KR20080027945A

KR20080027945A - 신규한 4-아미노-티에노[3,2-ｃ]피리딘-7-카르복실산아미드

Info

Publication number: KR20080027945A
Application number: KR1020087003603A
Authority: KR
Inventors: 킨-천 룩; 리 어파슬 맥더모트; 파멜라 로렌 로스만; 피터 마이클 우브컬리치; 주밍 장
Original assignee: 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 2005-08-16
Filing date: 2005-08-16
Publication date: 2008-03-28
Also published as: IL189181A0; KR100995790B1; MX2008002060A; BRPI0520482A2; CA2619459A1; AU2005335661A1; WO2007019884A1; JP2009504692A; EP1917015A1

Abstract

본 발명은 신규한 화학식 (I) 의 4-아미노-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 아미드, 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염 및 에스테르에 관한 것으로서, 화학식 (I) 의 화합물은 KDR 및/또는 FGFR 키나아제에 대한 선택적 저해제이다. 이들 화합물 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염은 고형 종양, 특히 유방, 결장, 폐 및 전립선의 고형 종양의 치료 또는 제어에 유용한 항-증식제이다. 또한 이들 화합물을 함유한 약학 조성물 또는 약제, 이들의 제조 방법 및 이들 화합물을 사용한 암의 치료 방법이 개시된다.

KDR, FGFR, 키나아제, 선택적 저해제, 항증식 작용

Description

신규한 4-아미노-티에노[3,2-Ｃ]피리딘-7-카르복실산 아미드 {NOVEL 4-AMINO-THIENO[3,2-C]PYRIDINE-7-CARBOXYLIC ACID AMIDES}

본 발명은 신규한 4-아미노-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 아미드 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염 및 에스테르에 관한 것이다. 이들 화합물은 KDR (kinase insert domain-containing receptor; 키나아제 인서트 도메인 포함 수용체) 키나아제 및/또는 FGFR (fibroblast growth factor receptor; 섬유아세포 성장 인자 수용체) 키나아제를 저해한다. 이들 화합물 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염 및 에스테르는 항증식 작용을 가져, 암, 특히 고형 종양의 치료 또는 제어에 유용하다. 또한, 이들 화합물은 유리한 생체이용률 프로필을 갖고 있다. 본 발명은 또한 이러한 화합물을 함유한 약학 조성물 및 암의 치료 또는 제어, 가장 특히는 유방, 폐, 결장 및 전립선 종양의 치료 또는 제어 방법에 관한 것이다.

단백질 키나아제는 다양한 세포 기능을 조절하는 단백질 (효소) 의 한 부류이다. 이는 단백질 기질 상의 특정 아미노산의 인산화로 성취되는데, 이로 인해 상기 기질 단백질의 형태가 변경된다. 상기 형태 변화는 상기 기질의 활성 또는 그의 다른 결합 파트너와 상호작용하는 능력을 조정한다. 상기 단백질 키 나아제의 효소 활성은 상기 키나아제가 인산기를 기질에 부가하는 속도를 지칭한다. 이는, 예를 들어 생성물로 전환되는 기질의 양을 시간의 함수로서 결정하여 측정할 수 있다. 기질의 인산화는 단백질 키나아제의 활성 부위에서 일어난다.

티로신 키나아제는 아데노신 3인산 (ATP) 의 말단 인산염을 단백질 기질 상의 티로신 잔기로 이동시키는 것을 촉매하는 단백질 키나아제의 하위 집합이다. 이들 키나아제는 세포 증식, 분화 및 이동을 초래하는 성장 인자 신호 전달의 전파에서 중요한 역할을 한다.

예를 들어, 염기성 섬유아세포 성장 인자 (FGF) 및 혈관 내피세포 성장 인자 (VEGF) 는 종양-촉진 혈관신생의 중요한 매개체로서 인식되어 왔다. VEGF 는 2 개의 고 친화성 수용체를 통해 신호전달함으로써 내피 세포를 활성화하는데, 그 중 하나가 키나아제 인서트 도메인-포함 수용체 (KDR) 이다. 참조: Hennequin L. F. 등, J. Med. Chem. 2002, 45(6), pp1300. FGF 는 FGF 수용체 (FGFR) 를 통해 신호전달함으로써 내피 세포를 활성화한다. 고형 종양은 성장하기 위해서 새로운 혈관의 형성 (혈관신생) 에 의존한다. 따라서, 성장 신호 전달을 방해하여 혈관신생을 방지하거나 이의 속도를 늦추는 수용체 FGFR 및/또는 KDR 의 저해제는 고형 종양의 예방 및 치료에 유용한 작용제이다. 참조: Klohs W.E. 등, Current Opinion in Biotechnology 1999, 10, p.544.

하나 이상의 유형의 고형 종양을 치료하기 위해, 단백질 키나아제, 특히 FGFR 및 KDR 키나아제의 촉매 활성을 저해하는데 효과적인, 용이하게 합성되는 소 분자 화합물이 요구되고 있다. FGFR 및/또는 KDR 에 선택적인 소분자 저해제를 제공하는 것이 특히 바람직하다. 이것이 바람직한 이유는, 복수 개의 표적을 저해함으로써 잠재적인 부대 독성 및 기타 바람직하지 않은 합병증이 따라올 수 있기 때문이다. 이러한 소분자 저해제가 또한 유리한 생체이용률 프로필을 갖는 것이 바람직하다. 따라서, 본 발명의 목적은 이러한 화합물 및 이들 화합물을 함유한 약학 조성물을 제공하는 것이다.

한 가지 구현예에서, 본 발명은 KDR 및/또는 FGFR 의 활성을 선택적으로 저해할 수 있는 신규한 4-아미노-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 아미드에 관한 것이다. 이들 화합물은 암의 치료 또는 제어, 특히 고형 종양의 치료 또는 제어에 유용하다. 특히 본 발명은 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 에스테르에 관한 것이다:

{식 중, R¹ 및 R² 는 본원에서 이하에 정의된 바와 같다}.

본 발명은 또한 치료상 유효량의 하나 이상의 화학식 I 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르, 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 함유한 약학 조성물에 관한 것이다.

본 발명은 또한 유효량의 화학식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 치료를 요하는 인간 환자에 투여함에 의한, 고형 종양의 치료 또는 제어, 특히 유방, 폐, 결장 및 전립선 종양, 가장 특히는 유방 또는 결장 종양의 치료 또는 제어 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 화학식 I 의 화합물의 제조에 유용한 신규한 중간체 화합물들에 관한 것이다.

본원에서 사용된 바, 하기 용어들은 하기 정의를 가질 것이다.

"알킬"은 탄소수 1 내지 10, 바람직하게는 1 내지 6, 및 더욱 바람직하게는 1 내지 4 의 직쇄 또는 분지쇄 포화 지방족 탄화수소를 나타낸다. 탄소수 1 내지 6 의 알킬기는 또한 본원에서 "저급 알킬"로 지칭된다. 전형적인 저급 알킬기에는, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, t-부틸, 2-부틸, 펜틸 및 헥실이 포함된다. 본원에서 사용된 바 예를 들어 표기 C₁ _-4 알킬은 탄소수 1 내지 4 의 알킬을 의미한다.

"아릴"은 방향족 카르보시클릭 라디칼, 예를 들어 6-10 원의 방향족 또는 부분적 방향족 고리계를 의미한다. 바람직한 아릴기에는, 이들에 제한되는 것은 아니나, 페닐, 나프틸, 톨릴 및 자일릴이 포함된다.

"시클로알킬"은 원자수가 3 내지 8 인 비-방향족, 부분 또는 완전 포화 고리형 지방족 탄화수소기를 의미한다. 시클로알킬기의 예에는, 시클로프로필, 시클로펜틸 및 시클로헥실이 포함된다.

"유효량" 또는 "치료상 유효량"은 종양 성장을 현저히 저해하는 하나 이상의 화학식 I 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 양을 의미한다.

"할로겐"은 불소, 염소, 브롬 또는 요오드, 바람직하게는 브롬, 염소 또는 불소를 의미한다.

"헤테로 원자"는 N, O 및 S 에서 선택되는 원자, 바람직하게는 N 을 의미한다. 헤테로 원자가 N 인 경우, 이는 -NH- 또는 -N-저급 알킬-로 존재할 수 있다. 헤테로 원자가 S 인 경우, 이는 S, SO 또는 SO₂ 로 존재할 수 있다.

"헤테로아릴"은 2 개 이하의 고리를 포함한 방향족 헤테로시클릭 고리계를 의미한다. 바람직한 헤테로아릴기에는, 이들에 제한되는 것은 아니나, 티에닐, 푸릴, 인돌릴, 피롤릴, 피리디닐, 피라지닐, 옥사졸릴, 티아졸릴, 퀴놀리닐, 피리미디닐, 이미다졸릴 및 테트라졸릴이 포함된다.

"헤테로사이클" 또는 "헤테로시클릴"은 질소, 산소 또는 황 또는 이들의 조합에서 선택되는 1 내지 3 개의 헤테로 원자를 가진 3- 내지 10-원의 포화 또는 부분 불포화 비-방향족 1 가 고리형 라디칼을 의미한다. 바람직한 헤테로사이클의 예는 피페리딘, 피페라진, 피롤리딘, 및 모르폴린이다.

"IC₅₀"은 특정 측정된 활성의 50% 를 저해하는데 필요한 본 발명에 따른 특정 화합물의 농도를 지칭한다. IC₅₀ 은, 특히, 하기 실시예 26 에 기재된 바와 같이 측정할 수 있다.

"약학적으로 허용가능한 에스테르"는 카르복실기를 가진 통상적으로 에스테르화된 화학식 I 의 화합물을 지칭하며, 이 때 에스테르는 화학식 I 의 화합물의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하며 생체내 (유기체 내) 에서 절단되어 대응 활성 카르복실산으로 된다. 생체내에서 절단되어 (이 경우 가수분해되어) 대응 카르복실산 (R⁴⁰C(=O)OH) 으로 되는 에스테르기의 예는 하기이다: NR⁴¹R⁴² (이 때, R⁴¹ 및 R⁴² 는 저급 알킬이거나, 또는 NR⁴¹R⁴² 는 함께 취해져 단환의 지방족 헤테로사이클, 예컨대 피롤리딘, 피페리딘, 모르폴린, N-메틸피페라진 등을 형성함) 로 치환될 수 있는 저급 알킬 에스테르; 식 R⁴⁰C(=O)OCHR⁴³OC(=O)R⁴⁴ 의 아실옥시알킬 에스테르 (이 때, R⁴³ 은 수소 또는 메틸이고, R⁴⁴ 는 저급 알킬 또는 시클로알킬임); 식 R⁴⁰C(=O)OCHR⁴³OC(=O)OR⁴⁵ 의 카르보네이트 에스테르 (이 때, R⁴³ 은 수소 또는 메틸이고, R⁴⁵ 는 저급 알킬 또는 시클로알킬임); 또는 식 R⁴⁰C(=O)OCH₂C(=O)NR⁴¹R⁴² 의 아미노카르보닐메틸 에스테르 (이 때, R⁴¹ 및 R⁴² 는 수소 또는 저급 알킬이거나, 또는 NR⁴¹R⁴² 는 함께 취해져 단환의 지방족 헤테로사이클, 예컨대 피롤리딘, 피페리딘, 모르폴린, N-메틸피페라진 등을 형성함).

저급 알킬 에스테르의 예는 메틸, 에틸, 및 n-프로필 에스테르 등이다. NR⁴¹R⁴² 로 치환된 저급 알킬 에스테르의 예는 디에틸아미노에틸, 2-(4-모르폴리닐)에틸, 2-(4-메틸피페라진-1-일)에틸 에스테르 등이다. 아실옥시알킬 에스테르의 예는 피발옥시메틸, 1-아세톡시에틸, 및 아세톡시메틸 에스테르이다. 카르보네이트 에스테르의 예는 1-(에톡시카르보닐옥시)에틸 및 1-(시클로헥실옥시카르보닐옥시)에틸 에스테르이다. 아미노카르보닐메틸 에스테르의 예는 N,N-디메틸카르바모일메틸 및 카르바모일메틸 에스테르이다.

에스테르의 예 및 약학적 화합물의 전달을 위한 이의 용도에 관한 추가적인 정보는 문헌 [Design of Prodrugs. Bundgaard H ed. (Elsevier, 1985)] 에서 입수가능하다. 또한 하기를 참조할 수 있다: H. Ansel 등, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (제 6 판, 1995), pp. 108-109; Krogsgaard-Larsen, 등, Textbook of Drug Design and Development (제 2 판, 1996), pp. 152-191.

"약학적으로 허용가능한 염"은 화학식 I 의 화합물의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하며 적당한 비독성 유기 또는 무기 산류 또는 유기 또는 무기 염기류로부터 형성되는 통상의 산-부가염 또는 염기-부가염을 지칭한다. 예시적인 산-부가염에는, 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 술팜산, 인산 및 질산과 같은 무기 산류로부터 유래한 것, 및 p-톨루엔술폰산, 살리실산, 메탄술폰산, 옥살산, 숙신산, 시트르산, 말산, 락트산, 푸마르산 등과 같은 유기 산류로부터 유래한 것들이 포함된다. 예시적인 염기-부가염에는, 암모늄, 칼륨, 나트륨 및, 예를 들어, 테트라메틸암모늄 히드록시드와 같은 4차 암모늄 히드록시드류로부터 유래한 것들이 포함된다. 약학적 화합물 (즉 약물) 의 염으로의 화학적 변형은 물리적 및 화학적 안정성, 흡습성, 유동성 및 용해도가 향상된 화합물을 수득하는, 제약 화학자들에게 익히 공지된 기술이다. 예컨대, 하기 참조: H. Ansel 등, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (제 6 판 1995), pp. 196 및 1456-1457.

약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 등과 같은 "약학적으로 허용가능한" 이란 약리학적으로 허용가능하고 상기 특정 화합물이 투여되는 대상체에 실질적으로 비독성인 것을 의미한다.

치환된 알킬에서와 같은 "치환된"이란 치환이 하나 이상의 위치에서 일어날 수 있고, 다르게 지시되지 않는 한, 각 치환 부위의 치환기들이 상술되는 선택사항들로부터 독립적으로 선택되는 것을 의미한다.

한 가지 구현예에서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르에 관한 것이다:

{식 중,

R¹ 은 하기에서 선택되고:

저급 알킬, 및

OR³, NR³R⁴, S(O)_nR³, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬;

R² 는 하기에서 선택되고:

H,

저급 알킬, 및

OR⁵, OC(O)R⁵, NR⁵R⁶, S(O)_nR⁵, 아릴, 치환된 아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬;

R³ 및 R⁴ 는 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬,

아릴, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬,

아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴,

치환된 아릴,

헤테로아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 헤테로아릴,

치환된 헤테로아릴,

헤테로사이클,

아릴에 융합된 헤테로사이클,

시클로알킬, 및

치환된 시클로알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR³R⁴ 는 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R³ 및 R⁴ 가 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷, 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁵ 및 R⁶ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬, 및

OR⁷, NR⁷R⁸, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁵R⁶ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷, 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁷ 및 R⁸ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H, 저급 알킬, 아릴 또는 헤테로아릴,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁷R⁸ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁷ 및 R⁸ 이 결합된 질소에 더하여 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, 또는 OR⁹ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁹ 는 H 또는 저급 알킬이고;

n 은 0, 1 또는 2 이고;

이 때,

치환된 아릴 및 치환된 헤테로아릴은 저급 알킬, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷, CN, NO₂ 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 아릴 및 헤테로아릴이고;

치환된 시클로알킬 및 치환된 헤테로사이클은 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 CN 으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 시클로알킬 및 헤테로사이클이다}.

