CN108299179A - 二氢查儿酮衍生物及制备方法、抑制肿瘤细胞增殖组合物 - Google Patents

Abstract

本发明属于类黄酮化合物技术领域，公开了一种二氢查儿酮衍生物及制备方法、抑制肿瘤细胞增殖组合物，将天然二氢查儿酮溶于酸或碱的溶液，获得用于制备二氢查儿酮类化合物的反应体系；加热反应体系至25℃～110℃，在1至100个大气压下，持续足以获得目标二氢查儿酮化合物的时间，并且从反应体系中回收目标二氢查儿酮化合物。本发明对于天然二氢查儿酮类化合物的衍生物进行改进，以获得用作预防和治疗糖尿病、高血糖，清除自由基、抗氧化，抑制肿瘤细胞增殖或治疗和预防癌症的化合物。

Description

二氢查儿酮衍生物及制备方法、抑制肿瘤细胞增殖组合物

技术领域

本发明属于类黄酮化合物技术领域，尤其涉及一种二氢查儿酮衍生物及制备方法、抑制肿瘤细胞增殖组合物。

背景技术

二氢查儿酮是一类具有C6-C3-C6基本结构(1,3-diphenylpropan-1-one)的类黄酮化合物，通常二氢查儿酮类化合物以多种衍生物的形式存在。二氢查儿酮类化合物的衍生物广泛分布于蔷薇科、芸香科、石柯属等植物中。其中根皮苷作为天然二氢查儿酮的衍生物已经被证明具有抑制钠葡萄糖协同转运因子(sodium/glucose cotransporter SGLT)的作用；作为根皮苷的同分异构体的三叶苷，具有远高于蔗糖的甜味；上述的二氢查儿酮类化合物的衍生物的生物学活性表明这类化合物在人类治疗和预防糖尿病和高血糖等方面具有良好的价值。现代科学研究还表明二氢查儿酮类化合物具有清除自由基、抗氧化和抑制肿瘤细胞增殖的作用。然而仅依靠从天然产物中提取分离天然的二氢查儿酮类化合物及其衍生物，很大程度上限制了这类化合物的开发和利用。因此可以期望通对于天然二氢查儿酮类化合物的衍生物进行改进，以获得用作预防和治疗糖尿病、高血糖，清除自由基、抗氧化，抑制肿瘤细胞增殖或治疗和预防癌症的化合物。

发明内容

根据下面详细的说明、附图和权利要求，本发明的其他目标、特征和优势是明显的。除非另外定义，否则本文使用的所有技术术语、缩写和科学术语、缩写具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解相同的含义。虽然类似于或等同于本文描述的二氢查儿酮类化合物的制备方法可以用于本发明的实践，但是描述了合适的二氢查儿酮类化合物和制备方法，且不期望任何本发明中所述的化合物和方法限制本发明。

本发明提供了一种二氢查儿酮衍生物及制备方法、本发明对于天然二氢查儿酮类化合物的衍生物进行改进，以获得用作预防和治疗糖尿病、高血糖的组合物，用于清除自由基、抗氧化的组合物，抑制肿瘤细胞增殖或治疗和预防癌症的组合物。

本发明是这样实现的，一种二氢查儿酮衍生物，所述二氢查儿酮衍生物结构为：

其中R1、R2、R3是相同的或不同的，且各自彼此独立地是氢，羟基，烷氧基，烯氧基，烯基，炔基，直链的、支链的或环状的烷基、烯基、炔基，取代或未取代的芳基、杂芳基或酰基；

其中R4、R5、R6、R7、R8是相同的或不同的，且各自彼此独立地是氢，羟基，烷氧基，烯氧基，烯基，炔基，直链的、支链的或环状的烷基、烯基，炔基，取代或未取代的芳基、杂芳基，酰基或以碳糖苷键连接的单糖、包含两种或寡糖的糖配基。

进一步，所述单糖配基至少包括下列糖苷的D构型和L构型呋喃式、吡喃式的异构体，且每种异构体均包括α和β两种构象：阿拉伯糖苷、木糖苷、葡萄糖苷、半乳糖苷和鼠李糖苷；

所述二糖和或寡糖的糖配基至少包括下列糖苷的D构型和L构型呋喃式、吡喃式的异构体，且每种异构体均包括α和β两种构象：阿拉伯糖苷、木糖苷、葡萄糖苷、半乳糖苷和鼠李糖苷。

