CN108030814A - 一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法 - Google Patents

一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法，方法为取中药复方宫炎净，70%乙醇浸泡24h后装柱，以2mL/s的速度渗漉48h，收集渗漉液，用旋转蒸发器浓缩至相当于原药1g/mL。得提取物后，加入2.0%的吐温80，搅拌均匀，4℃静置24h后取出，0.45μm微孔滤膜过滤得滤液。检测为棕红色澄清液体，pH值为6.4。最后分装成每瓶10mL，封口，121℃高压蒸汽灭菌20min即得。不仅成本不高，而且疗效显著、无副作用、功能全面。

Description

一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备 方法
技术领域
本发明涉及中药领域，具体的说，是一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法。
背景技术
奶牛不孕症是指母牛超过适龄配种年龄三个月以上仍不发情配种和产后经三个发情周期进行配种仍不受孕。乳房炎、不孕症、代谢病和蹄病，是影响奶牛业健康稳定发展的主要疾病，其中较为影响严重的不孕症，一方面使得奶牛数量减少，另一个方面促使牛场的产奶量急剧下滑，这就导致奶牛养殖场的经济损失。而子宫内膜炎是奶牛产后常发病，是造成奶牛不孕症的主要原因之一。
中兽医学认为，子宫内膜炎主要由于邪毒内侵、秽浊客于胞宫或瘀血停滞胞宫以及肾气虚弱引起。研究证明，一些中草药具有一定的抑菌作用，虽然在快速抑菌效果方面中药比抗生素稍差一些，然而通过增强子宫运动性、加速子宫局部血液循环和增强其免疫力，使奶牛快速的将子宫内的一些炎性产物排出，增强子宫的新陈代谢，最终达到抑制细菌生长的目的。由于当发生子宫内膜炎时，患病牛的机体抵抗力下降，子宫机能受到损伤，从而影响机体的血液循环，而某些中药材，即可作用于子宫，加快子宫机能恢复；又能增加患病牛的抵抗力，从而能达到良好的疗效。
因此，重要治疗在临床治疗上已成为目前子宫内膜炎防治的热点方向。然而目前，利用中药治疗奶牛子宫黏膜的黏液性和脓性炎症是非常鲜有的，有待开发。
发明内容
针对上述缺陷，本发明的目的在于提供一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法，不仅成本不高，而且疗效显著、无副作用、功能全面。
本发明通过下述技术方案实现：一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法，包括以下几个步骤：
步骤S1：取中药复方宫炎净100g，量取70%乙醇200mL浸泡24h后装柱，以2mL/s的速度渗漉48h，期间再加入800mL的70%乙醇，收集渗漉液，用旋转蒸发器浓缩至100mL，即相当于原药1g/mL；
步骤S2：取732阳离子交换树脂，先用去离子水洗净破碎树脂，浸泡过夜，用5倍量的5%盐酸溶液浸泡1h，用去离子水洗至近中性；再用5倍量5%氢氧化钠溶液浸泡1h，洗至pH值近7.0；再用5倍5%盐酸溶液浸泡2h左右，洗至pH值到7.0，；
步骤S3：将步骤S1中制备好的宫炎净提取物，用稀盐酸调pH4~5，抽滤，通过已处理好的阳离子交换树脂柱，至流出液与10%硅钨酸呈阳性反应为止；
步骤S4：将步骤S3中所得溶液用去离子水洗至流出液为近中性，再以5%盐酸溶液洗脱至生物碱反应为阴性，收集洗脱液，蒸干得生物碱提取物；
步骤S5：煎煮完成后，滤出药液，得到所得中药药剂。
这里采用宫炎净的原因是因为：宫炎净是由益母草、红花、淫羊藿等近40味名贵中草药，依君臣佐使科学组方，精心提炼而成，为纯中药复方子宫灌注液。
宫炎净疗效为：彻底清宫、强力镇痛、活血化瘀、消肿之血、破疖排脓，清热解毒，有利于解决难产和滞产由于限位栏的使用，抗生素的添加或饲养管理混乱，导致母牛肝肾损伤，体力耐力不足，过肥过瘦，供血不畅，难产和滞产时有发生。
