CN108310125B - 前列欣在抗血栓药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种抗血栓的药物组合物及其应用，该组合物由活性成分和辅料制备而成，所述的活性成分包括前列欣水样、乙酯样、石油醚样和正丁醇样，所述前列欣水样的浓度为30～120μg/mL，优选浓度为120μg/mL，所述前列欣乙酯样的浓度为30～60μg/mL，优选浓度为30μg/mL，所述前列欣石油醚样浓度为7.5～30μg/mL，优选为30μg/mL，所述前列欣正丁醇样60～120μg/mL，优选浓度为120μg/mL。本发明的药物具有较强的抗血栓形成的生物活性，可以单独作为防治血栓性疾病的药物使用。

Description

前列欣在抗血栓药物中的应用
技术领域
本发明属于药物技术领域，特别涉及一种前列欣在抗血栓药物中的应用。
背景技术
前列欣胶囊是山东宏济堂制药集团股份有限公司的独家品种，具有独立的知识产权，是国家中药保护品种，拥有良好的临床应用基础和市场，尤其在省内得到患者的广泛认可。其处方是由国家级泌尿外科专家刘猷枋教授依据古方“前列腺汤”的基础上研制而出，用于治疗瘀血凝聚，湿热下注所致淋证，症见尿急、尿痛、排尿不畅、滴沥不净、慢性前列腺炎、前列腺增生见上述证候者，是由卫生部批准并保护的纯中药制剂，临床总有效率达93.8％。经多年临床验证，慢性前列腺炎患者在服用前列欣胶囊后，前列腺功能的指标精浆酸性磷酸酶、柠檬酸水平显著提高，精子活力提高，精液的液化时间缩短，说明前列欣胶囊在改善慢性前列腺炎症状的同时，可恢复前列腺的生理功能，改善精子的质量、减少其复发，而且服用方便、长期口服未见明显毒副作用。
然而，作为一代经典产品，因开发时科研技术条件有限，导致研究基础薄弱，相关药效学研究较少，目前对前列欣的研究主要集中在前列欣胶囊以及前列欣和其它药物联合在临床治疗前列腺疗效方面的研究，在专利CN201610873671.8一种基于多指标活性成分测定的前列欣胶囊质量评价方法中公开对前列欣胶囊的质量评价方法，但是在所有研究中对前列欣的作用机制并未阐明，且药效物质基础未见报道，这样直接影响该药生产过程中的质量可控、有效性、临床上的准确合理应用以及市场竞争力，因此，研究前列欣药理机制对前列欣胶囊的二次开发提供技术支撑。
血栓性疾病是一类严重危害人类健康和生命的疾病，包括了急性冠脉综合征、缺血性脑血管病、血栓闭塞性脉管炎、糖尿病的血栓形成、急性肿瘤引起血栓等。血栓性疾病严重威胁人类的生命健康，其发病率高居各种疾病之首，且近年来还有渐增之势，是当代医学研究的重点和热点之一。
通过检索国内外专利合文献，尚没有发现前列欣抗具有抗血栓等生物活性的研究文献报道。
发明内容
为了解决上述问题，本发明的目的在于通过对前列欣抗血栓生成活性进行研究，提供一种具有抑制血栓形成作用的药物组合物。
本发明的目的是这样实现的：
一种抗血栓的药物组合物，由活性成分和辅料制备而成，所述的活性成分包括前列欣石油醚样；所述前列欣石油醚样浓度为7.5～30μg/mL。
优选的，所述前列欣石油醚样浓度为30μg/mL。
优选的，如上所述抗血栓的药物组合物，其中所述的活性成分由前列欣石油醚样组成。
进一步优选地，如上所述抗血栓的药物组合物，其中所述的药物组合物为口服固体制剂，所述的口服固体制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂。
一种抗血栓的药物组合物，由活性成分和辅料制备而成，所述的活性成分包括前列欣水样；所述前列欣水样的浓度为30～120μg/mL。
优选的，所述前列欣水样的浓度为120μg/mL。
优选的，如上所述抗血栓的药物组合物，其中所述的活性成分由前列欣水样组成。
进一步优选地，如上所述抗血栓的药物组合物，其中所述的药物组合物为口服固体制剂，所述的口服固体制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂。
一种抗血栓的药物组合物，由活性成分和辅料制备而成，所述的活性成分包括前列欣乙酯样；所述前列欣乙酯样的浓度为30～60μg/mL。