本发明的另一目的在于提供一种所述二氢查儿酮衍生物的制备方法，所述二氢查儿酮衍生物的制备方法包括以下步骤：

将天然二氢查儿酮溶于酸或碱的溶液，获得用于制备二氢查儿酮类化合物的反应体系；加热反应体系至25℃～110℃，在1至100个大气压下，持续足以获得目标二氢查儿酮化合物的时间，并且从反应体系中回收目标二氢查儿酮化合物。

进一步，构成反应体系的液体包括，但不限于水，石油醚、苯、甲苯、氯仿、四氯化碳、丙酮、乙醚、乙酸乙酯、吡啶、正庚烷、正己烷、正戊烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、乙醚、苯、甲基叔丁基醚、正辛醇、异戊醇、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、异丁醇、正丁醇、正丙醇、四氢呋喃、乙酸乙酯、异丙醇、氯仿、二氧六环、丙酮、甲乙酮、乙醇、乙酸、乙腈、甲酸、二甲基甲酰胺、N,N-二甲基甲酰胺，二甲基亚砜、甲醇，或上述液体以任意种类任意比例的混合。

进一步，所述酸为盐酸、硫酸、磷酸、亚磷酸、多磷酸、硝酸、碳酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、氢氟酸、甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸，或上述酸以任意种类任意比例的组合；

所述碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸镁、碳酸钙、氨水、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸钾、磷酸氢二钾，或上述碱以任意种类任意比例的组合。

进一步，获得目标二氢查儿酮化合物的时间在0.01小时至72小时；

分离二氢查儿酮类化合物的包括以下一种或多种方法任意组合：离心分离、过滤分离、喷雾干燥、真空干燥、加热烘干、冷冻干燥，自然干燥，萃取、自然沉淀。

进一步，纯化二氢查儿酮类化合物的方法包括以下一种或多种方法任意组合：大孔树脂柱层析、聚酰胺柱层析、凝胶柱层析、高速逆流色谱法、正相色谱法、反相色谱法和制备液相色谱法，高效液相色谱法，超临界流体色谱法。

本发明的另一目的在于提供一种由所述二氢查儿酮衍生物制备降血糖、治疗和预防糖尿病的组合物。

本发明的另一目的在于提供一种由所述二氢查儿酮衍生物制备抗氧化、清除自由基的组合物。

本发明的另一目的在于提供一种由所述二氢查儿酮衍生物制备抗肿瘤、抗癌、预防癌细胞生长、扩散和转移的组合物。

本发明的二氢查儿酮的衍生物具有抑制钠葡萄糖协同转运因子-2(sodium/glucose cotransporter SGLT-2)的作用；二氢查儿酮类化合物具有清除自由基、抗氧化和抑制肿瘤细胞增殖的作用。本发明对于天然二氢查儿酮类化合物的衍生物进行改进，以获得用作预防和治疗糖尿病、高血糖，清除自由基、抗氧化，抑制肿瘤细胞增殖或治疗和预防癌症的化合物。

附图说明

图1是本发明实施例提供的二氢查儿酮衍生物及制备方法、抑制肿瘤细胞增殖组合物

图2是本发明实施例提供的实施例1的HPLC检测结果示意图。

图3是本发明实施例提供的实施例2的HPLC检测结果示意图。

图4是本发明实施例提供的实施例4的结果示意图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。

本发明实施例提供的二氢查儿酮衍生物具有如下结构：

其中R₁、R₂、R₃是相同的或不同的，且各自彼此独立地是氢，羟基，烷氧基，烯氧基，烯基，炔基，直链的、支链的或环状的烷基、烯基、炔基，取代或未取代的芳基、杂芳基或酰基。

其中R₄、R₅、R₆、R₇、R₈是相同的或不同的，且各自彼此独立地是氢，羟基，烷氧基，烯氧基，烯基，炔基，直链的、支链的或环状的烷基、烯基，炔基，取代或未取代的芳基、杂芳基，酰基或以碳糖苷键连接的单糖、包含两种或三种糖的糖配基。

单糖配基至少包括下列糖苷的D构型和L构型呋喃式、吡喃式的异构体，且每种异构体均包括α和β两种构象：阿拉伯糖苷(arabinoside)、木糖苷(xyloside)、葡萄糖苷(glucoside)、半乳糖苷(galactoside)和鼠李糖苷(rhamnoside)。

