CN108152281A - 一种壳聚糖溶液改性试纸制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种壳聚糖溶液改性试纸制备方法。将壳聚糖改性层析纸裁成10×3cm的条状一张，在一端打孔，系上一根细线，在另一端2～3厘米处用铅笔画一横线，中间画一圆点；用毛细管汲取实验溶液，在原点处点样，样点直径应控制在5mm以内，每点一下用吹风机吹干，将点样好的层析纸条悬挂在层析缸中进行层析，到层析至终点线时结束，展开后待晾干；拿出裁剪好的壳聚糖改性层析纸条，用笔画下溶剂前沿的位置，然后用热风吹干烘干；均匀喷上显色剂进行显色，不间隔；用吹风机吹干后，观察斑点，确定其几何中心位置；量取数值，计算各自的Rf值。本发明的有益效果是试纸活性高，分离快，斑点清晰。

Description

一种壳聚糖溶液改性试纸制备方法

技术领域

本发明属于化学技术领域，涉及一种壳聚糖溶液改性试纸制备方法。

背景技术

壳聚糖(chitosan)又称脱乙酰甲壳素，是由自然界广泛存在的几丁质(chitin)经过脱乙酰作用得到的，化学名称为聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-B-D葡萄糖。自1859年，法国人Rouget首先得到壳聚糖后，这种天然高分子的生物官能性和相容性、血液相容性、安全性、微生物降解性等优良性能被各行各业广泛关注，在医药、食品、化工、化妆品、水处理、金属提取及回收、生化和生物医学工程等诸多领域的应用研究取得了重大进展。针对患者，壳聚糖降血脂、降血糖的作用已有研究报告。同时，壳聚糖被作为增稠剂、被膜剂列入国家食品添加剂使用标准GB-2760。

采用纸质分离法、以壳聚糖改性基底、选用正己烷—异丙醇为展开剂，羟胺—氯化铁进行显色，不同的壳聚糖浓度、不同醋酸浓度配制壳聚糖溶液改性试纸，对邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯进行分离，考察在不同条件下改性的试剂对分离效果的影响，并对不同活性的试纸对分离效果的影响进行对比。

发明内容

本发明的目的在于提供一种壳聚糖溶液改性试纸制备方法。

本发明所采用的技术方案是按照以下步骤进行：

1、将壳聚糖改性层析纸裁成10×3cm的条状一张，在一端打孔，系上一根细线，在另一端2～3厘米处用铅笔画一横线，中间画一圆点；

2、用毛细管汲取实验溶液，在原点处点样，样点直径应控制在5mm以内，每点一下用吹风机吹干，点2～3次为佳；

3、将点样好的层析纸条悬挂在层析缸中进行层析，注意点样线要高于层析液面，滤纸不要贴在层析缸璧上，到层析至终点线时结束，展开后待晾干；

4、拿出裁剪好的壳聚糖改性层析纸条，用笔画下溶剂前沿的位置，然后用热风吹干烘干；

5、均匀喷上显色剂进行显色，不间隔；

6、用吹风机吹干后，观察斑点，确定其几何中心位置；

7、量取数值，计算各自的Rf值。

进一步，壳聚糖改性层析纸的制备方法如下：

将滤纸顺着纹理方向剪成10×3厘米的滤纸条40张备用，用盐酸溶液浸泡半个钟头，并用蒸馏水洗至中性晾干备用，精确称取0.5000g壳聚糖溶于100mL1.0％醋酸溶液中配成0.5％的壳聚糖溶液，提前将层析纸用稀盐酸进行预处理，然后将预处理后的层析纸泡入配好的壳聚糖溶液中进行改性，半小时后取出室温阴风干备用。

进一步，显色剂的制备方法：

①a.盐酸羟胺10g溶于50ml水，用乙醇稀释至100ml，阴凉处保存；b.氢氧化钾10g溶于少量水中，加100ml乙醇；

②氯化铁5g溶于10ml 36％盐酸溶液中，加乙醚100ml摇匀，置棕色瓶内保存。使用时将试液a与b按1：2混合，过滤掉沉淀物，清液放冰箱保存，先喷此混合液，待微干，再喷试液②，贮于棕色瓶中备用。

