BR112018002840B1 - Método para reduzir o dano causado a uma planta alvo viva por uma praga agrícola e método para melhorar o rendimento comercializável de uma planta - Google Patents

Abstract

composições e seus usos para controle de praga e para induzir o hormônio vegetal e regulação do gene para produção e defesa melhoradas da planta. a presente invenção proporciona composições e métodos de utilização do mesmo para melhorar a defesa das plantas através da utilização de produtos químicos derivados naturalmente. em uma modalidade específica, a composição é de parthenium argentatum gray, também conhecida como planta guaiúle. as composições preferidas podem regular ascendentemente ou descendentemente os genes de crescimento responsáveis pelos mecanismos de defesa das plantas alvo para criar barreiras físicas e/ou químicas e produzir exsudados de ingestão, compostos antagonistas ou compostos fumigativos para prevenir e tratar os danos causados por pragas em plantas agronômicas ou não agronômicas.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA PARA UM PEDIDO RELACIONADO

[001] O pedido reivindica o benefício do pedido provisório americano de patente com No. de série 62/202,998, depositado em 10 de agosto de 2015, que é aqui incorporado por referência na sua totalidade.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[002] O mercado para o tratamento de nematóides de cistos em beterraba, colheitas e, especialmente, soja é muito grande. À medida que a química dos nematicidas de contato sintético e os fumigantes do solo enfrentam um maior escrutínio, e à medida que novas tubulações de produtos químicos de nematicida, inseticida, bactericida e fungicidas diminuem devido ao aumento dos limites regulatórios, pesticidas biológicos sustentáveis, como extratos de plantas, estão se tornando alternativas mais importantes, particularmente, aquelas que fornecem semelhantes níveis de controle como pesticidas e fumigantes convencionais. Condições econômicas e ambientais criam oportunidades para tratamentos biológicos de doenças causadas por nematóides parasitas, insetos, ácaros, bactérias e fungos. Como resultado, existe uma demanda significativa por soluções mais ecologicamente corretas que tornem o investimento na pesquisa e desenvolvimento de novos nematicidas biologicamente derivados.

[003] Atualmente, US $1,5 bilhão por ano está perdido para o nematóide de cisto de soja sozinho. As variedades de soja resistentes não duram muito por causa dos cruzamentos difíceis para híbridos com resistência. O acervo genético é diversificado e quebra a resistência em 2 a 3 anos em média. Aplicações diferentes dos tratamentos de sementes no passado foram caras. Portanto, a aplicação de nematicidas de contato colocados no sulco da semente na plantação foi o principal método de aplicação. Por causa da toxicidade em relação aos animais nas proximidades, como os pássaros, os pivôs centrais de aspersão com aplicações líquidas de compostos tóxicos, como Nemacur, Temik, Furadan, Dazinat e Mocap, deixaram de ser usados.

[004] O brometo de metila, um fumigante sintético do solo, representa riscos para a saúde e o meio ambiente, e está sendo retirado por uma proibição internacional. Desde a década de 1960, o brometo de metila tem sido utilizado pelos produtores para efetivamente esterilizar os campos antes da plantação para controlar, principalmente, os nematóides, bem como tratar doenças e ervas daninhas; no entanto, porque este composto tóxico é usado na forma de gás, mais da metade da quantidade injetada no solo pode acabar no Sr. Ascensão para a atmosfera, isto contribui para o desbaste da camada de ozônio. Em 2005, os países desenvolvidos proibiram o brometo de metila no âmbito do Protocolo de Montreal, que é um tratado internacional assinado em 1987 para proteger a camada estratosférica de ozônio.

[005] Sob a proibição, o tratado permite o uso limitado de brometo de metila em morangos, amêndoas e outras culturas que não possuem alternativas para controle efetivo e acessível de nematóides, doenças e ervas daninhas. A extensão do uso autorizado diminui a cada ano e, provavelmente, terminará em breve. A busca de alternativas ao brometo de metila é, portanto, uma prioridade para o USDA, que concedeu US $5 milhões que apoiou a pesquisa para identificar alternativas desde 2010. No entanto, nenhum produto fornece o amplo espectro de controle oferecido pelo composto brometo de metila. Os produtores que enfrentam a inevitável transição para produtos alternativos estão buscando alternativas viáveis com diferentes graus de sucesso.

[006] Historicamente, os nematicidas "moles", como os derivados de bactérias ou fungos, foram utilizados. Eles, geralmente, são mais fracos e podem rapidamente lixiviar pelo solo, sem o efeito residual para controlar os nematóides. O ácido cinâmico derivado biologicamente, por outro lado, oferece controle inicial potente, controle residual de curta duração e a segurança de nematicidas moles. Como exemplo, a planta de guaiúle, também conhecida como Parthenium argentatum Gray, está sendo cultivada comercialmente em quantidades limitadas para a extração de borracha de látex. A concentração de ácido cinâmico na fração de resina da planta de guaiúle é bem conhecida devido às tentativas de comercialização anteriores para a extração de borracha na década de 1940 e na década de 1980. No entanto, o que não é bem conhecido até esta descoberta recente é o efeito de vários compostos e os seus derivados colhidos da planta de guaiúle no tratamento e controle de nematóides e outras pragas de plantas que não foram extensivamente estudados. Embora o guaiúle tenha sido conhecido por ser resistente aos nematóides endoparasíticos, como nódulo da raiz e nematóide de lesão desde 1948, o pressuposto era que os exsudados de ácido cinâmico eram motivo de redução ou não entrada desses endoparasitas na raiz. No entanto, de acordo com a presente invenção, verificou-se que as enzimas e os hormônios vegetais em um extrato de guaiúle também estão muito envolvidos com múltiplos modos de ação para controlar ou suprimir os nematóides parasíticos das plantas, insetos e aumentar a produtividade das plantas através da regulação ascendente de genes da planta.

BREVE RESUMO DA INVENÇÃO

[007] A presente invenção proporciona composições e métodos para melhorar a defesa das plantas contra os ataques exógenos empregando um ou mais compostos extraídos de uma ou várias espécies de plantas. A presente invenção proporciona ainda materiais e métodos úteis para a regulação do crescimento de genes e plantas.

[008] Numa modalidade específica, a composição compreende um ou mais isoprenóides e outros compostos, derivados de Parthenium argentatum Gray e, mais especificamente, de ácido trans-cinâmico; ácido 3,4- dihidroxihidrocinâmico; e ácido 3-hidropropiônico. Estes compostos podem ser utilizados juntamente com enzimas que, quando aplicadas a nematóides ou insetos, podem, por exemplo, dissolver a quitina e/ou a proteína dos insetos de mudas. As enzimas podem ser, por exemplo, transferases de látex/borracha.

[009] As composições aqui contidas podem ser usadas para tratar plantas vivas e produtos derivados de plantas, como madeira seca, raízes secas, madeira serrada e frutos secos.

[0010] As composições preferidas podem regular a expressão de genes responsáveis pelos mecanismos de defesa das plantas para criar barreiras físicas e/ou químicas e/ou induzir a planta a produzir exsudados de ingestão, compostos antagonistas e/ou compostos fumigativos que evitam e/ou tratam danos causados por pragas em plantas agronômicas ou não agronômicas.

[0011] Assim, num aspecto, a presente invenção proporciona uma composição para regular os genes e/ou hormônios de uma planta alvo, tais como, por exemplo, reguladores de crescimento de plantas (PGRs), em que a composição compreende um ou mais compostos que podem ser extraídos de partes de plantas, ou um derivado de tal composto.

[0012] Em modalidades específicas, os compostos são de plantas que são cultivadas em ambientes agressivos, como, por exemplo, ambientes secos, ambientes de alta salinidade, alta altitude, pH extremo e/ou temperatura extrema. Vantajosamente, quando aplicados a taxas adequadas, em certas modalidades, as composições aqui proporcionadas são usadas para repelir, resistir, remover, desativar, fumigar, alterar e/ou matar pragas em uma variedade de ambientes.

[0013] Os compostos podem ter, pelo menos, um dos seguintes efeitos: aumentar a repelência de uma planta através de exsudados, induzir a resistência sistêmica de uma planta contra os ataques exógenos e aumentar as barreiras físicas e químicas de uma planta. Em certas modalidades preferidas, as composições compreendem compostos isoprenóides.

[0014] Em certas modalidades, o composto pode ser ácido cinâmico, ou um derivado deste. O composto também pode ser uma protease ou quitinase. De preferência, os compostos são extraídos a partir de uma planta do deserto Parthenium argentatum Gray, também referida como a planta guaiúle.

[0015] Em algumas modalidades, a composição compreende ainda um ou mais aditivos que podem ser selecionados de, por exemplo, agentes de umidificação, adjuvantes e produtos químicos inertes.

[0016] Exemplos de modalidades proporcionam composições que compreendem isoprenóides que podem regular ascendentemente ou descendentemente de um ou mais genes que estão envolvidos direta ou indiretamente no sistema de defesa de uma planta, incluindo metabólitos secundários encontrados nas vias de construção da defesa de uma planta. Em modalidades preferidas, os efeitos dos regulamentos genéticos e/ou hormônios são temporários sem modificar permanentemente os genes da planta.

[0017] Em certas modalidades, os ataques exógenos podem ser de natureza biótica ou abiótica. Exemplos não limitantes de ataques bióticos incluem parasitas de plantas, herbívoros, bactérias, fungos e plantas invasivas, como ervas daninhas. Os ataques abióticos podem ser causados por, por exemplo, as mudanças no ambiente da planta. Em algumas modalidades, os ataques exógenos são de natureza abiótica, provenientes de condições físicas extremas que incluem, mas não estão limitadas às mudanças na temperatura, exposição à luz, salinidade, qualidade da água, solo e outros fatores afetando o crescimento da planta alvo.

[0018] Numa modalidade específica, as composições aqui proporcionadas são eficazes no tratamento de plantas infestadas com nematóides parasitas. Numa modalidade, a população de micróbios benéficos é mantida ou reforçada.

[0019] Noutro aspecto, a presente invenção proporciona um método para melhorar a defesa de uma planta alvo contra os ataques exógenos, compreendendo regular temporariamente os genes e/ou hormônios vegetal, aplicando externamente, ou perto da planta, uma composição da presente invenção. Os regulamentos genéticos e/ou hormônios podem ter um ou mais dos seguintes efeitos: aumentar a repelência da planta através de exsudados, induzir a resistência sistêmica da planta contra os ataques e melhorar as barreiras físicas e/ou químicas da planta.

[0020] Em algumas modalidades, as barreiras químicas resultantes das regulações genéticas aqui proporcionadas incluem, mas não estão limitadas à produção de compostos antagonistas, tais como fitoalexinas, compostos fumigativos e compostos que podem alterar o sabor, cheiro e/ou feromonas característicos da planta alvo.

[0021] Em certas modalidades, os regulamentos genéticos e/ou hormônios são eficazes para inibir as habilidades das pragas para encontrar, penetrar e, posteriormente, consumir a planta alvo. Além disso, em certas modalidades, as composições da invenção em questão podem interferir com a capacidade das pragas de se acasalar.

[0022] Em algumas modalidades, a composição é aplicada como tratamento de sementes ou para a superfície do solo com ou sem incorporação mecânica.

[0023] Vantajosamente, as modalidades preferidas da presente invenção proporcionam tratamentos derivados naturalmente sem modificar permanentemente os genes das plantas e são eficazes na melhora do rendimento das culturas e na manutenção da saúde do solo. Além disso, ao contrário dos pesticidas convencionais que apenas matam pragas, em certas modalidades, as composições, aqui proporcionadas, podem melhorar os mecanismos de defesa da própria planta alvo contra os ataques exógenos.

[0024] Os objetos, características e vantagens da invenção serão evidentes para os peritos na técnica a partir da descrição detalhada da invenção que seguirá, em conjunto com as tabelas, desenhos e as reivindicações anexas.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0025] A Figura 1 mostra o aumento da produção de beterraba.

[0026] A Figura 2 mostra uma diminuição nos nematóides de cisto.

[0027] A Figura 3 mostra o aumento da produção de beterraba.

[0028] A Figura 4 mostra o aumento da produção da beterraba.

[0029] A Figura 5 mostra uma diminuição nos nematóides de cisto.

[0030] A Figura 6 mostra o aumento na produção da cenoura.