二糖和或寡糖的糖配基至少包括下列糖苷的D构型和L构型呋喃式、吡喃式的异构体，且每种异构体均包括α和β两种构象：阿拉伯糖苷(arabinoside)、木糖苷(xyloside)、葡萄糖苷(glucoside)、半乳糖苷(galactoside)和鼠李糖苷(rhamnoside)。

如图1所示，本发明实施例提供的二氢查儿酮衍生物的制备方法包括以下步骤：

S101：将天然二氢查儿酮溶于酸或碱的溶液，获得用于制备二氢查儿酮类化合物的反应体系；

S102：加热该反应体系至25℃～110℃，在1至100个大气压下，持续足以获得目标二氢查儿酮化合物的时间，并且从反应体系中回收目标二氢查儿酮化合物。

构成反应体系的液体包括，但不限于水，石油醚、苯、甲苯、氯仿、四氯化碳、丙酮、乙醚、乙酸乙酯、吡啶、正庚烷、正己烷、正戊烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、乙醚、苯、甲基叔丁基醚、正辛醇、异戊醇、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、异丁醇、正丁醇、正丙醇、四氢呋喃、乙酸乙酯、异丙醇、氯仿、二氧六环、丙酮、甲乙酮、乙醇、乙酸、乙腈、甲酸、二甲基甲酰胺、N,N-二甲基甲酰胺，二甲基亚砜、甲醇，或上述液体以任意种类任意比例的混合。

酸包括，但不限于，盐酸、硫酸、磷酸、亚磷酸、多磷酸、硝酸、碳酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、氢氟酸、甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸，或上述酸以任意种类任意比例的组合。

碱包括，但不限于，氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸镁、碳酸钙、氨水、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸钾、磷酸氢二钾，或上述碱以任意种类任意比例的组合。

获得目标二氢查儿酮化合物的时间在0.01小时至72小时的范围内。

回收二氢查儿酮的步骤包括从反应体系中分离二氢查儿酮类化合物。

分离二氢查儿酮类化合物的包括以下一种或多种方法任意组合：离心分离、过滤分离、喷雾干燥、真空干燥、加热烘干、冷冻干燥，自然干燥，萃取、自然沉淀。

纯化二氢查儿酮类化合物的方法包括以下一种或多种方法任意组合：大孔树脂柱层析、聚酰胺柱层析、凝胶柱层析、高速逆流色谱(High-speed CountercurrentChromatography)法、正相色谱法、反相色谱法和制备液相色谱法，高效液相色谱法，超临界流体色谱法。

二氢查儿酮类化合物可以独立地使用，或与合适的载体或填充剂结合使用。本发明中所述载体或填充剂的例子包括但不限于，溶剂、抗黏剂、粘结剂、涂层剂、分解剂、填充剂、稀释剂、软化剂、乳化剂、调味剂、着色剂、佐剂、润滑剂、功能剂(例如，营养剂)、粘度调节剂、膨松剂、表面活性剂、渗透剂、稀释剂，或任何其他的活性成分，或他们的组合。对于组合物而言，除非另外说明，否则％是按重量计。

二氢查儿酮类化合物可以用于制备降血糖、治疗和预防糖尿病的组合物。

二氢查儿酮类化合物可用于制备抗氧化、清除自由基的组合物。

二氢查儿酮类化合物可用于制备抗肿瘤、抗癌、预防癌细胞生长、扩散和转移的组合物。

下面结合具体实施例对本发明的应用原理作进一步的描述。

实施例1

本发明实施例通过将从苹果属植物中提取的二氢查儿酮类化合物的衍生物(二氢查儿酮类化合物的含量不小于总量的95％)置于2mol/L的盐酸中的水溶液中，缓慢的加热反应体系直至固体全部溶解，此时体系温度在95±5℃，反应24小时。将体系逐步冷却至大量固体析出，分离上清和沉淀，用甲醇溶解使其澄清。

反应产物用凝胶柱层析进一步分离，使用醇的水溶液洗脱，小心的调整醇的水溶液的比例，以获得最佳分离效果，收集含有的二氢查儿酮类化合物的组分，并从中获得二氢查儿酮类化合物。

