CN108095077A - 一种利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，利用凝结芽孢杆菌对竹笋进行发酵，使其在发酵过程中产生乳酸，使产物具有浓郁的乳酸风味；同时产生的纤维素酶降解竹笋纤维；并产生抗逆性较强的芽孢；发酵产物采用真空冷冻干燥处理，获得含有凝结芽孢杆菌的低纤维竹笋酵素粉。产物测定数据表明，与其他凝结芽孢杆菌作为发酵菌种相比，本发明所用菌株进行发酵，其产物活菌数可提高20.3％，产物溶解质量百分数提高20.3％，抗逆性测试通过率提高9.30％。该技术制备的益生菌竹笋酵素粉，可用于功能食品的开发。

Description

一种利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法
(一)技术领域
本发明涉及一种利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法及其产物和应用。
(二)背景技术
益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。人体、动物体内有益的细菌或真菌主要有：酪酸梭菌、乳杆菌、双歧杆菌、放线菌、酵母菌等，其广泛应用于食品安全以及生命健康领域。
2016年5月30日发布的《关于发酵乳杆菌CECT5716等3个菌种的公告(2016年第6号)》，将凝结芽孢杆菌列入《可用于食品的菌种名单》。
凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)属碱性厌氧菌，既产芽孢，又产乳酸，是益生菌领域中的后起之秀，属于肠道乳酸菌，又被称为“有孢子性乳酸菌”，是经美国FDA批准的一种“普遍认为安全”的芽孢杆菌类乳酸菌。凝结芽孢杆菌不仅具有乳酸菌和双歧杆菌的保健功效，还具有较强的耐高温、耐酸、耐胆碱等抗逆性，且对肠道致病菌具有较强的抑制作用。研究表明，凝结芽孢杆菌对人工胃液的酸性条件耐受性极强，其存活不受影响，明显优于其他微生态制剂，能顺利通过胃进入肠道。口服后，在盲肠、结肠和直肠中定植，发酵产生大量抗菌凝固素、乳酸、氨基酸、维生素和多种消化酶。凝结芽孢杆菌芽孢在人体中约4～6h便可萌发，其中85％的菌体可顺利通过消化系统，最终于肠道中萌发并繁殖。可用于治疗因肠道菌群失调引起的各种消化问题。
现有的竹笋类益生菌发酵制品，都是采用乳杆菌等传统益生菌(如嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌等)进行发酵处理。凝结芽孢杆菌作为一种新型益生菌，尚无以凝结芽孢杆菌发酵制备富含活性益生菌的竹笋酵素粉的相关报道。传统乳杆菌抗逆性较弱，通过胃酸屏障时存活率较低；所以必须经过微囊包埋等技术，增加了成本及技术难度；产品加工过程中也会出现活菌率降低的问题；而且保质期较短、储存条件要求较高。竹笋中含有大量的纤维，人体不易消化，食用过多会对胃肠道造成损伤。现有的以乳酸菌对竹笋进行发酵的工艺，只是增加了乳酸的风味，并不能降解竹笋纤维。
基于以上现有技术的不足之处，需要开发新的技术，既能改善竹笋风味；又能保留益生菌的活性，并使其能顺利通过胃肠屏障；还能降解竹笋中的纤维，使其转化成易于消化的营养成分。
(三)发明内容
本发明目的是提供一种利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，采用竹笋为原料，经匀浆后，利用凝结芽孢杆菌发酵处理；使其在发酵过程中降解竹笋纤维；并产生抗逆性较强的芽孢；发酵产物采用真空冷冻干燥或喷雾干燥处理，获得含有凝结芽孢杆菌的低纤维竹笋酵素粉；并将其作为食品的配料，用于功能食品的开发。
本发明采用的技术方案是：
本发明提供一种利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，所述方法为：将凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)接种至竹笋匀浆液中，在25～45℃、80～180r/min条件下密封发酵(装量为容积的2/3)培养，获得发酵液；将发酵液与保护剂混合，干燥，获得竹笋酵素粉；所述保护剂为海藻糖；所述竹笋匀浆液是将新鲜竹笋清洗(除杂、切成1cm长(或见方)的小段(或小块))后加入无菌水匀浆，获得竹笋匀浆液。
