KR20230012463A - 진균 병원체를 억제하기 위한 조성물 및 방법 - Google Patents
진균 병원체를 억제하기 위한 조성물 및 방법 Download PDFInfo
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Abstract
진균의 성장을 제어하는 방법 및 조성물이 제공된다.
Description
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 하기 미국 가출원 번호: 2020년 3월 4일 출원된 62/984,956, 2020년 3월 20일에 출원된 62/992,364, 및 2020년 11월 6일에 출원된 63/110,517의 이익을 주장하며, 상기 미국 가출원의 전체 내용은 여기에 참조로 포함된다.
발명의 배경
질병의 압박이 전 세계적으로 경제적으로 의미 있는 영향을 미치는 산업적 농업의 규모에서, 병원체 내성(pathogen resistance)의 사례가 증가하고 토양 건강, 환경 및 인간 건강에 해로운 영향을 미치면서, 계속해서 농약의 선택을 좁히는 것이 적용되어 오고 있다. 농업상의 질병을 통제하는 보다 지속 가능한 방법을 개발하기 위한 노력이 있었다. 그러나 이 방법은 구현하기 어렵거나 예측할 수 없는 결과를 낳는다. 예를 들어, 혐기성 토양 소독(ASD: anaerobic soil disinfestation)은 일관성 없는 결과를 특징으로 하며, 규모와 비용면에서 엄두도 못 낼 정도이기 때문에, 상업적 규모의 농업에서 최적화하거나 적용할 기회를 제한한다.
따라서, 식물의 건강을 효과적이고 경제적으로 촉진하고 세계 식량 생산 및 식물 건강에 해로운 영향을 미치는 병원체의 성장을 제어 및/또는 완화하기 위한 안전하고 환경 친화적인 조성물 및 방법의 개발이 여전히 필요하다.
하기에 기재된 바와 같이, 본 발명은 락테이트 및 아세테이트를 포함하는 조성물 및 진균 병원체(예를 들어, 보트리티스 키네레아(Botrytis cinerea), 콜레토트리쿰 아쿠타툼(Colletotrichum acutatum), 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이(Fusarium oxysporum f. sp. fragariae), 마크로포미나 파세올리나(Macrophomina phaseolina), 피토프토라 칵토룸(Phytophthora cactorum), 피티움 운키눌라툼(Pythium uncinulatum), 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani), 스클레로티니아 미노르(Sclerotinia minor), 스클레로티움 케피보룸(Sclerotium cepivorum), 스클레로티니아 스크레로티오룸(Sclerotinia sclerotiorum), 또는 베르티킬리움 달리아(Verticillium dahlia))의 성장을 억제하기 위해 그 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다. 한 측면에서, 본 발명은 좌선성 락테이트(L-락테이트) 및 아세테이트를 함유하는 조성물을 특징으로 하며, 상기 조성물은 우선성 락테이트(D-락테이트)를 실질적으로 함유하지 않는다.
한 측면에서, 본 발명은 식용 작물, 관상용 식물, 나무 또는 잔디를 재배하는 동안 토양을 제조하고/하거나 식물 표면을 보호하는 방법을 특징으로 한다. 이 방법은 토양 및/또는 식물 표면을 L-락테이트 및 아세테이트를 함유하는 조성물과 접촉시켜 토양을 제조하고/하거나 식물을 보호하는 단계를 포함한다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 각각의 L-락테이트 및 아세테이트의 양은 조성물과 접촉된 진균 병원체의 성장 또는 생존을 억제하는데 유효하다. 임의의 상기 실시양태에서, 조성물은 담체를 추가로 함유한다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 조성물은 약 50 ppm∼약 1,600 ppm L-락테이트 및 약 50 ppm∼약 1,600 ppm 아세테이트를 함유한다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 조성물은 약 400 ppm 이상의 L-락테이트 및 약 400 ppm 이상의 아세테이트를 함유한다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 조성물은 약 800 ppm 이상의 L-락테이트 및 약 800 ppm 이상의 아세테이트를 함유한다.