本发明的有益效果是试纸活性高，分离快，斑点清晰，改性试纸的壳聚糖溶液酸度在1％时，改性后的试纸分离效果最好，壳聚糖浓度配成0.5％时，分离效果最好。

附图说明

图1是展开剂的影响示意图；

图2是标准溶液比移值示意图；

图3是不同壳聚糖酸度下的示意图；

图4是重现性对比示意图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。

本发明步骤如下：

1、将壳聚糖改性层析纸裁成10×3cm的条状一张，在一端打孔，系上一根细线，在另一端2～3厘米处用铅笔画一横线，中间画一圆点；

2、用毛细管(循环使用)汲取实验溶液，在原点处点样，样点直径应控制在5mm以内，每点一下用吹风机吹干，点2～3次为佳；

3、将点样好的层析纸条悬挂在层析缸中进行层析(注意点样线要高于层析液面，滤纸不要贴在层析缸璧上)，到层析至终点线时(至另一端1～2cm处)结束，展开后待晾干。

4、拿出裁剪好的壳聚糖改性层析纸条，用笔画下溶剂前沿的位置，然后用热风吹干(或烘箱60℃)烘干。

5、均匀喷上显色剂进行显色，不间隔。

6、用吹风机吹干后，观察斑点，确定其几何中心位置。

7、量取数值，计算各自的Rf值

壳聚糖改性层析纸的制备方法如下：

将滤纸顺着纹理方向剪成10×3厘米的滤纸条40张备用，用盐酸溶液浸泡半个钟头，并用蒸馏水洗至中性晾干备用，精确称取0.5000g壳聚糖溶于100mL1.0％醋酸溶液中配成0.5％的壳聚糖溶液，提前将层析纸用稀盐酸进行预处理，然后将预处理后的层析纸泡入配好的壳聚糖溶液中进行改性，半小时后取出室温阴风干备用；

显色剂的制备方法：

1、显色剂：羟胺—氯化铁(①a.盐酸羟胺10g溶于50ml水，用乙醇稀释至100ml，阴凉处保存；b.氢氧化钾10g溶于少量水中，加100ml乙醇。②氯化铁(FeCl3·6H2O)5g溶于10ml 36％盐酸溶液中，加乙醚100ml摇匀，置棕色瓶内保存。使用时将试液①a.与①b.按1：2混合，过滤掉沉淀物，清液放冰箱保存。先喷此混合液，待微干，再喷试液②)，贮于棕色瓶中备用。

2、展开剂：100ml容量用蒸馏水清洗三次放入烘箱烘干，精确量取99ml正己烷，再用移液管移取1ml异丙醇。

3、标准溶液的配制

按照常规方法，配制100mg/L邻苯二甲酸二甲酯和邻苯二甲酸二丁酯溶液于容量瓶中备用。

展开剂对标准溶液层析的影响：如图1所示，左边为单展开剂(正己烷，异丙醇)层析结果；右边为展开剂与标准溶液共同层析结果。结果表明：在展开剂与标准溶液共同作用下，层析距离增加，比移值增大，更利于分离。

标准溶液的比移值如表1所示：

表1

分别取两种标准溶液5ml、10ml、20ml、25ml、50ml用甲醇溶液缓慢定容至100ml容量瓶中，依次编号1到5，如图2所示，分别点两种溶液于试纸上用事先配制好的展开剂以上行法展开，展开后，干燥。将层析纸用羟胺-氯化铁熏2分钟进行显色，分别测定比移值并观查层析情况。由实验结果可知，样品浓度小于10mg/L时，由于浓度太小，显色不明显，确定的中心点和斑点前沿的具体位置就不够精确，浓度大于10mg/L时，由于浓度偏大，所需显色剂量增多，再加上浓度大不易分离，拖尾现象比较严重，相对来讲浓度在10mg/L时两种溶液可以完全分离，故本论文中均采用10mg/L的样品进行实验。

