CN108069954B

CN108069954B - 含no供体的喹唑啉酮化合物

Info

Publication number: CN108069954B
Application number: CN201711452108.4A
Authority: CN
Inventors: 李云飞; 王艺瑾; 张瑱; 许忻; 程涛; 葛建
Original assignee: Shanghai Huahui Extension Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Shanghai Huahui Extension Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2017-03-03
Filing date: 2017-12-26
Publication date: 2018-11-23
Anticipated expiration: 2037-12-26
Also published as: CN108069954A

Abstract

本发明具体公开了一类偶联了NO供体的化合物，这些化合物进入体内能迅速释放出NO和提高体内ApoA‑I水平的小分子化合物，所公开化合物不仅能改善心脑血管功能，还对血脂异常及糖尿病并发症具有一定的防治作用。

Description

含NO供体的喹唑啉酮化合物

技术领域

本发明属于药物化学研发领域，具体涉及一类可释放一氧化氮的喹唑啉酮化合物及其医药用途。

背景技术

一氧化氮供体(NO Provider)是一类能在体内释放出NO的前体药物，是指不需经一氧化氮酶(NOS)催化自行或与其它物质作用产生NO的药物，它既可作为一种NO体内运输形式，又可作为一种贮存形式，延长NO的半衰期，克服吸入NO所引起的诸多不便及NO的吸入量难以控制的缺点。NO供体型药物主要是以已知药物或活性化合物的结构为母核，与NO供体通过各种连接基团结合而成的前药，它可在体内经相关酶或非酶作用释放原药和NO。研究表明，由于释放NO的作用，NO供体型药物的疗效一般优于原药，且不良反应显著小于原药。

目前，NO供体药物研究的趋势是利用前药原理将NO供体与生效药物结合起来形成一种更有效的结合型新药物。这种药物设计方式的优点在于提高药物的生物利用度、增加药物稳定性、减小毒副作用、促使药物长效化等。同时，它具有NO供体的特征，提供一种依赖于NO的生物活性，NO供体的研究已成为近年来生物医学和药学领域研究的热点和前沿之一。

心血管类疾病一直是全球范围内的公共卫生问题，据统计每年约350万人死于心血管病——每10秒钟有1人死于心血管病，人体内脂肪代谢或运转异常导致高血脂，高血脂可直接引起一些严重危害人体健康的疾病，如动脉粥样硬化。高血脂能造成人体组织器官供血不足，由此诱发冠心病、脑卒中、高血压、肾衰竭等心脑血管疾病。人体内的胆固醇逆向转运(RCT)机制可改善高血脂症，RCT是一种正常的生理过程，其能将动脉粥样硬化斑块运输到动脉之外，并通过肝脏将其从体内消除。

载脂蛋白A-I(ApoA-I)是功能性高密度脂蛋白(HDL)微粒的重要组成部分，其能促进RCT，有效消除动脉粥样硬化斑块，防治高血脂症；另一方面，ApoA-I还能通过激活AMPK信号通路，激活磷酸化乙酰辅酶羧化酶，提高葡萄糖在肌肉细胞中的吸收，改善体内的血糖代谢；随着研究的深入，人们发现ApoA-I不仅与调控体内脂质代谢及血糖代谢有关系，其还和免疫功能、神经功能有密切关系，临床实验数据表明，体内低水平的ApoA-I，可导致心血管疾病的发病率增加。因此，增加人体内ApoA-I的含量，将对心血管疾病的防治发挥积极作用。

开发能提高体内ApoA-I水平的小分子化合物已成为心血管疾病治疗药物研发的重要方向，在WO 2006/045096、WO2008/092231、WO2010/123975等专利中均公开了这一类小分子化合物。

发明内容

本发明公开了一类偶联了NO供体的化合物，这些化合物进入体内能迅速释放出NO和提高体内ApoA-I水平的小分子化合物，不仅能改善心脑血管功能，还对血脂异常及糖尿病并发症具有一定的防治作用。

本发明所提供的化合物为通式(II)的化合物及其药学上可接受的盐或立体异构体：

A-B(II)

其中A为防治心血管疾病的小分子化合物残基，选自下列基团：

其中R₁为-O-；R₀选自下列基团：

B选自：

其中，Y₁为直链的C_1-20亚烷基，支链的C_3-20亚烷基，直链的C_2-20亚烯基，支链的C_3-20亚烯基；或是被一种或多种取代基取代的C_1-20亚烷基，或是被一种或多种取代基取代的C_2-20亚烯基，其中所述取代基为T₁；或是具有4-7个碳原子的亚环烷基，所述环任选地被一个或多个直链的C_1-10烷基链或支链的C_3-10烷基链取代；尤其是选自以下基团：

-(CH₂)_r-、-(CH₂)_n-Z-(CH₂)_r-、-CH₂-CH(CH₃)-(CH₂)_r-、-CH₂-CH(CH₃)-(CH₂)_r-Z-CH₂-、-CH₂-CH(CH₃)-CH₂-Z-(CH₂)_r-、-CH₂CH＝CHCH₂-、-CH₂CH＝CHCH₂-Z-(CH₂)_r-、其中Z为-O-、-S-、-NH-、A为O、S、C；

T₁为未取代或取代的C_1-8直链烷基、未取代或取代的C_3-10支链烷基、未取代或取代的C_2-10直链烯基、未取代或取代的C_3-10支链烯基、未取代或取代的苄基、未取代或取代的苯基、未取代或取代的芳基取代的C_1-4烷基、未取代或取代的杂芳基；

Y₂为C_1-8烷基、苯基、苯磺酰基、腈基、三氟甲基、C_1-8烷氧基或者为C_1-8烷基硝酸酯基；

Y₁₁为

n为0-4的整数；r为1-6的整数。

R₂为H、直链C_1-4烷基或支链的C_3-4烷基

术语“烷基”包括饱和的脂肪族基团，包括直链烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等)、支链烷基(异丙基、叔丁基、异丁基等)、环烷基基团(环丙基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基)、烷基取代的环烷基、和环烷基取代的烷基。

在某些实施方案中，直链或支链的烷基的骨架上具有6个或更少的碳原子(例如，直链为C_1-6，支链为C_3-6)，且更优选4个或更少的碳原子。同样，优选的环烷基在其环结构上具有3-8个碳原子，更优选在其环结构上具有5或6个碳。

术语“C_1-6烷基”包括包含1至6个碳原子的烷基。

此外，术语“烷基”还包括“未被取代的烷基”和“取代的烷基”，后者是指烃骨架中一个或多个碳上的氢被取代基替换的烷基基团。所述取代基可以包括：烯基、炔基、卤素、羟基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳氧基羰基氧基、羟基羰基、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷硫基羰基、烷氧基、磷酸酯、膦酸酯、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲酰基和脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳硫基、羟基硫代羰基、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酸基、氨磺酰基、磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基或芳族基团或杂芳族基团。