한 측면에서, 본 발명은 진균의 성장을 감소 또는 제거하는 방법을 특징으로 한다. 이 방법은 진균을 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉시켜 진균의 성장을 감소시키거나 제거하는 단계를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 식용 작물, 관상용 식물, 나무 또는 잔디에서 진균 질병(fungal disease)을 억제하는 방법을 특징으로 한다. 이 방법은 진균을 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉시켜 진균 질병을 억제하는 단계를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 알리움(Allium) 식물 및/또는 알리움 성장 배지에서 백색 부패(white rot)를 억제하는 방법을 특징으로 한다. 이 방법은 알리움 식물 및/또는 성장 배지를 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉시켜 알리움 식물 및/또는 알리움 성장 배지에서 백색 부패를 억제하는 단계를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 식물 또는 성장 배지에서 회색 곰팡이(gray mold)를 억제하는 방법을 특징으로 한다. 이 방법은 식물 또는 성장 배지를 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉시켜 회색 곰팡이를 억제하는 단계를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 L-락테이트 및 아세테이트를 함유하는 식물 성장 배지를 특징으로 하며, 상기 식물 성장 배지는 우선성 락테이트(D-락테이트)를 실질적으로 함유하지 않는다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 식물은 알리움 속(Allium genus)에 속한다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 식물은 알리움 사티붐(Allium sativum), 알리움 케파(Allium cepa), 알리움 차이넨스(Allium chinense), 알리움 스티피타툼(Allium stipitatum), 알리움 스코에노프라숨(Allium schoenoprasum), 알리움 투베로숨(Allium tuberosum), 알리움 피스툴로숨(Allium fistulosum), 또는 알리움 암펠로프라숨(Allium ampeloprasum)이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 하기 중 하나 이상으로부터 선택된 속(genus)에 속한다: 보트리티스(Botrytis), 콜레토트리쿰(Colletotrichum), 푸사리움(Fusarium), 마크로포미나(Macrophomina), 피토프토라(Phytophthora), 피티움(Pythium), 리족토니아(Rhizoctonia), 스클레로티니아(Sclerotinia), 스클레로티니아케아이(Sclerotiniaceae), 스클레로티움(Sclerotium), 및 베르티킬리움(Verticillium). 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 스클레로티움 케피보룸이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 피토프토라 칵토룸이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 보트리티스 키네레아이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 콜레토트리쿰 아쿠타툼이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 마크로포미나 파세올리나이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 피티움 운키눌라툼이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 리족토니아 솔라니이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 스클레로티니아 미노르이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 스클레로티움 케피보룸이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 스클레로티니아 스클레로티오룸이다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 베르티킬리움 달리아이다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 토양 또는 다른 성장 배지 중에 존재한다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 식물의 지상에 존재한다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 상기 방법은 토양 중에서 진균 성장 속도를 감소시킨다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 상기 방법은 식물 상에서 진균 성장 속도를 감소시킨다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 접촉은 스프링클러의 사용, 분무, 점적(dripping) 또는 관주(drenching)를 포함한다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 토양 중에 존재하며 토양 관주에 의해 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉된다. 상기 측면 중 어느 하나에서, 진균은 식물 상에 존재하고 스프레이 병, 분무기, 노즐, 스프링클러 또는 드립 라인으로부터의 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉된다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 접촉 후, 토양 또는 성장 배지 중 및/또는 식물 상의 L-락테이트의 농도는 약 40 ppm∼약 5000 ppm이고, 토양 또는 성장 배지 중 아세테이트의 농도는 약 50 ppm∼약 5000 ppm이다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 접촉 후, 식물 표면 또는 토양은 약 1:6∼약 6:1의 중량비(락테이트:아세테이트)로 L-락테이트 및 아세테이트를 함유한다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 성장 배지는 생존 가능한 병원성 진균을 실질적으로 포함하지 않는다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 성장 배지는 액체 또는 고체이다.
