CN108342502A - 鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合及其检测方法 - Google Patents

鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合及其检测方法 Download PDF

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宋震
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Abstract

本发明公开了一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合，PCR引物对为P1或者P2；引物对组合为P1与P3组合使用，或者P2与P3组合使用。还公开了一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法，包括如下步骤：1)提取待检测的小麦种子或植株的根茎叶总基因组DNA作为PCR扩增模板；2)采用权利要求1所述的引物对或者引物对组合对得到的DNA模板进行扩增，根据条带的有无和强弱判断待测对象是否含有ms1b隐性不育基因。可有效地对不带胚的半粒小麦种子和植株组织进行检测，能实现对ms1b基因的快速、大通量的检测，大幅度提高蓝粒两系法杂交小麦系统中的两用系(不育系)快速转育和选育效率。

Description

鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合及其 检测方法
技术领域
本发明属于基因分子检测领域，具体涉及一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合及其检测方法。
背景技术
小麦雄性不育基因多数是由自然突变或人工诱导产生的，小麦上发现和诱导的雄性核不育材料较多，这些基因被命名为ms1、Ms2、Ms3、Ms4和ms5，分别定位在4BS、4DS、5AS、4DS和3AL染色体臂上。其中，ms1和ms5为隐性基因，而Ms2、Ms3、Ms4为显性基因。与本发明相关的ms1基因位点有很多突变体，包括Pugsley's突变体(含等位基因ms1a)、Probus突变体(含等位基因ms1b)、Cornerstone突变体(含等位基因ms1c)、FS3突变体(含等位基因ms1e)、FS24突变体(含等位基因ms1f)、LZ突变体(含等位基因ms1g)等等。2006年李中安利用ms1b不育基因建立了《一种以蓝粒为标记性状的两系法杂交小麦的选育方法》(专利号：ZL200610042629.8)，现已培育出一大批两用系(不育系)和杂交种在进行试验和示范。为进一步提高两用系(不育系)选育效率，在保持不育基因存在的情况下将其它抗病抗逆、优质、矮杆等优良性状转入两用系(不育系)中，因此迫切需要建立简便可行的鉴定ms1b基因的检测方法，尤其是早期从不带胚的半粒种子上进行检测。
PCR(Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应)已广泛应用于基因分离、克隆、核酸序列分析、病害分子检测、品种性状的分子标记等研究。目前尚无鉴定ms1b基因的PCR分子检测技术，对该不育基因的识别只有在田间开花时观察植株的育性，根据植株群体的育性个分离情况才能知道是ms1b基因是纯合的还是杂合的或根本没有，需要较大的群体才行，而且极大地受到季节性限制。
发明内容
本发明的目的是提供一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合及其检测方法。
本发明一方面提供了一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合，所述的PCR引物对为P1或者P2；所述的引物对组合为P1与P3组合使用，或者P2与P3组合使用；所述引物对P1、P2、P3的序列为：
P1-F：5'-ACCCTCTCTAGATATATCCGT-3'，
P1-R：5'-CATATTCAAGTGTCCCGTCA-3'，
P2-F：5'-GCTATCGTTTCTGTCCGCTCGTA-3'，
P2-R：5'-CCGCTTGACGTGAGTTCCAT-3'，
P3-F：5'-TGAGCGAACAACCTAAGACGA-3'，
P3-R：5'-CCGTGTCAGCTCAATTACCAT-3'。
本发明另一方面提供了一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法，包括如下步骤：
1)提取待检测的小麦种子或植株的根茎叶总基因组DNA作为PCR扩增模板；
2)采用权利要求1所述的引物对或者引物对组合对得到的DNA模板进行扩增，根据条带的有无和强弱判断待测对象是否含有ms1b隐性不育基因：当采用引物对P1进行检测时，如果扩增出720bp的条带，条带强时则说明检测对象不含ms1b隐性不育基因，条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因；没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因；
