CN108250226B - 一种新型荧光染料及其制备方法与应用 - Google Patents

一种新型荧光染料及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种新型荧光染料及其制备方法和应用，所述荧光染料它具有如下式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示的结构式，式(Ⅰ)所示的结构示如下：等；式(Ⅱ)所示的结构式如下：等；本发明的荧光染料具有所用原料易得，合成方法简单，反应条件容易控制等优点，并且产物分子不仅在溶液中具有很高的量子产率，固体状态发光在近红外区也有较高的量子产率。

Description

一种新型荧光染料及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于燃料技术材料领域，尤其是涉及一种新型荧光染料及其制备方法与应用。
背景技术
Bodipy(氟硼荧染料，或者是氟硼二吡咯)是近二十几年才发展起来的一类光物理化学性能优异的荧光染料分子，具有窄的吸收峰和发射峰、较高的摩尔吸光系数、较高的荧光量子产率、较好的光稳定性以及化学稳定性。但是传统的BODIPY荧光染料在应用上有一定的缺陷，比如它们的斯托克斯(Stokes)位移比较小，易荧光淬灭等，且现有的Bodipy荧光染料，其成像效果还不太明显，且毒性偏高。
发明内容
本发明要解决的第一个技术问题是提供一种新型荧光染料；该荧光染料以bodipy为基础进行结构修饰，在第一步的二羰基系列化合物取代bodipy氯位之后，第二步的成环反应使新生成的系列化合物发光进一步红移，从而成为良好的近红外荧光染料；本发明得到的一系列近红外荧光染料，不仅在乙腈、甲醇等有机溶剂中具有较高的量子产率，而且在固体状态下，发光位置进一步红移，化合物1、化合物2、化合物3可达到630nm左右，量子产率分别为13.31％、11.61％、10.54％；而化合物1a、化合物2a、化合物3a可达到730nm左右，尤其是化合物1a，拥有22.38％的固体量子产率且最大发光位置在733nm；这些性质都使得该化合物尤为适合生物成像；而细胞成像及小鼠成像也进一步证实，该系列化合物的生物成像效果明显且毒性低。
本发明要解决的第二个技术问题是提供上述新型荧光染料的制备方法。
本发明要解决的第三个技术问题是提供上述新型荧光染料的应用。
为解决上述第一个技术问题，发明采用如下的技术方案：
一种新型的的荧光染料，它具有如下式(Ⅰ)或(Ⅱ)所示的结构式，其中，式(Ⅰ)所示的结构示如下：
式(Ⅱ)所示的结构式如下：
为解决上述第二个技术问题，本发明上述一种新型荧光染料的制备方法，包括以下步骤：
1)式(I)所示化合物的合成
①化合物(1)的合成：将0.8-1.5摩尔当量Bodipy-Cl2溶于乙腈中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入0.8-1.5摩尔当量1,3-双(4-甲氧基苯)-1,3-丙二酮，3-5摩尔当量NaH，继续反应4-8h；然后加入二氯甲烷90-150mL，蒸馏水50-100mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物1；
②化合物2的合成：将0.8-1.5摩尔当量Bodipy-Cl2溶于乙腈中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入0.8-1.5摩尔当量二苯甲酰甲烷，3-5摩尔当量NaH，继续反应4-10h；然后加入二氯甲烷90-150mL，蒸馏水50-100mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物2；
③化合物3的合成：将0.8-1.5摩尔当量Bodipy-Cl2溶于乙腈置中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入0.8-1.5摩尔当量1,3-双(4-氯苯)-1,3-丙二酮，3-5摩尔当量NaH，继续反应4-10h；然后加入二氯甲烷90-150mL，蒸馏水50-100mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物3；
④化合物4的合成：将0.8-1.5摩尔当量Bodipy-Cl2溶于乙腈置于中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入2摩尔当量1,3-双(4-甲氧基苯)-1,3-丙二酮，3-5摩尔当量NaH，继续反应4-10h；然后加入二氯甲烷90-150mL，蒸馏水50-100mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物4；
2)式(II)中所示化合物的合成
