CN108348519A - 经氯苯取代的氮杂芳基化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供在抑制癌细胞生长中具有活性及对正常细胞具有低毒性的一系列经氯苯取代的氮杂芳基化合物。特别地，本发明的化合物对膀胱癌及肝癌具有较强的抑制作用。

Description

经氯苯取代的氮杂芳基化合物
技术领域
本发明涉及一系列抗癌化合物及其医药制剂以及其使用方法。特定言之，本发明提供具有抗癌活性的经氯苯取代的氮杂芳基化合物。
背景技术
癌症为身体部分中的细胞经历失控生长的疾病，其为最危及生命的疾病中的一者。目前主要通过将手术疗法与放射疗法及/或化学疗法组合来治疗此疾病。尽管新颖的手术技术的最近发展及新颖的抗癌剂的发现，但除一些癌症类型以外，癌症的现有治疗具有不充分改良的后果。特定言之，尚未研发出用于治疗膀胱癌的靶向疗法的药物，且靶向肝癌的药物索拉非尼(sorafenib)无法为大多数患者提供良好治疗功效。US8759517B2提供适用于治疗蛋白激酶依赖性疾病的嘧啶基芳基脲衍生物。WO 2013144339涉及用于治疗纤维母细胞生长因子受体介导病症的3-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基-苯基)-l-{6-[4-(4-乙基-哌嗪-l-基)-苯胺基]-嘧啶-4-基}-l-甲基-脲或其医药学上可接受的盐或溶合物或包含其的医药组合物。
然而，仍需要提供用作治疗癌症及其他疾病的治疗剂的化合物。
发明内容
本发明的一个态样为提供具有下式(I)的化合物：
或其互变异构体、立体异构体或对映异构体，或其溶合物、前药或医药学上可接受的盐。
本发明的另一态样为提供含有式(I)化合物的医药组合物。
又一态样为提供用于抑制、预防或治疗癌症的方法，所述方法包含向有需要的细胞或个体投与式(I)化合物。
图式简单说明
图1A及图1B展示MPT0L145抑制FGFR信号传递且对FGFR活化的癌细胞株发挥抗生长作用。A.MPT0L145对膀胱癌细胞的存活率的作用。用所指示浓度的MPT0L145处理RT-112、RT4及T24细胞72h。通过MTT分析评定细胞存活率。资料经表述为均值±标准差(与对照组相比，***P<0.001)。B.MPT0L145相对于正常细胞具有较低毒性。用所指示浓度的MPT0L145处理HUVEC 72小时且通过MTT分析检验存活率。资料经表述为均值±标准差(与对照组相比，***P<0.001)。
图2A至图2D展示在RT-112细胞中通过MPT0L145抑制FGFR信号传递。A.用所指示浓度的MPT0L145及BGJ-398处理RT-112细胞1h且经由西方墨点法检测经磷酸化的FGFR1、FGFR3及FRS2的位准。(B至D).MPT0L145对FGFR下游信号传递的作用。用所指示浓度的MPT0L145或BGJ-398处理细胞1h(B.)、4h(C.)及8h(D.)。通过所指示抗体使蛋白质溶胞物经受西方墨点法分析。
图3A至图3D展示MPT0L145对细胞周期分布的作用。A.用MPT0L145(4HM)、BGJ-398(4HM)及太平洋紫杉醇(Paclitaxel)(0.1HM)处理RT-112细胞持续所指示时间，且经由流式细胞测量术分析细胞周期分布。(CTL：对照组，145：MPT0L145，398：BGJ-398，Tax：太平洋紫杉醇)B.将RT-112细胞暴露于所指示浓度的MPT0L145及BGJ-398(8HM)中24h并经受流式细胞测量术。C.MPT0L145对细胞周期调节蛋白的作用。用不同浓度的MPT0L145处理RT-112细胞24h并经受西方墨点法。D.用MPT0L145及太平洋紫杉醇处理RT-112细胞72h。经由检测裂解卡斯蛋白酶-3及PARP来评定细胞凋亡。
图4A及图4B展示A549细胞中的细胞存活率结果(A)及CI值结果(B)。
图5A及5B展示Panc1细胞中的细胞存活率结果(A)及CI值结果(B)。
具体实施方式
本发明提供在抑制癌细胞生长中具有活性及对正常细胞具有低毒性的一系列经氯苯取代的氮杂芳基化合物。特定言之，本发明的这些化合物对膀胱癌及肝癌具有较强的抑制作用。
在本文中未特定地定义的术语应根据将通过本领域中熟习此项技术者根据本发明及上下文赋予其的涵义来理解。然而，如本说明书中所使用，除非相反说明，否则以下术语具有指定的含义且将遵守以下惯例。
术语“一(a)”及“一(an)”是指一或多个。
本文中的术语“疾病(disease)”及“病症(disorder)”可互换地使用。
术语“治疗(treatment)”及“治疗(treating)”涵盖预防性(亦即，预防)或治疗性(亦即，治愈性及/或缓解性)治疗两者。因此术语“治疗(treatment)”及“治疗(treating)”包含对具有已发展的所述病状，尤其呈明显形式的患者的治疗性治疗。治疗性治疗可为对症治疗以便减轻特定病症的症状，或可为病因治疗以便逆转或部分逆转病症的病状或阻止或减缓疾病的发展。因此，本发明的这些化合物、组合物及方法可用于(例如)在一段时间内以及长期疗法的治疗性治疗。此外，术语“治疗(treatment)”及“治疗(treating)”包含预防性治疗，亦即治疗有发展为上文所提及的病况的风险的病患，由此降低所述风险。
术语“治疗有效量”意谓(i)治疗或预防特定疾病或病状，(ii)减轻、改善或消除特定疾病或病状的一或多个症状，或(iii)预防或延缓本文中所描述的特定疾病或病状的一或多个症状的发病的本发明的化合物的量。
如本文中所使用，术语“经取代”意谓所指定的原子、基团或部分上的任一个或多个氢由自所指示群组选出者替换，其限制条件为不超出原子的正常价态且取代产生可接受地稳定化合物。
本文中所采用的术语“医药学上可接受”是指在医疗判断的范畴内适合用于与人类及动物的组织接触且无过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症且与合理益处/风险比率相匹配的彼等化合物、物质、组合物及/或剂型。
如本文所使用，“医药学上可接受的盐”是指所揭示的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制得其酸盐或碱盐而改质。医药学上可接受的盐的实例包括(但不限于)碱性残基(诸如胺、吡啶、嘧啶及喹唑啉)的矿物质或有机酸盐；酸性残基(诸如羧酸)的碱性或有机盐；及其类似物。
如本文中所使用，术语“立体异构体”为用于仅个别分子的原子在空间中取向不同的这些个别分子的所有异构体的通用术语。其包括对映异构体及具有不为彼此的镜像的多于一个对掌性中心的化合物的异构体(非对映异构体)。
术语“对掌性中心”是指与四个不同基团连接的碳原子。
术语“对映异构体”及“对映异构”是指不能迭加于其镜像上且因此为光学活性的分子，其中对映异构体在一个方向上旋转偏光的平面且其镜像化合物在相反方向上旋转偏光的平面。
术语“外消旋”是指为光学无活性的对映异构体的等效部分的混合物。
术语“分解”是指分子的两个对映异构形式中的一者的分离或浓缩或耗尽。
如本文中所使用，卤基或卤素是指氟基、氯基、溴基或碘基。
如本文所使用，术语“烷基”是指含有指定数目的碳原子的直链或分支链烃链。举例而言，“C1-C6烷基”是选自具有自1至6个碳原子的直链及分支链无环烃。代表性直链C1-C6烷基基团包括-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基及-正己基。代表性分支链C1-C6烷基包括-异丙基、-第二丁基、-异丁基、-第三丁基、-异戊基、-新戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、3-乙基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基及3,3-二甲基丁基。
如本文中所使用，术语“烯基”是指含有指定数目的碳原子及一或多个双键的直链或分支链烃链。举例而言，“C2-C6烯基”是选自具有2至6个碳原子且包括至少一个碳-碳双键的直链及分支链无环烃。代表性直链及分支链C2-C6烯基基团包括-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-异丁烯基、-1-戊烯基、-2-戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基、-2,3-二甲基-2-丁烯基、-1-己烯基、2-己烯基及3-己烯基。
如本文中所使用，“C2-C6炔基”是选自具有2至6个碳原子且包括至少一个碳-碳三键的直链及分支链无环烃。代表性直链及分支链C2-C6炔基包括-乙炔基、-丙炔基、-1-丁酰基、-2-丁酰基、-1-戊炔基、-2-戊炔基、-3-甲基-1-丁炔基、-4-戊炔基、-1-己炔基、-2-己炔基及-5-己炔基。
如本文中所使用，“环烷基”是指选自C3-C12环烷基的基团，且优选地C3-8环烷基。典型的环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基及环壬基。
如本文中所使用，术语“烷氧基”是指含有指定数目的碳原子的直链或分支链烷氧基。举例而言，C1-6烷氧基意谓含有至少1个且至多6个碳原子的直链或分支链烷氧基。如本文中所使用的“烷氧基”的实例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、丙氧基、丙-2-氧基、丁氧基、丁-2-氧基、2-甲基丙-1-氧基、2-甲基丙-2-氧基、戊氧基及己氧基。连接点可位于氧或碳原子上。
如本文中所使用，术语“烷硫基(亦称为烷基硫基)”是指直链或分支链烷基(优选地具有1至6个碳原子，例如1个至4个碳原子(C1-C6-烷硫基))，其经由硫原子在烷基中的任何键处结合至分子的其余部分。C1-C4-烷硫基的实例包括甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、第二丁硫基、异丁硫基及第三丁硫基。除C1-C4-烷硫基所提及者外，C1-C6-烷硫基的实例包括1-戊硫基、2-戊硫基及3-戊硫基、1-己硫基、2-己硫基及3-己硫基及其位置异构体。
如本文中所使用，术语“烷氧基烷基”是指基团-alk1-O-alk2，其中alk1为烷基或烯基且alk2为烷基或烯基。
如本文中所使用，术语“烷胺基”是指基团-NRR'，其中R为烷基且R'为氢或烷基。
如本文中所使用，“芳基”是指选自C6-14芳基，特别是C6-10芳基的基团。典型的C6-14芳基包括苯基、萘基、菲基、蒽基、茚基、薁基、二苯基、伸联苯基及茀基。
如本文中所使用，“杂芳基”是指具有自5至14个环原子的基团；在环状阵列中共享6Pi、10Pi或14Pi电子；且含有碳原子及1、2或3个氧、氮及/或硫杂原子。杂芳基的实例包括吲唑基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、恶唑基、噻唑基、吡唑基、异恶唑基、异噻唑基、恶二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、四唑基、三嗪基、氮杂卓基、恶氮呯基、吗啉基、噻环氮己三烯基、二氮呯基、噻唑啉基、苯并咪唑基、苯并恶唑基、咪唑并吡啶基、苯并恶嗪基、苯并噻嗪基、苯并噻吩基、恶唑并吡啶基、苯并呋喃基、喹啉基、喹唑啉基、喹喏啉基、苯并噻唑基、邻苯二酰亚胺基、苯并呋喃基、苯并二氮呯基、吲哚基、茚满基、氮杂吲唑基、去氮嘌呤基(deazapurinyl)及异吲哚基。
如本文中所使用，术语“治疗有效量”意指可有效地改善或预防症状的活性剂或试剂的组合的量。尤其根据本文所提供的详细揭示内容，治疗有效量的判定完全属于熟习此项技术者的能力范围内。
在一个态样中，本发明提供具有下式(I)的化合物：
其中
X为C、N、O或S；
R1为环烷基；未经卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、烷胺基或具有选自由N、O及S组成的群的1至3个杂原子的杂芳基取代或经其取代的芳基；未经卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、烷胺基或具有选自由N、O及S组成的群的1至3个杂原子的杂芳基取代或经其取代的杂烷基；或NR7R8，其中R7及R8各自独立地选自由H、硝基、胺基、氰基、烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基组成的群，其中烷基、烯基、炔基、芳基及杂芳基各自独立地由具有选自由N、O及S组成的群的1至3个杂原子的杂芳基取代及由烷基、烯基或炔基或烷氧基取代；
R2为未经卤基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基或炔基取代或经其取代的H、卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基、炔基或芳基；及
R3及R4各自独立地选自由以下组成的群：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基或烷胺基；及
R5及R6各自独立地选自H、卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基、炔基；
其中上文所提及的杂芳基未经卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、烷胺基或芳基取代或经其取代；
或其互变异构体或立体异构体，或其溶剂合物、前药或医药学上可接受的盐。
在式(I)的一些实施例中，卤基为F、Cl或Br；烷基为C1-10烷基，优选地C1-6烷基或C1-4烷基；烯基为C2-10烯基，优选地C2-6烯基；炔基为C2-10炔基，优选地C2-6炔基；烷氧基为C1-10烷氧基，优选地C1-6烷氧基或C1-4烷氧基；芳基为5员或6员芳基，优选地苯基；及杂芳基为5员或6员杂芳基且具有选自由N、O及S组成的群的1至3个杂原子。