术语“芳基”包括5和6元的单环芳族基团，其可以包含0-4个杂原子，例如苯、苯基、吡咯、呋喃、噻吩、噻唑、异噻唑、咪唑、三唑、四唑、吡唑、唑、异唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶等；此外，术语“芳基”还包括多环芳基，例如三环、二环，例如萘、苯并唑、苯并二唑、苯并噻唑、苯并咪唑、苯并噻吩、亚甲二氧基苯基、喹啉、异喹啉、萘啶、吲哚、苯并呋喃、嘌呤、苯并呋喃、脱氮嘌呤或中氮茚。这些具有杂原子的芳基也称为“芳基杂环”、“杂环”、“杂芳基”或“杂芳族基团”。

典型的杂芳基包括2-或3-噻吩基；2-或3-呋喃基；2-或3-吡咯基；2-、4-或5-咪唑基；3-、4-或5-吡唑基；2-、4-或5-噻唑基；3-、4-或5-异噻唑基；2-、4-或5-唑基；3-、4-或5-异唑基；3-或5-1，2，4-三唑基；4-或5-1，2，3-三唑基；四唑基；2-、3-或4-吡啶基；3-或4-哒嗪基；3-、4-或5-吡嗪基；2-吡嗪基；2-、4-或5-嘧啶基。

术语“杂芳基”还指其中杂芳族环与一个或多个芳基、环脂族或杂环基的环稠合的基团，其中其连接基团或连接点位于杂芳族环上。其实例包括但不限于1-、2-、3-、5-、6-、7-或8-中氮茚基；1-、3-、4-、5-、6-或7-异吲哚基；2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基；2-、3-、4-、5-、6-或7-吲唑基；2-、4-、5-、6-、7-或8-嘌呤基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-或9-喹嗪基；2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基；1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基；1-、4-、5-、6-、7-或8-酞嗪基；2-、3-、4-、5-或6-萘啶基；2-、3-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基；3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基；2-、4-、6-或7-蝶啶基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-4aH咔唑基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-咔唑基；1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-咔啉基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-菲啶基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-吖啶基；1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-啶基；2-、3-、4-、5-、6-、8-、9-或10-菲咯啉基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-或9-吩嗪基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩噻嗪基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩嗪基；2-、3-、4-、5-、6-或1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-苯并异喹啉基；2-、3-、4-或噻吩并[2，3-b]呋喃基；2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10-或11-7H-吡嗪并[2，3-c]咔唑基；2-、3-、5-、6-或7-2H-呋喃并[3，2-b]-吡喃基；2-、3-、4-、5-、7-或8-5H-吡啶并[2，3-d]-o-嗪基；1-、3-或5-1H-吡唑并[4，3-d]-唑基；2-、4-或5-4H-咪唑并[4，5-d]噻唑基；3-、5-或8-吡嗪并[2，3-d]哒嗪基；2-、3-、5-或6-咪唑并[2，1-b]噻唑基；1-、3-、6-、7-、8-或9-呋喃并[3，4-c]噌啉基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、8-、9-、10或11-4H-吡啶并[2，3-c]咔唑基；2-、3-、6-或7-咪唑并[1，2-b][1，2，4]三嗪基；7-苯并[b]噻吩基；2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基；2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基；2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基；1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-苯并氧杂基；2-、4-、5-、6-、7-或8-苯并嗪基；1-、2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10-或11-1H-吡咯并[1，2-b][2]苯并氮杂基。典型的稠合杂芳基包括2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基；1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基；2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基；2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并[b]噻吩基；2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基；2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基；2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基。

“芳基”或“杂芳基”的芳环可以在一个或多个环位置上被上文所述的取代基取代，例如卤素、羟基、烷氧基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳基氧基羰基氧基、羟基羰基、烷基羰基、烷基氨基羰基、芳基烷基氨基羰基、烯基氨基羰基、烷基羰基、芳基羰基、芳基烷基羰基、烯基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷硫基羰基、磷酸酯、膦酸酯、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲酰基和脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳硫基、羟基硫代羰基、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酸酯基、氨磺酰基、磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基，或芳族基团或杂芳族基团，其中芳基基团也可以与非芳族的脂环或杂环稠合或桥连，以形成多环(例如四氢萘)。

术语“烯基”包括在长度和可能的取代上类似于上述的烷基的不饱和脂肪族基团，但是其包含至少一个双键。

例如，术语“烯基”包括直链的烯基(例如：乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基等)、支链的烯基、环烯基(例如：环丙烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环辛烯基)、烷基或烯基取代的环烯基以及环烷基或环烯基取代的烯基。术语“烯基”还包括含有替换烃骨架的一个或多个碳的氧、氮、硫或磷原子的烯基。在某些实施方案中，直链或支链烯基在其骨架中具有6个或更少的碳原子(例如：C2-6的直链烯基，C_3-6的支链烯基)。术语C_2-6烯烃基包括含有2-6个碳原子的烯基。

此外，术语“烯基”包括“未被取代的烯基”和“被取代的烯基”，后者是指烃骨架中一个或多个碳上的氢被取代基替换的烯基。所述的取代基可以包括例如烷基、炔基、卤素、羟基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳基氧基羰基氧基、羟基羰基、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷硫基羰基、烷氧基、磷酸酯、膦酸酯、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲酰基和脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳硫基、羟基硫代羰基、硫酸酯、烷基亚磺酰基、磺酸基、氨磺酰基、磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基，或芳族基团。

术语“烷氧基”包括与氧原子共价连接的被取代的和未被取代的烷基。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、异丙基氧基、丙氧基、丁氧基和戊氧基。被取代的烷氧基的实例包括卤代烷氧基。烷氧基可被以下基团取代：烯基、炔基、卤素、羟基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳氧基羰基氧基、羟基羰基、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷硫基羰基、磷酸酯基、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲酰基和脲基)、脒基、亚氨基、巯基、烷硫基、芳硫基、羟基硫代羰基、烷基亚磺酰基、磺酸基、氨磺酰基、磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基芳基或芳族基团。

本发明所提供化合物的合成流程：

本发明的通式表示的化合物可以按照多种反应流程加以合成，本领域技术人员可以很容易的通过本文在实施例中所提供的一些制备方法设计其他化合物的反应流程。

一般的合成路线中，首先合成A-H化合物，该化合物的制备方法可参考专利WO2009158404，得到A-H化合物后，再将化合物与含有NO供体的片段进行反应，反应一般在缩合剂中，如DCC、EDCI、CDI或HOBt的存在条件下，在碱例如DMAP存在或不存在的条件下进行，在有机无水溶剂中，如DMF、THF、甲苯、二氧己环或多卤化的脂肪族烃存在的条件下，在-20℃至50℃的温度下进行，反应在30分钟至36小时的时间内完成。

制备得A-H化合物后，一般将其先和酸酐反应成酯，反应在有机无水溶剂中，如DMF、THF、DCM存在的条件下，在100℃至120℃的温度条件下搅拌，反应在2小时至4小时的时间内完成；所得产物纯化后再与酰氯类化合物反应，反应在有机碱例如DMAP、三乙胺或吡啶存在的条件下，在惰性有机溶剂中，如DMF、THF、苯、甲苯、二氧己环或多卤化的脂肪族烃存在的条件下，在-20℃至40℃的温度下进行，反应在30分钟至36小时的时间内完成；所得产物纯化后再与含有NO供体的化学片段进行缩合反应。