壳聚糖改性基底对分离的影响：不同壳聚糖浓度下的比移值如表2所示：

表2

分别进行了0.1％、0.25％、0.5％、0.75％、1％壳聚糖浓度改性层析纸对分离的影响实验。结果表明，采用0.1％、0.25％壳聚糖改性后的层析纸进行上面两种溶液的分离，比移值差值减小，但斑点间距较小。壳聚糖浓度为0.5％两种可完全分离，且斑点间距较大。而壳聚糖浓度为0.75％、1％时，斑点拖尾。这可能因为壳聚糖浓度增大，对试验溶液吸附作用增强所致。是以，课题中选定0.5％壳聚糖溶液对试纸进行改性。

壳聚糖溶液酸度对分离的影响：不同壳聚糖酸度下的比移值如表3所示。

表3

改性试纸的壳聚糖溶在醋酸中,故醋酸的量对分离有一些影响。如图3所示，分别以0.5％、1％、2.5％、5％不同浓度的醋酸制备的0.5％的壳聚糖溶液编号1到4来改性层析纸，分离两种标准溶液。结果表明：醋酸浓度小于百分之一时，分离效果不明显；醋酸浓度为百分之一时，斑点分离的较彻底，当醋酸浓度大于百分之一时，由于壳聚糖分子中氨基质子化程度加重，因而分离效果比较差。因而，课题中选定1％醋酸配备壳聚糖对试纸进行改性。

重现性试验：以1％的酸度制备0.5％的壳聚糖改性过的层析纸与未改性过的层析纸对不同样品进行分离对比实验，如图所示。由图4结果可见，壳聚糖改性层析纸分离邻苯二甲酸酯类物质明优于未改性层析纸，这为纸色谱法分离邻苯二甲酸酯类物质提供了一种较好的分离方法。图4中左边为采用壳聚糖改性层析纸，右边为采用未改性层析纸。

综上，邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯纸质分离效果收试纸活性、改性试纸溶液的酸度和浓度影响，试纸活性越高，分离越快，斑点越清晰，改性试纸的壳聚糖溶液酸度在1％时，改性后的试纸分离效果最好，壳聚糖浓度配成0.5％时，分离效果最好。

以上所述仅是对本发明的较佳实施方式而已，并非对本发明作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施方式所做的任何简单修改，等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。

Claims (3)

1.一种壳聚糖溶液改性试纸制备方法，其特征在于按照以下步骤进行：

1、将壳聚糖改性层析纸裁成10×3cm的条状一张，在一端打孔，系上一根细线，在另一端2～3厘米处用铅笔画一横线，中间画一圆点；

2、用毛细管汲取实验溶液，在原点处点样，样点直径应控制在5mm以内，每点一下用吹风机吹干；

3、将点样好的层析纸条悬挂在层析缸中进行层析，注意点样线要高于层析液面，滤纸不要贴在层析缸璧上，到层析至终点线时结束，展开后待晾干；

4、拿出裁剪好的壳聚糖改性层析纸条，用笔画下溶剂前沿的位置，然后用热风吹干烘干；

5、均匀喷上显色剂进行显色，不间隔；

6、用吹风机吹干后，观察斑点，确定其几何中心位置；

7、量取数值，计算各自的Rf值。

2.按照权利要求1所述一种壳聚糖溶液改性试纸制备方法，其特征在于：所述壳聚糖改性层析纸的制备方法如下：

将滤纸顺着纹理方向剪成10×3厘米的滤纸条40张备用，用盐酸溶液浸泡半个钟头，并用蒸馏水洗至中性晾干备用，精确称取0.5000g壳聚糖溶于100mL1.0％醋酸溶液中配成0.5％的壳聚糖溶液，提前将层析纸用稀盐酸进行预处理，然后将预处理后的层析纸泡入配好的壳聚糖溶液中进行改性，半小时后取出室温阴风干备用。

3.按照权利要求1所述一种壳聚糖溶液改性试纸制备方法，其特征在于：所述显色剂的制备方法：

①a.盐酸羟胺10g溶于50ml水，用乙醇稀释至100ml，阴凉处保存；b.氢氧化钾10g溶于少量水中，加100ml乙醇；

②氯化铁5g溶于10ml 36％盐酸溶液中，加乙醚100ml摇匀，置棕色瓶内保存。使用时将试液a与b按1：2混合，过滤掉沉淀物，清液放冰箱保存，先喷此混合液，待微干，再喷试液②，贮于棕色瓶中备用。