CN108024519A - 用于害虫防治和诱导植物激素和基因调控以改善植物生产和防御的组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了通过使用天然来源的化学品来改善植物防御的组合物和使用该组合物的方法。在一个具体的实施方式中,该组合物来自银胶菊(也被称为银胶菊植物)。优选的组合物可上调或下调负责目标植物防御机制的生长基因,以产生物理和/或化学屏障,并产生迂回渗出物、拮抗化合物或熏蒸化合物,其预防和处理农艺或非农艺植物中的害虫。
Description
相关申请的交叉引用
本申请要求于2015年8月10日提交的美国临时申请62/202,998的权益,其全部内容通过引用并入本文。
背景技术
处理甜菜、油菜作物(特别是大豆)中的囊胞线虫的市场非常大。由于合成的接触杀线虫化学药剂和土壤熏蒸剂面临更严格的审查,而且随着新的杀线虫剂、杀虫剂、杀菌剂和杀真菌剂等化学药剂流水线因管理门槛的提高而缩减,可持续生物杀虫剂(如植物提取物)正成为更为重要的替代品,特别是与传统杀虫剂和熏蒸剂具有类似的防治水平的那些。经济和环境条件为生物处理由植物寄生线虫、昆虫、螨虫、细菌和真菌引起的疾病创造了机会。因此,对于更环境友好的解决方案有着重大的需求,这使得在研究和开发新的生物衍生的杀线虫剂上的投资更有价值。
目前,仅大豆囊胞线虫每年就损失15亿美元。由于具有抗性的杂种的杂交困难,抗性大豆品种不会持续很长时间。基因库是多样的,平均在2-3年内破坏抗性。过去种子处理以外的应用是昂贵的。因此,在种子犁沟中施加接触杀线虫剂是主要的施用方法。由于对附近动物如鸟类的毒性,利用液体施用有毒化合物(如克线磷,涕灭威,虫螨威,Dazinat和灭克磷)的过顶中心枢转都失宠了。
甲基溴是一种合成的土壤熏蒸剂,对健康和环境造成危害,目前正在国际禁止的情况下逐步被淘汰。自二十世纪六十年代以来,种植者一直使用甲基溴在种植前对田地进行有效地杀菌,以主要控制线虫,并处理疾病和杂草;然而,因为这种有毒化合物是以气体形式使用的,所以注入土壤的量的一半以上最终会到大气中。进入大气,它促进臭氧层的变薄。在2005年,发达国家根据“蒙特利尔议定书”禁止甲基溴,这是1987年签署的一项保护平流臭氧层的国际条约。
根据禁令,该条约允许甲基溴有限地使用在草莓、杏仁和其他缺乏有效地控制线虫、疾病和杂草的可承受替代品的作物中。授权使用的范围每年都会变小,可能将会很快结束。因此,寻找甲基溴的替代品是美国农业部的优先事项,美国农业部提供了500万美元的赠款,支持自2010年以来的确定替代品的研究。然而,没有一种产品能够提供甲基溴所提供的控制的广谱性。面临向替代产品不可避免的过渡的种植者正在寻求可行的替代品,取得了不同程度的成功。
历史上,已经使用了“温和”杀线虫剂,例如来源于细菌或真菌的那些。它们通常较弱,可以迅速通过土壤浸出,缺乏控制线虫的残留效果。另一方面,生物衍生的肉桂酸提供了有效的初始控制、短期的残留控制以及温和杀线虫剂的安全性。作为一个例子,银胶菊植物,也被称为银胶菊(Parthenium argentatum Gray),目前正在以有限数量商业化种植以提取乳胶橡胶。由于之前在二十世纪四十年代和二十世纪八十年代的橡胶提取的商业化尝试,银胶菊植物的树脂部分中的肉桂酸浓度是众所周知的。然而,直到最近的发现才得知,从银胶菊植物中收获的各种化合物及其衍生物在处理和控制线虫和其它植物害虫方面的效果尚未被广泛研究。尽管从1948年起已知银胶菊对内寄生线虫(如根结线虫和病变线虫)具有抗性,但假定肉桂酸渗出物是这些内寄生物减少或不进入根部的原因。然而,根据本发明,已经发现银胶菊提取物中的酶和植物激素也与控制或抑制植物寄生线虫、昆虫的多种作用模式有很大的关系,并通过植物基因的上调提高植物生产率。
发明内容
本发明提供了通过使用从一种或多种植物提取的一种或多种化合物来改善植物对于外源攻击的防御的组合物和方法。本发明还提供了用于基因和植物生长调节的材料和方法。
在一个具体的实施方式中,该组合物包含衍生自银胶菊的一种或多种类异戊二烯和其他化合物,更具体地为反式肉桂酸、3,4-二羟基氢化肉桂酸和3-氢化丙酸。这些化合物可以与酶一起使用,当施用于线虫或昆虫时,所述酶可以例如溶解蜕皮昆虫的壳质和/或蛋白质。酶可以是例如乳胶/橡胶转移酶。
本文提供的组合物可用于处理活的植物和植物衍生的产品,例如干木、干燥的根、木材和干果。
优选的组合物可以调节负责植物防御机制的基因的表达,以便产生物理和/或化学屏障,和/或诱导植物产生预防和/或处理农艺或非农艺植物中害虫的危害的迂回渗出物、拮抗化合物和/或熏蒸化合物。
因此,在一个方面,本发明提供了用于调节目标植物基因和/或激素的组合物,例如植物生长调节剂(PGR),其中所述组合物包含一种或多种可以从部分植物提取的化合物或其衍生物。
在具体的实施方式中,所述化合物来自生长在恶劣环境(例如干燥环境,高盐度环境,高海拔,极端pH和/或极端温度)下的植物。有利地,当以适当的比例施用时,在某些实施方式中,本文提供的组合物用于在各种环境中排斥、抵抗、无效、灭活、熏蒸、改变和/或杀死害虫。
所述化合物可具有例如以下效果中的至少一种:通过渗出物增加植物的抵抗性,诱导植物对外源性攻击的系统抗性,以及增强植物的物理和化学屏障。在某些优选的实施方式中,组合物包含类异戊二烯化合物。
在某些实施方式中,所述化合物可以是肉桂酸或其衍生物。该化合物也可以是蛋白酶或几丁质酶。优选地,所述化合物是从沙漠植物银胶菊(也称为银胶菊植物)提取的。
在一些实施方式中,该组合物还包含一种或多种添加剂,其可以选自例如润湿剂、佐剂和惰性化学品。
示例性实施方式提供了包含类异戊二烯的组合物,其可以上调或下调直接或间接参与植物防御系统的一种或多种基因,包括在植物的防御构建途径中发现的次级代谢产物。在优选的实施方式中,遗传和/或激素调节的作用是暂时的,而不会永久修饰植物的基因。
在某些实施方式中,外源性攻击在性质上可以是生物的或非生物的。生物攻击的非限制性实例包括植物寄生虫、食草动物、细菌、真菌和入侵植物(如杂草)。非生物攻击可由如植物环境的变化引起。在一些实施方式中,外源性攻击在性质上是非生物的,源自极端物理条件,包括但不限于温度、光照、盐度、水质、土壤和影响目标植物生长的其他因素的变化。
在一个具体的实施方式中,本文提供的组合物有效地处理寄生线虫侵染的植物。在一个实施方式中,有益微生物群体得到维持或增强。
另一方面,本发明提供了改善目标植物对于外源性攻击的防御的方法,包括通过在植物上或植物附近外部施用本发明的组合物来暂时调节植物的基因和/或激素。基因和/或激素调控可能具有以下一种或多种效果:通过渗出物增加植物的抵抗性,诱导植物对攻击的系统抗性,以及增强植物的物理和化学屏障。
在一些实施方式中,由本文提供的遗传调控产生的化学屏障包括但不限于:产生拮抗化合物(如植物抗毒素)、熏蒸化合物和可以改变目标植物味道、气味和/或信息素特征的化合物。
在某些实施方式中,基因和/或激素调控在抑制害虫寻找、穿透和随后消耗目标植物的能力方面是有效的。此外,在某些实施方式中,本发明的组合物可以干扰害虫的交配能力。
在一些实施方式中,该组合物作为种子处理施用,或者在有/无机械掺入的情况下施用到土壤表面。
有利的是,本发明的优选实施方式提供天然来源的处理而不永久改变植物基因,并且有效提高作物产量并维持土壤健康。此外,与仅杀害害虫的传统杀虫剂不同,在某些实施方式中,本文提供的组合物可以改善目标植物本身针对外源性攻击的防御机制。
对于本领域技术人员来说,根据后面的发明详述,结合表格、附图和所附的权利要求,本发明的目的、特征和优点将是显而易见的。
附图说明
图1示出了增加的甜菜产量。
图2示出了囊胞线虫的减少。
图3示出了增加的甜菜产量。
图4示出了增加的甜菜产量。
图5示出了囊胞线虫的减少。
图6示出了胡萝卜产量的增加。
图7示出了胡萝卜产量的增加。
图8示出了胡萝卜产量的增加。
图9示出了柑桔线虫的控制。
图10示出了对葡萄叶蝉若虫和西花蓟马的控制。
图11示出了对葡萄叶蝉的控制。
图12示出了对葡萄叶蝉的昆虫生长调节效果。
图13示出了对胚根长度的影响。
图14示出了对根表面积的影响。
图15示出了对根长度的影响。
图16示出了对根尖数量的影响。
图17示出了对吸收根数量的影响。
图18示出了对根和茎的影响。
图19示出了对根和茎的影响。
图20示出对花芽数量的影响。
图21示出对根和茎的影响。
图22示出了对根长度的影响。
