CN108185245A - 一种人参菜用大豆饮品的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种人参菜用大豆饮品的制备方法，人参菜用大豆饮品主要由以下成分组成：水、菜用大豆提取物、红参提取物、落叶松提取物、食用盐、柠檬酸钠、柠檬酸，其主要是通过大豆脱粒、蒸制、提取、与人参提取液混合、配料等过程得到，具有抗糖尿病和肺纤维化的保健功效。

Description

一种人参菜用大豆饮品的制备方法

技术领域

本发明涉及一种菜用大豆保健饮品的制备方法及其保健用途。

背景技术

菜用大豆是被人们普遍认可的理想植物蛋白源食物，各种营养含量丰富。豆浆是通过浸泡干大豆并将其研磨成液体而制备的基于植物的饮料。豆浆古来就是中国最常用的饮品之一，它有许多保健功能，是预防及治疗高血脂、高血压、动脉硬化、缺铁性贫血、气喘等疾病的理想食品。中医理论认为, 豆浆性平味甘，滋阴润燥，常饮豆浆，对身体大有裨益。

目前报道的大豆饮料大多以蛋白质为基础，例如，田永红等报告大豆乳酸菌饮料的研究与制作，（田永红，付家庆，刘鸿雁，庞玉艳，大豆乳酸菌饮料的研究与制作，《粮油加工》, 2008(6):115-116；），）；美国N·R·甘迪等披露的“豆奶组合物及制备方法”（中国专利 02823429.4）；浙江大学，“一种枇杷花大豆饮料的制备方法”（中国专利：201310637843.8）；日本好侍食品株式会社在中国申请的“大豆混合粉末”（200880006782.2），这些均是以大豆蛋白质也包括脂肪、碳水化合物等成分制作的大豆乳饮料。

菜用大豆饮料报告较少，据“一种鲜毛豆豆浆及其加工方法”（中国专利，201410048088.4）报道，也是以鲜毛豆为基础，主要也是毛豆中蛋白质成分为主，再加上奶粉，白砂糖及部分中药等成分制成的乳饮料。一种菜用大豆提取物的制备方法及其应用（CN104887738.A）专利报道称，取新鲜菜用大豆，先行真空冷冻干燥，粉碎制成粉末，加酸水提取，提取液再加入 95% 乙醇，进行沉淀，上清液减压回收酒精，水溶液再行真空冷冻干燥，得干燥粉末。

本发明公开了以完整的新鲜菜用大豆粒为原料用超高压装置，用水提取得提取液，再配合红参提取物和落叶松提取物，制成澄明功能饮料。该提取技术简单易行，省去了酒精沉淀，水溶液再行真空冷冻干燥等步骤，节省了大量能源和成本。

发明内容

本发明公开了一种菜用大豆保健饮品，其特征在于由以下原料制成：水、菜用大豆提取物、红参提取物、落叶松提取物、食用盐、柠檬酸钠、柠檬酸，菜用大豆保健饮品主要是通过以下步骤实现：

步骤一：取无污染、无农药残留、有机栽培的新鲜菜用大豆，开水漂烫1-3min，利用扒皮机去掉菜用大豆豆荚，得完整豆粒，再行蒸制20-30min，备用；

步骤二：将步骤一蒸熟的完整的菜用大豆粒加1-6倍水，置于超高压提取装置中，提取5-20min，得提取液，备用。

步骤三: 取无污染、无农药残留、有机栽培的无病疤，无锈病的5年生新鲜优质人参加工的红参，然后粉碎成20-40目颗粒，备用；

将步骤三加工好的红参粉加6-10倍水，置于超高压提取装置中，提取2次，每次5-20min，合并2次提取液，真空减压浓缩，干燥得红参提取物（II）；

步骤四：取步骤二的菜用大豆提取液（I）与步骤三的红参提取物（II），按一定比例混合，加入适量水使之充分溶解，呈透明溶液状态；然后取适量的落叶松提取物、食用香精、柠檬酸、柠檬酸钠，加水使之充分溶解，并与菜用大豆提取物（I）红参提取物（II）的溶液充分混匀，过滤，得滤液，备用;

