CN108124794A - 一种大菱鲆亲鱼性腺促熟培育方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种大菱鲆性腺促熟培育方法，通过调节光时和水温能够有效的缩短亲鱼的促熟培育时间；结合养殖管理，使大菱鲆亲鱼的性成熟率提高。本发明通过为大菱鲆亲鱼提供优良独立封闭促熟培育环境、采用科学的控温控光方法和开发优质的亲鱼鲜饲料，从而实现了有效的缩短亲鱼人工促熟培育周期、提高亲鱼性腺发育成熟比例、获得优质受精卵的目的。

Description

一种大菱鲆亲鱼性腺促熟培育方法

技术领域

本发明属于海水养殖动物良种选育技术领域，具体为一种大菱鲆亲鱼性腺促熟培育方法。

背景技术

大菱鲆(Scophthal musmaximus L.)是原产于欧洲的底栖海水鱼类，具有口味鲜美、生长迅速、耐低温、易驯养等优点，是欧洲等地的优良海水养殖品种之一。大菱鲆自1992年引入我国，1999年突破生产性育苗技术以来，其养殖规模得到迅速发展，已经成为我国北方沿海重要的鱼类养殖品种。但近十多年以来，由于忽视良种培育研究，产业中种质衰退现象越来越严重，主要表现为苗种生长速度降低、白化率增高、商品鱼养成率降低等现象，再加之市场持续低迷，产业规模大幅萎缩，形势严峻。而导致这一现象发生的一个重要原因就是亲鱼的培育及繁殖不规范，性成熟发育率低，交配方案不科学(如近亲繁殖)，从而导致受精卵质量下降，并最终导致苗种质量的严重下降。所以，亲鱼的培育与繁殖技术亟需优化改进，而亲鱼促熟培育又是其中至关重要的环节，技术要求较高。这不仅因为亲鱼促熟培育环境因素要求较严格，包括水温、光照、水质、饵料的严格控制，而且这个阶段持续时间也相对较长，无论在良种培育过程中还是在商品苗种生产过程中，整个过程一般需要持续3个月左右的时间才能使30％左右的亲鱼达到性成熟，性成熟亲鱼数量及亲鱼促熟质量直接关系到苗种繁育数量和质量。目前，无论良种选育还是工厂化育苗场，亲鱼促熟培育技术都会是其核心技术，却不够成熟、规范，如温度控制、光照强度及光照时长调控和营养强化饵料等，导致市场供应苗种参差不齐，后期养殖问题越来越多，如苗种体质下降、疾病频发及养成率降低等，2015年再次爆发的药残事件，再次直接威胁到整个大菱鲆养殖产业生存。因此，如果能在缩短亲鱼促熟培育时间的同时，提高性成熟率，并兼得优质亲鱼，则可缩短亲鱼培育周期，增加亲鱼促熟成功率，减少成本支出；更重要的是获得优质受精卵，培育出优质苗种；同时减少亲鱼质量的影响。这对于通过构建选育家系方式的良种选育工作来说，将更有利于提高家系及个体遗传参数评估的准确性，从而进一步加快良种选育的进度；而对于苗种场而言，亲鱼促熟周期的缩短及质量提高，将直接减少亲鱼促熟成本，提高后期苗种培育周期、苗种质量和繁殖苗种的成活率，从而获得更显著的效益。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种大菱鲆性腺促熟培育方法，以解决目前大菱鲆亲鱼人工促熟效率低(性成熟率低、质量不稳定且周期长)，繁殖方法不科学的问题。本发明的方法能在缩短亲鱼促熟培育时间的同时，提高性成熟率，从而有利于规范大菱鲆亲鱼培育与繁殖的健康管理，为大菱鲆亲鱼培育与繁殖提供技术供保障。

申请人在长期的研究中发现，通过调节光时和水温能够有效的缩短亲鱼的促熟培育时间；结合养殖管理，使大菱鲆亲鱼的性成熟率提高，从而促成了本发明。

本发明所提供的大菱鲆亲鱼性腺促熟培育方法，是将待促熟的亲鱼移入促熟培育用的培育池中进行促熟；

所述的培育池，其面积为20-30m²，池深1.0m，所使用的养殖水为砂滤海水，水位深度60cm左右；盐度在30‰左右；水温14-16℃；PH 8.0左右；氨氮<0.2mg/L；充液态纯氧，溶解氧量7mg/L以上；亲鱼培育密度为每平方米6-8千克；

培育期间光照强度需调为200-600LUX；光照时间由每天8小时逐渐增至16 小时，每5天增加1小时；

水温先由14-16℃缓慢降至10℃，然后再由10℃逐步增至14℃，每5天变化(升高/降低)1℃；

在培育期间投喂鲜杂鱼作为饵料；

作为优选，在饵料鱼中添加维生素、矿物质和鱼油等，以提高卵/精子的质量；

其中实施例中一种饵料的配方具体如下：鲜杂鱼850g/kg，鱼粉90g/kg，鱼油45g/kg，卵磷脂5g/kg或裂壶藻5g/kg，脂溶性V_C 5g/kg，多维3g/kg，磷酸氢钙1g/kg，氯化胆碱1g/kg；