图23示出了对茎长的影响。
图24示出了对产量的影响。
图25示出了对玉米穗大小的影响。
具体实施方式
本发明提供了用于改善植物针对攻击的防御和/或调节植物生长和/或健康的组合物和方法。本文具体示例的是包含可从植物中提取的天然来源的化合物或其衍生物的组合物。在一个具体的实施方式中,本发明的组合物包含类异戊二烯化合物,并且更具体地,包含从银胶菊提取的反式肉桂酸或其衍生物。
本文提供的组合物可用于处理活的植物以及植物的衍生产品,例如干木、干燥的根、木材和干果。优选的组合物可以调节负责植物防御和/或生长和/或健康的基因的表达。在某些实施方式中,本发明的组合物可以用于诱导植物产生物理和/或化学屏障,例如产生防止、减少和/或修复来自农艺和/或非农艺植物中的害虫和/或物理损害的迂回渗出物、拮抗化合物或熏蒸化合物。
有利的是,本发明的优选实施方式提供了可以用来实现有利结果而不永久改变植物基因的天然来源的处理。有利的是,在某些实施方式中,所述组合物和方法在改善作物产量和维持土壤健康方面是有效的。
一方面,本发明提供了用于调节目标植物基因和/或激素产生的组合物,例如植物生长调节剂(PGR)。在优选的实施方式中,本发明的组合物包含可以从在恶劣环境中生长的植物提取的化合物或其衍生物。在优选的实施方式中,所述组合物具有以下一种或多种效果:通过渗出物增加植物排斥一种或多种害虫的能力,诱导植物对外源性攻击的系统获得的抗性,以及增强植物的物理和化学屏障。在某些实施方式中,所述组合物包含类异戊二烯化合物。
如本文所用,类异戊二烯化合物包含两个或更多个异戊二烯分子,所述两个或更多个异戊二烯分子连接在一起作为主链结构,其上连接有任选取代的官能团。未取代的异戊二烯分子(也称为2-甲基-1,3-丁二烯)是不饱和烃分子。肉桂酸及其羟基衍生物咖啡酸,3,4-二羟基氢化肉桂酸和3-氢化丙酸。本发明还考虑使用乳胶/橡胶转移酶。
在一些实施方式中,异戊二烯分子可以从植物提取,例如但不限于鳞叶卷柏(Selaginella lepidophylla),Parthenium incanum,银胶菊,丝兰(Yucca schidigera),皂树(Quillaja saponaria),桦树属,胡桃属和/或泡叶藻(Ascophyllum)属。
在一些实施方式中,植物是在恶劣的环境中生长的。例如,恶劣的环境可以是缺乏必要的用于其他植物生长的降水、位于高海拔的地区、高盐度地区和特征为极端的温度或土壤pH的地区。恶劣环境的非限制性例子包括沙漠和其他干旱地区、山脉和盐水(例如海洋或咸水湖)附近的陆地。
在某些实施方式中,干旱条件是指每年接收少于15、10、5或2英寸的雨的地点。在某些实施方式中,高海拔指高于海平面5,000、7,000、9,000或11,000英尺。在某些实施方式中,高盐度是指大于3.5mmhos/cm、4.0mmhos/cm或4.5mmhos/cm的通过电导率测量的生长介质(例如土壤)中的盐度。在某些实施方式中,极端温度是指低于0℃、-5℃、-15℃或-20℃。在某些实施方式中,极端温度是指高于30℃、35℃、40℃或45℃。在某些实施方式中,极端pH指的是低于5、4或3,或高于9、10或11。
在一个具体的实施方式中,类异戊二烯化合物优选包含从通常在沙漠环境中生长的银胶菊中提取的反式形式的肉桂酸或其衍生物。肉桂酸衍生物的非限制性实例是咖啡酸、3,4-二羟基氢化肉桂酸和3-氢化丙酸。
在一些实施方式中,根据本发明有用的化合物可以从整株植物或部分植物中提取。这些植物部分的非限制性实例包括种子、花粉、蜡、茎、叶、果实、生殖部分、根和毛状体。在具体的实施方式中,组合物来源于植物的根。有利的是,可以从这些植物或植物部分获得的本发明的组合物可以根据本发明用于促进植物健康和/或生长,而不会不利地影响它们所应用的环境。另外,这些组合物对人、鸟、鱼、家畜和宠物无毒。
在一些实施方式中,可以使用水提取步骤提取组合物。本发明的实施方式还提供了提取和包装组合物的方法。
有利地,在某些实施方式中,本发明提供了具有反式肉桂酸、3,4-二羟基氢化肉桂酸的组合物,衍生自天然植物来源而不是来自常规产品中发现的产生肉桂醛的合成方法。涉及皂甙骨架和萜烯的化学方法可安全有效地用于农艺次要作物、温室、高尔夫球场、草坪农场、户外苗圃、水培和附近的户外植物,而无需担忧对人、鸟和接近处理地点的其他植物和/或动物的生活有毒。
在一些实施方式中,组合物还包含选自例如润湿剂、佐剂和惰性化学品的添加剂。
来自试验的证据已经证实,使用银胶菊源的组合物作为主要活性成分,任选与其他生物化合物混合,可有效控制寄生线虫和其他害虫。适合于与银胶菊提取物混合的生物化合物包括,例如,来源于皂树的皂苷,其自身是通常称为皂皮树的皂树(Quillajasaponaria)的提取物,以及沙漠植物丝兰(Yucca schidigera)的提取物。皂苷还可以用作混合的组合物的表面活性剂。
在优选的实施方式中,遗传和/或激素调节的效果是暂时的,不永久修饰植物的基因。因此,与转基因生物(GMO)不同,可以使用组合物的外部应用来实现有针对性和可控制的效果。
在一个示例性的实施方式中,使用来自整个植物或银胶菊植物根部的分子的水性提取物,确定在重复施用前囊胞线虫可以残留大约两周。
与根结线虫不同,囊胞线虫的一半(雄性)在线虫生命周期的第一个月是属于根系。结果,当适当地应用时,本文提供的组合物的残余物在其消散之前的早期阶段是有效的。
在具体的实施方式中,本发明的组合物可以用于调节直接或间接参与植物生长调节剂(PGR)以及次级代谢产物(例如,在植物防御构建途径中发现的黄酮)功能的基因的表达。银胶菊植物提取物的三个主要成分是天冬氨酸(当施用于测试植物的上部时,其结合生长素,以及处理时影响根)以及琥珀酸和乳酸(其作用于根系上以增加侧根生长)。在优选的实施方式中,主题组合物还包含天冬氨酸、半胱氨酸和谷氨酰胺。
植物激素的五个主要类别是:生长素,细胞分裂素,赤霉素,脱落酸和乙烯。另一类植物激素是茉莉酮酸酯,其中茉莉酸是一个非限制性实施例。生长素(主要是吲哚-3-乙酸(lAA))促进细胞分裂和细胞伸长,并维持顶端优势。生长素还能刺激维管形成层的二次生长,诱导不定根形成并促进果实生长。
在本发明的一些实施方式中,调节上述植物激素的所有类别的基因对包含本发明组合物的处理作出响应。
可以上调或下调的基因的非穷举列表包括GA-生物合成GA1(cds)(Acc.编号AT4G02780),GA2(eks)(Acc.编号AT1G79460),AtKOllGA3(Acc.编号AT5G25900),CYP88A3/KA02(Ace.编号ATIG05160),AtGa20ox/Ga5(Ace.编号AT4G25420),AtOX3(Ace.编号ATI G15550),At20X(Ace.编号ATI G02400),ABA-生物合成PDS(Ace.编号AT5GI7230),ZEP(Ace.编号AT5G67030),(NCED#I)(Ace.编号AT4GI8350),NCED#2(Ace.编号ATL G78390),NCED3cplast(Ace.编号AT3G 14440),(NCED#4)(Ace.编号AT3G24220),NCED5cplast(Ace.编号ATIG30100),SDR,ABA2/GINI(Ace.编号ATIG52340),AA03(Ace.编号AT2G27150),MOCO,LOS5/ABA3(Ace.编号AY034895),ABA 8'羟化酶IAA生物合成/相关(Ace.编号CYP707A4),cyp单加氧酶(Ace.编号AT4G39950),cyp单加氧酶(Ace.编号AT2G22330),TRP单加氧酶(Ace.编号AT4G32540),腈水解酶(Ace.编号AT3G44300),腈水解酶(Ace.编号AT3G44310),腈水解酶(Ace.编号AT3G44320),水解酶/腈水解酶(Ace.编号AT4G08790),醛氧化酶(Ace.编号AT5G20960),IAA解离(Ace.编号AT5G56660),IAA解离(Ace.编号ATIG51760),IAA解离(Ace.编号AT3G02875),IAA结合(Ace.编号AT2G23260),IAA受体(Ace.编号AT3G62980),IAA输入载体(Ace.编号AT2G38120),IAA输出载体(Ace.编号ATIG73590),生长素重定向根尖ETH-生物合成(Ace.编号AT2G47000),ACC氧化酶(Ace.编号ATIG05010),ACC氧化酶(Ace.编号ATIG62380),ACC合成酶(Ace.编号AT2G22810),ACC合成酶(Ace.编号AT5G65800),ACC合成酶(Ace.编号AT4GI1280),ACC合成酶(Ace.编号AT4G37770),ACC合成酶(Ace.编号AT4G08040),CYK生物合成CTK合成酶(Ace.编号ATIG25410),CYK合成酶(Ace.编号AT3GI9160),CYK合成酶(Ace.编号AT3G63110),CYK合成酶(Ace.编号AT4G24650),CYK合成酶(Ace.编号AT5G 19040),CYK氧化酶(Ace.编号ATI G75450),CYK氧化酶(Ace.编号AT2GI9500),CYK氧化酶(Ace.编号AT2G41510),CYK氧化酶(Ace.编号AT3G63440),CYK氧化酶(Ace.编号AT4G29740),CYK氧化酶(Ace.编号AT5G21482),CYK氧化酶(Ace.编号AT5G56970)和PDF1.2c(防御素4)(Ace.编号AT5G44430)。