[0031] A Figura 7 mostra o aumento na produção da cenoura.

[0032] A Figura 8 mostra o aumento na produção da cenoura.

[0033] A Figura 9 mostra o controle de nematóides cítricos.

[0034] A Figura 10 mostra o controle de ninfas de cigarrinhas de uva e tripes de flores ocidentais.

[0035] A Figura 11 mostra o controle de cigarrinhas de uva.

[0036] A Figura 12 mostra o efeito de regulação do crescimento dos insetos nas cigarrinhas de uva.

[0037] A Figura 13 mostra os efeitos no comprimento da raiz radícula.

[0038] A Figura 14 mostra os efeitos na área da superfície da raiz.

[0039] A Figura 15 mostra os efeitos no comprimento da raiz.

[0040] A Figura 16 mostra os efeitos nas contagens da ponta da raiz.

[0041] A Figura 17 mostra os efeitos na contagem da raiz alimentadora.

[0042] A Figura 18 mostra os efeitos nas raízes e nos caules.

[0043] A Figura 19 mostra os efeitos nas raízes e nos caules.

[0044] A Figura 20 mostra os efeitos na contagem do botão de flor.

[0045] A Figura 21 mostra os efeitos nas raízes e nos caules.

[0046] A Figura 22 mostra os efeitos no comprimento da raiz.

[0047] A Figura 23 mostra os efeitos no comprimento do caule.

[0048] A Figura 24 mostra os efeitos sobre o rendimento.

[0049] A Figura 25 mostra os efeitos no tamanho da espiga de milho.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0050] A presente invenção proporciona composições e métodos para melhorar a defesa de uma planta contra os ataques e/ou modular o crescimento e/ou saúde das plantas. Exemplos específicos aqui são composições compreendendo compostos derivados naturalmente que podem ser extraídos de plantas ou derivados de tais compostos. Numa modalidade específica, as composições da invenção em questão compreendem um composto isoprenóide, e mais especificamente, ácido trans-cinâmico, ou seus derivados, extraídos de Parthenium argentatum Gray.

[0051] As composições aqui contidas podem ser usadas para tratar plantas vivas, bem como produtos derivados de plantas tais como madeira seca, raízes secas, madeira serrada e frutos secos. As composições preferidas podem regular as expressões de genes responsáveis pela defesa e/ou crescimento e/ou saúde da planta. Em certas modalidades, as composições da invenção em questão podem ser utilizadas para induzir a planta a criar barreiras físicas e/ou químicas de modo a, por exemplo, produzir exsudados de ingestão, compostos antagonistas ou compostos fumigativos que previnem, reduzam e/ou reparem danos de pragas e/ou ataques físicos em plantas agronômicas e/ou não agronômicas.

[0052] Vantajosamente, as modalidades preferidas da invenção em questão proporcionam tratamentos derivados naturalmente que podem ser usados para alcançar os resultados vantajosos sem modificar permanentemente os genes de uma planta. Vantajosamente, em certas modalidades, as composições e os métodos são eficazes na melhora do rendimento das culturas e na manutenção da saúde do solo.

[0053] Num aspecto, a presente invenção proporciona composições para regular os genes de uma planta alvo e/ou produção de hormônios tais como, por exemplo, reguladores de crescimento de plantas (PGRs). Em modalidades preferidas, as composições da presente invenção compreendem compostos que podem ser extraídos de plantas que crescem em ambientes agressivos ou derivados de tais compostos. Em modalidades preferidas, a composição tem um ou mais dos seguintes efeitos: aumentar a capacidade de uma planta de repelir uma ou mais pragas através de exsudados, induzir a resistência sistêmica adquirida da planta contra os ataques exógenos e aumentar as barreiras físicas e químicas da planta. Em certas modalidades, a composição compreende um composto isoprenóide.

[0054] Um composto isoprenóide, tal como aqui utilizado, compreende duas ou mais moléculas de isopreno ligadas em conjunto como estrutura principal com grupos funcionais opcionalmente substituídos ligados a ela. Uma molécula de isopreno não substituído, também conhecida como 2-metil-1,3-butadieno, é uma molécula de hidrocarboneto insaturada. Ácido cinâmico e seu derivado de ácido hidróxi caféico, ácido 3,4-dihidroxidrocinâmico e ácido 3- hidropropiônico. A presente invenção também contempla o uso de enzimas de látex/borracha transferase.

[0055] Em algumas modalidades, as moléculas de isopreno podem ser extraídas de uma planta como, entre outras, Selaginella lepidophylla, Parthenium incanum, Parthenium argentatum Gray, Yucca schidigera, Quillaja saponaria, espécies de Betula, espécies de Juglans e outras espécies de andlor Ascophyllum.

[0056] Em algumas modalidades, a planta é aquela que cresce em um ambiente severo. O ambiente severo pode ser, por exemplo, um que não possui a precipitação necessária para o crescimento de outras plantas, áreas localizadas em altitude elevada, áreas tendo alta salinidade e áreas caracterizadas por temperaturas extremas ou pH do solo. Exemplos não limitantes de ambientes agressivos incluem desertos e outras regiões áridas, montanhas e terras perto de corpos de água salgada, como oceanos ou lagos de água salgada.

[0057] Em certas modalidades, as condições áridas referem-se a uma localização que recebe menos de 15, 10, 5 ou 2 polegadas (0,381 m, 0,254 m, 0,127 m ou 0,0508 m) de chuva por ano. Em certas modalidades, altitude elevada refere-se a mais de 5000; 7.000; 9,000; ou 11,000 pés (1524 m, 2133,6 m, 2743,2 m ou 3352,8 m) acima do nível do mar. Em certas modalidades, a salinidade elevada refere-se a uma salinidade no meio de crescimento (por exemplo, solo), medido por condutividade elétrica superior a 3,5 mmhos/cm, 4,0 mmhos/cm ou 4,5 mmhos/cm. Em certas modalidades, as temperaturas extremas referem-se a menos de 0°C, -5°C, -15°C ou -20°C. Em certas modalidades, temperaturas extremas se referem a acima de 30°C, 35°C, 40°C, ou 45°C. Em certas modalidades, o pH extremo se refere a abaixo de 5, 4 ou 3 ou acima de 9, 10 ou 11.

[0058] Numa modalidade específica, o composto isoprenóico compreende, preferencialmente, ácido cinâmico na forma trans, ou seus derivados, extraídos de Parthenium argentatum Gray, a planta de guaiúle, tipicamente cultivada em ambientes desérticos. Exemplos não limitativos de derivados do ácido cinâmico são o ácido caféico; ácido 3,4- dihidroxihidrocinâmico; e ácido 3-hidropropiônico.

[0059] Em algumas modalidades, os compostos úteis de acordo com a presente invenção podem ser extraídos de uma planta inteira ou de uma parte da planta. Exemplos não limitativos dessas partes da planta incluem sementes, pólen, cera, caules, folhas, frutas, partes reprodutivas, raízes e tricomas. Numa modalidade específica, as composições derivam das raízes da planta. Vantajosamente, as composições da presente invenção, as quais podem ser derivadas destas plantas ou partes de plantas, podem ser utilizadas para promover a saúde e/ou crescimento da planta de acordo com a presente invenção sem afetar negativamente o ambiente ao qual são aplicadas. Além disso, essas composições não são tóxicas para humanos, aves, peixes, gado e animais de estimação.

[0060] Em algumas modalidades, as composições podem ser extraídas usando um procedimento de extração aquosa. As modalidades da presente invenção também proporcionam métodos de extração e embalagem das composições.

[0061] Vantajosamente, em certas modalidades, a presente invenção proporciona composições com ácido trans- cinâmico, ácido 3,4-dihidroxidrocinâmico, derivadas de fontes de plantas naturais, em vez de métodos sintéticos que produzem aldeídos cinâmicos, que são encontrados em produtos convencionais. Os procedimentos químicos envolvendo esqueleto de saponina e terpeno são seguros e eficazes para uso em culturas agronômicas e menores, estufas, campos de golfe, fazendas de relvados, viveiros ao ar livre, hidroponia e plantas ao ar livre em bairros, sem causar preocupações com a toxicidade para humanos, aves e outras plantas e/ou vida animal em proximidade do local de tratamento.

[0062] Em algumas modalidades, a composição compreende ainda aditivos selecionados de, por exemplo, agentes de umidificação, adjuvantes e produtos químicos inertes.

[0063] A evidência de ensaios confirmou a eficácia de usar uma composição derivada de guaiúle, como o ingrediente ativo principal, opcionalmente, misturado com outros compostos biológicos no controle de nematóides parasitas e outras pragas. Os compostos biológicos adequados para a mistura com extrato de guaiúle incluem, por exemplo, saponinas derivadas de quilaia, que é ele próprio um extrato de Quillaja saponaria, comumente conhecido como a casca da árvore rica em saponina e extratos da planta do deserto Yucca schidigera. As saponinas também podem servir como tensoativo para a composição combinada.

[0064] Em modalidades preferidas, os efeitos das regulações genéticas e/ou hormônios são temporários sem modificar permanentemente os genes de uma planta. Portanto, ao contrário dos organismos geneticamente modificados (OGM), a aplicação externa da composição pode ser usada para alcançar um efeito direcionado e controlado.

[0065] Em uma modalidade exemplar, usando uma extração aquosa de moléculas de toda a planta ou as raízes de uma planta de guaiúle, é determinado que o resíduo para nematóides de cisto pode ser aproximadamente duas semanas antes de repetir a aplicação.

[0066] Ao contrário dos nematóides do nódulo da raiz, a metade da população (os machos) dos nematóides do cisto são do sistema radicular durante o primeiro mês do ciclo de vida do nematóide. Como resultado, quando aplicado adequadamente, o resíduo das composições, aqui proporcionadas, pode ser eficaz numa fase inicial antes de se dissiparem.

[0067] Em modalidades específicas, as composições da presente invenção podem ser utilizadas para modular a expressão de genes que estão direta ou indiretamente envolvidos nas funções de reguladores de crescimento de plantas (PGRs), bem como metabólitos secundários tais como, por exemplo, flavóides, encontrados nos caminhos de construção da defesa da planta. Três componentes primários do extrato da planta de Guaiúle são o ácido aspártico, que conjuga a auxina, quando aplicado na parte superior das plantas testadas, bem como as raízes de impacto, quando tratadas, bem como o ácido succínico e lático, que atuam sobre o sistema radicular para aumentar crescimento da raiz lateral. Em modalidades preferidas, a composição em questão compreende, ainda, ácido aspártico, cisteína e glutamina.

[0068] Cinco categorias principais de hormônios vegetais são: auxinas, citoquininas, giberelinas, ácido abscísico e etileno. Uma categoria adicional de hormônios vegetais é jasmonatos, dos quais o ácido jasmônico é um exemplo não limitativo. Auxinas, principalmente, ácido indol-3-acético (IAA), promovem tanto a divisão celular e o alongamento celular e mantêm o domínio apical. Auxinas também estimulam o crescimento secundário no câmbio vascular, induzem a formação de raízes adventícias e promovem o crescimento da fruta.

[0069] Em algumas modalidades da presente invenção, os genes que regulam todas as categorias dos hormônios das plantas acima mencionados respondem ao tratamento que compreende as composições da presente invenção.