进一步，所述凝结芽孢杆菌在接种前，先进行斜面活化和扩大培养，将扩大培养液以体积浓度5～20％的接种量接种至竹笋匀浆液中。
进一步，所述斜面活化培养是将凝结芽孢杆菌接种至斜面培养基，在35～45℃活化培养12～36h，获得斜面孢子；所述斜面培养基终浓度组成为：蛋白胨5～15g/L，柠檬酸氢二铵1～3g/L，葡萄糖10～30g/L，0.5～2mL/L吐温-80，乙酸钠1～10g/L，磷酸二氢钾1～3g/L，硫酸镁0.1～1g/L，硫酸锰0.1～1g/L，琼脂15～20g/L，溶剂为蒸馏水，pH 6～7；
所述扩大培养是将斜面孢子用无菌水调整OD600为1.0的菌悬液；将菌悬液按体积浓度5-10％的接种量接种至液体培养基，在30～45℃，100～200r/min条件下培养12～36h，获得扩大培养液；所述液体培养基终浓度组成为：蛋白胨5～15g/L，柠檬酸氢二铵1～3g/L，葡萄糖10～30g/L，0.5～2mL/L吐温-80，乙酸钠1～10g/L，磷酸二氢钾1～3g/L，硫酸镁0.1～1g/L，硫酸锰0.1～1g/L，溶剂为蒸馏水，pH 6～7。
进一步，竹笋匀浆液相对密度为1.0～1.5，糖度为1.0～3.0，pH调整为6～7。相对密度用无菌水和麦芽糊精调节，糖度用无菌水和葡萄糖调节。pH用0.1mol/L的HCl水溶液和0.1mol/L的NaOH水溶液调整。
进一步，所述保护剂添加量以发酵液体积计为50～200g/L。
进一步，干燥方法为真空冷冻干燥：真空度5～15Pa，温度-55～-63℃。
进一步，所述竹笋匀浆液制备方法为：将新鲜竹笋，除杂、切成小段或小块，获得预处理后的竹笋；向预处理后的竹笋中加无菌水，匀浆，得到竹笋匀浆液；所述无菌水体积用量以预处理后的竹笋重量计为4～10ml/g。
进一步，所述新鲜竹笋包括毛竹(Phyllostachys pubescens)笋、麻竹(Dendrocalamus latiflorus Munro)笋、箭竹(Fargesia spathacea)笋、雷竹(Phyllostachys propinqua)笋、慈竹(Neosino calamus affinis)笋、绿竹(Dendrocalamopsis oldhami)笋、桂竹(phyllostachys bambusoides)笋、哺鸡竹(Phyllostachys glabrata)笋、刚竹(Phyllostachys viridis)笋、苦竹(Pleioblastusamarus)笋、方竹(Chimonobambusa Makino)笋、毛金竹(Phyllostachys nigra)笋或甜龙竹(Dendrocalamus hamiltonii Neeset Arn.ex Munro)笋。
本发明所述凝结芽孢杆菌优选为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)PCM1843，购买自中国普通微生物菌种保藏中心，编号1.2009。
本发明所述竹笋酵素粉可应用于食品、保健食品的制备。
本发明所述无菌水是指经121℃灭菌20min的蒸馏水。
与现有技术相比，本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，利用凝结芽孢杆菌对竹笋进行发酵，使其在发酵过程中产生乳酸，使产物具有浓郁的乳酸风味；同时产生的纤维素酶降解竹笋纤维；并产生抗逆性较强的芽孢；发酵产物采用真空冷冻干燥处理，获得含有凝结芽孢杆菌的低纤维竹笋酵素粉。产物测定数据表明，与其他凝结芽孢杆菌作为发酵菌种相比，本发明所用菌株进行发酵，其产物活菌数可提高20.3％，产物溶解质量百分数提高20.3％，抗逆性测试通过率提高9.30％。本发明制备的益生菌竹笋酵素粉，可用于功能食品的开发。
(四)附图说明
图1竹笋酵素粉(真空冷冻干燥样品)。