상기 화학식 I 에 속하는 본원에 개시된 화합물들은 호변이성질 또는 구조 이성질을 나타낼 수 있다. 본 발명은 이들 화합물들의 임의의 호변이성질 또는 구조 이성질 형태, 또는 이러한 형태들의 혼합물 (예컨대 라세미 혼합물) 을 포괄하며, 상기 화학식 I 에 묘사된 임의의 하나의 호변이성질 또는 구조 이성질 형태에 제한되지 않는 것으로 의도되었다.

당업자는 상기 정의된 바와 같은 기 NR³R⁴, NR⁵R⁶ 및 NR⁷R⁸ 이 상기 언급된 N 에 더하여 하나 이상의 고리 헤테로원자를 포함할 수 있음을 이해할 것이다. 부가적인 고리 헤테로원자, 즉 상기 언급된 N 외의 고리 헤테로원자들의 총 수는 관련된 특정 고리계에 좌우된다. 바람직하게는, 1 또는 2 개 이하의 부가적인 고리 헤테로원자가 존재한다.

한 가지 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 OR³ 으로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다. 바람직한 R³ 기에는, 아릴, 할로겐으로 치환된 아릴, 및 헤테로사이클에 융합된 아릴이 포함된다. 바람직한 할로겐기에는, Br, Cl 및 F 가 포함된다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 OR³ 으로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다. 바람직한 R³ 기에는 헤테로아릴 및 OR⁷ 로 치환된 헤테로아릴이 포함된다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 NR³R⁴ 로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다. 바람직하게는, 상기 기 NR³R⁴ 는 R³ 및 R⁴ 가 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함한 총 3 내지 7 개의 고리 원자를 가진 고리를 형성하는데, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷, 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기, 바람직하게는 OR⁷ 로 치환된다. 가장 바람직하게는 상기 고리 원자들은 비치환이거나 또는 저급 알킬 및 =O 로 치환된다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 S(O)_nR³ (식 중, R³ 은 저급 알킬임) 으로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 시클로알킬로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R¹ 이 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 OR⁵ (식 중, R⁵ 는 NR⁷R⁸ 로 치환된 저급 알킬임) 로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 NR⁵R⁶ 으로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다. 바람직하게는, 상기 기 NR⁵R⁶ 은 총 3 내지 7 개의 고리 원자를 가진 고리를 형성하는데, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 가 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷, 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환된다. 가장 바람직하게는 상기 고리 원자들은 비치환이거나 또는 저급 알킬, =O, 및 OR⁷ 로 치환된다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 하나 이상의 OH 기 또는 1 개의 NR⁵R⁶ 기로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 OR⁵ 로 치환된 저급 알킬인 상기 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 OC(O)R⁵ 로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 S(O)_nR⁵ (식 중, R⁵ 는 저급 알킬이고 n 은 1 또는 2 임) 로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 아릴로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 치환된 아릴로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 시클로알킬로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R² 가 H 인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 H 인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 아릴, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 치환된 아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 헤테로아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 헤테로아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 치환된 헤테로아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 헤테로사이클인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 아릴에 융합된 헤테로사이클인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 시클로알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 치환된 시클로알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R³ 이 저급 알킬, 아릴에 융합된 헤테로사이클, 아릴, 치환된 아릴, 또는 헤테로사이클에 융합된 아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 H 인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 아릴, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 치환된 아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 헤테로아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 헤테로아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 치환된 헤테로아릴인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 헤테로사이클인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 아릴에 융합된 헤테로사이클인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 시클로알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁴ 가 치환된 시클로알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 상기 기 NR³R⁴ 가 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성하고, 상기 고리 원자들은 R³ 및 R⁴ 가 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷, 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환된 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다. 가장 바람직하게는 상기 고리 원자들은 비치환이거나 또는 저급 알킬, =O 및 OR⁷ 로 치환된다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁵ 가 H 인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁵ 가 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁵ 가 NR⁷R⁸, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다. 가장 바람직하게는 R⁵ 는 NR⁷R⁸ 로 치환된 저급 알킬이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁵ 가 하나 이상의 OR⁷ 로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁶ 이 H 인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁶ 이 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁶ 이 NR⁷R⁸, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다. 가장 바람직하게는 R⁶ 은 NR⁷R⁸ 로 치환된 저급 알킬이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 상기 기 NR⁵R⁶ 이 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성하고, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷, 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환된 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다. 가장 바람직하게는 상기 고리 원자들은 비치환이거나 또는 저급 알킬, =O 및 OR⁷ 로 치환된다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁷ 이 H 인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁷ 이 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁸ 이 H 인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁸ 이 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 상기 기 NR⁷R⁸ 이 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성하고, 상기 고리 원자들은 R⁷ 및 R⁸ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, 또는 OR⁹ 로 이루어진 기로 치환된 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁹ 가 H 인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 R⁹ 가 저급 알킬인 화학식 I 의 화합물에 관한 것이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 하기 화학식 I 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르에 관한 것이다:

{식 중,

R¹ 은 OR³ 으로 치환된 저급 알킬이고;

R² 는 H, 또는 하나 이상의 OR⁵ 기 또는 1 개의 NR⁵R⁶ 기로 치환된 저급 알킬이고;

R³ 은 할로겐 또는 OR⁷ 로 치환된 아릴, 또는 헤테로사이클에 융합된 아릴이고;

R⁵ 및 R⁶ 은 독립적으로 H, 저급 알킬 또는 하나 이상의 OR⁷ 로 치환된 저급 알킬이거나, 또는 다르게는, 상기 기 NR⁵R⁶ 은 독립적으로 총 3 내지 6 개의 원자를 가진 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 N 또는 O 에서 선택되는 하나의 부가적인 헤테로원자들로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 OR⁷ 로 치환되고;

R⁷ 은 H 또는 저급 알킬이다}.

하기 화합물들은 본 발명에 따른 바람직한 구현예이다:

4-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드 (실시예 1),

4-아미노-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드 (실시예 2),

4-아미노-3-(벤조[1,3]디옥솔-5-일옥시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드 (실시예 3),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드 (실시예 4a 및 4b),

4-아미노-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드 (실시예 5),

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1-메틸-에틸)-아미드 (실시예 6),

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-프로필)-아미드 (실시예 7),

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2,3-디히드록시-프로필)-아미드 (실시예 8),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1,1-디메틸-에틸)-아미드 (실시예 9),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1-히드록시메틸-에틸)-아미드 (실시예 10),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-디에틸아미노-에틸)-아미드 (실시예 11),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드 (실시예 12a),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드 히드로클로라이드 염 (실시예 12b),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드 메탄술폰산 염 (실시예 12c),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-모르폴린-4-일-에틸)-아미드 (실시예 13a)

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-모르폴린-4-일-에틸)-아미드 히드로클로라이드 염 (실시예 13b),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (3-디메틸아미노-2,2-디메틸-프로필)-아미드 (실시예 14),

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (5-디에틸아미노-1-메틸-펜틸)-아미드 (실시예 15),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 아미드 (실시예 16),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸]-아미드 (실시예 17),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [4-(3-메톡시-피롤리딘-1-일)-부틸]-아미드 (실시예 18),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피페리딘-1-일-부틸)-아미드 (실시예 19),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-피페리딘-1-일-에톡시)-에틸]-아미드 (실시예 20),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [4-(3-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-아미드 (실시예 21),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-모르폴린-4-일-부틸)-아미드 (실시예 22),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-모르폴린-4-일-에톡시)-에틸]-아미드 (실시예 23),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [4-(4-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-아미드 (실시예 24),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [3-(2,3-디히드록시-프로폭시)-프로필]-아미드 (실시예 25).

본 발명의 화합물들은 FGFR 및/또는 KDR 키나아제에 대해 선택적이다. 이들 화합물은 암의 치료 또는 제어, 특히 고형 종양, 구체적으로 유방, 폐, 결장 및 전립선 종양의 치료 또는 제어에 유용하다. 이들 화합물들은 세포막에 대해 고도로 투과성이어서, 향상된 경구 생체이용률과 같은 유리한 생체이용률 프로필을 갖는다.

본 발명의 화합물들은 임의의 종래의 수단으로 제조할 수 있다. 이들 화합물에 대한 적당한 합성 방법은 실시예에 제시되어 있다. 일반적으로, 화학식 I 의 화합물은 하기 기재된 합성 경로에 따라 제조할 수 있다.

반응식 1

반응식 2

입체이성질체의 혼합물을 광학적으로 순수한 입체이성질체로 분리함 (화학식 I 의 화합물이 키랄성인 경우)

화학식 I 의 이성질 구조들의 임의적 분리는 예를 들어 용리 (resolution) 또는 키랄 고압력 액체 크로마토그래피 (키랄 HPLC 로도 공지되어 있음) 와 같은 공지의 방법에 따라 수행할 수 있다. 용리 방법은 익히 공지되어 있으며, "Enantiomers, Racemates, and Resolutions" (Jacques, J. 등, John Wiley and Sons, NY, 1981) 에 요약되어 있다. 키랄 HPLC 방법 또한 익히 공지되어 있으며, "Separation of Enantiomers by Liquid Chromatographic Methods" (Pirkle, W. H. 및 Finn, J. in "Asymmetric Synthesis", Vol. 1, Morrison, J. D., Ed., Academic Press, Inc., NY 1983, pp. 87-124) 에 요약되어 있다.

염기성 질소를 가진 화학식 I 의 화합물을 약학적으로 허용가능한 산 부가 염으로 전환시킴

염기성 질소를 가진 화학식 I 의 화합물의 약학적으로 허용가능한 산 부가 염으로의 임의적 전환은 통상의 수단으로 달성할 수 있다. 예를 들어, 상기 화합물을 예를 들어 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산과 같은 무기 산, 또는 아세트산, 시트르산, 타르타르산, 메탄술폰산, p-톨루엔 술폰산 등과 같은 적절한 유기 산으로 처리할 수 있다.

카르복실산기를 가진 화학식 I 의 화합물을 약학적으로 허용가능한 알칼리 금속염으로 전환시킴

카르복실산기를 가진 화학식 I 의 화합물의 약학적으로 허용가능한 알칼리 금속염으로의 임의적 전환은 통상의 수단으로 달성할 수 있다. 예를 들어, 상기 화합물을 수산화리튬, 수산화나트륨, 수산화칼륨 등과 같은 무기 염기로 처리할 수 있다.

카르복실산기 또는 히드록시기를 가진 화학식 I 의 화합물을 약학적으로 허용가능한 에스테르로 전환시킴

카르복실산기 또는 히드록시기를 가진 화학식 I 의 화합물의 약학적으로 허용가능한 에스테르로의 임의적 전환은 통상의 수단으로 달성할 수 있다. 상기 에스테르의 형성 조건은 해당 반응 조건에 대한 분자 내의 나머지 작용기들의 안정성에 좌우된다. 분자 내의 다른 부분들이 산성 조건에 안정하다면, 상기 에스테르는 알콜 중의 광산 (예컨대, 황산) 용액 중에서 가열하여 편리하게 제조할 수 있다. 상기 분자가 산성 조건에 안정하지 않은 경우 편리할 수 있는 기타 상기 에스테르의 제조 방법으로는, 커플링제의 존재하에서 및 임의로는 상기 반응을 촉진할 수 있는 부가적인 작용제의 존재하에서 상기 화합물을 알콜로 처리하는 것이 있다. 많은 이러한 커플링제는 유기 화학 분야의 업자에게 공지되어 있다. 두 가지 예는 디시클로헥실카르보디이미드 및 트리페닐포스핀 /디에틸 아조디카르복실레이트이다. 커플링제로서 디시클로헥실카르보디이미드를 사용하는 경우, 상기 반응은, 상기 산을 약 0 도 내지 대략 실온의 온도에서, 바람직하게는 대략 실온에서 할로겐화 탄화수소 (예컨대, 디클로로메탄) 와 같은 불활성 용매 중에서 알콜, 디시클로헥실카르보디이미드, 및 임의로는 촉매량 (0-10 몰%) 의 N,N-디메틸아미노피리딘으로 처리함으로써 편리하게 수행된다. 커플링제로서 트리페닐포스핀/디에틸 아조디카르복실레이트를 사용하는 경우, 상기 반응은, 상기 산을 약 0 도 내지 대략 실온의 온도에서, 바람직하게는 약 0 도에서 에테르 (예컨대, 테트라히드로푸란) 또는 방향족 탄화수소 (예컨대, 톨루엔) 와 같은 불활성 용매 중에서 알콜, 트리페닐포스핀 및 디에틸 아조디카르복실레이트로 처리함으로써 편리하게 수행된다.

대안적인 구현예에서, 본 발명에는, 하나 이상의 화학식 I 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르 및 약학적으로 허용가능한 부형제 및/또는 담체를 포함한 약학 조성물이 포함된다.

이들 약학 조성물은, 예를 들어 정제, 코팅 정제, 당의정, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 에멀젼 또는 현탁액의 형태로, 경구 투여될 수 있다. 이들은 또한 직장으로, 예를 들어, 좌약의 형태로, 또는 비경구적으로, 예를 들어, 주사 용액의 형태로 투여될 수 있다.

화학식 I 의 화합물, 및/또는 이의 염 또는 에스테르를 함유한 본 발명의 약학 조성물은 당업계에 공지된 방식으로, 예컨대 통상적인 혼합법, 캡슐화법, 용해법, 과립화법, 에멀젼화법, 포괄법 (entrapping), 당의정-제조법, 또는 동결건조법으로 제조할 수 있다. 이들 약학 제제들은 치료상 불활성인 무기 또는 유기 담체들과 함께 제형화될 수 있다. 락토오스, 옥수수 전분 또는 이의 유도체, 탈크, 스테아르산 또는 이의 염을, 이러한 정제, 코팅 정제, 당의정 및 경질 젤라틴 캡슐용 담체로 사용할 수 있다. 연질 젤라틴 캡슐용으로 적합한 담체로는, 식물성유, 왁스 및 지방이 있다. 상기 활성 물질의 성질에 따라, 연질 젤라틴 캡슐의 경우에 일반적으로 어떠한 담체도 필요하지 않다. 용액 및 시럽 제조용으로 적당한 담체는 물, 폴리올, 자당, 전화당 (invert sugar) 및 포도당이다. 주사용으로 적당한 담체는 물, 알콜, 폴리올, 글리세린, 식물성유, 인지질 및 계면활성제이다. 좌약용으로 적당한 담체는 천연유 또는 경화유, 왁스, 지방 및 반액체 폴리올이다.