本发明所提供的NO供体化合物由B表示，其合成方法可参考专利WO2014113700、WO2015109210、EP0984012、EP1336602。

下列缩写可以用在实施例和说明书全文中：

本发明的通式A-B中具有代表性的化合物如下：

4-((2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)甲基)-3-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物；

4-(2-(2-(4-(5，7-甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)乙基)-3-甲基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物；

3-氰基-4-((2-(4-(5，7--二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)甲基)-1，2，5-噁二唑-2-氧化物；

N-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)-5-甲基噻吩-2-磺胺；

N-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)-5-甲基呋喃-2-磺胺；

N-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)-5-甲基-N-((5-甲基噻吩-2-基)磺酰基)噻吩-2-磺胺；

N-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)-3-(甲基磺酰基)苯磺酰胺；

6-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)六氢化呋喃并[3，2-b]呋喃-3-基硝化物；

2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙基L-精氨酸；

如上所述，本发明还包括式(II)的化合物的药用可接受的盐和其立体异构体。

所述的药用可接受的盐的是指无机碱盐，如钠盐、钾盐、钙盐或铝盐；有机碱盐，如赖氨酸盐、精氨酸盐、三乙胺盐、二苄胺盐、哌啶盐及其他药学上可接受的有机胺盐。

在本发明的化合物分子中包含至少一个可成盐的氮原子时，可以通过在有机溶剂如乙腈、四氢呋喃中与相应的有机酸或无机酸反应，从而转化为相应的盐。典型的有机酸有草酸、酒石酸、马来酸、琥珀酸、柠檬酸，典型的无机酸有硝酸、盐酸、硫酸、磷酸，优选硝酸。

本发明的化合物中具有一个或多个不对称碳原子时，它们能够以如下形式存在：光学纯的对映异构体、纯的非对应异构体、对映异构体混合物、非对应异构体混合物、对映异构体外消旋混合物、外消旋物或外消旋物混合物。式(II)的化合物的全部可能的异构体、立体异构体和其混合物也在本发明的范围内。

本发明还提供了一种药物组合物，其包含上述至少一个化合物以及任选一种或多种医药上可接受的载剂和/或稀释剂。

本发明所提供的药物组合物可以制备为任何形式，例如颗粒、粉末、片剂、包衣片剂、胶囊、药丸、糖浆、滴剂、溶液、混悬剂和乳剂，或者活性成分的缓释制剂，其中胶囊剂的实例包括硬或软明胶胶囊剂，颗粒剂和粉剂可以是非泡腾或泡腾形式。

本发明的药物组合物可进一步包括一种或多种医药或生理上可接受的载体，这些载体将适当配制以便于给药。例如，医药或生理上可接受的载体可以是盐水、热压水、林格氏液、缓冲盐水、葡萄糖、麦芽糖糊精、甘油、乙醇及其混合物。本发明的药物组成物还可以包括医药或生理上可接受的添加剂，例如稀释剂、润滑剂、粘合剂、助流剂、崩解剂、甜味剂、矫味剂、湿润剂、分散剂、表面活性剂、溶剂、涂层剂、发泡剂、或芳香剂。

可以使用的稀释剂的实例包括但不限于乳糖、蔗糖、淀粉、高岭土、盐、甘露糖醇和磷酸二钙；润滑剂的实例包括但不限于滑石、淀粉、镁或钙的硬脂酸盐、石松子和硬脂酸；粘合剂的实例包括但不限于微晶纤维素、黄蓍胶、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶溶液、蔗糖和淀粉糊；助流剂的实例包括但不限于胶体二氧化硅；崩解剂的实例包括但不限于交联羧甲基纤维素钠、淀粉羟乙酸钠、藻酸、玉米淀粉、马铃薯淀粉、膨润土、甲基纤维素、琼脂和羧甲基纤维素；甜味剂的实例包括但不限于蔗糖、乳糖、甘露糖醇和人工甜味剂，例如环磺酸钠和糖精，和任意数量的喷雾干燥矫味剂；矫味剂的实例包括但不限于从植物提取的天然矫味剂，例如果实，和味道较好的化合物，例如但不限于薄荷和水杨酸甲酯；湿润剂的实例包括但不限于丙二醇一硬脂酸酯、脱水山梨醇一油酸酯、二甘醇一月桂酸酯和聚氧乙烯月桂基醚。

本发明的药物组合物可以根据传统方法来通过各种途径给药，包括口服、静脉内、动脉内、腹腔内、胸腔内、透皮、鼻腔、吸入、直肠、眼部和皮下导入。

任选地添加到本发明的药物组合物中的医药上可接受的载体是：水、醇、蜂蜜、甘露醇、山梨醇、糊精、乳糖、焦糖、明胶、硫酸钙、硬脂酸镁、滑石粉、高岭土、甘油、吐温、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、环糊精及其衍生物、磷脂类、磷酸盐类、淀粉类及其衍生物、硅衍生物、纤维素类及其衍生物、吡咯烷酮类、聚乙二醇类、丙烯酸树脂类、酞酸酯类、丙烯酸共聚物、苯三酸酯类中的一种或几种。

经药理实验验证，本发明所提供的化合物或者药物组合物可通过抑制白介素-66、血管细胞粘附分子-1和单核细胞趋化蛋白-1发挥抗炎作用；通过抑制炎性细胞因子释放发挥免疫抑制作用；通过促进高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)增多、抑制胆固醇、脂肪酸和甘油三酯的合成、减少葡萄糖吸收和生成来调控体内葡萄糖代谢紊乱和脂代谢紊乱。

另一方面，本发明的化合物或者药物组合物还具有神经保护作用，可对抗神经凋亡、抑制神经坏死，促进神经再生。

本发明提供了上述化合物或者药物组合物在制备用于预防、治疗心脑血管疾病、炎性疾病、神经退行性疾病、代谢紊乱疾病及其继发症的药物中的应用。

本发明提供一种用于预防和/或治疗心脑血管疾病、炎性疾病、神经退行性疾病、代谢紊乱疾病及其继发症的方法，所述方法包括对有需要的对象施用治疗有效量的根据本发明的化合物或者药物组合物。

另一方面，根据本发明的化合物或者药物组合物用于预防和/或治疗心脑血管疾病、炎性疾病、神经退行性疾病、代谢紊乱疾病及其继发症。

进一步地，所述心脑血管疾病包括动脉粥样硬化、脑动脉粥样硬化、脑血栓、脑梗死、高血脂、缺血性心肌损伤、中风、冠心病、心脏肥厚、心衰、心脏梗塞、风湿性心脏病、先天性心脏病、左心室功能不全、内皮功能障碍、内皮功能障碍后的纤维变性和结构重塑、肥厚性心肌病、糖尿病性心肌病、室上性和室性心律失常、房颤、心脏纤维化、心房扑动、有害的血管重塑、心肌梗塞及其后遗症、心绞痛、高血压、原发性和继发性肺性高血压、肾血管性高血压、高血压性视网膜病变或视网膜血管病变。