(五)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
本发明所述竹笋为普通食用竹笋。
实施例1
一、竹笋酵素粉的制备
1)菌种活化：将凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)PCM1843(购买自中国普通微生物菌种保藏中心，编号1.2009)保藏菌种转接于斜面菌种培养基，于37℃活化培养18h，获得斜面孢子。斜面菌种培养基组成：蛋白胨10g，柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g，吐温-80 1mL，乙酸钠5g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，硫酸锰0.5g，琼脂18g，蒸馏水1000mL，pH 6.5，115℃，灭菌30min。
2)液体菌种制备：用无菌水将斜面孢子洗下，并将其OD600用无菌水调整为1.0，制得菌悬液；将菌悬液按照体积浓度8％的接种量，转接于液体菌种培养基中，于37℃，150r/min条件下培养18h，制得液体菌种。液体菌种培养基组成：蛋白胨10g，柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g，吐温-80 1mL，乙酸钠5g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，硫酸锰0.5g，蒸馏水1000mL，pH 6.5，115℃，灭菌30min。
3)匀浆：将新鲜竹笋，除杂、切成1cm长(或见方)的小段(或小块)，称取100g竹笋小段(或小块)加600mL无菌纯化水，匀浆，得到竹笋匀浆液；
4)相对密度调整：用无菌水和麦芽糊精(调节匀浆液相对密度，同时作为冷冻干燥过程中益生菌的辅助保护剂)，竹笋匀浆液的相对密度调整为1.2。
5)用无菌水和葡萄糖，将步骤4)竹笋匀浆液的糖度调整到1.5；并用0.1mol/L的HCl水溶液和0.1mol/L的NaOH水溶液将pH调整为6.5。
6)以步骤5)调整pH后的竹笋匀浆液质量计，将步骤2)制备的液体菌种以质量分数10％的接种量加入到竹笋匀浆液中。接种后的竹笋匀浆液装入500mL三角瓶(装量为容积的2/3)，密封，37℃保温，转速100r/min，发酵48h。
7)发酵结束后，每100mL发酵产物中添加10g海藻糖，混匀溶解，于真空度15Pa，温度-60℃条件下冷冻干燥。获得富含凝结芽孢杆菌的竹笋酵素粉，活菌数(活菌+芽孢)6.5×109CFU/g。溶解质量百分数可达91.8％。抗逆性测试结果表明，凝结芽胞杆菌通过率为96.4％。
二、竹笋酵素粉性能检测
a、活菌数测定方法
1材料
(1)生理盐水
(2)MRS培养基：蛋白胨5g，柠檬酸氢二铵1g，葡萄糖10g，吐温-80 0.5mL，乙酸钠1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.1g，硫酸锰0.1g，蒸馏水1000mL，琼脂15g，pH 6，115℃，灭菌30min。
2操作步骤
(1)样品用生理盐水进行梯度稀释。
(2)选择2～3个合适的稀释度，每个稀释度吸取0.1mL样品分别加入到培养皿中，倾入冷却至50℃左右的MRS培养基约20mL，轻轻旋转摇匀，然后静置凝固，于37℃培养箱中培养12～20h计数。
b、溶解性测定
将待测样品快速倒入室温(25℃)的蒸馏水中，用玻璃棒轻轻搅动2min，使其充分溶解；然后溶液2000r/min离心5min；将得到的上清液进行冷冻干燥(真空度15Pa，温度-60℃)。此时得到的固体质量即为溶解的样品质量(以干重计)，与待测样品(以干重计)之比即为溶解的质量百分数。
c、抗逆性检测
1材料
(1)生理盐水
(2)人工胃液：取浓度为1mol/mL的稀盐酸，将pH调至1.5。每100mL盐酸溶液中加入1g胃蛋白酶，混匀，待用。