制备得到的二氢查儿酮类化合物使用HPLC和NMR鉴定，最终确定所得化合物含有三羟基根皮素(CAS:57765-66-9)，通过核磁共振和质谱确定结构如下：

该化合物的¹H NMR和¹³C NMR数据如下表(500MHz DMSO-d6)：

上述实施例的中对于三羟基根皮素糖苷化衍生物的高效液相检测条件如下：使用Inertsil ODS-3色谱柱(5.0ml柱体积，4.6mm×250mm)，Inertsil ODS-3保护柱(5.0μm，4.0mm×10mm)，使用岛津公司(shimadzu)SPD-M20A二极管阵列DAD检测器，用于分析的具体条件在下表中:

HPLC检测结果如图2所示，结果表明提取物中三羟基根皮素的含量达到99.9％。

实施例2

将含有二氢查儿酮类化合物的粗提物溶于1mol/L的氢氧化钠溶液中，隔绝空气加热至100±5℃，不断搅拌维持8h，待反应体系冷却后用盐酸中和氢氧化钠并调节pH值至2。冷冻干燥混合体系，用纯净的水清洗干燥后的粉末，反复结晶，得到黄色固体粉末。

将黄色固体粉末用HPLC检测，高效液相检测条件如下：使用Inertsil ODS-3色谱柱(5.0ml柱体积，4.6mm×250mm)，Inertsil ODS-3保护柱(5.0μm，4.0mm×10mm)，使用岛津公司(shimadzu)SPD-M20A二极管阵列DAD检测器，用于分析的具体条件在下表中:

HPLC检测结果如图3所示，最终确定所得化合物是三羟基根皮素的组合物，与标准品比对确认其中还含有根皮素、根皮苷、三叶苷、三羟基三叶苷和’根皮素木糖葡萄糖苷等化合物，其中三羟基根皮苷的含量不低于20％。

上述实施例中萃取可以使用本领域普通技术人员已知的任何合适的溶剂，例如水、各种沸程的石油醚、乙酸乙酯、乙醇、氯仿、丙酮等。

上述实施例中所述的醇的水溶液应当为甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、乙二醇、丙三醇中的一种或几种与水以任意比例混合。

上述实施例中回收三羟基根皮素糖苷化衍生物的方法包括但不限于各种浓缩的方法、离心的方法、过滤的方法、结晶的方法和干燥的方法。例如浓缩可以采用旋转蒸发浓缩、加热浓缩、真空浓缩等方法；离心可以采用水平离心和角转子离心等方法；过滤可以采用真空抽滤或压滤等方法，结晶可以适当加入晶种，干燥可以使用加热干燥、真空干燥、真空冷冻干燥、喷雾干燥等方法。

上述实施例中所述的提取完毕后的分离步骤，所使用的方法包括但不限于离心分离、过滤分离、自然沉降等方法。

实施例3

将稳定表达人SGLT-2蛋白的人胚肾细胞细胞(HEK293T)置于含有50μM放射性甲基-D-吡喃葡糖苷(α-MDG)的PBS培养基中，添加不同浓度的二氢查儿酮类化合物的组合物，其中三羟基根皮素的含量不低于30％，在37℃下孵育40min。移除上清后，用含有1％TritonX-100的PBS清洗细胞，用闪烁计数器测试细胞的放射性强度，以反映添加的含有二氢查儿酮类化合物的组合物对于细胞糖转运的抑制作用。

结果表明含有二氢查儿酮类化合物的组合物可以抑制SGLT-2蛋白对于糖的转运，具有降血糖、治疗和预防糖尿病的作用。

实施例4

用含有二氢查儿酮衍生物的组合物，清除DPPH和ABTS自由基，组合物中三羟基根皮素的含量不低于98％。其清除自由基的能力用维生素E比对，对DPPH自由基的清除在脂溶性体系中，对ABTS自由基的清除在水溶性体系中。结果如图4所示。

结果表明，本发明中的二氢查儿酮类化合物对于自由基的清除能力在脂溶性和水溶性体系下分别是维生素E的1.59和1.78倍，具有良好的清除自由基的能力。

实施例5

在含有不同浓度的二氢查儿酮衍生物组合物的培养基中分别培养MG-63，Hela，Hep G2，SK-OV-3和MDA-MB-231肿瘤细胞，使用MTT法测定肿瘤细胞的存活率，与不含有二氢查儿酮衍生物的培养基中的肿瘤细胞比较。分别得到二氢查儿酮衍生物组合物对五种肿瘤细胞生长的半抑制浓度(IC₅₀)，如下表所示。

