大肠癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、泌尿生殖器癌、胆道癌、甲状腺癌、乳头状癌、肝癌、子宫内膜癌、子宫癌、唾液腺癌、肾癌、前列腺癌、睾丸癌、外阴癌、腹膜癌、肛门癌、阴茎癌、骨癌、多发性骨髓瘤、B-细胞淋巴瘤、中枢神经系统癌症、脑癌、头颈癌、霍奇金病以及相关转移。肿瘤性疾病的实例包括骨髓增生性疾病如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化如原发性骨髓纤维化和慢性骨髓性白血病(CML)。

“化疗药物”是用于治疗指定病症的药物，例如癌症或炎性病症。化疗药物的实例在本领域中是公知的，包括描述于例如美国公开申请号2010/0048557中公开的那些实例，其在此引入本文作为参考。另外，化疗药物包括任何化疗药物的可药用的盐、酸或衍生物以及它们中两种或更多种的组合。

“包装说明书”用于指通常包含在治疗产品的商业包装中的使用说明，其包含关于使用此类治疗产品的适应症、用法、剂量、给药、禁忌症或警告的信息。

除非另有说明，本文描绘的结构还应当包括仅在一或多个同位素富集的原子存在时不同的化合物。可以掺入本发明化合物的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，分别例如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³⁵S、¹⁸F、³⁶Cl、¹²³I和¹²⁵I。同位素标记的化合物(例如用³H和¹⁴C标记的化合物)可用于化合物或底物组织分布测定。氚化(即³H)和碳-14(即¹⁴C)同位素由于其易于制备和检测而被应用。此外，由于具有较高的代谢稳定性(例如增加体内半衰期或降低剂量需求)，用较重的同位素例如氘(即²H)取代可以提供某些治疗优势。在某些实施方案中，在本发明化合物中，一或多个碳原子被¹³C-或¹⁴C-富集的碳替代。正电子发射同位素例如¹⁵O、¹³N、¹¹C和¹⁸F可用于正电子发射断层扫描(PET)研究以检查底物受体占有率。同位素标记的化合物通常可以根据与流程中或本文实施例中公开的类似方法通过用同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂制备。

需要特别注意的是，与本发明的一个实施方案相关的讨论的任何限制适用于本发明的任何其它实施方案。此外，本发明的任何化合物或组合物可用于本发明的任何方法中，本发明的任何方法可以用于生产或利用本发明的任何化合物或组合物。

除非明确说明替代方案是唯一的或者替代方案是互相排斥的，否则术语“或”的使用意味着“和/或”，尽管本公开支持唯一的替代方案和“和/或”的定义。

在整个申请中，术语“约”用于表示：数值包括用于确定该值的设备或方法的误差的标准偏差。

除非另外明确指出，本文所使用的“一”或“一个”意指一个或一个以上。本文所使用的“另一个”表示至少第二个或更多个。

本文使用的标题仅用于编写的目的。

JANUS激酶抑制剂

还提供了选自实施例1-13的化合物及其盐。

在一个实施方案中，R¹为–(C₀-C₃烷基)NR^aR^b。

在一个实施方案中，R¹为H或–(C₀-C₃烷基)R^a。

在一个实施方案中，R¹为–(C₀-C₃烷基)C(O)R^a。

在一个实施方案中，R¹选自下列基团：H、甲基、

在一个实施方案中，R¹为H、甲基、

在一个实施方案中，R^e选自下列基团：甲基、乙基、

在一个实施方案中，R^e选自下列基团：

在一个实施方案中，R²为苯基，其任选被1－5个Rⁿ取代。

在一个实施方案中，R²为苯基，其任选被1－2个Rⁿ取代。

在一个实施方案中，R²选自:

在一个实施方案中，R³为H。

在一个实施方案中，R⁴为H。

在一个实施方案中，R⁵为H、氯代或乙炔基。

在一个实施方案中，R³为H，R⁴为H，R⁵为H。

在一个实施方案中，R³为H，R⁴为H，R⁵为氯代。

在一个实施方案中，R³为H，R⁴为H，R⁵为乙炔基。

在一个实施方案中，R³为-NH₂。在另一个实施方案中，R³不为-NH₂。示例性的本发明化合物包括选自下列的化合物：

及其盐。

还提供了下式的化合物：

其可以根据与本文提供的方法类似的方法学与本领域技术人员的知识相结合来制备。

在一个实施方案中，所述疾病或病症为癌症、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化、慢性骨髓性白血病(CML)、类风湿性关节炎、炎性肠综合征、克隆病、牛皮癣、接触性皮炎或迟发型超敏反应。

在一个实施方案中，提供了式(I)化合物或其可药用的盐的用途，用于治疗癌症、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化、慢性骨髓性白血病(CML)、类风湿性关节炎、炎性肠综合征、克隆病、牛皮癣、接触性皮炎或迟发型超敏反应。

在一个实施方案中，提供了配制用于吸入给药的组合物。

在一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物或其可药用的盐的定量吸入器。

在一个实施方案中，式(I)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为JAK2抑制剂有效至少5倍以上。

在一个实施方案中，式(I)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为JAK2抑制剂有效至少10倍以上。

在一个实施方案中，式(I)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为JAK3抑制剂有效至少5倍以上。