宫炎净中的主要成分能引起子宫平滑肌的收缩，是一种较平缓的阵缩力，能逐步地引起羊膜破裂，保持产道的湿润顺滑，通过这种脉冲式的推力，使胎儿有条不紊的产出。
另外母牛产仔时，产道受到剧烈挤压，痛疼剧烈，母牛由于疼痛而不愿怒责，导致产程过长，宫炎净对母牛产仔时有明显强力镇痛作用，产中使用一瓶有效减少分娩应激，有效缩短产程，保持母牛体力，减少死胎及白仔，分娩后母牛食欲恢复加快一天以上。
为了更好的实现本发明，进一步地，所述的步骤S3包括以下几个步骤：
步骤S301：取中药复方宫炎净提取物2.5mL于10mL容量瓶中，先取3.00mL新配制的2%雷氏盐溶液，用0.10mol/L的盐酸定容后摇匀；
步骤S302：1h冰水浴，之后取干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取续滤液。
为了更好的实现本发明，进一步地，还包括步骤S6：取中药复方宫炎净，70%乙醇浸泡24h后装柱，以2mL/s的速度渗漉48h，收集渗漉液，用旋转蒸发器浓缩提取物备用；筛选出使用吐温80、活性炭对提取物进行处理，观察对提取物的澄清度和生物碱含量的影响，最后使用微孔滤膜对药液进行处理。
为了更好的实现本发明，进一步地，所述步骤S5中煎煮时间为5-6小时。
为了更好的实现本发明，进一步地，所述的制备容器为试管、烧杯或者不锈钢。
本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
本发明是基于对中药宫炎净的认识及治疗原则，采用简单有效的制备方法，浓缩中药的药性，能够有效治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症，进而提高奶牛产量。
具体实施方式
实施例1：
本实施例的一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法，包括以下几个步骤：
步骤S1：取中药复方宫炎净100g，量取70%乙醇200mL浸泡24h后装柱，以2mL/s的速度渗漉48h，期间再加入800mL的70%乙醇，收集渗漉液，用旋转蒸发器浓缩至100mL，即相当于原药1g/mL；
步骤S2：取732阳离子交换树脂，先用去离子水洗净破碎树脂，浸泡过夜，用5倍量的5%盐酸溶液浸泡1h，用去离子水洗至近中性；再用5倍量5%氢氧化钠溶液浸泡1h，洗至pH值近7.0；再用5倍5%盐酸溶液浸泡2h左右，洗至pH值到7.0，；
步骤S3：将步骤S1中制备好的宫炎净提取物，用稀盐酸调pH4~5，抽滤，通过已处理好的阳离子交换树脂柱，至流出液与10%硅钨酸呈阳性反应为止；
步骤S4：将步骤S3中所得溶液用去离子水洗至流出液为近中性，再以5%盐酸溶液洗脱至生物碱反应为阴性，收集洗脱液，蒸干得生物碱提取物；
步骤S5：煎煮完成后，滤出药液，得到所得中药药剂。
这里采用宫炎净的原因是因为：宫炎净是由益母草、红花、淫羊藿等近40味名贵中草药，依君臣佐使科学组方，精心提炼而成，为纯中药复方子宫灌注液。
宫炎净疗效为：彻底清宫、强力镇痛、活血化瘀、消肿之血、破疖排脓，清热解毒，有利于解决难产和滞产由于限位栏的使用，抗生素的添加或饲养管理混乱，导致母牛肝肾损伤，体力耐力不足，过肥过瘦，供血不畅，难产和滞产时有发生。
宫炎净中的主要成分能引起子宫平滑肌的收缩，是一种较平缓的阵缩力，能逐步地引起羊膜破裂，保持产道的湿润顺滑，通过这种脉冲式的推力，使胎儿有条不紊的产出。
另外母牛产仔时，产道受到剧烈挤压，痛疼剧烈，母牛由于疼痛而不愿怒责，导致产程过长，宫炎净对母牛产仔时有明显强力镇痛作用，产中使用一瓶有效减少分娩应激，有效缩短产程，保持母牛体力，减少死胎及白仔，分娩后母牛食欲恢复加快一天以上。
实施例2：
本实施例在实施例1的基础上做进一步优化，所述的步骤S3包括以下几个步骤：
步骤S301：取中药复方宫炎净提取物2.5mL于10mL容量瓶中，先取3.00mL新配制的2%雷氏盐溶液，用0.10mol/L的盐酸定容后摇匀；