①式(II)中所示化合物1a的合成：将0.08-0.15mmoL化合物1溶于二氯甲烷中，室温下搅拌；然后向瓶中分别加入0.4-0.8mL三氟化硼乙醚络合物和0.08-0.12mL三乙胺，过夜反应；然后再缓慢加入蒸馏水，和二氯甲烷。反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物1a；
所述化合物1a的结构表征如下：1HNMR(400MHz,CDCl3):δ7.79(d,2H,J＝8.8Hz),7.72(d,2H,J＝8.8Hz),7.50(d,2H,J＝8.0Hz),7.33(d,2H,J＝8.0Hz),7.07(m,4H),6.84(d,1H,J＝4.0Hz),6.72(m,2H),6.44(d,1H,J＝4.0Hz),3.76(s,3H),3.75(s,3H),2.47(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):193.4,166.1,163.4,162.4,154.1,140.7,138.2,134.4,134.4,133.4,132.6,132.3,132.1,131.8,131.0,130.6,129.5,128.2,124.8,120.5,114.7,113.7,113.7,108.9,55.5,55.5,21.6.ESI-HRMS:calculated for[M+H]+579.16582,found 579.16639；
②式(II)中所示化合物2a的合成：将0.08-0.15mmoL化合物2溶于二氯甲烷置中，室温下搅拌。然后向瓶中分别加入0.4-0.8mL三氟化硼乙醚络合物和0.08-0.15mL三乙胺，过夜反应；然后再缓慢加入蒸馏水，和二氯甲烷。反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物2a；
所述化合物2a的结构表征如下：1H NMR(600MHz,CDCl3):δ7.80(dd,2H,J＝7.8,1.2Hz),7.58(t,2H,J＝7.2Hz),7.47(t,4H,J＝7.8Hz),7.42(d,2H,J＝7.8Hz),7.39(s,1H),7.31(d,2H,J＝7.8Hz),6.90(d,1H,J＝4.2Hz),6.87(d,1H,J＝4.2Hz),6.52(d,1H,J＝4.2Hz),6.41(d,1H,J＝4.2Hz),2.46(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):194.86,167.55,153.43,140.96,139.16,138.75,135.44,135.28,134.35,133.09,132.66,132.33,131.55,130.80,130.72,130.61,129.88,129.52,128.23,128.14,125.71,120.33,115.12,109.71,21.62.ESI-HRMS:calculated for[M+H]+519.14414,found519.14484；
③式(II)中所示化合物3a的合成：将0.08-0.15mmoL化合物3溶于二氯甲烷中，室温下搅拌。然后向瓶中分别加入0.4-0.8mL三氟化硼乙醚络合物和0.08-0.15mL三乙胺，过夜反应；然后再缓慢加入蒸馏水，和二氯甲烷。反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物3a；
所述化合物3a的结构表征如下：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.70(d,2H,J＝8.5,1.2Hz),7.62(d,2H,J＝8.5Hz),7.51(d,2H,J＝8.0Hz),7.35(d,2H,J＝7.8Hz),7.20(d,4H,J＝8.5Hz),7.09(q,2H,J＝4.6Hz),6.91(d,1H,J＝4.1Hz),6.48(d,1H,J＝4.1Hz),2.48(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):193.2,165.4,152.6,141.1,139.8,139.4,138.0,136.9,135.9,134.4,133.7,133.0,132.3,131.8,131.1,130.5,130.5,129.5,129.5,129.5,128.7,128.7,128.6,128.6,126.3,119.8,115.4,109.5,29.8,29.4,27.3,21.5.ESI-HRMS:calculated for[M+H]+587.0668,found 587.0661；
④式(II)中所示化合物4a的合成：将0.08-0.15mmoL化合物4溶于二氯甲烷中，室温下搅拌；然后向瓶中分别加入0.4-0.8mL三氟化硼乙醚络合物和0.08-0.15mL三乙胺，过夜反应；然后再缓慢加入蒸馏水，和二氯甲烷。反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物4a；