所述炎性疾病包括：慢性肾病、慢性肾炎、关节炎、类风湿性关节炎、银屑病、肠炎性疾病、自身免疫性疾病、溃疡性结肠炎、胃溃疡、慢性胃炎、宫颈炎、乙肝、丙肝、非酒精性脂肪性肝炎、皮肤慢性溃疡、器官移植排斥；用于神经炎性疾病，如糖尿病神经病变、肌肉萎缩性侧索硬化症、朊毒体病、脊髓性肌萎缩症、多发性硬化、神经性疼痛、原发性侧索硬化病、脑膜炎或病毒性脑炎。

所述神经退行性疾病包括阿兹海默症、帕金森、多发性硬化、亨廷顿舞蹈病。

代谢紊乱疾病及其继发症包括：2型糖尿病、糖尿病性脂血异常、糖尿病黄斑水肿、糖尿病视网膜病变、黄斑变性、白内障、糖尿病肾病、肾小球硬化、糖尿病神经病变、代谢性酸中毒、月经前期综合症、食欲调节及肥胖。

本发明所提供的化合物一般的剂量范围为约每天0.001mg/Kg至1000mg/kg，优选为约0.01mg/kg至100mg/kg，更优选为约0.1至20mg/kg，药物组合物的剂量范围为以其含有的上述化合物的量来计算。

本发明所提供的NO前药分子结构新颖，具有以下特点及优势：

①NO供体型前药在体内裂解成可调控ApoA-I表达或分泌的小分子治疗药物及NO分子，从而在ApoA-I调控剂本身的药理作用基础上额外提供了外源性的NO，对心脑血管疾病的治疗具有重要的意义；

②发明人所选择的一些ApoA-I调控剂的化学结构中带有游离的醇羟基，这类药物在体内易与葡萄糖醛酸直接轭合发生第II相生物转化与而被代谢，另外，在体内醇脱氢酶的催化下经过第I相生物转化被氧化成游离羧酸而直接排除体外，或进一步与甘氨酸轭合发生第II相生物转化而被代谢。发明人将这些形成ApoA-I调控剂偶联上NO供体，形成NO前药后，在很大程度上减缓了这些代谢途径，从而提高药物的生物利用度、增加药物稳定性，达到药物长效的效果；

③临床上应用的很多心脑血管疾病药物，具有相对较高的亲脂性，比如他汀类、沙坦酯类的醇-水分配系数(log P)值都在5左右，而发明人在ApoA-I调控剂上偶联了NO供体，形成NO前药后，亲脂性水平提高，log P值从3升到了5，从而提高了药物体内吸收分数，进一步增加生物利用度。

具体实施方式

实施例1：4-((2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)甲基)-3-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物(H201)的制备

步骤1：

将化合物H201-1(2g，14.9mmol)和二氯甲烷DCM(50mL)先后加入到瓶子里，氮气保护下，滴加SOCl₂(3mL)，加完后室温搅拌1小时，TLC(PE∶EtOAc＝5∶1，Rf＝0.9，紫外光灯显色)显示反应结束，反应液直接用水洗(30mL×3次)，有机相分开后用无水硫酸钠干燥，滤掉无水硫酸钠后蒸干溶液得到中间体H201-2(粗品，3g)，外观为棕色液体。

步骤2：

将30mL冰乙酸加入到单口瓶中，搅拌下，加入金属钠(0.7g，30mmol，1.5eq)。等到金属钠全部反应之后，将上步的粗品H201-2(3g，20mmol，1eq)加到反应瓶中，反应液加热外温50度2小时，TLC(PE∶EtOAc＝5∶1，Rf＝0.15，紫外光灯显色)显示反应完全，反应混合物冷至室温，用DCM(70mL×5次)萃取，合并DCM相，用100mL水洗一次，干燥有机相，蒸干，过柱纯化，淋洗液为PE∶EtOAc＝10∶1，得到H201-3(2.2g，12.3mmol，收率：61.8％)，外观为黄色液体。

步骤3：

将H201-3(2.2g，12.3mmol，1eq)、四溴化碳(6.5g，19.6mmol，1.5eq)、三苯基膦(4.8g，18.3mmol，1.5eq)和DCM(70mL)先后加入到反应瓶中。反应液在室温下搅拌12小时，TLC(PE∶EtOAc＝5∶1，Rf＝0.9，紫外光灯显色)显示反应完全，2mL乙醇加入到反应液中，室温搅拌1小时，在反应液中加入100mL水和30mL的DCM，搅拌后分液，有机相用水(50mL×2次)洗，无水硫酸钠干燥有机相，蒸干，粗产物过硅胶柱纯化，淋洗液为PE∶EtOAc＝100∶1，得到产物H201-4(2g，8.3mmol，产率：67％)，外观为黄色液体。

步骤4：

在反应瓶内加入上步产物H201-4(500mg，2.1mmol，1eq)和冰乙酸(5mL)，然后分批加入亚硝酸钠(500mg，7.2mmol，3.4eq)，加完后将反应混合物加热到外温60度，反应3小时。等反应完全后，将反应液冷却到室温，用DCM萃取。萃取液合并，用饱和碳酸氢钠水溶液洗一次，然后用水和饱和食盐水各洗一次，用无水硫酸钠干燥，蒸干得到产物粗品，过硅胶柱纯化，淋洗液用PE∶EtOAc＝50∶1，得到中间体H201-5(240mg，0.8mmol，收率为38％)，外观为无色液体。

步骤5：

将上步产物H201-5(240mg，0.8mmol，1eq)、化合物H1：2-(4-(2-羟基乙氧基)-3，5-二甲基苯基)-5，7-二甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(240mg，0.74mmol，0.9eq)、K₂CO₃(240mg，1.7mmol，1.7eq)和DMF(5mL)先后加入到反应瓶中，反应混合物加热外温50度反应3小时，TLC(DCM：MeOH＝20∶1，Rf＝0.45，紫外光灯显色)显示反应完全。在反应液中加入100mL的水和100mL的DCM，搅拌后分液，有机相用水(50mL×2次)洗，干燥有机相，蒸干，过硅胶柱纯化，淋洗液为PE∶EtOAc＝100∶1，得到终产物H201(65mg，0.12mmol，产率：15％)，外观为白色固体，其结构经核磁共振氢谱图和质谱确证。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ：9.54(s，1H)，7.93～7.91(d，2H)，7.68(s，2H)，7.54～7.52(m，3H)，6.82～6.98(s，1H)，6.45(s，1H)，4.72(s，2H)，4.00～3.92(m，10H)，2.35(s，6H).LC-MS：m/z(ES⁺)for C₂₉H₂₈N₄O₇ 545[M+1]⁺.