优选的，所述前列欣乙酯样的浓度为30μg/mL。
优选的，如上所述抗血栓的药物组合物，其中所述的活性成分由前列欣乙酯样组成。
进一步优选地，如上所述抗血栓的药物组合物，其中所述的药物组合物为口服固体制剂，所述的口服固体制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂。
一种抗血栓的药物组合物，由活性成分和辅料制备而成，所述的活性成分包括前列欣正丁醇样；所述前列欣正丁醇样60～120μg/mL。
优选的，所述前列欣正丁醇样浓度为120μg/mL。
优选的，如上所述抗血栓的药物组合物，其中所述的活性成分由前列欣正丁醇样组成。
进一步优选地，如上所述抗血栓的药物组合物，其中所述的药物组合物为口服固体制剂，所述的口服固体制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂。
本发明还提供前列欣水样、乙酯样、石油醚样和正丁醇样在治疗和预防抗血栓的药物中的应用。
本发明利用斑马鱼模式生物探讨前列欣样品的抗血栓生成活性，考察前列欣水样、乙酯样、石油醚样、正丁醇样和混合样的抗血栓生成活性。结果发现，在30-120μg/mL范围内，前列欣水样，乙酯样，正丁醇样表现出有抑制血栓生成，促进血液流动的活性，但是它们产生该活性的浓度不同，正丁醇样在浓度为120μg/mL时才会产生一定的延长凝血时间的作用，而石油醚样在浓度达到7.5μg/mL时就会产生抑制血栓形成的作用，这预示着前列欣水样、乙酯样、石油醚样和正丁醇样均具有显著的抗血栓作用，且前列欣石油醚样的抗血栓活性显著性更高一些。
本发明的有益效果
(1)由于前列欣副作用较小，其前列欣水样、乙酯样、石油醚样和正丁醇样的副作用也较小，因此，具有安全可靠的优点。
(2)通过研究发现，前列欣水样、乙酯样、石油醚样和正丁醇样具有较强的抗血栓形成的生物活性，为治疗血栓性疾病提供了新的候选药物，可以单独作为防治血栓性疾病的药物使用，具有非常重要的临床意义。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明特征及其它相关特征作进一步详细说明，以便于同行业技术人员的理解：
材料与仪器
1.材料
AB系野生型斑马鱼为山东省科学院生物研究所药物筛选重点实验室提供；
无水三氯化铁购自国药集团化学试剂有限公司，批号：20090305；
前列欣样品测试样品由山东省分析测试中心提供，包括前列欣水样、前列欣石油醚样、前列欣乙酯样、前列欣正丁醇样和前列欣总样，测试样的制备方法为：市面上所售的前列欣胶囊用乙醇超声提取三次，每次30分钟，提取液过滤、合并，然后减压浓缩得到前列欣总样，总样用适量蒸馏水超声混悬 后分别用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取三次，萃取液合并后减压浓缩，分别得到前列欣水样、前列欣石油醚样、前列欣乙酯样和前列欣正丁醇样。
2.仪器
SZX16型荧光显微镜及DP2-BSW图像采集系统(日本Olympus公司)；
XSJ-D型倒置显微镜(重庆光电仪器公司产品)；
Forma 3111型水套式CO2培养箱(美国Forma公司)；
斑马鱼养殖饲养设备(北京爱生科技公司)。
3.试剂
斑马鱼胚胎培养用水包含5.0mM NaCl，0.17mM KCl，0.4mM CaCl2，0.16mM MgSO4。
实施例1斑马鱼胚胎获取
将♀♂斑马鱼分开喂养，照明14h/黑暗10h交替进行，定时喂以人工颗粒状饵料和刚孵出的卤虫无节幼体(Artemianauplii)。采卵时取健康性成熟的斑马鱼按♀♂1:1的比例放入交配缸内，次日9-10时获得受精卵。对受精卵进行消毒和洗涤后移入斑马鱼胚胎培养用水中，28℃下控光培养。
实施例2前列欣对斑马鱼血栓生成的影响