[0070] Uma lista não exaustiva dos genes que podem ser regulados ascendentemente ou descendentemente inclui GA- biossintético GAl (cds) (Acc. No. AT4G02780), GA2 (eks) (Acc. No. AT1G79460), AtKOllGA3 (Acc. No. AT5G25900), CYP88A3/KA02 (Ace. No. ATIG05160), AtGa20ox/Ga5 (Ace. No. AT4G25420), AtOX3 (Ace. No. ATI G 15550), At20X (Ace. No. ATI G02400), ABA-biossintético PDS (Ace. No. AT5GI7230), ZEP (Ace. No. AT5G67030), (NCED#I) (Ace. No. AT4GI8350), NCED#2 (Ace. No. ATl G78390), NCED3 cplast (Ace. No. AT3G 14440), (NCED#4) (Ace. No. AT3G24220), NCED5 cplast (Ace. No. ATIG30100), SDR,ABA2/GINI (Ace. No. ATIG52340), AA03 (Ace. No. AT2G27150), MOCO,LOS5/ABA3 (Ace. No. AY034895), ABA 8' hidroxilase IAA-biossintético/relacionado (Ace. No. CYP707 A4), cyp mono oxigenase (Ace. No. AT4G39950), cyp mono- oxigenase (Ace. No. AT2G22330), TRP mono-oxigenase (Ace. No. AT4G32540), nitrilase (Ace. No. AT3G44300), nitrilase (Ace. No. AT3G44310), nitrilase (Ace. No. AT3G44320), hidrolase/nitrilase (Ace. No. AT4G08790), aldeído oxidase (Ace. No. AT5G20960), IAA deonjugação (Ace. No. AT5G56660), IAA deonjugação (Ace. No. ATIG51760), IAA deonjugação (Ace. No. AT3G02875), IAA conjugação (Ace. No. AT2G23260), IAA receptor (Ace. No. AT3G62980), veículo de influxo IAA (Ace. No. AT2G38120), veículo de efluxo IAA (Ace. No. ATIG73590), Auxina redireção na ponta da raiz ETH-biosintético (Ace. No. AT2G47000), ACC oxidase (Ace. No. ATIG05010), ACC oxidase (Ace. No. ATIG62380), ACC sintase (Ace. No. AT2G22810), ACC sintase (Ace. No. AT5G65800), ACC sintase (Ace. No. AT4GI1280), ACC sintase (Ace. No. AT4G37770), ACC sintase (Ace. No. AT4G08040), CYK-biosintético CYK sintase (Ace. No. ATIG25410), CYK sintase (Ace. No. AT3GI9160), CYK Sintase (Ace. No. AT3G63110), CYK sintase (Ace. No. AT4G24650), CYK sintase (Ace. No. AT5G 19040), CYK oxidase (Ace. No. ATI G75450), CYK oxidase (Ace. No. AT2GI9500), CYK oxidase (Ace. No. AT2G41510), CYK oxidase (Ace. No. AT3G63440), CYK oxidase (Ace. No. AT4G29740), CYK oxidase (Ace. No. AT5G21482), CYK oxidase (Ace. No. AT5G56970), e PDF1.2c (defensina 4) (Ace. No. AT5G44430).

[0071] As plantas que podem se beneficiar da aplicação da composição da presente invenção incluem: Culturas em filheiras (por exemplo, milho, soja, sorgo, amendoim, batatas, etc.), Culturas de campo (por exemplo, alfafa, trigo, grãos, etc.), Culturas de árvore (por exemplo, Nozes, Amêndoas, Pecanas, Avelãs, Pistácios, etc.), Culturas de citrinos (por exemplo, laranja, limão, toranja, etc.), Culturas de frutas (por exemplo, maçãs, peras, etc.), Culturas de relvas, Culturas Ornamentais (por exemplo, Flores, videiras, etc.), Legumes (por exemplo, tomates, cenouras, etc.), Culturas de videira (por exemplo, uvas, morangos, mirtilos, amoras, etc.).

[0072] O benefício pode ser, por exemplo, aumentar a produção, a qualidade, a doença e a resistência às pragas, etc.

[0073] As plantas que podem se beneficiar dos métodos da invenção incluem todas as plantas que pertencem à superfamília Viridiplantae, em particular, plantas monocotiledôneas e dicotiledôneas, incluindo leguminosas forragens ou forrageiras, plantas ornamentais, culturas alimentares, árvores ou arbustos selecionados da lista que compreendendo Acer spp., Actinidia spp., Abelmoschus spp., Agave sisalana, Agropyron spp., Agrostis stolonifera, Allium spp., Amaranthus spp., Ammophila arenaria, Ananas comosus, Annona spp., Apium graveolens, Arachis spp, Artocarpus spp., Asparagus officinalis, Avena spp. (por exemplo, Avena sativa, Avena fatua, Avena byzantina, Avena fatua var. sativa, Avena hybrida), Averrhoa carambola, Bambusa sp., Benincasa hispida, Bertholletia excelsea, Beta vulgaris, Brassica spp. (por exemplo, Brassica napus, Brassica rapa ssp. [canola, colza, nabo]), Cadaba farinosa, Camellia sinensis, Canna indica, Cannabis sativa, Capsicum spp., Carex elata, Carica papaya, Carissa macrocarpa, Carya spp., Carthamus tinctorius, Castanea spp., Ceiba pentandra, Cichorium endivia, Cinnamomum spp., Citrullus lanatus, Citrus spp., Cocos spp., Coffea spp., Colocasia esculenta, Cola spp., Corchorus sp., Coriandrum sativum, Corylus spp., Crataegus spp., Crocus sativus, Cucurbita spp., Cucumis spp., Cynara spp., Daucus carota, Desmodium spp., Dimocarpus longan, Dioscorea spp., Diospyros spp., Echinochloa spp., Elaeis (e.g. Elaeis guineensis, Elaeis oleifera), Eleusine coracana, Eragrostis tef, Erianthus sp., Eriobotrya japonica, Eucalyptus sp., Eugenia uniflora, Fagopyrum spp., Fagus spp., Festuca arundinacea, Ficus carica, Fortunella spp., Fragaria spp., Ginkgo biloba, Glycine spp. (por exemplo, Glycine max, Soja hispida ou Soja max), Gossypium hirsutum, Helianthus spp. (por exemplo, Helianthus annuus), Hemerocallis fulva, Hibiscus spp., Hordeum spp. (por exemplo, Hordeum vulgare), Ipomoea batatas, Juglans spp., Lactuca sativa, Lathyrus spp., Lens culinaris, Linum usitatissimum, Litchi chinensis, Lotus spp., Luffa acutangula, Lupinus spp., Luzula sylvatica, Lycopersicon spp. (por exemplo, Lycopersicon esculentum, Lycopersicon lycopersicum, Lycopersicon pyriforme), Macrotyloma spp., Malus spp., Malpighia emarginata, Mammea americana, Mangifera indica, Manihot spp., Manilkara zapota, Medicago sativa, Melilotus spp., Mentha spp., Miscanthus sinensis, Momordica spp., Morus nigra, Musa spp., Nicotiana spp., Olea spp., Opuntia spp., Ornithopus spp., Oryza spp. (por exemplo, Oryza sativa, Oryza latifolia), Panicum miliaceum, Panicum virgatum, Passiflora edulis, Pastinaca sativa, Pennisetum sp., Persea spp., Petroselinum crispum, Phalaris arundinacea, Phaseolus spp., Phleum pratense, Phoenix spp., Phragmites australis, Physalis spp., Pinus spp., Pistacia vera, Pisum spp., Poa spp., Populus spp., Prosopis spp., Prunus spp., Psidium spp., Punica granatum, Pyrus communis, Quercus spp., Raphanus sativus, Rheum rhabarbarum, Ribes spp., Ricinus communis, Rubus spp., Saccharum spp., Salix sp., Sambucus spp., Secale cereale, Sesamum spp., Sinapis sp., Solanum spp. (por exemplo, Solanum tuberosum, Solanum integrifolium ou Solanum lycopersicum), Sorghum bicolor, Spinacia spp., Syzygium spp., Tagetes spp., Tamarindus indica, Theobroma cacao, Trifolium spp., Tripsacum dactyloides, Triticosecale rimpaui, Triticum spp. (por exemplo, Triticum aestivum, Triticum durum, Triticum turgidum, Triticum hybernum, Triticum macha, Triticum sativum, Triticum monococcum ou Triticum vulgare), Tropaeolum minus, Tropaeolum majus, Vaccinium spp., Vicia spp., Vigna spp., Viola odorata, Vitis spp., Zea mays, Zizania palustris, Ziziphus spp., entre outras.

[0074] As modalidades podem ser utilizadas para a transformação de qualquer espécie de planta, incluindo, mas não limitado às monocotiledôneas e dicotiledôneas. Exemplos de plantas de interesse incluem, mas não estão limitados a, milho (Zea mays), Brassica sp. (por exemplo, B. napus, B. rapa, B. juncea), particularmente aquelas espécies de Brassica úteis como fontes de óleo de semente, alfafa (Medicago sativa), arroz (Oryza sativa), centeio (Secale cereale), sorgo (Sorghum bicolor, Sorghum vulgare), milheto (por exemplo, mexoeira (Pennisetum glaucum), millet proso (Panicum miliaceum), painço (Setaria italica), milho miúdo indiano (Eleusine coracana)), girassol (Helianthus annuus), cártamo (Carthamus tinctorius), trigo (Triticum aestivum), soja (Glycine max), tabaco (Nicotiana tabacum), batata (Solanum tuberosum), amendoim (Arachis hypogaea), algodão (Gossypium barbadense, Gossypium hirsutum), batata-doce (Ipomoea batatus), mandioca (Manihot esculenta) Café (Coffea spp.), coco (Cocos nucifera), abacaxi (Ananas comosus), cítricos (Citrus spp.), cacau (Theobroma cacao), chá (Camellia sinensis), banana (Musa spp.), abacate (Persea americana), figueira (Ficus casica), goiaba (Psidium guajava), manga (Mangifera indica), azeitona (Olea europaea), papaia (Carica papaya), caju (Anacardium occidentale), macadâmia (Macadamia integrifolia), amêndoa (Prunus amygdalus), beterraba (Beta vulgaris), cana-de- açúcar (Saccharum spp.), aveia, cevada, vegetais, plantas ornamentais e coníferas.

[0075] Os legumes incluem tomates (Lycopersicon esculentum), alface (por exemplo, Lactuca sativa), feijão verde (Phaseolus vulgaris), feijão de lima (Phaseolus limensis), ervilhas (Lathyrus spp.) e membros do gênero Cucumis, como pepino (C. sativus), cantaloupe (C. cantalupensis) e melão (C. melo). As plantas ornamentais incluem azálea (Rhododendron spp.), Hortênsia (Macrophylla hydrangea), hibisco (Hibiscus rosasanensis), rosas (Rosa spp.), Tulipas (Tulipa spp.), Narcisitas (Narcissus spp.), Petunias (Petunia hybrida), cravos (Dianthus caryophyllus), poinsétia (Euphorbia pulcherrima) e crisântemo. As coníferas que podem ser utilizadas na prática das modalidades incluem, por exemplo, pinheiros como pinheiro loblolly (Pinus taeda), pinheiro slash (Pinus elliotii), pinheiro ponderosa (Pinus ponderosa), pinheiro lodgepole (Pinus contorta) e pinheiro de Monterey (Pinus radiata); pseudotsuga (Pseudotsuga menziesii); Tsuga (Tsuga canadensis); pinheiro de Sitka (Picea glauca); sequóia (Sequoia sempervirens); abetos verdadeiros, como abeto prateado (Abies amabilis) e abeto bálsamo (Abies balsamea); e cedros como o cedro vermelho ocidental (Thuja plicata) e o cedro amarelo do Alasca (Chamaecyparis nootkatensis). As plantas das modalidades incluem plantas de cultivo (por exemplo, milho, alfafa, girassol, brássica, soja, algodão, cártamo, amendoim, sorgo, trigo, milheto, tabaco, etc.), como plantas de milho e soja.

[0076] Os cereais incluem, mas não estão limitados a: grama azul anual (Poa annua); azevém (Lolium multiflorum); grama azul canadense (Poa compressa); Festuca de Chewings (Festuca rubra); gramínea colonial (Agrostis tenuis); gramínea rastejante (Agrostis palustris); erva de trigo com crista (Agropyron desertorum); erva de trigo fairway (Agropyron cristatum); festuca dura (Festuca longifolia); relva do Kentucky (Poa pratensis); panasco (Dactylis glomerate); azevém perene (Lolium perenne); Festuca vermelha (Festuca rubra); gramínea Redtop (Agrostis alba); grama (Poa trivialis); erva ovelha (Festuca ovine); Bromo liso (Bromus inermis); festuca alta (Festuca arundinacea); timóteo (Phleum pretense); gramínea de veludo (Agrostis canine); gramínea alcalina chorão (Puccinellia distans); trigo ocidental (Agropyron smithii); grama Bermuda (Cynodon spp.); Grama de Santo Agostinho (Stenotaphrum secundatum); grama zoysia (Zoysia spp.); Grama da Bahia (Paspalum notatum); Grama tapete (Axonopus affinis); grama centípede (Eremochloa ophiuroides); capim kikuyo (Pennisetum clandesinum); grama costeira (Paspalum vaginatum); grama azul (Bouteloua gracilis); grama búfalo (Buchloe dactyloids); grama sideoats (Bouteloua curtipendula).