可以受益于本发明组合物的施用的植物包括:行间作物(例如玉米,大豆,高粱,花生,马铃薯等),大田作物(例如苜蓿,小麦,谷物等),乔木作物(例如核桃,杏仁,胡桃,榛子,开心果等),柑桔类作物(例如橙,柠檬,西柚等),水果作物(例如苹果,梨等),草坪作物,观赏植物(如花卉,藤等),蔬菜(如西红柿,胡萝卜等),藤本作物(如葡萄,草莓,蓝莓,黑莓等)。
益处可以是例如增加产量、质量、抗病虫害等的形式。
可受益于本发明方法的植物包括属于总科绿色植物的所有植物,尤其是单子叶植物和双子叶植物,包括饲料或豆科牧草、观赏植物、食用作物、树木或灌木,其选自包括以下植物的列表:槭属,猕猴桃属,秋葵属,剑麻,冰草属,匍匐翦股颖,葱属,苋属,马兰草,菠萝,番荔枝属,芹菜属,落花生属,木菠萝属,芦笋,燕麦属(燕麦,野燕麦,红燕麦,野燕麦栽培变种,杂交燕麦),杨桃,刺竹属,冬瓜属,巴西果,甜菜,芸苔属(如欧洲油菜,芜菁属[卡诺拉,菜籽油菜,芜菁油菜]),Cadaba farinosa,野茶树,美人蕉,大麻,辣椒属,苔属,番木瓜,大果假虎刺,山核桃属,红花属,栗属,吉贝木棉,菊苣属,樟属,西瓜,柑橘属,椰子属,咖啡属,芋属,可乐属,黄麻属,胡荽,榛属,山楂属,番红花,南瓜属,黄瓜属,菜蓟属,胡萝卜属,金钱草属,龙眼,薯蓣属,柿属,稗属,油棕属(例如几内亚油棕,美洲油棕),龙爪稷,埃塞俄比亚画眉草,蔗茅属,枇杷,桉属,番樱桃,荞麦属,水青冈属,高羊茅,无花果,金桔属,草莓属,银杏,大豆属(例如大豆,Soja hispida或Soja max),陆地棉,向日葵属(例如一年生向日葵),Hemarocallis fulva,木槿属,大麦属(例如大麦),甘薯,胡桃属,莴苣,山黧豆属,小扁豆,亚麻,荔枝,莲花属,棱角丝瓜,羽扇豆属,地杨梅属sylvatica,番茄属(例如番茄,Lycopersicon lycopersicum,Lycopersiconpyriforme),硬皮豆属,苹果属,金虎尾属,曼密苹果,芒果,木薯属,人心果,紫苜蓿,草木樨属,薄荷属,中国芒,苦瓜属,黑桑,芭蕉属,烟草属,洋橄榄属,仙人掌属,鸟足豆属,稻属(如水稻,宽叶稻),黍稷,柳枝黍,西番莲,欧防风,狼尾草属,鳄梨属,皱叶欧芹,虉草,菜豆属,猫尾草,凤凰属,芦苇,酸浆属,松属,阿月浑子,豌豆属,早熟禾属,杨属,牧豆树属,李属,番石榴属,石榴,西洋梨,栎属,栽培萝卜,波叶大黄,茶藨子属,普通蓖麻,悬钩子属,甘蔗属,柳属,接骨木属,黑麦,胡麻属,白芥属,茄属(例如栽培茄,红茄或番茄),双色高粱,菠菜属,蒲桃属,万寿菊属,酸豆,可可,三叶草属,鸭茅状摩擦禾,小黑麦,小麦属(例如,小麦,硬粒小麦,肿胀小麦,Triticum hybernum,马卡小麦,Triticum sativum,单粒小麦或普通小麦),小旱金莲,大旱金莲,越桔属,蚕豆属,豇豆属,香堇菜,葡萄属,玉蜀黍,沼生菰,枣属等。
实施方式可以用于任何植物物种的转化,包括但不限于单子叶植物和双子叶植物。感兴趣的植物的实施例包括但不限于玉米(玉蜀黍),芸苔属(例如欧洲油菜,芜菁,芥菜)、特别是那些可用作种子油来源的芸苔属物种,苜蓿(紫花苜蓿),水稻(栽培稻),黑麦(黑麦),高粱(双色高粱,普通高粱),小米(例如珍珠小米(御谷),黄米(黍稷),谷子(粟),糁米(龙爪稷)),向日葵(一年生向日葵),红花(红花),小麦(普通小麦),大豆(大豆),烟草(普通烟草),马铃薯(栽培茄属),花生(落花生),棉花(海岛棉,陆地棉),红薯(甘薯),木薯(木薯),咖啡(咖啡属),椰子(可可椰子),菠萝(凤梨),柑橘树(柑橘属),可可(可可),茶(茶树),香蕉(芭蕉属),鳄梨(牛油果),无花果(无花果),番石榴(番石榴),芒果(杧果),橄榄(欧洲橄榄),番木瓜(番木瓜),腰果(西方腰果),澳洲坚果(全缘叶澳洲坚果),杏仁(巴旦杏),甜菜(栽培甜菜),甘蔗(甘蔗属),燕麦,大麦,蔬菜,观赏植物和松柏类。
蔬菜包括番茄(西红柿),莴苣(例如莴苣),绿豆(菜豆),青豆(利马豆),豌豆(山黧豆属)和黄瓜属成员,如黄瓜(C.sativus),哈密瓜(C.cantalupensis)和甜瓜(C.melo)。观赏植物包括杜鹃花(杜鹃花属),绣球花(大叶绣球花),芙蓉(Hossiscus rosasanensis),玫瑰(蔷薇属),郁金香(郁金香属),水仙(水仙属),矮牵牛(杂交矮牵牛),康乃馨(香石竹),一品红(圣诞红)和菊花。可以用于实施实施方式的松柏类包括例如:松树如厚皮刺果松(火炬松),湿地松(湿地松),杰克松(美国黄松),美国黑松(扭叶松)和蒙特雷松(辐射松);花旗松(黄杉);西部铁杉(加拿大铁杉);西加云杉(白云杉);红杉(北美红杉);冷杉如银杉(太平洋银冷杉)和香脂冷杉(胶冷杉);和雪松,如西方红雪松(北美乔柏)和阿拉斯加黄雪松(黄扁柏)。实施方式的植物包括作物(例如玉米,苜蓿,向日葵,芸苔属,大豆,棉花,红花,花生,高粱,小麦,小米,烟草等),例如玉米和大豆植物。
草坪用草包括但不限于:一年生兰草(一年生早熟禾属);一年生黑麦草(多花黑麦草);加拿大兰草(扁早熟禾);紫羊茅(匍匐紫羊茅);寄生常绿草(细弱剪股颖);匍匐翦股颖(沼泽翦股颖);扁穗冰草(沙生冰草);航道冰草(鸡冠鹅观草);硬羊茅(长叶羊茅);肯塔基蓝草(草地早熟禾);果园草(Dactylis glomerate);多年生黑麦草(多年生毒麦);红羊茅(红羊茅);红顶草(小糠草);粗蓝草(粗茎早熟禾);羊茅(绵羊羊茅);光雀麦(无芒雀麦);高羊茅(苇状羊茅);梯牧草(猫尾草);绒毛剪股颖(犬翦股颖);垂枝碱茅(Puccinelliadistans);西部麦草(蓝茎冰草);百慕达草(狗牙根属);圣奥古斯丁草(偏序钝叶草);结缕草(结缕草属);百喜草(美洲雀稗);地毯草(近缘地毯草);蜈蚣草(假俭草);基库尤草(隐花狼尾草);海滨雀稗(海雀稗);蓝色格兰马(纤格兰马草);野牛草(指状野牛草);sideoats格兰马草(垂穗格兰马草)。
感兴趣的植物包括提供感兴趣的种子的谷类植物,油籽植物和豆科植物。油籽植物包括棉花,大豆,红花,向日葵,芸苔属,玉米,苜蓿,棕榈,椰子,亚麻,蓖麻,橄榄等。豆科植物包括豆类和豌豆。豆类包括瓜尔豆,刺槐豆,胡芦巴,大豆,四季豆,豇豆,绿豆,利马豆,蚕豆,扁豆,鹰嘴豆等。
本发明的组合物和方法可以用于减少由大范围的害虫引起的损害。
害虫分类的实施例包括鳞翅目(例如,菜蛾科,夜蛾科,螟蛾科,卷蛾科,潜蛾科,螟蛾科,蛀果蛾科,麦蛾科,草螟科,灯蛾科和毒蛾科),半翅目(例如叶蝉科,飞虱科,木虱科,蚜科,粉虱科,Orthezidae,盲蝽科,网蝽科,蝽科,和Lygaiedae),鞘翅目(例如金龟子科,叩头甲科,瓢虫科,天牛科,叶甲科和象鼻虫科),双翅目(例如蝇科,丽蝇科,麻蝇科,花蝇科,实蝇科,禾蝇总科,鸟蝇总科),直翅目(例如,蝗科,斑腿蝗科,锥头蝗科),缨翅目(例如蓟马科,纹蓟马科和食孢蓟马科),垫刃目(例如滑刃科和Neotylechidae),弹尾目(例如棘跳虫属和等节科),蜱螨目(例如叶螨科,皮刺螨科,粉螨科和疥螨科),柄眼目(例如,嗜黏液蛞蝓科和巴蜗牛科),蛔虫科(例如蛔虫和异尖科),后睾目,裂体科,蜚蠊目(例如硕蠊科,隐尾蜚蠊科和弯翅蠊科)和缨尾目(例如衣鱼科,鳞啮虫科和土鱼科)。