상기 측면 중 어느 하나에서, 성장 배지는 화분용 토양이다.
본 발명은 진균 병원체(예를 들어, 보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 피티움 운키눌라툼, 리족토니아 솔라니, 스클레로티니아 미노르, 스클레로티움 케피보룸, 스클레로티니아 스클레로티오룸, 또는 베르티킬리움 달리아이)의 성장을 억제하는 조성물 및 방법을 제공한다. 본 발명에 의해 정의된 조성물 및 물품은 하기에 제공된 실시예와 관련하여 단리되거나 또는 제조되었다. 본 발명의 다른 특징 및 이점은 상세한 설명 및 청구범위로부터 명백할 것이다.
정의
달리 정의되지 않는 한, 여기에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 기술자에 의해 일반적으로 이해되는 의미를 갖는다. 다음 참고 문헌은 본 발명에 사용된 많은 용어의 일반적인 정의를 기술자에게 제공한다: Singleton et al., Dictionary of Microbiology and Molecular Biology (2nd ed. 1994); Cambridge Dictionary of Science and Technology (Walker ed., 1988); Glossary of Genetics, 5th Ed., R. Rieger et al. (eds.), Springer Verlag (1991); 및 Hale & Marham, Harper Collins, Dictionary of Bioly(1991). 본원에 사용된 다음 용어들은 달리 명시되지 않는 한 아래에 부여된 의미를 갖는다.
"L-락테이트" 또는 "L-락트산"은 화학식 C3H6O3를 갖고, CAS 번호 79-33-4에 해당하며,
의 구조를 갖는 화합물, 및 그의 농경학적으로 허용되는 염을 의미한다. 상기 염은 리튬, 나트륨 또는 칼륨 염일 수 있다.
"D-락테이트" 또는 "D-락트산"은 화학식 C3H6O3를 갖고, CAS 번호 10326-41-7에 해당하며,
의 구조를 갖는 화합물, 및 그의 농경학적으로 허용되는 염을 의미한다. 상기 염은 리튬, 나트륨 또는 칼륨 염일 수 있다.
용어 "락테이트"는 D-락테이트, L-락테이트, 또는 이들의 혼합물을 지칭할 수 있다.
"아세테이트" 또는 "아세트산"은 화학식 C2H4O2를 갖고, CAS 번호 64-19-7에 해당하며,
의 구조를 갖는 화합물, 및 그의 농경학적으로 허용되는 염을 의미한다. 상기 염은 리튬, 나트륨 또는 칼륨 염일 수 있다.
"작용제(agent)"는 임의의 소분자 화합물을 의미한다. 소분자 화합물은 유기산(예: 락트산 및/또는 아세트산)일 수 있다.
"농경지"는 경작 중이거나 작물 재배에 사용되는 토지를 의미한다.
"개선하다(ameliorate)"는 질병의 발달 또는 진행을 감소(decrease), 억제, 약화, 감소(diminish), 저지 또는 안정화하는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서,질병은 진균 병원체(예를 들어, 보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 피티움 운키눌라툼, 리족토니아 솔라니, 스클레로티니아 미노르, 스클레로티움 케피보룸, 스클레로티니아 스클레로티오룸, 또는 베르티킬리움 달리아이)와 관련된다. 일부 실시양태에서, 질병은 회색 곰팡이 또는 백색 부패이다.
"담체"는 식물 또는 토양에 대한 조성물의 적용을 용이하게 하는 기능을 하는 물질을 의미한다.