[0077] As plantas de interesse incluem plantas de grãos que fornecem sementes de interesse, plantas oleaginosas e leguminosas. As sementes de interesse incluem sementes de grãos, como milho, trigo, cevada, arroz, sorgo, centeio, milheto, etc. As plantas de semente de óleo incluem algodão, soja, cártamo, girassol, brássica, milho, alfafa, palma, coco, linhaça, rícino, azeitona, etc. As plantas leguminosas incluem feijão e ervilhas. Os feijões incluem guar, alfarroba, feno-grego, soja, feijão vegetal, feijão frade, feijão mungo, feijão de lima, feijão de fava, lentilhas, grão-de-bico, etc.

[0078] As composições e os métodos da presente invenção podem ser utilizados para reduzir os danos causados por uma ampla variedade de pragas.

[0079] Exemplos da classificação de pragas incluem Lepidoptera (por exemplo, Plutellidae, Noctuidae, Pyralidae, Tortricidae, Lyonetiidae, Carposinidae, Gelechiidae, Crambidae, Arctiidae, e Lymantriidae), Hemiptera (por exemplo, Cicadellidae, Delphacidae, Psyllidae, Aphididae, Aleyrodidae, Orthezidae, Miridae, Tingidae, Pentatomidae, e Lygaiedae), Coleoptera (por exemplo, Scarabaeidae, Elateridae, Coccinellidae, Cerambycidae, Chrysomelidae, e Curculionidae), Diptera (por exemplo, Muscidae, Calliphoridae, Sarcophagidae, Anthomyiidae, Tephritidae, Opomyzoidea, e Carnoidea), Orthoptera (por exemplo, Acrididae, Catantopidae, e Pyrgomorphidae), Thysanoptera (por exemplo, Thripidae, Aeolothripidae, e Merothripidae), Tylenchida (por exemplo, Aphelenchoididae e Neotylechidae), Collembola (por exemplo, Onychiurus e Isotomidae), Acarina (por exemplo, Tetranychidae, Dermanyssidae, Acaridae, e Sarcoptidae), Stylommatophora (por exemplo, Philomycidae e Bradybaenidae), Ascaridida (por exemplo, Ascaridida e Anisakidae), Opisthorchiida, Strigeidida, Blattodea (por exemplo, Blaberidae, Cryptocercidae, e Panesthiidae) e Thysanura (por exemplo, Lepismatidae, Lepidotrichidae, e Nicoletiidae).

[0080] Exemplos das pragas pertencentes a Lepidoptera incluem Chilo suppressalis Walker, Cnaphalocrocis medinalis, Parnara guttata, Sesamia inferens, Mythimna separata, Naranga aenescens Moore, Spodoptera litura, Etiella zinckenella, Etiella behrii, Matsumuraeses falcana, Leguminivora glycinivorella, Pleuroptya naafis, Agrotis segetum, Agrotis ipsilon, Helcystogramma triannulellum, Xestia c-nigrum, Helicoverpa assulta, Helicoverpa armigera, Mamestra brassicae, Spodoptera exigua, Plutella xylostella, Pieris rapae, Pieris brassicae, Hellulla undalis, e Autographa nigrisigna.

[0081] Exemplos das pragas pertencentes a Hemiptera incluem Nilaparvata lugens, Sogatella furcifera, Laodelphax stratella, Nephotettix cincticeps, Recilia dorsalis, Stenotus rubrovittatus, Trigonotylus caelestialium, Leptocorisa chinensis, Nezara antennata, Nezara viridula, Lagynotomus elongatus, Scotinophara lurida, Eysarcoris annamita, Eysarcoris lewisi, Eysarcoris ventralis, Togo hemipterus Scott, Cletus punctiger, Piezodorus hybneri, Halyomorpha halys, Dolycoris baccarum, Neotoxoptera formosana, Rhopalosiphum padi, Rhopalosiphum maidis, e Aphis glycines.

[0082] Exemplos das pragas pertencentes a Coleoptera incluem rice Lissorhoptrus oryzophilus, Oulema oryzae, Echinocnemus squameus, Melanotus legatus, Melanotus fortnumi, Anomala cuprea, Popillia japonica, Maladera castanea, Epilachna varivestis, Paraluperodes nigrobilineatus, Epilachna vigintioctomaculata, Henosepilachna vigintioctopunctata, Harmonia axyridis, Anomala rufocuprea, Anomala testaceipes, Aulacophora indica, e Phyllotreta striolata.

[0083] Exemplos das pragas pertencentes a Diptera incluem Chlorops oryzae, Hydrellia griseola, Sitodiplosis mosellana, Delia platura, Asphondylia yushimai, Melanagromyza sojae, Liriomyza trifolii, Liriomyza sativae, Liriomyza huidobrensis, e Liriomyza bryoniae.

[0084] Exemplos das pragas pertencentes a Orthoptera incluem Oxya yezoensis e Oxya japonica. Exemplos das pragas pertencentes a Thysanoptera incluem Stenchaetothrips biformis e Thrips palmi. Exemplos das pragas pertencentes a Tylenchida incluem Meloidogyne, Nematoda, e Heterodera. Exemplos das pragas pertencentes a Collembola incluem Onchiurus psuedamatus yagii e Onychiurus matsumotoi. Exemplos das pragas pertencentes a Acarina incluem Penthaleus major, Tetranychus urticae, Tetranychus kanzawai, Tyrophagus putrescentiae, e Tarsonemus bilobatus. Exemplos das pragas pertencentes a Stylommatophora incluem Helix e Philomycidae. Exemplos das pragas pertencentes a Ascaridida incluem Ascaris lumbricoide. Exemplos das pragas pertencentes a Opisthorchiida incluem Metagonimus yokogawai. Exemplos das pragas pertencentes a Strigeidida incluem Schistosoma japonicum. Exemplos das pragas pertencentes a Blattodea incluem Blattella germanica, Periplaneta fuliginosa, Periplaneta americana, e Blatta lateralis. Exemplos das pragas pertencentes a Thysanura include Ctenolepisma e Lepisma.

[0085] Em vista das características técnicas da presente invenção e do conhecimento técnico comum neste campo, a cobertura da presente invenção (mais especificamente as pragas para as quais o método de controle de pragas da presente invenção é aplicável) é ampla. Por outro lado, como mostrado nos exemplos abaixo descritos, a eficiência ou eficácia da presente invenção foi confirmada pelos experimentos de Henosepilachna vigintioctopunctata e Harmonia axyridis pertencentes a Coleoptera: Coccinellidae, Oxya yezoensis pertencentes a Orthoptera: Catantopidae, Helicoverpa armigera pertencente para Lepidoptera: Noctuidae e Blatta lateralis pertencentes a Blattodea: Blattidae como insetos de teste. Em consideração ao fato, embora não haja intenção de limitar a cobertura da presente invenção, a presente invenção é, de preferência, aplicada aos insetos pertencentes a Coleoptera, Orthoptera, Lepidoptera ou Blattodea, e mais preferencialmente, aos insetos pertencentes a Coleoptera: Coccinellidae, Orthoptera: Catantopidae, Lepidoptera: Noctuidae, ou Blattodea: Blattidae. Exemplos específicos dos insetos pertencentes a Coleoptera: Coccinellidae incluem Henosepilachna vigintioctopunctata e Harmonia axyridis, e exemplos específicos dos insetos pertencentes a Orthoptera: Catantopidae incluem Oxya yezoensis. Exemplos específicos dos insetos pertencentes a Lepidoptera: Noctuidae incluem Helicoverpa armigera e exemplos específicos dos insetos pertencentes a Blattodea: Blattidae incluem Blatta lateralis.

[0086] Em uma modalidade exemplar, o extrato de guaiúle previne a formação de galhas causadas por nematóides, tais como nematóides de nódulos da raiz e cisto.

[0087] Vantajosamente, ao contrário dos pesticidas convencionais que controlam as pragas por matar, as composições aqui proporcionadas podem, em algumas modalidades, controlar as pragas, regulando as vias de sinalização próprias de uma planta que são tipicamente controladas por auxina e outros hormônios envolvidos em tecidos vegetais, produção de saponinas e outros glicosídeos, bem como o aumento dos pêlos radiculares.

[0088] Em certas modalidades, a invenção em questão protege ataques a plantas que podem ser de natureza biótica ou abiótica. Exemplos não limitantes de ataques bióticos incluem parasitas de plantas, artrópodes, animais, fungos, bactérias, nematóides, répteis, moluscos, escorpiões e vírus. Os ataques abióticos são causados, por exemplo, por mudanças em ambientes físicos que incluem, mas não estão limitados a temperatura, salinidade, exposição à luz, qualidade da água, qualidade do solo e oxidação.

[0089] Exemplos de ensaios demonstraram que o extrato de guaiúle da presente invenção fornece uma base para melhorar o controle de nematóides de cisto, nódulo de raiz e lesão.

[0090] As composições aqui proporcionadas também podem, quando aplicadas em, por exemplo, doses elevadas, aumentar a proteção de plantas secas de pragas tais como, por exemplo, térmitas, brocas de madeira, fungos, bactérias e certas pragas animais comuns à madeira serrada, madeira seca, raízes secas e frutas secas.

[0091] Numa modalidade, a composição do indivíduo melhora a saúde e a produtividade das plantas submetidas ao estresse hídrico.

[0092] A composição da invenção em questão também pode ser usada para induzir floração e/ou florescimento, inclusive em plantas de maconha.

[0093] Em algumas modalidades, as barreiras químicas resultantes da regulação genética conseguidas utilizando as composições e os métodos da presente invenção incluem, mas não estão limitados a compostos antagonistas, tais como fitoalexinas, compostos fumigativos e compostos que podem alterar o sabor, o cheiro e/ou características de feromônio da planta.

[0094] Em certas modalidades, os regulações genéticas e/ou hormônios são eficazes. Inibindo a capacidade de uma praga de encontrar, penetrar e/ou consumir a planta alvo. Além disso, as composições abordadas, compreendendo os extratos abordados e, opcionalmente, outros aditivos derivados naturalmente, podem interferir com a capacidade de uma praga encontrar um companheiro.

[0095] Em algumas modalidades, os ataques exógenos são de natureza abiótica, provenientes de condições físicas extremas que incluem, mas não estão limitadas a mudanças na temperatura, exposição à luz, água, solo e outros fatores que afetam o crescimento da planta alvo.

[0096] Em algumas modalidades, as composições aqui proporcionadas, quer numa formulação seca quer em formulação líquida, são aplicadas como tratamento de sementes ou na superfície do solo.

[0097] Os métodos preferidos incluem a aplicação das composições, aqui proporcionadas, na superfície do solo sem incorporação mecânica. O efeito pesticida da aplicação do solo pode ser ativado por irrigação por chuva, aspersão, inundação ou gotejamento, e, subsequentemente, entregue às pragas alvo, de modo a reduzir os níveis de população para limites aceitáveis. Numa modalidade exemplar, as composições aqui proporcionadas podem ser aplicadas eficientemente através de um sistema de irrigação de pivô central ou com uma pulverização sobre o sulco da semente.

[0098] A referência aqui à administração da composição "em ou perto" de uma praga ou uma planta ou para o "ambiente" de uma praga ou planta significa que a administração é tal que a composição está suficientemente em contato com a praga ou planta de tal modo que o resultado desejado (por exemplo, matar a praga, aumentar a produção, prevenir danos à planta, regular genes e/ou hormônios, etc.).

[0099] O uso do termo "compreendendo", aqui inclui "constindo essencialmente em" e "constindo em". O termo "constindo essencialmente em", como aqui utilizado, limita o escopo dos ingredientes e etapa aos materiais especificados ou etapas e aqueles que o fazem não afetam materialmente a(s) característica(s) básica(s) e inovadora(s) da presente invenção, por exemplo, composições e métodos para promover a saúde das plantas através de hormônios e/ou regulação de genes e/ou controle de pragas.

[00100] Vantajosamente, as composições aqui proporcionadas usando, por exemplo, composições extraídas de arbustos desérticos de plantas de guaiúle, são econômicas, especialmente, quando comparadas com homólogos sintéticos. Por exemplo, com base em evidências atuais e conhecimento das taxas de eficácia e aplicação, para um extrato de baixa concentração de plantas guaiúle, o controle mundial de nematóides de cisto pode ser realizado com vários milhares de hectares de produção de guaiúle.