当采用引物对P2进行检测时，如果扩增出531bp的条带，条带强时则说明检测对象不含ms1b隐性不育基因，条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因，没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因；
当采用P1与P3组合双重PCR时，如果扩增出976bp的条带，说明检测对象中含有4B染色体；如果同时扩增出720bp的条带，条带强时说明检测对象不含ms1b隐性不育基因，条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因，没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因；如果未扩增出976bp的条带，则说明该样品检测结果不准确需要重新实验；
当采用P2与P3组合双重PCR时，如果扩增出976bp的条带，说明检测对象中含有4B染色体；如果同时扩增出531bp的条带，条带强时说明检测对象不含ms1b隐性不育基因，条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因；没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因；如果未扩增出976bp的条带，则检测结果不准确需要重新实验。
当采用引物对P1进行检测时，20μL的PCR反应体系包含：10μL 2×Green Mixbuffer；样品基因组DNA抽提物1μL；浓度为10μmol/L的P1引物对的上下游引物各0.3μL，蒸馏水补足至20μL；PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸1min，40个循环，最后72℃延伸5min。
当采用引物对P2进行检测时，20μL的PCR反应体系包含：10μL 2×Green Mixbuffer；样品基因组DNA抽提物1μL；浓度为10μmol/L的P2引物对的上下游引物各0.3μL，蒸馏水补足至20μL；PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s，36个循环，最后72℃延伸5min。
当采用引物对P1和P3引物对组合进行检测时，20μL的PCR反应体系包含：10μL 2×Green Mix buffer；样品基因组DNA抽提物1μL；浓度为10μmol/L的P1引物对的上下游引物各0.3μL，浓度为浓度为10μmol/L的P3引物对的上下游引物各0.15μL，蒸馏水补足至20μL；PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸1min，40个循环，最后72℃延伸5min。
当采用引物对P2和P3引物对组合进行检测时，20μL的PCR反应体系包含：10μL 2×Green Mix buffer；样品基因组DNA抽提物1μL；浓度为10μmol/L的P2、P3引物对的上下游引物均各0.3μL，蒸馏水补足至20μL；PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s，33个循环，最后72℃延伸5min。
本发明的有益效果是：检测周期短、灵敏度好，方法简便、操作简单、准确性好，可有效地对不带胚的半粒小麦种子和植株组织进行检测，能实现对ms1b基因的快速、大通量的检测，大幅度提高蓝粒两系法杂交小麦系统中的两用系(不育系)快速转育和选育效率。
附图说明
图1为采用P1引物对检测ms1b的琼脂糖凝胶电泳结果图，其中：M：分子量标准为DL1000 DNA Marker；1-2：13品6；5-2：17ZH189(16L5079w/绵麦367)杂交种；8-1：14L6232B蓝粒两用系；N：清水对照。
图2为采用P2引物对检测ms1b的琼脂糖凝胶电泳结果图，其中：M：分子量标准为DL1000 DNA Marker；1-2：13品6；5-2：17ZH189(16L5079w/绵麦367)杂交种；7-1：17ZH231(15L7079w/13品6)杂交种；8-1：14L6232B蓝粒两用系；N：清水对照。
图3为采用P3引物对检测4B染色体有无缺失的琼脂糖凝胶电泳结果图，其中，M：分子量标准为DL1000 DNA Marker；1-2：13品6；5-2：17ZH189(16L5079w/绵麦367)杂交种；8-1：14L6232B蓝粒两用系；N：清水对照。
图4为采用P1和P3引物组合进行双重PCR检测ms1b和4B染色体的琼脂糖凝胶电泳结果图，其中，M：分子量标准为DL1000 DNA Marker；1-2：13品6；5-2：17ZH189(16L5079w/绵麦367)；8-1：14L6232B蓝粒两用系；N：清水对照。
图5为采用P2和P3引物组合进行双重PCR检测ms1b和4B染色体的琼脂糖凝胶电泳结果图，其中，M：分子量标准为DL1000 DNA Marker；1-2：13品6；5-2：17ZH189(16L5079w/绵麦367)杂交种；7-1：17ZH231(15L7079w/13品6)杂交种；8-1：14L6232B蓝粒两用系；N：清水对照。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例一、
