CN108078957A - 一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法及其应用 - Google Patents

一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及药物制剂技术领域，具体涉及一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法及其应用。该辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法包括：步骤一，制备F127溶液；步骤二，将植烷三醇和辣椒碱水浴上融化涡旋混合均匀，然后匀浆机剪切下滴加到F127溶液；步骤三，水浴恒温振荡器中振荡，制得粗分散体；步骤四，粗分散体置于超声细胞粉碎机中进行超声破碎，即制得辣椒碱立方液晶纳米粒。本发明制得的辣椒碱立方液晶纳米粒能明显减少辣椒碱刺激性，有较好的促创伤愈合效果。并且，本发明制得的辣椒碱立方液晶纳米粒，可应用于作为促进皮肤创伤愈合的药物制剂。

Description

一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备 方法及其应用
技术领域
本发明涉及药物制剂技术领域，具体涉及一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法及其应用。
背景技术
皮肤创伤愈合一直是国内外皮肤及整形外科的研究热点。皮肤创伤愈合是一个复杂的生物学过程，包括炎症反应期、细胞增殖期、创面成熟和重建期三个阶段。其中，炎症反应期：炎性因子如TNF-a可诱导炎症细胞、成纤维细胞和角质形成细胞向创伤部位迁移，开始创面修复。细胞增殖：成纤维细胞、表皮角质细胞和内皮细胞通过迁移、增殖，促进创面再上皮化、新生血管化，形成肉芽组织，促进皮肤屏障功能恢复。其中成纤维细胞是皮肤伤口创面愈合中的主要效应细胞。创面成熟和重建期：创伤开始，修复即开始。创面如果较大，易形成愈合后瘢痕。病理性瘢痕是皮肤软组织在受到创伤后，创面异常愈合的产物，既影响美观又可致组织器官发生不同程度的功能障碍，给患者带来生理和心理的伤害。
目前，主要预防及治疗创伤修复后增生性瘢痕的方法包括应用加压、硅胶制品、手术切除、放射、冷冻、激光、激素注射等疗法，但均易复发或有严重的不良作用。
辣椒碱(capsaicin，CAP)，是辣椒中的主要生物活性成分。它是一种天然的脂溶性的含香草酰胺的植物碱，化学结构为8-甲基-N-香草基-6-壬烯基酰胺(C18H27NO3),呈单斜长方形片状无色结晶，其化学结构如式1所示：
研究报道辣椒碱具有显著的抗纤维化作用，可抑制增生性成纤维细胞增殖能力和胶原合成能力；其次是耗竭神经肽P物质，发挥抗瘢痕过度增生的作用。P物质(SP)是组织修复的重要调控因子，皮肤损伤时感觉神经末梢释放的SP不仅可启动神经源性炎性反应，同时可诱导成纤维细胞内多种细胞因子(如TGF-β、EGF、TNF)表达增多，直接或间接促进成纤维细胞增殖。而辣椒碱作SP的耗竭剂，发挥抗瘢痕过度增生的作用。另外辣椒碱还具有抑制增生性瘢痕的另一典型临床症状-瘙痒。
由于辣椒碱存在胃肠首关效应强、胃肠道刺激、半衰期短等缺陷，经皮给药可维持血药浓度，降低不良反应，是较为合适的给药方式。
然而，现有技术中，有文献报导直接使用辣椒碱会延缓创伤愈合，并产生皮肤灼痛，这可能与创伤部位局部微环境改变及辣椒碱强刺激性有关。另外，动物实验证实直接使用辣椒碱对大鼠皮肤刺激性大，导致皮肤受伤部位出现化脓、红肿现象，伤口面积变大，伤口愈合减缓。
发明内容
本发明的目的之一在于针对现有技术的不足，提供一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法。
本发明的目的之二在于针对现有技术的不足，提供一种辣椒碱立方液晶纳米粒的应用。
为了实现上述目的之一，本发明采用如下技术方案：
提供一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，它包括以下步骤：
步骤一、将水置于容器中，然后加入F127溶解备用，制得F127溶液；
步骤二、称取一定量的植烷三醇和辣椒碱，均置于离心管中，然后于一定温度的水浴上融化涡旋混合均匀，然后在一定转速的匀浆机剪切下滴加到步骤一制得的F127溶液中，制得剪切好的样品；
步骤三、将步骤二制得的剪切好的样品转移置于一定转速的水浴恒温振荡器中进行振荡一定时间，即制得粗分散体；
步骤四、将步骤三制得的粗分散体置于超声细胞粉碎机中进行超声破碎，即制得辣椒碱立方液晶纳米粒。