본 개시내용에서 "포함하다(comprise)", "포함하는(comprising)", "함유하는(containing)" 및 "갖는(having)" 등은 미국 특허법에서 그들에게 부여된 의미를 가질 수 있고 "포함하다(include)", "포함하는(including)" 등을 의미할 수 있고; "본질적으로 구성되는(consisting essentially of)" 또는 "본질적으로 구성되다(consists essentially)" 등은 마찬가지로 미국 특허법에서 부여된 의미를 가지며, 이 용어는, 언급된 것의 기본적 또는 신규한 특성이, 언급된 것을 넘는 존재에 의해 변경되지 않는 한, 언급된 것을 넘는 존재를 허용하는 개방형이며, 단 선행 기술 실시양태는 배제한다. 특정 성분(들) 또는 요소(들)를 "포함하는" 것으로 특정된 임의의 실시양태는, 일부 실시양태에서는 그 특정 성분(들) 또는 요소(들)로 "구성되는" 또는 "본질적으로 구성되는" 것으로 고려된다.
"농축물"은 용매가 부족하여 고농도의 성분을 함유하는 조성물을 의미한다. 농축물은 조성물 성분의 목표 또는 작동 농도를 얻기 위해 용매(예: 물)를 사용하여 그 농축물을 몇 배나 희석해야 하는지에 따라 2X, 3X, 4X, 5X 등으로 지칭될 수 있다. 농축물은 1.5X, 2X, 3X, 4X, 5X, 10X, 15X, 20X, 25X, 50X, 75X, 100X, 150X, 200X, 250X, 300X, 500X, 750X, 또는 1000X 농축물일 수 있다.
"본질적으로 구성된다(consist essentially)"는 것은 성분으로서 상업적 재료에 존재하는 정상적인 불순물 및 본 개시내용의 작동에 영향을 미치지 않는 수준, 예를 들어 5 중량% 미만 또는 1 중량% 미만 또는 심지어 0.5 중량% 미만의 수준으로 존재하는 임의의 다른 첨가제와 함께, 나열된 성분만을 포함함을 의미한다.
"검출하다"는 검출될 분석물의 존재, 부재 또는 양을 식별하는 것을 의미한다.
"질병"은 토양 또는 식물 기능을 손상시키거나 방해하는 모든 상태 또는 장애를 의미한다. 토양의 정상적인 기능에는 질병이 없는 식물의 성장을 지속시키는 능력이 포함된다. 이 질병은 식물 또는 토양 병원체(예: 진균)에 의해 유발될 수 있다. 일부 실시양태에서, 식물 질병은 백색 부패 또는 회색 곰팡이이다. 병원성 진균으로는 예로서, 보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 피티움 운키눌라툼, 리족토니아 솔라니, 스클레로티니아 미노르, 스클레로티움 케피보룸, 스클레로티니아 스클레로티오룸, 및 베르티킬리움 달리아이를 들 수 있다. "유효량"은 처리되지 않은 토양 또는 식물에 비해 질병의 증상을 개선하는데 필요한 작용제(agent)의 양을 의미한다. 진균 질병(예: 백색 부패, 회색 곰팡이)의 치료 또는 예방을 위해 본 발명을 실시하는 데 사용되는 활성 화합물(들)의 유효량은 투여 방식 및 처리되는 식물 및/또는 토양에 따라 달라진다. 이러한 양을 "유효" 양이라고 한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 진균 성장을 억제하거나 진균을 사멸시키는 데 필요한 양이다.
"성장 배지(growth medium)"는 식물의 성장을 지원하는 기능을 하는 고체, 액체 또는 반고체를 의미한다. 일부 실시양태에서, 성장 배지는 토양이다. 일부 실시양태에서, 성장 배지는 토양, 바크(bark), 점토(예를 들어, 하소된 점토), 코이리피쓰(coir pith), 녹색 퇴비, 토탄(예를 들어, 흑색 토탄 또는 백색 토탄), 펄라이트, 왕겨, 모래, 그릿, 목질 섬유, 토탄, 질석, 잎 곰팡이, 톱밥, 버개스(bagasse), 발포 폴리스티렌, 요소 포름알데히드, 또는 이들의 조합을 함유한다. 일부 실시양태에서, 성장 배지는 수경 성장 배지이다.