属于鳞翅目的害虫的实施例包括二化螟,稻纵卷叶螟,稻苞虫,大螟,粘虫,稻螟蛉,斜纹夜盗虫,豆荚螟,紫花苜蓿荚斑螟,Matsumuraeses falcana,大豆食心虫,Pleuroptya naafis,黄地老虎,球菜夜蛾,甘薯麦蛾,八字地老虎,烟夜蛾,棉铃虫,甘蓝夜蛾,甜菜夜蛾,小菜蛾,菜粉蝶,大菜粉蝶,菜心螟和黑点银纹夜蛾。
属于半翅目的害虫的实施例包括褐飞虱,白背飞虱,灰飞虱,黑尾叶蝉,电光叶蝉,Stenotus rubrovittatus,棉花赤须盲蝽,中华稻缘蝽,黑须稻绿椿,稻绿虫舂,Lagynotomus elongatus,稻黑蝽,拟二星椿,日本二星蝽,黑腹椿,Togo hemipterusScott,稻棘缘蝽,璧蝽hybneri,茶翅蝽,斑须蝽,台湾新声蚜,禾谷缢管蚜,玉米缢管蚜和大豆蚜。
属于鞘翅目的害虫的实施例包括水稻稻水象,稻负泥虫,稻象鼻虫,Melanotuslegatus,Melanotus fortnumi,古铜异丽金龟,日本丽金龟,栗色绒金龟,墨西哥豆瓢虫,Paraluperodes nigrobilineatus,马铃薯瓢虫,茄二十八星瓢虫,异色瓢虫,红铜丽金龟,金龟子,印度黄守瓜和黄曲条菜跳甲。
属于双翅目的害虫的实施例包括稻秆潜蝇,大麦水蝇,麦红吸浆虫,灰地种蝇,Asphondylia yushimai,豆秆黑潜蝇,三叶斑潜蝇,美洲斑潜蝇,南美斑潜蝇和番茄斑潜蝇。
属于直翅目的害虫的实施例包括小翅稻蝗和日本稻蝗。属于缨翅目的害虫的实施例包括稻蓟马和棕榈蓟马。属于垫刃目的害虫的实施例包括根结线虫、线虫纲和异皮线虫属。属于弹尾目的害虫的实施例包括Onchiurus psuedamatus yagii和Onychiurusmatsumotoi。属于蜱螨目的害虫的实施例包括麦圆蜘蛛,二斑叶螨,神泽叶螨,腐食酪螨和双叶跗线螨。属于柄眼目的害虫的实施例包括大蜗牛和嗜黏液蛞蝓科。属于蛔虫目的害虫的实施例包括人蛔虫。属于后睾目的害虫的实施例包括横川后殖吸虫。属于裂体科的害虫的实施例包括日本血吸虫。属于蜚蠊目的害虫的实施例包括德国小蠊,黑胸大蠊,美洲大蠊和樱桃红蜚蠊。属于缨尾目的害虫的实施例包括灰衣鱼和衣鱼。
鉴于本发明的技术特征和本领域的公知常识,本发明(更具体地说,本发明的害虫控制方法适用的害虫)的覆盖范围很广。另一方面,如下述实施例所示,本发明的效果或有效性通过实验而确认,测试昆虫为属于鞘翅目:瓢虫科的茄二十八星瓢虫和异色瓢虫;属于直翅目:斑腿蝗科的小翅稻蝗;属于鳞翅目:夜蛾科的棉铃虫;属于蜚蠊目:蜚蠊目的樱桃红蜚蠊。考虑到事实,尽管不打算限制本发明的范围,但是本发明优选应用于属于鞘翅目、直翅目、鳞翅目或者蜚蠊目的昆虫,并且更优选地适用于属于鞘翅目:瓢虫科、直翅目:斑腿蝗科、鳞翅目:夜蛾科、或蜚蠊目:蜚蠊科的昆虫。属于鞘翅目:瓢虫科的昆虫的具体实施例包括茄二十八星瓢虫和异色瓢虫,属于直翅目:斑腿蝗科的昆虫的具体实施例包括小翅稻蝗。属于鳞翅目:夜蛾科的昆虫的具体实施例包括棉铃虫,属于蜚蠊目:蜚蠊科的昆虫的具体实施例包括樱桃红蜚蠊。
在一个示例性实施方式中,银胶菊提取物防止由线虫(例如根结线虫和囊胞线虫)引起的根瘿的形成。
有利地,与通过杀死来控制害虫的常规杀虫剂不同,在一些实施方式中,本文提供的组合物可以通过调节植物自身的信号途径来控制害虫,所述信号途径通常由植物组织涉及的生长素和其他激素、皂苷和其他苷类产量以及根毛的增加中控制。
在某些实施方式中,本发明防护生物或非生物性质的对于植物的攻击。生物攻击的非限制性实施例包括植物寄生虫,节肢动物,动物,真菌,细菌,线虫,爬行动物,软体动物,蝎子和病毒。非生物攻击是由例如物理环境的变化引起的,包括但不限于温度,盐度,光照,水质,土壤质量和氧化。
示例性试验已经证明,本发明的银胶菊提取物提供了改善囊胞、根结和根腐线虫控制的基础。
例如当以高剂量施用时,本文提供的组合物还可以增强干燥植物对害虫的防护,例如白蚁、蛀木虫,真菌,细菌和对木材、干木、干燥的根和干果常见的某些害虫。
在一个实施方式中,主题组合物改善了经历水分威胁的植物的健康和产量。
本发明的组合物也可用于诱导出芽和/或开花,包括在大麻植物中。
在一些实施方式中,使用本发明的组合物和方法获得的基因调控产生的化学屏障包括但不限于:拮抗化合物(如植物抗毒素),熏蒸化合物和能够改变味道、气味和/或植物的信息素特征的化合物。
在某些实施方式中,基因和/或激素调控在抑制害虫寻找、穿透和/或消耗目标植物的能力方面是有效的。此外,包含主题提取物和任选的其他天然衍生添加剂的主题组合物可以干扰害虫找到配偶的能力。
在一些实施方式中,外源性攻击是非生物性的,源自极端的物理条件,包括但不限于温度、光照、水、土壤和影响目标植物生长的其他因素的变化。
在一些实施方式中,本文提供的组合物以干燥或液体制剂形式作为种子处理施用或施用于土壤表面。
优选的方法包括将本文提供的组合物施用至土壤表面而无需机械结合。然后可以通过降雨、洒水器、洪水或滴灌来激活土壤施用的杀虫效果,然后将其传递到目标害虫,以将其种群水平降低到可接受的阈值。在一个示例性实施方式中,本文提供的组合物可以通过中心枢转灌溉系统或在种子犁沟上的喷洒有效地施用。
本文中提及的将组合物施用于害虫或植物“之上或附近”或施用于害虫或植物的“环境”是指施用使得组合物与害虫或植物充分接触,使得实现期望的结果(例如,杀死害虫,增加产量,防止对植物的伤害,调节基因和/或激素等)。
术语“包括”的使用在本文中包括“基本上由...组成”和“由......组成”。如本文所用,术语“基本上由......组成”将成分和步骤的范围限制为指定的材料或步骤以及那些不会实质上影响本发明的基本和新颖特征的材料或步骤,例如通过激素和/或基因调控和/或害虫控治来促进植物健康的组合物和方法。
有利地,本文提供的组合物使用例如从银胶菊植物的沙漠灌木提取的组合物,其是划算的,尤其是当与合成对应物比较时。例如,根据现有的证据和有效性和应用率的知识,对于银胶菊植物的低浓度提取物,全球的囊胞线虫的防治可以通过数千英亩的银胶菊生产来完成。
实施例
应该理解的是,这里描述的实施例和实施方式仅用于说明的目的,并且本领域技术人员在其基础上能够想到各种改进或变化,它们将被包括在本申请的精神和范围内。
实施例1
在一个示例性实施方式中,如本文所述的用于植物生长和防御处理的组合物的提取和包装方法包括以下步骤。
首先,通过冲洗或物理刷洗清除源植物(如根或芽)的过多污垢,如果合适的话,随后用H2O2处理除去霉菌。然后将源植物的根或芽用剪刀调整大小以适合研磨机,所述研磨机将植物部分研磨成粉末。或者,将所述植物部分在一种或多种溶剂(例如水,乙醇,丙醇,异丙醇,皂树提取物或西地格丝兰提取物)中湿磨。然后粉末可以存放在一个密封的容器并冷藏。
为了制备10%的植物提取物溶液,将10g干燥的根粉末加入到本实施例前面提供的90g蒸馏水或其它溶剂中。在某些实施方式中,总溶剂的50%、40%、25%或10%或更少是非水。其他浓度可以通过调整植物提取物的质量到总溶剂体积来完成。植物提取物和溶剂混合物可以保存并冷藏48小时,每4-6小时搅拌一次。然后将混合物倾析并通过堆叠的滤纸(4个滤纸/堆叠)过滤。
在一个实施方式中,对提取物进行一种或多种本文所述活性的测试。可以压榨植物甘蔗渣以获得额外的植物提取物并通过堆叠的滤纸(4个滤纸/堆叠)过滤。然后过滤后的溶液,任选地加入抗氧化剂,放在UV保护的瓶子中。为了排除包装中的空气,优选将瓶子填充到边缘。
对于商业生产,针对大量的银胶菊和其他植物提取物,已经开发了用于提取和加工的方法,不使用己烷或醇,而是通过水处理。
生产方法的一个具体例子如下:
等量提取物(Iso-extract)生产线步骤:
1.根收获定时:利用水平采样技术(例如,每5行和垂直20英尺)在田地对根质量进行采样,在400Ft×480Ft田地提供24个根采样。例如,可以在二月、五月、八月和十一月份收集样品,清洁、研磨和提取样品,并检测特定化学标记物的存在和数量。当化学标记物以制剂指定的量存在时收获根。中等大小的根被剪切并移除。
2.根收获:计算生产运行所需的干根重量,确定收获面积。首先摘下植物的顶部收获根部,然后将干根提取并捆扎。总取样根量接近100根。(96)根。为了采样优选不破坏植物。被收获的根优选地存储在阴凉商品谷仓直到被处理。
3.初步的根处理:来自田间的干根首先用井水在滚筒中清洗。井水用于冲洗、过滤和再循环,沉积物定期清除并沉积在周围的土地上。
4.初步定型:将清洁后的干燥根部输送到初步筛分器-切片机中,调整大小到小于1英寸长度。