上述技术方案中，所述步骤一中，所制得的F127溶液中，所述F127的浓度为0.5％～3％。
上述技术方案中，所述步骤二中，所述植烷三醇、所述辣椒碱和所述F127溶液的质量比为1～3：0.001～0.05：15～20。
上述技术方案中，所述步骤二中，所述水浴的温度为60℃～80℃；所述匀浆机的转速为10000rpm～40000rpm。
上述技术方案中，所述步骤二中，所述滴加过程的时间设置为2min～5min，所述剪切的时间为4min～8nin。
上述技术方案中，所述步骤三中，所述水浴恒温振荡器的转速设置为50rpm～150rpm；所述振荡时间为4h～6h。
上述技术方案中，所述步骤四中，所述超声的功率设置为50w～100w，所述超声的时间设置为4min～8min。
上述技术方案中，所述步骤四中，所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒中，辣椒碱的浓度为150μg·ml-1～350μg·ml-1。
为了实现上述目的之二，本发明采用如下技术方案：
提供一种辣椒碱立方液晶纳米粒的应用，上述所述的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒，应用于作为促进皮肤创伤愈合的药物制剂。
本发明与现有技术相比较，有益效果在于：
(1)本发明提供的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒的愈合表观效果良好，经动物实验证明，30天左右愈合完全。本发明制得的辣椒碱立方液晶纳米粒改善了辣椒碱的副作用，并将对皮肤创伤修复与瘢痕防治提供新的参考。另外，所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒具有黏度低、生物相溶性好、比表面积大，能包裹亲脂性及亲水性药物等特性，可供口服、注射及经皮给药。
(2)本发明提供的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，由于现有技术中植烷三醇与过量水接触后会形成立方液晶凝胶，经超声分散高压均质可得到粒径较均一的纳米粒，但该纳米粒易发生凝聚，本发明通过添加F127为作为稳定剂，能够避免所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒发生凝聚。
(3)本发明提供的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，由于先采用超细匀浆机进行剪切辅助分散，然后用超声破碎法制备辣椒碱立方液晶纳米粒，整个制备过程中，控制好液晶材料滴加速度与剪切分散时间是本发明成功的关键。制备过程中经匀浆机剪切后的样品置于水浴恒温振荡器中振荡，其目的是为了使粗分散体温度降至室温，以减少后续超声时所导致的温度差异；目的之二是使液晶材料与水充分接触自乳化以形成立方液晶结构，也可以防止粗分散体的聚集。本发明制备辣椒碱立方液晶纳米粒的过程中未使用高压匀质机，可有效避免破坏立方液晶晶格结构。
(4)本发明提供的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，具有操作简单易行，成本低，并能够适用于工业化大规模生产的特点。
附图说明
图1是本发明的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒的小角衍射图。
图2是不同处理因素不同时间对皮肤瘢痕愈合的影响图，其中，A为生理盐水组、B为空白液晶纳米粒组、C为辣椒碱组、D为辣椒碱立方液晶纳米粒。
具体实施方式
为了使本发明所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
其中，本发明提及的F127是指泊洛沙姆407。
实施例1。
一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，它包括以下步骤：
步骤一、将水置于容器中，然后加入F127溶解备用，制得F127溶液；本实施例中，所制得的F127溶液中，F127的浓度为1％；
步骤二、称取一定量的植烷三醇和辣椒碱，均置于离心管中，然后于70℃的水浴上融化涡旋混合均匀，然后在转速为20000rpm的匀浆机剪切下滴加到步骤一制得的F127溶液中，制得剪切好的样品；本实施例中，植烷三醇、辣椒碱和F127溶液的质量比为2：0.005：18；本实施例中，滴加过程的时间设置为3min，所述剪切的时间为6nin；
步骤三、将步骤二制得的剪切好的样品转移置于转速为100rpm的水浴恒温振荡器中进行振荡5h，即制得粗分散体；