상기 약학 제제들은 또한 보존제, 가용화제, 안정화제, 습윤제, 에멀젼화제, 감미제, 착색제, 향신제, 삼투압을 다양화시키는 염, 완충제, 코팅제 또는 항산화제를 함유할 수 있다. 이들은 또한, 화학식 I 의 화합물 외의 부가 활성 성분을 포함한, 치료상으로 가치있는 다른 물질들을 함유할 수 있다.

상기 언급한 바와 같이, 화학식 I 의 화합물을 비롯한 본 발명의 화합물들은 고형 종양에서의 새로운 혈관 형성 방지 (항-혈관신생) 을 비롯한 세포 증식성 장애의 치료 또는 제어에 유용하다. 이들 화합물들 및 상기 화합물들을 함유한 제형물은, 예를 들어, 유방, 결장, 폐 및 전립선 종양 등의 고형 종양의 치료 또는 제어에 특히 유용하다.

본 발명에 따른 화합물의 치료상 유효량은 질병을 예방하거나, 질병의 증상을 완화 또는 개선하거나 치료되는 대상의 생존을 연장시키는데 효과적인 화합물의 양을 의미한다. 치료상 유효량의 결정은 당업계의 기술내에 있다.

본 발명에 따른 화합물의 치료상 유효량 또는 투여량은 넓은 제한범위내에서 다양할 수 있고, 당업계에 공지된 방식으로 결정될 수 있다. 이러한 투여량은 투여되는 특정 화합물(들), 투여 경로, 치료되는 상태, 및 치료되는 환자를 비롯하여, 각 특정 경우에 개별적인 요건에 맞게 조절될 것이다. 일반적으로, 체중이 약 70 ㎏ 인 성인에 대한 경구 또는 비경구 투여의 경우, 일일 투여량이 약 10 ㎎ 내지 약 10,000 ㎎, 바람직하게는 약 200 ㎎ 내지 약 1,000 ㎎ 인 것이 적당할 것이나, 상기 상한선은 지시되는 경우 초과될 수 있다. 일일 투여량은 단일 투여로 또는 분할 투여로 투여될 수 있으며, 또는 비경구 투여의 경우 이는 연속 주입으로 제공될 수 있다.

본 발명의 화합물들은 방사선 요법과 같은 공지의 항암 치료 또는 세포성장억제제 또는 세포독성제, 예를 들어, 이에 제한되는 것은 아니나, DNA 상호작용제 (interactive agent), 예컨대 시스플라틴 또는 독소루비신; 토포이소머라아제 II 저해제, 예컨대 에토포사이드: 토포이소머라아제 I 저해제, 예컨대 CPT-11 또는 토포테칸; 튜불린 상호작용제, 예컨대 파클리탁셀, 도세탁셀 또는 에포틸론 계열; 호르몬제, 예컨대 타목시펜; 티미딜레이트 합성효소 저해제, 예컨대 5-플루오로우라실; 및 항대사제, 예컨대 메토트렉세이트와 조합하여 사용할 수 있다 (조합적으로 또는 순차적으로 투여함). 화학식 I 의 화합물은 또한 p53 전이활성의 조절자와의 조합에 유용할 수 있다.

고정된 용량으로 제형화하는 경우, 상기 기술한 배합 산물은 본 발명의 화합물들을 상기 기술한 투여량 범위 내로, 및 기타 약학적으로 활성인 작용제 또는 치료제를 승인된 1회분량 범위 내로 포함한다. 예를 들어, 조기 (early) cdk1 저해제인 올로뮤신 (olomucine) 은 세포사멸을 유도함에 있어서 익히 공지된 세포독성제들과 상승적으로 작용하는 것으로 나타났다. (J. Cell Sci ., 1995, 108, 2897-2904). 화학식 I 의 화합물은 또한 병합 투여 또는 조합이 부적절한 경우 공지의 항암- 또는 세포독성제와 함께 순차적으로 투여될 수 있다. 본 발명은 투여의 순서에서는 제한받지 않는다: 화학식 I 의 화합물은 상기 공지의 항암- 또는 세포독성제의 투여 전 또는 후에 투여될 수 있다. 예를 들어, cdk 저해제인 플라보피리돌의 세포독성 활성은 항암제와의 투여 순서에 영향받는다. (Cancer Research, 1997, 57, 3375).

본 발명은 또한 화학식 I 의 화합물의 합성에 유용한 하기 신규한 중간체에 관한 것이다:

3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온 (중간체 4),

7-요오도-3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온 (중간체 5),

3-메틸-4-옥소-4,5-디히드로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 6),

4-클로로-3-메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 7),

3-브로모메틸-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 8),

3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 9),

4-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 10),

4-아미노-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 11),

3-(4-브로모-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 12),

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 13),

4-클로로-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 14),

4-아미노-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (중간체 15), 및

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (중간체 16).

하기 실시예는 본 발명의 화합물 및 제형물을 합성하는 바람직한 방법을 예시한다.

중간체 1

4-메틸-2-티오펜카르복스알데히드

무수 에테르 (600 mL) 중의 3-메틸티오펜 (58.90 g, 0.60 mol) (Fluka) 의 용액을 교반하고, 얼음-물 조에서 냉각시켰다. 상기 용액을 15 분에 걸쳐 펜탄 중의 n-부틸리튬 (2 M, 450 mL, 0.90 mol) (Aldrich) 으로 적가 처리하였다. 실온에서 2 시간 동안 교반한 후 혼합물을 얼음-물 조에서 냉각시키고, 5 분에 걸쳐 N,N-디메틸포름아미드 (48.24 g, 0.66 mol) (Fisher) 로 적가 처리한 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 에테르 (600 mL) 로 희석하고, 물 및 염수로 세정하였다. 건조 (황산나트륨) 후, 에테르를 여과하고, 회전식 증발기 상에서 진공없이 증발시켜, 114 g 의 적색 액체를 수득하였다. 상기 액체를 실리카겔 60 의 패드 (1 Kg, 70-230 메쉬) 상에서 40% 디클로로메탄 - 헥산으로 용출시키는 크로마토그래피로 정제하였다. 진공없이 증발시켜, 4-메틸-2-티오펜카르복스알데히드 및 3-메틸-2-티오펜카르복스알데히드 (대략 5:1) 의 혼합물을 밝은 적색 오일로서 수득하였다. (수율 56.62 g, 74.7%).

중간체 2

3-(4-메틸-티오펜-2-일)-아크릴산

피리딘 (550 mL) 중의 4-메틸-2-티오펜카르복스알데히드 (56.62 g, 0.448 mol) (상기 중간체 1 로부터의 것, 3-메틸-2-티오펜카르복스알데히드 함유), 말론산 (186.77 g, 1.79 mol) (Aldrich) 및 피페리딘 (1.90 g, 0.022 mol) (Fluka) 의 용액을 밤새 교반하면서 환류 하에 가열하였다. 반응 혼합물을 증발시켜 건조시켰다. 생성된 잔류물을 디클로로메탄에 용해시키고, 3 N 염산, 물 및 염수로 연속적으로 세정하였다. 유기층을 건조시키고(황산나트륨), 여과한 후, 증발시 켜 3-(4-메틸-티오펜-2-일)-아크릴산을 황갈색 고체로서 수득하였다. (수율 49.52 g, 65.7%).

중간체 3

3-(4-메틸-티오펜-2-일)-아크릴로일 아지드

교반 및 얼음-물 조에서 냉각 중의 아세톤 (2000 mL) 중의 3-(4-메틸-티오펜-2-일)-아크릴산 (49.52 g, 0.294 mol) (상기 중간체 2 로부터의 것) 및 트리에틸아민 (44.68 g, 0.441 mol) (Aldrich) 의 용액에 에틸 클로로포르메이트 (35.14 g, 0.323 mol) (Aldrich) 를 첨가하였다. 실온에서 20 분간 교반한 후, 소듐 아지드 (28.70 g, 0.441 mol) (Aldrich) 를 첨가하고, 추가로 20 분간 실온에서 교반을 계속하였다. 이어서, 아세톤을 감압하에서 증발 제거하고, 잔류물을 물로 희석하였다. 이를 디클로로메탄으로 추출하였다. 상기 유기 추출물을 염수로 세정하고, 건조시키고(황산나트륨), 여과한 후, 농축하여 3-(4-메틸-티오펜-2-일)-아크릴로일 아지드를 갈색 고체로서 수득하였다. (수율 48.51 g, 85.4%).

중간체 4

3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온

방법 A: 3-(4-메틸-티오펜-2-일)-아크릴로일 아지드 (69.21 g, 0.358 mol) (상기 중간체 3 으로부터의 것) 및 자일렌 (700 mL) 의 혼합물을 교반하고, 0.5 시간 동안 환류 하에 가열하였다. 요오드 (0.45 g, 1.79 mmol) 를 첨가하고, 혼합물을 밤새 환류 하에 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 중아황산나트륨 수용액과 함께 5 분간 교반하였다. 상기 현탁액을 여과하고, 에테르로 세정하고, 건조하게 흡인하여, 3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온을 황갈색 고체로서 수득하였다. (수율 31.28 g, 52.8%).

방법 B: 3-(4-메틸-티오펜-2-일)-아크릴로일 아지드 (1.54 g; 7.95 mmol) (상기 중간체 3 으로부터의 것) 를 메타-자일렌 (16 mL) 에 용해시켰다. 상기 용액을 105 - 115 ℃ 의 오일 조에서 질소 방출이 그칠 때까지 30 분간 가열하였다. 이 시점에서 수 개의 요오드 결정을 상기 반응물에 첨가하고, 상기 오일 조 온도를 145 - 150 ℃ 로 증가시켰다. 상기 반응물을 환류 하에 6 시간 동안 가열하였다. 냉각 시에, 고체가 용액 중에서 침전되었다. 여과 및 건조하여, 3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온을 수득하였다. (수율: 1.05 g; 80.1%).

HRMS(EI+) m/z C₈H₇NOS [(M⁺)] 에 대한 계산치: 165.0248. 실측치: 165.0250.

중간체 5

7-요오도-3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온

N,N-디메틸포름아미드 (1000 mL) 중의 3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온 (24.27 g, 0.146 mol) (상기 중간체 4 로부터의 것) 및 N-요오도숙신이미드 (34.70 g, 0.154 mol) (Avocado) 의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 에테르 (1000 mL) 로 0.5 시간 동안 교반하였다. 현탁액을 여과하고, 에테르로 세정하고, 건조하게 흡인하여, 7-요오도-3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온을 갈색 고체로서 수득하였다. (수율 41.88 g, 97.9%).

HRMS(EI+) m/z C₈H₆INOS [(M⁺)] 에 대한 계산치: 290.9215. 실측치: 290.9210.

중간체 6

3-메틸-4-옥소-4,5-디히드로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르

에탄올 (50 mL) 중의 7-요오도-3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온 (1.14 g, 3.92 mmol) (상기 중간체 5 로부터의 것), 트리에틸아민 (2.5 mL, 17.94 mmol) (Aldrich) 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드 (0.14 g, 0.2 mmol) (Aldrich) 의 교반된 현탁액을 아르곤으로 탈기시키고, 이어서 일산화탄소로 포화시켰다. 혼합물을 대기압에서 대량의 일산화탄소 하에서 밤새 75 ℃ 오일 조에서 가열하면서 교반하였다. 냉각 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시켜, 에탄올 일부 (약 20%) 를 제거하였다. 형성된 고체를 여과에 의해 수집하고, 에탄올 - 디에틸 에테르 (1:1) 및 이어서 디에틸 에테르로 세정한 후, 마지막으로 진공 하에서 건조시켜, 3-메틸-4-옥소-4,5-디히드로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 수득하였다. (수율 0.78 g, 84.0%).

HRMS(EI+) m/z C₁₁H₁₁NO₃S [(M⁺)] 에 대한 계산치: 237.0460. 실측치: 237.0451.

중간체 7

4-클로로-3-메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르

3-메틸-4-옥소-4,5-디히드로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (2.43 g, 10.24 mmol) (상기 중간체 6 로부터의 것) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (2.4 mL, 13.87 mmol) (Fluka) 의 혼합물을 얼음-물 조에서 냉각시키면서 교반하였다. 상기 혼합물을 옥시염화인 (7.8 mL, 83.68 mmol) (Fluka) 으로 서서히 처리한 후, 실온으로 가온되게 하였다. 이어서, N,N-디메틸포름아미드 (1.0 mL, 12.86 mmol) 를 첨가하고, 혼합물을 70 ℃ 에서 30 분간 가열하면서 교반하였다. 1/2 분량의 N,N-디메틸포름아미드 (0.5 mL, 6.43 mmol) 를 첨가하고, 혼합물을 70 ℃ 에서 추가로 30 분간 가열하였다. 냉각 후, 상기 용액에 얼음을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 상기 유기 추출물을 물, 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세정하였다. 수성 상들을 에틸 아세테이트로 역세정하였다. 에틸 아세테이트 용액들을 수합하고, 건조시키고(황산나트륨), 여과한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 이 잔류물을 실리카겔 (Biotage 65M, 5 : 95 에틸 아세테이트 - 헥산) 상에서 속성 크로마토그래피로 정제하여, 4-클로로-3-메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 수득하였다. (수율 1.57 g, 60.0%).

HRMS(EI+) m/z C₁₁H₁₀ClNO₂S [(M⁺)] 에 대한 계산치: 255.0121. 실측치: 255.0119.

중간체 8

3-브로모메틸-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르

사염화탄소 (50 mL) 중의 4-클로로-3-메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (0.81 g, 3.17 mmol) (상기 중간체 7 로부터의 것) 의 용액에 N-브로모숙신이미드 (0.73 g, 4.12 mmol) (Avacado) 및 2,2'-아조비스이소부티로니트릴 (52 mg, 0.32 mmol) (Aldrich) 을 각각 첨가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃ 에서 24 h 동안 가열하였다. 이어서, 혼합물을 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 크로마토그래피 (에틸 에테르 - 헥산, 1:4, V/V) 로 정제하여 목적한 3-브로모메틸-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 0.7 g, 66%).

HRMS(EI+) m/z C₁₁H₉BrClNO₂S [(M⁺)] 에 대한 계산치: 332.9226. 실측치: 332.9224.

중간체 9

3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르

테트라히드로푸란 - N,N-디메틸포름아미드의 혼합물 (10 mL, 5:1) 중의 3-브로모메틸-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (265 mg, 0.79 mmol) (상기 중간체 8 로부터의 것) 및 2,6-디플루오로-4-브로모-페놀 (166 mg, 0.79 mmol) (Alfa) 의 용액을 탄산칼륨 (110 mg, 0.79 mmol) 으로 처리하였다. 실온에서 15 시간 동안 교반한 후 반응 혼합물을 65 ℃ 로 가온하고, 상기 온도에서 추가로 5.5 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 냉각시켜, 디클로로메탄 및 물로 분할시켰다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후, 농축시켜 잔류물을 수득하고, 이를 실리카겔 컬럼 및 헥산 중의 0-30% 디에틸 에테르를 이용한 크로마토그래피로 정제하여, 생성물을 수득하였다. 상기 물질을 클로로포름 중에서 과량의 헥산으로 침전시켜, 3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 270 mg, 73%).

HRMS m/z C₁₇H₁₁BrClF₂NO₃S + H [M+H]⁺ 에 대한 계산치: 461.9373. 실측치: 461.9377.