5.湿研磨:将切片-调整大小的根称重,然后通过螺旋钻进入湿磨机。将无微生物的水加入到螺旋钻和切碎的根部,并研磨至小于1/16英寸的平均粒度以产生可泵送的浆液。优选地,颗粒通过1/4英寸、1/8英寸或更小的筛选尺寸。加入的水的量可以是例如每加仑水约0.75-1.5磅的根。更优选地,每加仑水约0.9至约1.25磅的根。可以现场生产和储存无微生物的RO水。
在此使用的术语“提取物的百分比”(例如10%或30%)是指植物部分(例如根)的重量占植物部分和溶剂(例如水)的混合物重量的百分比,溶剂与植物部分接触。浓度可以是例如50%,40%,30%,20%,10%或更小,以及其间的任何百分比。优选浓度约为30%。计量进入研磨罐的水量略高于所要求的最终浓度。根片的体积根据作物年龄、收获日期、含水量、储存期限、提取物的色度计测试以及其他浓度测量工具而变化。
6.从研磨机转移到压榨机:将根-水浆液泵送到一系列驻留罐中,并允许“静置”直到达到所需浓度的活性成分。可以使用例如GLC和质谱仪来评估组合物的含量。组合物的浓度也可以基于比色法和/或比重来确定。当获得等量提取物的适当组合物时,将驻留罐的内容物泵入旋转式压榨机。旋转式压榨机从甘蔗渣中分离等量提取物溶液,然后将溶液泵入、过滤并储存在一个批量罐中。固体的百分比优选小于5%,4%,3%,2%或1%。甘蔗渣固体可以转移出建筑物并用于堆肥生产。在优选的实施方式中,除去大于16、24、32、40或48微米的固体。在进一步优选的实施方式中,去除不适合通过1/2英寸、1/4英寸或1/8英寸筛子的颗粒。
7.批量罐:可以使用GLC和质谱仪再次检查等量提取物溶液的浓度和组成。如果溶液浓度太高,则将无微生物的RO水加入到等量提取物溶液中以达到所需的浓度。当达到所需浓度时,将0.1重量%的苯甲酸钠加入溶液中,然后将溶液过滤并通过过滤泵入一系列储罐以用于制剂的最终生产。可以定期监测储存的等量提取物成分和浓度,以保证始终维持质量。
8.制剂的生产和装瓶:将等量提取物从储罐泵入2500加仑的混合罐中,在其内将各种添加剂与等量提取物混合,以生产特定的制剂。称量这样的添加剂并手动加入,不断搅拌溶液,然后根据需要使其停留。可以用GLC和质谱仪检查制剂的浓度和组成,并且当正确时,过滤并且泵送到填充站并且放在容器中。制剂可以装在手提大小的容器里,也可使用旋转式16头填充器装入瓶中(1加仑和2.5加仑F型壶),盖上盖子,贴上标签,装箱。箱子放在托盘上,收缩包装,并存储或立即发货。添加剂可以是例如植物营养素、有机和常规衍生的植物活力产品和皂素(润湿剂)。
10.产品储存和分配:包装产品放在托盘上并放置在库存中待售。散装产品被放置在270加仑的手提容器中。取决于生产的体积,托盘/手提容器可以现场存储,或运输到一个单独的仓库存储和运输。
实施例2
使用本文提供的组合物和方法进行试验。有利的是,结果比用二氯丙烯II或威百亩熏蒸更好。
证明了银胶菊提取物对甜菜囊胞线虫的功效。此外,银胶菊根的相同含水提取物用于治疗西兰花囊胞线虫。它也成功地提高了作物产量,抑制了囊胞线虫的生长。还对生长在番茄、胡萝卜和甜瓜上的根结线虫测试了银胶菊提取物。观察到显著的产量和减少的线虫种群。
此外,银胶菊植物被直接播种在测试地点旁边的行上。这些行旁边是生长季节严重受侵染的番茄植物。这部分根结线虫被完全控制。
由于中西部玉米根虫的Bt抗性,这种提取物对于治理美国及其他地区种植的1亿英亩玉米可能是有用的。
额外的实验结果表明有效的控制在甜菜和西兰花植物中的寄生线虫,如囊胞线虫、Heterodear schactii和Heterodera cruciferi,对作物产量、土壤健康和有益线虫恢复有积极作用。有利地,发现有益的线虫种群在应用本发明的组合物之后不久就增加了。
实施例3
在一个示例性的实施方式中,用于调控目标植物基因和/或激素的组合物包含以下一种或多种:乙酸,脱落酸,acc合成酶,acetovallinones,argentatins,brassinoles,咖啡酸,菜油甾醇,莰烯,香芹酚,顺式肉桂酸,反式肉桂酸,绿原酸,d-柠檬烯,丁香酚,低聚半乳糖,gemional,愈创木酚,guayulins,赤霉酸,吲哚,菊粉,木质素,碘,茉莉酸,茉莉酸酯,山奈酚,山奈酚3甲醚,山奈酚2-糖苷,激动素,柠檬烯,亚油酸,亚麻酸,羽扇烯,甲羟戊酸,月桂烯,柚皮素,油酸,棕榈酸,对-an1SiC酸,蒎烯,长叶薄荷酮,qualyins,六羟黄酮,槲皮黄酮,奎尼酸,皂甙,水杨酸,sanquarinine,硬脂酸,百里酚,海藻糖6-磷酸酯(Tre6P),萜烯,tri-terpenois,turpines,香草醛和玉米素。3,4-二羟基氢化肉桂酸,3-氢化丙酸以及乳胶/橡胶转移酶,如半胱氨酸蛋白酶,天冬氨酸蛋白酶,组氨酸蛋白酶和一种或多种衍生自银胶菊薄壁细胞乳胶和橡胶的其它蛋白酶。这里提到这些酶包括作为应用本发明组合物的结果在植物中诱导这些酶(或其它酶)。
实施例4-银胶菊等量根部提取物的前30%的分析,在质谱仪读数中检测到30种化合物
该组合物优选含有这些化合物中的至少5、10、15、20、25种或全部30种。
实施例5-囊胞线虫的控制
囊胞线虫的控制与标准熏蒸和其他接触杀线虫剂相当。
目标:以甜菜囊胞线虫控制和随后的甜菜生长来评估杀线虫剂
类型:囊胞线虫控制
作物:甜菜
品种:Phoenix,Coronado,Baja,Cortez,SV2013,SV2015,β4521R,β4430R,β8520和β8617。
地块设计:随机区组
地块大小:长25'x宽3.3'
重复实验:6
土壤类型:沙壤土
土壤说明:沙漠沙
灌溉方法:滴灌
主要事件日期:
预先应用9月25日(种植前注射二氯丙烯)
种植10月16日(种植)
第一次应用10月16日(移栽时应用所有处理)
第二次应用10月30日(处理5-7、15-18、20再次应用)
收获4月22日(收获所有地块,收集线虫样品)
应用信息:
1)未处理的检测UTC
2)二氯丙烯II(1,3-二氯丙烯)
3)Nimitz液体
4)Nimitz颗粒
5)刺激剂(IBA,GA3和细胞分裂素,Stoller Enterprises,休斯顿,德克萨斯州)
6)更多能量(氯化钙和氨基酸,Stoller Enterprises,休斯顿,德克萨斯州)
7)根能量(微量营养素和氨基酸,Stoller Enterprises,休斯顿,德克萨斯州)
8)Cortez抗性种子
9)SV2013抗性种子
10)Baja抗性种子
11)β4430R抗性种子
12)β4521R抗性种子
13)β8617抗性种子
14)β8520抗性种子
15)LM0624(润湿剂加氨基酸,Beem Consulting,萨克拉门托,加利福尼亚州)
16)GWN 10221(生物制品的混合物,Gowan,尤马,亚利桑那州)
17)GWN 1535(Neem,Gowan,尤马,亚利桑那州)
18)GU7812(GU 30%提取物,Beem Biologics,萨克拉门托,加利福尼亚州)
19)SV2015抗性种子
20)促变剂(柑橘湿润剂和硼酸,ORO AGRI,弗雷斯诺,加利福尼亚州)
21)Coronado抗性种子
应用方法:二氯丙烯II在种植前3周作为熏蒸剂注入土壤。种植时和两周后,剩余的处理施用在3.33英尺宽的苗床上的1英尺带中的土壤顶部上。
应用用量的说明:用量基于播种英亩,但是在种子线上方中心1英尺区域上的床的40%并且随后在两周后在出现的苗的顶部上进行分带(banded)。因此虽然用量示出1pt(品脱)或2pt/英亩。每英亩的材料总量减少了60%。因此,实际使用的产品量小于1pt/英亩。每英亩使用5.0盎司。2次应用将是10盎司/英亩
维护应用:在此试验过程中使用标准的除草剂、手锄和化肥。
评估方法:从每个复制实验中手工挖出甜菜并分析。为了分析,基于40英寸行距和5英寸甜菜行距,每个甜菜的磅数转换成吨/英亩。线虫样品从每个复制实验取得,并分析甜菜囊胞线虫的幼虫。
统计分析:方差分析(ANOVA),然后是Fisher最小显著差异检验。