在一个实施方案中，式(I)化合物或其可药用的盐作为JAK1抑制剂较作为JAK3抑制剂有效至少10倍以上。

在一个实施方案中，提供了用于治疗哺乳动物脱发的方法，该方法包括将式(I)化合物或其可药用的盐给予哺乳动物。

在一个实施方案中，提供了式(I)化合物或其可药用的盐用于治疗脱发的用途。

在一个实施方案中，提供式(I)化合物或其可药用的盐在制备用于治疗哺乳动物脱发的药物中的用途。

JANUS激酶抑制剂化合物的合成

本发明的化合物可以通过本文所述的合成路线合成。在某些实施方案中，除了或者根据本文所包含的描述，可以采用化学领域公知的方法。原料通常可从商业来源例如Aldrich Chemicals(Milwaukee,Wis.)获得，或者使用本领域技术人员熟知的方法容易地制备(例如，通过下列文献中所述常规方法制备：Louis F.Fieser和Mary Fieser,Reagentsfor Organic Synthesis(有机合成试剂),1－19卷,Wiley,N.Y.(1967－1999ed.)；Beilsteins Handbuch der organischen Chemie,4,Aufl.ed.Springer-Verlag,Berlin,包括增补版(也可以通过Beilstein在线数据库获得))；或Comprehensive HeterocyclicChemistry(综合杂环化学),Katrizky和Rees编辑,Pergamon Press,1984。

化合物可以单独制备或作为包含至少2种化合物(例如5-1,000种化合物或10-100种化合物)的化合物库制备。通过本领域技术人员已知的方法，可以通过组合的“拆分和混合(‘split and mix’)”方法或者通过使用液相或固相化学的多重平行合成来制备化合物库。因此，根据本发明的另一方面，提供了包含至少2种本发明化合物的化合物库，例如式0、I、Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig或II化合物或实施例1-1至1-303、2-1至2-486或3-1任一项中的化合物。

为了说明的目的，下面描述的反应流程提供了合成本发明的化合物以及关键中间体的路线。各个反应步骤的更详细说明，参阅下面的实施例部分。本领域技术人员应当理解，可以使用其他合成路线。尽管在流程中描述了一些具体的原料和试剂并在下面进行了讨论，但是可以用其它原料和试剂替代从而提供各种衍生物或反应条件。另外，根据下述方法制备的许多化合物可以根据本公开内容使用本领域技术人员熟知的常规化学进一步修饰。

在制备本发明化合物时，可能需要保护中间体的远端官能团(例如伯胺或仲胺)。是否需要此类保护取决于远端官能团的性质以及制备方法的条件。适当的氨基保护基团包括乙酰基、三氟乙酰基、苄基、苯磺酰基、叔丁氧基羰基(Boc)、苄氧基羰基(CBz)和9-芴基亚甲氧基羰基(Fmoc)。本领域技术人员很容易确定是否需要此类保护。关于保护基团及其用途的一般描述，参见T.W.Greene,Protective Groups in Organic Synthesis(有机合成中的保护基团),John Wiley&Sons,纽约,1991。

在本发明化合物的合成中常用的并且可以使用各种试剂和条件进行的其它转化包括以下：

(1)羧酸与胺反应形成酰胺。此类转化可以使用本领域技术人员已知的各种试剂实现，但全面评述可以参见Tetrahedron，2005，61，10827－10852。

(2)伯胺或仲胺与芳基卤化物或拟卤化物(例如三氟甲磺酸酯)的反应，通常称为“Buchwald-Hartwig交叉偶联”，可以使用各种催化剂、配体和碱来实现。这些方法的综述参见Comprehensive Organic Name Reactions and Reagents(综合有机名称反应和试剂)，2010，575－581。

(3)芳基卤与乙烯基硼酸或硼酸酯之间的钯交叉偶联反应。这种转化是一种“Suzuki-Miyaura交叉偶联”，此类反应详细地描述于Chemical Reviews,1995，95(7)，2457－2483。

(4)酯水解生成相应的羧酸是本领域技术人员熟知的，条件包括：对于甲酯和乙酯，使用强碱水溶液(如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾)或强无机酸水溶液(如HCl)；对于叔丁酯，可以使用酸进行水解，例如HCl的二氧六环溶液或者三氟乙酸(TFA)的二氯甲烷(DCM)溶液。

流程1

如流程1所示，2型化合物可以通过1型化合物的硝基还原获得。通过2和3之间的酰胺键形成获得4型化合物，然后在酸性条件下将其脱保护获得5型化合物。采用适当的亲电子试剂和碱进行吡唑烷基化获得6型化合物。

流程2

如流程2所示，2型化合物可以通过采用2-氯代-2,2-二氟乙酸钠处理酚例如1获得，该反应在碱存在下并在适当的溶剂中加热进行。通过2和3之间的Pd-介导的偶合反应获得4型化合物。通过硝基还原获得5，可以在适当的酰胺键形成条件下使其与6型化合物偶合，获得7。通过Pd介导的硫醇置换可以将7转化为8，然后通过酸性条件处理可以将8转化为9。

流程3

如流程3所示，2型化合物可以通过1型化合物的Pd介导的硫醇置换获得。通过硝基还原获得5b型化合物，然后可以在适当的酰胺键形成条件下使其与6型化合物偶合，获得7型化合物。通过酸性脱保护获得8型化合物。

流程4

如流程4所示，2型化合物可以在碱存在下采用适当的亲电子试剂进行吡唑烷基化而获得。酸性脱保护，随后通过酰胺键形成反应，获得4型化合物。

流程5

如流程5所示，3型化合物可以通过卤代乙酰基卤(acetayl halides)与适当的胺反应而获得。在碱存在下使得3和1结合引起吡唑烷基化，获得4型化合物。

流程6

如流程6所示，2型化合物可以通过在碱存在下1型的吡唑与适当的亲电子试剂的烷基化而获得。胺去保护，随后通过烷基化或还原胺化，获得4型化合物。

方法和LCMS条件

方法A

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用Shim-Pack XR-ODS柱(50×3mm,2.2μm粒径)，洗脱液：溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法B

