CN108208535A - 一种中药配方降解黄曲霉毒素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药配方降解黄曲霉毒素的方法，属于黄曲霉毒素控制技术领域。方法为采用山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶挥发油处理需要去除黄曲霉毒素的产品，本发明采用纯中药制剂，无毒无污染，不存在安全隐患，对黄曲霉毒素的去除效果佳，并且使用方便。

Description

一种中药配方降解黄曲霉毒素的方法

技术领域

本发明属于黄曲霉毒素控制技术领域，具体地说，涉及一种中药配方降解黄曲霉毒素的方法。

背景技术

黄曲霉毒素是主要由黄曲霉和寄生曲霉等真菌产生的一类次生代谢产物，具有很强的毒性和致癌力，对人和动物的肝脏、中枢神经具有很强的毒害作用，动物典型的黄曲霉毒素中毒症状有黄疸、嗜睡、垂翼、体温上升和神经症状，造成肠胃紊乱、贫血、生长性能及饲料利用率降低、胰脏消化酵素活性降低、免疫能力减弱、肝脏肿大、生殖能力下降等毒害作用。人在食用污染有黄曲霉毒素的食品后，可出现发热、腹痛、呕吐、食欲减退等症状，严重者在2～3周会出现肝区疼痛、肝脾肿大、肝功能异常等肝病症状，甚至出现心脏扩大、肺水肿、痉挛、昏迷等症状。一次性大量摄入会引起人和动物的急性中毒死亡，小剂量的长期摄入可致畸、致癌和致突变。

理论上，防毒比去毒更有效，但黄曲霉毒素污染可能发生在农产品收获、运输、贮藏等各环节中，农业生产中，黄曲霉毒素超标的中药等产品并不少见。对于已经污染的产品来讲，仅有的防毒措施并不能解决已经残留的毒素，如果全部销毁，将会造成很大的损失，因此，农产品收获后黄曲霉毒素的降解技术一直是研究的热点。

研究表明，黄曲霉毒素无色、无味、无嗅，理化性质稳定，是迄今自然界中已发现的理化性质最稳定的真菌毒素，在中药的加工过程中难以被破坏。根据黄曲霉毒素的化学性质，理论上有三种去毒途径，即脱除毒素、把毒素变成无毒化合物、将毒素降解为无毒的小分子物质。常规的去毒方法主要有物理法、化学法、生物法。但目前的黄曲霉毒素去除方法，往往会对中草药及食品的营养成分产生破坏，甚至存在一定安全隐患，从而实际应用受到严重限制。例如，中国专利申请号为：201210505116.1，公开日为：2013年2月20日的专利文件，公开了一种黄曲霉毒素的降解方法，是对含有黄曲霉毒素的物质采用臭氧水、二氧化氯、超声联合作用处理，臭氧水臭氧含量为1～3g/L；所述的二氧化氯浓度为3～8g/m³；所述超声的强度为100W，该方法中采用的臭氧水、二氧化氯是强氧化剂，易引起食品氧化变质、破坏维生素、改变食品色泽，同时残留的氧化剂被食用后对人体健康的影响问题也不容忽视。又如，中国专利申请号为：201610984217.X，公开日为：2017年4月15日的专利文件，公开了一种黄曲霉毒素的降解方法，更具体地说，该发明涉及一种辐照降解黄曲霉毒素的方法，包括：制备黄曲霉菌孢子悬浮液；将试验农产品置于紫外灯下照射灭菌后，加入黄曲霉菌孢子悬浮液中混匀培养，得到感染黄曲霉菌的试验农产品；将感染黄曲霉菌的试验农产品加入体积浓度为80～85％的酒精中浸泡，并搅拌，70～80℃水浴加热，得到经过初步降解的感染黄曲霉菌的试验农产品；将感染黄曲霉菌的试验农产品置于离心管中密封，先放入⁶⁰Coγ射线辐射场进行辐照处理，再放入电子束辐照场中进行辐照处理。但目前国内外对辐照降解污染物的机理、降解产物及其毒性的研究较少，辐照是否改变食品的内在品质，辐照处理后污染物是否转化为有毒或更毒的物质，能否适用于中药，会不会改变中药的药效，这些问题都尚未解决。