중간체 10

4-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르

압력 반응기 내에서 디옥산 (10 mL) 중의 3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (200 mg, 0.43 mmol) (상기 중간체 9 로부터의 것) 의 용액 내로 암모니아 기체를 5 분간 버블링 (bubbling) 하였다. 반응 혼합물을 밀폐시키고, 130 ℃ 에서 9 시간 동안 및 이어서 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 용매를 감압 하에서 증발시켰다. 생성된 잔류물을 헥산 중의 0 - 100% 에틸 아세테이트 구배를 이용한 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 과량의 헥산을 이용하여 테트라히드로푸란 중에서 침전시켜, 4-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 130 mg, 67%).

HRMS m/z C₁₇H₁₃BrF₂N₂O₃S [M⁺] 에 대한 계산치: 441.9798. 실측치: 441.9786.

중간체 11

4-아미노-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복 실산 에틸 에스테르

테트라히드로푸란 (8 mL) 및 디클로로메탄 (2 mL) 의 혼합물 중의 3-브로모메틸-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (400 mg, 1.19 mmol) (상기 중간체 8 로부터의 것) 의 용액에 2-클로로-4-메톡시페놀 (192 mg, 1.21 mmol) (Aldrich) 및 그 후 탄산칼륨 (167 mg, 1.21 mmol) 을 첨가하였다. 박층 크로마토그래피로 판단하여 상기 출발 물질이 소비되면, 반응 혼합물을 디클로로메탄 및 물로 분할시켰다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 및 헥산 중의 0 - 30% 디에틸 에테르 구배를 이용하여 크로마토그래피로 정제하여, 중간체 4-클로로-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 수득하였다.

압력 반응기에서 디옥산 중의 상기 중간체 4-클로로-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르의 용액 내로 암모니아를 실온에서 5 분간 버블링하였다. 이어서 상기 반응 용기를 밀폐시키고, 혼합물을 120 ℃ 에서 12 시간 동안 및 실온에서 48 시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 헥산 중의 20 - 40% 에틸 아세테이트 구배를 이용하여 Biotage 시스템 상에서 크로마토그래피로 정제하여 4-아미노-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 백색 분말로서 수득하였다. (수율 80 mg, 17%).

HRMS m/z C₁₈H₁₇ClN₂O₄S [M⁺] 에 대한 계산치: 392.0598. 실측치: 392.0582.

중간체 12

3-(4-브로모-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르

테트라히드로푸란 - N,N-디메틸포름아미드 혼합물 (5 : 1, 40 mL) 중의 탄산칼륨 (0.67 g, 4.85 mmol) 및 4-브로모페놀 (0.78 g, 4.47 mmol) (Aldrich) 의 현탁액을 65 - 70 ℃ 에서 3 시간 동안 가열하였다. 3-브로모메틸-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (1.41 g; 4.21 mmol) (상기 중간체 8 로부터의 것) 를 첨가하고, 추가적 분량의 테트라히드로푸란 - N,N-디메틸포름아미드 용매 혼합물 (5 : 1, 13 mL) 로 헹구었다. 20 시간 동안 가열을 계속하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 및 물로 분할시켰다. 유기 상을 물 및 염수로 세정하고, 건조시키고(황산나트륨), 여과한 후, 농축시켰다. 조 물질을 고온의 아세토니트릴로부터 결정화하여, 3-(4-브로모-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 수득하였다. (수율: 1.15 g, 66.1%).

HRMS(ES+) m/z C₁₇H₁₃BrClNO₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 425.9561. 실측치: 425.9562.

중간체 13

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르

방법 A: 압력관 내의 디옥산 중의 암모니아의 용액 (0.5 N, 200 mL, 100 mmol) (Aldrich) 에 3-(4-브로모-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (2.1 g, 4.9 mmol) (상기 중간체 12 로부터의 것) 를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 (50 psi) 하에 밀폐시키고, 100 ℃ 에서 48 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 크로마토그래피 (에틸 아세테이트 - 헥산, 1:1, 그 후 에틸 아세테이트) 로 정제하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 1.5 g, 75%).

방법 B: 압력병에서 건조 디옥산 (21 mL) 중의 4-클로로-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (0.95 g; 2.05 mmol) (상기 중간체 12 로부터의 것) 의 용액 내로 암모니아 기체를 15 분간 버블링하였다. 이어서 상기 병의 뚜껑을 닫고, 상기 용액을 120 - 125 ℃ 에서 가열하였다. 상기 반응을 액체 크로마토그래피 분석으로 모니터하고, 15 시간 후 암모니아를 재충전시켰다. 40 시간 후에 상기 반응을 중지시켰다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 및 물로 분할시켰다. 유기 상을 염수로 세정하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 혼합물을 속성 크로마토그래피 (Biotage 40M; 에틸 아세테이트 - 헥산 구배 (10 - 50% 에틸 아세테이트)) 로 정제하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 수득하였다. (수율: 0.65 g, 76.32%).

HRMS(ES+) m/z C₁₇H₁5BrN₂O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 407.0060. 실측치: 407.0060.

중간체 14

4-클로로-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르

테트라히드로푸란 - 디메틸포름아미드 혼합물 (2.8 mL, 5 : 1) 중의 탄산칼륨 (31 mg; 0.22 mmol) 및 페놀 (22 mg; 0.23 mmol) 의 현탁액을 65 ℃ 에서 2 시간 동안 가열하였다. 3-브로모메틸-3-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실 산 에틸 에스테르 (75 mg, 0.22 mmol) (상기 중간체 12 로부터의 것) 를 첨가하고, 밤새 가열을 계속하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 및 물로 분할시켰다. 유기 상을 염수 (2x) 로 세정한 후, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후, 농축시켰다. 조 물질을 속성 크로마토그래피 (Biotage 40S; 75:25 디클로로메탄 - 헥산) 로 정제하여 4-클로로-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 수득하였다. (수율 19.4 mg, 24.9%).

중간체 15

4-아미노-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르

압력병에서 디옥산 (2.4 mL) 중의 4-클로로-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (38 mg; 0.11 mmol) (상기 중간체 14 로부터의 것) 의 용액 내로 암모니아 기체를 30 분간 버블링하였다. 상기 병의 뚜껑을 닫고, 투명한 무색 용액을 115 - 125 ℃ 의 오일 조에서 밤새 가열하였다. 오렌지색 조 혼합물을 농축시키고, 속성 크로마토그래피 (Biotage 12M; 에틸 아세테이트 - 헥산 구배 (15 - 100% 에틸 아세테이트)) 로 정제하여 4-아미노-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 수득하였다. (수율: 14 mg, 39.1%).

크로마토그래피로부터 상당한 양의 미반응 4-클로로-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (16 mg) 를 회수하였다.

중간체 16

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산

수산화나트륨 수용액 (1.0 N, 3.1 mL, 3.1 mmol) 을 테트라히드로푸란 - 메탄올 (13 mL, 3 : 1) 중의 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (0.75 g; 1.84 mmol) (상기 중간체 13 으로부터의 것) 의 용액에 첨가하고, 혼합물을 35 - 40 ℃ 에서 18 시간 동안 가열하였다. 상기 조 반응 혼합물을 농축시키고, 톨루엔과 공비혼합시켰다. 고체 잔류물을 에틸 아세테이트로 분쇄하였다. 이어서 상기 고체를 물에 현탁시키고, 묽은 염산 (1.0 N, 3.4 mL) 으로 처리하였다. 30 분간 교반한 후, 고체를 수집하고, 물 및 그 후 디에틸 에테르로 세정한 후, 건조시켜, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산을 수득하였다. (수율: 0.67 g, 95.5%).

HRMS(ES+) m/z C₁₅H₁₁BrN₂O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 378.9747. 실측치: 378.9747.

중간체 17

4-(4-아미노부틸)모르폴린

무수 에탄올 (50 mL) 중의 4-브로모부틸프탈이미드 (5.0 g, 17.7 mmol) (Lancaster), 모르폴린 (2.0 mL, 23.0 mmol)(Aldrich), 및 트리에틸아민 (5.0 mL, 35.9 mmol) 의 용액을 환류 하에 16 시간 동안 가열하였다. 에탄올을 감압 하에서 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물 및 염수로 세정하였다. 건조 (MgSO₄) 후, 디클로로메탄을 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중의 4% 메탄올로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, 2-(4-모르폴린-4-일-부틸)-이소인돌-1,3-디온을 수득하였다. (수율 4.44 g, 87%)

무수 에탄올 (100 mL) 중의 2-(4-모르폴린-4-일-부틸)-이소인돌-1,3-디온 (4.44 g, 15.4 mmol) 의 용액에 히드라진 수화물 (2.0 mL, 41.2 mmol) (Aldrich) 을 첨가하고, 혼합물을 환류 하에 2 시간 동안 가열하였다. 이어서, 혼합물을 냉각시키고, 여과하고, 침전물을 무수 에탄올로 세정하였다. 수합한 여과액 및 세정물을 감압 하에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 건조 테트라히드로푸란 (100 mL) 에 현탁시키고, 얼음 중에서 냉각시켰다. 벤질 클로로포르메이트 (Aldrich) (톨루엔 중의 50% 용액 7.5 mL, 52.5 mmol) 를 적가하고, 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 과량의 시약을 메탄올로 켄칭 (quenching) 시 켰다. 용매를 감압 하에서 제거하였다. 잔류물을 물로 희석하고, 결과적으로 생성된 용액을 산성화하여 pH 1 이 되도록 하였다(묽은 염산 이용). 상기 수용액을 디클로로메탄으로 세정한 후, (pH 10 이 되도록) 과량의 탄산나트륨으로 처리하고, 에틸 아세테이트 (3 X 100 mL) 로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층들을 수합하고, 건조시킨 후(MgSO₄), 여과시켰다. 이어서 용매를 감압하에서 제거하고, 잔류물을 디클로로메탄 중의 0 - 5% 메탄올 구배로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, N-(벤질옥시카르보닐)-4-(4-아미노부틸)모르폴린을 수득하였다. (수율 2.19 g, 49%)

메탄올 (50 mL) 중의 N-(벤질옥시카르보닐)-4-(4-아미노부틸)모르폴린 (2.19 g, 7.49 mmol) 의 용액을 10% Pd/C (0.2 g) 상에서 54 psi 로 18 시간 동안 수소화하였다. 혼합물을 Celite^® 패드를 통해 여과시키고, 감압 하에서 농축시켜, 4-(4-아미노부틸)모르폴린을 수득하고, 이를 추가적인 정제 없이 사용하였다. (수율 1.43 g, 100%).

중간체 18

2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸아민

0 ℃ 의 디클로로메탄 (50 mL) 중의 2-(2-아미노에톡시)에탄올 (3.5 g, 33.3 mmol) (Aldrich) 의 용액에 N-카르보에톡시프탈이미드 (Aldrich) 및 트리에틸아민 을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 1 일 동안 교반한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 에틸 아세테이트 - 헥산 (2:1, V/V) 으로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, 2-[2-(2-히드록시-에톡시)-에틸]-이소인돌-1,3-디온을 수득하였다. (수율 3.77 g, 48%)

0 ℃ 의 디클로로메탄 (60 mL) 중의 2-[2-(2-히드록시-에톡시)-에틸]-이소인돌-1,3-디온 (3.77 g, 16.03 mmol) 및 사브롬화탄소 (6.38 g, 19.23 mmol) (Aldrich) 의 용액에 트리페닐포스핀 (5.04 g, 19.23 mmol) (Aldrich) 을 첨가하였다. 혼합물을 18 시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 - 헥산 (1:2, V/V) 으로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, 2-[2-(2-브로모-에톡시)-에틸]-이소인돌-1,3-디온을 수득하였다. (수율 4.0 g, 84%).

무수 에탄올 (70 mL) 중의 2-[2-(2-브로모-에톡시)-에틸]-이소인돌-1,3-디온 (4.0 g, 13.4 mmol), 피롤리딘 (1.46 mL, 17.4 mmol) (Aldrich), 및 트리에틸아민 (3.74 mL, 26.8 mmol) 의 용액을 환류 하에 18 시간 동안 가열하였다. 에탄올을 감압 하에서 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물 및 염수로 세정하였다. 건조 (MgSO₄) 후, 디클로로메탄을 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중의 5 - 10% 메탄올 구배로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, 2-[2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸]-이소인돌-1,3-디온을 수득하였다. (수율 1.56 g, 40%).

무수 에탄올 (20 mL) 중의 2-[2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸]-이소인돌-1,3-디온 (1.56 g, 5.41 mmol) 의 용액에 히드라진 수화물 (1.0 mL, 20.6 mmol) (Aldrich) 을 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 2 시간 동안 가열하고, 냉각시키고, 여과하고, 침전물을 무수 에탄올로 세정하였다. 여과액을 농축시키고, 잔류물을 건조 테트라히드로푸란 (30 mL) 에 현탁시키고, 얼음 중에서 냉각시켰다. 벤질 클로로포르메이트 (Aldrich) (톨루엔 중의 50% 용액 2.62 mL, 18.39 mmol) 를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 과량의 시약을 메탄올로 켄칭하고, 용매를 감압 하에서 제거하였다. 잔류물을 물로 희석하고, 생성된 용액을 산성화하여 pH 1 이 되도록 하고(묽은 염산), 디클로로메탄으로 세정한 후, (pH 10 이 되도록) 과량의 탄산나트륨으로 처리하고, 에틸 아세테이트 (3 X 50 mL) 로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층들을 수합하고, 건조시킨 후(MgSO₄), 여과하고, 감압 하에서 농축시켰다. 상기 잔류물을 디클로로메탄 중의 0 - 5% 메탄올 구배로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, [2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸]-카르밤산 벤질 에스테르를 수득하였다. (수율 1.2 g, 76%).

메탄올 (50 mL) 중의 [2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸]-카르밤산 벤질 에스테르 (1.2 g, 4.1 mmol) 의 용액을 10% Pd/C (0.1 g) 상에서 50 psi 에서 18 시간 동안 수소화하였다. 혼합물을 Celite^® 패드를 통해 여과시키고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜, 2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸아민을 수득하고, 이를 추 가적인 정제 없이 사용하였다. (수율 0.85 g, 99%).

중간체 19

4-(4-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸아민

문헌 [Baker, W. R. 등 J. Med . Chem ., 1992, 35, 1722 - 1734] 의 절차에 따라 4-히드록시피페리딘 (Aldrich) 으로부터 N-포르밀-4-히드록시피페리딘을 합성하였다.

테트라히드로푸란 (100 mL) 중의 N-포르밀-4-히드록시피페리딘 (10.0 g, 77.4 mmol) 의 용액에 0 ℃ 의 수소화나트륨 (3.41g, 오일 중 60%, 85.2 mmol) (Aldrich) 을 첨가한 후, 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 0 ℃ 로 재냉각시키고, 요오도메탄 (5.3 mL, 85.2 mmol) (Aldrich) 을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 상기 반응을 물로 조심스럽게 켄칭한 후, 에틸 아세테이트 (3 X 50 mL) 로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층들을 수합하고, 건조시킨 후(MgSO₄), 여과하였다. 용매를 감압하에서 제거하고, 잔류물을 디클로로메탄 중의 4% 메탄올로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, 4-메톡시-피페리딘-1-카르브알데히드를 수득하였다. (수율 5.63 g, 51%).