步骤五：将步骤4所得滤液加适量天然矿泉水稀释，中空纤维滤膜过滤后灌装，每罐200-350mL，得到成品红参菜用大豆饮品。

本发明的积极效果在于所用的原料为去除豆荚的新鲜完整的菜用大豆粒，不经过粉碎加工处理，直接用水提取，这种提取方法操作简单，提取液中的成分均为小分子成分。

本发明的积极效果还在于所用的红参为无污染、无农药残留、有机栽培的无病疤，无锈病的5年生新鲜优质人参加工的红参，经加过后的红参中含有较多的精氨酸糖苷。

本发明的积极效果还在于菜用大豆保健饮品中含有脱落酸、阿拉伯半乳聚糖、二氢槲皮素、游离氨基酸、维生素C、含有人参皂苷、红参精氨酸糖苷。

实验例1

菜用大豆中游离氨基酸的含量测定

1.1 仪器、试剂、实验材料

盐酸溶液 c(HCL)=0.06mol/L ；柠檬酸钠缓冲液:PH=2.2，氢氧化钠溶液ρ(NaOH）=500g/L ；磺基水杨酸溶液，ρ(C7H6O6S.2H2O)=50g/L ；乙二胺四乙酸二钠溶液ρ(EDTA-Na)=10g/L ；混合氨基酸标准溶液，色谱纯；S433D 全自动氨基酸分析仪德国SYKAM 公司；实验材料：菜用大豆，2015年 8月采自长白山。

1.2 方法与结果

1.2.1 试样的制备

固体样品经多次缩分后，取出约100g, 将其迅速研磨至全部通过0.5mm 孔径筛，混合均匀，置于洁净、干燥容器中，液体样品经多次播动后，迅速取出100ml, 置于洁净、干燥的容

器中。

1.2.2 试样溶液的制备

称取试样1g ～ 5g( 精确到0.001g)，置于250mL 容量瓶中，充分溶解后，加水至刻度，混匀。放置过夜后吸取上清液2mL 于10mL 离心管中，准确加入2mL 磺基水杨酸溶液，混匀，放置1h。准确加入1mLEDTA-Na 溶液，混匀，离心15min。将上清液稀释至一定的浓度及PH范围，衍生化后使其浓度处于仪器最佳检测范围内，备用。

1.3.结果大豆与菜用大豆中游离氨基酸如表1-1。毛豆中的游离氨基酸是大豆的2-3 倍，尤其是加拿大杨氏3号含量更高, 这可能预示对糖尿病会有更好的作用。

表1-1 菜用大豆提取物中游离氨酸含量（mg/g）

氨基酸	菜用大豆提取物	备注
			天冬氨酸	31.8
苏氨酸	24.96	必须氨基酸
			丝氨酸	56.76
谷氨酸	6.36
			甘氨酸	10.35
丙氨酸	7.65
			缬氨酸	14.49	必须氨基酸
蛋氨酸	4.68	必须氨基酸
			异亮氨酸	6.60	必须氨基酸
亮氨酸	12.75	必须氨基酸
			酪氨酸	7.70
苯丙氨酸	10.56	必须氨基酸
			组氨酸	56.66
赖氨酸	16.28	必须氨基酸
			精氨酸	68.84	0.28
脯氨酸	12.57	0.04
			总和	350.10	2.57

实验例2不同配比的提取物对糖尿病小鼠的影响

2. 材料与方法

2.1材料与仪器

Streptozotocin(STZ,Sigma公司，CAS Number：18883-66-4)；二甲双胍（北京京丰制药有限公司）；MK3型酶标仪（美国Thermo Electron公司）；Applied Biosystems® 的 实时荧光定量PCR仪（美国ABI公司）；MDA、SOD、GSH、考马斯亮蓝试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：20151229）；SPF级ICR雄性小鼠，体质量（18-22）g（长春市亿斯实验动物技术有限责任公司，合格证号：SCXK-（吉）-2010-0001）120只。