所述化合物4a的结构表征如下：1HNMR(600MHz,CDCl3):δ8.21(d,2H,J＝9.0Hz),7.93(d,2H,J＝9.0Hz),7.71(d,2H,J＝9.0Hz),7.53(d,2H,J＝9.0Hz),7.35(s,1H),7.31(d,2H,J＝7.8Hz),7.18(d,2H,J＝7.8Hz),7.03(d,1H,J＝4.8Hz),6.99(d,2H,J＝9.0Hz),6.90(d,1H,J＝4.2Hz),6.88(d,1H,J＝4.8Hz),6.78(d,2H,J＝9.0Hz),6.68(d,2H,J＝9.0Hz),6.47(d,1H,J＝4.2Hz),6.24(d,2H,J＝9.0Hz),3.87(s,3H),3.80(s,3H),3.74(s,3H),3.63(s,3H),2.46(s,3H).13C NMR(150MHz,CDCl3):193.3,191.6,191.2,165.5,164.2,163.8,163.2,161.3,152.8,144.0,140.6,139.8,136.3,133.1,132.2,132.1,131.8,131.5,131.4,131.3,131.1,130.6,129.5,129.4,129.0,128.0,126.0,119.4,118.2,114.4,114.1,113.5,113.1,109.3,57.6,55.7,55.6,55.5,55.1,21.6.ESI-HRMS:calculated for[M+H]+849.2763,found 849.2760；
⑤式(II)中所示化合物1b的合成：将0.035-0.040mmoL化合物1a溶于甲苯中，在通氮气条件下加入0.004mmoL碘化亚铜，0.004mmoL双三苯基磷二氯化钯；通8-12分钟氮气后，用注射器加入0.076mmoL苯乙炔和0.1mL三乙胺。在60-70℃下搅拌1-5h后，减压蒸掉溶剂；用二氯甲烷和蒸馏水反复萃取三次，残留物进行层析柱得到化合物1b；
所述化合物1b的结构表征如下：1HNMR(600MHz,CDCl3):δ7.79(d,2H,J＝9.0Hz),7.69(m,2H),7.64(d,2H,J＝9.0Hz),7.53(d,2H,J＝7.8Hz),7.43(m,3H),7.34(d,2H,J＝7.8Hz),7.08(d,1H,J＝4.8Hz),7.04(d,1H,J＝4.8Hz),6.88(d,1H,J＝4.2Hz),6.80(d,1H,J＝4.2Hz),6.71(d,2H,J＝9.0Hz),6.45(d,2H,J＝7.8Hz),3.76(s,3H),3.69(s,3H),2.48(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):193.5,166.4,163.3,162.1,154.3,140.6,137.5,136.2,134.2,132.8,132.5,132.3,132.1,131.6,130.6,129.4,128.9,128.7,128.5,128.1,124.2,123.2,121.5,120.7,113.6,113.3,108.9,96.6,83.5,55.5,55.4,21.6.ESI-HRMS:calculated for[M+H]+645.2363,found 645.2372；
⑥式(II)中所示化合物1c的合成：将0.035-0.040mmoL化合物1a溶于乙腈中，室温搅拌情况下，加入0.076mmoL对甲氧基苯硫酚，加入5滴三乙胺，在室温下继续反应2-8h；然后加入二氯甲烷和蒸馏水反复萃取三次，残留物进行层析柱得到化合物(1c)；
所述化合物1c的结构表征如下：1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.83(d,2HJ＝8.4Hz,),7.78(d,2H,J＝8.4Hz),7.65(d,2H,J＝8.4Hz),7.49(d,2H,J＝7.8Hz),7.29(d,J＝7.8Hz,1H),6.99(q,2H,J＝4.2Hz),6.96(d,2H,J＝8.4Hz),6.84(d,J＝4.2Hz,1H),6.71(m,4H),5.94(d,1H,J＝4.2Hz),3.84(s,3H),3.76(s,3H),3.73(s,3H),2.44(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):194.0,164.4,163.2,161.9,161.0,151.5,150.8,140.3,137.5,137.0,136.9,132.5,132.3,132.0,131.8,131.5,130.6,130.1,129.4,128.3,126.5,121.2,118.2,116.4,115.3,113.5,108.9,55.6,55.5,55.4,21.6.ESI-HRMS:calculated for[M+H]+683.2189,found 683.2182。