EXEMPLOS

[00101] Deve ser entendido que os exemplos e as modalidades aqui descritas são apenas para fins ilustrativos e que várias modificações ou alterações à luz do mesmo serão sugeridas por peritos na técnica e devem ser incluídas dentro do escopo e domínio deste pedido.

EXEMPLO 1 -

[00102] Numa modalidade exemplar, um método de extração e embalagem de uma composição para o crescimento da planta e tratamento de defesa, como aqui descrito, inclui as seguintes etapas.

[00103] Primeiro, partes da planta de origem, como raízes ou brotos, são limpas de sujeira excessiva por enxague ou por escovação física, seguido de um tratamento com H2O2 para remover o mofo, se apropriado. As raízes ou brotos da planta fonte são dimensionados com tesouras para encaixar em um triturador, que tritura as partes da planta em um pó. Alternativamente, as partes da planta são molhadas em um ou mais solventes, como água, etanol, propanol, isopropanol, extratos de Quillaja saponaria ou extratos de Yucca schidigera. Em seguida, o pó pode ser armazenado em um recipiente selado e refrigerado.

[00104] Para preparar uma solução de extrato de planta a 10%, adiciona-se 10 g de pó de raiz seca a 90 g de água destilada ou outro solvente, como previsto anteriormente neste Exemplo. Em certas modalidades, 50%, 40%, 25% ou 10% ou menos do solvente total é não aquoso. Outras concentrações podem ser feitas ajustando a massa dos extratos de plantas ao volume total de solvente. Os extratos de plantas e a mistura de solventes podem ser armazenados, cobertos e refrigerados durante 48 horas enquanto se agitam a cada 4 a 6 horas. A mistura é, então, decantada e filtrada através de filtros de papel empilhados (4 filtros/pilha).

[00105] Numa modalidade, o extrato é testado para uma ou mais das atividades aqui descritas. O bagaço da rede da planta pode ser pressionado para obter extratos adicionais de plantas e filtrados através de filtros de papel empilhados (4 filtros/pilha). A solução filtrada, com, opcionalmente, antioxidante adicionado, é, então, colocada em frascos protegidos por UV. É preferível que as garrafas estejam cheias até a borda para excluir o ar na embalagem.

[00106] Para métodos de produção comercial de extrato e processamento foram desenvolvidos para volumes maiores de Guaiúle e outros extratos vegetais, sem o uso de hexanos ou álcoois, mas sim através de processamento de água.

[00107] Um exemplo específico de um método de produção é o seguinte: Etapas da linha de produção do Iso-Extrato: 1. Tempo de colheita de raízes: a qualidade da raiz é experimentada no campo, utilizando uma técnica de amostragem horizontal (por exemplo, a cada 5a filheira e 20 pés (6,1 m) verticalmente), fornecendo 24 amostras de raiz em um campo 400Ft (121 m) X 480 Ft (146 m). As amostras podem ser coletadas, por exemplo, nos meses de fevereiro, maio, agosto e novembro, limpas, trituradas e extrações de amostra produzidas e testadas quanto à presença e quantidade de marcadores químicos especificados. A raiz é colhida quando os marcadores químicos estão presentes nas quantidades especificadas para as formulações. As raízes de tamanho médio são cortadas e removidas. 2. Colheita de raízes: o peso da raiz seca necessária para uma operação de produção é calculado e a superfície para a colheita é determinada. A raiz é colhida com o topo das plantas primeiramente removido e, em seguida, a raiz seca é extraída e empacotada. A quantidade total de raiz de teste seria de cerca de 100 raízes. (96) raízes. De preferência, as plantas não são destruídas por uma amostra. A raiz colhida é, de preferência, armazenada em um celeiro de commodities cobertos até ser processada. 3. Processamento de raiz preliminar: a raiz seca do campo é primeiro limpa em um copo com um enxague de água potável. A água potável é usada para enxaguar, filtrar e voltar a circular, com o material sedimentado periodicamente removido e depositado nos campos circundantes. 4. Dimensionamento preliminar: a raiz seca limpa é transportada para um cortador de calibre preliminar e dimensionada para < 1 polegada (0,0254 m) de comprimento. 5. Trituração molhada: a raiz dimensionada cortada é pesada e, depois, alimentada em um moinho úmido através de uma sonda alimentadora. A água livre de material microbiano é adicionada à sonda alimentadora e a raíz cortada e triturada para um tamanho médio de partícula de menos de 1/16 polegada (1,5875 mm) para produzir uma pasta bombeável. De preferência, as partículas passam por um tamanho de peneira de M de polegada (6,35 mm), 1/8 de polegada (3,175 mm) ou menor. A quantidade de água adicionada pode ser, por exemplo, de cerca de 0,75 (340 g) a 1,5 libras (680 g) de raiz por galão de água. Mais preferencialmente, há cerca de 0,9 (408 g) a cerca de 1,25 libras (567 g) de raiz por galão de água. A água RO sem micróbios pode ser produzida e armazenada no local. A percentagem do extrato como este termo é aqui utilizado (por exemplo, 10% ou 30%) refere-se ao peso da parte da planta (por exemplo, raiz) como uma percentagem do peso da mistura da parte da planta e do solvente (por exemplo, água) que é contatado com a parte da planta. A concentração pode ser, por exemplo, 50%, 40%, 30%, 20%, 10% ou menos, e qualquer porcentagem no meio. De preferência, a concentração é de cerca de 30%. O volume de água medido no tanque do triturador é ligeiramente superior à concentração final procurada. O volume de lascas de raízes é variado de acordo com a idade da safra, a data da colheita, o teor de umidade, o termo de armazenamento, o teste de colorimetro no extrato e outras ferramentas de medição de concentração. 6. Transferência do triturador para Prensa: A pasta de água da raiz é bombeada para uma série de tanques de permanência, e é permitido "assentar" até obter a concentração desejada de componentes ativos. O teor da composição pode ser avaliado usando, por exemplo, um GLC e um espectrômetro de massa. A concentração da composição também pode ser determinada com base na colorimetria e/ou gravidade específica. Quando a composição adequada do Iso- Extrato é alcançada, o teor do(s) tanque(s) de permanência é bombeado para uma prensa rotativa. A prensa rotativa separa a solução Iso-Extratos do bagaço, com a solução, então, bombeada, filtrada e armazenada em um tanque de batelada. A percentagem de sólidos é, de preferência, inferior a 5%, 4%, 3%, 2% ou 1%. Os sólidos do bagaço podem ser transferidos para fora do prédio e utilizados na produção de compostagem. Em modalidades preferidas, sólidos maiores que 16, 24, 32, 40 ou 48 mícrons são removidos. Em outras modalidades preferidas, as partículas que não se encaixam através de uma peneira de ^ polegada (12,7 mm), M de polegada (6,35 mm) ou 1/8 de polegada (3,175 mm) são removidas. 7. Tanque Batelada: A solução de Iso-Extrato pode novamente ser verificada quanto à concentração e composição usando o GLC e o espectrômetro de massa. Se a concentração da solução for muito alta, a água RO sem micróbios é adicionada à solução Iso-Extrato para atingir a concentração desejada. Quando a concentração desejada é atingida, adiciona-se 0,1% de Benzoato de Sódio em peso à solução e a solução é, então, filtrada e bombeada através de filtração para uma série de tanques de armazenamento para uso na eventual produção de formulações. A composição e a concentração armazenada de Iso-Extrato podem ser periodicamente monitoradas para garantir uma manutenção consistente da qualidade. 8. Produção de formulações e engarrafamento: o Iso- Extrato é bombeado dos tanques de armazenamento, para um tanque de mistura de 2500 galões, onde vários aditivos são misturados com o Iso-Extrato, para produzir formulações especificadas. Tais aditivos, são pesados e adicionados manualmente, a solução é continuamente agitada, e depois deixa-se parada no local, conforme necessário. A concentração e a composição da formulação podem ser verificadas com um GLC e um espectrômetro de massa, e quando correto, filtradas e bombeadas para uma estação de carregamento e colocado em recipientes. As formulações podem ser enviadas em recipientes de tamanho de embalagem, ou engarrafados (1 galão (3,78 L) e 2,5 galões (9,46 L) de jarras de estilo F) com um tipo rotativo, 16 dispositivos de enchimento na parte superior, tampado, rotulado e revestido. As caixas são colocadas em uma palete, encolhidas e armazenadas ou enviadas imediatamente. Os aditivos podem ser, por exemplo, nutrientes de plantas, produtos de fertilidade de planta derivado convencionalmente e orgânico e saponinas (agentes de umidificação). 10. Armazenamento e distribuição de produtos: o produto do pacote é colocado em paleta e colocado em inventário para venda. O produto a granel é colocado em sacos de 270 galões. Dependendo do volume produzido, a paleta/sacos podem ser armazenados no local ou transportados para um depósito separado para armazenamento e transporte.

EXEMPLO 2 -

[00108] Os ensaios foram realizados utilizando as composições e métodos aqui proporcionados. Vantajosamente, os resultados foram melhores do que a fumigação com Telone II ou Vapam.

[00109] A eficácia do extrato de guaiúle em nematóides de cistos de beterraba foi demonstrada. Adicionalmente, utilizou-se o mesmo extrato aquoso das raízes de guaiúle para tratar os nematóides do cisto de brócolis. Isso também foi bem-sucedido no aumento da produção das culturas e na supressão do crescimento do nematóide do cisto. O extrato de guaiúle também foi testado em nematóides de nódulos radicais cultivados em tomates, cenouras e melões. Foram observados rendimentos significativos e redução da população de nematóides.

[00110] Além disso, as plantas guaiúle foram semeadas diretamente em fileiras ao lado de um local de teste. Essas fileiras estavam ao lado de plantas de tomate fortemente infestadas dessa época de crescimento. Os nematóides do nódulo da raiz nesta seção foram completamente controlados.

[00111] Devido ao acúmulo de resistência Bt por minhocas de raízes de milho no Centro-Oeste, esse extrato pode ser potencialmente útil para tratar os 100 milhões de acres de milho cultivados nos Estados Unidos e mais.

[00112] Resultados experimentais adicionais demonstraram controle efetivo ou nematóides parasitas, como nematóides de cisto, Heterodear schactii e Heterodera cruciferi em beterraba e plantas de brócolis com benefícios positivos para o rendimento das culturas, a saúde do solo e a recuperação de nematóides benéficos. Vantajosamente, verificou-se que a população de nematóides benéficos aumentava logo após a aplicação das composições da presente invenção.

EXEMPLO 3 -

[00113] Numa modalidade exemplar, uma composição para regular os genes e/ou hormônios da planta alvo compreende um ou mais dos seguintes: ácido acético, ácido abscísico, acc- sintases, acetovalinonas, argentatinas, brassinolas, ácido caféico, campesterol, camfeno, carvacrol, ácido cis- cinâmico, ácido trans-cinâmico, ácido colorgênico, d- limoneno, eugenol, galacto-oligossacarídeo, gemional, guaiacol, guaiulinas, ácidos giberélicos, indol, inulinas, ligninas, iodo, ácido jasmônico, jasmonatos, caempferol, metil éter de caempferol 3, 2-glicosídeo de caempferol, cinetina, limoneno, ácido linoléico, ácido linolênico, lupenos, ácido melavônico, mirceno, naringenina, ácido oleico, ácido palmítico, ácido p-anlSlC, pinenos, pulegonas, qualinas, quercetagetina, quercetinas, ácido quínico, saponinas, ácido salicílico, sanquarinina, ácido esteárico, timol, 6-fosfato de trealose (Tre6P), terpenos, tri- terpenois, turpinas, vanilinas e zeatina. Ácido 3,4- dihidroxidrocinâmico, ácido 3-hidropropiônico juntamente com enzimas de látex/borracha transferase tais como protease de cisteína, aspartato protease, histidina protease e uma ou mais outras proteases derivadas do látex e da borracha da célula do parênquima de Guaiúle. A referência aqui a estas enzimas inclui a indução destas enzimas (ou outras enzimas) na planta como consequência da aplicação da composição em questão). EXEMPLO 4 - ANÁLISE DO EXTRATO DE RAÍZ ISO GUAIÚLE 30% - TOP 30 Compostos Detectados em Leituras de Espectrômetro de Massa

[00114] A composição contém, de preferência, pelo menos 5, 10, 15, 20, 25 ou todos os 30 destes compostos.