目的和进展:一项试验包括一个随机完整的区块设计中的21个处理,每个处理重复6次。9月25日,应用9gpa的二氯丙烯II标准处理。试验种植,剩余的处理在10月16日进行,随后同一天进行灌溉。二氯丙烯II处理、未经处理的对照和十种新产品处理被种植。新产品处理是:LM0624(湿润剂加氨基酸,Beem Consulting,萨克拉门托,加利福尼亚州),GWN10221(生物制品的混合物,Gowan,尤马,亚利桑那州),GWN1535(Neem,Gowan,尤马,亚利桑那州),GU7812(GU 30%,Beem Biologics,萨克拉门托,加利福尼亚州),促变剂(柑橘湿润剂和硼酸,ORO AGRI,弗雷斯诺,加利福尼亚州),刺激剂(IBA、GA3和细胞分裂素,StollerEnterprises,休斯顿,德克萨斯州),更多能量(氯化钙和和氨基酸,Stoller Enterprises,休斯顿,德克萨斯州),根能量(微量营养素和氨基酸,Stoller Enterprises,休斯顿,德克萨斯州),Nimitz(MCW-2,fluensulfone,ADAMA,罗利,北卡罗来纳州)和Nimitz(MCW-2,fluensulfone)颗粒。
所测试的品种是:Phoenix,Coronado,Baja,Cortez,SV2013,SV2015,β4521R,β4430R,β8520和β8617。
4月22日收获试验。
从每个重复实验中手工挖出甜菜并进行分析。为了分析,基于40英寸行距和5英寸甜菜行距,根据Spreckels实验室数据确定的干净甜菜的每个甜菜的磅数转换为吨/英亩。线虫样品从每个重复实验取得,并分析甜菜囊胞线虫的幼虫。
等量提取物GU 30%(GU7812)使囊胞线虫最快减少,甜菜产量几乎增加最多。产量高于二氯丙烯II熏蒸标准。(见图1和2)
每个图是6个重复实验的平均值。
没有跟随相同字母的平均值根据Fisher保护最小显著差异检验在P=0.05或0.10时彼此显著不同。
每个图是6个重复实验的平均值。
没有跟随相同字母的平均值根据Fisher保护最小显著差异检验在P=0.05或0.10时彼此显著不同。
实施例6-银胶菊提取物对甜菜中的囊胞线虫有效的试验。
在这个试验中,在30多年的冬季月份期间,通过轮流培养易感染的作物作为宿主,囊胞线虫的压力变得非常高。
目标:针对甜菜囊胞线虫控制和随后的甜菜生长来评估杀线虫剂
类型:线虫控制
地点:加州尔湾
作物:甜菜
品种:Phoenix(易感染)
地块设计:随机区组
地块大小:10'x 2.5'
重复实验:5
土壤类型:沙壤土
土壤说明:沙子:66%
淤泥:21%
粘土:13%
有机物质:0.60%
pH:7.6
CEC:0.68mmhos/cm
灌溉方法:高架洒水器,然后作物长出后一个月滴灌。
主要事件日期:
熏蒸应用6月4日(种植前注射二氯丙烯)
种植前应用6月8日(种植前应用Nimitz处理)
种植6月18日(播种)
第一次应用6月18日(种植时应用所有处理)
第二次应用7月2日(重复应用处理2-9和11)
第三次应用7月16日(重复应用处理2-9和11)
收获10月29日(收获日期)
处理:1未处理
2 BG-T 1pt/a
3 RP-T 1pt/a
4 RaizeMore-T 2pt/a
5 BBI GU 10%1pt/a
6 BBI GU 10%3pt/a
7 LM-2015 1pt/a
8 Nema-Q 3pt/a
9 BBI GU 10%&LM 1+1pt/a
10 硅藻土30ib/a
11 Nimitz+BG-T 3.5+1pt/a
12 Nimitz 5pt/a,种植时
13 Nimitz 5pt/a,种植前
14 Nimitz 3.5pt/a,种植时
15 Nimitz 3.5pt/a,种植前
16 二氯丙烯9gpa
收获日期:十月二十九日
评估方法:收获时,从每个重复实验中收获5株植物并称重。首先未处理组在种植前采样以确定种群存在。所有的重复实验都是在收获时每个重复试验采样12个1英寸(2.5厘米)直径的心,至深度为12英寸(30厘米)。
应用注意事项:在中心2.5英尺的床上的1英尺的带中在种子线的顶部上进行带状应用。
统计分析:方差分析(ANOVA),然后是Fisher最小显著差异检验。
总结和讨论:
土壤一直保持高度侵染囊胞线虫成虫、幼虫和卵。与标准的二氯丙烯II熏蒸、其他化学杀线虫剂和未处理的检测相比,以1pt/英亩和3pt/英亩应用等量提取物GU 10%来确定剂量响应差异。
此外,还引入了等量提取物GU 10%与新型润湿剂(LM 2015)的组合。等量提取物GU10%@3pt/英亩单独表现很好,在早期的试验中与GU30%制剂@1pt/英亩相当。GU 10%@1pt/英亩的活性分子量是1/3,并不足以控制产量或线虫。
与新型润湿剂(LM2015)相结合,即使GU10%@仅1pt/英亩,产量也显著增加。对于减少孢囊线虫和增加产量,等量提取物GU 10%@1pt/英亩+润湿剂的组合与GU 10%3pt/英亩相当。参见图3、4和5。
实施例7-用于控制根结线虫(爪哇根结线虫)的银胶菊根提取物
在温和的冬季增强根结线虫在易感染作物上的生长,以保持人为的高水平的卵和幼年幼虫进行测试。
类型:线虫控制
位置:尔湾
作物:胡萝卜
品种:Imperator
地块设计:随机区组
地块大小:20'x 2.5'
重复实验:5
土壤类型:沙壤土
灌溉方法:滴灌
主要事件日期:
应用前6月4日(二氯丙烯II注射)
种植7月20日(种植种子)
首次应用6月17日和18日(首次土壤应用)
第二次应用7月1日和2日(第二次土壤应用)
第三次应用7月14日(第三次土壤应用)
作物收获11月12日(收获)
应用信息:
1)未处理的检测UTC
2)BG-T
3)RP-T
4)RaizeMore-T
5)BASC-15-10
6)LM-2015
7)Nema-Q
8)硅藻土
9)Nimitz EC
10)二氯丙烯II(用量参见表格)
收获日期:11月12日
评估方法:在收获时,从每个重复实验中收获3英尺(0.91米)的行,并分成4类:1)无线虫损伤可销售的,2)有线虫损伤可销售的,3)有线虫损伤不可销售的,以及4)无线虫损伤不可销售的。首先未处理组在种植前采样以确定存在的种群。所有的重复实验都是在收获时采样12个1英寸(2.5厘米)直径的心,至深度为12英寸(30厘米)。
统计分析:方差分析(ANOVA),然后是Fisher最小显著差异检验。
结果:
表5.数字上与未处理组相比较,*BASC-15-10 3pt/a、LM-2015和二氯丙烯的胡萝卜总数量和重量较大。BG-T和Nimitz+BG-T的胡萝卜数量比未处理的大。BASC-15-10&LM的胡萝卜重量更大。在P=0.05时,二氯丙烯的胡萝卜重量更大。参见图6。
表6.在数字上,BG-T,RP-T,*BASC-15-10 3pt/ac,LM-2015,BASC-15-10&LM,Nimitz+BG-T和Telone相比未处理的具有更大数量和重量的的无线虫损伤可销售胡萝卜。RaizeMore-T相比未处理的具有更大数量的无线虫损伤可销售胡萝卜。在P=0.05时,二氯丙烯相比未处理的具有更大重量的无线虫损伤可销售胡萝卜。参见图7和8。
*BASC-15-10为胡萝卜试验的GU 10%代码
实施例8对柑桔线虫的活性
测量对于一个放置在穿孔容器的沙子中和放置在土壤中的单蜕皮柑桔线虫(半穿刺柑桔线虫)的酶活性,以测定在7天的蜕皮期间这种酶对裸露蛋白质皮肤线虫幼虫阶段的功效。
应用信息:
a.)等量提取物,30%1毫升+249毫升H2O=250毫升溶液。
b.)等量提取物30%5毫升+245毫升H2O=250毫升溶液。
c.)等量提取物30%25毫升+225毫升H2O=250毫升溶液。
d.)未处理的H2O=仅250ml水。
值得注意的是,在蜕皮期间,所有剂量都是有效的并且在种群部分效果良好。参见图9。
实施例9-等量提取物10%对葡萄叶蝉若虫和西花蓟马的功效
对叶蝉的若虫以及西花蓟马的成虫和若虫的功效在统计学上是显著的。
目的:测定等量提取物GU 10%对酿酒葡萄叶蝉和西花蓟马的功效。
类型:叶蝉控制
地点:美国加利福尼亚州洛迪市
作物:酿酒葡萄
品种:古藤仙粉黛
地块设计:随机区组
地块大小:三藤
重复实验:每个处理或未经处理检测重复实验6次,5x6次=30x3藤次
土壤类型:沙壤土-汉福德沙坡
土壤说明:0-2%坡度&>0.1%OM
灌溉方法:在12小时运行周期内滴灌@0.5GPH
主要事件日期:
首次应用9月16日(叶应用,仅一次)
首次评估9月21日(处理vs未处理和种植者标准)
第一次降雨9月22日(强风暴和霜冻后,害虫没有恢复)
应用信息:
1)未处理的检测UTC
2)Admire Pro@1.5oz/英亩
3)等量提取物GU 10%@1pt/英亩(1250ppm vol./vol)
4)等量提取物GU 10%@2pt/英亩(2500ppm vol./vol)