组合物中二氢查儿酮衍生物组合物中三羟基根皮素的含量不少于80％。表明二氢查儿酮衍生物具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。

在具体的实施方式中，本发明实施例提供了制备二氢查儿酮类化合物的方法。

用于制备二氢查儿酮类化合物的方法一般包括：制备含有二氢查儿酮类化合物的衍生物的无机酸或碱的粗制的或基本上纯的二氢查儿酮类化合物的衍生物的溶液、乳浊液、悬浊液或胶体或具有明显分界面的两相或两相以上的体系，作为反应体系，加热或加压(或其组合)该反应体系到足以使二氢查儿酮类化合物的衍生物反应的温度和压力，持续足以获得二氢查儿酮类化合物的时间，并从反应体系中回收二氢查儿酮类化合物。在一种实施方式中，足以使二氢查儿酮类化合物的衍生物反应的温度范围从25℃至约110℃，更具体地从约40℃至约105℃，其又更具体地从约75℃至约100℃。本领域普通技术人员已知的任何合适的加热方法可以用于加热该反应体系，其非限制性的实施例包括使用电磁波或升高的环境温度。在一种实施方式中，足以使二氢查儿酮类化合物的衍生物反应的时间的范围从约0.01小时至72小时。

适用于本发明的实施方式的酸非限制性实例包括：盐酸、硫酸、磷酸、亚磷酸、多磷酸、硝酸、碳酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、氢氟酸、甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸，或上述酸以任意种类任意比例的组合。适用于本发明的实施方式的碱非限制性实例包括：氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸镁、碳酸钙、氨水、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸钾、磷酸氢二钾，或上述碱以任意种类任意比例的组合。不期望受任何理论的限制，认为使用酸或碱将引起可预见或不可预见的不生成二氢查儿酮类化合物的反应的发生，以及使用碱引起的反应体系中的任何化合物所具有的可电离的氢被其他原子或基团置换，其需要加入酸以重新恢复这些活泼氢。

如本发明所用，制备得到的二氢查儿酮类化合物存在于反应体系中，此时反应体系的状态可以是溶液、乳浊液、悬浊液、胶体或具有明显分界面的两相或两相以上的体系。在具体的实施方式中，回收二氢查儿酮类化合物的步骤包括对于具有明显相界面、不明显相界面或均一的单相体系中的二氢查儿酮类化合物的分离。使用任何合适的分离技术可回收二氢查儿酮类化合物，例如可以干燥反应体系中的液态组分以获得二氢查儿酮类化合物；使用其他任何可用的溶剂从反应体系中回收二氢查儿酮类化合物；利用重力场或离心作用使两相或多相彼此分离从中回收含有二氢查儿酮类化合物的一相、两相或多相；使用依靠重力场、离心作用、任何形式的压力、真空过滤的方法并从反应体系中回收含有二氢查儿酮类化合物的一相、两相或多相。特别地，本领域普通技术人员已知的任何合适的干燥方法可用于干燥该反应体系，其非限制性的包括利用电磁波或升高环境温度加热反应体系而使体系中的液态部分干燥的方法，增加反应体系表面积使体系中液态部分干燥的方法，改变反应体系形态或使反应体系相对于周围环境产生速度的方法；本领域普通技术人员已知的任何合适的萃取方法可用于从反应体系中获得二氢查儿酮类化合物，其非限制性的包括利用液态或超流态物质(或其组合)从反应体系中回收二氢查儿酮类化合物；本领域普通技术人员已知的任何合适的利用重力或离心作用的方法可用于从反应体系中回收二氢查儿酮类化合物，其非限制性的实例包括垂直和水平的多孔篮式离心、固体沉降式离心、沉降式离心、卧式刮刀卸料离心、卧式活塞推料离心、Heinkel式离心、盘式层叠离心、气旋式分离；此外，本领域普通技术人员已知的任何合适的依靠重力场、离心作用、任何形式的压力、真空的过滤的方法可从反应体系中回收含有二氢查儿酮类化合物，所述方法包括但不限于：使用带式、鼓式、布氏漏斗、nutsche型、叶式、板式、Rosenmund型、火花型和袋式的过滤器和压滤机以及依靠重力自然过滤的办法。