EXEMPLO 5 - Controle do Nematóide de Cisto

[00115] O controle do nematóide do cisto foi comparável à fumigação padrão e outros nematicidas de contato.

[00116] Objetivo: Avaliar nematicidas para o controle de nematóides de cistos de beterraba e subsequente crescimento de beterraba.

[00117] Tipo: Controle de nematóides de Cisto.

[00118] Cultivo: Beterraba.

[00119] Variedade: Phoenix, Coronado, Baja, Cortez, SV2013, SV2015, Beta 4521R, Beta 4430R, Beta 8520, e Beta 8617.

[00120] Projeto de lote: bloco aleatório.

[00121] Tamanho do lote: 25' (7,62 m) de comprimento x 3,3' (1 m) largura.

[00122] Repetições: 6.

[00123] Tipo de solo: Argila arenosa.

[00124] Notas sobre o solo: Areia Desértica.

[00125] Método de irrigação: Irrigação por gotejamento.

[00126] Datas principais do evento:

[00127] Informação da aplicação: 1) Controle não tratado UTC; 2) Telone II (1,3-dicloropropeno); 3) Líquido Nimitz; 4) Grânulos de Nimitz; 5) Estimulante (IBA, GA3 e citoquinina, Stoller Enterprises, Houston, TX); 6) Mais pó (cloreto de cálcio e aminoácidos, Stoller Enterprises, Houston, TX); 7) Poder da Raiz (micronutrientes e aminoácidos, Stoller Enterprises, Houston, TX); 8) Semente Resistente Cortez; 9) Semente Resistente SV2013; 10) Semente Resistente a Baja; 11) Semente Resistente Beta 4430R; 12) Semente Resistente Beta 4521R; 13) Semente Resistente Beta 8617; 14) Semente Resistente Beta 8520; 15) LM0624 (agente de umidificação mais aminoácidos, Beem Consulting, Sacramento, CA); 16) GWN 10221 (mistura de produtos biológicos, Gowan, Yuma, AZ); 17) GWN 1535 (Neem, Gowan, Yuma, AZ); 18) GU7812 (extrato GU 30%, Beem Biologics, Sacramento, CA); 19) Semente Resistente SV2015; 20) Transformador (agente de umidificação cítrico e ácido bórico, ORO AGRI, Fresno, CA); e 21) Sementes Resistentes a Coronado.

[00128] Método de Aplicação: Telone II foi injetada como Fumigante no solo 3 semanas antes da plantação. O restante dos tratamentos foi aplicado na parte superior do solo em uma faixa de 1 pé (30,48 cm) em um canteiro de 3,33 pés (101,49 cm) de largura, na plantação e duas semanas depois.

[00129] Notas Taxa de Aplicação: As taxas são baseadas em acre de transmissão, mas foram agrupadas em 40% do canteiro na área central de 1 pé (30,48 cm) sobre a linha de sementes e, posteriormente, no topo da muda emergida duas semanas depois. Portanto, embora as taxas indiquem 1 pt ou 2 pt/acre. A quantidade total de material por acre foi reduzida em 60%. Assim, as quantidades reais de produto utilizado foram inferiores a 1 pt por acre. Foi 5,0 oz (0,14 kg) usado por acre. 2 aplicações seriam 10 oz/A (0,28 kg/a).

[00130] Aplicação de manutenção: o herbicida padrão, a enxada manual e fertilizantes foram utilizados durante o curso deste teste.

[00131] Métodos de avaliação: as beterrabas foram escavadas a mão de cada repetição e analisadas. Para análise, as libras por beterraba foram convertidas em toneladas/acre com base em um espaçamento de 40 polegadas (1,016 m) de fileiras e um espaçamento de 5 polegadas (12,7 cm) na fileira entre beterrabas. As amostras de nematóides foram retiradas de cada repetição e analisadas para juvenis de nematóides de cisto de beterraba.

[00132] Análise estatística: análise de variância (ANOVA) seguida do teste de menor diferença significativa de Fisher.

[00133] Objetivos e Progresso: um teste consistiu em 21 tratamentos em um projeto de blocos completos aleatórios com 6 repetições por tratamento. Um tratamento padrão da Telone II a 9 gpa foi aplicado em 25 de setembro. O ensaio foi plantado e os tratamentos restantes foram aplicados em 16 de outubro, seguido de irrigação no mesmo dia. O tratamento com Telone II, controle não tratado e dez novos produtos foram plantados. Os novos tratamentos do produto foram: LM0624 (agente de umidificação mais aminoácidos, Beem Consulting, Sacramento, CA), GWN 10221 (mistura de produtos biológicos, Gowan, Yuma, AZ), GWN 1535 (Neem, Gowan, Yuma, AZ), GU7812 (GU 30% Beem Biologics, Sacramento, CA), Transformador (agente de umidificação cítrico e ácido bórico, ORO AGRI, Fresno, CA), Estimulante (IBA, GA3 e citoquinina, Stoller Enterprises, Houston, TX), mais pó (Cloreto de cálcio e aminoácidos, Stoller Enterprises, Houston, TX), Pó de raiz (micronutrientes e aminoácidos, Stoller Enterprises, Houston, TX), Nimitz (MCW-2, fluensulfona, ADAMA, Raleigh, NC) e grânulos de Nimitz (MCW- 2, fluensulfona).

[00134] As variedades testadas foram: Phoenix, Coronado, Baja, Cortez, SV2013, SV2015, Beta 4521R, Beta 4430R, Beta 8520, e Beta 8617.

[00135] O ensaio foi colhido em 22 de abril.

[00136] As beterrabas foram escavadas a mão de cada repetição e analisadas. Para análise, as libras por beterraba determinada a partir dos dados laboratoriais de Spreckels para Beterraba limpa foram convertidas em toneladas/acre com base em um espaçamento de 40 polegadas (1,016 m) de fileiras e um espaçamento de 5 polegadas (12,7 cm) de fileiras entre beterrabas. As amostras de nematóides foram retiradas de cada repetição e analisadas para juvenis de nematóides de cisto de beterraba.

[00137] ISO-EXTRATO GU 30% (GU7812) deu a menor redução no nematóide de Cisto e quase o maior aumento no rendimento da Beterraba. O rendimento foi maior que o padrão de fumigação Telone II. (Ver Figuras 1 e 2) Cada figura é a média de 6 repetições. Os meios não seguidos pela mesma letra são significativamente diferentes uns dos outros de acordo com o Teste de Diferença Significativa Protegida de Fisher em P = 0,05 ou 0,10 Cada figura é a média de 6 repetições. Os termos não seguidos pela mesma letra são significativamente diferentes uns dos outros de acordo com o Teste de Diferença Significativa Protegida de Fisher em P = 0,05 ou 0,10.

EXEMPLO 6 - Ensaio em que o Extrato de Guaiúle foi efetivo no Nematóide de Cisto em Beterrabas.

[00138] Neste ensaio, a pressão do Nematóide de Cisto foi extremamente elevada ao cultivar culturas suscetíveis como hospedeiras em rotação durante o mês de inverno por mais de 30 anos.

[00139] Objetivo: Avaliar nematicidas para o controle de nematóides de cistos de beterraba e subsequente crescimento de beterraba açucareira.

[00140] Tipo: Controle de Nematóide;

[00141] Local: Irvine, Califórnia.

[00142] Cultivo: Beterraba.

[00143] Variedade: Phoenix (Suscetível).

[00144] Projeto de lote: bloco aleatório.

[00145] Tamanho do lote: 10' (3,048 m)x 2,5’ (0,762 m).

[00146] Repetições: 5.

[00147] Tipo de solo: Argila arenosa.

[00148] Notas sobre o solo: Areia: 66% Lodo: 21% Argila: 13% Matéria orgânica: 0,60% pH: 7,6 CEC: 0,68 milimhos/cm

[00149] Método de irrigação: Aspersores superiores seguidos por irrigação por gotejamento um mês após a colheita estabelecida.

[00150] Datas principais do evento:

[00151] Tratamentos: 1 Não tratado 2 BG-T 1 pt/a 3 RP-T 1 pt/a 4 RaizeMore-T 2 pt/a 5 BBI GU 10% 1 pt/a 6 BBI GU 10% 3 pt/a 7 LM-2015 1 pt/a 8 Nema-Q 3 pt/a 9 BBI GU 10% & LM 1 + 1 pt/a 10 Terra de diatomácea 30 lb/a (16,60kg/a) 11 Nimitz + BG-T 3,5 + 1 pt/a 12 Nimitz 5 pt/a na plantação 13 Nimitz 5 pt/a pré-plantação 14 Nimitz 3,5 pt/a na plantação 15 Nimitz 3,5 pt/a pré-plantação 16 Telone 9 gpa

[00152] Data da colheita: 29 de outubro.

[00153] Métodos de avaliação: na colheita, foram colhidas e pesadas 5 plantas de cada repetição. Primeira amostra retirada na pré-plantação não tratada para estabelecer presença de população. Todas as repetições testadas em núcleos de colheita, 12, 1 polegada (2,5 cm) de diâmetro por repetição para uma profundidade de 12 polegadas (30 cm).

[00154] Notas de aplicação: as aplicações foram feitas como aplicações de banda na parte superior da linha de sementes em uma faixa de 1 ft (0,304 m) acima do canteiro de 2,5 pés (0,762 m) de centro.

[00155] Análise estatística: análise de variância (ANOVA) seguida do teste de menor diferença significativa de Fisher.

Resumo e Discussão:

[00156] O solo foi mantido altamente infestado com adultos, larvas e ovos de Nematóides de cisto. O ISO EXTRATO GU 10% foi aplicado a 1 pt/Acre e 3 pts/Acre para determinar uma diferença de resposta à dose em comparação com a fumigação Telone II padrão, outros nematicidas químicos e o controle não tratado.

[00157] Além disso, foi introduzida uma combinação de ISO EXTRATO GU 10% com um novo agente de umidificação (LM 2015). ISO EXTRATO GU 10% @ 3 pts/Acre, sozinho, apresentou- se muito bem e foi comparável à formulação GU 30% @ 1 litro/Acre em ensaios anteriores. O GU 10% @ 1 pt/Acre foi 1/3 menor da quantidade de moléculas ativas e não foi suficiente para o rendimento ou o controle de nematóides.

[00158] Em combinação com o novo agente de umidificação (LM 2015), houve um aumento acentuado no rendimento mesmo com GU 10% @ apenas 1 pt/Acre. A combinação de ISO EXTRACT GU 10% @ a 1 pt/Acre + o agente de umidificação foi comparável a GU 10% @ 3 pts/Acre para reduzir o nematóide de Cisto e aumentar o rendimento. Veja também as Figuras 3, 4 e 5.

EXEMPLO 7 - Extrato de raiz de Guaiúle para o controle do nematóide de nódulo de raiz (Meloidogyne javanica)

[00159] O nematóide de nódulo de raiz é aumentado para crescer durante o inverno suave em uma cultura susceptível de manter um nível artificialmente alto de ovos e larvas juvenis para o teste.

[00160] Tipo: Controle de nematoide;

[00161] Localização: Irvine;

[00162] Cultivo: cenoura;

[00163] Variedade: Imperator;

[00164] Projeto de lote: bloco aleatório;

[00165] Tamanho de lote: 20'(6,096 m)x 2,5’ (0,762 m);

[00166] Repetições: 5;

[00167] Tipo de solo: Argila Arenosa;

[00168] Método de irrigação: Irrigação por gotejamento;

[00169] Datas principais do evento:

[00170] Informação da aplicação: 1) Controle não tratado UTC 2) BG-T 3) RP-T 4) RaizeMore-T 5) BASC-15-10 6) LM-2015 7) Nema-Q 8) Terra diatomácea 9) Nimitz CE 10) Telone II (Veja Tabelas para taxas)

[00171] Data da colheita: 12 de novembro.

[00172] Métodos de avaliação: na colheita, foram colhidas três pés (0,91 metros) de fileira de cada repetição e classificadas em 4 categorias: 1) comercializável sem dano de nematóides, 2) comercializável com dano de nematóides, 3) não comercializável com dano de nematóide e 4) não comercializável sem danos de nematóides. Primeira amostra retirada na pré-plantação não tratada para estabelecer presença de população. Todas as repetições amostradas na colheita, núcleos de 12, 1 polegada (2,5 cm) de diâmetro por repetição para uma profundidade de 12 polegadas (30 cm).