实施例2：4-(2-(2-(4-(5，7-甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)乙基)-3-甲基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物(H202)的制备

制备方法同实施例1，但起始原料由H201-1换为3-戊烯-1-醇。终产物结构经经核磁共振氢谱图和质谱确证。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ：9.56(s，1H)，7.95～7.92(d，2H)，6.96～6.83(s，1H)，6.48(s，1H)，4.69(s，2H)，4.08～3.97(m，10H)，2.83(s，3H)，2.76(m，2H)，2.34(s，6H).LC-MS：m/z(ES⁺)for C₂₅H₂₈N₄O₇497[M+1]⁺.

实施例3：3-氰基-4-((2-(4-(5，7--二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)甲基)-1，2，5-噁二唑-2-氧化物(H203)的制备

制备方法同实施例1，但起始原料由H201-1换为4-羟基2-丁烯腈。终产物结构经经核磁共振氢谱图和质谱确证。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ：9.53(s，1H)，7.96～7.92(d，2H)，6.95～6.83(s，1H)，6.484(s，1H)，4.72(s，2H)，4.11～3.90(m，10H)，2.35(s，6H).LC-MS：m/z(ES⁺)for C₂₄H₂₃N₅O₇494[M+1]⁺.

实施例4：N-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)-5-甲基噻吩-2-磺胺(H204)的制备

步骤1：

将H203-1(20g，0.1mol，1eq)，HOBt(20.4g，0.15mol，1.5eq)，EDCI(28.8g，0.15mol，1.5eq)，DIPEA(32.4g，0.25mol，2.5eq)和THF(1L)先后加入到2升的三口瓶中，室温下搅拌3小时，然后将NH₃·H₂O(40mL)加入到反应瓶中，继续搅拌，直到原料反应完全，反应混合物用DCM(200mL)萃取两次。有机相用水洗两次，然后用无水硫酸钠干燥后浓缩，往浓缩的残余物中加入乙醚，会有固体析出，抽滤，滤饼烘干得到H203-2(8.6g，43mmol，收率：43％)，外观为黄色固体粉末。

步骤2：

H203-2(8.6g，43mmol，1eq)，4-羟基-3，5-二甲基苯甲醇(6.58g，43mmol，1eq)，NaHSO₃(5g，48.4mmol，1.1eq)，P-TSA(0.75g，4.4mmol，0.1eq)和NMP(100mL)先后加入到单口瓶中，氩气保护下，混合物在外温130度下加热搅拌3小时，TLC(展开剂为DCM：MeOH＝20∶1，Rf＝0.4，紫光光灯显色)显示原料反应完全，待反应物冷至室温后，加入水(300mL)和DCM(200mL)，搅拌后分层，水层用DCM(200mL)萃取，有机相合并后，用水(300mL×3次)洗有机相，此时有越来越多的不溶固体物析出，存在于水相和有机相之间，呈黄色絮状物。过滤，滤饼用少量水洗两次，得到产物H203-M(8g，24.5mmol，收率为56％)，外观为黄色固体。

步骤3：

N-羟基邻苯二甲酰亚胺(8g，49mmol)、三乙胺(15mL，108mmol)和1，2-二溴乙烷(18mL，203mmol)先后加入到58mL的DMF中，室温搅拌过夜，反应液中有大量不溶物，过滤，滤饼用DMF洗，滤出液加入400mL水，有固体析出，过滤，将滤饼溶解在100mL的EtOAc中，用无水硫酸镁干燥，过滤，蒸干滤液，将残余物在95％乙醇中重结晶得到H203-N(8g，29.6mmol，产率：61％)，外观为白色固体。

步骤4：

将H203-M(3.26g，10mmol，1eq)、H203-N(3g，11mmol，1.1eq)、K₂CO₃(5g，40mmol，4eq)和DMF(50mL)先后加入到反应瓶中，氮气保护，混合物加热到外温90度反应2小时，TLC(展开剂为DCM∶MeOH＝20∶1，Rf＝0.4，紫光光灯显色)显示大部分原料已经反应，加入300mL水和200mL二氯甲烷，搅拌后静置分液，有机相用水(300mL×3次)洗，干燥有机相，浓缩得到产物粗品，过硅胶柱纯化，淋洗液为DCM∶MeOH＝80∶1，得到产物H203-6(600mg，1.16mmol，产率：11.6％)，外观为白色固体。

步骤5：

将H203-6(250mg，0.5mmol，1eq)、THF(5mL)和DCM(15mL)先后加入到反应瓶中，氮气保护，滴加2滴85％水合肼，反应液在室温下反应12小时，TLC(展开剂为DCM∶MeOH＝20∶1，Rf＝0.5，紫光光灯显色)显示原料已经反应完全，反应液浓缩，硅胶柱层析纯化，淋洗液为DCM∶MeOH＝80∶1，得到产物H203-7(170mg，0.44mmol，产率：91.4％)，外观为白色固体。

步骤6：

将2-甲基噻吩(20g，203mmol，1eq)、三氧化硫*吡啶(75g，471mmol，2.3eq)和DCM(300mL)先后加入到反应瓶中，氮气保护下，室温搅拌4天，过滤除去不溶物，滤饼用二氯甲烷洗两次，将滤液合并，浓缩，得到产物2的粗品15g，外观为棕色固体。

步骤7：

上步的粗品2(3g)、草酰氯(5mL)和DME(乙二醇二甲醚，50mL)加入到反应瓶中，氮气保护下，滴加1滴DMF到反应液中，然后整个反应液室温下搅拌12小时，TLC(展开剂为PE∶EtOAc＝5∶1，Rf＝0.9，紫光光灯显色)显示有新点产生，将反应液倒在碎冰上，加入EtOAc100mL进行萃取，有机相分离出来用饱和食盐水洗一次，然后用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，得到产物3(1g)，外观为棕色液体。

步骤8：

将H203-7(170mg，0.44mmol，1eq)、上步产物3(110mg，0.56mmol，1.2eq)、DCM(30mL)和DMAP(100mg，0.82mmol，2eq)先后加入到反应瓶中，氮气保护下室温搅拌2小时，TLC(展开剂为DCM∶MeOH＝20∶1，Rf＝0.5，紫光光灯显色)显示有两个新点产生，加入30mL水，搅拌后分液，有机层用水(30mL×2次)洗，干燥后将溶液旋干，过硅胶柱层析，淋洗液为DCM∶MeOH＝80∶1，得到H203(40mg，0.073mmol，收率为16.8％)，外观为白色固体，其结构经核磁共振氢谱图和质谱确证。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：11.83(s，1H)，10.60(s，1H)，7.88(s，2H)，7.55～7.54(d，1H)，6.99～6.98(m，1H)，6.73～6.72(d，1H)，6.51(d，1H)，4.23～4.21(m，2H)，4.01～3.99(m，2H)，3.88～3.84(d，6H)，2.54(s，3H)，2.25(s，6H).LC-MS：m/z(ES⁺)for C₂₅H₂₇N₃O₇S₂546[M+1]⁺.