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用Shim-Pack XR-ODS柱(50×3mm,2.2μm粒径)，洗脱液：溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法C

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用Ascentis Express C18柱(30×2.1mm,2.7μm粒径)，洗脱液：溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法D

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用Shim-Pack XR-ODS柱(50×3mm,2.2μm粒径)，洗脱液：溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法E

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用Poroshell HPH-C₁₈,柱(50×3mm,2.7μm粒径)，洗脱液：溶剂A:水/5mM NH₄HCO₃；溶剂B:乙腈。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法F

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用Ascentis Express C18柱(30×2.1mm,2.7μm粒径)，洗脱液：溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法G

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用Ascentis Express C18柱(30×2.1mm,2.7μm粒径)，洗脱液：溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法H

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用Ascentis Express C18柱(30×2.1mm,2.7μm粒径)，洗脱液：溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法I

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用Shim-Pack XR-ODS柱(50×3mm,2.2μm粒径)，洗脱液：溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法J

实验在SHIMADZU 20A HPLC上进行，采用C18-反相柱(50×3mm Xtimate TM-C18,2.2μm粒径)，流动相：溶剂A:水+0.1％甲酸；溶剂B:乙腈+0.05％甲酸。梯度洗脱：

检测-UV(220和254nm)和ELSD

方法K

在采用ESI作为电离源的配备Agilent MSD(6140)的Agilent 1290UHPLC质谱仪上进行实验。LC分离采用Phenomenex XB-C18,1.7mm,50×2.1mm柱，流速为0.4ml/分钟。溶剂A为含有0.1％甲酸的水，溶剂B为含有0.1％甲酸的乙腈。梯度洗脱为：2－98％溶剂B洗脱7分钟，保持98％B 1.5分钟，随后平衡1.5分钟。LC柱温度为40℃。在220nm和254nm记录UV吸收度，所有的实验均采用质谱全扫描。

实施例1

N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

于0℃，将2-溴乙酰溴(285mg,1.41mmol)的二氯甲烷(4.0mL)滴加至N-甲基-N-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-胺(200mg,1.18mmol)的二氯甲烷(10mL)和饱和的碳酸钠(10mL)混合物中。然后将反应混合物于室温下搅拌1h。分离各相。水相用3×30mL的二氯甲烷萃取，合并有机层。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。获得200mg的2-溴-1-[4-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]哌啶-1-基]乙-1-酮，为浅黄色固体，其无需纯化可以直接使用。

于65℃，将2-溴-1-4-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]哌啶-1-基乙-1-酮(86.0mg,0.295mmol)的DMF(2.0mL)溶液滴加至N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(100mg,0.247mmol)和Cs₂CO₃(160mg,0.491mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)混合物中。将反应混合物于65℃搅拌5h。加入水(20mL)。获得的混合物用3×50mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物通过Prep-HPLC纯化，采用下列条件：柱：XBridge Prep C18OBD柱,5um,19*150mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：30mL/min；梯度洗脱：25％B至45％B，8min内；254/220nm检测。获得15.9mg的N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法A,ESI)：[M+H]⁺＝615.3,R_T＝1.39min；¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)：δ(ppm)8.59(dd,J＝4.8,1.6Hz,1H),8.48(s,1H),8.44(s,1H),8.27(dd,J＝9.4,1.4Hz,1H),7.73(d,J＝2.8Hz,1H),7.60(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.54-7.47(m,2H),6.81(t,J＝73.4Hz,1H),5.34(d,J＝16.4Hz,1H),5.22(d,J＝16.4Hz,1H),4.68-4.66(m,4H),4.63–4.60(m,1H),4.11–4.03(m,2H),3.26–3.10(m,1H),2.75–2.63(m,2H),2.23(s,3H),1.81–1.75(m,2H),1.64–1.46(m,2H)。

实施例3

N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]-6-乙炔基-咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

向6-氯代咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-羧酸(500mg,2.53mmol)的DMF(10mL)溶液中加入HATU(1060mg,2.78mmol)、DIPEA(1330mg,10.1mmol)和5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑-4-胺(987mg,2.53mmol)。将获得的溶液于室温下搅拌1h。将获得的混合物真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用庚烷/乙酸乙酯(100/0～0/100)洗脱，获得17mg(20％)的固体6-氯代-N-[5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺。LC/MS(方法J,ESI)：[M+H]⁺＝569.0,R_T＝1.65min；

在氮气环境中、室温下，向6-氯代-N-[5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(600mg,1.05mmol)的四氢呋喃(4.2mL)溶液中依次加入碘化亚铜(40.1mg,0.00713mL,0.211mmol)、四(三苯膦)钯(0)(122mg,0.105mmol)、乙炔基(三甲基)硅烷(124mg,0.179mL,1.26mmol)和三乙胺(213mg,0.294mL,2.11mmol)。将获得的溶液于60℃、氮气环境中搅拌过夜，冷却至室温。将获得的混合物真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用庚烷/乙酸乙酯(100/0～50/50)洗脱，获得226mg(34％)的N-[5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑-4-基]-6-(2-三甲基甲硅烷基乙炔基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为油状物。LC/MS(方法J,ESI)：[M+H]+＝631.1,RT＝2.12min；