(3)人工肠液：取KH2PO4 6.8g加水500mL溶解，用0.4％(w/w)的NaOH回调pH至6.8，获得KH2PO4溶液。每100mLKH2PO4溶液中加入1g胰蛋白酶，混匀，待用。
(4)MRS培养基：蛋白胨5g，柠檬酸氢二铵1g，葡萄糖10g，吐温-80 0.5mL，乙酸钠1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.1g，硫酸锰0.1g，蒸馏水1000mL，琼脂15g，pH 6，115℃，灭菌30min。
2操作方法
(1)取2g样品，溶于37℃的人工胃液/人工肠液中100r/min搅拌30min。以生理盐水替代人工胃液/人工肠液，作为对照；
(2)然后8000r/min离心20min，弃上清，沉淀用生理盐水洗涤3次；最后沉淀用生理盐水梯度稀释；
(3)选择2～3个合适的稀释度，每个稀释度吸取0.1mL样品分别加入到培养皿中，倾入冷却至50℃左右的MRS培养基约20mL，轻轻旋转摇匀，然后静置凝固，于37℃培养箱中培养12～20h计数。
(4)抗逆性通过率＝(试验组/对照组)×100％。
实施例2
1)菌种活化：将凝结芽孢杆菌保藏菌种转接于斜面菌种培养基，于35℃活化培养12h，获得斜面孢子。斜面菌种培养基组成：蛋白胨5g，柠檬酸氢二铵1g，葡萄糖10g，0.5mL吐温-80，乙酸钠1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.1g，硫酸锰0.1g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，pH6，115℃，灭菌30min。
2)液体菌种制备：用无菌水将斜面孢子洗下，并将其OD600用无菌水调整为1.0，制得菌悬液；将菌悬液按照体积浓度5％的比例，转接于液体菌种培养基中，于30℃，100r/min条件下培养12h，制得液体菌种。液体菌种培养基组成：蛋白胨5g，柠檬酸氢二铵1g，葡萄糖10g，吐温-80 0.5mL，乙酸钠1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.1g，硫酸锰0.1g，蒸馏水1000mL，pH6，115℃，灭菌30min。
3)匀浆：将新鲜竹笋，除杂、切成1cm长(或见方)的小段(或小块)，称取100g竹笋小段(或小块)加400mL无菌水，匀浆，得到竹笋匀浆液；
4)相对密度调整：用无菌水和麦芽糊精，竹笋匀浆液的相对密度调整为1。
5)用无菌水和葡萄糖，将步骤4)竹笋匀浆液的糖度调整到1.5；并用0.1mol/L的HCl水溶液和0.1mol/L的NaOH水溶液将pH调整为6。
6)以步骤5)调整pH后的竹笋匀浆液质量计，将步骤2)制备的液体菌种以质量分数5％的接种量加入到竹笋匀浆液中。接种后的竹笋匀浆液装入500mL三角瓶(装量为容积的2/3)，密封，30℃保温，转速80r/min，发酵16h。
7)发酵结束后，每100mL发酵产物中添加5g海藻糖，混匀溶解，于真空度5Pa，温度-55℃条件下冷冻干燥。获得富含凝结芽孢杆菌的竹笋酵素粉，活菌数(活菌+芽孢)4.3×108CFU/g。溶解质量百分数可达84.8％。抗逆性测试结果表明，凝结芽胞杆菌通过率为88.2％。
实施例3
1)菌种活化：将凝结芽孢杆菌保藏菌种转接于斜面菌种培养基，于45℃活化培养36h，获得斜面孢子。斜面菌种培养基组成：蛋白胨15g，柠檬酸氢二铵3g，葡萄糖30g，2mL吐温-80，乙酸钠10g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1g，硫酸锰1g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7，115℃，灭菌30min。
2)液体菌种制备：用无菌水将斜面孢子洗下，并将其OD600用无菌水调整为1.0，制得菌悬液；将菌悬液按照体积浓度10％的比例，转接于液体菌种培养基中，于45℃，200r/min条件下培养36h，制得液体菌种。液体菌种培养基组成：蛋白胨15g，柠檬酸氢二铵3g，葡萄糖30g，2mL吐温-80，乙酸钠10g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1g，硫酸锰1g，蒸馏水1000mL，pH7，115℃，灭菌30min。