물 (40 mL) 중의 4-메톡시-피페리딘-1-카르브알데히드 (5.63 g, 39.30 mmol) 및 수산화칼륨 (7.37 g, 0.13 mol) 의 용액을 실온에서 1 일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에테르 (4 X 20 mL) 로 추출하고, 에테르 층들을 수합하고, 건조시킨 후(MgSO₄), 여과하였다. 이를 농축하여 4-메톡시피페리딘을 수득하고, 이를 추가적인 정제 없이 사용하였다. (수율 2.43 g, 33%).

무수 에탄올 (50 mL) 중의 4-브로모부틸프탈이미드 (5.0 g, 17.7 mmol) (Lancaster), 4-메톡시-피페리딘 (2.43 g, 21.3 mmol), 및 트리에틸아민 (5.0 mL, 35.9 mmol) 의 용액을 환류 하에 18 시간 동안 가열하였다. 에탄올을 감압 하에서 제거하였다. 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 물 및 염수로 세정하였다. 건조 (MgSO₄) 및 여과한 후, 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중의 4% 메탄올로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, 2-[4-(4-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-이소인돌-1,3-디온을 수득하였다. (수율 4.06 g, 73%).

무수 에탄올 (100 mL) 중의 2-[4-(4-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-이소인돌-1,3-디온 (4.06 g, 12.87 mmol) 의 용액에 히드라진 수화물 (2.0 mL, 41.2 mmol) (Aldrich) 을 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 2 시간 동안 가열한 후, 냉각시키고, 여과하고, 침전물을 무수 에탄올로 세정하였다. 여과액을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 건조 테트라히드로푸란 (100 mL) 에 현탁시키고, 얼음 중에서 냉각시켰다. 벤질 클로로포르메이트 (Aldrich) (톨루엔 중의 50% 용액 6.25 mL, 43.77 mmol) 를 적가한 후, 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 과량 의 시약을 메탄올로 켄칭하고, 용매를 감압 하에서 제거하였다. 잔류물을 물로 희석하고, 생성된 용액을 산성화하여 pH 1 이 되도록 하고(묽은 염산), 디클로로메탄으로 세정한 후, (pH 10 이 되도록) 과량의 탄산나트륨으로 처리하고, 에틸 아세테이트 (3 X 100 mL) 로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층들을 수합하고, 건조시키고(MgSO₄), 여과한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 상기 잔류물을 디클로로메탄 중의 5 - 10% 메탄올 구배로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, [4-(4-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-카르밤산 벤질 에스테르를 수득하였다. (수율 1.9 g, 46%).

메탄올 (30 mL) 중의 [4-(4-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-카르밤산 벤질 에스테르 (1.9 g, 5.93 mmol) 의 용액을 10% Pd/C (0.19 g) 상에서 50 psi 에서 18 시간 동안 수소화하였다. 혼합물을 Celite® 패드를 통해 여과시키고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜, 4-(4-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸아민을 수득하고, 이를 추가적인 정제 없이 사용하였다. (수율 1.43 g, 100%).

중간체 20

3-(2,2-디메틸-[1,3]디옥솔란-4-일-메톡시)-프로필아민

0 ℃ 의 건조 테트라히드로푸란 (500 mL) 중의 2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-메탄올 (26.43 g 0.20 mol) (Aldrich) 및 아크릴로니트릴 (26.33 mL, 0.40 mol) (Aldrich) 의 용액에 수소화나트륨 (1.6 g, 오일 중 60%, 40 mmol) (Aldrich) 을 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, 물 (100 mL) 을 적가하고, 생성된 현탁액을 감압 하에서 농축시켰다. 물 (200 mL) 을 다시 첨가하고, 혼합물을 디클로로메탄 (2 X 300 mL) 으로 추출하였다. 추출물들을 수합하고, 건조시키고(MgSO₄), 여과한 후, 농축하여 오일을 수득하고, 이를 감압 하에서 증류하여, 3-(2,2-디메틸-[1,3]디옥솔란-4-일-메톡시)-프로피오니트릴을 수득하였다. (수율 26.07 g, 70%; b.p. 86 - 105 ℃ / 0.5 mmHg).

메탄올 (450 mL) 중의 3-(2,2-디메틸-[1,3]디옥솔란-4-일-메톡시)-프로피오니트릴 (13.89 g, 75.0 mmol) 의 용액에 염화코발트(II) (19.48 g, 0.15 mol) (Aldrich) 를 첨가하였다. 교반 및 냉각시킨 (얼음 물 조) 상기 용액에 수소화붕소나트륨 (28.37 g, 0.75 mol) (Aldrich) 을 첨가하였다. 교반을 1 시간 동안 계속한 후, 진한 암모늄 히드록시드 수용액 (250 mL) 을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 여과한 후, 감압 하에서 농축시켜, 메탄올을 제거하였다. 혼합물을 디클로로메탄 (2 X 300 mL) 으로 추출하고, 추출물들을 수합하고, 건조시킨 후(MgSO₄), 감압 하에서 농축시켜 오일을 수득하고, 이를 감압 하에서 증류하여, 3-(2,2-디메틸-[1,3]디옥솔란-4-일-메톡시)-프로필아민을 수득하였다. (수율 7.95 g, 56%; b.p. 75 - 82 ℃ / 0.6 mmHg).

실시예 1

4-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복 실산 (2-히드록시-에틸)-아미드

에탄올아민 (대략 2 mL) (Aldrich) 중의 4-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (51 mg, 0.11 mmol) (상기 중간체 10 로부터의 것) 의 용액을 75 ℃ 에서 8 시간 동안 및 실온에서 밤새 교반하였다. 그 후, 상기 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물로 분할시켰다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후, 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중의 0 - 30% 메탄올 구배를 이용한 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제한 후, 과량의 헥산을 이용하여 테트라히드로푸란 중에서 침전시켜, 4-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 22 mg, 42%).

HRMS m/z C₁₇H₁₄BrF₂N₃O₃S + H [M+H]⁺ 에 대한 계산치: 457.9980. 실측치: 457.9984.

실시예 2

4-아미노-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드

4-아미노-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (80 mg, 0.20 mmol) (상기 중간체 11 로부터의 것) 를 에탄올아민 (2 mL) (Aldrich) 및 디메틸술폭시드 (대략 1 mL) 의 혼합물에 용해시켰다. 상기 혼합물을 80 ℃ 에서 밤새 교반한 후, 실온으로 냉각시켰다. 물을 첨가하고, 혼합물을 여과하여, 형성된 백색 침전물을 수집하였다. 상기 침전물을 디클로로메탄 중의 0 - 10% 메탄올 구배를 이용한 실리카겔 컬럼을 이용하여 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획들을 수합하고, 농축시키고, 잔류물을 과량의 물을 이용하여 디메틸술폭시드 중에서 침전시켜, 4-아미노-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드를 백색 분말로서 수득하였다. (수율 20 mg, 25%).

HRMS m/z C₁₈H₁₈ClN₃O₄S [M⁺] 에 대한 계산치: 407.0707. 실측치: 407.0700. KDR IC₅₀ 0.5089 μM, FGFR IC₅₀ 2.559 μM.

실시예 3

4-아미노-3-(벤조[1,3]디옥솔-5-일옥시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드

테트라히드로푸란 (8 mL) 및 디클로로메탄 (2 mL) 중의 3-브로모메틸-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (400 mg, 1.19 mmol) (상기 중간체 8 로부터의 것) 의 용액을 세사몰 (sesamol) (167 mg, 1.01 mmol) (Aldrich) 및 탄산칼륨 (167 mg, 1.21 mmol) 으로 처리하고, 박층 크로마토그래피에 의해 출발 물질의 소비가 나타날 때까지 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 디클로로메탄 및 물로 분할시켰다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 및 헥산 중의 0 - 30% 디에틸 에테르 구배를 이용하여 정제하여, 중간체 3-(벤조[1,3]디옥솔-5-일옥시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르를 수득하였다.

압력관 내에서 실온에서 디옥산 중에 용해시킨 중간체 3-(벤조[1,3]디옥솔-5-일옥시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르의 용액 내로 암모니아 기체를 5 분간 버블링하였다. 이어서, 상기 반응 용기를 밀폐시키고, 혼합물을 120 ℃ 에서 12 시간 동안 및 그 후 실온에서 48 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에서 증발 제거하였다. 생성된 잔류물을 속성 크로마토그래피 (헥산 중 20 - 40% 에틸 아세테이트 구배를 가진 Biotage 시스템) 로 정제하여, 4-아미노-3-(벤조[1,3]디옥솔-5-일옥시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르 복실산 에틸 에스테르를 수득하고, 이를 임의의 추가적인 특징 분석 없이 다음 단계에 사용하였다.

에탄올아민 (2 mL) (Aldrich) 및 디메틸술폭시드 (1 mL) 중의 상기 4-아미노-3-(벤조[1,3]디옥솔-5-일옥시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르의 용액을 120 ℃ 오일 조에서 가열하고, 박층 크로마토그래피에 의해 출발 물질의 소비가 표시될 때까지 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 냉각시키고, 물로 처리하였다. 형성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세정한 후, 건조시켜, 4-아미노-3-(벤조[1,3]디옥솔-5-일옥시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드를 백색 분말로서 수득하였다. (수율 15 mg, 3%).

HRMS m/z C₁₈H₁₇N₃O₅S [M⁺] 에 대한 계산치: 387.0889. 실측치: 387.0888.

실시예 4a

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드

디메틸술폭시드 (0.5 mL) 중의 4-아미노-3-(4-브로모페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (30 mg, 0.074 mmol) (상기 중간체 13 으로부터의 것) 및 에탄올아민 (0.50 mL, 8.31 mmol) (Aldrich) 의 용액을 70 ℃ 의 오일 조에서 10 시간 동안 가열하였다. 상기 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세정하였다. 유기 상을 농축시키고, 잔류물을 물로 처리하였다. 형성된 고체를 수집하였는데, 이는 여전히 출발 물질을 함유하고 있는 것으로 나타났다. 상기 고체 및 그의 모액을 부가적인 4-아미노-3-(4-브로모페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (14 mg; 0.034 mmol) 와 함께 조합하여, 디메틸술폭시드 (0.5 mL) 에 용해시켰다. 에탄올아민 (1.0 mL, 16.62 mmol) 을 첨가하고, 상기 혼합물 75 ℃ 에서 밤새 가열하였다. 조 반응물을 물로 희석하자, 유백색의 고체가 침전되었다. 에틸 아세테이트의 첨가에 의해 상기 고체를 용해시키지 못하였다. 고체를 수집하고 건조시켜, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드를 수득하였다. (수율 31.5 mg (90% 순수); 62.10%).

상기 물질 중 일부 (22 mg) 를 디메틸술폭시드 (0.5 mL) 에 용해시키고, 75 ℃ 에서 24 시간 동안 에탄올아민 (1.0 mL, 16.62 mmol) 으로 재처리하였다. 조 반응물을 물 및 그 후 에틸 아세테이트로 희석하자, 고체가 침전되었다. 고체를 수집하고 건조시켜, 순수한 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드를 수득하였다. (수율 20 mg, 전부 43.8%).

HRMS(ES+) m/z C₁₇H₁₆BrN₃O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 422.0169. 실측 치: 422.0173. KDR IC₅₀ 0.0200 μM, FGFR IC₅₀ 0.0724 μM, VEGF-HUVEC 0.264 μM, FGF-HUVEC 2.762 μM.

실시예 4b

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드 비스-메탄술폰산 염

메탄올 (5 mL) 중의 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드 (0.05 g, 0.12 mmol) (상기 실시예 4a 로부터의 것) 의 용액을 메탄술폰산 (7.7 μL, 0.12 mmol) 으로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 2 일간 교반한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물에 현탁시켰다. 고체를 여과한 후, 건조시켜, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드 비스-메탄술폰산 염을 백색 분말로서 수득하였다. (수율: 25 mg, 34%).

실시예 5

4-아미노-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드

압력병에서 디메틸술폭시드 (0.5 mL) 중의 4-아미노-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (31 mg; 0.094 mmol) (상기 중간체 15 로부터의 것) 의 용액을 에탄올아민 (1.0 mL, 16.62 mmol) (Aldrich) 으로 처리하고, 75 ℃ 에서 16 시간 동안 가열하였다. 상기 조 반응 혼합물을 물로 희석하자, 고체가 침전되었다. 고체를 수집하였는데, 이는 15% 미반응 출발 물질을 여전히 함유하고 있는 것으로 나타났다. 고체를 그의 모액과 함께 재수합하고, 75 ℃ 에서 추가로 19 시간 동안 에탄올아민 (1.0 mL) 으로 재처리하였다. 상기 조 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하였다. 생성된 고체를 수집하고, 물 및 디에틸 에테르로 세정한 후, 아세토니트릴로 분쇄 (trituration) 하여, 4-아미노-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드를 수득하였다. (수율 16.7 mg, 51.5%).

HRMS(ES+) m/z C₁₇H₁₇N₃O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 344.1064. 실측치: 344.1066.

실시예 6

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1-메틸-에틸)-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (50 mg, 0.13 mmol) (상기 중간체 13 으로부터의 것) 및 라세미 2-아미노-1-프로판올 (2.6 g, 35 mmol) (Aldrich) 의 혼합물을 150 ℃ 에서 6 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (50 mL) 로 희석한 후, 물로 세정하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (50 mL) 로 추출하였다. 유기층을 분리시키고, 수합한 후, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 크로마토그래피 (에틸 아세테이트 - 메탄올, 85:15) 로 정제하여, rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1-메틸-에틸)-아미드를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 30 mg, 55%).

HRMS m/z C₁₈H₁₈BrN₃O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 436.0325. 실측치: 436.0329.

실시예 7

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-프로필)-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (60 mg, 0.15 mmol) (상기 중간체 13 으로부터의 것) 및 라세미 1-아미노-2-프로판올 (3 g, 40 mmol) (Aldrich) 의 혼합물을 130 ℃ 에서 16 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (50 mL) 로 희석하고, 물로 세정하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (50 mL) 로 추출하였다. 유기층을 분리시키고, 수합한 후, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 크로마토그래피 (에틸 아세테이트 : 메탄올, 85:15) 로 정제하여, rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-프로필)-아미드를 백색 고체로서 수득하였다. (수율, 34 mg, 52%).

실시예 8

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2,3-디히드록시-프로필)-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (80 mg, 0.20 mmol) (상기 중간체 13 으로부터의 것) 및 라세미 3-아미노-1,2-프로판디올 (3 g, 33 mmol) (Aldrich) 의 혼합물을 130 ℃ 에서 16 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 에틸 아세테이트 및 메탄올 (1:1, 20 mL) 의 공-용매 혼합물로 희석하였다. 형성된 침전물을 여과하고, 건조시킨 후, 수집하여, rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2,3-디히드록시-프로필)-아미드를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 80 mg, 90%).

HRMS m/z C₁₈H₁₈BrN₃O₄S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 452.0274. 실측치: 452.0279.