于室温下，向N-[5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑-4-基]-6-(2-三甲基甲硅烷基乙炔基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(220mg,0.349mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中加入四丁基氟化铵的THF溶液(1M,0.7mL)。将获得的溶液搅拌1h。获得的混合物真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用庚烷/乙酸乙酯(100/0～0/100)洗脱，获得112mg(57％)的N-[5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑-4-基]-6-乙炔基-咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为油状物。LC/MS(方法J,ESI)：[M+H]+＝559.0,RT＝1.59min；

将N-[5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑-4-基]-6-乙炔基-咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(110mg,0.197mmol)的盐酸/1,4-二氧六环(4M,0.5mL)置于室温下。将获得的溶液搅拌1h。将获得的混合物真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用庚烷/乙酸乙酯(100/0～0/100)，获得112mg(57％)的N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]-6-乙炔基-咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为油状物。LC/MS(方法K,ESI)：[M+H]+＝429.1,RT＝4.01min.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.18(s,1H),10.05(s,1H),8.47(s,1H),8.44–8.35(m,2H),7.71–7.53(m,3H),7.44(d,J＝8.8Hz,1H),7.10(t,J＝73.3Hz,1H),3.57(s,1H)。

实施例4

N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

向N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(130mg,0.321mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(18mL)溶液中加入Cs₂CO₃(300mg,0.921mmol)和2-溴-1-[4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]乙-1-酮(130mg,0.446mmol)。将反应混合物于65℃搅拌3h，将其冷却至室温。加入水(30mL)。将获得的溶液用3×50mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机萃取液用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物通过Prep-HPLC纯化，采用下列条件：柱：XBridge Prep C18OBD柱,5um,19*150mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：30mL/min；梯度洗脱：25％B至45％B，8min内；254/220nm；检测，获得32.7mg(17％)的N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法A,ESI)：[M+H]⁺＝615.3,R_T＝1.39min；¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)：δ(ppm)8.58(dd,J＝4.8,1.6Hz,1H),8.47(s,1H),8.43(s,1H),8.27(dd,J＝9.4,1.6Hz,1H),7.72(d,J＝2.8Hz,1H),7.60(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.52–7.47(m,2H),6.81(t,J＝73.6Hz,1H),5.34(d,J＝16.0Hz,1H),5.23(d,J＝16.4Hz,1H),4.59–4.55(m,1H),4.11–4.08(m,1H),3.72(t,J＝4.4Hz,4H),3.25–3.19(m,1H),2.84–2.79(m,1H),2.63(t,J＝4.4Hz,4H),2.58–2.52(m,1H),2.01–1.98(m,2H),1.57–1.47(m,2H)。

实施例5

N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(4-[[(1-氰基环丙基)-甲基]氨基]哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

向4-氧代哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(300mg,1.51mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中加入1-(氨基甲基)环丙烷-1-甲腈盐酸盐(216mg,1.63mmol)和NaOAc(120mg,1.46mmol)。将获得的溶液于室温下搅拌2h。然后加入NaBH(OAc)₃(636mg,3.00mmol)。将反应混合物于室温搅拌3h，然后加入饱和的碳酸钠(50mL)。分离各相，水相用3×50mL的二氯甲烷萃取，合并有机层。有机相经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得300mg的4-[[(1-氰基环丙基)甲基]氨基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯，为无色油状物。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝280.1,R_T＝0.55min.

于0－5℃，在搅拌下，向4-[[(1-氰基环丙基)甲基]氨基]哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(200mg,0.716mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中滴加三氟乙酸(3.0mL)。将获得的溶液于室温下搅拌1h。获得的混合物真空浓缩，获得200mg(粗品)的1-[[(哌啶-4-基)氨基]甲基]环丙烷-1-甲腈三氟乙酸盐，为黄色油状物。LC/MS(方法I,ESI)：[M+H]⁺＝180.1RT＝0.16min。

向N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(200mg,0.494mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入2-溴乙酸叔-丁基酯(105mg,0.538mmol)和Cs₂CO₃(321mg,0.985mmol)。将获得的混合物于65℃搅拌2h，将其冷却至室温。加入水(30mL)。获得的混合物用3×50mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯和石油醚梯度洗脱(0-60％乙酸乙酯)。合并适当的组分，真空浓缩，获得200mg(78％)的2-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸叔-丁基酯，为黄色固体。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝519.0,R_T＝0.97min。

于室温下，向4N HCl的二氧六环溶液(10mL)中加入2-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸叔-丁基酯(200mg,0.385mmol)。将获得的溶液于室温搅拌2h。将获得的混合物真空浓缩，获得2-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(150mg)，其无需进一步纯化可以直接用于下一步骤。LC/MS(方法I,ESI)：[M+H]⁺＝463.2，R_T＝0.76min。

向2-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(80.00mg,0.173mmol)的DMA(10mL)溶液中加入获自该实施例第2步的1-{[(哌啶-4-基)氨基]甲基}环丙烷-1-甲腈三氟乙酸盐(44.8mg,0.207mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基