在促熟培育期间，不进行倒池操作，每天进行4次换水，每次换水的水量为70％；

每2周刷池1次，并使用低浓度甲醛(100ppm)和(10％)氟苯尼考(10ppm) 进行药浴。

性腺促熟的大菱鲆进行人工授精及孵化操作管理。

本发明通过为大菱鲆亲鱼提供优良独立封闭促熟培育环境、采用科学的控温控光方法和开发优质的亲鱼鲜饲料，从而实现了有效的缩短亲鱼人工促熟培育周期、提高亲鱼性腺发育成熟比例、获得优质受精卵的目的。

具体实施方式

下面通过实例对本发明进行详细叙述。

实施例1

本实施例是2017年在山东省海阳市黄海水产有限公司海珍品养殖场进行的，

1.亲鱼选择

(1)选取从国外引进的丹麦和法国大菱鲆杂交经人工选育而获得、体型完整、体色正常、摄食积极、无伤残且健康活泼的2013级G3代亲鱼200尾；

(2)雌雄比例为1:1，雌雄鱼均4龄，雌鱼2.5千克以上，体长35厘米以上，雄鱼1.5千克以上，体长25厘米以上；

2.亲育培育

(1)亲鱼日常管理

亲鱼池面积为25m²，池深1.0m，池底光滑，具有一定坡度(20cm)；水为砂滤海水，清澈见底，水位60cm左右；盐度在30左右；水温14-16℃；PH 8.0左右；氨氮<0.2mg/L；充液态纯氧，水体溶解氧量7mg/L以上；亲鱼培育密度为每池100尾；

食料以新鲜、优质杂鱼为主，在鲜料制作机器内搅碎做成合适大小的类圆柱状鲜料再进行投喂，每天定时投喂2次(上午7:00，下午16:30)，投喂前提前开灯20分钟左右，日投喂量为鱼总体重的1-2％，每次投喂后大排水(70％左右)，每天共排水4次(上午,7:00，中午12:00，下午16:30，晚上20:30)，以保池水清洁，每次排水5分钟后再进行一次小排水排出中心管周围由于水流旋转聚集的粪便；常流水日交换量为8-10个全量；每2周刷池1次，每月倒池1次，倒池采用泡沫箱为宜或直接一条条轻轻捞入相邻的干净池子中，切忌轻捞轻放，从而减少了倒池时对亲鱼的损伤(通过实践和调研发现，实际生产中倒池带来的损伤而致病情况比较普遍)，并使用甲醛(100ppm)和10％氟苯尼考粉(10ppm) 进行长流水药浴，并连续投喂拌入氟苯尼考粉的干颗粒配合饲料药饵，比例3‰即1千克饲料拌入氟苯尼考粉3克，连续投喂2天(1次/天)；以上这些细小的改进均大大降低了亲鱼发病的可能性，从而保证了亲鱼的存活率；

(2)亲鱼性腺促熟培育

在对亲鱼进行控温控光性腺促熟期间，除同亲鱼日常管理的相应条件外，亲鱼移入封闭的培育池；光照强度调为300LUX；使用智能电控开关控制光照时间，由每天8小时(早8:00-晚16:00)逐渐增至每天16小时(早4:00-晚20:00)，每5天增加1小时(每天早晚各增加6分钟)；水温先由14℃缓慢降至10℃，然后再由10℃逐步增至14℃，每5天变化(升高/降低)1℃；饵料投喂较高质量的小黄鱼，并向饵料鱼中添加维生素、矿物质和鱼油等，以提高卵的质量； 1kg饵料的配方为：鲜杂鱼850g/kg、鱼粉90g/kg、鱼油45g/kg、卵磷脂5g/kg 或裂壶藻(增强型)5g/kg、脂溶性V_C 5g/kg、、多维3g/kg、磷酸氢钙1g/kg、氯化胆碱1g/kg。

从2017年1月26日开始至2017年4月13日结束，控温控光促熟培育期间，每次大排水量70％左右，不进行倒池、鱼体电子芯片标记的扫描等剧烈操作，每 2周刷池1次，并使用低浓度甲醛(100ppm)和(10％)氟苯尼考(10ppm)药浴。对比实施例海阳市黄海水产有限公司于2017年1月2日开始至2017年4月10 日结束，促熟时间缩短了21天。

3.人工交配

亲鱼经过连续78天的控温控光促熟培育调控后，亲鱼达到性成熟。

(1)交配原则：采取家系建立原则，在不同远缘家系间，依据家系育种值大小设计的家系间交配优先次序方案进行人工授精，1雌对1-4雄或1雄对1-2雌；

(2)人工授精方法：

①把雌鱼从水中轻轻捞起置于放有海绵或毛巾的平台上，用毛巾擦干鱼体，然后顺着生殖腺，轻轻挤压鱼体腹部，把卵挤到广口塑料烧杯中待用。

②再从水中捞出雄鱼，擦干雄鱼鱼体和生殖孔区，然后轻轻用手挤压腹部，就会有精液流出，丢弃最初的精液以确保精液中不含有尿液，其余的精液则收集到一个小瓶内，放在冰上保存。