在式(I)的一些实施例中，X为C；R1为未经卤基、氰基、硝基、具有选自由N、O及S组成的群的1至3个杂原子的C1-10烷氧基或C5-12杂芳基取代或经其取代及未经C1-10烷基取代或经其取代的苯基；或未经具有选自由N、O及S组成的群的1个至3个杂原子取代或经其取代的杂芳基；R2为H；R3及R4各自独立地为C1-10烷基；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。优选地，X为C；R1为苯基、C1-10烷基哌嗪基苯基、C1-10烷氧基苯基、卤苯基、氰苯基、硝基苯基、呋喃基或吡啶基。更优选地，X为C；R1为(4-乙基哌嗪基-1-基)苯基、苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-氰苯基、硝基苯基、2-呋喃基、3-吡啶基或4-吡啶基。更优选地，R1为苯基、(4-乙基哌嗪基-1-基)苯基、苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-氰苯基、硝基苯基、2-呋喃基、3-吡啶基或4-吡啶基；R2为H；R3及R4各自独立地为CH3；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。
在式(I)的一些其他实施例中，X为C或N；R1为NR7R8，其中R7及R8各自独立地选自由以下组成的群：H、经未经C1-10烷基取代或经其取代的6员杂芳基取代的C1-10烷基；经具有选自由N、O及S组成的群的1至3个杂原子的6员杂芳基取代及经C1-10烷基取代的苯基；R2为H、卤基或苯基；R3及R4各自独立地为C1-10烷基；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。优选地，X为C或N；R1为NR7R8，其中R7为C1-10烷基哌嗪基苯基、哌啶基C1-10烷基、C1-10烷基哌嗪基C1-10烷基或C1-10烷基哌嗪基羰基苯基及R8为H；R2为H、卤基或苯基；R3及R4各自独立地为C1-10烷基；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。更优选地，X为C或N；R1为NR7R8，其中R7为乙基哌嗪基苯基、甲基哌嗪基乙基或乙基哌嗪基羰基苯基及R8为H；R2为H、苯基或Cl；R3及R4各自独立地为C1-10烷基；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。
在式(I)的一些实施例中，这些化合物包括(但不限于)以下：
1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-2-苯基嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(4-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-1,3,5-三嗪-2-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(4-氯-6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-1,3,5-三嗪-2-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-((2-(哌啶-1-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-((2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-羰基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-苯基嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-氟苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-氯苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-氰苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(3-氰苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-(3-硝基苯基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(呋喃-2-基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；及
1-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
或其互变异构体或立体异构体，或其溶剂合物、前药或医药学上可接受的盐。
在另一实施例中，本发明的化合物为1-(4-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-1,3,5-三嗪-2-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲，
可鉴于本发明使用熟习此项技术者已知的方法来制备本发明的化合物。举例而言，可如以下流程中所展示来制备本发明的优选化合物：
流程1
(a)浓HCl(水溶液)、H2O，-78℃接着POCl3、DMF、DCM，0℃至室温
(b)2M甲胺于THF、IPA中，室温
(c)5，AcOH/H2O，回流
(d)14，三光气、对二恶烷、甲苯，回流接着甲苯，回流
流程2
(a)经胺取代、AcOH/H2O，回流
(b)14，三光气、对二恶烷、甲苯，回流接着甲苯，回流
流程3
*试剂及条件
(a)经硼酸取代、PdCl2(dppf)、Cs2CO3、对二恶烷/H2O，回流
(b)14，三光气、对二恶烷、甲苯，回流接着甲苯，回流
在另一态样中，本发明提供一种医药组合物，其包含本发明的化合物及医药学上可接受的载剂。当用作医药时，通常以医药组合物形式投与本发明的化合物。这些组合物可以医药领域中熟知的方式来制备且包含至少一种活性化合物。一般而言，以医药学上有效量投与本发明的化合物。实际上投与的化合物的量将通常由医师鉴于相关情形确定，这些相关情形包括所治疗的病状、所选择的投与途径、所投与的实际化合物、个别患者的年龄、体重及反应、患者症状的严重程度及其类似者。
在一个实施例中，化合物以可有效地达成其预期治疗性目的的量存在于组合物中。尽管个别需要可变化，但每一种化合物的有效量的最佳范围的确定在本领域的技术内。通常，这些化合物可每天以哺乳动物的每公斤体重约0.1mg至约100mg的剂量或等效量的其医药学上可接受的盐、前药或溶合物经口投与哺乳动物(例如，人类)以治疗、预防或改善具体病症。优选地，每天以哺乳动物的每公斤体重约0.1mg至约90mg、约0.1mg至约80mg、约0.1mg至约70mg、约0.1mg至约60mg、约0.1mg至约50mg、约0.1mg至约40mg、约0.1mg至约30mg、约0.1mg至约20mg、约0.1mg至约10mg、约0.1mg至约5mg、约0.5mg至约100mg、约0.5mg至约90mg、约0.5mg至约80mg、约0.5mg至约70mg、约0.5mg至约60mg、约0.5mg至约50mg、约0.5mg至约40mg、约0.5mg至约30mg、约0.5mg至约20mg、约0.5mg至约10mg、约0.5mg至约5mg、约1mg至约100mg、约1mg至约90mg、约1mg至约80mg、约1mg至约70mg、约1mg至约60mg、约1mg至约50mg、约1mg至约40mg、约1mg至约30mg、约1mg至约20mg、约1mg至约10mg、约5mg至约100mg、约5mg至约90mg、约5mg至约80mg、约5mg至约70mg、约5mg至约60mg、约5mg至约50mg、约5mg至约40mg、约5mg至约30mg、约5mg至约20mg、约5mg至约10mg、约10mg至约100mg、约20mg至约100mg、约30mg至约100mg、约40mg至约100mg、约50mg至约100mg、约60mg至约100mg、约70mg至约100mg、约80mg至约100mg、约5mg至约90mg、约10mg至约90mg、约10mg至约80mg、约10mg至约70mg、约10mg至约60mg、约10mg至约50mg、约10mg至约40mg、约10mg至约30mg、约20mg至约90mg、约20mg至约80mg、约20mg至约70mg、约20mg至约60mg、约20mg至约50mg、约20mg至约40mg、约30mg至约90mg、约30mg至约80mg、约30mg至约70mg、约30mg至约60mg、约30mg至约50mg、约40mg至约90mg、约40mg至约80mg、约40mg至约60mg、约50mg至约90mg、约50mg至约80mg、约50mg至约70mg的剂量范围或等效量的其医药上可接受盐、前药或溶合物投与。投与哺乳动物的本发明的化合物的适用口服剂量为哺乳动物的每公斤体重约5mg至约100mg(优选的剂量如上文所描述)或等效量的其医药学上可接受的盐、前药或溶合物。对于肌肉内注射，剂量通常为约口服剂量的一半。
单位口服剂量可包含约0.1mg至约100mg，且优选地约1mg至约80mg的化合物。每天可(例如)以一或多个锭剂或胶囊投与单位剂量一或多次，每一锭剂或胶囊含有约0.01mg至约50mg的化合物或等效量的其医药学上可接受的盐、前药或溶合物。
本发明的医药组合物可通过多种途径投与，包括经口、经直肠、经皮、皮下、关节内、静脉内、肌肉内及鼻内。根据递送的预期途径，本发明化合物优选地经调配为可注射或口服组合物。
用于经口投与的组合物可采取散装液体溶液或悬浮液或散装粉末的形式。然而，这些组合物更常见地以单位剂型存在以便于精确给药。术语“单位剂型”是指适用作人类个体及其他哺乳动物的单位剂量的实体离散单位，每一单位含有经计算以产生所需治疗作用的预定量的活性物质，其与合适的医药赋形剂、媒剂或载剂结合。典型的单位剂型包括液体组合物的预填充、预量测安瓿或注射器或在固体组合物情形中的丸剂、锭剂、胶囊或其类似物。
本发明的范畴内的医药组合物包括本发明的化合物与医药学上可接受的载剂组合的所有组合物。在一优选实施例中，化合物以有效达成其预期治疗性目的的量存在于组合物中。尽管个别需要可变化，但各化合物的有效量的最佳范围的确定在本领域的技术内。
本发明的化合物及/或医药组合物可适用于与一或多种第二治疗剂组合，且例示性医药组合物可包括或不包括本文中所描述的一或多种第二治疗剂中的任一者，特定言之，适合于治疗及/或预防此前已呈现的病况及疾病的治疗剂。举例而言，在癌症治疗中，第二治疗剂可为有丝分裂抑制剂(诸如紫杉烷(taxane)(优选地，太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇(docetaxel))、长春花生物碱(vincaalkaloid)(优选地，长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春地辛(vindesine)及长春瑞滨(vinorelbine))及灭必治(vepesid))；蒽环抗生素(anthracycline antibiotic)(诸如阿霉素(doxorubicin)、道诺霉素(daunorubicin)、泛艾霉素(epirubicin)、艾达霉素(idarubicin)、瓦尔霉素(valrubicin)及米托蒽醌(mitoxantrone))；核苷类似物(诸如吉西他滨(gemcitabine))；EGFR抑制剂(诸如吉非替尼(gefitinib)及埃罗替尼(erlotinib))；叶酸抗代谢物(诸如三甲氧苄二胺嘧啶、乙胺嘧啶及培美曲唑)；顺铂(cisplatin)及卡铂(carboplatin)。可包括或不包括于例示性化合物及/或例示性医药组合物中的第二治疗剂的实例可包括(但不限于)他莫昔芬(tamoxifen)、紫杉醇、长春碱、依托泊苷(etoposide)(VP-16)、阿德力霉素(adriamycin)、5-氟脲嘧啶(5FU)、喜树碱(camptothecin)、放射菌素-D、丝裂霉素C、康柏斯达汀(combretastatin)，更特别地多西紫杉醇(docetaxel)(紫杉德(taxotere))、顺铂(CDDP)、环磷酰胺、阿霉素、甲胺喋呤、太平洋紫杉醇及长春新碱及其衍生物及前药。
其他适用的例示性第二治疗剂包括干扰DNA复制、有丝分裂、染色体分离及/或微管蛋白活性的化合物。这些化合物包括阿德力霉素(亦称为阿霉素)、依托泊苷、维拉帕米(verapamil)、鬼臼毒素(podophyllotoxin)、康柏斯达汀及其类似物。亦可使用破坏聚核苷酸前驱体的合成及保真性(fidelity)的药剂。已经广泛测试且容易获得的药剂特别适用。因此，优选地在肿瘤组织中使用诸如5-氟尿嘧啶(5-FU)的药剂，使得此剂特别适用于靶向肿瘤细胞。