실시예 9

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1,1-디메틸-에틸)-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (80 mg, 0.20 mmol) (상기 중간체 13 으로부터의 것) 및 2-아미노-2-메틸-1-프로판올 (4 g, 45 mmol) (Aldrich) 의 혼합물을 130 ℃ 에서 16 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (100 mL) 로 희석하고, 물로 세정하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (100 mL) 로 추출하였다. 유기층을 분리시키고, 수합한 후, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 크로마토그래피 (에틸 아세테이트 : 메탄올, 10:1) 로 정제하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1,1-디메틸-에틸)-아미드를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 30 mg, 33%).

HRMS m/z C₁₉H₂₀BrN₃O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 450.0482. 실측치: 450.0487.

실시예 10

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1-히드록시메틸-에틸)-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (80 mg, 0.20 mmol) (상기 중간체 13 으로부터의 것) 및 2-아미노-1,3-프로판디올 (3 g, 33 mmol) (Aldrich) 의 혼합물을 180 ℃ 에서 5 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 에틸 아세테이트 및 메탄올 (1:1, 20 mL) 의 공-용매 혼합물로 희석하였다. 형성된 침전물을 여과하고, 건조시킨 후, 수집하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1-히드록시메틸-에틸)-아미드를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 60 mg, 66%).

HRMS m/z C₁₈H₈BrN₃O₄S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 452.0274. 실측치: 452.0279.

실시예 11

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-디에틸아미노-에틸)-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (20.4 mg, 0.054 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것), 1-히드록시-벤조트리아졸 수화물 (10.0 mg, 0.074 mmol) (Aldrich) 및 1,3-디이소프로필-카르보디이미드 (10.0 μL, 0.064 mmol) (Aldrich) 를 격렬히 교반하면서 테트라히드로푸란: N,N-디메틸포름아미드 (1.2 mL, 5:1) 중에서 수합하였다. 상기 반응물들은 고체의 재-침전 전에 잠시 용액으로 되었다. 혼합물을 실온에서 30 분간 교반하였다. 이어서, N,N-디에틸렌디아민 (15 μL, 0.11 mmol) (Aldrich) 을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 중에서 녹이고, 물 및 염수로 세정하였다. 수성 상에는 임의의 미반응 출발 물질이 잔류하였다. 유기 상을 농축시키고, 역상 크로마토그래피 (SB-C18 컬럼, 25 mm x 21.2 mm, 10 분에 걸친 5-90% 아세토니트릴 - 물 (0.75% 트리플루오로아세트산 함유) 구배) 로 정제하였다. 생성물을 함유한 분획들을 수합한 후, 동결-건조시켰다. 상기 동결-건조시킨 물질 (트리플루오로아세트산 염으로서의 것) 을 또 다른 실험으로부터의 유사한 물질과 조합하고, 이를 에틸 아세테이트에 용해시켰다. 상기 트리플루오로아세트산 염을 1N 수산화나트륨으로 세정하여 중화시키고, 물 및 염수로 세정하여 중성으로 하였다. 유기 상을 건조 및 농축 시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 - 헥산으로부터 재결정화하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-디에틸아미노-에틸)-아미드를 수득하였다. (수율: 32.7 mg, 2 개의 실험에 대해 합한 수율 43.0%).

HRMS(ES+) m/z C₂₁H₂₅BrN₄O₂S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 477.0955. 실측치: 477.0961.

실시예 12a

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (21.1 mg, 0.056 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것), 1-히드록시-벤조트리아졸 수화물 (12.0 mg; 0.089 mmol) (Aldrich) 및 1,3-디이소프로필-카르보디이미드 (12.5 μL, 0.080 mmol) (Aldrich) 를 격렬히 교반하면서 테트라히드로푸란: N,N-디메틸포름아미드 (1.2 mL, 5:1) 중에서 조합하였다. 고체가 서서히 용액으로 되었다. 1 시간 후, 4-피롤리디노부틸아민 (23.0 mg; 0.16 mmol) (Pfaltz & Bauer) 을 첨가하고, 실온에서 교반을 계속하였다. 대략 40 시간 후, 반응 혼합물을 농축시켰 다. 잔류물을 에틸 아세테이트에 용해시키고, 물 및 염수로 세정하였다. 유기 상을 농축시키고, 다른 반응들로부터의 물질들과 함께, 역상 HPLC (SB-C18 컬럼, 25 mm x 21.2 mm, 10 분에 걸친 5-90% 아세토니트릴 - 물 (0.75% 트리플루오로아세트산 함유) 구배) 로 정제하였다. 모든 실행으로부터의 순수한 분획들을 수합한 후, 동결-건조시켰다. 비결정질 고체 (트리플루오로아세트산 염) 를 에틸 아세테이트에 용해시키고, 1N 수산화나트륨 워시 (wash) 로 중화시켰다. 유기 상을 물 및 염수로 세정하여 중성이 되게 하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 이어서, 상기 물질을 에틸 아세테이트 - 헥산으로부터 재결정화하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드를 수득하였다. (수율 11.9 mg).

HRMS(ES+) m/z C₂₃H₂₇BrN₄O₂S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 503.1111. 실측치: 503.1114.

실시예 12b

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드 히드로클로라이드 염

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (0.187g; 0.49 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것), 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (0.13 g; 0.084 mmol) (Aldrich) 및 1,3-디이소프로필카르보디이미드 (0.11 mL; 0.70 mmol) (Aldrich) 를 격렬히 교반하면서 테트라히드로푸란: N,N-디메틸포름아미드 (48 mL, 5:1) 중에서 조합하였다. 상기 용액을 실온에서 4 시간 동안 교반하고, 그 후, 4-피롤리디노부틸아민 (0.20 g; 1.41 mmol) (Pfaltz & Bauer) 을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반을 계속하였다. 상기 반응물을 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 및 물로 분할하였다. 유기 상을 물 (2x) 및 염수로 세정한 후, 농축시켰다. 잔류물을 수성 트리플루오로아세트산에 용해시키고, 여과하여 불용성 물질을 제거한 후, 동결-건조시켰다. 상기 동결-건조시킨 트리플루오로아세트산 염을 에틸 아세테이트로 희석하고, 1N 수산화나트륨으로 중화하여, 유리 염기를 형성시키고, 이어서 물 및 염수로 세정하였다. 유기 상을 농축시켰다. 상기 유리 염기 잔류물을 고온의 테트라히드로푸란 (30 mL) 에 용해시키고, 1 당량의 수성 1 N 염산으로 처리하였다. 생성된 히드로클로라이드 염을 용액 중에서 침전시켰다. 고체를 수집하고, 물에 재용해시키고, 동결-건조시켜, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드 히드로클로라이드를 수득하였다. (수율 0.17 g, 65.7%).

HRMS(ES+) m/z C₂₃H₂₇BrN₄O₂S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 503.1111. 실측 치: 503.1105.

실시예 12c

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드 메탄술폰산 염

상기 화합물은 실시예 12b 의 화합물과 유사한 방식으로 대응 아미드 및 메탄술폰산을 사용하여 제조할 수 있다.

실시예 13a

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-모르폴린-4-일-에틸)-아미드

N-(2-아미노에틸)-모르폴린 (2.0 mL) (Aldrich) 및 메탄올 (2.0 mL) 을 수합한 후, 황산나트륨 및 염기성 알루미나 상에서 2 - 3 시간 동안 교반하였다. 상기 용액의 일부 (1.0 mL; 3.8 mmol) 를 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에 노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르 (36.3 mg; 0.089 mmol) (상기 중간체 13 으로부터의 것) 및 시안화나트륨 (12.0 mg; 0.25 mmol) 의 혼합물에 첨가하였다. 투명한 용액이 신속히 수득되었는데, 상기 용액을 65 ℃ 에서 가열하였다. 3 시간 후에 고체가 용액 중에서 침전되기 시작했다. 42 시간 후 상기 반응의 액체 크로마토그래피 분석 결과, 목적한 생성물 및 산 부-생성물 (4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산) 의 약 1:1 혼합물로 나타났다. 상기 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 상기 유기 용액을 물 및 염수로 세정하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 - 헥산으로부터 재결정화하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-모르폴린-4-일-에틸)-아미드를 수득하였다. (수율 11.0 mg, 25.1%).

HRMS(ES+) m/z C₂₁H₂₃BrN₄O₃S +H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 491.0747. 실측치: 491.0749.

실시예 13b

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-모르폴린-4-일-에틸)-아미드 히드로클로라이드 염

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (40.7 mg, 0.11 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것), 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (23.8 mg, 0.18 mmol) (Aldrich) 및 1,3-디이소프로필카르보디이미드 (25 μL; 0.16 mmol) (Aldrich) 를 격렬히 교반하면서 테트라히드로푸란 : N,N-디메틸포름아미드 (16 mL, 5:1) 중에서 조합하였다. 상기 용액을 실온에서 3.75 시간 동안 교반하고, 그 후, N-(2-아미노에틸)-모르폴린 (42 μL; 0.32 mmol) (source) 을 첨가하고, 실온에서 교반을 계속하였다. 40 시간 후 상기 반응물을 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 중에서 녹이고, 생성된 유기 상을 물 및 염수로 세정하였다. 유기 상을 농축시켰다. 잔류물을 수성 트리플루오로아세트산에 용해시키고, 여과하여 불용성 물질을 제거한 후, 역상 HPLC (SB-C18 컬럼, 25 mm x 21.2 mm, 10 분에 걸친 5-90% 아세토니트릴 - 물 (0.75% 트리플루오로아세트산 함유) 구배) 로 복수 회 정제하였다. 순수한 생성물을 함유한 분획들을 수합한 후, 농축시켜 거의 건조되게 하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 1N 수산화나트륨으로 중화하여 상기 유리 염기를 형성시킨 후, 물 및 염수로 세정하였다. 상기 유리 염기 (27.4 mg; 0.056 mmol) 를 고온의 테트라히드로푸란에 용해시키고, 1 당량의 수성 1N 염산 (53 μL) 으로 처리하였다. 생성된 히드로 클로라이드 염은 용액 중에 침전되었다. 고체를 수집하고 건조시켜, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-모르폴린-4-일-에틸)-아미드 히드로클로라이드를 수득하였다. (수율 16.2 mg; 28.6%).

HRMS(ES+) m/z C₂₁H₂₃BrN₄O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 491.0747. 실측치: 491.0746. KDR IC₅₀ 0.0584 μM, FGFR IC₅₀ 0.1803 μM, VEGF-HUVEC 0.204 μM, FGF-HUVEC 0.627 μM.

실시예 14

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (3-디메틸아미노-2,2-디메틸-프로필)-아미드

무수 N,N-디메틸포름아미드 및 아세토니트릴 (1:1, 10 mL) 중의 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (0.1 g, 0.26 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것) 및 N,N,2,2-테트라메틸-1,3-프로판디아민 (3 당량, 0.1 g, 0.79 mmol) (Aldrich) 의 용액에 디페닐포스포릴 아지드 (0.29 g, 1.06 mmol) (Aldrich) 및 트리에틸아민 (3 당량, 0.08 g, 0.79 mmol) (Aldrich) 을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 (100 mL) 로 희석하고, 물로 세정하였다. 유기층을 분리시키고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 크로마토그래피 (에틸 아세테이트 : 메탄올 : 트리에틸아민, 9:1:0.04) 로 정제하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (3-디메틸아미노-2,2-디메틸-프로필)-아미드를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 24 mg, 19%).

HRMS m/z C₂₂H₂₇BrN₄O₂S + CH₃OH + H [(M+CH₃OH+H)⁺] 에 대한 계산치: 523.1373. 실측치: 523.1347.

실시예 15

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (5-디에틸아미노-1-메틸-펜틸)-아미드

무수 N,N-디메틸포름아미드 및 아세토니트릴 (1:1, 10 mL) 중의 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (0.1 g, 0.26 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것) 및 라세미 2-아미노-5-디에틸아미노펜탄 (0.12 g, 0.79 mmol) (Aldrich) 의 용액에 디페닐포스포릴 아지드 (0.29 g, 1.06 mmol) (Aldrich) 및 트리에틸아민 (0.08 g, 0.79 mmol) 을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 (100 mL) 로 희석하고, 물로 세정하였다. 유기층을 분리시키고, 황산나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 크로마토그래피 (에틸 아세테이트 : 메탄올 : 트리에틸아민, 8:2:0.04) 로 정제하여, rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-디에틸아미노-1-메틸-부틸)-아미드를 백색 고체로서 수득하였다. (수율 21 mg, 16%).

HRMS m/z C₂₄H₃₁BrN₄O₂S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 519.1424. 실측치: 519.1426.

실시예 16

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 아미드

티오닐 클로라이드 (20 mL) 중의 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (0.1 g, 0.26 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것) 의 용액에 트리에틸아민 한 방울 (0.1 mL) 을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 80 ℃ 에서 1 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 농축시켜, 건조되게 하였다. 잔류물에 암모니아의 메탄올성 용액 (20 mL, 40 mmol, 2 N) 을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 크로마토그래피 (에틸 아세테이트 : 메탄올, 20:1) 로 정제하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 아미드를 회백색 고체로서 수득하였다. (수율 35 mg, 36%).

HRMS m/z C₁₅H₁₂BrN₃O₂S - H₂ [(M-2H)⁺] 에 대한 계산치: 376.9834. 실측치: 376.9813.

구체적으로 예시되지 않는 한 실시예 17 - 24 의 화합물들은 실시예 12a 및 12b 의 화합물들과 유사한 방식으로 적절한 화합물들을 형성하는 대응 아민들을 사용하여 제조할 수 있다.

실시예 17

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸]-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (0.05 g, 0.13 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것), 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (28.5 mg, 0.21 mmol) (Aldrich) 및 1,3-디이소프로필카르보디이미드 (0.03 mL, 0.19 mmol) (Aldrich) 를 교반 중인 테트라히드로푸란 - N,N-디메틸포름아미드 (3.6 mL, 5:1, V/V) 의 혼합물 중에서 조합하였다. 1 시간 후, 2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸아민 (0.06 g, 0.40 mmol) (상기 중간체 18 로부터의 것) 을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3 일간 교반한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 - 물 (20 - 90% 구배) 로 용출시키는 C18 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-피페리딘-1-일-에톡시)-에틸]-아미드를 백색 분말로서 수득하였다. (수율 36.6 mg, 54%).

HRMS (ES⁺) m/z C₂₃H₂₇BrN₄O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 519.1060. 실측치: 519.1060.

실시예 18

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [4-(3-메톡시-피롤리딘-1-일)-부틸]-아미드

실시예 19

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4- 피페리딘-1-일-부틸)-아미드

실시예 20

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-피페리딘-1-일-에톡시)-에틸]-아미드

실시예 21

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [4-(3-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-아미드

실시예 22

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-모르폴린-4-일-부틸)-아미드

티오닐 클로라이드 (20 mL) (Aldrich) 중의 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (0.05 g, 0.13 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것) 의 용액에 한 방울의 트리에틸아민 (0.1 mL) 을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 80 ℃ 에서 1 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켜 건조되게 하였다. 건조 테트라히드로푸란 (15 mL) 중의 상기 잔류물에 4-(4-아미노부틸)모르폴린 (0.06 g, 0.40 mmol) (상기 중간체 17 로부터의 것) 을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 감압 하에서 농축시켰다.