步骤S302：1h冰水浴，之后取干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取续滤液。
还包括步骤S6：取中药复方宫炎净，70%乙醇浸泡24h后装柱，以2mL/s的速度渗漉48h，收集渗漉液，用旋转蒸发器浓缩提取物备用；筛选出使用吐温80、活性炭对提取物进行处理，观察对提取物的澄清度和生物碱含量的影响，最后使用微孔滤膜对药液进行处理。
所述步骤S5中煎煮时间为5-6小时。
所述的制备容器为试管、烧杯或者不锈钢。
本实施例的其他部分与实施例1相同，故不再赘述。
实施例3：
本实施例中采用实施例2制得的一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药，对其进行试验测试：
按常规方法配制普通营养琼脂，高压灭菌后备用。取中药复方宫炎净注射液1mL，与1mL营养琼脂液混合后，取出1mL再与1mL营养琼脂液混合，依次倍比稀释成含中药复方宫炎净注射液梯度依次为1:2、1:4、1:8、1:16的4
个琼脂平板梯度，取各菌株液10μL均匀涂于各平板表面，置于37℃的培养箱中18~24h察看变化情况。
取40只小鼠分组及给药方式同1.2.2。末次给药1h后，尾静脉注射1%伊文斯兰溶液0.2mL/只），随后腹腔注射0.7%冰醋酸溶液（0.2mL/只）致炎，
30min后处死小鼠，用生理盐水冲洗腹腔，轻揉腹腔1min后，收集腹腔液，离心（1000r/min）5min，取上清液于590nm处测OD值。
毒理学试验：
取40只小鼠分组及给药方式同1.2.2。给药前，用乙醚将小鼠麻醉，于小鼠肩胛骨
皮下植入消毒棉球（5mg）。术后第二天开始给药，连续给药7d。第8天处死小鼠，取出棉球及肉芽组织，置于60℃恒温箱中干燥至恒重后称重，计算肉芽组织重量。
注射液对蛋清致小鼠足趾肿胀的影响取40只小鼠分组及给药方式同末次给药30min后，于各组小鼠左后足趾部皮下注射1%鸡蛋清（0.03mL/只）致炎4h
后，处死小鼠，于踝关节切下两后肢，并称重，计算足趾肿胀率。肿胀率=（左后足趾重-右后足趾重）/右后足趾重×100%。
长期毒性试验：
取中药复方宫炎净，70%乙醇浸泡24h后装柱，2mL/s的速度渗漉48h，收集渗漉液，用旋转蒸发器浓缩至相当于原药1g/mL。得提取物后，加入
2.0%的吐温80，搅拌均匀，4℃静置24h后取出，0.45μm微孔滤膜过滤得滤液，封口，成品10mL/支，121℃高压蒸汽灭20min即可。
注射液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响，将40只健康雌性昆明小鼠随机分成5组，其中三组分别为宫炎净注射液高剂量（0.2mL/只）、中剂量（0.1mL/
只）、低剂量（0.05mL/只），生物碱含量1.2872㎎/mL，肌肉注射；西药对照组肌注给予地塞米松（0.5mg/kg）；空白对照组肌注给予生理盐水（
10mL/kg）；连续给药4d，每天1次。末次给药1h后，于各组小鼠左耳上滴二甲苯（0.05mL/只）致炎，20min后处死小鼠，用打孔器在两耳相同位置打孔，于精密电子称称重，
记录数据，计算肿胀率。肿胀率=（左耳重量-右耳重量）/右耳重量×100%。
注射液对冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
取40只小鼠分组及给药方式同末次给药1h后，尾静脉注射1%伊文斯兰溶液（0.2mL/只），随后腹腔注射0.7%
冰醋酸溶液（0.2mL/只）致炎，30min后处死小鼠，用生理盐水冲洗腹腔，轻揉腹腔1min后，收集腹腔液，离心（1000r/min）5min，取上清液于
590nm处测OD值。