实施例5：N-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)-5-甲基呋喃-2-磺胺(H205)的制备

制备方法同实施例4，但起始原料由2-甲基噻吩换为2-甲基呋喃。其结构经核磁共振氢谱图和质谱确证。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：11.81(s，1H)，10.63(s，1H)，7.85(s，2H)，7.53(d，1H)，6.95(m，1H)，6.77(d，1H)，6.58(d，1H)，4.25～4.22(m，2H)，4.05～4.01(m，2H)，3.85～3.80(d，6H)，2.52(s，3H)，2.27(s，6H).LC-MS：m/z(ES⁺)for C₂₅H₂₇N₃O₈S 530[M+1]⁺.

实施例6：N-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)-5-甲基-N-((5-甲基噻吩-2-基)磺酰基)噻吩-2-磺胺(H206)的制备

根据实施例4的制备方法，同样得到产物H206(60mg，0.085mmol，收率：19.3％)，外观为白色固体，其结构经核磁共振氢谱图和质谱确证。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：11.87(s，1H)，7.93(s，2H)，7.49～7.48(d，2H)，6.91～6.90(m，2H)，6.74～6.73(d，1H)，6.52(d，1H)，4.53～4.51(m，2H)，4.13～4.11(m，2H)，3.89～3.84(d，6H)，2.50(s，6H)，2.31(s，6H).LC-MS：m/z(ES⁺)for C₃₀H₃₁N₃O₉S₄706[M+1]⁺.

实施例7：N-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)-3-(甲基磺酰基)苯磺酰胺(H207)的制备

制备方法同实施例4，但起始原料由2-甲基噻吩换为(甲磺酰基)苯，其结构经核磁共振氢谱图和质谱确证。¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：11.64(s，1H)，8.69(s，1H)，8.37～8.32(d，2H)，7.83～7.80(d，1H)，6.95～6.92(m，2H)，6.72(d，1H)，6.58(d，1H)，4.58～4.53(m，2H)，4.18～4.14(m，2H)，3.83～3.80(d，6H)，3.42(s，3H)，2.34(s，6H).LC-MS：m/z(ES⁺)forC₂₇H₂₉N₃O₉S₂604[M+1]⁺.

实施例8：6-(2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙氧基)六氢化呋喃并[3，2-b]呋喃-3-基硝化物(H208)的制备

步骤1：

将化合物2-(4-(2-羟基乙氧基)-3，5-二甲基苯基)-5，7-二甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(2g，5.4mmol，1eq)、四溴化碳(2.68g，8.1mmol，1.5eq)、三苯基膦(2.12g，8.1mmol，1.5eq)和DCM(50mL)加入到反应瓶中，反应混合物在室温下搅拌12小时。TLC(DCM∶MeOH＝10∶1，Rf＝0.5，紫外光灯显色)显示反应有新点产生，并随时间推移不再增多，加入2mL乙醇，搅拌1小时，向反应液中加入100mL水合30mL的DCM，搅拌后分液，有机层用水洗两次，干燥有机相，蒸干过柱纯化，淋洗液为DCM∶MeOH＝100∶1，得到2-(4-(2-溴基乙氧基)-3，5-二甲基苯基)-5，7-二甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(500mg，1.15mmol，产率：21.3％)，外观为白色固体。

步骤2：

将5-单硝酸异山梨酯(2g，10.46mmol，1eq)溶在25mL的DCM中，加入叔丁基二甲基氯硅烷(1.73g，11.51mmol，1.1eq)、咪唑(0.764g，12.55mmol，1.2eq)、DMAP(0.1g)，反应混合物在室温下搅拌12小时，TLC显示有新点产生。将反应液中的不溶物过滤掉，滤液浓缩得到H208-2的粗品3.72g，外观为无色液体。

步骤3：

将H208-2(3.7g)溶解在MeOH和EtOAc的混合液中(v/v，10mL/40mL)，加入钯碳催化剂0.3g，氢气球保护下室温搅拌12小时，TLC显示原料反应完全，滤掉钯碳，滤液浓缩得到H208-3(粗品，2.72g)，外观为白色固体。

步骤4：

将氢氧化钠(412mg，10.3mmol)加入到DMSO(10mL)中，形成的悬浊液50度搅拌15分钟，随后加入H208-3(356mg，1.37mmol)，反应混合物50度搅拌1个小时，将步骤1的产物(1.78g，4.11mmol)溶解于DMSO(20mL)中，所得溶液加入到上述反应液，反应混合物70度搅拌16个小时，TLC(PE/EtOAc＝2/1)显示原料反应完全，LCMS显示有反应物生成，反应液冷却到室温，倒入冰水(100mL)中，乙酸乙酯(30mL)萃取三遍，合并萃取有机相，先后用水(40mL)洗三遍，饱和食盐水(40mL)洗一遍，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤并旋干，残余物通过硅胶过柱纯化得到40mg白色固体H208-4，产率6％。

步骤5：

将发烟硝酸(31.5mg，0.5mmol)缓慢加入到醋酸和醋酸酐的混合溶剂(0.2mL/0.2mL)中，保持內温-5～-10℃，形成的混合液滴加到H208-4(25mg，0.05mmol)的醋酸和醋酸酐(0.4mL/0.2mL)溶液中，保持內温-5～-10℃，TLC检测反应，一旦发现反应完全，立即将反应液倒入冰水(10mL)中，有固体析出，过滤收集，滤饼先后用水洗和石油醚洗，滤饼烘干得到23mg浅黄色固体H208，产率85％，其结构经核磁共振氢谱图和质谱确证。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ10.57(s，1H)，7.81(d，J＝12.3Hz，2H)，6.82(d，J＝0.8Hz，1H)，6.45(s，1H)，5.37(d，J＝3.4Hz，1H)，4.77(t，J＝4.6Hz，1H)，4.62(d，J＝4.6Hz，1H)，4.44-3.62(m，15H)，2.37(s，6H).LC-MS：m/z(ES+)for C₂₆H₂₉N₃O₁₀544[M+1]⁺

实施例9：2-(4-(5，7-二甲氧基-4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2，6-二甲基苯氧基)乙基L-精氨酸(H212)的制备

步骤1：

将H212-2(3.11g，5.4mmol，2eq)溶在DMF(20mL)中，冷至0度，将DCC(1.67g，8.1mmol，3eq)和DMAP(33mg，0.27mmol，0.1eq)先后加入到反应液中，等温度稳定后，加入2-(4-(2-羟基乙氧基)-3，5-二甲基苯基)-5，7-二甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(1g，2.7mmol，leq)，反应液在室温下搅拌12小时，TLC(DCM∶MeOH＝10∶1，Rf＝0.6，紫外光灯显色)显示原料反应完全，滤掉不溶物，滤液蒸干后过柱纯化，淋洗液用DCM∶MeOH＝20∶1，得到产物H212-3(2.1g，2.2mmol，产率81.5％)，外观为白色固体。