잔류물을 아세토니트릴 - 물 (40 - 80% 구배) 로 용출시키는 C18 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-모르폴린-4-일-부틸)-아미드를 수득하였다. (수율 34 mg, 51%).

HRMS (ES⁺) m/z C₂₃H₂₇BrN₄O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 519.1060. 실측 치: 519.1060.

실시예 23

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-모르폴린-4-일-에톡시)-에틸]-아미드

실시예 24

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [4-(4-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (0.05 g, 0.13 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것), 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (28.5 mg, 0.21 mmol) (Aldrich) 및 1,3-디이소프로필카르보디이미드 (0.03 mL, 0.19 mmol) (Aldrich) 를 교반 중인 테트라히드로푸란 - N,N-디메틸포름아미드 (3.6 mL, 5:1, V/V) 의 혼합물 중에서 조합하였다. 1 시간 후, 4-(4-메톡시-피 페리딘-1-일)-부틸아민 (0.07 g, 0.40 mmol) (상기 중간체 19 로부터의 것) 을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3 일간 교반한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 - 물 (20 - 90% 구배) 로 용출시키는 C18 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-피페리딘-1-일-에톡시)-에틸]-아미드를 백색 분말로서 수득하였다. (수율 22.0 mg, 31%).

HRMS (ES⁺) m/z C₂₅H₃₁BrN₄O₃S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 547.1373. 실측치: 547.1372.

실시예 25

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [3-(2,3-디히드록시-프로폭시)-프로필]-아미드

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (0.05 g, 0.13 mmol) (상기 중간체 16 로부터의 것), 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (28.5 mg, 0.21 mmol) (Aldrich) 및 1,3-디이소프로필카르보디이미드 (0.03 mL, 0.19 mmol) (Aldrich) 를 교반 중인 테트라히드로푸란 - N,N-디메틸포름아미드 (3.6 mL, 5:1, V/V) 의 혼합물 중에서 조합하였다. 1 시간 후, 3-(2,2-디메틸-[1,3]디옥솔란-4-일-메톡시)-프로필아민 (75.7 mg, 0.40 mmol) (상기 중간체 20 로부터의 것) 을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, 건조시키고(MgSO₄), 여과한 후, 감압 하에서 농축시켰다. 상기 잔류물을 헥산 - 에틸 아세테이트 (80 - 100% 구배) 로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [3-(2,2-디메틸-[1,3]디옥솔란-4-일메톡시)-프로필]-아미드를 수득하였다. (수율 60 mg, 84%).

에탄올 (2 mL) 중의 4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [3-(2,2-디메틸-[1,3]디옥솔란-4-일메톡시)-프로필]-아미드 (60.0 mg, 0.11 mmol) 의 용액에 1N 수성 염산 (2 mL) 을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 얼음-물 조에서 냉각시키고, 1N 수산화나트륨 수용액 (2 mL) 을 첨가하였다. 이어서, 에탄올을 감압하에서 제거하였다. 잔류물을 물로 세정한 후, 에틸 아세테이트 중의 10% 메탄올로 용출시키는 속성 크로마토그래피로 정제하여, rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [3-(2,3-디히드록시-프로폭시)-프로필]-아미드를 백색 분말로서 수득하였다. (수율 32 mg, 57%).

HRMS (ES⁺) m/z C₂₁H₂₄BrN₃O₅S + H [(M+H)⁺] 에 대한 계산치: 510.0693. 실측 치: 510.0693.

본 발명의 화합물들의 항증식 작용은 하기 실시예 26 및 27 에서 증명된다. 이들 작용은 본 발명의 화합물들이 암, 특히 고형 종양, 더욱 특히는 유방, 폐, 전립선 및 결장의 암성 고형 종양, 가장 특히는 유방 및 결장의 암성 고형 종양을 치료하는데 유용하다는 것을 나타낸다.

실시예 26

키나아제 분석

KDR 및 FGFR 의 저해를 측정하기 위해, HTRF (Homogeneous Time Resolved Fluorescence, 균등 시간 분해 형광) 분석을 이용하여 키나아제 분석을 수행하였다. 상기 분석은 문헌 [A. J. Kolb 등, Drug Discovery Today, 1998, 3(7), p 333] 에 기재되어 있다.

키나아제 반응 전에, 재조합 EEE-표지 KDR 을 활성화 완충액 (50 mM HEPES, pH 7.4, 1 mM DTT, 10% 글리세롤, 150 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 26 mM MgCl₂, 및 4 mM ATP) 의 존재하에서 활성화하였다. 상기 효소를 4 ℃ 에서 1 시간 동안 인큐베이션하였다.

각 웰에서 총 부피가 90 ㎕ 인 96-웰 폴리프로필렌 플레이트 (Falcon) 에서 키나아제 활성 분석을 수행하였다. 각 웰은 1 μM KDR 기질 (비오틴-EEEEYFELVAKKKK), 1 nM 활성화 KDR, 및 100 μM 내지 128 pM 범위의 8 개 분석 농도 (1:5 연속 희석) 중 하나의 시험 화합물을 포함하였다. 키나아제 활성 분석 은 100 mM HEPES, pH 7.4, 1 mM DTT, 0.1 mM Na₂VO₄, 25 mM MgCl₂, 50 mM NaCl (KDR 저장 용액으로부터의 것), 1% DMSO (화합물로부터의 것), 0.3 mM ATP (K_m 농도에서) 및 0.02% BSA 의 존재하에서 수행되었다. 상기 반응물을 37 ℃ 에서 30 분간 인큐베이션하였다. 상기 KDR 반응을 중지시키기 위해, 72 ㎕ 의 반응 혼합물을 18 ㎕ 의 표시 (revelation) 완충액 (20 mM EDTA, 50 mM HEPES, pH 7.4, 0.02% BSA, 10 nM Eu-표지된 항-pY 항체 (최종 농도 2 nM), 및 100 nM 스트렙타비딘 (최종 농도 20 nM)) 이 담긴 STOP 플레이트로 옮겼다. 혼합 후, 35 ㎕ 의 용액을 384-웰 블랙 플레이트 (Costar) 의 이중 웰 내로 옮기고, Wallac Victor 5 판독기 상에서 615/665 nm 에서 판독하였다.

FGFR 활성 분석은 하기 차이점을 제외하고는 KDR 활성 분석에 대해 상기 기술된 바와 같이 수행되었다. GST-표지된 FGFR 효소를 실온에서 1 시간 동안 하기 활성화 완충액 중에서 활성화하였다: 100 mM HEPES, pH 7.4, 50 mM NaCl, 20 mM MgCl₂, 및 4 mM ATP. 키나아제 활성 분석은, 100 mM HEPES, 1 mM DTT, 0.4 mM MgCl₂, 0.4 mM MnCl₂, 50 mM NaCl, 1% DMSO, 10 μM ATP (FGFR 에 있어서 K_m = 8.5 μM), 0.1 mM Na₂VO₄, 및 0.02% BSA 의 존재하에서 총 90 ㎕ 부피로 1 μM 기질 (비오틴-EEEEYFELV), 1.5 nM 활성화 FGFR, 및 시험 화합물을 이용하여 수행되었다. 상기 분석의 나머지는 KDR 분석과 동일한 방식으로 수행되었다.

화합물 IC₅₀ 값은 2 개씩의 데이타 세트로 결정하였고, Excel 을 이용하여 데이타를 방정식 Y=[(a-b)/{1+(X/c)^d}]+b 에 대입하여 계산하였다(여기서, a 및 b 는 각각 시험 저해제 화합물 부재 하 및 무한한 양의 저해제 시험 화합물의 존재 하에서의 효소 활성이고, c 는 IC₅₀ 이고, d 는 화합물 반응의 힐 상수 (hill constant) 임). IC₅₀ 값은 기재된 시험 조건 하에서 효소 활성을 50% 감소시키는 시험 화합물의 농도이다.

본 발명의 화합물은 5 μM 미만, 바람직하게는 1.5 μM 미만의 KDR IC₅₀ 값, 또는 5 μM 미만, 바람직하게는 2.5 μM 미만의 FGFR IC₅₀ 값을 갖는다. 가장 바람직하게는, 본 발명의 화합물은 1.5 μM 미만의 KDR IC₅₀ 값 및 2.5 μM 미만의 FGFR IC₅₀ 값을 갖는다.

실시예 27

VEGF 및 FGF-자극 HUVEC 증식 분석

세포 기반 분석에서 본 발명의 시험 화합물의 항증식 활성을 BrdU 키트 (Roche Biochemicals 1-647-229) 를 이용한 BrdU 분석으로 평가하였다. 인간 제대 정맥 내피 세포 (HUVEC, Clonetics CC-2519) 를 EGM-2 (Clonetics CC-3162) 배지 중에서 배양하고, 하룻밤 동안 96-웰 편평 바닥 플레이트 (Costar 3595) 에서 EGM-2 (Clonetics CC-3162) 배지 200 ㎕ 부피 중에 웰 당 10000 세포씩 접종하였다. 37℃ 에서 5% CO₂ 로 24 시간 동안 성장시킨 후, 인큐베이션 배지를 천천히 흡입 제거하고, 각 웰의 내용물을 1 ㎖ 당 50 ㎍ 의 겐타마이신 및 1 ㎖ 당 50 ng 의 암포테리신-B (Clonetics CC-4083) 를 함유하는, 300 ㎕ 의 사전 가온된 EBM-2 (Clonetics CC-3156) 로 세정하였다. 이어서, 잔여 배지를 다시 흡입하고, 웰 당 160 ㎕ 의 혈청 감소 배지 (1% 의 열 불활성화 FBS (Clonetics CC-4102), 1 ㎖ 당 50 ㎍ 의 겐타마이신 및 1 ㎖ 당 50 ng 의 암포테리신-B (Clonetics CC-4083), 1 ㎖ 당 10 단위의 Wyeth-Ayerst 헤파린 (NDC0641-0391-25), 및 2 mM L-글루타민 (GIBCO 25030-081) 이 보충된 EBM-2) 로 교체하였다. 24 시간 동안 세포를 혈청 감소시킨 후, 2.5% DMSO 가 포함된 혈청 감소 배지 중 10X 시험 농도의 시험 화합물 20 ㎕ 를 적절한 웰에 첨가하였다. 대조군 웰에는 2.5% DMSO 가 포함된 혈청 감소 배지 20 ㎕ 가 포함되었다. 플레이트를 2 시간 동안 인큐베이터로 되돌려 놓았다. 2 시간 동안 시험 화합물과 세포를 사전 인큐베이션한 후, 혈청 감소 배지 중에 희석된 10X 분석 농도의 성장인자 20 ㎕, 1 ㎖ 당 50 ng 의 FGF 또는 1 ㎖ 당 200 ng 의 VEGF (R & D 시스템 293-VE) 를 첨가하였다. 분석물 중 FGF 의 최종 농도는 1 ㎖ 당 5 ng 이었고, 분석물 중 VEGF 의 최종 농도는 1 ㎖ 당 20 ng 이었다. 성장 인자가 없는 대조군 웰은 성장 인자를 갖는 웰에서와 동량의 BSA 를 갖는 혈청 감소 배지를 웰 당 20 ㎕ 씩 가졌다. 플레이트를 추가 22 시간 동안 인큐베이터로 되돌려 놓았다.

BrdU ELISA

시험 화합물에 24 시간 노출시킨 후, 혈청 감소 배지 중에 희석시킨 (1:100) BrdU 표지 시약을 웰 당 20 ㎕ 씩 첨가하여 세포를 BrdU (Roche Biochemicals 1- 647-229) 로 표지하였다. 이어서, 플레이트를 4 시간 동안 인큐베이터로 되돌려 놓았다. 배지를 종이 타월 상에 따라내어 표지 배지를 제거하였다. 각각의 웰에 200 ㎕ 의 고정/변성 용액을 첨가하고 실온에서 45 분 동안 인큐베이션하여, 세포를 고정하고 DNA 를 변성시켰다. 고정/변성 용액을 종이 타월 상에 따라내고, 각각의 웰에 100 ㎕ 의 항-BrdU-POD 를 첨가하고, 웰을 실온에서 2 시간 동안 인큐베이션하였다. 항체 용액을 제거하고, 웰을 각각 3-4 회 300 ㎕ PBS 로 세정하였다. 100 ㎕ 의 TMB 기질 용액을 각 웰에 첨가하고, 웰을 실온에서 5-8 분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 웰 당 100 ㎕ 의 1 M 인산을 첨가하여 반응을 중지시켰다. 플레이트를 650 nm 의 참고 파장으로 450 nm 에서 판독하였다. 모든 웰로부터 블랭크 (무세포) 웰의 흡광도를 제한 후, 각 2 개씩의 시험물의 평균 흡광도를 대조군의 평균으로 나눈 값을 1 로부터 제하여서 각 시험 화합물의 저해 백분율을 계산하였다. 이어서 최종 값에 100 을 곱하였다 (저해 % = [1 - (2 개씩의 시험물의 평균 흡광도/대조군의 평균)] * 100). IC₅₀ 값은 BrdU 표지를 50% 저해하는 시험 화합물의 농도로, 세포 증식 저해의 척도이다. IC₅₀ 은 농도 대 저해 백분율의 대수 도식의 선형 회귀로부터 결정되었다.

본 발명의 화합물은 3 μM 미만, 바람직하게는 1.5 μM 미만의 VEGF-자극 HUVEC 분석 IC₅₀ 값, 또는 5 μM 미만, 바람직하게는 3.0 μM 미만, 더욱 더 바람직하게는 2 μM 미만의 FGF-자극 HUVEC 분석 IC₅₀ 값을 갖는다. 가장 바람직하게 는, 본 발명의 화합물은 1.5 μM 미만의 VEGF-자극 HUVEC 분석 IC₅₀ 값 및 2 μM 미만의 FGF-자극 HUVEC 분석 IC₅₀ 값을 갖는다.

실시예 28

정제 제형물

제조 절차:

1. 항목 1, 2 및 3 을 적당한 혼합기 내에서 15 분 동안 혼합한다.

2. 단계 1 로부터의 분말 혼합물을 20% 포비돈 K30 용액 (항목 4) 으로 과립화한다.

3. 단계 2 로부터의 과립물을 50℃ 에서 건조한다.

4. 단계 3 으로부터의 과립물을 적당한 분쇄 장치를 통해 통과시킨다.

5. 항목 5 를 단계 4 의 분쇄된 과립물에 첨가하고, 3 분 동안 혼합한다.

6. 단계 5 로부터의 과립물을 적당한 압축기 상에서 압축한다.

실시예 29

캡슐 제형물

제조 절차:

2. 항목 4 & 5 를 첨가하고, 3 분 동안 혼합한다.

3. 적당한 캡슐 상에 충전한다.

실시예 30

주사 용액/에멀젼 제제

항목	성분	㎎/㎖
1	화합물 A^*	1 ㎎
2	PEG400	10-50 ㎎
3	레시틴	20-50 ㎎
4	대두유	1-5 ㎎
5	글리세롤	8-12 ㎎
6	물 적량	1 ㎖
^*화합물 A 는 본 발명의 화합물을 나타낸다.