六氟磷酸盐(PyAOP)(135mg,0.259mmol)、4-二甲基氨基吡啶(2.11mg,0.0173mmol)和DIPEA(67mg,0.52mmol)。将获得的溶液于65℃搅拌5h，将其冷却至室温。加入水(30mL)。获得的混合物用3x30mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯和石油醚梯度洗脱(0-80％乙酸乙酯)。合并适当的组分，真空浓缩。残留物通过Prep-HPLC进一步纯化，采用下列条件：柱：XBridge Prep C18OBD柱,5um,19*150mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：30mL/min；梯度洗脱：25％B至45％B，8min内；254/220nm；检测，获得4.10mg的N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(4-[[(1-氰基环丙基)甲基]氨基]哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法E,ESI)：[M+H]⁺＝624.2,R_T＝1.24min；¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)：δ(ppm)8.58(d,J＝4.4Hz,1H),8.47(s,1H),8.43(s,1H),8.27(d,J＝8.8Hz,1H),7.73(d,J＝2.4Hz,1H),7.60(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.52–7.47(m,2H),6.80(t,J＝73.6Hz,1H),5.32(d,J＝16.8Hz,1H),5.26(d,J＝16.8Hz,1H),4.45–4.41(m,1H),4.05–3.98(m,1H),3.07–2.81(m,2H),2.77(s,2H),2.09–1.96(m,2H),1.55–1.29(m,3H),1.27–1.22(m,2H),1.05–0.97(m,2H)。

实施例7

N-[1-(2-氨基乙基)-3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

向N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(200mg,0.494mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入N-(2-溴乙基)氨基甲酸叔-丁基酯(120mg,0.535mmol)和Cs₂CO₃(320mg,0.982mmol)。将反应混合物于60℃搅拌4h，将其冷却至室温。加入水(100mL)。获得的混合物用3×100mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯和石油醚梯度洗脱(0－40％乙酸乙酯)。合并适当的组分，真空浓缩，获得200mg(74％)的N-(2-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)氨基甲酸叔-丁基酯，为黄色固体。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝548.1,R_T＝0.91min。

向4N HCl的二氧六环溶液(10mL)中分数次加入N-(2-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)氨基甲酸叔-丁基酯(150mg,0.274mmol)。将反应混合物于室温搅拌3h，真空浓缩。残留物通过Prep-HPLC纯化，采用下列条件：柱：XBridge Prep C18OBD柱,5um,19*150mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B:ACN；流速：30mL/min；梯度洗脱：25％B至45％B，8min内；254/220nm检测，获得49.1mg(40％)的N-[1-(2-氨基乙基)-3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法G,ESI)：[M+H]⁺＝448.1,R_T＝1.28min；¹HNMR(400MHz,CD₃OD-d₄)：δ(ppm)8.59(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),8.47(s,1H),8.41(s,1H),8.27(dd,J＝9.2,1.6Hz,1H),7.71(d,J＝2.4Hz,1H),7.59(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.52–7.45(m,2H),6.82(t,J＝73.6Hz,1H),4.32(t,J＝6.0Hz,2H),3.18(t,J＝6.0Hz,2H)。

实施例8

N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

向5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(4.60g,11.0mmol)的乙醇(50mL)和水(5mL)溶液中加入铁粉(6.12g,110mmol)和NH₄Cl(2.93g,54.78mmol)。将获得的混合物于回流下氮气环境中搅拌3h，将其冷却至室温。滤除固体，用EtOH洗涤。真空浓缩滤液。将残留物在EtOAc和盐水之间分配。有机相经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得4.01g(94％)的5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-胺，为黄色油状物。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝390.1,RT＝0.89min。

向5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-胺(4.01g,10.3mmol)的DMA(40mL)溶液中依次加入咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酸(1.80g,11.03mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基

六氟磷酸盐(PyAOP)(6.30g,12.1mmol)、DIPEA(4.00g,30.9mmol)和4-二甲基氨基吡啶(120mg,0.982mmol)。将反应混合物于60℃搅拌过夜，将其冷却至室温。加入水(100mL)。获得的混合物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取，合并有机层。有机萃取液用1×100mL的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯和石油醚梯度洗脱(0－60％乙酸乙酯)。合并适当的组分，真空浓缩，获得5.02g(91％)的N-[5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS(方法H,ESI,m/z)：[M+H]⁺＝535.2,R_T＝1.07min。

向4N HCl的二氧六环溶液(40mL)中分次加入N-[5-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(4.00g,7.48mmol)。将获得的混合物于室温搅拌2h，然后真空浓缩。加入10％碳酸氢钠水溶液直到pH达到～9。过滤收集固体，用水洗涤，真空干燥，获得3.01g(99％)的N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]＝405.0,R_T＝0.77min。

将碘甲烷(28mg,0.197mmol)加至N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(100mg,0.247mmol)和Cs₂CO₃(80.0mg,0.246mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)混合物中。将反应混合物于室温下搅拌30min。加入水(20mL)。将获得的溶液用3×50mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物通过Prep-HPLC纯化，采用下列条件：柱：XBridge Prep C18OBD柱,5um,19*150mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：30mL/min；梯度洗脱：25％B至45％B，8min内；254/220nm；检测，获得16.0mg(15％)的N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法D,ESI)：[M+H]⁺＝419.1,RT＝1.47min；¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)：δ(ppm)8.59(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),8.47(s,1H),8.35(s,1H),8.27(dd,J＝9.2,1.6Hz,1H),7.67(d,J＝2.8Hz,1H),7.58(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.50(dd,J＝9.2,4.8Hz,1H),7.47(d,J＝9.2Hz,1H),6.81(t,J＝73.6Hz,1H),4.02(s,3H)。

实施例9

N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

在氮气环境中，向环丙烷硫醇(46.0mg,0.620mmol)的甲苯(15mL)溶液中加入氢化钠(24.0mg,1.00mmol)。将获得的溶液于室温、氮气环境中搅拌1h。