为解决上述第三个技术问题，本发明提供一种上述荧光染料应用：上述荧光染料可应用在生物成像领域。例如：所述荧光染料可用来在体外或活体内对于肿瘤细胞或肿瘤进行成像；利用F127在二次水中包裹荧光染料，分别在体外对于肿瘤细胞进行成像分析，进而在体内对于荷瘤小鼠利用尾静脉注射后对肿瘤进行成像检测。
本发明所记载的任何范围包括端值以及端值之间的任何数值以及端值或者端值之间的任意数值所构成的任意子范围。
如无特殊说明，本发明中的各原料均可通过市售购买获得，本发明中所用的设备可采用所属领域中的常规设备或参照所属领域的现有技术进行。
与现有技术相比较，本发明具有如下有益效果：
本发明的荧光染料具有所用原料易得，合成方法简单，反应条件容易控制等优点，并且产物分子在溶解及固相都有较高的量子产率，毒性低，可应用于生物成像。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明
图1为式I所示不同荧光染料(浓度为10μmol/L)在二氯甲烷溶液中的紫外光谱。
图2为式I所示不同荧光染料(浓度为10μmol/L)在二氯甲烷溶液中的的荧光光谱。
图3为式II所示不同荧光染料(浓度为10μmol/L)在二氯甲烷溶液中的紫外光谱。
图4为式II所示不同荧光染料(浓度为10μmol/L)在二氯甲烷溶液中的荧光光谱。
图5为式I所示不同荧光染料在固态的紫外光谱。
图6为式II所示不同荧光染料在固态的荧光光谱。
图7为式II所示荧光染料3a(浓度为10μmol/L)在5％四氢呋喃以及F127包裹的水溶液中的荧光光谱。
图8为式II所示荧光染料3a(浓度为5μmol/L，含0.5％DMSO)在Hela细胞中的成像。
图9为式II所示荧光染料3a由F127包裹(浓度0.5mg/mL)在荷瘤小鼠(4T1)体中的生物成像。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。
实施例1
一种新型荧光染料的制备方法及应用：
1)式(I)所示化合物的合成
①将176mg(0.5mmol)Bodipy-Cl2溶于30mL的乙腈置于250mL单口瓶中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入142mg(0.5mmol)1,3-双(4-甲氧基苯)-1,3-丙二酮，3-5摩尔当量NaH，继续反应5h；然后加入二氯甲烷100mL，蒸馏水60mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，层析柱(石油醚:二氯甲烷＝1:1)分离得到红色固体化合物1。
②将176mg(0.5mmol)Bodipy-Cl2溶于30mL的乙腈置于250mL单口瓶中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入284mg(0.5mmol)1,3-双(4-甲氧基苯)-1,3-丙二酮，3-5摩尔当量NaH，继续反应5h；然后加入二氯甲烷100mL，蒸馏水60mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，层析柱(石油醚:二氯甲烷＝1:1)分离得到深红色固体化合物4。
2)式(Ⅱ)所示的荧光染料分子的合成：
①将0.1mmoL化合物1溶于15mL的二氯甲烷置于100mL单口瓶中，室温下搅拌。然后向瓶中分别加入0.5mL三氟化硼乙醚络合物和0.1mL三乙胺，过夜反应。然后再缓慢加入蒸馏水30mL，和二氯甲烷30mL。反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，层析柱(石油醚:二氯甲烷＝2:1)分离得到深紫色化合物1a，结构式如下：
②将化合物0.038mmoL 1a溶于20mL甲苯中置于100mL三口瓶中，在通氮气条件下加入0.004mmoL碘化亚铜，0.004mmoL双三苯基磷二氯化钯。通10分钟氮气后，用注射器加入0.076mmoL苯乙炔和0.1mL三乙胺。在65℃下搅拌2h后，减压蒸掉溶剂。用二氯甲烷和蒸馏水反复萃取三次，再用硅胶色谱柱提纯(二氯甲烷：石油醚＝1:2作淋洗剂)，得到蓝色固体化合物1b，若过完柱得到的产物不纯，可通过重结晶得到纯品。化合物1b，结构式如下：
③将化合物0.038mmoL1a溶于10mL乙腈中置于100mL单口瓶中，室温搅拌情况下，加入0.076mmoL对甲氧基苯硫酚，加入5滴三乙胺，在室温下继续反应3h。然后加入二氯甲烷和蒸馏水反复萃取三次，再用硅胶色谱柱提纯(二氯甲烷：石油醚＝3：1作淋洗剂)，得到蓝色化合物1c，结构式如下：