제조 절차:

1. 항목 1 을 항목 2 중에 용해시킨다.

2. 항목 3, 4 및 5 를 항목 6 에 첨가하고 분산될 때까지 혼합한 후 균질화시킨다.

3. 단계 1 로부터의 용액을 단계 2 로부터의 혼합물에 첨가하고, 분산액이 투명해질 때까지 균질화시킨다.

4. 0.2 ㎛ 필터를 통해 멸균 여과하고, 바이알 내로 충전한다.

실시예 31

주사 용액/에멀젼 제제

항목	성분	㎎/㎖
1	화합물 A^*	1 ㎎
2	글리코푸롤	10-50 ㎎
3	레시틴	20-50 ㎎
4	대두유	1-5 ㎎
5	글리세롤	8-12 ㎎
6	물	적량 1 ㎖
^*화합물 A 는 본 발명의 화합물을 나타낸다.

제조 절차:

1. 항목 1 을 항목 2 중에 용해시킨다.

4. 0.2 ㎛ 필터를 통해 멸균 여과하고, 바이알 내로 충전한다.

본 발명을 구체적이고 바람직한 구현예를 참고로 예시하였으나, 당업자는 본 발명의 일상적 실험 및 실시를 통해 변화 및 변형이 만들어질 수 있음을 이해할 것이다. 따라서, 본 발명은 상기 설명에 제한되는 것이 아니라 첨부되는 청구범위 및 이들의 동등물에 의해 정의되는 것으로 의도된 것이다.

Claims

하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르:

{식 중,

R¹ 은 저급 알킬, 및

OR³, NR³R⁴, S(O)_nR³, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬에서 선택되고;

R² 는 하기에서 선택되고:

H,

저급 알킬, 및

OR⁵, OC(O)R⁵, NR⁵R⁶, S(O)_nR⁵, 아릴, 치환된 아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로 아릴로 치환된 저급 알킬;

R³ 및 R⁴ 는 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬,

아릴, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬,

아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴,

치환된 아릴,

헤테로아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 헤테로아릴,

치환된 헤테로아릴,

헤테로사이클,

아릴에 융합된 헤테로사이클,

시클로알킬, 및 치환된 시클로알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR³R⁴ 는 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R³ 및 R⁴ 가 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁵ 및 R⁶ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬, 및

OR⁷, NR⁷R⁸, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁵R⁶ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁷ 및 R⁸ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H, 및

저급 알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁷R⁸ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁷ 및 R⁸ 이 결합된 질소에 더하여 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, 또는 OR⁹ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁹ 는 H 또는 저급 알킬이고;

n 은 0, 1 또는 2 이고;

이 때,

치환된 아릴 및 치환된 헤테로아릴은 저급 알킬, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷, CN, NO₂ 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 아릴 및 헤테로아릴이고;

치환된 시클로알킬 및 치환된 헤테로사이클은 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 CN 으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 시클로알킬 및 헤테로사이클이다}.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 OR³ 으로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 2 항에 있어서, R³ 이 아릴, 할로겐으로 치환된 아릴, 및 헤테로사이클에 융합된 아릴에서 선택되는 화합물.
제 3 항에 있어서, 할로겐이 Br, Cl 또는 F 인 화합물.
제 2 항에 있어서, R³ 기가 헤테로아릴 및 OR⁷ 로 치환된 헤테로아릴에서 선택되는 화합물.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 NR³R⁴ 로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 6 항에 있어서, 기 NR³R⁴ 가 R³ 및 R⁴ 가 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함한 총 3 내지 7 개의 고리 원자를 가진 고리를 형성하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷, 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기, 바람직하게는 OR⁷ 로 치환되는 화합물.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 S(O)_nR³ 으로 치환된 저급 알킬이고, R³ 은 저급 알킬, 헤테로사이클, 아릴에 융합된 헤테로사이클, 아릴, 치환된 아릴, 및 헤테로사이클에 융합된 아릴인 화합물.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 시클로알킬로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R² 가 OR⁵ 로 치환된 저급 알킬이고,R⁵ 는 NR⁷R⁸ 로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R² 가 NR⁵R⁶ 으로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R² 가 OR⁵ 로 치환된 저급 알킬이고, 이 때 R⁵ 는 수소인 화합물.
제 1 항에 있어서, R² 가 OR⁵ 로 치환된 저급 알킬이고, 이 때 R⁵ 는 OR⁷ 로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 17 항에 있어서, 기 NR⁵R⁶ 이 총 3 내지 7 개의 고리 원자를 갖는 고리를 형성하고, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환된 화합물.
제 1 항에 있어서, R² 가 SO_(n)R⁵ 로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R² 가 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R² 가 1 개의 OH 기 또는 1 개의 NR⁵R⁶ 기로 치환된 저급 알킬인 화합물.
제 1 항에 있어서, R² 가 H 인 화합물.
하기 화학식 I 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르:

{식 중,

R¹ 은 OR³ 으로 치환된 저급 알킬이고;

R² 는 H, 또는 1 개의 OR⁵ 기 또는 1 개의 NR⁵R⁶ 기로 치환된 저급 알킬이고;

R³ 은 할로겐 또는 OR⁷ 로 치환된 아릴, 또는 헤테로사이클에 융합된 아릴이고;

R⁵ 및 R⁶ 은 독립적으로 H 또는 저급 알킬이거나, 또는 다르게는, 상기 기 NR⁵R⁶ 은 독립적으로 총 3 내지 6 개의 원자를 가진 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 N 또는 O 에서 선택되는 하나의 부가적인 헤테로원자들로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 OR⁷ 로 치환되고;

R⁷ 은 H 또는 저급 알킬이다}.
제 1 항에 있어서, 하기로 이루어진 군에서 선택되는 화합물:

4-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드,

4-아미노-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드,

4-아미노-3-(벤조[1,3]디옥솔-5-일옥시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드, 및

4-아미노-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-에틸)-아미드.
제 1 항에 있어서, 하기로 이루어진 군에서 선택되는 화합물:

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1-메틸-에틸)-아미드,

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-프로필)-아미드, 및

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2,3-디히드록시-프로필)-아미드.
제 1 항에 있어서, 하기로 이루어진 군에서 선택되는 화합물:

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1,1-디메틸-에틸)-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-히드록시-1-히드록시메틸-에틸)-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-디에틸아미노-에틸)-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드 히드로클로라이드 염, 및

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피롤리딘-1-일-부틸)-아미드 메탄술폰산 염.
제 1 항에 있어서, 하기로 이루어진 군에서 선택되는 화합물:

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-모르폴린-4-일-에틸)-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (2-모르폴린-4-일-에틸)-아미드 히드로클로라이드 염,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (3-디메틸아미노-2,2-디메틸-프로필)-아미드,

rac-4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (5-디에틸아미노-1-메틸-펜틸)-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 아미드, 및

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-피롤리딘-1-일-에톡시)-에틸]-아미드.
제 1 항에 있어서, 하기로 이루어진 군에서 선택되는 화합물:

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [4-(3-메톡시-피롤리딘-1-일)-부틸]-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-피페리딘-1-일-부틸)-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-피페리딘-1-일-에톡시)-에틸]-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [4-(3-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 (4-모르폴린-4-일-부틸)-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [2-(2-모르폴린-4-일-에톡시)-에틸]-아미드, 및

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [4-(4-메톡시-피페리딘-1-일)-부틸]-아미드,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 [3-(2,3-디히드록시-프로폭시)-프로필]-아미드.
제 1 항에 따른 화학식 I 의 화합물을 약학적으로 허용가능한 애주번트 (adjuvant) 와 함께 포함한 약학 조성물.
하기 화학식 I 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르, 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 포함한 약학 조성물:

{식 중,

R¹ 은 저급 알킬, 및 OR³, NR³R⁴, S(O)_nR³, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬에서 선택되고;

R² 는 H, 저급 알킬, 및 OR⁵, OC(O)R⁵, NR⁵R⁶, S(O)_nR⁵, 아릴, 치환된 아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬에서 선택되고;

R³ 및 R⁴ 는 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬,

아릴, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬,

아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴,

치환된 아릴,

헤테로아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 헤테로아릴,

치환된 헤테로아릴,

시클로알킬, 및

치환된 시클로알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR³R⁴ 는 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R³ 및 R⁴ 가 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁵ 및 R⁶ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬, 및

OR⁷, NR⁷R⁸, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁵R⁶ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁷ 및 R⁸ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H, 및

저급 알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁷R⁸ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖 는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁷ 및 R⁸ 이 결합된 질소에 더하여 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O 또는 OR⁹ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁹ 는 H 또는 저급 알킬이고;

n 은 0, 1 또는 2 이고;

이 때,

치환된 아릴 및 치환된 헤테로아릴은 저급 알킬, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷, CN, NO₂ 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 아릴 및 헤테로아릴이고;

치환된 시클로알킬 및 치환된 헤테로사이클은 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 CN 으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 시클로알킬 및 헤테로사이클이다}.
치료상 유효량의 제 1 항에 따른 화학식 I 의 화합물을 치료를 요하는 환자에 투여하는 것을 포함하는 암의 치료 방법.
치료상 유효량의 하기 화학식 I 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 치료를 요하는 환자에 투여하는 것을 포함하는 암의 치료 방법:

{식 중,

R¹ 은 하기에서 선택되고:

저급 알킬, 및

OR³, NR³R⁴, S(O)_nR³, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬;

R² 는 하기에서 선택되고:

H,

저급 알킬, 및

OR⁵, OC(O)R⁵, NR⁵R⁶, S(O)_nR⁵, 아릴, 치환된 아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬;

R³ 및 R⁴ 는 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬,

아릴, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬,

아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴,

치환된 아릴,

헤테로아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 헤테로아릴,

치환된 헤테로아릴,

시클로알킬, 및

치환된 시클로알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR³R⁴ 는 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R³ 및 R⁴ 가 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷, 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁵ 및 R⁶ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬, 및

OR⁷, NR⁷R⁸, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁵R⁶ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁷ 및 R⁸ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H, 및

저급 알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁷R⁸ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁷ 및 R⁸ 이 결합된 질소에 더하여 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O 또는 OR⁹ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁹ 는 H 또는 저급 알킬이고;

n 은 0, 1 또는 2 이고;

이 때,

치환된 아릴 및 치환된 헤테로아릴은 저급 알킬, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷, CN, NO₂ 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 아릴 및 헤테로아릴이고;

치환된 시클로알킬 및 치환된 헤테로사이클은 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 CN 으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 시클로알킬 및 헤테로사이클이다}.
치료상 유효량의 하기 화학식 I 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 치료를 요하는 환자에 투여하는 것을 포함하는 암의 제어 방법:

{식 중,

R¹ 은 하기에서 선택되고:

저급 알킬, 및

OR³, NR³R⁴, S(O)_nR³, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬;

R² 는 하기에서 선택되고:

H,

저급 알킬, 및

OR⁵, OC(O)R⁵, NR⁵R⁶, S(O)_nR⁵, 아릴, 치환된 아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클, 치환된 헤테로사이클, 헤테로아릴 또는 치환된 헤테로아릴로 치환된 저급 알킬;

R³ 및 R⁴ 는 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬,

아릴, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클로 치환된 저급 알킬,

아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 아릴,

치환된 아릴,

헤테로아릴,

헤테로사이클 또는 치환된 헤테로사이클에 융합된 헤테로아릴,

치환된 헤테로아릴,

시클로알킬, 및

치환된 시클로알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR³R⁴ 는 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R³ 및 R⁴ 가 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁵ 및 R⁶ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H,

저급 알킬, 및

OR⁷, NR⁷R⁸, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로사이클, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬로 치환된 저급 알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁵R⁶ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁵ 및 R⁶ 이 결합된 질소에 더하여, 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 SO₂NR⁷R⁸ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁷ 및 R⁸ 은 독립적으로 하기에서 선택되거나:

H, 및

저급 알킬,

또는, 다르게는, 상기 기 NR⁷R⁸ 은 독립적으로 총 3 내지 7 개의 원자를 갖 는 고리를 형성할 수 있는데, 상기 고리 원자들은 R⁷ 및 R⁸ 이 결합된 질소에 더하여 탄소 고리 원자들을 포함하고, 상기 탄소 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 부가적인 헤테로원자로 대체되고, 상기 고리 원자들은 임의로는 하나 이상의 저급 알킬, =O 또는 OR⁹ 로 이루어진 기로 치환되고;

R⁹ 는 H 또는 저급 알킬이고;

n 은 0, 1 또는 2 이고;

이 때,

치환된 아릴 및 치환된 헤테로아릴은 저급 알킬, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷, CN, NO₂ 및 할로겐으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 아릴 및 헤테로아릴이고;

치환된 시클로알킬 및 치환된 헤테로사이클은 저급 알킬, =O, OR⁷, NR⁷R⁸, COR⁷, CO₂R⁷, CONR⁷R⁸, SO₂NR⁷R⁸, SO_nR⁷ 및 CN 으로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 치환된 시클로알킬 및 헤테로사이클이다}.
제 33 항에 있어서, 암이 유방, 폐, 결장 또는 전립선 암인 방법.
제 35 항에 있어서, 암이 유방, 폐, 결장 또는 전립선 암인 방법.
하기 군에서 선택되는 화합물:

3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온,

7-요오도-3-메틸-5H-티에노[3,2-c]피리딘-4-온,

3-메틸-4-옥소-4,5-디히드로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르,

4-클로로-3-메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르,

3-브로모메틸-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르,

3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르, 및

4-아미노-3-(4-브로모-2,6-디플루오로-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르.
하기 군에서 선택되는 화합물:

4-아미노-3-(2-클로로-4-메톡시-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르,

3-(4-브로모-페녹시메틸)-4-클로로-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르,

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르,

4-클로로-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르,

4-아미노-3-페녹시메틸-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산 에틸 에스테르, 및

4-아미노-3-(4-브로모-페녹시메틸)-티에노[3,2-c]피리딘-7-카르복실산.
제 25 항에 있어서, R¹ 이 4-브로모-페녹시메틸이고; R² 가 제 25 항에 제시된 의미를 갖는 화학식 I 의 화합물.
하기 단계를 포함하는 제 1 항에 따른 화학식 I 의 화합물의 제조 방법:

a) 화학식 A 의 화합물을 화학식 B 의 화합물로 변환시키는 단계:

;

; 및

b) 화학식 R²NH₂ 의 화합물의 존재하에서 상기 화학식 B 의 화합물을 추가로 반응시켜, 화학식 I 의 화합물을 수득하는 단계,

이 때, R¹ 및 R² 는 제 1 항에 제시된 의미를 가지며, R¹⁰ 은 저급 알킬임.
암의 치료 및/또는 제어를 위한 제 1 항에 따른 화합물의 용도.
고형 종양의 치료 및/또는 제어를 위한 제 1 항에 따른 화합물의 용도.
유방, 폐, 결장 또는 전립선 암의 치료 및/또는 제어를 위한 제 1 항에 따른 화합물의 용도.
암의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 제 1 항에 따른 화합물의 용도.
고형 종양의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 제 1 항에 따른 화합물의 용도.
유방, 폐, 결장 또는 전립선 암의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 제 1 항에 따른 화합물의 용도.
앞서 본원에 기재된 바와 같은 본 발명.