③把适量精液加入盛有卵的烧杯中，快速混匀，后加入少量海水，精液：卵子：水的体积比约为1:100:200，轻轻搅动后静置15分钟，待受精卵吸水膨胀后，用80目筛绢过滤，用海水冲洗多余的精液，将滤得的上浮受精卵放入盛有干净海水的量筒中，静置5分钟，记录上浮卵数量。取浮在上层的受精卵经消毒(防病原体带入孵化水体内)后放入盛有14-15℃的海水池孵化网箱中，微流水孵化。

④取卵和精液时，要对每条鱼进行扫描，确认其家系和身份，并作对应记录。

4.受精卵孵化：

(1)孵化设施：孵化网箱规格为60cm*60cm*80cm，12个孵化网箱固定于孵化池(25m²，深1.0m)中，使其在孵化池周边呈漂浮状态，孵化网需露出水面 10cm左右；

(2)孵化条件：光照度为600LUX，水温14-15℃，盐度30左右，溶解氧>7mg/L, 氨氮<0.2mg/L；

(3)孵化密度：布卵密度按40-60万粒/m³放入孵化网箱；经100个小时左右可孵化出仔鱼。

(4)孵化管理：为保证孵化池中溶氧充足，首先在孵化池中保持循环微流水，并放置若干气石充气，同时，在每个孵化网箱中央安置1个气石，以保持微水流和水流动，使受精卵在水体中呈均匀悬浮、滚动状态。另外，每天早8：00 点和晚20:00点及时吸一次沉卵，直至孵化第3天下午收卵布桶为止，且吸沉卵工具使用前后注意消毒。

实施例2

2017年在山东省海阳市黄海水产有限公司海珍品养殖场对本发明方法进行了小规模生产应用，经过78天的控温控光促熟，其中41.0％的大菱鲆家系亲鱼达到了性成熟，亲鱼存活率100％。同时，通过采用优良人工选育亲鱼、更优的亲育培育管理模式、制定高效最优人工交配方案以及分阶段优化培育方法，使近交系数控制在0.005以下，受精卵上浮率达到85％以上，且上浮受精卵成活率80％以上，共计培育大菱鲆家系60个，优质大菱鲆苗种15万尾，商品苗出苗率为45.6％，白化率低于2％。

同期在海阳市黄海水产有限公司采用同批次亲鱼进行亲鱼人工促熟培育和人工交配的对比实例中，与本发明不同的步骤主要如下：

1.亲育培育阶段：

(1)对比公司采用传统的亲鱼饲料配方，包括鲜杂鱼、复合维生素和鸡蛋黄，营养不够全面；

(2)公司采用恒长时间光照且光照强度偏低(低于100LUX)；

(3)没有降温调节步骤且升温速度过快(2天/℃)；

(4)甲醛(300ppm)和(10％)氟苯尼考(30ppm)进行药浴浓度均较高且每周1次。

按照公司的方法，在经历过99天性腺促熟培育亲鱼性成熟比例仅为20.0％，发育时间近3个半月，亲鱼存活率90％，受精卵上浮率在70％以下，上浮受精卵成活率也只有60％左右，培育苗种30万，出苗率28.4％，白化率9.6％。以上这些数据均表明，无论在亲鱼发育质量、数量及促熟周期方面，还是在苗种存活率和白化率方面，本发明均具有明显优势。

Claims (8)

1.一种大菱鲆亲鱼性腺促熟培育方法，其特征在于，所述的方法是将待促熟的亲鱼移入培育池中进行促熟培育；

培育期间光照强度为200-600LUX；光照时间由每天8小时逐渐增至16小时，每5天增加1小时；

水温先由14-16℃缓慢降至10℃，然后再由10℃逐步增至14℃；每5天变化1℃；

在培育期间投喂鲜杂鱼作为饵料。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的培育池的面积为20-30m²，池深1.0m，所使用的养殖水为砂滤海水，水位深度60cm左右；盐度在30‰左右；PH 8.0左右；氨氮<0.2mg/L；充液态纯氧，溶解氧量7mg/L以上；亲鱼培育密度为每平方米6-8千克。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的饵料中添加维生素、矿物质和鱼油。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的饵料的配方如下：鲜杂鱼850g/kg，鱼粉90g/kg，鱼油45g/kg，卵磷脂5g/kg或裂壶藻5g/kg，脂溶性V_C 5g/kg，多维3g/kg，磷酸氢钙1g/kg，氯化胆碱1g/kg。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在培育期间，不进行倒池操作，每天进行4次换水，每次换水的水量为70％。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在培育期间，每周刷培育池1次，并使用低浓度甲醛和10％的氟苯尼考进行药浴。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的甲醛加入的浓度为100ppm，氟苯尼考的加入浓度为10ppm。

8.权利要求1所述的方法获得的性腺促熟的大菱鲆进行人工授精及孵化操作。