在另一态样中，本发明提供一种用于抑制、预防或治疗个体的癌症的方法，所述方法包含向个体投与有效量的本发明的化合物及/或医药组合物。此方法包括以足以治疗所述病状的量向个体投与本发明的化合物。举例而言，这些癌症包括(但不限于)选自由以下组成的群：神经母细胞瘤、肺癌、胆管癌、非小细胞肺癌、肝细胞癌、头部及颈部鳞状细胞癌、鳞状细胞子宫颈癌、淋巴瘤、鼻咽癌、胃癌、结肠癌、子宫颈癌、胆囊癌、前列腺癌、乳癌、睪丸生殖细胞肿瘤、结肠直肠癌、神经胶质瘤、甲状腺癌、基底细胞癌、肠胃基质癌、肝母细胞瘤、子宫内膜癌、卵巢癌、胰脏癌、肾细胞癌、卡波西氏(Kaposi's)肉瘤、慢性白血病、肉瘤、直肠癌、咽喉癌、黑素瘤、结肠癌、膀胱癌、肥胖细胞瘤、乳房癌、乳腺癌、咽部鳞状细胞癌、睪丸癌、肠胃癌、肝癌、胃癌、骨髓瘤及泌尿上皮癌(urothelial cancer)。优选地，所述癌症为膀胱癌及肝细胞癌。本发明的化合物及医药组合物可用作FGFR抑制剂，且因此在FGFR活化的癌症的治疗或预防中有效。因此，本发明提供一种用于抑制、预防或治疗个体中FGFR活化的癌症的方法，所述方法包含向个体投与有效量的本发明的化合物。
对于经口投药，本发明的适合的医药组合物包括粉剂、颗粒、丸剂、锭剂、口含锭、咀嚼片、胶剂及胶囊以及液体、糖浆剂、悬浮液、酏剂及乳液。这些组合物亦可包括抗氧化剂、增味剂、防腐剂、悬浮剂、增稠剂及乳化剂、着色剂、调味剂及其他医药学上可接受的添加剂。经口投药的调配物可调配为速释或缓释，其中缓释包括经延迟、持续、经脉冲、受控、靶向及程控释放。
对于不经肠投药，本发明的化合物及医药组合物是经由静脉内、动脉内、腹膜内、肌肉内、皮下或其他注射或注入直接地投与至血流中、至肌肉中或至内部器官中。可在水性注射溶液中制备不经肠调配物，其可含有除本发明的化合物以外的缓冲剂、抗氧化剂、抑菌剂、盐、碳水化合物及通常在这些溶液中所采用的其他添加剂。不经肠投药可为速释或缓释(诸如注射或植入积存)。
本发明的化合物及医药组合物亦可为局部、(内部)经皮或透皮投与至皮肤或黏膜。典型的调配物包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳膏、软膏、敷料、泡沫剂、皮肤贴片、粉片、植入剂及微乳剂。本发明的化合物亦可诸如通过干粉、气溶胶喷雾或作为滴剂经由吸入或滴鼻投药而投与。本发明的例示性化合物及组合物的其他投药途径包括阴道内及经直肠(藉助于栓剂、子宫托或灌肠剂)、经眼及耳。
以下实例出于说明本发明的目的而给出且不应被视为限制本发明的范畴或精神。
实例
实例1 2,4-二氯-1,3,5-三嗪(81)的制备
将78(3.0g，33.70mmol)的混合物溶解于H2O(13ml)中且接着在-78℃下添加至充满浓HCl(15ml)的另一烧瓶中。在-78℃下搅拌所得混合物15min，接着加热至-35℃持续15min。接着，将混合物冷却至0℃且过滤以产生沈淀剂。在室温下取充满DM(10ml)的另一烧瓶并在0℃下将POCl3(1.84ml，19.71mmol)及DMF(1.53ml，19.71mmol)添加至所述烧瓶中。在搅拌片刻之后，将所得混合物分批添加至以上沈淀剂中并接着在室温下搅拌隔夜。通过水淬灭反应并接着通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，Rf＝0.63)急骤管柱纯化残余物以得到呈白色固体状的81(0.64g，13.13％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ8.90(s,1H)。
实例2 6-氯-N-甲基嘧啶-4-胺(83)的制备
将79(0.50g，3.36mmol)及IPA(1.5ml)的混合物搅拌片刻并接着在0℃下向其中添加含2M甲胺的THF(4.2ml，8.40mmol)。在搅拌隔夜下将所得混合物返回至室温。通过水淬灭反应并接着通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.20)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的83(0.47g，97.43％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ2.95(d,J＝5.1Hz,3H)、5.26(br,1H)、6.34(s,1H)、8.34(s,1H)。
实例3 6-氯-N-甲基-2-苯基嘧啶-4-胺(84)的制备
将80(0.25g，1.11mmol)及IPA(3ml)的混合物搅拌片刻并接着在0℃下向其中添加含2M甲胺的THF(1.39ml，2.78mmol)。在搅拌隔夜下将所得混合物返回至室温。通过水淬灭反应并接着通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，Rf＝0.18)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的84(0.22g，90.23％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.02(d,J＝4.2Hz,3H)、5.09(br,1H)、6.26(s,1H)、7.42-7.46(m,3H)、8.35-8.37(m,2H)。
实例4 4-氯-N-甲基-1,3,5-三嗪-2-胺(85)的制备
将81(0.10g，0.67mmol)及IPA(3ml)的混合物搅拌片刻并接着在0℃下向其中添加含2M甲胺的THF(0.67ml，1.34mmol)。在搅拌隔夜下将所得混合物返回至室温。通过水淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，Rf＝0.50)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡白色固体状的85(0.07g，72.27％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.03-3.06(m,3H)、5.71(br,1H)、8.36(d,J＝42.0Hz,1H)。
实例5 4,6-二氯-N-甲基-1,3,5-三嗪-2-胺(86)的制备
在-78℃下将82(2.0g，10.85mmol)、DIPEA(3.78ml，21.70mmol)及THF(40ml)的混合物搅拌片刻，接着在搅拌1小时后在-78℃下向其中添加甲胺HCl(0.72g，10.85mmol)。通过水淬灭反应并通过二氯甲烷(30ml×3)萃取混合物。过滤残余物以得到呈白色固体状的86(0.56g，28.83％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.08(d,J＝5.1Hz,3H)、6.35(br,1H)。
实例6 N4-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)-N6-甲基嘧啶-4,6-二胺(87)的制备
将5(0.49g，2.39mmol)、H2O(0.75ml)及AcOH(3ml)的混合物与83(0.15g，3.13mmol)混合并回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.25)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡橙色固体状的87(0.60g，80.20％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ1.16(t,J＝7.2Hz,3H)、2.48(q,J＝7.2Hz,2H)、2.64(t,J＝5.1Hz,4H)、2.81(d,J＝5.4Hz,3H)、3.22(t,J＝5.1Hz,4H)、4.86(s,1H)、5.54(s,1H)、6.69(s,1H)、6.95(d,J＝9.0Hz,2H)、7.18(d,J＝8.7Hz,2H)、8.14(s,1H)。
实例7 N4-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)-N6-甲基-2-苯基嘧啶-4,6-二胺(88)的制备
将5(0.16g，0.77mmol)、H2O(0.4ml)及AcOH(1.6ml)的混合物与84(0.22g，1.00mmol)混合并接着回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.35)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的88(0.22g，73.54％)。1H-NMR(500MHz,CDCl3):δ1.16(t,J＝7.5Hz,3H)、2.52(q,J＝7.5Hz,2H)、2.66(t,J＝5.0Hz,4H)、2.88(d,J＝5.0Hz,3H)、3.25(t,J＝5.0Hz,4H)、4.84(s,1H)、5.51(s,1H)、6.51(s,1H)、6.95(d,J＝8.5Hz,2H)、7.23(d,J＝8.5Hz,2H)、7.42-7.43(m,3H)、8.31-8.33(m,2H)。
实例8 N2-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)-N4-甲基-1,3,5-三嗪-2,4-二胺(89)的制备
将5(0.10g，0.48mmol)、DIPEA(0.08ml，0.48mmol)及EtOH(5ml)的混合物与85(0.07g，0.48mmol)混合并回流2.5小时。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.28)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的89(0.05g，33.24％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ1.13(t,J＝7.2Hz,3H)、2.46(q,J＝7.2Hz,2H)、2.62(t,J＝5.1Hz,4H)、2.98(d,J＝5.1Hz,3H)、3.19(t,J＝5.1Hz,4H)、5.17-5.29(m,1H)、5.55(br,1H)、6.91(d,J＝8.7Hz,2H)、7.37(d,J＝8.1Hz,1H)、7.46(s,1H)、8.20(d,J＝44.7Hz,1H)。
实例9 6-氯-N2-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)-N4-甲基-1,3,5-三嗪-2,4-二胺(90)的制备
将5(0.11g，0.56mmol)、DIPEA(0.10ml，0.56mmol)及乙腈(3ml)的混合物与86(0.10g，0.56mmol)混合并接着在室温下搅拌隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝15:1，Rf＝0.18)急骤管柱纯化残余物以得到呈棕色固体状的90(0.06g，30.80％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ1.15(t,J＝7.2Hz,3H)、2.51(q,J＝7.2Hz,2H)、2.64(s,4H)、3.01(d,J＝7.2Hz,3H)、3.22(t,J＝5.4Hz,4H)、5.30(br,1H)、5.74(br,1H)、6.88-6.94(m,2H)、7.11(s,1H)、7.35(d,J＝9.0Hz,1H)、7.37-7.48(s,1H)。
实例10 1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(91)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将87(0.25g，0.81mmol)添加至所得混合物中并搅拌且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝6:1，Rf＝0.35)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的91(0.10g，20.75％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ1.14(t,J＝7.2Hz,3H)、2.49(q,J＝7.2Hz,2H)、2.63(t,J＝5.1Hz,4H)、3.26(t,J＝5.4Hz,4H)、3.30(s,3H)、3.91(s,6H)、6.10(s,1H)、6.97(d,J＝9.0Hz,3H)、7.20(d,J＝9.0Hz,2H)、8.34(s,1H)、12.76(s,1H)。
实例11 1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-2-苯基嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(92)的制备
将14(0.20g，0.76mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.38g，1.26mmol)混合并接着搅拌且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将88(0.25g，0.64mmol)添加至混合物中并搅拌且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝6:1，Rf＝0.35)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的92(0.04g，9.31％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ1.16(t,J＝7.5Hz,3H)、2.51(q,J＝7.2Hz,2H)、2.66(t,J＝5.1Hz,4H)、3.27(t,J＝5.1Hz,4H)、3.83(s,3H)、3.97(s,6H)、6.99(d,J＝9.3Hz,2H)、7.49-7.56(m,3H)、7.67(d,J＝9.0Hz,2H)、8.48-8.51(m,2H)、10.72(s,1H)。