步骤四、将步骤三制得的粗分散体置于超声细胞粉碎机中进行超声破碎，即制得辣椒碱立方液晶纳米粒。本实施例中，超声的功率设置为75w，超声的时间设置为6min。本实施例中，所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒中，辣椒碱的浓度为250μg·ml-1。
上述一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒，应用于作为促进皮肤创伤愈合的药物制剂。
实施例2。
一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，它包括以下步骤：
步骤一、将水置于容器中，然后加入F127溶解备用，制得F127溶液；本实施例中，所制得的F127溶液中，F127的浓度为0.5％；
步骤二、称取一定量的植烷三醇和辣椒碱，均置于离心管中，然后于60℃的水浴上融化涡旋混合均匀，然后在转速为10000rpm的匀浆机剪切下滴加到步骤一制得的F127溶液中，制得剪切好的样品；本实施例中，植烷三醇、辣椒碱和F127溶液的质量比为1：0.001：15；本实施例中，滴加过程的时间设置为2min，所述剪切的时间为4min；
步骤三、将步骤二制得的剪切好的样品转移置于转速为50rpm的水浴恒温振荡器中进行振荡4h，即制得粗分散体；
步骤四、将步骤三制得的粗分散体置于超声细胞粉碎机中进行超声破碎，即制得辣椒碱立方液晶纳米粒。本实施例中，超声的功率设置为50w，超声的时间设置为4min。本实施例中，所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒中，辣椒碱的浓度为150μg·ml-1。
上述一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒，应用于作为促进皮肤创伤愈合的药物制剂。
实施例3。
一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，它包括以下步骤：
步骤一、将水置于容器中，然后加入F127溶解备用，制得F127溶液；本实施例中，所制得的F127溶液中，F127的浓度为3％；
步骤二、称取一定量的植烷三醇和辣椒碱，均置于离心管中，然后于80℃的水浴上融化涡旋混合均匀，然后在转速为40000rpm的匀浆机剪切下滴加到步骤一制得的F127溶液中，制得剪切好的样品；本实施例中，植烷三醇、辣椒碱和F127溶液的质量比为3：0.05：20；本实施例中，滴加过程的时间设置为5min，所述剪切的时间为8nin；
步骤三、将步骤二制得的剪切好的样品转移置于转速为150rpm的水浴恒温振荡器中进行振荡6h，即制得粗分散体；
步骤四、将步骤三制得的粗分散体置于超声细胞粉碎机中进行超声破碎，即制得辣椒碱立方液晶纳米粒。本实施例中，超声的功率设置为100w，超声的时间设置为8min。本实施例中，所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒中，辣椒碱的浓度为350μg·ml-1。
上述一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒，应用于作为促进皮肤创伤愈合的药物制剂。
实施例4。
一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，它包括以下步骤：
步骤一、将水置于容器中，然后加入F127溶解备用，制得F127溶液；本实施例中，所制得的F127溶液中，F127的浓度为1.5％；
步骤二、称取一定量的植烷三醇和辣椒碱，均置于离心管中，然后于65℃的水浴上融化涡旋混合均匀，然后在转速为30000rpm的匀浆机剪切下滴加到步骤一制得的F127溶液中，制得剪切好的样品；本实施例中，植烷三醇、辣椒碱和F127溶液的质量比为1.5：0.02：16；本实施例中，滴加过程的时间设置为4min，所述剪切的时间为5nin；
步骤三、将步骤二制得的剪切好的样品转移置于转速为80rpm的水浴恒温振荡器中进行振荡4.5h，即制得粗分散体；
步骤四、将步骤三制得的粗分散体置于超声细胞粉碎机中进行超声破碎，即制得辣椒碱立方液晶纳米粒。本实施例中，超声的功率设置为60w，超声的时间设置为5min。本实施例中，所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒中，辣椒碱的浓度为200μg·ml-1。
上述一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒，应用于作为促进皮肤创伤愈合的药物制剂。
实施例5.