2.2实验动物模型建立与分组

ICR小鼠120只，适应性饲养7天后，随机选取10只为空白对照组，喂正常饲料，其他110只，喂高脂饲料30天，于第30天晚间禁食不禁水，第31天随机抽取30只眼眶取血，离心取血清测TC、TG，高于正常值，如表1。腹腔注射100mg/kgSTZ柠檬酸缓冲液（0.1M PH=4.4），继续喂高脂饲料10天，第10天晚间禁食不禁水，于第11天尾部采血测定血糖值，测空腹血糖≥11.1mmol/L为造模成功，选取成模中80只小鼠，随机分为8组，分别为空白组（A组）、模型组（B）、二甲双胍组（C）、菜用大豆饮品D组（人参提取物：菜用大豆提取物：落叶松提取物1:2：20）、菜用大豆饮品E组（人参提取物：菜用大豆提取物1:1）、菜用大豆饮品F组（人参提取物：菜用大豆提取物1:2），每组10只，空白对照组和模型组每天灌胃生理盐水，其他给药组分别灌胃相应药物，0.1mL/10g剂量给药，共给药40天。

2.3结果与分析

2.3.1对2型糖尿病模型小鼠空腹血糖量的影响

如表2所示，造模成功后小鼠空腹血糖值明显升高，与空白对照组有显著性差异（P＜0.01），给药治疗后，实验组小鼠空腹血糖值均呈下降趋势。持续给药四周后，与模型组相比，二甲双胍组、F组空腹血糖值显著降低（P＜0.01），其他给药组小鼠空腹血糖值也有所降低，但无明显差异，无统计学意义。

表2-1 不同配比的提取物对2型糖尿病模型小鼠空腹血糖量的影响

注;与空白组，#P＜0.05，##P＜0.01；与模型组，*P＜0.05，**P＜0.01

2.3.2 对2型糖尿病小鼠葡萄糖耐受量的影响

如说明书附图1所示，C组和D组血糖曲线下面积AUC明显低于模型组，且具有差异性极显著性（P＜0.05）。结果表明，菜用大豆提取物添加落叶松提取物后能明显改善2型糖尿病小鼠的葡萄糖耐受情况，并且可以快速降低餐后血糖，与二甲双胍给药组效果相当。

2.3.3对肝脏中TNF-α、IDE的mRNA表达量的影响

给药各组肝脏中基因的表达量与模型组相比显著降低，综合两个基因表达量可见C组和D组相对降低TNF-α、IDE的表达量明显较好于二甲双胍组，采用大豆饮品对2型糖尿病小鼠降糖作用与TNF-α、IDE表达水平具有相关型（说明书附图2和说明书附图3）。

实验例3不同配比的提取物抗肺纤维化的活性研究

3.1 实验动物、试剂和主要仪器

SPF 级昆明种小鼠 60 只，雌雄各半，体质量18~22 g，长春市亿斯实验动物技术有限责任公司，合格证号：SCXK-（吉）-2010-0001）。小鼠分笼颗粒饲料喂养，自由进食、饮水，适应环境1周。TG，北京天然药物研究院（纯度 98% ，批号：120916）；BLM，浙江海正药业股份有限公司（批号：120901）；醋酸泼尼松（prednisone），天津药业集团新郑股份有限公司（批号：120406）；α平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin，α-SMA）和β肌动蛋白引物、逆转录和实时荧光定量PCR试剂盒（TaKaRa生物工程公司），MK3型酶标仪（美国Thermo Electron公司）；Applied Biosystems® 的 实时荧光定量PCR仪（美国ABI公司）； NOS、GSH（南京建成生物工程研究所，批号：20151229）。