"완화하다(mitigate)"는 병원체 또는 이의 유해한 영향을 완화(alleviating) 또는 감소시키는 것을 의미한다. 본원에 사용된 "제거하다"는 병원체의 박멸 또는 병원체의 유해한 영향의 근절(eradication)을 의미한다. 본원에 사용된 "억제하다"는 병원체의 양의 감소 또는 병원체의 유해한 영향의 감소를 의미한다. 본원에 사용된 "사멸하다"은 병원체의 파괴, 또는 증식이나 번식 능력의 영구적이고 비가역적인 제거를 의미한다. 본원에 사용된 "늦추다(slow)"는 병원체의 확산을 감소시키거나 병원체의 유해한 영향이 확립되거나 증가하는 속도를 감소시키는 것을 의미한다. 용어 완화하다, 제거하다, 억제하다, 사멸하다, 늦추다, 제어하다 또는 예방하다는 병원체 또는 병원체의 유해한 영향의 부분적 또는 완전한 완화, 제거, 억제, 사멸, 늦춤, 제어 또는 예방을 포함할 수 있다. 예를 들어, 완화, 제거, 억제, 사멸, 늦춤, 제어 또는 예방은 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 상기 값들 중 임의의 두 가지에 의해 정의된 범위 내의 양일 수 있다.
본원에 사용된 "작용제를 얻는"에서의 "얻는"은 작용제를 합성, 구매, 또는 달리 획득하는 것을 포함한다.
"병원체"는 식물에서 질병을 일으키는 유기체를 의미한다. 일부 실시양태에서, 병원체는 진균 병원체이다. 실시양태에서, 진균 병원체는 보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 피티움 운키눌라툼, 리족토니아 솔라니, 스클레로티니아 미노르, 스클레로티움 케피보룸, 스클레로티니아 스클레로티오룸, 또는 베르티킬리움 달리아이이다. 일부 실시양태에서, 질병은 백색 부패 또는 회색 곰팡이이다. 일부 실시양태에서, 진균 병원체는 식물의 성장, 식물의 외관, 식물성 식품의 생산 및 수확량, 식물성 식품의 외관, 식물성 식품의 보존, 식물의 재배에 악영향을 미친다. 일부 실시양태에서, 병원체는 임의의 모든 형태의 탄저병(anthracnose) 또는 임의의 모든 유형의 보트리티스(Botrytis), 푸사리움(Fusarium)(푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이(F. oxysporum f. sp. Fragariae), 큐벤세(Cubense) 또는 F. 솔라니(solani)), 티엘라보프시스(Thielavopsis) (뿌리 부패), 미코스파에렐라(Mycosphaerella) (M. 피지엔시스(fijiensis) 및 M. 무시콜라(musicola) 포함), 베르티킬리움(Verticillium)(V. 달리아(dahlia) 포함), 마크로포미나 파세올리나(Macrophomina phaseolina), 피토프토라 칵토룸(Phytophthora cactorum), 마그나포르테 그리세아(Magnaporthe grisea), 피티움(Phythium), 스클레로티니아 스클레로티오룸(Sclerotinia sclerotiorum), 스클레로티움 케피보룸(Sclerotium cepivorum) (또는, 스트로마티니아 케피보라(Stromatinia cepivora)), 우스틸라고(Ustilago), 리족토니아(Rhizoctonia)(R. 솔라니 포함), 클라도스포리움(Cladosporium), 콜레토트리쿰(Colletotrichum)(C. 코코코데스(cococodes), C. 아쿠타툼(acutatum), C. 트룬카툼(truncatum), 또는 C. 글로에오스포로이데스(gloeosporoides) 포함), 트리코데르마(Trichoderma) (T. 비리데(viride) 또는 T. 하르지아눔(harzianum) 포함), 헬민토스포리움(Helminthosporium) (H. 솔라니 포함), 알테르나리아(Alternaria) (A. 솔라니 또는 A. 알테르나타(alternata) 포함), 아스페르길루스(Aspergillus) (A. 니게르(niger) 또는 A. 푸미가투스(fumigatus) 포함), 파코스포라 파키리지(Phakospora pachyrhizi), 푸키니아(Puccinia), 난균류(oomycetes)(피토프토라(Phytophthora) 포함), 및 아르밀라리아(Armillaria)이다. 일부 실시양태에서, 식물 병원체는 두건버섯(Leotiomycetes) 과(Family) 강(Class), 고무버섯(Helotiales) 목 및/또는 균핵버섯(Sclerotiniaceae) 과에 속한다.