一、引物设计及组合
根据E.J.Tucker等2017年在《Nature Communication》杂志上发表的基因组序列设计引物对，先建立P1、P2和P3引物对的单个PCR检测体系，然后通过优化反应条件，检测ms1b的P1、P2引物分别与检测4B染色体的P3引物搭配，建立同时检查样品中有无ms1b基因和4B染色体有无缺失的双重PCR体系。3对引物组合详细情况见下表1：
表1本发明所使用的引物对
本发明以种子或植株的根茎叶总基因组DNA为模板，利用本发明的引物对或其组合分别进行PCR扩增，反应结束后根据琼脂糖凝胶电泳判定结果：具体利用P1或者P2引物对，进行PCR扩增可鉴别ms1b不育基因；利用P3引物对进行PCR扩增可鉴别4B染色体在所鉴定的材料中有无缺失；当P1、P2引物对分别与P3组合进行双重PCR扩增可以保证在4B染色体无缺失情况下鉴别ms1b基因有无、是杂合或纯合的，检测结果更准确可靠。
二、DNA提取:
利用Biospin全能型植物基因组DNA提取试剂盒提取DNA，对其操作步骤略有改动，具体步骤如下：
1)用刀片将种子切成两半，无胚部分压碎后放入1.5或2.0mL的离心管中；或用刀片将植物组织切碎后放入1.5mL的离心管中。
2)在装有样品的离心管中加800μL LA plus Buffer，放置30min后加入钢珠用磨样器打碎，置于4℃冰箱中过夜。
3)振荡后置于65℃水浴锅中温浴30min，其间振荡离心管2-3次。
4)加入200μL DA Buffer，混合均匀后置于-20℃冰箱中或冰浴中10min。
5)将混合物在10000rpm离心3min后上清液移至Shredder spin column，再在10000rpm离心1min。
6)将滤液转移到一个新的1.5mL离心管中，加入750uL或滤液体积1.5倍的PBinding Buffer(加酒精的)，混合均匀。
7)将混合液移至Spin column中，6000rpm离心1min，弃去接液管中液体(由于液体较多，分2次离心过柱)。
8)向Spin column中加入400μL的G Binding Buffer,10000rpm离心30秒，弃去接液管中液体。
9)向Spin column中加入400μL的Washing Buffer(加酒精的),10000rpm离心30秒，弃去接液管中液体，重复2次。
10)再次将Spin column 10000rpm离心1min，然后将其转移至一个新的1.5mL的离心管上。
11)向Spin column中加入30μL的Elution Buffer，在室温下放置1min后，10000rpm离心1min，弃去Spin column，离心管中液体即为DNA抽提物，-20℃下保存备用。
三、PCR反应体系(20μL)：
10μL 2×Green Mix buffer(PROMEGA公司，其成分为GoTaq DNA聚合酶、dNTPs及反应缓冲液)；样品基因组DNA抽提物1μL；引物由重庆市擎科兴业生物技术有限公司合成，浓度为10μmol/L，单个PCR扩增中P1、P2引物使用量均为0.3μL，P3引物使用量为0.15μL，双重PCR扩增中P1和P3引物组合中P1和P3使用量分别为0.3μL和0.15μL，P2和P3组合引物中P2和P3使用量均为0.3μL；蒸馏水补足至20μL。
四、PCR反应程序：
1)P1引物对的PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸1min，40个循环，最后72℃延伸5min；
2)P2引物对的PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s，36个循环，最后72℃延伸5min；
3)P3引物对的PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸1min，40个循环，最后72℃延伸5min；
4)P1和P3引物对组合双重PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸1min，40个循环，最后72℃延伸5min；
5)P2和P3引物对组合双重PCR的反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s，33个循环，最后72℃延伸5min。PCR产物在4℃条件下保存。
从上面可以发现，P1和P3引物对组合的双重PCR的PCR循环次数明显多于P2和P3引物对组合双重PCR的PCR循环次数，因此当提取的DNA量较少时，采用P2和P3引物对组合进行双重PCR效果更好，更易得到清晰的条带。五、电泳：
电泳用2.5％的琼脂糖，DL1000 DNA Marker(TaKaRa公司)，80V电压，90min。
实施例二、品种(系)检测鉴定
按照实施例一中的DNA提取方法、PCR反应体系、PCR反应程序、琼脂糖对不同小麦品种(系)检测(电泳结果如附图1-5所示)：
一、常规小麦品种(系)检查鉴定
检测了常规小麦品种(系)：14品16,13品6，绵麦374，绵麦367，渝麦17，西农538，小偃22，高大1号，陕987，远丰175，MTS-1，15CA50，济麦22，九麦2号，伟隆121,伟隆136，伟隆169等。检测结果显示均表现1-2(13品6)的带型。