实例12 1-(4-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-1,3,5-三嗪-2-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(93)的制备
将14(0.39g，1.52mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.75g，2.52mmol)混合并接着搅拌且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将89(0.40g，1.28mmol)添加至混合物中并搅拌且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝15:1，Rf＝0.35)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的93(0.12g，15.73％)。1H-NMR(500MHz,CDCl3+CD3OD):δ1.02(t,J＝7.5Hz,3H)、2.37(q,J＝7.5Hz,2H)、2.46-2.53(m,4H)、2.89-3.09(m,4H)、3.41(s,3H)、3.76(s,3H)、3.79(s,3H)、6.59-6.84(m,2H)、7.14-7.31(m,2H)、8.32(s,1H)。
实例13 1-(4-氯-6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-1,3,5-三嗪-2-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(94)的制备
将14(0.26g，1.03mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.51g，1.71mmol)混合并接着搅拌且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将90(0.30g，0.86mmol)添加至混合物中并接着搅拌且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.25)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的94(0.04g，7.38％)。1H-NMR(500MHz,CDCl3):δ1.12(t,J＝7.0Hz,3H)、2.46-2.62(m,6H)、2.97-3.24(m,4H)、3.53(s,3H)、3.90(s,6H)、6.65-6.95(br,2H)、7.04-7.46(m,2H)、11.50(s,1H)。
实例14 N4-甲基-N6-(2-(哌啶-1-基)乙基)嘧啶-4,6-二胺(95)的制备
将83(0.05g，0.35mmol)及正丁醇(2ml)的混合物与TEA(0.12ml，0.88mmol)及2-(哌啶-1-基)乙胺(0.05ml，0.35mmol)混合并接着搅拌且回流隔夜。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝15:1，Rf＝0.15)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的95(0.04g，48.56％)。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ1.47-1.49(m,4H)、1.57-1.59(m,3H)、2.70(d,J＝5.1Hz,3H)、3.46(br,4H)、5.50(s,1H)、6.51(d,J＝5.4Hz,1H)、7.94(s,1H)。
实例15 N4-甲基-N6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)嘧啶-4,6-二胺(96)的制备
在120℃下将83(0.05g，0.35mmol)及2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙胺(0.35g，2.45mmol)的混合物搅拌隔夜。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝6:1，Rf＝0.13)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的96(0.02g，22.83％)。1H-NMR(500MHz,CD3OD):δ2.28(s,3H)、2.53(br,4H)、2.59(t,J＝6.5Hz,2H)、2.80(s,3H)、3.29-3.36(m,2H)、5.39(s,1H)、7.87(s,1H)。
实例16 (4-乙基哌嗪-1-基)(4-((6-(甲胺基)嘧啶-4-基)胺基)苯基)甲酮(97)的制备
将1-乙基哌嗪(0.10g，0.88mmol)及乙腈(3ml)的混合物与碳酸钾(0.18g，1.32mmol)及4-硝基苯甲酰氯(0.16g，1.32mmol)混合并接着在室温下搅拌4小时。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.20)急骤管柱的纯化残余物以得到产物。将10％Pd/C作为触媒添加至以上产物及甲醇(5ml)的混合物中，并接着在室温，氢气下搅拌混合物2小时。过滤混合物以获得滤过物并接着移除溶剂以获得粗产物。将83(0.14g，0.95mmol)、H2O(0.5ml)及AcOH(2ml)的混合物添加至以上粗产物中并接着搅拌且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.06)急骤管柱纯化残余物以得到呈棕色固体状的97(0.07g，28.17％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ1.07(t,J＝5.1Hz,3H)、2.47(t,J＝5.1Hz,6H)、2.78(s,3H)、3.62(br,4H)、5.77(s,1H)、7.32(d,J＝5.4Hz,2H)、7.52(d,J＝5.4Hz,2H)、8.04(s,1H)。
实例17 1-甲基-1-(6-((2-(哌啶-1-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(98)的制备
将14(0.16g，0.61mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.30g，1.01mmol)混合并接着搅拌且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将95(0.12g，0.51mmol)添加至混合物中并搅拌混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝15:1，Rf＝0.35)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的98(0.06g，22.72％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ1.54(br,3H)、1.65(br,7H)、3.42(d,J＝5.1Hz,3H)、3.67(br,4H)、3.90(d,J＝5.1Hz,6H)、6.00(s,1H)、8.32(s,1H)、12.82(s,1H)。
实例18 1-甲基-1-(6-((2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(99)的制备
将14(0.09g，0.33mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.16g，0.55mmol)混合并接着搅拌混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将96(0.07g，0.28mmol)添加至混合物中并接着搅拌混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.20)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的99(0.03g，20.11％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ2.67(s,3H)、2.52(t,J＝5.1Hz,4H)、3.43(br,4H)、3.73(t,J＝5.1Hz,4H)、3.90(s,6H)、6.01(s,1H)、8.33(m,1H)、12.77(s,1H)。
实例19 1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-羰基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(100)19-2370-2B的制备
将14(0.36g，1.40mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.70g，2.32mmol)混合并接着搅拌混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将97(0.40g，1.18mmol)添加至混合物中并搅拌混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝19:1，Rf＝0.25)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的100(0.01g，1.36％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ1.18(s,3H)、2.56(t,J＝5.1Hz,6H)、3.41(s,3H)、3.81(m,4H)、3.92(br,1H)、6.34(s,1H)、7.03(s,5H)、7.47(s,1H)、8.47(s,1H)、12.60(s,1H)。
实例20 6-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)-N-甲基嘧啶-4-胺(101)的制备
将1-(4-溴苯基)哌嗪(0.15g，0.62mmol)及丙酮(5ml)的混合物与碳酸钾(0.17g，1.24mmol)及乙基碘(0.08ml，1.00mmol)混合并接着在室温下搅拌4小时。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.43)急骤管柱纯化残余物以获得产物。将PdCl2dppf(0.04g，0.06mmol)、乙酸钾(0.55g，5.58mmol)及联硼酸频哪醇酯(bispinacolatoboron)(0.71g，2.79mmol)添加至以上产物及对二恶烷(10ml)的混合物中并搅拌所得混合物且回流隔夜。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.48)急骤管柱纯化残余物以获得产物。将PdCl2dppf(0.04g，0.06mmol)、乙酸钾(0.55g，5.58mmol)及联硼酸频哪醇酯(0.71g，2.79mmol)添加至83(0.06g，0.41mmol)、H2O(1ml)及对-二恶烷(4ml)的混合物中，并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝19:1，Rf＝0.19)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的101(0.08g，65.61％)。1H-NMR(500MHz,CDCl3):δ1.16(t,J＝7.0Hz,3H)、2.52(d,J＝7.0Hz,2H)、2.65(s,4H)、3.00(d,J＝5.0Hz,3H)、3.35(s,4H)、4.92(s,1H)、6.62(s,1H)、6.97(d,J＝7.0Hz,2H)、7.93(d,J＝9.0Hz,2H)、8.59(s,1H)。
实例21 N-甲基-6-苯基嘧啶-4-胺(102)的制备
将PdCl2dppf(0.14g，0.20mmol)、碳酸铯(1.27g，3.90mmol)及苯基酸(0.24g，1.95mmol)添加至83(0.28g，1.95mmol)、H2O(1.5ml)及对二恶烷(6ml)的混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.30)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的102(0.25g，69.21％)。1H-NMR(300MHz,CD3OD):δ2.95(s,3H)、6.84(s,1H)、7.45-7.48(m,3H)、7.89(s,2H)、8.45(s,1H)。
实例22 6-(4-甲氧基苯基)-N-甲基嘧啶-4-胺(103)的制备