发明内容

1.要解决的问题

针对现有的黄曲霉毒素去除方法，往往会对中药及食品的营养成分、有效成分产生破坏，或者存在一定安全隐患的问题，本发明提供一种中药配方降解黄曲霉毒素的方法，本发明采用纯中药制剂，无毒无污染，不存在安全隐患，对黄曲霉毒素的去除效果佳，并且使用方便。

2.技术方案

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：

一种中药配方降解黄曲霉毒素的方法，采用山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶挥发油处理需要去除黄曲霉毒素的产品。

进一步地，所述的挥发油采用如下方法得到：

(1)挥发油提取：取山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶，加入投料量质量5～6倍的水回流提取，得到挥发油粗品；

(2)挥发油纯化：将步骤(1)得到的挥发油粗品在真空度(2～3)×133.32Pa下进行蒸馏，蒸馏分为4个阶段，截取产品馏分的柱顶温度依次为86℃～91℃、105℃～110℃、 115℃～120℃、130℃～135℃，得到挥发油精品。

进一步地，所述的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮、芳樟叶的质量比为8:4:3:1。

进一步地，所述的步骤(2)中的回流比为2～3，4个阶段的收集时间依次为2h、1h、1.5h、1.5h。

进一步地，所述的需要去除黄曲霉毒素的产品为燀桃仁。

进一步地，所述的步骤(1)中挥发油提取的具体步骤为：

①取新鲜的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶，于40℃～50℃干燥6h，粉碎，过40目筛，加入投料量质量5～6倍的水，得到A溶液；

②加入氯化钠，氯化钠的质量为A溶液质量的1％～3％，搅拌后浸泡1～2h，得到B溶液；

③将B溶液在频率30Hz、功率200W超声20～30min，得到C溶液；

④将C溶液装入蒸馏器，加热回流直至馏出液中不再有油珠出现，停止加热。

进一步地，所述的步骤①中加入投料量质量6倍的水；所述的步骤②中加入A提取液质量的2％的氯化钠，搅拌后浸泡1.5h；所述的步骤③中，超声时间为25min。

一种中药配方降解燀桃仁中黄曲霉毒素的方法，其步骤为：

A.将得到的挥发油精品用95％乙醇稀释40～60倍得到挥发油精品稀释液，喷洒在燀桃仁上，25～35℃下放置20～30h；

B.将经过步骤A处理后的燀桃仁在活性炭悬浮液中浸泡5～10min，过滤得到燀桃仁；

C.将经过步骤B处理后的燀桃仁在60～80℃的热风下干燥0.5～1h。

进一步地，所述的步骤A中挥发油与燀桃仁的质量比为(1～10):5000。

进一步地，所述的活性炭悬浮液中活性炭的添加量为水质量的8％～10％。

3.有益效果

相比于现有技术，本发明的有益效果为：

(1)本发明中药配方降解黄曲霉毒素的方法采用纯中药制剂，本身无毒无污染，同时不破坏原产品的产品品质，尤其天然植物精油自古就广泛应用于民间药方及食品的防腐、防虫害，不产生二次污染，不存在安全隐患；

(2)本发明中药配方降解黄曲霉毒素的方法，制备挥发油过程中，分4段温度区间对挥发油进行减压蒸馏提纯，并精确控制收集时间，各段得到的馏出物不同，联合作用于黄曲霉毒素，降解毒素效果好，效率高，同时采用超声波辅助-盐析-水蒸汽蒸馏法提取原料得到挥发油粗品，对料液比、氯化钠浓度、浸泡时间、超声频率、超声功率和超声时间等参数进行反复试验，得到最优化的提取工艺，挥发油得率达到5％以上，成本大幅度降低，去除毒素效果也得到改善；