④将0.1mmoL化合物4溶于15mL的二氯甲烷置于100mL单口瓶中，室温下搅拌。然后向瓶中分别加入0.5mL三氟化硼乙醚络合物和0.1mL三乙胺，过夜反应。然后再缓慢加入蒸馏水30mL，和二氯甲烷30mL。反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，层析柱(石油醚:二氯甲烷＝2:1)分离得到深紫色化合物4a，结构式如下：
实施例2
一种新型荧光染料的制备方法：
1)式(I)所示化合物的合成：
①将176mg(0.5mmol)Bodipy-Cl2溶于30mL的乙腈置于250mL单口瓶中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入112mg(0.5mmol)二苯甲酰甲烷，3-5摩尔当量NaH，继续反应5h。然后加入二氯甲烷100mL，蒸馏水60mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，层析柱(石油醚:二氯甲烷＝1:1)分离得到红色固体化合物2，结构式如下：
2)式(Ⅱ)所示的化合物的合成：
①将0.1mmoL化合物2溶于15mL的二氯甲烷置于100mL单口瓶中，室温下搅拌。然后向瓶中分别加入0.5mL三氟化硼乙醚络合物和0.1mL三乙胺，过夜反应。然后再缓慢加入蒸馏水30mL，和二氯甲烷30mL。反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，层析柱(石油醚:二氯甲烷＝2:1)分离得到深紫色产物2a，结构式如下：
实施例3
一种新型荧光染料的制备方法：
1)式(I)所示化合物的合成
①将176mg(0.5mmol)Bodipy-Cl2溶于30mL的乙腈置于250mL单口瓶中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入148mg(0.5mmol)二苯甲酰甲烷，3-5摩尔当量NaH，继续反应5h。然后加入二氯甲烷100mL，蒸馏水60mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，层析柱(石油醚:二氯甲烷＝1:1)分离得到红色固体化合物3，结构式如下：
2)式(Ⅱ)所示化合物的合成：
①将0.1mmoL化合物3溶于15mL的二氯甲烷置于100mL单口瓶中，室温下搅拌。然后向瓶中分别加入0.5mL三氟化硼乙醚络合物和0.1mL三乙胺，过夜反应。然后再缓慢加入蒸馏水30mL，和二氯甲烷30mL。反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，层析柱(石油醚:二氯甲烷＝2:1)分离得到深紫色化合物3a，结构式如下：
实验例
1.使用二氯甲烷溶液配制10μmol/L的式(I)(II)所示化合物溶液。
式(I)所示化合物检测紫外光谱，如图1所示；检测荧光光谱，如图2所示。
式(II)所示化合物检测紫外光谱，如图3所示；检测荧光光谱，如图4所示。
2.制备得固体状态时的(I)(II)所示化合物粉末。
式(I)所示化合物检测固体荧光光谱，如图5所示。
式(II)所示化合物检测固体荧光光谱，如图6所示。
3-1.含5％四氢呋喃的3a化合物水溶液(浓度为10μmol/L)的配制是：向浓度为200μmol/L的四氢呋喃100μL中加入去离子水1.9mL,摇晃均匀，静置过夜。
3-2.F127包裹的3a化合物水溶液(浓度为10μmol/L)的配制是：将1mg化合物3a与20mg F127置于玻璃瓶中，加入0.6mL四氢呋喃，置于通风橱中过夜风干，再向瓶中加入1mL去离子水，剧烈摇晃至溶解均匀，再稀释至浓度为10μmol/L。
对于两种溶液检测荧光光谱，如图7所示。F127包裹的3a化合物水溶液荧光强度强于含5％四氢呋喃的3a化合物水溶液，且溶液更稳定，更适合生物体内成像。
4.在生物体内成像之前，先尝试体外的细胞成像，对Hela细胞用浓度为5μmol/L，含有0.5％DMSO培养液孵育15min，反复洗掉培养液后得到细胞成像结果如图8所示，其中图8(a)为近红外通道，图8(b)为明场。结果显示该染料在近红外的紫光通道有显著地成像效果，良好的体内成像前景。
5.对于体内成像，本申请选用BALB/C系4T1荷瘤小鼠。制备F127包裹的3a化合物水溶液方法如上所述，浓度为0.5mg/mL的该浓溶液由尾静脉注射300μL进入小鼠体内。分别观察1h、5h、18h、24h、48h时小鼠体内的染料分布情况如图9所示，从图中可以观察到在1h、5h的时间点，染料还主要分布于肠胃等器官内，但在其后染料逐渐聚集于肿瘤部位，尤其18h之后，聚集效果尤为明显，而解剖后的小鼠器官成像也说明，除了肝脏这一器官外，染料主要聚集于肿瘤处，充分说明了该染料对于肿瘤的特异性识别及显著地成像效果。
图9中纵坐标为不同时间小鼠成像的荧光亮度标尺，由波长630nm激发和波长700nm检测。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。

Claims (2)