将PdCl2dppf(0.14g，0.20mmol)、碳酸铯(1.27g，3.90mmol)及4-甲氧基苯酸(0.30g，1.95mmol)添加至83(0.28g，1.95mmol)、H2O(1.5ml)及对二恶烷(6ml)的混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，Rf＝0.18)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的103(0.30g，71.47％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.01(d,J＝5.1Hz,3H)、3.86(s,3H)、5.04(s,1H)、6.64(s,1H)、6.98(d,J＝9.0Hz,2H)、7.96(d,J＝8.7Hz,2H)、8.61(s,1H)。
实例23 6-(4-氟苯基)-N-甲基嘧啶-4-胺(104)的制备
将PdCl2dppf(0.14g，0.20mmol)、碳酸铯(1.27g，3.90mmol)及4-氟基苯酸(0.27g，1.95mmol)添加至83(0.28g，1.95mmol)、H2O(1.5ml)及对二恶烷(6ml)的混合物中，接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.15)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的104(0.16g，40.38％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.02(d,J＝5.1Hz,3H)、5.10(s,1H)、6.65(s,1H)、7.12-7.18(m,2H)、7.96-8.01(m,2H)、8.63(s,1H)。
实例24 6-(4-氯苯基)-N-甲基嘧啶-4-胺(105)的制备
将PdCl2dppf(0.14g，0.20mmol)、碳酸铯(1.27g，3.90mmol)及4-氯基苯酸(0.30g，1.95mmol)添加至83(0.28g，1.95mmol)、H2O(1.5ml)及对二恶烷(6ml)的混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.06)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的105(0.20g，46.69％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.02(d,J＝5.1Hz,3H)、5.11(s,1H)、6.66(s,1H)、7.44(d,J＝8.7Hz,2H)、7.93(d,J＝8.7Hz,2H)、8.63(s,1H)。
实例25 4-(6-(甲胺基嘧啶)-4-基)苯甲腈(106)的制备
将PdCl2dppf(0.14g，0.20mmol)、碳酸铯(1.27g，3.90mmol)及4-氰基苯酸(0.29g，1.95mmol)添加至83(0.28g，1.95mmol)、H2O(1.5ml)及对二恶烷(6ml)的混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.23)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的106(0.30g，73.18％)。1H-NMR(300MHz,CD3OD):δ3.05(d,J＝5.4Hz,3H)、5.21(s,1H)、6.73(s,1H)、7.76(d,J＝8.7Hz,2H)、8.10(d,J＝8.7Hz,2H)、8.67(s,1H)。
实例26 3-(6-(甲胺基)嘧啶-4-基)苯甲腈(107)的制备
将PdCl2dppf(0.14g，0.20mmol)、碳酸铯(1.27g，3.90mmol)及3-氰基苯酸(0.29g，1.95mmol)添加至83(0.28g，1.95mmol)、H2O(1.5ml)及对二恶烷(6ml)的混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，Rf＝0.13)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的107(0.33g，80.45％)。1H-NMR(300MHz,CD3OD):δ2.97(s,3H)、6.93(s,1H)、7.67(t,J＝7.8Hz,1H)、7.83(d,J＝7.8Hz,1H)、8.23(d,J＝8.7Hz,1H)、8.30(s,1H)、8.49(s,1H)。
实例27 N-甲基-6-(3-硝基苯基)嘧啶-4-胺(108)的制备
将PdCl2dppf(0.14g，0.20mmol)、碳酸铯(1.27g，3.90mmol)及3-硝基苯酸(0.33g，1.95mmol)添加至83(0.28g，1.95mmol)、H2O(1.5ml)及对二恶烷(6ml)的混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，Rf＝0.38)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的108(0.19g，42.32％)。1H-NMR(300MHz,CD3OD):δ2.98(s,3H)、6.98(s,1H)、7.74(t,J＝8.1Hz,1H)、8.34(d,J＝8.1Hz,2H)、8.51(s,1H)、8.80(s,1H)。
实例28 6-(呋喃-2-基)-N-甲基嘧啶-4-胺(109)的制备
将PdCl2dppf(0.14g，0.20mmol)、碳酸铯(1.27g，3.90mmol)及2-呋喃酸(0.22g，1.95mmol)添加至83(0.28g，1.95mmol)、H2O(1.5ml)及对二恶烷(6ml)的混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，Rf＝0.13)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的109(0.10g，29.27％)。1H-NMR(300MHz,CD3OD):δ3.01(d,J＝5.1Hz,3H)、5.11(s,1H)、6.55(d,J＝5.1Hz,1H)、6.68(s,1H)、7.17-7.18(m,1H)、7.55(s,1H)、8.54(s,1H)。
实例29 N-甲基-6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-胺(110)的制备
将PdCl2dppf(0.03g，0.04mmol)、碳酸铯(0.23g，0.70mmol)及吡啶-3-酸(0.04g，0.35mmol)添加至83(0.05g，0.35mmol)、H2O(1ml)及对-二恶烷(4ml)的混合物中，并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应，并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取所得混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.44)急骤管柱纯化残余物，得到呈淡黄色固体的110(0.05g，76.72％)。1H-NMR(300MHz,CD3OD):δ2.97(s,3H)、6.93(s,1H)、7.53-7.57(m,1H)、8.36(d,J＝8.1Hz,1H)、8.50(s,1H)、8.61-8.63(m,1H)、9.08(s,1H)。
实例30 N-甲基-6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-胺(111)的制备
将PdCl2dppf(0.18g，0.24mmol)、碳酸铯(1.59g，4.88mmol)及吡啶-4-酸(0.30g，2.44mmol)添加至83(0.35g，2.44mmol)、H2O(1.5ml)及对-二恶烷(6ml)的混合物中，并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应，并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取所得混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.10)急骤管柱纯化残余物，得到呈淡黄色固体的111(0.25g，55.02％)。1H-NMR(500MHz,CD3OD):δ2.97(s,3H)、6.99(s,1H)、7.94(s,2H)、8.52(s,1H)、8.66(d,J＝6.5Hz,2H)。
实例31 1-(6-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(112)的制备
将14(0.24g，0.92mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.45g，1.53mmol)混合并接着搅拌混合物且回流持续整夜。直接地移除溶剂并将沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将101(0.23g，0.77mmol)添加至混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取所得混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝15:1，Rf＝0.43)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的112(0.07g，15.68％)。1H-NMR(500MHz,CDCl3):δ1.14(t,J＝7.0Hz,3H)、2.49(d,J＝7.0Hz,2H)、2.63(t,J＝5.0Hz,4H)、3.38(t,J＝5.0Hz,4H)、3.57(s,3H)、3.91(d,J＝8.0Hz,6H)、7.00(d,J＝9.0Hz,2H)、8.02(d,J＝9.0Hz,2H)、8.83(s,1H)、12.59(s,1H)。
实例32 1-甲基-1-(6-苯基嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(113)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将102(0.15g，0.81mmol)添加至混合物中并搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.55)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的113(0.22g，58.07％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.60(s,3H)、3.93(s,6H)、7.37(s,1H)、7.54-7.56(m,3H)、8.06-8.09(m,2H)、8.94(s,1H)、12.50(s,1H)。
实例33 1-(6-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(114)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将103(0.17g，0.81mmol)添加至混合物中并搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，Rf＝0.45)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的115(0.23g，57.05％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.60(s,3H)、3.90(s,3H)、3.93(s,6H)、7.04(d,J＝8.7Hz,2H)、7.30(s,1H)、8.06(d,J＝8.7Hz,2H)、8.88(s,1H)、12.54(s,1H)。
实例34 1-(6-(4-氟苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(115)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将104(0.16g，0.81mmol)添加至混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.33)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的115(0.10g，25.42％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.60(s,3H)、3.93(s,6H)、7.20-7.26(m,2H)、7.33(s,1H)、8.08-8.12(m,2H)、8.92(s,1H)、12.46(s,1H)。
实例35 1-(6-(4-氯苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(116)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将105(0.15g，0.81mmol)添加至混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.38)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的116(0.11g，27.04％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.60(s,3H)、3.93(s,6H)、7.34(s,1H)、7.53(d,J＝8.7Hz,2H)、8.04(d,J＝8.7Hz,2H)、8.92(s,1H)、12.44(s,1H)。