一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，它包括以下步骤：
步骤一、将水置于容器中，然后加入F127溶解备用，制得F127溶液；本实施例中，所制得的F127溶液中，F127的浓度为2％；
步骤二、称取一定量的植烷三醇和辣椒碱，均置于离心管中，然后于75℃的水浴上融化涡旋混合均匀，然后在转速为15000rpm的匀浆机剪切下滴加到步骤一制得的F127溶液中，制得剪切好的样品；本实施例中，植烷三醇、辣椒碱和F127溶液的质量比为2.5：0.01：19；本实施例中，滴加过程的时间设置为3.5min，所述剪切的时间为7nin；
步骤三、将步骤二制得的剪切好的样品转移置于转速为120rpm的水浴恒温振荡器中进行振荡5.5h，即制得粗分散体；
步骤四、将步骤三制得的粗分散体置于超声细胞粉碎机中进行超声破碎，即制得辣椒碱立方液晶纳米粒。本实施例中，超声的功率设置为90w，超声的时间设置为7min。本实施例中，所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒中，辣椒碱的浓度为300μg·ml-1。
上述一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒，应用于作为促进皮肤创伤愈合的药物制剂。
检测：
辣椒碱立方液晶纳米粒晶格结构确定：
将本发明制得的辣椒碱立方液晶纳米粒溶液填充到直径1mm的石英毛细管中，射线照射60min。使用Anton Paar小角X-散射仪，散射光源为Cu，X射线波长为0.1542nm，散射角测量范围为q＝0.05～6nm-1。见图1的辣椒碱立方液晶纳米粒小角衍射图。其中，图1显示辣椒碱立方液晶纳米粒在 位置出现出现谱线峰，对应于密勒指数h k l＝110,200,211，与立方液晶Im3m(Q229)空间结构一致，由于体系的富含水，后面的散射峰较弱。
动物实验：
取清洁级8周龄SD大鼠，雌性。体重200～250g，共24只。由广州市白山区穗北实验动物养殖场提供。10％水合氯醛(0.4ml/100g)经左腹腔麻醉后，等待2～3分钟，固定在塑料板上。剪去背部皮毛约2.0cm×2.0cm，碘酒、75％乙醇消毒皮肤，用医用剪刀划开皮肤，使伤口面积达到2.0cm×2.0cm。参考文献[19]将10mg辣椒碱溶于1ml无水乙醇、1ml吐温80和8ml生理盐水，配制成1mg/ml浓度的原液，用时按照比例稀释成相应工作浓度(250μg·ml-1)。实验随机分四组：A生理盐水组、B空白液晶纳米粒组、C辣椒碱组、D辣椒碱立方液晶纳米粒。创伤半个小时后进行第一次给药，以后每天加药，观察创伤的愈合情况，见图2。
辣椒碱对大鼠皮肤刺激性大，一开始用药会导致皮肤的伤口出现伤口化脓，红肿，伤口面积变大。从图2可以看出，相对而言，辣椒碱立方液晶纳米粒组在实验过程中伤口慢慢愈合，创伤部位皮肤瘢痕形成较小，其愈合表观效果良好，并于30天左右愈合完全，愈合速度较辣椒碱组迅速。实验结果显示，本发明制得的辣椒碱立方液晶纳米粒能明显减少辣椒碱刺激性，有较好的促创伤愈合效果。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (9)

1.一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：
步骤一、将水置于容器中，然后加入F127溶解备用，制得F127溶液；
步骤二、称取一定量的植烷三醇和辣椒碱，均置于离心管中，然后于一定温度的水浴上融化涡旋混合均匀，然后在一定转速的匀浆机剪切下滴加到步骤一制得的F127溶液中，制得剪切好的样品；
步骤三、将步骤二制得的剪切好的样品转移置于一定转速的水浴恒温振荡器中进行振荡一定时间，即制得粗分散体；
步骤四、将步骤三制得的粗分散体置于超声细胞粉碎机中进行超声破碎，即制得辣椒碱立方液晶纳米粒。
2.根据权利要求1所述的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，其特征在于：所述步骤一中，所制得的F127溶液中，所述F127的浓度为0.5％～3％。
3.根据权利要求1所述的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，其特征在于：所述步骤二中，所述植烷三醇、所述辣椒碱和所述F127溶液的质量比为1～3：0.001～0.05：15～20。
4.根据权利要求1所述的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，其特征在于：所述步骤二中，所述水浴的温度为60℃～80℃；所述匀浆机的转速为10000rpm～40000rpm。
5.根据权利要求1所述的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，其特征在于：所述步骤二中，所述滴加过程的时间设置为2min～5min，所述剪切的时间为4min～8nin。
6.根据权利要求1所述的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，其特征在于：所述步骤三中，所述水浴恒温振荡器的转速设置为50rpm～150rpm；所述振荡时间为4h～6h。
7.根据权利要求1所述的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，其特征在于：所述步骤四中，所述超声的功率设置为50w～100w，所述超声的时间设置为4min～8min。
8.根据权利要求1所述的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法，其特征在于：所述步骤四中，所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒中，辣椒碱的浓度为150μg·ml-1～350μg·ml-1。
9.一种辣椒碱立方液晶纳米粒的应用，其特征在于：权利要求1至8任意一项所述的一种用于促进皮肤创伤愈合的辣椒碱立方液晶纳米粒的制备方法所制得的辣椒碱立方液晶纳米粒，应用于作为促进皮肤创伤愈合的药物制剂。
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