"백만분율(ppm)"은 mg/L 또는 g/m3에 해당하는 농도의 단위를 의미하며, 액체의 밀도는 약 1 g/ml 또는 mg/kg으로 추산된다. 예를 들어, 100 mg의 락테이트를 함유하는 수용액 1 L는 100 ppm의 락테이트를 함유하는 것으로 기술될 수 있다. 추가 예로서, 100 mg의 락테이트를 함유하는 1 kg의 토양 샘플은 100 ppm의 락테이트를 함유하는 것으로 기술될 수 있다.
"식물(plant)"이라는 용어는 식물계의 모든 유기체와 그 세포, 조직 및 산물을 포함한다. 따라서 식물이라는 용어는 종자, 잎, 줄기, 뿌리, 열매 등을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "예방하다", "예방하는", "예방", "예방적 치료" 등은, 질병을 갖고 있지 않지만 발병할 위험이 있거나 발병하기 쉬운 식물 또는 토양에서 질병(예: 백색 부패, 회색 곰팡이)이 발병할 확률을 감소시키는 것이다.
"감소시키다"는 적어도 5%, 10%, 25%, 50%, 75% 또는 100%의 음(-)의 변경을 의미한다.
"레퍼런스(reference)"는 표준 또는 제어 조건을 의미한다. 한 실시양태에서, 레퍼런스는, 진균 병원체를 포함하나, 본 발명의 조성물과 접촉하지 않은, 식물, 토양 또는 기타 배지이다. 실시양태에서, 진균 병원체는 보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 피티움 운키눌라툼, 리족토니아 솔라니, 스클레로티니아 미노르, 스클레로티움 케피보룸, 스클레로티니아 스클레로티오룸, 또는 베르티킬리움 달리아이이다. 실시양태에서, 본 발명의 조성물은 락테이트 및/또는 아세테이트를 포함한다.
"멸균 조성물"은 생존 가능한 유기체가 존재하지 않는 조성물을 의미한다. "유기체(organism)"라는 용어는 진균 병원체를 포함하며, 그 비제한적인 예는 보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 피티움 운키눌라툼, 리족토니아 솔라니, 스클레로티니아 미노르, 스클레로티움 케피보룸, 스클레로티니아 스클레로티오룸, 또는 베르티킬리움 달리아를 포함한다.
본 명세서에 제공된 범위는 그 범위 내의 모든 값에 대한 약칭으로 이해된다. 예를 들어, 1∼50의 범위는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 336, 35, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 또는 50로 구성된 그룹의 임의의 수, 숫자의 조합 또는 하위 범위를 포함하는 것으로 이해된다.
본원에 사용된 "토양"은 식물에 구조적 지지를 제공하고 식물을 위한 물 및 영양소의 공급원으로서 기능하는 조성물을 의미한다. 토양은 무기물(예: 모래( sand), 미사(silt), 점토(clay), 자갈(gravel))과 유기 물질의 혼합물을 포함할 수 있다. 토양은 직경이 2 mm보다 큰 입자(자갈), 직경이 약 0.2 mm에서 약 2 mm인 입자(거친 모래), 직경이 약 0.02 mm에서 약 0.2 mm인 입자(고운 모래), 직경이 약 0.002 mm∼약 0.02 mm인 입자(미사), 직경이 0.002 mm 미만인 입자(점토) 또는 이들의 다양한 조합을 포함할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "치료하다", 치료하다", "치료" 등은 토양 또는 식물로부터의 질병을 감소시키거나 개선시키는 것을 의미한다.