[00173] Análise estatística: análise de variância (ANOVA) seguida do teste de menor diferença significativa de Fisher.

[00174] Resultados: Tabela 5. Numericamente comparado ao não tratado, *BASC-15- 10 a 3 pt/a, LM-2015 e a Telone teve um número total maior e peso de cenouras. BG-T e Nimitz + BG-T tiveram um número maior de cenouras do que não tratadas. BASC-15-10&LM teve um peso maior de cenouras. Em P = 0,05, Telone teve um peso maior de cenouras. Veja também a Figura 6. Tabela 6. Numericamente, BG-T, RP-T, *BASC-15-10 3 pt/ac, LM-2015, BASC-15-10&LM, Nimitz+BG-T e Telone tiveram um número e peso maiores de comercializáveis de Cenouras sem dano de nematóides do que não tratadas. RaizeMore-T teve um número maior de cenouras comercializáveis sem dano de nematóides do que não tratadas. Em P = 0,05, Telone teve um peso maior de cenouras comercializáveis sem dano de nematóide do que não tratada. Veja também as Figuras 7 e 8. * BASC-15-10 é código para GU 10% para Carrot Trial

EXEMPLO - 8 Atividade contra o nematóide Citrus

[00175] A atividade enzimática contra uma única muda de nematóides Citrus Tylenchulus semipenetrans colocada em areia em um recipiente perfurado e colocada em solo para determinar a eficácia dessa enzima no estágio de nematóide juvenil de pele protéica nua durante um período de muda de 7 dias.

[00176] Informação da aplicação: a.) Iso Extrato, 30% 1 ml + 249 ml H2O = 250 ml de solução. b.) Iso Extrato 30% 5 ml + 245 ml H2O = 250 ml de solução. c.) Iso Extrato 30% 25 ml +225 ml H2O = 250 ml de solução. d.) H2O não tratada = apenas 250 ml de água.

[00177] Notavelmente, todas as doses foram eficazes e funcionaram bem na porção da população durante a muda. Veja a Figura 9.

EXEMPLO 10 - ISO EXTRATO 10% Eficácia em ninfas de cigarrinhas de uva e tripes de flores ocidentais

[00178] A eficácia foi estatisticamente significante para ninfas de cigarrinhas, bem como adultos e ninfas de WT Tripes.

[00179] Objetivo: Determinar a eficácia do ISSO Extrato GU 10% em cigarrinhas de uvas de vinho & Tripes de flor ocidental.

[00180] Tipo: Controle de cigarrinhas.

[00181] Local: Lodi, Califórnia, EUA.

[00182] Cultivo: Uva de vinho.

[00183] Variedade: Old Vine Zinfandel.

[00184] Projeto de lote: bloco aleatório.

[00185] Tamanho do Lote: Três Videiras.

[00186] Repetições: 6 Repetições por tratamento ou Controle não tratado, 5 x 6 Repetições = 30 x 3 repetições de videira.

[00187] Tipo de solo: Argila arenosa - Encostas Íngrimes de Hanford.

[00188] Notas sobre o solo: 0-2% Inclinação &> 0,1% OM.

[00189] Método de irrigação: Irrigação por gotejamento @ 0,5GPH no ciclo de funcionamento de 12 horas.

[00190] Datas principais do evento:

[00191] Informação da aplicação: 1) Controle não tratado UTC; 2) Admire Pro @ 1,5oz/Acre (0,04 kg/Acre); 3) ISO Extrato GU 10% @ 1pt/Acre (1250 ppm vol./vol); 4) ISO Extrato GU 10% @ 2pt/Acre (2500 ppm vol./vol); 5) ISO Extrato GU 10% @ 3pt/Acre (5000 ppm vol./vol).

[00192] Método de aplicação: Pulverizador Airblast Backpack @ 15 litros por tratamento calculado para pulverização 100GPA.

[00193] Notas de Taxa de Aplicação: Aplicação pós- colheita, Cultivador deixou as pragas de folha irem após a colheita, então cigarrinha e Tripes aumentaram acentuadamente.

[00194] Aplicação de Manutenção: Pulverizações de Mofo em pó na estação, mas não após a colheita.

[00195] Data de colheita: 26 de agosto. Não foram utilizados pesticidas 10 dias antes da colheita, ou a qualquer momento depois da colheita nesta videira.

[00196] Métodos de avaliação: no campo, as comparações foram feitas entre a Controle não tratado e 4 tratamentos para determinar o dano geral e a densidade populacional, contando a remoção de 5 folhas por lote/colocação em uma bolsa de papel e a avaliação das folhas dentro de uma hora com um escopo de dissecação. As contagens foram feitas de presença de cigarrinhas de uva jovens móveis; adultos e jovens móveis de tripes de flores ocidentais, também.

[00197] Análise estatística: Programa ARM Versão 8.0 (última versão 21 de abril de 2013) Teste de faixa múltiplo de Duncans, (p = 0,05)

[00198] Resultados e Discussão: Os ingredientes ativos deste ISO Extrato têm um impacto dramático, como demonstrado neste ensaio para a atividade knockdown, sobre pragas de insetos de mudas. Veja as Figuras 10 e 11.

[00199] Cigarrinhas de uva e Tripes da flor ocidental são duas das pragas mais significativas nas uvas por ano. A avaliação foi realizada por um pesquisador de quase 40 anos na Vineyard Management. O ISO Extrato não só afetou os insetos da uva quando muda, mas pareceu seguro para abelhas e vespas de forrageamento adultos. Após uma forte precipitação e geada logo após a primeira avaliação, o produto apareceu, pela observação do Pesquisador, para manter a ferida de gelo nas videiras por vários dias ou uma semana de duração.

EXEMPLO 10 - Efeito de Regulação de Crescimento de Insetos (Efeito Enzimático da Pele de Proteína de Ninfas de Cigarrinhas de Uva)

[00200] Objetivo: Determinar a eficácia do ISO Extrato GQB 23% em Cigarrinha de uva de vinho e outras pragas de corpo macio.

[00201] Tipo: Controle de Cigarrinhas.

[00202] Cultivo: Uva de vinho.

[00203] Variedade: Syrah.

[00204] Projeto de lote: bloco aleatório.

[00205] Tamanho de lote: 12'(3,65 m)x 2,5’ (0,762 m).

[00206] Repetições: 8 videiras de uva simples repetidas por controle não tratado ou tratamento.

[00207] Tipo de solo: Argila sedimentosa.

[00208] Notas sobre o solo: o solo estava moderadamente úmido, mas mais seco do que o normal.

[00209] Método de irrigação: Irrigação por gotejamento.

[00210] Datas principais do evento:

[00211] Informação da aplicação: 1 .) Controle não tratado UTC 2 .) ISO Extrato BBI GQB 23% @ 1pt/Acre

[00212] Método de aplicação: Pulverizador pressurizado portátil.

[00213] Notas de Taxa de Aplicação: Ponta de bocal ajustável de cone oco. Pulverizado para escoamento em ambos os lados das folhas.

[00214] Métodos de avaliação: as amostras de folhas foram coletadas e ensacadas 21 dias após a aplicação para evitar a evacuação de cigarrinhas vivas. As folhas foram observadas sob um microscópio de zoom e uma contagem total de cigarrinhas vivas e mortas foi tomada.

[00215] Notas de aplicação: Deve-se notar que a cobertura da folha inteira é preferida para obter o melhor efeito de contato com as pragas. Ninfas de cigarrinhas e Tripe Adulto WF e ninfas passam a maior parte do tempo na parte inferior das folhas.

[00216] Análise estatística: Programa ARM Versão 8.0 (última versão 21 de abril de 2013) Teste de faixa múltipla de Duncans (P = 0,05)

[00217] Resultados: EXTRATO GQB 23% é uma mistura de três extratos sinérgicos baseados em plantas. Especificamente GQB é a formulação de Guaiúle 10%, Quillaja 10% e Brassinole 3%.

[00218] A aplicação deste produto não só teve um resíduo de 3 semanas para o controle de cigarrinhas de uva, mas também não era prejudicial aos ovos do predador benéfico Green Lacewing.

[00219] Os efeitos adicionais incluíram redução dramática no dano das folhas da cigarrinha da uva das partes do bocal sugador de pragas, com apenas uma aplicação. Também uma circunferência consistentemente maior das canas, folhas mais verdes e alongamento das canas de uva. Veja a Figura 12.

EXEMPLO 11 - Efeito Bioestimulante/Hormônio da plantarelacionado aos ingredientes ativos da raiz da planta de Guaiúle aplicada como uma drenagem de solo em vasos de estufa com semente de milho plantada.

[00220] ISO EXTRATO 10% (extrato de raiz Guaiúle 10%) aumentou os comprimentos dos raios, os comprimentos das raízes, a área da superfície da raiz e as pontas de raízes laterais.

[00221] Objetivo: Determinar os efeitos dos extratos no milho de campo.

[00222] Tipo: Estudo PGR.

[00223] Cultivo: milho de campo híbrido.

[00224] Variedade: 32B10.

[00225] Projeto de lote: bloco aleatório.

[00226] Tamanho do lote: Pote de Plástico Preto 8" (20,32 cm).

[00227] Repetições: 12 para 15 tratamentos e controle não tratado.

[00228] Tipo de solo: mistura de areia de grão médio e envasamento.

[00229] Notas sobre o solo:

[00230] Método de irrigação: Irrigação manual usando uma lata de água ou um acessório de mangueira de aspersão da parte superior.

[00231] Datas principais do evento:

[00232] Informação da aplicação: 1) Controle não tratado (somente controle de água) 2) ISO EXTRATO 10% 1 ml 3) ISO EXTRATO 10% 2ml 4) Yucca Ag Aide 50% 1 ml 5) Yucca Ag Aide 50% 2 ml 6) QL Agri 35% 1 ml 7) QL Agri 35% 2 ml 8) ISO 10% + Yucca 50% 1 ml 9) ISO 10% + QL 35% 1ml 10) Yucca 50% + QL 35% 1ml 11) ISO 10% + Yucca 50% 2 ml 12) ISO 10% + QL 35% 2 ml 13) Yucca 50% + QL 35% 2 ml 14) ISO 10% + Y50% + QL35% 1,5 ml 15) Estimulante 2 ml

[00233] Método de aplicação: Aplicado pela seringa no topo do solo como 10 ml de solução por repetição.

[00234] Data da colheita: 3/21.

[00235] Métodos de avaliação: medições de broto e raiz tomadas com régua usando incrementos de centímetro. Broto avaliado quanto ao comprimento total da semente à ponta. As raízes avaliadas como Radícula, Seminal e Nodal para comprimento em centímetros e contagem para raízes nodais.

[00236] Análise estatística: Programa ARM Versão 8.0 (última versão 21 de abril de 2013) Teste de alcance múltiplo de Duncans.

[00237] Os resultados foram favoráveis, como pode ser visto nas Figuras 13-17.

EXEMPLO 12 - ISO EXTRATO 10% (Extrato de raiz Guaiúle 10%) aplicado como uma drenagem de solo sobre sementes de algodão plantadas em estufa.

[00238] Objetivo: crescimento de plantas e raízes.

[00239] Tipo: Ensaio de Bioestimulante PGR.

[00240] Cultivo: Algodão.

[00241] Variedade: DP1216B2RF.

[00242] Projeto de lote: 12 tratamentos e um controle não tratado, 12 repetições/tratamento.

[00243] Tamanho do lote: estufa 18 oz (0,51 kg) lotes.

[00244] Repetições: 12 Repetições por tratamento.

[00245] Tipo de solo: Areia.

[00246] Notas sobre o solo:

[00247] Método de irrigação: Irrigação com Micro aspersor.