二、含1对ms1b基因的蓝粒两用系检测鉴定
检测了蓝粒两用系：08L5070B，12L8012B，12L8015B，12L8016B，14L8056B，14L8139B,14L6232B，15L7079B，15L7084B，15L7095B，15L7096B，15L7266,16L5079B，16L6010B,16L6335B,16L6355B,16L6388B,16L6392B,16L6429B,16L6432B,16L7004B,16L7043B,17L5080B,17L6062B,17L6067B,17L9034B,17L9066B,17L9076B,17L9080B等。检测结果显示均表现8-1(14L6232B蓝粒两用系)的带型。
三、含1个ms1b基因的小麦杂交种的检测鉴定
检测了小麦杂交种：17ZH01，17ZH02，17ZH03，17ZH04，17ZH05，17ZH06，17ZH07，17ZH08，17ZH49，17ZH50，17ZH51，17ZH52，17ZH53，17ZH54，17ZH95，17ZH96，17ZH139，17ZH140，17ZH141，17ZH142，17ZH143，17ZH186，17ZH187，17ZH188，17ZH189，17ZH229，17ZH230，17ZH231，17ZH233，17ZH234，17ZH235，17ZH236等。检测结果显示均表现5-2(17ZH189，杂交种)的带型。
采用本发明方法得到的检测结果和这些品种(系)的已知不育表型是相符合的，说明本发明的检测方法灵敏度好，方法简便，操作简单，能实现对ms1b基因的快速、大通量的检测，大幅度提高蓝粒两系法杂交小麦系统中的两用系(不育系)快速转育和选育效率。

Claims (6)

1.一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR引物对和引物对组合，其特征在于：所述的PCR引物对为P1或者P2；所述的引物对组合为P1与P3组合使用，或者P2与P3组合使用；所述引物对P1、P2、P3的序列为：
P1-F：5'-ACCCTCTCTAGATATATCCGT-3'，
P1-R：5'-CATATTCAAGTGTCCCGTCA-3'，
P2-F：5'-GCTATCGTTTCTGTCCGCTCGTA-3'，
P2-R：5'-CCGCTTGACGTGAGTTCCAT-3'，
P3-F：5'-TGAGCGAACAACCTAAGACGA-3'，
P3-R：5'-CCGTGTCAGCTCAATTACCAT-3'。
2.一种鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
1)提取待检测的小麦种子或植株的根茎叶总基因组DNA作为PCR扩增模板；
2)采用权利要求1所述的引物对或者引物对组合对得到的DNA模板进行扩增，根据条带的有无和强弱判断待测对象是否含有ms1b隐性不育基因：当采用引物对P1进行检测时，如果扩增出720bp的条带，条带强时则说明检测对象不含ms1b隐性不育基因，条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因；没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因；
当采用引物对P2进行检测时，如果扩增出531bp的条带，条带强时则说明检测对象不含ms1b隐性不育基因，条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因，没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因；
当采用P1与P3组合双重PCR时，如果扩增出976bp的条带，说明检测对象中含有4B染色体；如果同时扩增出720bp的条带，条带强时说明检测对象不含ms1b隐性不育基因，条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因，没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因；如果未扩增出976bp的条带，则说明该样品检测结果不准确需要重新实验；
当采用P2与P3组合双重PCR时，如果扩增出976bp的条带，说明检测对象中含有4B染色体；如果同时扩增出531bp的条带，条带强时说明检测对象不含ms1b隐性不育基因，条带弱时说明检测对象含有1个ms1b隐性不育基因；没有条带时则说明检测对象含有1对ms1b隐性不育基因；如果未扩增出976bp的条带，则检测结果不准确需要重新实验。
3.如权利要求2所述的鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法，其特征在于：当采用引物对P1进行检测时，20μL的PCR反应体系包含：10μL 2×Green Mix buffer；样品基因组DNA抽提物1μL；浓度为10μmol/L的P1引物对的上下游引物各0.3μL，蒸馏水补足至20μL；PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸1min，40个循环，最后72℃延伸5min。