구체적으로 언급되거나 문맥상 명백하지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어 "또는"은 포괄적인 것으로 이해된다. 구체적으로 언급되거나 문맥상 명백하지 않은 한, 본원에 사용된 용어 "a", "an" 및 "the"는 단수 또는 복수로 이해된다.
구체적으로 언급되거나 문맥상 명백하지 않는 한, 본원에 사용된 용어 "약"은 예를 들어 평균의 2 표준 편차 내에서 당 분야의 정상 허용 범위 내로 이해된다. 약은 명시된 값의 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.1%, 0.05% 또는 0.01% 이내로 이해될 수 있다. 문맥상 달리 명백하지 않는 한, 본원에 제공된 모든 수치는 약이라는 용어로 수식된다.
본원에서 변수(variable)의 정의에 있는 화학 그룹 목록의 열거는, 나열된 그룹들 중 어느 하나의 그룹 또는 조합으로서의 그 변수의 정의를 포함한다. 본원의 변수 또는 측면에 대한 실시양태의 열거는, 임의의 단일 실시양태로서 또는 임의의 다른 실시양태 또는 이의 부분과 조합하여, 그 실시양태를 포함한다.
본원에 제공된 임의의 조성물 또는 방법은 본원에 제공된 임의의 다른 조성물 및 방법 중 하나 이상과 조합될 수 있다.
도 1은 스클레로티움 케피보룸 및 보트리티스 키네레아의 성장에 대한 유기산 조성물의 영향을 보여주는 3개의 플롯을 제시한다. 도 1에서, n.s.는 "유의하지 않음(not significant)"을; ppm은 "백만분율"을; L 및 (S)는 각각 좌선성(levorotatory) 및 좌선성(sinister rotatory)을 나타내며; 별표는 표준 규칙에 따라 통계적 유의성의 정도를 나타내는 데 사용된다. 2배 농축된 락테이트 및 아세테이트 조성물을 탈이온수 + 한천 용액으로 1:1 희석하여 한천 플레이트를 제조하였다.
도 2A-2E는 스클레로티니아 스클레로티오룸을 접종한 페트리 플레이트의 플롯과 이미지이며, 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물이 진균 병원체의 성장을 억제함을 입증한다. 도 2A-2D에 제시된 이미지는, 접종으로부터 2일, 3일, 4일 및 7일 후에 각각 촬상되었다. 도 2A-2D의 각각에서, 첫번째(상단) 패널은, 생물방제제 또는 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물 대신 물(H2O)을 함유하는 음성 대조군 페트리 플레이트의 이미지이고, 두번째 패널은 생물방제제(BCA: biocontrol agent)를 함유하는 페트리 플레이트의 이미지이며, 세번째(마지막) 패널은 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물로 처리된 페트리 플레이트의 이미지이다. 눈금으로 각 이미지에 센티미터 눈금자가 표시된다. 도 2E는 시간의 경과에 따른 진균 콜로니 면적의 플롯을 제공한다. 오차 막대는 평균으로부터 1 표준 편차를 나타낸다. 도면 전체에서 "AC"는 "아세테이트 및 L-락트산"의 약자이다.
도 3A-3E는 스클레로티니아 미노르를 접종한 페트리 플레이트의 플롯과 이미지이며, 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물이 진균 병원체의 성장을 억제함을 입증한다. 도 3A-3D에 제시된 이미지는 접종으로부터 2일, 3일, 4일 및 7일 후에 각각 촬상되었다. 도 3A-3D의 각각에서, 첫번째(상단) 패널은 생물방제제 또는 락테이트와 L-락트산을 함유하는 조성물 대신 물(H2O)을 함유하는 음성 대조군 페트리 플레이트의 이미지이고, 두번째 패널은 생물방제제(BCA)가 포함된 페트리 플레이트의 이미지이며, 세번째 (마지막) 패널은 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물로 처리된 페트리 플레이트의 이미지이다. 도 3E는 시간의 경과에 따른 진균 콜로니 면적의 플롯을 제공한다. 오차 막대는 평균으로부터 1 표준 편차를 나타낸다. 도면 전체에서 "AC"는 "아세테이트 및 L-락트산"의 약자이다.