实例36 1-(6-(4-氰苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(117)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将106(0.17g，0.81mmol)添加至混合物中并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.23)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的117(0.12g，30.07％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.61(s,3H)、3.93(s,6H)、7.40(s,1H)、7.84(d,J＝5.4Hz,2H)、8.20(d,J＝8.7Hz,2H)、8.98(s,1H)、12.32(s,1H)。
实例37 1-(6-(3-氰苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(118)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将107(0.17g，0.81mmol)添加至混合物中并搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，Rf＝0.33)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的118(0.12g，30.07％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.60(s,3H)、3.92(s,6H)、7.36(s,1H)、7.66(t,J＝8.1Hz,1H)、7.81(d,J＝7.8Hz,1H)、8.30(d,J＝8.4Hz,1H)、8.39(s,1H)、8.95(s,1H)、12.33(s,1H)。
实例38 1-甲基-1-(6-(3-硝基苯基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(119)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并接着将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将108(0.19g，0.81mmol)添加至混合物中并搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，Rf＝0.31)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的119(0.06g，14.45％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.64(s,3H)、3.93(s,6H)、7.44(s,1H)、7.75(t,J＝8.1Hz,1H)、8.39-8.47(m,2H)、8.94(s,1H)、8.99(s,1H)、12.36(s,1H)。
实例39 1-(6-(呋喃-2-基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(120)的制备
将14(0.15g，0.58mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.29g，0.96mmol)混合并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将109(0.09g，0.49mmol)添加至混合物中并搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，Rf＝0.20)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的120(0.05g，22.29％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.58(s,3H)、3.93(s,6H)、6.62(d,J＝5.4Hz,1H)、7.33(d,J＝6.0Hz,2H)、7.64(s,1H)、8.80(s,1H)、12.47(s,1H)。
实例40 1-甲基-1-(6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(121)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌所得混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将110(0.15g，0.81mmol)添加至混合物中并搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.55)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的121(0.04g，10.54％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.62(s,3H)、3.93(s,6H)、7.41(s,1H)、7.50-7.54(m,1H)、8.44(d,J＝8.1Hz,1H)、8.79(d,J＝4.2Hz,1H)、8.97(s,1H)、9.29(s,1H)、12.38(s,1H)。
实例41 1-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲(122)的制备
将14(0.25g，0.97mmol)及对二恶烷(7ml)的混合物与溶解于甲苯(3ml)中的三光气(0.48g，1.61mmol)混合并接着搅拌混合物且回流隔夜。直接地移除溶剂并将所得沈淀物溶解于甲苯(10ml)中。将110(0.15g，0.81mmol)添加至混合物中并搅拌所得混合物且回流隔夜。通过饱和NaHCO3(水溶液)淬灭反应并通过乙酸乙酯(30ml×3)萃取混合物。通过硅胶(二氯甲烷:甲醇＝9:1，Rf＝0.30)急骤管柱纯化残余物以得到呈淡黄色固体状的122(0.20g，52.68％)。1H-NMR(300MHz,CDCl3):δ3.62(s,3H)、3.93(s,6H)、7.45(s,1H)、8.00(d,J＝6.0Hz,2H)、8.84(d,J＝4.8Hz,2H)、9.00(s,1H)、12.29(s,1H)。
实例42 生物学分析-MTT分析
在具有10％FBS(v/v)及青霉素/链霉素(100U/ml)的RPMI-1640(RT-112、KMS-11、SNU-16、HT-29、HCT-116、NCI-H520、Hep3B、PLC/PRF/5、HL-60、MOLT-4)及DMEM(HepG2、MCF-7、MDA-MB-231)中培养细胞。在具有10％FBS的DMEM:F12培养基中维持FU-DDLS-1细胞株。以补充有10％FBS、2mmol/L L-麸酰胺酸及0.1mg/mL庆大霉素的IMDM/RPMI-1640(4:1比率)中维持LiSa-2细胞株。使人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长以汇合1％胶原蛋白，并在具有经调节以含有1.5g/L碳酸氢钠、10％FBS及青霉素/链霉素(100U/ml)的25U/ml肝素、30Hg/ml内皮细胞生长补充剂(ECGS)的90％培养基199中维持。在5％CO2/95％空气的潮湿氛围中在37℃下维持培养物。
在96孔板(5,000细胞/孔)中接种细胞且培育隔夜以供附着，并接着在补充有10％FBS的培养基中用所指示试剂处理72小时。在37℃下用MTT(0.5mg/mL)替换培养基1小时。在去除培养基之后，用100HL每孔的二甲亚砜(DMSO)溶解细胞，并通过微板读取器量测在550nm处的吸收度。相对细胞存活率(％)表述为相对于DMSO对照组细胞的百分比。IC50值经测定为将细胞存活率减小至DMSO对照组的50％(平均值±标准差)所需的化合物浓度。测试化合物及其MTT分析的结果列举在下表中。
在MTT分析中使用不同癌细胞株以测试例示性经氯苯取代的氮杂芳基化合物(MPT0L145)的抗癌活性。将已知化合物BJG398(3-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基-苯基)-1-{6-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)-苯胺基]-嘧啶-4-基}-1-甲基-脲)用作参考化合物以供比较。结果展示MPT0L145在抑制例示性膀胱癌及例示性肝癌中具有出人意料的功效且具有比BJG398低得多的毒性。
IC50(HM，均值±SD)
实例42 膀胱癌细胞中的MPT0L145的抗生长活性
已记录膀胱癌中的FGFR3的活化突变、基因融合及过度表达，从而指示膀胱癌为用于发现新颖FGFR抑制剂的有前景的适应症。吾等检测MPT0L145对具有不同基因背景的FGFR3的膀胱癌细胞的抗生长作用。与具有正常FGFR3状况(T24)的彼等细胞相比，具有FGFR3-TACC3融合物(RT-112、RT4)的细胞对MPT0L145更敏感(图1A)。尤其，与已知FGFR抑制剂BGJ-398相比，MPT0L145在正常细胞(HUVEC)中诱发明显地更低毒性(图1B)。RT-112及HUVEC中的MPT0L145的IC50值分别为11.1HM及0.05HM。据报导，RT-112细胞依赖于FGFR以供生长且因此经选择以确认MPT0L145对FGFR信号传导[22、23]的作用。包括BGJ-398(FGFR1至FGFR3的已知选择性抑制剂)作为参考化合物。资料揭露MPT0L145在1h内对FGFR1及FGFR3以及其下游对接蛋白质(FRS2)的自磷酸化发挥抑制活性(图2A)。FGFR的主要下游路径为MAPK、PI3K/AKT及PLC-γ。据报导，由于缺失FGFR3的最后外显子，表达FGFR3-TACC3的RT-112细胞不能激活PLCγ。接着，吾等在RT-112细胞中，在1h至8h内检测MPT0L145对FGFR下游的信息传递路径的动力作用。MPT0L145以浓度依赖性方式在1h处抑制ERK的磷酸化(图2B)。化合物在1h至4h内在抑制AKT磷酸化中显示比BGJ-398更好的潜能(图2B、图2C)。在8h处通过MPT0L145完全地抑制ERK及AKT的磷酸化(图2D)。这些资料支援所观测的MPT0L145对在膀胱癌细胞中的FGFR信息传递路径的抑制性作用。
实例43 MPT0L145诱发膀胱癌细胞中的G0/G1阶段处的细胞周期停滞
吾等观测与细胞周期进程相关联的基因在经MPT0L145治疗的细胞中减少。因此，吾等进一步检测MPT0L145对RT-112细胞中的细胞周期进程的作用。资料揭露MPT0L145在24h内显着诱发G0/G1细胞周期停滞。亦在用BGJ-398处理的细胞中观测到此现象(图3A)。然而，有趣地是，MPT0L145并不在72h内促成次G1阶段的聚集(凋亡细胞死亡的标志)，而BGJ-398及太平洋紫杉醇在48h至72h下诱发显着的细胞凋亡。此外，MPT0L145对G0/G1遏止的作用为浓度依赖性的(图3B)。这些发现指示至少部分经由在G0/G1阶段处妨碍细胞周期进程而发生MPT0L145的抗生长活性。接着，吾等经由西方墨点法检测G0/G1调节性蛋白质的表达。吾等资料展示p16的少量增加且细胞周期蛋白E含量的显着降低(图3C)。与太平洋紫杉醇相比，通过在72内检测卡斯蛋白酶-3及其基质PARP的裂解进一步消除经MPT0L145诱发的细胞凋亡的可能性(图3D)。结果共同地表明MPT0L145至少部分经由诱发G0/G1细胞周期停滞而在膀胱癌细胞中展现抗生长活性。
实例44 MPT0L145在RT-112异种移植模型中的抗肿瘤活性
为评估MPT0L145在临床前设定中的抗癌活性，吾等检测其在携带现有RT-112肿瘤异种移植的无胸腺裸鼠中的作用。在对灭菌粮食及水的任意获取的情况下，在恒定光周期(在21℃至23℃及60％至85％湿度下12h光照/12h黑暗)的条件下在TMU实验室动物中心(台湾台北)中分组圈养八周龄雌性无胸腺裸鼠。所有动物实验遵循如先前所描述的伦理标准及协定[50]。每一小鼠皮下接种在含有50％基质胶(BD Biosciences)的0.1mL无血清培养基的总体积中的1×106个RT-112细胞。随着肿瘤形成(约100mm3)，将小鼠随机分为接受以下治疗的四个群组(n＝5)：(a)0.5％羧基甲基纤维素/0.1％Tween 80媒剂，(b)5mg/kg/wk的顺铂，(c)经腹膜内注射(ip)的5mg/kg/d的MPT0L145或(d)经腹膜内注射(ip)的10mg/kg/d的MPT0L145。使用测径规每周量测肿瘤。自w2×l/2(w＝肿瘤的宽度，l＝以mm为单位的肿瘤的长度)计算肿瘤体积(mm3)。
MPT0L145以剂量依赖性方式明显地遏制肿瘤生长。顺铂(5mg/kg)及MPT0L145(5mg/kg及10mg/kg)的肿瘤生长抑制百分比(％TGI)分别为56.3％、61.4％及74.6％。MPT0L145展现不仅与顺铂类似的抗肿瘤活性，而且具有更好的安全性，如自治疗后的体重损失的评定确立。因此，吾等推定MPT0L145在活体内具有显着的抗肿瘤活性。
化合物 MPT0L145 MPT0L145 顺铂
治疗 5mg/kg/d,i.p. 10mg/kg/d,i.p. 5mg/kg/wk,i.p.