3.2 模型动物的制备及分组给药

称小鼠体质量后，以3.5%水合氯醛350 mg·kg-1腹腔注射麻醉，仰卧固定，颈部常规消毒，无菌条件下行颈正中切口，钝性分离暴露气管，于气管软骨环间隙向心方向穿刺缓慢注入BLM 5 mg·kg-1，注药后立即将小鼠直立沿身体纵轴左右旋转3~5 min，使药液在双肺内均匀分布，缝合皮肤、消毒，待小鼠清醒后送SPF级观察室常规饲养。假手术组小鼠在相同条件下经气管注入等体积生理盐水。所有小鼠术后肌内注射苄星青霉素（benzathinebenzylpenicillin）预防感染。饲养和实验过程中遵守实验动物管理与保护的有关准则。小鼠随机分6组，每组10只（雌雄各半）：假手术组（A组）、模型组（B）、阳性药醋酸泼尼松5 mg·kg-1组（C组）、菜用大豆饮品D组（人参提取物：菜用大豆提取物：落叶松提取物1:2:0.2）、菜用大豆饮品E组（人参提取物：菜用大豆提取物1:1）。造模后次日ig给药，剂量均为100mg/kg，假手术组与模型组均以同体积ig蒸馏水，连续28 d。

3.3结果与分析

3.3.1不同配比的提取物对BLM诱导PF小鼠肺系数的影响

表3-1不同配比的提取物对BLM诱导PF小鼠肺系数的影响

组别	肺系数
		A	5.8
B	12.4##
		C	7.4*
D	6.7*
		E	9.4
F	10.3

##表示与假手术组相比差异显著，**表示与模型组相比差异显著。

造模后假手术小鼠活泼好动，毛发光泽发亮，体质量逐渐增加，嘴角红润，呼吸平稳，饮食及大便正常；模型组小鼠开始出现不同程度饮食、活动减少，精神萎靡，毛枯，1 周后出现体质量减轻，肺系数显著增高（P<0.01）；醋酸泼尼松组和给药组小鼠开始表现与模型组相似，1周后逐渐好转，体质量逐渐增加，活动增加，摄食好，肺系数明显下降，添加落叶松提取物组别的小鼠较没有添加的小鼠肺系数降低显著。

3.3.2不同配比的提取物对BLM诱导PF小鼠GSH和NOS的影响

表3-2不同配比的提取物对BLM诱导PF小鼠GSH和NOS的影响

组别	GSH（mg.g-1 protein）	NOS(kU.g-1 protein)
			A	68.3	98.3
B	15.4##	189.4##
			C	55.4**	134.3**
D	58.3**	113.2**
			E	44.7**	157.8**
F	47.2**	135.6**

##表示与假手术组相比差异显著，**表示与模型组相比差异显著。

与假手术对照组比较，模型组小鼠肺组织中GSH 的含量显著性降低，NOS水平显著性增加，给药组均能明显改善小鼠肺组织中GSH和NOS水平，给药组之间相比较，添加落叶松提取物组中GSH水平较其他两组有升高的趋势，NOS水平与其他区相比具有明显差异，说明添加落叶松提取物后，对小鼠的肺纤维化的治愈效果较不添加的效果明显。

3.3.3不同配比的提取物对BLM诱导PF小鼠肺组织α-SMA mRNA表达的影响

表3-3不同配比的提取物对BLM诱导PF小鼠肺组织α-SMA mRNA表达的影响

组别	α-SMA mRNA
		A	56.3
B	333.5##
		C	241.4**
D	156.7**
		E	269.4*
F	210.3**

##表示与假手术组相比差异显著，**表示与模型组相比差异显著。

与假手术对照组比较，模型对照组小鼠肺组织中α-SMA mRNA 的表达明显上调（P<0.05），提示BLM 气管内灌注引起了小鼠的 PF；与模型组比较给药组均能显著性的降低α-SMA mRNA的表达，添加落叶松提取物后α-SMA mRNA 的表达下调明显。

具体实施方案

实施例1

取无污染、无农药残留、有机栽培的新鲜菜用大豆，开水漂烫3min，去掉菜用大豆豆荚，得完整豆粒100g，再行蒸制20min，然后将蒸熟的完整的菜用大豆粒加1倍水，置于超高压提取装置中，采用300兆帕压力提取10min，得提取液，过滤得80ml。经测定含有脱落酸180微克。

实施例2

取无污染、无农药残留、有机栽培的新鲜菜用大豆，开水漂烫2min，去掉菜用大豆豆荚，得完整豆粒100g，再行蒸制20min，然后将蒸熟的完整的菜用大豆粒加1.5倍水，置于超高压提取装置中，采用300兆帕压力提取10min，得提取液，过滤得120ml。经测定含有脱落酸200微克。