(3)本发明应用于去除燀桃仁中的黄曲霉毒素，利用燀桃仁与黄曲霉毒素之间作用力容易被改变的特点，尤其是燀桃仁中黄曲霉毒素之间的分子极性容易被本发明的挥发油成分所改变的特性，使得黄曲霉毒素去除率达到80％以上，并且具有使用简单、效率高、无污染的优点，使用时仅需采用95％乙醇稀释后喷洒在被污染的燀桃仁上即可弱化黄曲霉毒素与燀桃仁的间的作用力，并使得黄曲霉毒素与挥发油开始发生反应，十分便捷，处理后采用活性炭悬浮液短时间浸泡，同时在适当的温度下采用热风进行快速烘干，既能去除降解产物以及残留挥发油，消除二次污染，不存安全隐患，又不会破坏或者损失有效成分，对药效无影响，避免影响燀桃仁的药效与口感；同时采用该方法降解黄曲霉毒素所需处理时间较短，远低于现有技术，例如中国专利申请号为：201310002615.3，公开日为2014年7月9日的专利文献公开的肉桂精油熏蒸去除黄曲霉毒素所需时间。

附图说明

图1为实施例1中燀桃仁在处理前后黄曲霉毒素含量对比图

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进一步进行描述。

实施例1

一种中药配方降解燀桃仁中黄曲霉毒素的方法，采用山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶挥发油处理黄曲霉毒素含量超标的燀桃仁。方法如下：

首先进行制备挥发油，包括挥发油提取和挥发油纯化：

(1)挥发油提取：①取新鲜的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶，其质量依次为480g、240g、180g、60g，于40℃干燥6h，粉碎，过40目筛，加入5.76kg水，得到 6.5kg的A溶液；

②加入130g氯化钠，搅拌后浸泡1.5h，得到B溶液；

③将B溶液在频率30Hz、功率200W超声25min，得到C溶液；

④将C溶液装入蒸馏器，加热回流直至馏出液中不再有油珠出现，停止加热，得到51.84

g挥发油粗品，计算可知，挥发油得率为5.4％。

(2)挥发油纯化：将步骤(1)得到的挥发油粗品在真空度3×133.32Pa下进行蒸馏，蒸馏分为4个阶段，截取产品馏分的柱顶温度依次为86℃～91℃、105℃～110℃、115 ℃～120℃、130℃～135℃，收集时间依次为2h、1h、1.5h、1.5h，回流比为2，得到挥发油精品。

采用上述得到的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶挥发油精品处理需要去除黄曲霉毒素的燀桃仁，其步骤为：

A.将所得到的挥发油精品用95％乙醇稀释50倍得到挥发油精品稀释液，喷洒在燀桃仁上，挥发油精品与燀桃仁的质量比为2mg:1g，30℃下放置24h；

B.将经过步骤A处理后的燀桃仁在活性炭悬浮液中浸泡5min，过滤得到燀桃仁，所述的活性炭悬浮液中活性炭的添加量为水质量的8％；

C.将经过步骤B处理后的燀桃仁在70℃的热风下干燥0.5h。

处理前后燀桃仁中黄曲霉毒素含量对比如图1所示，处理前含有15μg黄曲霉毒素B1，含有黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素B1的总量为18μg，经过挥发油喷洒处理后仅含有2μg黄曲霉毒素B1，黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素B1的总量降为3.6μg，计算可得黄曲霉毒素B1的去除率为86.7％。另外，采用中药挥发油处理前燀桃仁中苦杏仁苷的含量为6％，处理后苦杏仁苷的含量为5.8％，药效损失较小，并且处理后未检测出新的有毒有害成分，所需处理时间也较短。经中医处方用于代替未经处理的燀桃仁使用，治疗效果没有发生明显变化，实践证明药效得到了保证。