肿瘤生长抑制(％) 61.4 74.6 56.3
体重损失 否 否 是
实例45 MPT0L145对蛋白激酶及脂质激酶的活体外抑制性作用
激酶分析。对于大多数分析，在来源于BL21菌株的大肠杆菌(E.coli)宿主中制备激酶标记的T7噬菌体病毒株。大肠杆菌生长为记录阶段且经T7噬菌体感染并在32℃下振荡培育直至溶解。对溶解物进行离心且过滤以移除细胞碎片。在HEK-293细胞中产生剩余激酶且随后用DNA标记以供qPCR检测。在室温下用生物素化小分子配位体处理经抗生蛋白链菌素涂布的磁性珠粒持续30分钟，以生成用于激酶分析的亲和树脂。用过量生物素阻断经配位的珠粒，且用阻断缓冲液(SeaBlock(Pierce)，1％BSA、0.05％Tween 20、1mM DTT)洗涤以移除未结合的配位体及减少非特异性结合。通过使激酶、经配位的亲和珠粒及测试化合物在1×结合缓冲剂(20％SeaBlock、0.17×PBS、0.05％Tween 20、6mM DTT)中组合来组装结合反应。所有反应均在最终体积0.135mL的聚苯乙烯96孔板中进行。将分析板在室温下在震荡下培育1小时，且用洗涤缓冲液(1×PBS、0.05％Tween 20)洗涤亲和珠粒。随后将珠粒再悬浮于溶离缓冲液(1×PBS、0.05％Tween 20、0.5HM非生物素化亲和配位体)中，且在室温下振荡培育30分钟。溶离液中的激酶浓度通过qPCR来测量。
化合物处理。在100％DMSO中以100×最终测试浓度制备各测试化合物的11点、3倍连续稀释液，且随后在分析中稀释至1×(最终DMSO浓度＝1％)。使用化合物最高浓度＝30,000nM来测定大多数Kd值。若所测定的起始Kd<0.5nM(所测试的最低浓度)，则用以较低最高浓度开始的连续稀释液重复量测。经报导为40,000nM的Kd值指示Kd经测定为>30,000nM。
结合常数(Kd)。使用希尔(Hill)等式用标准剂量-反应曲线计算结合常数(Kd)：
将希尔斜率设定为-1。通过雷文柏格马括特演算法(Levenberg-Marquardtalgorithm)使用非线性最小平方拟合来拟合曲线。
MPT0L145对蛋白激酶的活体外抑制性作用的结果展示于下表中。
激酶 Kd(nM) 激酶 Kd(nM)
FGFR1 130 IKK-α >10000
FGFR3 270 IKK-β >10000
FGFR2 670 INSR >10000
FGFR4 7500 KIT >10000
CSF1R 340 LKB1 >10000
TYK2 660 MAPKAPK2 >10000
PDGFRB 680 MEK1 >10000
KIT 950 MEK2 >10000
FLT3 1300 MET >10000
VEGFR2 3100 MKNK1 >10000
Erbb2 10000 MKNK2 >10000
ACVR1B >10000 MLK1 >10000
ADCK3 >10000 p38-α >10000
AKT1 >10000 p38-β >10000
AKT2 >10000 PDGFRA >10000
AURKB >10000 PDPK1 >10000
AXL >10000 PIK3CA >10000
BMPR2 >10000 PIK3CG >10000
BRAF >10000 PIM1 >10000
BTK >10000 PIM2 >10000
CDK3 >10000 PIM3 >10000
CDK9 >10000 PLK1 >10000
CSNK1D >10000 PLK3 >10000
DCAMKL1 >10000 RAF1 >10000
EGFR >10000 RET >10000
EPHA2 >10000 ROCK2 >10000
ERBB4 >10000 SRPK3 >10000
ERK1 >10000 TGFBR1 >10000
FAK >10000 TSSK1B >10000
GSK3B >10000 YANK3 >10000
IGF1R >10000 ZAP70 >10000
MPT0L145对脂质激酶的活体外抑制性作用的结果展示于下表中。
基因符号 Kd(nM)
PIK3C3 0.53
PIK3C2B 1000
PIKFYVE 2600
PIK4CB 6500
PIP5K2B >10000
PIP5K2C >10000
PIK3C2G >10000
PIK3CA >10000
PIK3CB >10000
PIK3CD >10000
PIK3CG >10000
PIP5K1A >10000
PIP5K1C >10000
实例46 MPT0L145对突变的FGFR3的活体外抑制性作用
FGFR失常在各种癌症中为常见的，诸如基因扩增或活化突变。最常受影响的癌症为泌尿上皮癌(32％FGFR-异常)；乳房癌(18％)；子宫内膜癌(13％)；鳞状肺癌(13％)及卵巢癌(9％)。在泌尿上皮癌中，大部分的失常为FGFR3中的活化突变，包括S249C、R248C、Y373C、G370C及K650M(Clin Cancer Res.2016年1月1日；22(1):259-67.)。在多发性骨髓瘤中，据报导活跃FGFR3突变(Y373C及K650E)对肿瘤进展是重要的(Oncogene.2001年6月14日；20(27):3553-62.)。FGFR3的突变(V555M)亦经识别为获取对FGFR抑制剂的抵抗力的机制(Oncogene.2013年6月20日；32(25):3059-70.)。此外，在口腔鳞状细胞癌中发现FGFR3b(G697C)的基本的活化突变(Int J Cancer.2005年10月20日；117(1):166-8.)。因此，吾等检测MPT0L145对具有活跃突变的FGFR3的抑制剂活性。与野生型FGFR3相比，MPT0L145展示在抑制FGFR3(G697C)中的相当的活性，且在特异性地抑制FGFR3(K650E)中具有更好的活性。资料表明MPT0L145不仅可抑制野生型FGFR3，且亦抑制携载活跃突变的FGFR3(K650E、G697C)。
化合物及分析方法类似于在实例45中提及的彼等。MPT0L145对突变FGFR3的活体外抑制性作用的结果展示于下表中。
基因符号 Kd(nM)
FGFR3 390
FGFR3(G697C) 390
FGFR3(K650E) 240
FGFR3(V555M) >10000
实例47 在癌症的治疗中已知用以诱发促存活率细胞自噬的MPT0L145及试剂的合理组合
细胞自噬为重要的细胞再循环机制，其中部分细胞溶质或细胞器螯合至双细胞膜结构中且递送至溶酶体以供降解。因此，通过将细胞自噬抑制与诱发作为促存活率反应的细胞自噬以增大其治疗功效的试剂组合来提出癌症中的靶向嗜细胞自噬的基本原理。根据吾等资料，MPT0L145为PIK3C3的强力抑制剂，其在细胞自噬的进展中是重要的(KD＝0.53nM)。因此，吾等检测了MPT0L145与已知用以诱发促存活率细胞自噬的试剂的组合。吾等的初步资料表明当MPT0L145在非小细胞肺癌A549细胞中与吉非替尼组合及在胰脏癌Panc1细胞中与吉西他滨组合时的协作相互作用。
在A549细胞或Panc1细胞中使用MTT分析(72h)。在96孔板中接种细胞并暴露于DMSO或所指示的化合物72小时。使用如先前所描述的3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物(MTT)分析来评定细胞存活率[46]。简言之，将100Hl的0.5mg/ml MTT添加至各孔中且在37℃下培育1小时。此后，将100Hl的提取试剂(用于悬浮液细胞的0.1M醋酸钠缓冲剂或用于附接细胞的DMSO)添加至各孔中以溶解细胞且量测在550nm处的吸收度。细胞存活率表述为相对于DMSO处理对照组细胞(其被认为是100％存活率)在药物治疗中的存活细胞的百分比。根据剂量作用曲线来测定抑制50％的细胞生长(IC50)的浓度。通过使用CompuSyn软体(ComboSyn,Inc)根据Chou-Talalay方法由各自药物组合的受影响分率值测定组合指标(CI)值，且低于1的组合指标值表示协同效应(Pharmacol Rev.2006年9月；58(3):621-81.)。在A549细胞中的细胞存活率结果及CI值结果分别展示于图4A及图4B中且亦展示于下表中。
吉非替尼(μM) MPT0L145(μM) 作用 CI
1.25 1.0 0.333 0.51078
5.0 1.0 0.43 0.62487
10.0 1.0 0.599 0.34009
1.25 2.0 0.464 0.45105
5.0 2.0 0.581 0.39447
10.0 2.0 0.727 0.24181
1.25 4.0 0.678 0.42583
5.0 4.0 0.73 0.38142
10.0 4.0 0.819 0.27111
在A549细胞中的细胞存活率结果及CI值结果分别展示于图5A及图5B中且亦展示于下表中。
吉西他滨(μM) MPT0L145(μM) 作用 CI
6.25 2.5 0.59 0.0492
12.5 2.5 0.641 0.03376
25 2.5 0.642 0.0335
50 2.5 0.701 0.02099
6.25 5 0.632 0.07226
12.5 5 0.685 0.04786
25 5 0.703 0.04128
50 5 0.801 0.01634

Claims (18)

1.一种具有以下式(I)的化合物：
其中
X为C、N、O或S；
R1为环烷基；未经取代或经卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、烷胺基或具有1至3个选自由N、O及S组成的群的杂原子的杂芳基取代的芳基；未经取代或经卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、烷胺基或具有1至3个选自由N、O及S组成的群的杂原子的杂芳基取代的杂烷基；或NR7R8，其中R7及R8各自独立地选自由H、硝基、胺基、氰基、烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基组成的群，其中烷基、烯基、炔基、芳基及杂芳基各自独立地经具有1至3个选自由N、O及S组成的群的杂原子的杂芳基取代及经烷基、烯基或炔基或烷氧基取代；
R2为H、卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基、炔基，或未经取代或经卤基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基或炔基取代的芳基；及
R3及R4各自独立地选自由以下组成的群：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基或烷胺基；及
R5及R6各自独立地选自H、卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基、炔基；
其中上文所提及的杂芳基未经取代或经卤基、羰基、羟基、胺基、硝基、氰基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷氧基烷基、烷胺基或芳基取代；
或其互变异构体或立体异构体，或其溶剂合物、前药或医药学上可接受的盐。
2.如权利要求1的化合物，其中卤基为F、Cl或Br；烷基为C1-10烷基，优选地C1-6烷基或C1-4烷基；烯基为C2-10烯基，优选地C2-6烯基；炔基为C2-10炔基，优选地C2-6炔基；烷氧基为C1-10烷氧基，优选地C1-6烷氧基或C1-4烷氧基；芳基为5员或6员芳基，优选地苯基；及杂芳基为5员或6员杂芳基且具有1至3个选自由N、O及S组成的群的杂原子。