5)等量提取物GU 10%@3pt/英亩(5000ppm vol./vol)
应用方法:背包式鼓风喷雾器@每次处理15升,计算喷雾100GPA
应用用量的说明:收获后应用,收获后种植者让叶片害虫生长,使得叶蝉和蓟马急剧增加。
维护应用:白粉菌当令喷洒,但不能在收获后。
收获日期:8月26日。在这个葡萄园中,收获前10天或收获后任何时候都不使用杀虫剂。
评估方法:在现场对未处理的检测和4种处理之间进行视觉比较,通过计算每个地块去除5片叶子/放置在纸袋中并在一小时内在解剖范围评估叶子来确定总体损害和种群密度。计数年轻的能动葡萄叶蝉的存在;西花蓟马的成虫和能动的幼虫也是如此。
统计分析:ARM程序版本8.0(最新版本2013年4月21日)邓肯多范围测试,(p=0.05)
结果与讨论:这种等量提取物的活性成分具有剧烈的影响,正如本试验中关于蜕皮的昆虫害虫的敲击(knockdown)活性的试验所证明的。参见图10和11。
葡萄叶蝉和西花蓟马是每年葡萄中最重要的两种害虫。在葡萄园管理中花了近40年的研究员进行了评估。等量提取物不仅影响蜕皮时的葡萄昆虫,而且对成年的觅食的蜜蜂和黄蜂也是安全的。在第一次评估之后,经过大量降雨和霜冻,经研究员观察,该产品出现几天或一周的藤霜冻伤害。
实施例10-昆虫生长调节效果(葡萄叶蝉若虫的蛋白质皮肤的酶效应)
目的:确定等量提取物GQB 23%对酿酒葡萄叶蝉和其他软体害虫的功效。
类型:叶蝉控制
作物:酿酒葡萄
品种:Syrah
地块设计:随机区组
地块大小:12'x 2.5',
重复实验:每个处理或未处理检验使用8个重复的单葡萄藤
土壤类型:粉质壤土
土壤说明:土壤中度湿润,但比通常干燥。
灌溉方法:滴灌
主要事件日期:
第一次应用7月25日(叶应用)
首次评估8月18日(叶样品收集,取得活计数)
应用信息:
1.)未处理的检测UTC
2.)BBI等量提取物GQB 23%@1pt/英亩
应用方法:手持式加压喷雾器
应用用量的说明:空心锥形可调喷嘴尖端。喷洒,在叶子两侧径流。
评估方法:收集叶样品并在施用21天后装袋以防止活的叶蝉逃逸。在放大显微镜下观察叶子,并且记录活的和死的叶蝉总数。
应用注意事项:应该注意的是,优选覆盖整个叶子,以达到与害虫接触的最佳效果。叶蝉若虫和西花成虫蓟马和若虫将大部分时间花费在叶子的下面。
统计分析:ARM程序版本8.0(最新版本2013年4月21日)邓肯多范围测试(P=0.05)
结果:提取物GQB 23%是三种协同植物提取物的混合物。具体地,GQB是银胶菊10%、皂树10%和Brassinole 3%的制剂。
这种产品的应用不仅对葡萄叶蝉的控制有3周残留,而且对有益捕食者草蛉的卵是无害的。
其他效果包括仅一次应用就大幅减少由于害虫吸食口部分的葡萄叶蝉叶片损害。还有一个一致更大的藤条周长、更绿色的叶子和葡萄藤的延长。
见图12
实施例11-在种植田间玉米种子的温室盆中,作为土壤浸渍剂(drench)应用的来自银胶菊植物根的活性成分的生物刺激/植物激素作用。
等量提取物10%(银胶菊根提取物10%)增加了嫩枝(shoot)长、根长、根表面积和侧根尖。
目的:确定提取物对田间玉米的影响
类型:PGR研究
作物:杂交饲料玉米
品种:32B10
地块设计:随机区组
地块大小:8“黑塑料盆
重复实验:15个处理和未处理的检测12次
土壤类型:中细粒砂和盆栽混合物
土壤说明:
灌溉方法:使用洒水壶或洒水头软管附件手动浇水
主要事件日期:
第一次应用3/7(喷雾应用溶液)
种植日期3/7(沙子中1/4”-1/2”的种植深度)
第一次评估3/21(牵引和评估次数)
应用信息:
1)未处理的检测(只限水检)
2)等量提取物10% 1毫升
3)等量提取物10% 2毫升
4)丝兰Ag助剂50% 1毫升
5)丝兰Ag助剂50% 2毫升
6)QL Agri 35% 1毫升
7)QL Agri 35% 2毫升
8)等量10%+丝兰50% 1毫升
9)等量10%+QL 35% 1毫升
10)丝兰50%+QL 35% 1毫升
11)等量10%+丝兰50% 2毫升
12)等量10%+QL 35% 2毫升
13)丝兰50%+QL 35% 2毫升
14)等量10%+丝兰50%+QL35% 1.5毫升
15)刺激剂2毫升
应用方法:用注射器在土壤顶部每个重复实验施用10ml溶液
收获日期:3/21
评估方法:使用厘米量度的直尺进行嫩枝和根测量。评估从种子到尖端的嫩枝的总长度。根被评估为幼根、种子根和节点根,长度以厘米为单位,计数节点根。
统计分析:ARM程序版本8.0(最新版本2013年4月21日)邓肯多范围测试
结果是有利的,如图13-17所示。
实施例12-在温室试验中,将等量提取物10%(银胶菊根提取物10%)用作土壤浸渍剂施用于种植的棉花种子上。
目的:植物和根的生长
类型:生物刺激剂PGR试验
作物:棉花
品种:DP1216B2RF
地块设计:12个处理和一个未处理的检测,12次/处理
地块大小:温室18盎司地块
重复实验:每次处理12次重复实验
土壤类型:沙子
土壤说明:
灌溉方式:微洒灌溉
主要事件日期:
种植日期4/28(种植在温室18”盆中)
处理日期5/4(10毫升溶液)
第一次评估5/18(根,嫩枝测量,干物质,水分百分比)
第二次评估6/10(根,嫩枝测量,干物质,水分百分比)
应用信息:
1)未处理的检测UTC
2)等量提取物10%1000PPM
3)等量提取物10%2000PPM
4)等量提取物10%3000PPM
5)丝兰50%1000PPM
6)丝兰50%2000PPM
7)丝兰50%3000PPM
8)Quillaya 1000PPM
9)Quillaya 2000PPM
10)Quillaya 3000PPM
11)等量10%+丝兰1000+1000PPM
12)等量10%+Quillaya 1000+1000PPM
13)丝兰+Quillaya 1000+1000PPM
应用方法:每次处理作为浸渍液10毫升应用。
评估日期:处理后7天和处理后14天
评估方法:种植到沙中,18盎司的盆。沙是生长介质,具有半英寸的土壤用于种子萌发。通过微洒14GPH灌溉,每天总共5分钟。第一次评估发生在处理后14天,第二次评估发生在处理后21天。植物营养-液体12-4-8,20毫升/星期(沙介质)
统计分析:ARM程序版本8.0(最新版本2013年4月21日)邓肯多范围测试
在图18和19中可以看到有利的结果。
实施例13-在温室环境中进行叶子实验,而不是种子处理或土壤浸渍应用。
目的:开花/发芽,植物和根的生长
作物:商业长春花
品种:杂交
地块设计:5个处理和1个未处理检测,共6个
地块大小:温室1加仑地块
重复实验:每个处理12次重复实验
土壤类型:沙子
灌溉方式:微洒灌溉14GPH
主要事件日期:
移栽日期7/1
第一次处理7/5
第二次处理7/12
评估日期7/28
第一次评估7/28
应用信息:
1)未处理的检测UTC
2)等量提取物10%1000叶PPM
3)等量提取物10%2000叶PPM
4)等量提取物10%3000叶PPM
5)等量提取物10%1000叶PPM
+1000根应用PPM
6)等量提取物10%2000叶PPM
+2000根应用PPM
应用方法:作为叶喷雾处理1-4施用。处理5和6叶喷雾加根浸渍,处理,这两种处理每棵植物10毫升。
评估方法:移栽到沙子,1加仑的盆中。沙是生长介质,具有用于种子萌发的.24土壤。通过微洒14GPH灌溉,每天总共5分钟。第一次评估发生在处理后14天,第二次评估发生在处理后21天。植物营养-液体12-4-8,20毫升/周(沙介质)
应用注意事项:叶喷雾处理/根浸渍长春花
统计分析:ARM程序版本8.0(最新版本2013年4月21日)邓肯多范围测试
总结和讨论:等量提取物10%的种子处理率可以例如0.5盎司、1盎司、2盎司或3盎司/100磅的种子完成。浸渍处理可以例如1、2或3毫升的等量提取物10%在种植的种子上完成,或者在辣椒和西红柿的情况下浸渍根部。根发育和嫩枝发育、以及根和嫩芽或整个植物的新鲜和干重发生显著增加。长春花植物处理采用1、2或3ml叶处理/L水(1000,2000或3000ppm体积/体积溶液)。叶和土壤的应用同时在两个处理上进行。植物激素和糖途径在根系和植物上部是不同的。激素差异的一个简单的例子是顶端有更多的生长素,根中有更多的细胞分裂素,以及生长阶段的糖的移动vs植物顶部的果实汇(fruit sinks)生长。在长春花上,在同一天(第1天和2周后)向植物顶部施用1000ppm的组合两次,在根部施用1000ppm的组合两次,然后在第二次施用2周后评估一次。这告诉我们有关该产品在结果实蔬菜和树木、大豆荚、玉米粒和开花观赏植物领域的潜在用途。我们在两次叶应用1000、2000或3000ppm的情况下,实现了典型的植物生长调节剂或生物刺激剂的典型剂量反应,例如,花的增加为28%、85%和36%,显示出典型的增加而不是减少,且比未处理组更好。这被称为三重效应。将这种响应与土壤应用相结合,当顶部达到200%+当土壤和顶部施用相结合时,增加了根系的有效性。如果需要的话,在处理土壤和顶部组合时,可以降低用量。