步骤2：

将H212-3(1g，1.1mmol)溶解在THF中(50mL)，加入钯碳(0.3g)和一滴冰乙酸，用氢气球保护，反应混合物加热外温50度反应3小时。TLC(DCM∶MeOH＝10∶1，Rf＝0.1，紫外光灯显色)显示反应完全。滤掉钯碳，滤液旋干得到300g的H212粗品，产物粗品经反相高效液相色谱制备得到H212(80mg，0.15mmol，产率：13.8％)，外观为白色固体，其结构经核磁共振氢谱图和质谱确证。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：11.87(s，1H)，8.49(s，3H)，7.92(s，2H)，7.73(d，1H)，6.99～6.98(s，1H)，6.73～6.72(d，1H)，6.54(d，1H)，4.55～4.53(t，2H)，4.16～4.07(m，3H)，3.89～3.85(d，6H)，3.15～3.13(d，2H)，2.31(s，6H)，1.88～1.84(m，2H)，1.67～1.58(m，2H).LC-MS：m/z(ES⁺)for C₂₆H₃₄N₆O₆ 527[M+1]⁺.

生物学实验

实验一、受试化合物在体外释放一氧化氮的实验研究

实验步骤：

(1)配置Griess试剂：取氨苯磺胺4g，N-萘乙烯二胺盐酸盐0.2g，85％的磷酸溶液10ml，用蒸馏水稀释至100ml。

(2)绘制标准曲线：配置0.01、0.03、0.05、0.07、0.09、0.2、0.4μg/ml的亚硝酸盐氮的系列标准溶液，各取10ml与2.5ml的Griess试剂充分混匀，室温放置10min后，于540nm波长处测定其吸收值。根据所得数据绘制标准曲线。

(3)受试药物NO释放量的测定：所有受试物均先溶于二甲亚砜中(1ml)，再用磷酸缓冲液(pH7.4)缓慢滴加、振荡，将药物溶液稀释至50ml，缓冲液中含有过量的半胱氨酸(5mmol/l)，受试物终浓度为10^-4mol/l；将溶液置于37℃环境下孵化，分别于1.5h取反应液2ml与500μl的Griess试剂混合，室温放置10分钟，在540nm处测吸收值，以单硝酸异山梨酯为阳性对照，以化合物2-(4-(2-羟基乙氧基)-3，5-二甲基苯基)-5，7-二甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮(H1)为阴性对照，NO的释放量以其氧化产物亚硝酸盐(NO₂ ^-)的量表示。

实验结果及结论：受试物NO体外释放结果参见表一，由实验结果可看出化合物H20l、H202、H203、H208、H212在1.5h之内均检测到NO的释放。

表一

受试物编号	NO释放量(μM)
		单硝酸异山梨酯	4.18
H201	3.86
		H202	7.26
H203	4.95
		H208	13.65
H212	3.68
		H1(对比化合物)	0.24

实验二、受试化合物释放HNO的实验研究

HNO在水溶液中会迅速二聚化和脱水产生一氧化二氮，在检测HNO的实验中一般采用气相色谱顶空分析法测定一氧化二氮的释放量从而间接检测化合物释放HNO的水平。

实验步骤：将各受试化合物用DMF配置成20mg/mL的母液，实验开始前，取50μL药物母液放置于20mL的顶空进样瓶中，再加入5mL的pH7.4的PBS缓冲液稀释受试化合物，所得样品在37℃的氩气条件下保温90分钟后，抽取顶部气体进行一氧化二氮的气相色谱分析，实验中采用Angeli′s Salt作为阳性化合物。

实验结果：各受试物HNO释放结果参见表二。

实验结论：由于此实验中所选取的化合物结构中含有HNO供体，这类化合物体外无法检测到NO的释放，只能通过气相色谱顶空分析法测定一氧化二氮的释放量从而间接检测化合物释放HNO的水平。从实验结果中可看出除了原型化合物H130(阴性对照)没检测到HNO的释放，其余化合物在1.5h之类均能检测到不同水平的HNO释放。

表二

化合物	N₂O的摩尔量/样品摩尔量(％)
		Angeli′s Salt	56.7
H204	21.3
		H205	24.8
H206	15.9
		H207	17.2
H1(对比化合物)	0.23

实验三、受试化合物对ApoA-I mRNA的调节

在24孔板中用400μl的含0.5％(v/v)胎牛血清的MEM培养基培养HepG2细胞24小时，然后加入各受试化合物(100μM)、阳性对照H1(100μM)，再培养细胞48h，吸出培养基，200μl PBS冲洗后，将85μl细胞裂解液加入到各孔的细胞中，室温孵育5-10分钟以使细胞完全溶解和脱离，试剂盒提取细胞中的mRNA，然后采用RNA荧光(RiboGreen)定量检测试剂盒和爱普拜斯公司的ApoA-I mRNA引物-探针混合物将提取出的mRNA用于实时荧光定量PCR检测；

得到Ct值后，计算每个受试化合物相对于DMSO对照组的诱导倍数，诱导倍数用于反映受试化合物调控ApoA-I mRNA能力的强弱，当100μM的受试化合物使HepG2细胞中的ApoA-I mRNA增加15％以上，则被称为ApoA活性化合物。

各受试物对HepG2细胞ApoA-I mRNA的调节活性的实验结果参见表六。由表三可看出，所合成的受试物均能上调肝细胞中的ApoA-I mRNA。由于载脂蛋白A-I(ApoA-I)是功能性高密度脂蛋白(HDL)微粒的重要组成部分，其能有效消除动脉粥样硬化斑块，防治高血脂症，改善体内的血糖代谢；因此本发明所公开化合物可增加细胞内的ApoA-I含量说明这些化合物将对心血管疾病的防治发挥积极作用。

表三

受试物编号	上调ApoA-I mRNA水平
		H201	活性
H202	活性
		H203	活性
H204	活性
		H205	活性
H206	活性
		H207	活性
H208	活性
		H212	活性

实验四、受试化合物对C57小鼠和db/db小鼠的NO释放研究

实验1：受试化合物对C57小鼠的作用研究

选用38只8周龄的C57BL/6小鼠(级别：SPF；性别：雄性；来源：上海斯莱克实验动物有限责任公司)，其中选取2只作空白对照，6只作阳性药对照(单硝酸异山梨酯)，剩余30只小鼠，随机分成五组，每组6只，分别为H201给药组、H205给药组、H208给药组、H112给药组、H1给药组，阳性药对照组和各给药组的受试化合物溶解于DMSO，然后加入PEG400，震荡混匀，最后加入10％HP-β-CD，震荡混匀，各溶剂比例为DMSO∶PEG400∶10％HP-β-CD＝5∶67.5∶27.5；给药组以150mg/kg的剂量口服灌胃给药，阳性药对照组给药剂量为5mg/kg，各组小鼠分别在给药后10min、30min、60min、120min、180min、240min，吸入过量CO₂的方法处死小鼠，采集血液于1.5ml离心管中，室温放置30min以上后离心(3000rpm，10min)吸取上清血清，-80℃保存待检；血液采集后，剪取心脏至胸主动脉，其中心脏称取三份于冻存管中，液氮速冻后冻存于-80℃待检；主动脉及主动脉弓称重，液氮速冻后冻存于-80℃待检。用总NO测试试剂盒(碧云天)测定C57BL/6小鼠血清的NO含量。