回收的二氢查儿酮类化合物任选地可以用含水或者不含水的有机溶剂澄清，而回收的二氢查儿酮类化合物任选地可以被溶解在含水或者不含水的有机溶剂中。其中所述有机溶剂包括但是不限于石油醚、苯、甲苯、氯仿、四氯化碳、丙酮、乙醚、乙酸乙酯、吡啶、正庚烷、正己烷、正戊烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、乙醚、苯、甲基叔丁基醚、正辛醇、异戊醇、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、异丁醇、正丁醇、正丙醇、四氢呋喃、乙酸乙酯、异丙醇、氯仿、二氧六环、丙酮、甲乙酮、乙醇、乙酸、乙腈、甲酸、二甲基甲酰胺、N,N-二甲基甲酰胺，二甲基亚砜、甲醇，或上述液体以任意种类任意比例的混合。

本领域普通技术人员应当理解，二氢查儿酮类化合物在其制备之后通常不是以纯的形式存在。因此，在具体的实施方式中，二氢查儿酮类化合物可以包括二氢查儿酮类化合物的衍生物的重量计从约0.5％至约99.99％的量或期间的任何量(即约0.5％至约90％、即约0.5％至约80％、即约0.5％至约70％、即约0.5％至约60％、即约0.5％至约50％、即约0.5％至约40％、即约0.5％至约30％、即约0.5％至约20％、即约0.5％至约10％、即约0.5％至约1％等等)。

在其他具体的实施方式中，制备二氢查儿酮类化合物的方法进一步包括纯化二氢查儿酮类化合物。例如二氢查儿酮类化合物可以使用色谱的方法从反应体系中纯化。用于纯化二氢查儿酮类化合物的色谱的方法包括开放和封端的柱色谱的方法、薄层的色谱方法、纸色谱的方法、高速连续逆流分配的方法、连续逆流分配的方法、高效液相色谱法、超高效液相色谱法或超临界流体色谱法，特别地，还可以使用结晶和重结晶的方法进一步纯化二氢查儿酮类化合物。

本领域普通技术人员应当理解，在制备、回收和纯化二氢查儿酮类化合物的过程中会涉及一个或多个需要将含有二氢查儿酮类化合物的溶液、乳浊液、悬浊液、胶体或具有明显分界面的两相或两相以上的体系浓缩的过程。其中浓缩的方法可以使用本领域普通技术人员已知的任何合适的浓缩的方法，包括但不限于对于上述体系的加热、减压、透析、或改变该体系的形态和表面积或使含有二氢查儿酮类化合物的体系相对于该体系所存在的环境产生速度的方法，或上述的方法的任意组合。

特别的，制备得到的二氢查儿酮类化合物可以任何需要的形式存在，例如固体、液体、或者以一定的浓度溶解于适合溶剂的溶液或与其他固体或液体构成的组合物。

二氢查儿酮类化合物可以用于制备降血糖、治疗和预防糖尿病的组合物。例如在一些实施方案中，二氢查儿酮类化合物能减少SGLT-2蛋白对于糖的转运。所述组合物中二氢查儿酮类化合物的含量在0.00001％～100％之间。

二氢查儿酮类化合物可用于制备抗氧化、清除自由基的组合物。例如在一些实施方案中，二氢查儿酮类化合物可以清除ABTS自由基、DPPH自由基和活性氧。所述组合物中二氢查儿酮类化合物的含量在0.0000001％～100％之间。

二氢查儿酮类化合物可用于制备抗肿瘤、抗癌、预防癌细胞生长、扩散和转移的组合物。例如在一些实施方案中二氢查儿酮类化合物可以抑制肿瘤细胞的生长和增殖，或导致肿瘤细胞的凋亡。所述组合物中二氢查儿酮类化合物的含量在0.000001％～100％之间。

本领域普通技术人员应当理解，上述的糖配基与二氢查儿酮衍生物形成的糖苷键 均包括α构象和β构象两种情况，且糖配基均包含D构型和L构型两种情况，除非另外标明，否 则本发明所述的三羟基根皮素糖苷化衍生物均应包含所有合适的构型和构象。