在氮气环境中，向上述溶液中加入N-[5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(100mg,0.173mmol)、Pd₂(dba)₃.CHCl₃(10mg,0.0966mmol)和XantPhos(10mg,0.0173mmol)。将反应混合物于85℃搅拌过夜，将其冷却至室温。将获得的混合物真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯和石油醚梯度洗脱(0－90％EtOAc)。合并适当的组分，真空浓缩。获得90.1mg(91％)的N-[5-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝573.3,R_T＝1.13min。

向甲醇(2.0mL)和浓HCl(2.0mL,12N)的混合物中分数次加入N-[5-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(90.0mg,0.157mmol)。将反应混合物于室温搅拌3h，真空浓缩。残留物通过Prep-HPLC纯化，采用下列条件：柱：XBridge Prep C18OBD柱,5um,19*150mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：30mL/min；梯度洗脱：25％B至45％B，8min内；254/220nm；检测，获得18.1mg(26％)的N-[3-[5-(环丙基硫烷基)-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法C,ESI)：[M+H]⁺＝443.1,R_T＝1.15min；¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)：δ(ppm)8.59(d,J＝4.4Hz,1H),8.46(s,1H),8.36(s,1H),8.25(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(s,1H),7.56(d,J＝8.8Hz,1H),7.49(dd,J＝8.8,4.4Hz,1H),7.41(d,J＝8.4Hz,1H),6.73(t,J＝73.7Hz,1H),2.33–2.22(m,1H),1.18–1.06(m,2H),0.69–0.57(m,2H)。

实施例10

N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙-2-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

将铁粉(480mg,8.60mmol)和NH4Cl(250mg)加至5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(400mg,0.861mmol)的乙醇(20mL)和水(2mL)溶液中。将反应混合物于回流下、氮气环境中搅拌3h。滤除固体，用乙醇洗涤。真空浓缩滤液。将残留物在EtOAc和盐水之间分配。有机相经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。获得400mg(粗品)的5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-胺，为浅黄色油状物。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝434.0,R_T＝0.90min。

向5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-胺(400mg,0.921mmol)的DMA(30mL)溶液中加入咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酸(160mg,0.981mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基

六氟磷酸盐(PyAOP)(572mg,1.10mmol)、4-二甲基氨基吡啶(11.0mg,0.0901mmol)和DIPEA(355mg,2.75mmol)。将获得的溶液于60℃搅拌过夜，将其冷却至室温。加入水(100mL)。获得的混合物用3×300mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机相用1×100mL的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯和石油醚梯度洗脱(0－70％EtOAc)。合并适当的组分，真空浓缩，获得300mg(56％)的N-[5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝581.1,R_T＝1.08min。

在氮气环境中。向N-[5-[5-溴-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(120mg,0.207mmol)的甲苯(10mL)溶液中加入(丙-2-基硫烷基)钠(60.0mg,0.611mmol)、Pd₂(dba)₃.CHCl₃(11.0mg,0.0106mmol)和XantPhos(11.0mg,0.0190mmol)。获得的混合物于80℃氮气环境中搅拌过夜，将其冷却至室温。将获得的混合物真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯和石油醚梯度洗脱(0－70％EtOAc)，获得100mg(84％)的N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙-2-基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝575.2,R_T＝1.15min。

向甲醇(5.0mL)和浓HCl(5.0mL,12N)的混合物中加入N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙-2-基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(120mg,0.209mmol)。将获得的溶液于室温搅拌2h，真空浓缩。残留物通过Prep-HPLC纯化，采用下列条件：柱：XBridge Prep C18OBD柱,5um,19*150mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：30mL/min；梯度洗脱：25％B至45％B，8min内；254/220nm检测，获得7.70mg的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(丙-2-基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法B,ESI)：[M+H]⁺＝445.2,R_T＝2.56min；¹H NMR(300MHz,CD₃OD-d₄)：δ(ppm)8.56(d,J＝4.5Hz,1H),8.45(s,1H),8.36(s,1H),8.24(dd,J＝9.2,1.4Hz,1H),7.64(d,J＝2.1Hz,1H),7.58(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.48(dd,J＝9.3,4.5Hz,1H),7.41(d,J＝8.4Hz,1H),6.76(t,J＝73.5Hz,1H),3.49–3.43(m,1H),1.28(d,J＝6.3Hz,6H)。

实施例11

N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-[4-([4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-基]甲基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

在冰浴冷却下，向N,N-二甲基-2-[4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-基]乙酰胺(300mg,1.12mmol)的二氯甲烷(10mL)和饱和的碳酸钠(3.8mL)的溶液中滴加2-溴乙酰基溴(335mg,1.66mmol)，滴加的速度应当保持内部温度低于5℃。将获得的溶液在冰浴冷却下搅拌1h。将获得的溶液用3×50mL的二氯甲烷萃取，合并有机层。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，在不加热的情况下真空浓缩。获得300mg的2-(4-[[1-(2-溴乙酰基)哌啶-4-基]甲基]哌嗪-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺，为黄色油状物，其无需进一步纯化可以直接使用。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝389.2,R_T＝0.17min。