实验结果见表四，由实验结果可看出，C57小鼠经各组受试化合物给药后，与空白对照小鼠相比，除了H1给药组，其余给药组小鼠血清中NO水平均有一定程度的提高。

表四

实验2：受试化合物对db/db小鼠的作用研究

实验方法：选用25只8周龄的db/db小鼠(品系：BKS.Cg-+Leprdb/+leprdb/JclSlac；级别：SPF；性别：雄性；来源：上海斯莱克实验动物有限责任公司)，其中选取3只作空白给药对照，2只作阳性药对照(单硝酸异山梨酯)，剩余20只小鼠，随机分成五组，每组4只，分别为H201给药组、H205给药组、H208给药组、H112给药组、H1给药组，阳性药对照组和各给药组的受试化合物溶解于DMSO，然后加入PEG400，震荡混匀，最后加入10％HP-β-CD，震荡混匀，各溶剂比例为DMSO∶PEG400∶10％HP-β-CD＝5∶67.5∶27.5；给药组以150mg/kg的剂量口服灌胃给药，阳性药对照组给药剂量为5mg/kg，H101给药组小鼠在给药2h后处死，其余给药组小鼠在给药后1h处死，分别采集血液于1.5ml离心管中，室温放置30min以上后离心(3000rpm，10min)吸取上清血清，-80℃保存待检；血液采集后，剪取心脏至胸主动脉，其中心脏称取三份于冻存管中，液氮速冻后冻存于-80℃待检；主动脉及主动脉弓称重，液氮速冻后冻存于-80℃待检。分别用总NO测试试剂盒(碧云天)测定C57BL/6小鼠血清的NO含量；NOS测试试剂盒(碧云天)测定小鼠心脏的NOS含量，通过与加入eNOS抑制剂L-NAME(碧云天)后测定值的差值计算eNOS的含量。

实验结果：db/db小鼠给药后血清NO变化见表五。

实验结论：对db/db小鼠进行的实验中，受试化合物给药后，与空白对照小鼠相比，除了H1给药组，其余受试化合物给药组小鼠血清中NO均有不同程度增加。

以上实验结果说明发明人所提供的NO供体化合物进入体内可促进血管释放NO，提高eNOS活力。

表五

实验五、受试化合物对Apo E小鼠动脉粥样硬化模型的作用研究

实验方法：选取8-10周龄的雄性apoE-/-小鼠36只，随机分为空白给药组、H205给药组、H207给药组、H208给药组、H212给药组、H1给药组，每组6只，各组小鼠给予高脂饲料饲养12周，在高脂饲养开始时，就对各组小鼠进行给药处理，各受试化合物按150mg/kg的剂量，一天两次，灌胃给药，各给药组的受试化合物先溶解于Tween80，然后加入PEG400，震荡混匀，注射用水，震荡混匀，各溶剂比例为Tween80∶PEG400∶H₂O＝10∶40∶50，空白给药组仅给予上述溶媒；给药12周后，用吸入过量CO₂的方法安乐死，心脏采集血液于1.5ml离心管中，室温放置30min以上后离心(3000rpm，10min)吸取上清血清，自动生化仪检测HDL-c，LDL-c，AST，ALT，血液采集后，剪取主动脉，肝脏中叶和左中叶，福尔马林固定，用于大体油红O、肝脏HE染色和油红O染色的病理检测。

实验结果与结论：

表六

*p＜0.05，**p＜0.01，与空白给药组相比

表七

*p＜0.05，**p＜0.01，与空白给药组相比

实验结果如表六和表七显示，与空白给药组比较，H205给药组、H207给药组、H208给药组及H212给药组小鼠血清中，LDL-c值降低，HDL-c值升高，主动脉大体油红O检测分析结果显示，各受试物组别与空白给药组比较，脂肪面积百分比下降，*p＜0.05，有显著性差异；

以上结果说明上述受试化合有明显的抗动脉粥样硬化的作用。

另外，从表六和表七中还可以看出，与空白给药组比较，H205、H207、H208、H212给药的小鼠血清中，谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平较低，*p＜0.05，有显著性差异；而在肝脏油红O检测与肝脏HE检测实验中，H205、H207、H208、H212给药的小鼠，其肝脏脂滴的面积百分比及肝细胞脂肪变与空白给药组比较无显著性差界，而H1给药组均显著性增加，*p＜0.05，有显著性差异。

以上结果说明本专利所保护化合物在致肝损伤方面，无明显肝毒性作用，临床使用上安全性较高。

Claims

1.通式（II）的化合物及其药学上可接受的盐：

A-B （II）

其中A选自；R₁为-O-；R₀选自；

B选自、、、、、、；

其中，Y₁为直链的C_1-3亚烷基；

Y₂为甲基、乙基、丙基、苯基或腈基；

Y₁₁为、或；

R₂为-H、甲基或甲基磺酰基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物为：

4-((2-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2,6-二甲基苯氧基)乙氧基)甲基)-3-苯基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物；

4-(2-(2-(4-(5,7-甲氧基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2,6-二甲基苯氧基)乙氧基)乙基)-3-甲基-1,2,5-噁二唑-2-氧化物；

3-氰基-4-((2-(4-(5,7--二甲氧基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2,6-二甲基苯氧基)乙氧基)甲基)-1,2,5-噁二唑-2-氧化物；

N-(2-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2,6-二甲基苯氧基)乙氧基)-5-甲基噻吩-2-磺胺；

N-(2-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2,6-二甲基苯氧基)乙氧基)-5-甲基呋喃-2-磺胺；

N-(2-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2,6-二甲基苯氧基)乙氧基)-5-甲基-N-((5-甲基噻吩-2-基)磺酰基)噻吩-2-磺胺；

N-(2-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2,6-二甲基苯氧基)乙氧基)-3-(甲基磺酰基)苯磺酰胺；

6-(2-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2,6-二甲基苯氧基)乙氧基)六氢化呋喃并[3,2-b]呋喃-3-基硝化物；

2-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2,6-二甲基苯氧基)乙基L-精氨酸。

3.一种药物组合物，其特征在于，包括治疗有效量的权利要求1-2任一项所述的化合物及其药学上可接受的盐，以及任选一种或多种医药上可接受的载剂和/或稀释剂。

4.根据权利要求1-2任一项所述的化合物及其药学上可接受的盐或者根据权利要求3所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗心脑血管疾病或代谢性疾病的药物中的用途。

5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述心脑血管疾病为动脉粥样硬化、高血脂、缺血性心肌损伤、心衰、心脏梗塞或心绞痛。

6.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述代谢性疾病为2型糖尿病、糖尿病性血脂异常、糖尿病肾病、食欲调节及肥胖。