[00248] Datas princ ipais do evento: Data de plantação 4/28 (Planta em potes de 18" (38,1cm) de estufa) Data de tratamento 5/4 (10 ml de solução) Primeira avaliação 5/18 (Raiz, medições de broto, matéria seca, porcentagem de umidade) Segunda avaliação 6/10 (Raiz, medições de broto, matéria seca, porcentagem de umidade)

[00249] Informação da aplicação: 1) Controle não tratado UTC 2) Extrato ISO 10% 1000 PPM 3) Extrato ISO 10% 2000 PPM 4) Extrato ISO 10% 3000 PPM 5) Yucca 50 % 1000 PPM 6) Yucca 50 % 2000 PPM 7) Yucca 50 % 3000 PPM 8) Quillaya 1000 PPM 9) Quillaya 2000 PPM 10) Quillaya 3000 PPM 11) ISO10% + Yucca 1000 + 1000 PPM 12) ISO10% + Quillaya 1000 + 1000 PPM 13) Yucca + Quillaya 1000 + 1000 PPM

[00250] Método de Aplicação: Aplicado como 10 ml de drenagem por tratamento.

[00251] Data de avaliação: sete dias após o tratamento e 14 dias após o tratamento.

[00252] Métodos de avaliação: plantados em areia, potes de 18 onças (0,51 kg). A areia era o meio crescente com uma meia polegada de solo para germinação de sementes. A irrigação foi aplicada através de micro-aspersores 14GPH por um total de 5 minutos por dia. A primeira avaliação ocorreu 14 dias após o tratamento e a segunda avaliação ocorreu 21 dias após o tratamento. Nutrição vegetal - líquido 12-4-8, 20 ml/semana (areia).

[00253] Análise estatística: Programa ARM Versão 8.0 (última versão 21 de abril de 2013) Teste de alcance múltiplo de Duncans.

[00254] Os resultados favoráveis podem ser vistos nas Figuras 18 e 19.

EXEMPLO 13 - O ensaio foi realizado como um foliar em vez de tratamento de sementes ou aplicação de drenagem de solo em um ambiente de estufa.

[00255] Objetivo: crescimento de flores/brotos, plantas e raízes.

[00256] Colheita: Vinca Comercial.

[00257] Variedade: híbrido

[00258] Projeto de lote: 5 tratamentos e um Controle não tratado - Total de 6 tratamentos.

[00259] Tamanho do lote: Lotes de 1 galão (3,78 L) de estufa.

[00260] Repetições: 12 Repetições por tratamento.

[00261] Tipo de solo: Areia.

[00262] Método de irrigação: irrigação por micro aspersão 14GPH

[00263] Datas principais do evento: Data de transplantação 7/1 Primeiro tratamento 7/5 Segundo tratamento 7/12 Data de avaliação 7/28 Primeira avaliação 7/28

[00264] Informação da aplicação: 1) Controle não tratado UTC 2) ISO Extrato 10% 1000 Foliar PPM 3) ISO Extrato 10% 2000 Foliar PPM 4) ISO Extrato 10% 3000 Foliar PPM 5) ISO Extrato 10% 1000 Foliar PPM +1000 RootApp PPM 6) ISO Extrato 10% 2000 Foliar PPM +2000 RootApp PPM

[00265] Método de Aplicação: Aplicado como Tratamentos 1-4 de pulverizador foliar. Tratamentos 5 e 6 Pulverização Foliar mais Drenagem, tratamentos, 10 ml por planta destes dois tratamentos.

[00266] Métodos de avaliação: transplantados para areia, potes de 1 galão (3,78 L). A areia era o meio crescente com um. 24 de solo para germinação de sementes. A irrigação foi aplicada através de micro-aspersores 14GPH por um total de 5 minutos por dia. A primeira avaliação ocorreu 14 dias após o tratamento e a segunda avaliação ocorreu 21 dias após o tratamento. Nutrição vegetal - líquido 12-4-8, 20 ml/semana (areia).

[00267] Notas de aplicação: Tratamento de pulverização foliar/ Vinca de drenagem de raiz.

[00268] Análise estatística: Programa ARM Versão 8.0 (última versão 21 de abril de 2013) Teste de alcance múltiplo de Duncans.

[00269] Resumo e Discussão: As taxas de tratamento de sementes do ISO EXTRATO 10% podem ser feitas em, por exemplo, 0,5 oz (0,014 kg), 1 oz (0,02 kg), 2 oz (0,056 kg) ou 3 oz (0,085 kg)/100 libras (45 kg) de semente. Os tratamentos de drenagem podem ser feitos, por exemplo, 1, 2 ou 3 ml de ISO EXTRATO 10% sobre a semente plantada ou, no caso de pimentas e tomates, drenar nas raízes. Aumentos significativos no desenvolvimento da raiz e no desenvolvimento do broto, bem como o peso fresco ou seco, raízes, brotos e ou plantas inteiras ocorreram. As plantas de Vinca foram tratadas com um tratamento foliar de 1, 2 ou 3 ml/litro de água (1000, 2000 ou 3000 ppm vol/vol). Aplicações foliares e de solo foram realizadas ao mesmo tempo em dois tratamentos. As vias de hormônio vegetal e açúcar são diferentes no sistema radicular e na parte superior da planta. Mais auxinas na parte superior e mais citocininas nas raízes, como um exemplo simples de diferenças hormônios, bem como movimento de açúcares durante estágios vegetativos vs quando as pastilhas de frutas estão crescendo na parte superior da planta. Na Vinca, a combinação de 1000 ppm foi aplicada duas vezes às partes superiores e 1000 ppm aplicadas duas vezes às raízes nos mesmos dias (1° dia e 2 semanas depois), depois avaliadas duas semanas após a segunda aplicação. Isso nos diz algo sobre o potencial uso do produto no campo para frutificar vegetais e árvores, vagens de soja, grãos de milho e plantas ornamentais que florescem. Onde realizamos as aplicações foliar de 1000, 2000 ou 3000 ppm, a resposta de dose clássica de um Regulador de Crescimento de Plantas ou BioStimulante foi obtida, por exemplo, o aumento de flores foi de 28%, 85% e 36% mostrando o aumento típico do que diminuir, mas ainda melhor do que não tratada. Isso é conhecido como o efeito triplo. Acoplando esta resposta com as aplicações do solo, que aumentam a eficácia do sistema de raízes ao mesmo tempo em que atinge 200% + quando o solo e as aplicações superiores são combinadas. As taxas podem ser reduzidas se desejado ao tratar o solo e os cumes combinados.

[00270] Os resultados favoráveis podem ser vistos nas Figuras 20-23.

EXEMPLO 14 - Aplicação foliar de ensaios comerciais duplicados de milho doce.

[00271] O teste demonstrou o potencial com tempo adequado na planta de milho em V-3, V-5 e Tassel para aumentar o rendimento e o tamanho de grãos sem perda de tamanho de cobb de milho.

[00272] Objetivo: Determinar o impacto de aplicações de 1 e 2 pts/Acre na estação no milho doce.

[00273] Tipo: Bioestimulante Planta/Regulator de crescimento de Planta (Produção de milho doce).

[00274] Colheita: milho doce.

[00275] Variedade: 3674.

[00276] Projeto de lote: bloco aleatório.

[00277] Tamanho do lote: 30' (9,14 m)x 66' (20,11 m).

[00278] Repetições: 6.

[00279] Notas sobre o solo: a umidade do solo foi boa ao longo da estação de crescimento.

[00280] Método de irrigação: irrigação superficial/sulco.

[00281] Datas principais do evento:

[00282] Informação da aplicação: 1) Controle não tratado UTC 2) BBI ISO EXTRATO GU 10% 1pt/Acre 40 galões de água 3) BBI ISO EXTRATO GU 10% 2pt/Acre 40 galões de água

[00283] Método de Aplicação: Pulverizador Backpack CO2 @ 40psi calculado para pulverizar 40 galões por Acre.

[00284] Notas de Taxa de aplicação: Não foram observados efeitos adversos (fitotóxicos) a partir de aplicações do ISO EXTRATO GU 10%.

[00285] Data da colheita: 10 de outubro.

[00286] Métodos de avaliação: área de lote total colhida manualmente, circunferência da medição, comprimento e peso individual das orelhas.

[00287] Análise estatística: Programa ARM Versão 8.0 (última versão 21 de abril de 2013) Teste de alcance múltiplo de Duncans;

[00288] Resultados e Discussão: O ensaio foi conduzido na região de crescimento de milho doce do Norte de San Joaquin Valley da Califórnia. ISO EXTRATO GU 10% foi efetivo no aumento do rendimento total e do perímetro de espiga de milho, que aumentou o peso além de mais espiga por lote. O tempo de aplicação foi conveniente e se encaixou nas práticas culturais com pulverizações para herbicidas e inseticidas e miticidas. O fato de haver e aumentar para ambas as taxas e ainda não significativamente maior com a taxa de 2 pt, confirma pesquisa anterior onde a resposta de dose para o ISO EXTRATO GU 10% foi efetiva em 8 oz (0,22 kg) -2 pts/Acre, mas não em taxas mais elevadas. Este é o efeito típico do Hormônio do Crescimento das Plantas quando aplicações exógenas de Reguladores de Crescimento de Plantas são aplicadas, é o que é conhecido como o "efeito triplo". Isso começa com o aumento da resposta à dose, então um nivelamento do efeito (como altura da planta, tamanho do fruto, comprimento da raiz) e, finalmente, um reverso. O aumento de rendimento superior a 15% em relação ao controle não tratado é considerado bastante bom para o aumento da produção de milho doce por acre.

[00289] Vantajosamente, esses componentes são naturalmente derivados de uma ou mais plantas e, em conjunto, servem para regular o mecanismo de crescimento e defesa da planta alvo, melhorar os efeitos antioxidantes da planta e controlar o transporte de hormônios vegetais. Veja as Figuras 24 e 25.

[00290] Todas as patentes, pedidos de patente, pedidos provisórios e publicações referidas ou citadas aqui são incorporadas por referência na sua totalidade, incluindo todas as figuras e tabelas, na medida em que não sejam incompatíveis com os ensinamentos explícitos deste pedido.

[00291] Deve ser entendido que os exemplos e as modalidades aqui descritos são apenas para fins ilustrativos e várias modificações ou alterações à luz do mesmo serão sugeridas para peritos na técnica e devem ser incluídas dentro do escopo e domínio deste pedido. REFERÊNCIAS Abbott, Derek A., de Hulster, Erik, Duong, Giang- Huong, Pronk, Jack T., Suir, Erwin, and van Maris, Antonius J.A.. Catalase Overexpression Reduces Lactic Acid-Induced Oxidative Stress in Saccharomyces cerevisiae Appl. Environ Microbiol 2009 Apr 27;75(8):2320-5. Epub 2009 Feb 27. 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Claims (4)

1. Método para reduzir o dano causado a uma planta alvo viva por uma praga agrícola, caracterizado pelo fato de que o referido método compreende administrar à referida praga, à referida planta ou ao ambiente da referida praga e/ou à planta, uma quantidade eficaz da composição produzida pela extração de uma composição aquosa bioativa de uma planta de guaiúle (Parthenium argentatum Gray), compreendendo as etapas de: separar as raízes do resto da planta; moer as raízes até um tamanho de M de polegada ou menos; extrair apenas as raízes moídas, colocando-as em água; e remover as raízes moídas da água, obtendo assim a composição aquosa bioativa, em que a referida planta alvo viva e produto derivado da planta são selecionados de culturas de fileiras, culturas de campo, culturas de árvores, culturas cítricas, culturas frutíferas, culturas de relva, culturas ornamentais, culturas vegetais e videiras, e a referida praga é selecionada de nematóides e insetos.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que 0,34 a 0,68 kg de raiz são usados por 3,79 * 10-2 m3 de água durante o processo de extração, e em que 0,24 a 2,37 * 10-2 m3 da composição são aplicados por 10.000 m2.

3. Método para melhorar o rendimento comercializável de uma planta caracterizado pelo fato de que o referido método compreende administrar à referida planta viva e produto derivado da planta, ou ao ambiente da referida planta viva e produto derivado da planta, uma composição produzida pela extração de uma composição aquosa bioativa de uma planta de guaiúle (Parthenium argentatum Gray), compreendendo as etapas de: separar as raízes do resto da planta; moer as raízes até um tamanho de M de polegada ou menos; extrair apenas as raízes moídas, colocando-as em água; e remover as raízes moídas da água, obtendo assim a composição aquosa bioativa, em que a referida planta viva alvo e o produto derivado da planta são selecionados a partir de culturas de fileiras, culturas de campo, culturas de árvores, culturas cítricas, culturas frutíferas, culturas de relva, culturas ornamentais, culturas vegetais e videiras.

4. Método, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a composição é aplicada tanto no solo próximo da planta como à folhagem da planta.