实施例2

一种中药配方降解燀桃仁中黄曲霉毒素的方法，采用山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶挥发油处理黄曲霉毒素含量超标的燀桃仁。方法如下：

首先进行制备挥发油，包括挥发油提取和挥发油纯化：

(1)挥发油提取：①取新鲜的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶，其质量依次为480g、240g、180g、60g，于50℃干燥6h，粉碎，过40目筛，加入4.8kg水，得到 5.5kg的A溶液；

②加入165g氯化钠，搅拌后浸泡1h，得到B溶液；

③将B溶液在频率30Hz、功率200W超声30min，得到C溶液；

④将C溶液装入蒸馏器，加热回流直至馏出液中不再有油珠出现，停止加热，得到48.96

g挥发油粗品，计算可知，挥发油得率为5.1％。

(2)挥发油纯化：将步骤(1)得到的挥发油粗品在真空度2×133.32Pa下进行蒸馏，蒸馏分为4个阶段，截取产品馏分的柱顶温度依次为86℃～91℃、105℃～110℃、115 ℃～120℃、130℃～135℃，收集时间依次为2h、1h、1.5h、1.5h，回流比为2，得到挥发油精品。

采用上述得到的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶挥发油精品处理需要去除黄曲霉毒素的燀桃仁，其步骤为：

A.将所得到的挥发油精品用95％乙醇稀释40倍得到挥发油精品稀释液，喷洒在燀桃仁上，挥发油精品与燀桃仁的质量比为1mg:5g，25℃下放置30h；

B.将经过步骤A处理后的燀桃仁在活性炭悬浮液中浸泡10min，过滤得到燀桃仁，所述的活性炭悬浮液中活性炭的添加量为水质量的10％；

C.将经过步骤B处理后的燀桃仁在80℃的热风下干燥1h。

处理前含有25μg黄曲霉毒素B1，含有黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素B1的总量为35μg，经过挥发油喷洒处理后仅含有4.8μg黄曲霉毒素B1，黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素B1的总量降为5μg，计算可得黄曲霉毒素B1的去除率为80.8％。另外，采用中药挥发油处理前燀桃仁中苦杏仁苷的含量为 6.2％，处理后苦杏仁苷的含量为6％，药效损失较小，并且处理后未检测出新的有毒有害成分，所需处理时间也较短。

实施例3

一种中药配方降解燀桃仁中黄曲霉毒素的方法，采用山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶挥发油处理黄曲霉毒素含量超标的燀桃仁。方法如下：

首先进行制备挥发油，包括挥发油提取和挥发油纯化：

(1)挥发油提取：①取新鲜的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶，其质量依次为480g、240g、180g、60g，于45℃干燥6h，粉碎，过40目筛，加入5.76kg水，得到 6.5kg的A溶液；

②加入65g氯化钠，搅拌后浸泡2h，得到B溶液；

③将B溶液在频率30Hz、功率200W超声30min，得到C溶液；

④将C溶液装入蒸馏器，加热回流直至馏出液中不再有油珠出现，停止加热，得到49.92

g挥发油粗品，计算可知，挥发油得率为5.2％。

(2)挥发油纯化：将步骤(1)得到的挥发油粗品在真空度3×133.32Pa下进行蒸馏，蒸馏分为4个阶段，截取产品馏分的柱顶温度依次为86℃～91℃、105℃～110℃、115 ℃～120℃、130℃～135℃，收集时间依次为2h、1h、1.5h、1.5h，回流比为3，得到挥发油精品。

采用上述得到的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶挥发油精品处理需要去除黄曲霉毒素的燀桃仁，其步骤为：