具体地，本发明所述的二氢查儿酮类化合物，是从其他化合物制备得到的。其中应含有二氢查儿酮类化合物，并且其中可能含有其他多酚类化合物，包含但不限于一种或多种成分，例如根皮苷、三叶苷、儿茶素、绿原酸、花色苷、芦丁及各种槲皮素的糖苷化衍生物和山萘酚的糖苷化衍生物以及制备这种二氢查儿酮类化合物过程中生成的其他化合物。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种二氢查儿酮衍生物，其特征在于，所述二氢查儿酮衍生物结构为：

其中R1、R2、R3是相同的或不同的，且各自彼此独立地是氢，羟基，烷氧基，烯氧基，烯基，炔基，直链的、支链的或环状的烷基、烯基、炔基，取代或未取代的芳基、杂芳基或酰基；

其中R4、R5、R6、R7、R8是相同的或不同的，且各自彼此独立地是氢，羟基，烷氧基，烯氧基，烯基，炔基，直链的、支链的或环状的烷基、烯基，炔基，取代或未取代的芳基、杂芳基，酰基或以碳糖苷键连接的单糖、包含两种或寡糖的糖配基。

2.如权利要求1所述的二氢查儿酮衍生物，其特征在于，所述单糖配基至少包括下列糖苷的D构型和L构型呋喃式、吡喃式的异构体，且每种异构体均包括α和β两种构象：阿拉伯糖苷、木糖苷、葡萄糖苷、半乳糖苷和鼠李糖苷；

所述二糖和或寡糖的糖配基至少包括下列糖苷的D构型和L构型呋喃式、吡喃式的异构体，且每种异构体均包括α和β两种构象：阿拉伯糖苷、木糖苷、葡萄糖苷、半乳糖苷和鼠李糖苷。

3.一种如权利要求1所述二氢查儿酮衍生物的制备方法，其特征在于，所述二氢查儿酮衍生物的制备方法包括以下步骤：

将天然二氢查儿酮溶于酸或碱的溶液，获得用于制备二氢查儿酮类化合物的反应体系；加热反应体系至25℃～110℃，在1至100个大气压下，持续足以获得目标二氢查儿酮化合物的时间，并且从反应体系中回收目标二氢查儿酮化合物。

4.如权利要求3所述的二氢查儿酮衍生物的制备方法，其特征在于，构成反应体系的液体包括，但不限于水，石油醚、苯、甲苯、氯仿、四氯化碳、丙酮、乙醚、乙酸乙酯、吡啶、正庚烷、正己烷、正戊烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、乙醚、苯、甲基叔丁基醚、正辛醇、异戊醇、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、异丁醇、正丁醇、正丙醇、四氢呋喃、乙酸乙酯、异丙醇、氯仿、二氧六环、丙酮、甲乙酮、乙醇、乙酸、乙腈、甲酸、二甲基甲酰胺、N,N-二甲基甲酰胺，二甲基亚砜、甲醇，或上述液体以任意种类任意比例的混合。

5.如权利要求3所述的二氢查儿酮衍生物的制备方法，其特征在于，所述酸为盐酸、硫酸、磷酸、亚磷酸、多磷酸、硝酸、碳酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、氢氟酸、甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸，或上述酸以任意种类任意比例的组合；

所述碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸镁、碳酸钙、氨水、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸钾、磷酸氢二钾，或上述碱以任意种类任意比例的组合。

6.如权利要求3所述的二氢查儿酮衍生物的制备方法，其特征在于，获得目标二氢查儿酮化合物的时间在0.01小时至72小时；

分离二氢查儿酮类化合物的包括以下一种或多种方法任意组合：离心分离、过滤分离、喷雾干燥、真空干燥、加热烘干、冷冻干燥，自然干燥，萃取、自然沉淀。

7.如权利要求3所述的二氢查儿酮衍生物的制备方法，其特征在于，纯化二氢查儿酮类化合物的方法包括以下一种或多种方法任意组合：大孔树脂柱层析、聚酰胺柱层析、凝胶柱层析、高速逆流色谱法、正相色谱法、反相色谱法和制备液相色谱法，高效液相色谱法，超临界流体色谱法。

8.一种由权利要求1～2任意一项所述二氢查儿酮衍生物制备降血糖、治疗和预防糖尿病的组合物。

9.一种由权利要求1～2任意一项所述二氢查儿酮衍生物制备抗氧化、清除自由基的组合物。

10.一种由权利要求1～2任意一项所述二氢查儿酮衍生物制备抗肿瘤、抗癌、预防癌细胞生长、扩散和转移的组合物。