于65℃，将粗品2-(4-[1-(2-溴乙酰基)哌啶-4-基]甲基哌嗪-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺(120mg)的DMF(2.0mL)溶液滴加至N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(120mg,0.288mmol)和Cs₂CO₃(400mg,1.23mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(8.0mL)混合物中。将反应混合物于65℃搅拌2h，将其冷却至室温。加入水(20mL)。获得的混合物用3×50mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机萃取液用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物通过Prep-HPLC纯化，采用下列条件：柱：XBridge Prep C18OBD柱,5um,19*150mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：30mL/min；梯度洗脱：25％B至45％B，8min内；254/220nm检测，获得6.20mg的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[2-[4-([4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-基]甲基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LC/MS(方法A,ESI)：[M+H]⁺＝725.4,R_T＝1.38min；1H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)：δ(ppm)8.58(dd,J＝4.8,1.6Hz,1H),8.47(s,1H),8.43(s,1H),8.26(dd,J＝9.4,1.4Hz,1H),7.57(d,J＝2.4Hz,1H),7.52–7.49(m,2H),7.42(d,J＝8.4Hz,1H),6.74(t,J＝73.8Hz,1H),5.31(d,J＝16.4Hz,1H),5.22(d,J＝16.4Hz,1H),4.54–4.51(m,1H),4.05–4.01(m,1H),3.24(s,2H),3.22–3.14(m,1H),3.11(s,3H),2.95(s,3H),2.87–2.70(m,1H),2.68–2.45(m,11H),2.27–2.25(m,2H),1.93–1.84(m,3H),1.38–1.14(m,2H)。

实施例12

N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(吗啉-4-基)乙基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

在冰浴冷却下，向搅拌的4-[2-(哌嗪-1-基)乙基]吗啉(200mg,1.00mmol)、二氯甲烷(10mL)、饱和的碳酸钠(4.2mL)的混合物中滴加2-溴乙酰基溴(243mg,1.20mmol)，滴加的速度应当使得内部温度保持在5℃以下。将反应混合物于室温下再搅拌30min。分离各相，水相用3×20mL的二氯甲烷萃取，合并有机层。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得200mg的粗品2-溴-1-[4-[2-(吗啉-4-基)乙基]哌嗪-1-基]乙-1-酮，其无需进一步纯化可以立即用于下一步骤。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝320.1,R_T＝0.28min。

将前面步骤中获得的粗品2-溴-1-[4-[2-(吗啉-4-基)乙基]哌嗪-1-基]乙-1-酮(94.9mg)的DMF(2mL)溶液加至N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(100mg,0.247mmol)和Cs₂CO₃(161mg,0.494mmol)的DMF(10mL)混合物中。将反应混合物于65℃搅拌2h，将其冷却至室温。加入水(20mL)。获得的混合物用3×50mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机萃取液用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯和石油醚梯度洗脱(0-90％乙酸乙酯)。合并适当的组分，真空浓缩。残留物通过Prep-HPLC进一步纯化，采用下列条件：柱：XBridgePrep C₁₈OBD柱,5um,19*150mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：30mL/min；梯度洗脱：25％B至45％B，8min内；254/220nm检测，获得3.40mg的N-[3-[5-氯代-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(吗啉-4-基)乙基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为灰白色固体。LC/MS(方法F,ESI)：[M+H]⁺＝644.3,R_T＝0.95min；¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)：δ(ppm)8.59(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),8.48(s,1H),8.43(s,1H),8.27(dd,J＝9.4,1.4Hz,1H),7.72(d,J＝2.4Hz,1H),7.60(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.52–7.47(m,2H),6.80(t,J＝73.6Hz,1H),5.28(s,2H),3.79–3.61(m,8H),2.66–2.45(m,12H)。

实施例13

N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺

将铁粉(647mg)和NH₄Cl(310mg,5.79mmol)加入5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-4-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(500mg,1.16mmol)的乙醇(10mL)和水(1.0mL)的溶液中。将反应混合物于回流下氮气环境中搅拌4h，将其冷却至室温。滤出固体，用乙醇洗涤。真空浓缩滤液。残留物在EtOAc和盐水之间分配。有机相经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，获得400mg的5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-胺，浅黄色油状物。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝402.0,R_T＝0.80min。

向5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-胺(150mg,0.374mmol)的DMA(5.0mL)溶液中加入咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酸(73.1mg,0.448mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基

六氟磷酸盐(PyAOP)(234mg,0.448mmol)、DIPEA(145mg,1.12mmol)和4-二甲基氨基吡啶(4.56mg,0.0373mmol)。将反应混合物于60℃搅拌过夜，将其冷却至室温。加入水(50mL)。将获得的溶液用3×50mL的乙酸乙酯萃取，合并有机层。有机萃取液用1×50mL的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶快速色谱纯化，采用乙酸乙酯和石油醚梯度洗脱(0－50％EtOAc)。合并适当的组分，真空浓缩，获得150mg(73％)的N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为黄色固体。LC/MS(方法H,ESI)：[M+H]⁺＝547.2,R_T＝1.07min。

向甲醇(5.0mL)和浓HCl水溶液(5.0mL,12N)的混合物中分数次加入N-[5-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺(120mg,0.220mmol)。将获得的溶液于室温搅拌3h，真空浓缩(除去过量的HCl和MeOH)。将20％的碳酸钠水溶液加至混合物中直到pH达到9。过滤收集固体，用水洗涤，干燥，获得50.1mg(55％)的N-[3-[2-(二氟甲氧基)-5-(甲基硫烷基)苯基]-1H-吡唑-4-基]咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-甲酰胺，为棕色固体。LC/MS(方法A,ESI)：[M+H]⁺＝417.1,R_T＝1.61min；¹HNMR(400MHz,CDCl₃)：δ(ppm)10.58(s,1H),8.61(s,1H),8.53(s,1H),8.48(dd,J＝4.4,1.2Hz,1H),8.17(dd,J＝9.4,1.4Hz,1H),7.56(d,J＝2.0Hz,1H),7.39(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.33(d,J＝8.4Hz,1H),7.27(dd,J＝9.2,4.4Hz,1H),6.44(t,J＝73.6Hz,1H),2.53(s,3H)。