A.将所得到的挥发油精品用95％乙醇稀释30倍得到挥发油精品稀释液，喷洒在燀桃仁上，挥发油精品与燀桃仁的质量比为1mg:1g，35℃下放置20h；

B.将经过步骤A处理后的燀桃仁在活性炭悬浮液中浸泡8min，过滤得到燀桃仁，所述的活性炭悬浮液中活性炭的添加量为水质量的9％；

C.将经过步骤B处理后的燀桃仁在60℃的热风下干燥1h。

处理前含有20μg黄曲霉毒素B1，含有黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素B1的总量为24μg，经过挥发油喷洒处理后仅含有3.4μg黄曲霉毒素B1，黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素B1的总量降为3.7μg，计算可得黄曲霉毒素B1的去除率为83％。另外，采用中药挥发油处理前燀桃仁中苦杏仁苷的含量为5.9％，处理后苦杏仁苷的含量为5.8％，药效损失较小，并且处理后未检测出新的有毒有害成分，所需处理时间也较短。

Claims (10)

1.一种中药配方降解黄曲霉毒素的方法，其特征在于：采用山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶挥发油处理需要去除黄曲霉毒素的产品。

2.根据权利要求1所述的中药配方降解黄曲霉毒素的方法，其特征在于：所述的挥发油采用如下方法得到：

(1)挥发油提取：取山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶，加入投料量质量5～6倍的水回流提取，得到挥发油粗品；

(2)挥发油纯化：将步骤(1)得到的挥发油粗品在真空度(2～3)×133.32Pa下进行蒸馏，蒸馏分为4个阶段，截取产品馏分的柱顶温度依次为86℃～91℃、105℃～110℃、115℃～120℃、130℃～135℃，得到挥发油精品。

3.根据权利要求2所述的中药配方降解黄曲霉毒素的方法，其特征在于：所述的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮、芳樟叶的质量比为8:4:3:1。

4.根据权利要求3所述的中药配方降解黄曲霉毒素的方法，其特征在于：所述的步骤(2)中的回流比为2～3，4个阶段的收集时间依次为2h、1h、1.5h、1.5h。

5.根据权利要求4所述的中药配方降解黄曲霉毒素的方法，其特征在于：所述的需要去除黄曲霉毒素的产品为燀桃仁。

6.根据权利要求2所述的中药配方降解黄曲霉毒素的方法，其特征在于：所述的步骤(1)中挥发油提取的具体步骤为：

①取新鲜的山苍子、柠檬草、温州蜜柑果皮和芳樟叶，于40℃～50℃干燥6h，粉碎，过40目筛，加入投料量质量5～6倍的水，得到A溶液；

②加入氯化钠，氯化钠的质量为A溶液质量的1％～3％，搅拌后浸泡1～2h，得到B溶液；

③将B溶液在频率30Hz、功率200W超声20～30min，得到C溶液；

④将C溶液装入蒸馏器，加热回流直至馏出液中不再有油珠出现，停止加热。

7.根据权利要求6所述的中药配方降解黄曲霉毒素的方法，其特征在于：所述的步骤①中加入投料量质量6倍的水；所述的步骤②中加入A提取液质量的2％的氯化钠，搅拌后浸泡1.5h；所述的步骤③中，超声时间为25min。

8.一种中药配方降解燀桃仁中黄曲霉毒素的方法，其步骤为：

A.将权利要求2所得到的挥发油精品用95％乙醇稀释40～60倍得到挥发油精品稀释液，喷洒在燀桃仁上，25～35℃下放置20～30h；

B.将经过步骤A处理后的燀桃仁在活性炭悬浮液中浸泡5～10min，过滤得到燀桃仁；

C.将经过步骤B处理后的燀桃仁在60～80℃的热风下干燥0.5～1h。

9.根据权利要求8所述的一种中药配方降解燀桃仁中黄曲霉毒素的方法，其特征在于，所述的步骤A中挥发油与燀桃仁的质量比为(1～10):5000。

10.根据权利要求8所述的一种中药配方降解燀桃仁中黄曲霉毒素的方法，其特征在于，所述的活性炭悬浮液中活性炭的添加量为水质量的8％～10％。