3)匀浆：将新鲜竹笋，除杂、切成1cm长(或见方)的小段(或小块)，称取100g竹笋小段(或小块)加800mL无菌水，匀浆，得到竹笋匀浆液；
4)相对密度调整：用无菌水和麦芽糊精，竹笋匀浆液的相对密度调整为1.5。
5)用无菌水和葡萄糖，将步骤4)竹笋匀浆液的糖度调整到1.5；并用0.1mol/L的HCl水溶液和0.1mol/L的NaOH水溶液将pH调整为7。
6)以步骤5)调整pH后的竹笋匀浆液质量计，将步骤2)制备的液体菌种以质量分数20％的接种量加入到竹笋匀浆液中。接种后的竹笋匀浆液装入500mL三角瓶(装量为容积的2/3)，密封，45℃保温，转速180r/min，发酵56h。
7)发酵结束后，每100mL发酵产物中添加20g海藻糖，混匀溶解，于真空度15Pa，温度-63℃条件下冷冻干燥。获得富含凝结芽孢杆菌的竹笋酵素粉，活菌数(活菌+芽孢)5.2×109CFU/g。溶解质量百分数可达91.4％。抗逆性测试结果表明，凝结芽胞杆菌通过率为89.3％。
对比例1
以植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)299v(购自瑞典Probi公司)为菌种代替凝结芽孢杆进行发酵，其预处理、发酵条件、产物处理工艺均同实施例1。
获得含有植物乳杆菌的竹笋酵素粉，活菌数5.9×109CFU/g。溶解质量百分数为56.8％。抗逆性测试结果表明，凝结芽胞杆菌通过率为34.3％。
在实施例1工艺相同的情况下，用其植物乳杆菌为菌种进行发酵，活菌数与实施例1差别不大；但是产物溶解质量百分数远远低于实施例1；抗逆性测试结果也是远远低于实施例1。
对比例2
以植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)299v(购自瑞典Probi公司)为菌种代替凝结芽孢杆进行发酵，其预处理方法、发酵条件、产物处理工艺均同实施例2。获得含有植物乳杆菌的竹笋酵素粉，活菌数4.5×108CFU/g。溶解质量百分数为56.3％。抗逆性测试结果表明，凝结芽胞杆菌通过率为35.6％。
在实施例2工艺相同的情况下，用其植物乳杆菌为菌种进行发酵，活菌数与实施例2差别不大；但是产物溶解质量百分数远远低于实施例2；抗逆性测试结果也是远远低于实施例2。
对比例3
以植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)299v(购自瑞典Probi公司)为菌种代替凝结芽孢杆进行发酵，其预处理、发酵条件、产物处理工艺均同实施例3。获得含有植物乳杆菌的竹笋酵素粉，活菌数5.8×109CFU/g。溶解质量百分数为56.3％。抗逆性测试结果表明，凝结芽胞杆菌通过率为32.4％。
在实施例3工艺相同的情况下，用其植物乳杆菌为菌种进行发酵，活菌数与实施例3差别不大；但是产物溶解质量百分数远远低于实施例3；抗逆性测试结果也是远远低于实施例3。
对比例4
以其他的凝结芽孢杆菌菌株TBC169(购买自鹤壁市百惠生物科技有限公司)进行发酵，其预处理、发酵条件、产物处理工艺均同实施例1。获得含有植物乳杆菌的竹笋酵素粉，活菌数5.4×109CFU/g。溶解质量百分数为76.3％。抗逆性测试结果表明，凝结芽胞杆菌通过率为88.2％。
在实施例1工艺相同的情况下，用其他凝结芽孢杆菌为菌种进行发酵，活菌数与实施例1基本一致；但是产物溶解质量百分数显著低于实施例1；抗逆性测试结果也是显著低于实施例1。
采用本发明所提供的方法，利用凝结芽孢杆菌对竹笋进行发酵处理，可显著改善竹笋的口感、风味；经发酵、后处理得到的竹笋酵素粉，富含新型益生菌——凝结芽孢杆菌；竹笋酵素粉中的凝结芽孢杆菌以芽孢形式存在，抗逆性强、易储存；芽孢耐胃酸能力强，易于通过胃肠屏障；竹笋酵素粉兼具竹笋粉的风味以及凝结芽孢杆菌的益生功效。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对于本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换，都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims (10)