1.一种新型的荧光染料，它具有如下式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示的结构式，其特征在于，式(Ⅰ)所示的结构示如下：
式(Ⅱ)所示的结构式如下：
2.如权利要求1所述的荧光染料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)式(I)所示化合物的合成
①化合物(1)的合成：将0.8-1.5摩尔当量Bodipy-Cl2溶于乙腈中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入0.8-1.5摩尔当量1,3-双(4-甲氧基苯)-1,3-丙二酮，3-5摩尔当量NaH，继续反应4-10h；然后加入二氯甲烷90-150mL，蒸馏水50-100mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物1；
②化合物2的合成：将0.8-1.5摩尔当量Bodipy-Cl2溶于乙腈中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入0.8-1.5摩尔当量二苯甲酰甲烷，3-5摩尔当量NaH，继续反应4-10h；然后加入二氯甲烷90-150mL，蒸馏水50-100mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物2；
③化合物3的合成：将0.8-1.5摩尔当量Bodipy-Cl2溶于乙腈中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入0.8-1.5摩尔当量1,3-双(4-氯苯)-1,3-丙二酮，3-5摩尔当量NaH，继续反应4-10h；然后加入二氯甲烷90-150mL，蒸馏水50-100mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物3；
④化合物4的合成：将0.8-1.5摩尔当量Bodipy-Cl2溶于乙腈于中，通入氮气，室温下搅拌，然后加入2摩尔当量1,3-双(4-甲氧基苯)-1,3-丙二酮，3-5摩尔当量NaH，继续反应4-10h；然后加入二氯甲烷90-150mL，蒸馏水50-100mL，反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物4；
2)式(II)中所示化合物的合成
①式(II)中所示化合物1a的合成：将0.08-0.15mmoL化合物1溶于二氯甲烷中，室温下搅拌；然后向瓶中分别加入0.4-0.8mL三氟化硼乙醚络合物和0.08-0.12mL三乙胺，过夜反应；然后再缓慢加入蒸馏水，和二氯甲烷；反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物1a；
②式(II)中所示化合物2a的合成：将0.08-0.15mmoL化合物2溶于二氯甲烷置中，室温下搅拌；然后向瓶中分别加入0.4-0.8mL三氟化硼乙醚络合物和0.08-0.15mL三乙胺，过夜反应；然后再缓慢加入蒸馏水和二氯甲烷；反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物2a；
③式(II)中所示化合物3a的合成：将0.08-0.15mmoL化合物3溶于二氯甲烷中，室温下搅拌；然后向瓶中分别加入0.4-0.8mL三氟化硼乙醚络合物和0.08-0.15mL三乙胺，过夜反应；然后再缓慢加入蒸馏水和二氯甲烷；反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物3a；
④式(II)中所示化合物4a的合成：将0.08-0.15mmoL化合物4溶于二氯甲烷中，室温下搅拌；然后向瓶中分别加入0.4-0.8mL三氟化硼乙醚络合物和0.08-0.15mL三乙胺，过夜反应；然后再缓慢加入蒸馏水，和二氯甲烷；反复萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干，残留物进行层析柱得到化合物4a；
⑤式(II)中所示化合物1b的合成：将0.035-0.040mmoL化合物1a溶于甲苯中，在通氮气条件下加入0.004mmoL碘化亚铜，0.004mmoL双三苯基磷二氯化钯；通8-20分钟氮气后，用注射器加入0.076mmoL苯乙炔和0.1mL三乙胺；在60-80℃下搅拌1-5h后，减压蒸掉溶剂；用二氯甲烷和蒸馏水反复萃取三次，残留物进行层析柱得到化合物1b；
⑥式(II)中所示化合物1c的合成：将0.035-0.040mmoL化合物1a溶于乙腈中，室温搅拌情况下，加入0.076mmoL对甲氧基苯硫酚，加入5滴三乙胺，在室温下继续反应2-4h；然后加入二氯甲烷和蒸馏水反复萃取三次，残留物进行层析柱得到化合物(1c)；
所述Bodipy-Cl2的结构式如下：
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