在受精卵发育72h时，于解剖显微镜下挑选发育正常的斑马鱼幼鱼，移入24孔培养板中，每孔10枚，对照组加入0.1％二甲基亚砜(DMSO)溶剂，其他实验组分别加入10μL不同浓度的测试样品溶液，加培养水至2.0mL，然后加盖，置于光照培养箱(28℃)让胚胎继续发育。在96hpf时，三氯化铁用纯净水配成1mg/mL的母液溶液，吸取400μL分别加入到2mL 对照组和加样组的培养液孔中，荧光显微镜观察并记录斑马鱼腹部血管血流停止的时间。
1、实验结果：
前列欣的斑马鱼抗血栓生成活性
表1前列欣样品对斑马鱼凝血时间的影响
Figure RE-GDA0001682368420000041
Figure RE-GDA0001682368420000051
与模型对照组比较，*代表＜0.05，**代表＜0.01，***代表P<0.001；
2、结论
本研究发现，在30-120μg/mL范围内，前列欣水样，乙酯样，正丁醇样表现出有抑制血栓生成，促进血液流动的活性，但是它们产生该活性的浓度不同，正丁醇样在浓度为120μg/mL 时才会产生一定的延长凝血时间的作用，而石油醚样在浓度达到7.5μg/mL时就会产生抑制血栓形成的作用，说明前列欣石油醚样的抗血栓活性更显著些。
最后应该说明的是，以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种抗血栓的药物组合物，由活性成分和辅料制备而成，其特征在于，所述的活性成分为前列欣石油醚提取物；所述前列欣石油醚提取物浓度为7.5～30μg/mL；
制备方法为：市面上所售的前列欣胶囊用乙醇超声提取三次，每次30分钟，提取液过滤、合并，然后减压浓缩得到前列欣总提取物，总提取物用适量蒸馏水超声混悬后用等体积的石油醚萃取三次，萃取液合并后减压浓缩，得到前列欣石油醚提取物。
2.如权利要求1所述抗血栓的药物组合物，其特征在于，前列欣石油醚提取物浓度为30μg/mL。
3.一种抗血栓的药物组合物，由活性成分和辅料制备而成，其特征在于，所述的活性成分为前列欣水提取物；所述前列欣水提取物的浓度为30～120μg/mL；
制备方法为：市面上所售的前列欣胶囊用乙醇超声提取三次，每次30分钟，提取液过滤、合并，然后减压浓缩得到前列欣总提取物，总提取物用适量蒸馏水超声混悬后分别用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取三次，萃取液合并后减压浓缩，得到前列欣水提取物。
4.如权利要求3所述抗血栓的药物组合物，其特征在于，前列欣水提取物浓度为120μg/mL。
5.一种抗血栓的药物组合物，由活性成分和辅料制备而成，其特征在于，所述的活性成分为前列欣正丁醇提取物；所述前列欣正丁醇提取物的浓度为60～120μg/mL；
制备方法为：市面上所售的前列欣胶囊用乙醇超声提取三次，每次30分钟，提取液过滤、合并，然后减压浓缩得到前列欣总提取物，总提取物用适量蒸馏水超声混悬后用等体积的正丁醇萃取三次，萃取液合并后减压浓缩，得到前列欣正丁醇提取物。
6.如权利要求5所述抗血栓的药物组合物，其特征在于，前列欣正丁醇提取物浓度为120μg/mL。
7.一种抗血栓的药物组合物，由活性成分和辅料制备而成，其特征在于，所述的活性成分为前列欣乙酸乙酯提取物；所述前列欣乙酸乙酯提取物的浓度为30～60μg/mL；
制备方法为：市面上所售的前列欣胶囊用乙醇超声提取三次，每次30分钟，提取液过滤、合并，然后减压浓缩得到前列欣总提取物，总提取物用适量蒸馏水超声混悬后用等体积的乙酸乙酯萃取三次，萃取液合并后减压浓缩，得到前列欣乙酸乙酯提取物。
8.如权利要求7所述抗血栓的药物组合物，其特征在于，前列欣乙酸乙酯提取物浓度为30μg/mL。
9.如权利要求1～8任一项所述抗血栓的药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物为口服固体制剂，所述的口服固体制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂。
10.前列欣水提取物、前列欣 乙酸乙酯提取物、前列欣 石油醚提取物和前列欣 正丁醇提取物在制备治疗和预防抗血栓的药物中的应用。
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