在图20-23中可以看到有利的结果
实施例14:商业甜玉米重复试验的叶施用。
该试验证明在适当的时机在V-3、V-5和抽穗的玉米植株上可以增加玉米粒的产量和大小,而不会损失玉米cobb的大小。
目标:确定当令应用1&2pt/英亩对甜玉米的影响
类型:植物生物刺激剂/植物生长调节剂(甜玉米生产)
作物:甜玉米
品种:3674
地块设计:随机区组
地块大小:30'x 66'
重复实验:6
土壤说明:整个生长季节土壤水分良好
灌溉方法:沟槽/地面灌溉
主要事件日期:
种植7月25日
第一次应用8月25日(叶应用,V-3)
第二次应用9月10日(叶应用,抽穗前)
第三次应用9月17日(叶应用,早期长须)
收获日期10月10日(成熟甜玉米收获)
应用信息:
1)未处理的检测UTC
2)BBI等量提取物GU 10%1pt/英亩40加仑水
3)BBI等量提取物GU 10%2pt/英亩40加仑水
应用方法:CO2背包式喷雾器@40psi,计算为每英亩喷40加仑。
应用用量的说明:等量提取物GU 10%的应用没有不良反应(植物毒性)
收获日期:10月10日
评估方法:手工采集的总地块面积,测量穗的周长、长度和个体重量
统计分析:ARM程序版本8.0(最新版本2013年4月21日)邓肯多范围测试
结果与讨论:试验在加利福尼亚北圣华金河谷甜玉米种植区进行。等量提取物GU10%可有效增加玉米穗的总产量和周长,这增加了每个地块的穗数和穗重。应用时间很方便,适用于除草剂和杀虫剂及杀螨剂喷洒的栽培实践。
事实上,这两个用量都有增加,而2pt用量并没有明显增加,这证实了之前的研究,其中等量提取物GU 10%的剂量反应在8盎司-2pt/英亩是有效的,但没有更高的用量。这是植物生长调节剂外源施用时所具有的典型的植物生长激素效应,即所谓的“三重效应”。这从剂量反应增加开始,然后是效果的平稳(例如植物高度,果实大小,根长度),然后最终逆转。未处理的检测的产量增加超过15%,对于每英亩甜玉米产量的增加被认为是相当好的。
有利地,这些上述组分天然地来源于一种或多种植物,一起用于调节目标植物的生长和防御机制,提高植物的抗氧化作用,并控制植物激素的传输。参见图24和25。
本文提及或引用的所有专利、专利申请、临时申请和出版物均以其与本说明书的明确教导不矛盾的程度通过引用全文并入,包括所有附图和表格。
应该理解的是,这里描述的实施例和实施方式仅用于说明的目的,并且本领域技术人员鉴于其有动机进行各种修改或改变,这些修改或改变将包括在本申请的精神和范围内。
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Claims (39)
1.一种用于调节目标植物的基因和/或激素的组合物,其中所述组合物包含从在恶劣环境中生长的植物提取的化合物或所述化合物的衍生物,所述组合物具有以下效果中的至少一种:通过渗出物增加目标植物的抵抗性,诱导植物对外源性攻击的系统获得的抗性,以及增强植物对攻击的物理和化学屏障。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中所述恶劣环境选自干旱地区、位于高海拔的地区、高盐度地区、以极端温度为特征的地区以及具有极端pH值的土壤。
3.根据权利要求1所述的组合物,还包含一种或多种选自其他的植物提取物、润湿剂、佐剂和惰性化学品的添加剂。
4.根据权利要求1所述的组合物,其包含异戊二烯或类异戊二烯化合物。
5.根据权利要求1所述的组合物,其中所述提取物来自银胶菊植物。
6.根据权利要求1所述的组合物,其包含来自植物根部的提取物。
7.根据权利要求6所述的组合物,其中所述提取物是使用水作为溶剂获得的。
8.根据权利要求7所述的组合物,其中水是唯一使用的溶剂。
9.根据权利要求1所述的组合物,具有小于1%的大于32微米的颗粒。
10.一种改善目标植物对外源攻击的防御的方法,包括通过在植物上或植物附近施用权利要求1的组合物来调节植物的基因和/或激素。
11.根据权利要求10所述的方法,其中所述基因和/或激素的调节是暂时的。
12.根据权利要求10所述的方法,其中所述外源攻击是由选自昆虫和线虫的害虫引起的。
13.根据权利要求12所述的方法,其中所述害虫是线虫。
14.根据权利要求10所述的方法,其中所述目标植物是干木、木材、干燥的根或干果。
15.根据权利要求10所述的方法,其中将所述组合物施用于土壤表面、植物的表面或植物的种子上。
16.根据权利要求10所述的方法,其中所述目标植物选自行间作物、大田作物、乔木作物、柑橘作物、水果作物、草皮作物、观赏作物、蔬菜和藤本作物。
17.一种从在恶劣环境中生长的植物提取生物活性组合物的方法,包括获得所述植物的一个或多个部分,清洁所述部分的外表面;在溶剂存在下研磨该部分以制备植物-溶剂混合物;过滤混合物以除去固体,由此获得生物活性组合物。
18.根据权利要求17所述的方法,其中所述溶剂选自水、乙醇、丙醇和异丙醇。
19.根据权利要求18所述的方法,其中所述溶剂是水。
20.根据权利要求17所述的方法,其中在所述方法期间施加正压力或负压力。
21.根据权利要求17所述的方法,其中所述恶劣环境选自干旱地区、位于高海拔的地区、高盐度地区、以极端温度为特征的地区以及具有极端pH值的土壤。
22.根据权利要求21所述的方法,其中,所述组合物是从银胶菊提取的。
23.一种组合物,其包含表1中列出的化合物,并且还包含农业上可接受的载体。
24.根据权利要求23所述的组合物,具有小于1%的大于32微米的颗粒。
25.由权利要求17的方法生产的组合物。
26.用于减少农业害虫对目标植物造成的损害的方法,其中所述方法包括对所述害虫、所述植物或所述害虫和/或植物的环境施用有效量的权利要求25的组合物。
27.根据权利要求26所述的方法,其中所述目标植物选自行间作物、大田作物、乔木作物、柑橘作物、水果作物、草皮作物、观赏作物、蔬菜和藤本作物。
28.根据权利要求26所述的方法,其中所述害虫选自线虫和昆虫。
29.根据权利要求28所述的方法,其中所述害虫是线虫。
30.根据权利要求26所述的方法,其中将所述组合物施用于所述植物附近的土壤和所述植物的叶子。
31.根据权利要求26所述的方法,其中提取组合物的植物是银胶菊。
32.根据权利要求26所述的方法,其中在提取过程期间每加仑水使用0.75至1.5磅的根。
33.根据权利要求32所述的方法,其中每英亩应用约0.5至5品脱的组合物。
34.一种在植物中诱导芽和/或花形成的方法,其中所述方法包括使所述植物或其环境与权利要求25的组合物接触。
35.一种改善植物的可销售产量的方法,其中所述方法包括对所述植物或所述植物的环境施用权利要求25的组合物。
36.根据权利要求35所述的方法,其中所述目标植物选自行间作物、大田作物、乔木作物、柑橘作物、水果作物、草皮作物、观赏作物、蔬菜和藤本作物。
37.根据权利要求35所述的方法,其中将所述组合物施用于植物附近的土壤和植物的叶子。
38.根据权利要求35的方法,其中提取组合物的植物是银胶菊。
39.根据权利要求35所述的方法,其中蜜蜂未受到伤害。
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Address after: Arizona, USA Applicant after: Bayaodel Ag Co.,Ltd. Address before: Arizona, USA Applicant before: BEEM BIOLOGICS Inc. |
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20180511 |
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