经过进行二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致小鼠足趾肿胀、冰醋酸致小鼠腹腔，毛细血管通透性及棉球肉芽肿4个急性炎症试验，摸索宫炎净注射液的抗炎作用。综合4个试验结果，表明中药复方宫炎净注射液高剂量组和中剂量组具有显著的抗炎作用，且与地塞米松组无显著差异。目前认为中药有多种抗炎作用机制，有些对下丘脑-垂体肾上腺(HPA)轴功能产生影响，有些通过影响炎症介质的产生和分泌来实现。中药复方宫炎净由益母草、川芎、当归、五灵脂、桃仁和甘草等组成，益母草为君药，其味辛、微苦，入心包经、肝经，多用其干燥地上部分为药用部位，具有活血调经等功效。益母草及其复方制剂经常治疗在临床上的月经不调、产后瘀痛等疾病，其中生物碱为主要有效成分，包括盐酸水苏碱和盐酸益母草碱。益母草通过兴奋子宫，来加强子宫的收缩，促使子宫内的炎性物质排出体外。益母草的抗炎作用显著，有人研究表明榜嘎总生物碱能使小白鼠耳廓肿胀度和腹腔毛细血管通透性降低，以及抑制大鼠足趾肿胀率。研制的益母草胶囊，具有抗炎作和镇痛作用，用于治疗止血和子宫复旧效果良好。中药复方宫炎净注射液的主要有效成分为生物碱，这些研究结果与本试验结果一致。
因此，本实施例中一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药能够起到显著的治疗效果。
本实施例的其他部分与实施例2相同，故不再赘述。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化，均落入本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法，其特征在于：包括以下几个步骤：
步骤S1：取中药复方宫炎净100g，量取70%乙醇200mL浸泡24h后装柱，以2mL/s的速度渗漉48h，期间再加入800mL的70%乙醇，收集渗漉液，用旋转蒸发器浓缩至100mL，即相当于原药1g/mL；
步骤S2：取732阳离子交换树脂，先用去离子水洗净破碎树脂，浸泡过夜，用5倍量的5%盐酸溶液浸泡1h，用去离子水洗至近中性；再用5倍量5%氢氧化钠溶液浸泡1h，洗至pH值近7.0；再用5倍5%盐酸溶液浸泡2h左右，洗至pH值到7.0，；
步骤S3：将步骤S1中制备好的宫炎净提取物，用稀盐酸调pH4~5，抽滤，通过已处理好的阳离子交换树脂柱，至流出液与10%硅钨酸呈阳性反应为止；
步骤S4：将步骤S3中所得溶液用去离子水洗至流出液为近中性，再以5%盐酸溶液洗脱至生物碱反应为阴性，收集洗脱液，蒸干得生物碱提取物；
步骤S5：煎煮完成后，滤出药液，得到所得中药药剂。
2.根据权利要求1所述的一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法，其特征在于：所述的步骤S3包括以下几个步骤：
步骤S301：取中药复方宫炎净提取物2.5mL于10mL容量瓶中，先取3.00mL新配制的2%雷氏盐溶液，用0.10mol/L的盐酸定容后摇匀；
步骤S302：1h冰水浴，之后取干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取续滤液。
3.根据权利要求2所述的一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法，其特征在于：还包括步骤S6：取中药复方宫炎净，70%乙醇浸泡24h后装柱，以2mL/s的速度渗漉48h，收集渗漉液，用旋转蒸发器浓缩提取物备用；筛选出使用吐温80、活性炭对提取物进行处理，观察对提取物的澄清度和生物碱含量的影响，最后使用微孔滤膜对药液进行处理。
4.根据权利要求1所述的一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法，其特征在于：所述步骤S5中煎煮时间为5-6小时。
5.根据权利要求1所述的一种能够治疗奶牛子宫黏膜的黏液性或脓性炎症的中药制备方法，其特征在于：所述的制备容器为试管、烧杯或者不锈钢。
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