实施例3

取无污染、无农药残留、有机栽培的新鲜菜用大豆，开水漂烫2min，去掉菜用大豆豆荚，得完整豆粒100g，再行蒸制30min，然后将蒸熟的完整的菜用大豆粒加2倍水，置于超高压提取装置中，采用300兆帕压力提取10min，得提取液，过滤得130ml。经测定含有脱落酸210微克。

实施例4

取无污染、无农药残留、有机栽培的新鲜菜用大豆，开水漂烫2min，去掉菜用大豆豆荚，得完整豆粒100g，再行蒸制30min，然后将蒸熟的完整的菜用大豆粒加3倍水，置于超高压提取装置中，采用400兆帕压力提取10min，得提取液，过滤得180ml。经测定含有脱落酸215微克。

实施例5

取无污染、无农药残留、有机栽培的无病疤，无锈病的5年生新鲜优质人参400g，去掉泥土杂质，经刷洗干净后，蒸制、干燥加工，得红参100g，然后粉碎成40目粉末，加6倍量水，置于超高压提取装置中，采用300兆帕压力提取2次，每次15min，合并2次提取液，过滤，滤液真空减压浓缩，干燥得红参提取物20g。按国家药典法测定提取物中含有人参总皂苷3.5%，AFG经高效液相色谱法测定，含量2%。

实施例6

取无污染、无农药残留、有机栽培的无病疤，无锈病的5年生新鲜优质人参400g，去掉泥土杂质，经刷洗干净后，蒸制、干燥加工，得红参100g，然后粉碎成40目粉末，加6倍量水，置于超高压提取装置中，采用300兆帕压力提取2次，每次15min，合并2次提取液，过滤，滤液真空减压浓缩，干燥得红参提取物21g。按国家药典法测定提取物中含有人参总皂苷3.4%，AFG经高效液相色谱法测定，含量2%。

实施例7

取无污染、无农药残留、有机栽培的无病疤，无锈病的5年生新鲜优质人参400g，去掉泥土杂质，经刷洗干净后，蒸制、干燥加工，得红参100g，然后粉碎成40目粉末，加10倍量水，置于超高压提取装置中，采用400兆帕压力提取2次，每次10min，合并2次提取液，过滤，滤液真空减压浓缩，干燥得红参提取物22g。按国家药典法测定提取物中含有人参总皂苷3.4%，AFG经高效液相色谱法测定，含量2%。

实施例8

取无污染、无农药残留、有机栽培的无病疤，无锈病的5年生新鲜优质人参400g，去掉泥土杂质，经刷洗干净后，蒸制、干燥加工，得红参100g，然后粉碎成40目粉末，加10倍量水，置于超高压提取装置中，采用400兆帕压力提取2次，每次10min，合并2次提取液，过滤，滤液真空减压浓缩，干燥得红参提取物22g。经国家药典法测定提取物中含有人参总皂苷3.5%，AFG1.9%。

实施例9

取落叶松提取物2.0g，用水溶解，过滤，经HPLC测定含有二氢槲皮素4.2%，阿拉伯半乳聚糖78.3%。

实施例例10

取落叶松提取物5.0g，用50%乙醇水溶液溶解，过滤，经HPLC测定含有二氢槲皮素12.5%，阿拉伯半乳聚糖57.4%。

实施例11

纯净水500mL，菜用大豆提取物5g，红参提取物2g，落叶松提取物0.1g，柠檬酸3g，柠檬酸钠3g，使用香精0.1g充分溶解，中空纤维滤膜过滤后灭菌、分装得到本产品，产品室温下放置6个月后，产品澄清透明、无沉淀出现。

实施例12

纯净水1000mL，菜用大豆提取物18g，红参提取物8g，落叶松提取物0.7g，柠檬酸6g，柠檬酸钠6g，使用香精0.3g充分溶解，中空纤维滤膜过滤后灭菌、分装得到本产品，产品4℃下放置6个月后，产品澄清透明、无沉淀出现，经测定产品中AFG的含量为0.5%，二氢槲皮素的含量0.065%。