3.如权利要求1的化合物，其中X为C；R1为未经取代或经卤基、氰基、硝基、C1-10烷氧基或具有1至3个选自由N、O及S组成的群的杂原子且未经取代或经C1-10烷基取代的C5-12杂芳基取代的苯基；或具有1个至3个选自由N、O及S组成的群的杂原子的未经取代或经取代的杂芳基；R2为H；R3及R4各自独立地为C1-10烷基；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。
4.如权利要求1的化合物，其中X为C；R1为苯基、C1-10烷基哌嗪基苯基、C1-10烷氧基苯基、卤苯基、氰苯基、硝基苯基、呋喃基或吡啶基，更优选地，R1为(4-乙基哌嗪基-1-基)苯基、苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-氰苯基、硝基苯基、2-呋喃基、3-吡啶基或4-吡啶基。
5.如权利要求1的化合物，其中X为C；R1为苯基、(4-乙基哌嗪基-1-基)苯基、苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-氰苯基、硝基苯基、2-呋喃基、3-吡啶基或4-吡啶基；R2为H；R3及R4各自独立地为CH3；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。
6.如权利要求1的化合物，其中X为C或N；R1为NR7R8，其中R7及R8各自独立地选自由以下组成的群：H、经未经取代或经C1-10烷基取代的6员杂芳基取代的C1-10烷基；经具有1至3个选自由N、O及S组成的群的杂原子的6员杂芳基取代及经C1-10烷基取代的苯基；R2为H、卤基或苯基；R3及R4各自独立地为C1-10烷基；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。
7.如权利要求1的化合物，其中X为C或N；R1为NR7R8，其中R7为C1-10烷基哌嗪基苯基、哌啶基C1-10烷基、C1-10烷基哌嗪基C1-10烷基或C1-10烷基哌嗪基羰基苯基及R8为H；R2为H、卤基或苯基；R3及R4各自独立地为C1-10烷基；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。
8.如权利要求1的化合物，其中X为C或N；R1为NR7R8，其中R7为乙基哌嗪基苯基、甲基哌嗪基乙基或乙基哌嗪基羰基苯基及R8为H；R2为H、苯基或Cl；R3及R4各自独立地为C1-10烷基；及R5及R6各自独立地为H或C1-10烷基。
9.如权利要求1的化合物，其选自由以下组成的群：
1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-2-苯基嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(4-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-1,3,5-三嗪-2-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(4-氯-6-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-1,3,5-三嗪-2-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-((2-(哌啶-1-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-((2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-((4-(4-乙基哌嗪-1-羰基)苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-苯基嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-氟苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-氯苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(4-氰苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(3-氰苯基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-(3-硝基苯基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-(6-(呋喃-2-基)嘧啶-4-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
1-甲基-1-(6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；及
1-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲；
或其互变异构体或立体异构体，或其溶剂合物、前药或医药学上可接受的盐。
10.如权利要求1的化合物，其为1-(4-((4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基)胺基)-1,3,5-三嗪-2-基)-1-甲基-3-(2,4,6-三氯-3,5-二甲氧基苯基)脲，具有下式：
11.一种医药组合物，其包含如权利要求1的化合物及医药学上可接受的载剂。
12.如权利要求11的医药组合物，其进一步包含一或多种第二治疗剂。
13.如权利要求12的医药组合物，其中所述第二治疗剂为有丝分裂抑制剂(诸如紫杉烷(优选太平洋紫杉醇(paclitaxel)、多烯紫杉醇(docetaxel))、长春花生物碱(优选长春碱、长春新碱、长春地辛(vindesine)及长春瑞滨(vinorelbine))及灭必治(vepesid))；蒽环抗生素(诸如阿霉素(doxorubicin)、道诺霉素(daunorubicin)、泛艾霉素(epirubicin)、艾达霉素(idarubicin)、瓦尔霉素(valrubicin)及米托蒽醌(mitoxantrone))；核苷类似物(诸如吉西他滨(gemci-tabine))；EGFR抑制剂(诸如吉非替尼(gefitinib)及埃罗替尼(erlotinib))；叶酸抗代谢物(诸如三甲氧苄二胺嘧啶(trimetho-prim)、乙胺嘧啶(pyrimethamine)及培美曲唑(pemetrexed))；顺铂及卡铂。
14.如权利要求12的医药组合物，其中所述第二治疗剂为他莫昔芬(tamoxifen)、紫杉醇、长春碱、依托泊苷(etoposide)(VP-16)、阿德力霉素(adriamycin)、5-氟脲嘧啶(5FU)、喜树碱、放射菌素-D、丝裂霉素C、康柏斯达汀(combretastatin)，更特别地多西紫杉醇(紫杉德(taxotere))、顺铂(CDDP)、环磷酰胺、阿霉素、甲胺喋呤(methotrexate)、太平洋紫杉醇、长春新碱、吉非替尼、埃罗替尼。
15.一种用于抑制、预防或治疗个体癌症的方法，其包含向所述个体投与有效量的如权利要求1的化合物。
16.如权利要求14的方法，其中所述癌症是选自由以下组成的群：神经母细胞瘤、肺癌、胆管癌、非小细胞肺癌、肝细胞癌、头部及颈部鳞状细胞癌、鳞状细胞子宫颈癌、淋巴瘤、鼻咽癌；胃癌、结肠癌、子宫颈癌、胆囊癌、前列腺癌、乳癌、睪丸生殖细胞肿瘤、结肠直肠癌、神经胶质瘤、甲状腺癌、基底细胞癌、肠胃基质癌、肝母细胞瘤、子宫内膜癌、卵巢癌、胰脏癌、肾细胞癌、卡波西氏(Kaposi’s)肉瘤、慢性白血病、肉瘤、直肠癌、咽喉癌、黑素瘤、结肠癌、膀胱癌、肥胖细胞瘤、乳房肿瘤、乳腺癌、咽部鳞状细胞癌、睪丸癌、肠胃癌或胃癌、及泌尿上皮癌(urothelial cancer)，优选地，所述癌症为膀胱癌及肝细胞癌。
17.如权利要求14的方法，其中所述癌症为膀胱癌、肝癌、胃癌、骨髓瘤、肉瘤、结肠直肠癌、肺癌、乳癌或肝细胞癌。
18.如权利要求14的方法，其中所述癌症为FGFR活化的癌症。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110283130A (zh) * 2019-07-05 2019-09-27 温州医科大学 一种1-(2,5-二甲氧基苯基)-3-取代脲类结肠癌抑制剂及其制备和应用

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20220396567A1 (en) * 2019-09-30 2022-12-15 Hoffmann-La Roche Inc. Substituted pyrimidine for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090137804A1 (en) * 2004-06-24 2009-05-28 Qiang Ding Compounds and Compositions as Protein Kinase Inhibitors
WO2013144339A1 (en) * 2012-03-30 2013-10-03 Novartis Ag Fgfr inhibitor for use in the treatment of hypophosphatemic disorders
US8759517B2 (en) * 2005-12-21 2014-06-24 Novartis Ag Pyrirnidinyl aryl urea derivatives being FGF inhibitors

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101483215B1 (ko) * 2010-01-29 2015-01-16 한미약품 주식회사 단백질 키나아제 저해활성을 갖는 비시클릭 헤테로아릴 유도체
WO2015057938A1 (en) * 2013-10-18 2015-04-23 Eisai R&D Management Co., Ltd. Pyrimidine fgfr4 inhibitors

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090137804A1 (en) * 2004-06-24 2009-05-28 Qiang Ding Compounds and Compositions as Protein Kinase Inhibitors
US8759517B2 (en) * 2005-12-21 2014-06-24 Novartis Ag Pyrirnidinyl aryl urea derivatives being FGF inhibitors
WO2013144339A1 (en) * 2012-03-30 2013-10-03 Novartis Ag Fgfr inhibitor for use in the treatment of hypophosphatemic disorders

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110283130A (zh) * 2019-07-05 2019-09-27 温州医科大学 一种1-(2,5-二甲氧基苯基)-3-取代脲类结肠癌抑制剂及其制备和应用
CN110283130B (zh) * 2019-07-05 2023-12-19 温州医科大学 一种1-(2,5-二甲氧基苯基)-3-取代脲类结肠癌抑制剂及其制备和应用

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