表1提供了上述化合物和采用类似方法制备的其它代表性的本发明化合物的列表。

表1

酶试验

JAK酶试验如下进行：

分离的重组JAK1和JAK2激酶结构域的活性通过采用Caliper

technology(Caliper Life Sciences,Hopkinton,MA)监测来源于JAK3(Val-Ala-Leu-Val-Asp-Gly-Tyr-Phe-Arg-Leu-Thr-Thr,采用5-羧基荧光素在N-末端上进行荧光标记)的肽磷酸化测定。为确定抑制常数(K_i)，将化合物在DMSO中连续稀释，添加至含有纯化酶(1.5nMJAK1或0.2nM JAK2)、100mM HEPES缓冲液(pH 7.2)、0.015％Brij-35、1.5μM肽底物、ATP(25μM)、10mM MgCl₂、4mM DTT的50μL激酶反应物，最终DMSO的浓度为2％。将反应物于22℃在384-孔聚丙烯微量板中温育30分钟，然后通过加入25μL含EDTA的溶液(100mM HEPES缓冲液(pH 7.2)、0.015％Brij-35、150mM EDTA)终止，使得EDTA最终浓度为50mM。在激酶反应终止后，根据制造商说明书采用Caliper

3000测定作为总肽底物的一部分的磷酸化产物的比例。然后使用Morrison紧密结合模型测定K_i值(Morrison,J.F.,Biochim.Biophys.Acta.185:269－296(1969)；William,J.W.和Morrison,J.F.,Meth.Enzymol.,63:437－467(1979))，修饰用于ATP-竞争抑制[K_i＝K_i,app/(1+[ATP]/K_m,app)]。

在细胞系中如下进行JAK1通路试验：

在设计用于测定JAK1依赖性STAT磷酸化的细胞类试验中测定抑制效能(EC₅₀)。如上所述，通过阻断Jak/Stat信号传导通路而抑制IL-4、IL-13和IL-9信号传导可以缓解临床前肺部炎症模型中的哮喘症状(Mathew等,2001,J Exp Med 193(9):1087－1096；Kudlacz等,2008,Eur J.Pharmacol582(1－3):154－161)。

在一种试验方法中，采用自美国典型培养物保藏中心(American Type CultureCollection(ATCC；Manassas,VA))获得的TF-1人红白血病细胞测定IL-13刺激的下游的JAK1依赖性STAT6磷酸化。在用于测定之前，将TF-1细胞在补充有0.5％活性炭/葡聚糖脱色的胎牛血清(FBS)、0.1mM非必需氨基酸(NEAA)和1mM丙酮酸钠的OptiMEM培养基(LifeTechnologies,Grand Island,NY)中在缺乏GM-CSF的情况下生长过夜。试验在无血清OptiMEM培养基中在384孔板中进行，每孔使用300,000个细胞。在第二种测定方法中，在实验前一天，将获自ATCC的BEAS-2B人支气管上皮细胞以每孔100,000个细胞接种于96孔板。BEAS-2B试验在完全生长培养基(支气管上皮基础培养基+bulletkit；Lonza；Basel,Switzerland)中进行。

试验化合物在DMSO中以1:2系列稀释，然后在即将使用前在培养基中以1:50稀释。将稀释的化合物加入到细胞中，最终的DMSO浓度为0.2％，于37℃温育30分钟(对于TF-1试验法)或1小时(对于BEAS-2B试验法)。然后，用人类重组细胞因子以各自的EC₉₀浓度刺激细胞，该浓度如以前对各个批次所测定。将细胞用IL-13(R&D Systems,Minneapolis,MN)于37℃刺激15分钟。通过直接加入10×裂解缓冲液(Cell Signaling Technologies,Danvers,MA)终止TF-1细胞反应，而通过除去培养基并加入1×裂解缓冲液终止BEAS-2B细胞培养。获得的样品于-80℃下在板中冷冻。使用MesoScale Discovery(MSD)技术(Gaithersburg,MD)在细胞裂解物中测定化合物介导的STAT6磷酸化的抑制。测定EC₅₀值，作为相对于DMSO对照测定的STAT磷酸化抑制达50％所需的化合物浓度。

表2提供了指定实施例的JAK1K_i、JAK2K_i和IL-13-pSTAT6的IC₅₀信息。

表2：LCMS和效能数据

Claims (7)

1.式(I)化合物或其盐：

其中：

R¹为H、甲基

R²选自

R³为H；

R⁴为H；

R⁵为H、氯代或乙炔基；

R⁶为H。

2.权利要求1的化合物，选自下列化合物：

及其盐。

3.药用组合物，所述药用组合物包含权利要求1－2中任一项的化合物或其可药用的盐以及可药用的载体、稀释剂或赋形剂。

4.权利要求1－2中任一项的化合物或其可药用的盐在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。

5.权利要求1－2中任一项的化合物或其可药用的盐，用于治疗炎性疾病。

6.权利要求4的用途，其中所述炎性疾病为哮喘。

7.权利要求5的化合物或其可药用的盐，其中所述炎性疾病为哮喘。