4.如权利要求2所述的鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法，其特征在于：当采用引物对P2进行检测时，20μL的PCR反应体系包含：10μL 2×Green Mix buffer；样品基因组DNA抽提物1μL；浓度为10μmol/L的P2引物对的上下游引物各0.3μL，蒸馏水补足至20μL；PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s，36个循环，最后72℃延伸5min。
5.如权利要求2所述的鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法，其特征在于：当采用引物对P1和P3引物对组合进行检测时，20μL的PCR反应体系包含：10μL 2×Green Mixbuffer；样品基因组DNA抽提物1μL；浓度为10μmol/L的P1引物对的上下游引物各0.3μL，浓度为浓度为10μmol/L的P3引物对的上下游引物各0.15μL，蒸馏水补足至20μL；PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸1min，40个循环，最后72℃延伸5min。
6.如权利要求2所述的鉴定小麦ms1b隐性不育基因的PCR检测方法，其特征在于：当采用引物对P2和P3引物对组合进行检测时，20μL的PCR反应体系包含：10μL 2×Green Mixbuffer；样品基因组DNA抽提物1μL；浓度为10μmol/L的P2、P3引物对的上下游引物均各0.3μL，蒸馏水补足至20μL；PCR反应程序为：预变性95℃，3min，再经95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s，33个循环，最后72℃延伸5min。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109593873A (zh) * 2018-12-29 2019-04-09 中国科学院遗传与发育生物学研究所 小麦隐性核雄性不育突变基因ms1的分子标记及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1234722A (zh) * 1997-05-15 1999-11-10 耶达研究及发展有限公司 生产杂交小麦的方法
WO2007092505A2 (en) * 2006-02-07 2007-08-16 Washington State University Research Foundation Glyphosate-tolerant wheat genotypes
CN103409433A (zh) * 2013-08-12 2013-11-27 江苏省农业科学院 一个水稻稻瘟病广谱抗病新等位基因pi21t及其抗性应用
CN104719129A (zh) * 2015-03-27 2015-06-24 西南大学 一种小麦新品种的选育方法
CN105671170A (zh) * 2016-03-10 2016-06-15 中国农业大学 一种用于鉴别鸡匍匐性状的引物组合及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1234722A (zh) * 1997-05-15 1999-11-10 耶达研究及发展有限公司 生产杂交小麦的方法
WO2007092505A2 (en) * 2006-02-07 2007-08-16 Washington State University Research Foundation Glyphosate-tolerant wheat genotypes
CN103409433A (zh) * 2013-08-12 2013-11-27 江苏省农业科学院 一个水稻稻瘟病广谱抗病新等位基因pi21t及其抗性应用
CN104719129A (zh) * 2015-03-27 2015-06-24 西南大学 一种小麦新品种的选育方法
CN105671170A (zh) * 2016-03-10 2016-06-15 中国农业大学 一种用于鉴别鸡匍匐性状的引物组合及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ELISE J等: ""Molecular identification of the wheat male fertility gene Ms1 and its prospects for hybrid breeding"", 《NATURE COMMUNICATIONS》 *
金晶，陈茶主编: "《分子诊断学实验指导》", 30 August 2015, 中国医药科技出版社 *
陈涛等: ""小麦抗白粉病基因Ｐm13和Ｐm21的多重PCR检测"", 《贵州农业科学》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109593873A (zh) * 2018-12-29 2019-04-09 中国科学院遗传与发育生物学研究所 小麦隐性核雄性不育突变基因ms1的分子标记及其应用

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