实施例13

纯净水100mL，菜用大豆提取物18g，红参提取物8g，落叶松提取物0.4g，柠檬酸6g，柠檬酸钠6g，使用香精0.3g充分溶解，中空纤维滤膜过滤后灭菌、分装得到本产品，产品4℃下放置12个月后，产品澄清透明、无沉淀出现，经测定产品中AFG的含量为3.6%，二氢槲皮素的含量0.37%。

实施例13

纯净水1000mL，菜用大豆提取物18g，红参提取物8g，落叶松提取物0.4g，柠檬酸6g，柠檬酸钠6g，使用香精0.3g充分溶解，中空纤维滤膜过滤后灭菌、分装得到本产品，产品4℃下放置24个月后，产品澄清透明、无沉淀出现。

实施例14

纯净水1000mL，菜用大豆提取物18g，红参提取物8g，柠檬酸6g，柠檬酸钠6g，使用香精0.3g充分溶解，中空纤维滤膜过滤后灭菌、分装得到本产品，产品4℃下放置36个月后，产品澄清透明、无沉淀出现。

实施例15

利用实施例13和实施例14中的产品，分别给两组肺纤维化患者服用，发现服用实施例13产品的患者呼吸困难症状减轻，干咳次数减少、乏力症状明显好转、体内各指标得到较好的改善。

说明书附图说明

图1是提取物对2型糖尿病小鼠葡萄糖耐受量的影响图

图2是提取物对肝脏中TNF-α的mRNA表达量的影响图

图3是提取物对肝脏中IDE的mRNA表达量的影响图。

Claims (5)

1.本发明公开一种人参菜用大豆保健饮品的制备方法及其保健用途，其特征在于由以下原料制成：水、菜用大豆提取物、红参提取物、落叶松提取物、食用盐、柠檬酸钠、柠檬酸，菜用大豆保健饮品主要是通过以下步骤实现：

步骤一：取无污染、无农药残留、有机栽培的新鲜菜用大豆，开水漂烫1-3min，利用扒皮机去掉菜用大豆豆荚，得完整豆粒，再行蒸制20-30min，备用；

步骤二：将步骤一蒸熟的完整的菜用大豆粒加1-6倍水，置于超高压提取装置中，提取5-20min，得提取液，备用；

步骤三：取无污染、无农药残留、有机栽培的无病疤，无锈病的5年生新鲜优质人参加工的红参，然后粉碎成20-40目颗粒，备用；

将步骤三加工好的红参粉加6-10倍水，置于超高压提取装置中，提取2次，每次5-20min，合并2次提取液，真空减压浓缩，干燥得红参提取物（II）；

步骤四：取步骤二的菜用大豆提取液（I）与步骤三的红参提取物（II），按一定比例混合，加入适量水使之充分溶解，呈透明溶液状态；然后取适量的落叶松提取物、食用香精、柠檬酸、柠檬酸钠，加水使之充分溶解，并与菜用大豆提取物（I）红参提取物（II）的溶液充分混匀，过滤，得滤液，备用;

步骤五：将步骤4所得滤液加适量天然矿泉水稀释，中空纤维滤膜过滤后灌装，每罐200-350mL，得到成品人参菜用大豆饮品。

2.根据权利要求1所述制备的人参菜用大豆保健饮品，其特征在于步骤二所得提取液中含有脱落酸、阿拉伯半乳聚糖、二氢槲皮素、含有游离氨基酸，维生素C，含有人参皂苷，含有红参精氨酸糖苷。

3.根据权利要求1所述人参菜用大豆保健饮品的制备方法，其特征在于步骤一中使用的新鲜菜用大豆还可以是刀豆、豌豆、芸豆、扁豆、荷兰豆中的一种或者两种以上的混合。

4.根据权利要求1所述制备的人参菜用大豆饮品，其特征在于饮品能够用于预防治疗肺纤维化产品的制备。

5.根据权利要求1所述制备的人参菜用大豆饮品，其特征在于饮品能够用于预防糖尿病产品的制备。