1.一种利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于所述方法为：将凝结芽孢杆菌接种至竹笋匀浆液中，在25～45℃、80～180r/min条件下密封发酵培养，获得发酵液；将发酵液与保护剂混合，干燥，获得竹笋酵素粉；所述保护剂为海藻糖；所述竹笋匀浆液是将新鲜竹笋清洗后加入无菌水匀浆，获得竹笋匀浆液。
2.如权利要求1所述利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于所述凝结芽孢杆菌在接种前，先进行斜面活化和扩大培养，将扩大培养液以体积浓度5-20％的接种量接种至竹笋匀浆液中。
3.如权利要求2所述利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于所述斜面活化培养是将凝结芽孢杆菌接种至斜面培养基，在35～45℃活化培养12～36h，获得斜面孢子；所述斜面培养基终浓度组成为：蛋白胨5～15g/L，柠檬酸氢二铵1～3g/L，葡萄糖10～30g/L，0.5～2mL/L吐温-80，乙酸钠1～10g/L，磷酸二氢钾1～3g/L，硫酸镁0.1～1g/L，硫酸锰0.1～1g/L，琼脂15～20g/L，溶剂为蒸馏水，pH 6～7；
所述扩大培养是将斜面孢子用无菌水调整OD600为1.0的菌悬液；将菌悬液按体积浓度5～10％的接种量接种至液体培养基，在30～45℃，100～200r/min条件下培养12～36h，获得扩大培养液；所述液体培养基终浓度组成为：蛋白胨5～15g/L，柠檬酸氢二铵1～3g/L，葡萄糖10～30g/L，0.5～2mL/L吐温-80，乙酸钠1～10g/L，磷酸二氢钾1～3g/L，硫酸镁0.1～1g/L，硫酸锰0.1～1g/L，溶剂为蒸馏水，pH 6～7。
4.如权利要求1所述利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于竹笋匀浆液相对密度为1.0～1.5，糖度为1.0～3.0，pH调整为6～7。
5.如权利要求4所述利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于相对密度用无菌水和麦芽糊精调节，糖度用无菌水和葡萄糖调节。
6.如权利要求1所述利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于保护剂添加量以发酵液体积计为50～200g/L。
7.如权利要求1所述利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于干燥方法为真空冷冻干燥：真空度5～15Pa，温度-55～-63℃。
8.如权利要求1所述利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于所述竹笋匀浆液制备方法为：将新鲜竹笋，除杂、切成小段或小块，获得预处理后的竹笋；向预处理后的竹笋中加无菌水，匀浆，得到竹笋匀浆液；所述无菌水体积用量以预处理后的竹笋重量计为4～10ml/g。
9.如权利要求1所述利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于新鲜竹笋包括毛竹笋、麻竹笋、箭竹笋、雷竹笋、慈竹笋、绿竹笋、桂竹笋、哺鸡竹笋、刚竹笋、苦竹笋、方竹笋、毛金竹笋或甜龙竹笋。
10.如权利要求1所述利用益生菌制备竹笋酵素粉的方法，其特征在于凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)PCM1843。
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