도 4A-4D는 피티움 운키눌라툼을 접종한 페트리 플레이트의 플롯과 이미지이며, 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물이 진균 병원체의 성장을 억제함을 입증한다. 도 4A-4C에 제시된 이미지는 각각 접종으로부터 3일, 4일 및 7일 후에 촬상되었다. 도 4A-4C의 각각에서, 첫번째(상단) 패널은 생물방제제 또는 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물 대신 물(H2O)을 함유하는 음성 대조군 페트리 플레이트의 이미지이고, 두번째 패널은 생물방제제(BCA)를 함유하는 페트리 플레이트의 이미지이고, 세번째(마지막) 패널은 각각 800 ppm 농도의 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물로 처리된 페트리 플레이트의 이미지이다. 도 4D는 시간의 경과에 따른 진균 콜로니 면적의 플롯을 제공한다. 오차 막대는 평균으로부터 1 표준 편차를 나타낸다. 도면 전체에서 "AC"는 "아세테이트 및 L-락트산"을 나타낸다.
도 5A-5H는 생물방제제, 또는 각각 800 ppm의 농도의 락테이트 및 L-락트산의 조성물을 첨가 또는 무첨가한, 감자 덱스트로스 한천에서 표시된 종의 성장을 보여주는 막대 그래프이다. 감자 덱스트로스 한천의 접종으로부터 4일 및 7일 후에 성장을 평가했다(N=3). 0.2 cm2는 페트리 플레이트를 접종하는 데 사용된 한천 플러그의 면적이었으며, 따라서 0.2 cm2의 면적은 제로(0) 성장에 해당한다. 56.7 cm2는 페트리 접시의 면적이었다. 오차 막대는 1 표준 편차와 같다.
도 2A-2E는 스클레로티니아 스클레로티오룸을 접종한 페트리 플레이트의 플롯과 이미지이며, 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물이 진균 병원체의 성장을 억제함을 입증한다. 도 2A-2D에 제시된 이미지는, 접종으로부터 2일, 3일, 4일 및 7일 후에 각각 촬상되었다. 도 2A-2D의 각각에서, 첫번째(상단) 패널은, 생물방제제 또는 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물 대신 물(H2O)을 함유하는 음성 대조군 페트리 플레이트의 이미지이고, 두번째 패널은 생물방제제(BCA: biocontrol agent)를 함유하는 페트리 플레이트의 이미지이며, 세번째(마지막) 패널은 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물로 처리된 페트리 플레이트의 이미지이다. 눈금으로 각 이미지에 센티미터 눈금자가 표시된다. 도 2E는 시간의 경과에 따른 진균 콜로니 면적의 플롯을 제공한다. 오차 막대는 평균으로부터 1 표준 편차를 나타낸다. 도면 전체에서 "AC"는 "아세테이트 및 L-락트산"의 약자이다.
도 3A-3E는 스클레로티니아 미노르를 접종한 페트리 플레이트의 플롯과 이미지이며, 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물이 진균 병원체의 성장을 억제함을 입증한다. 도 3A-3D에 제시된 이미지는 접종으로부터 2일, 3일, 4일 및 7일 후에 각각 촬상되었다. 도 3A-3D의 각각에서, 첫번째(상단) 패널은 생물방제제 또는 락테이트와 L-락트산을 함유하는 조성물 대신 물(H2O)을 함유하는 음성 대조군 페트리 플레이트의 이미지이고, 두번째 패널은 생물방제제(BCA)가 포함된 페트리 플레이트의 이미지이며, 세번째 (마지막) 패널은 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물로 처리된 페트리 플레이트의 이미지이다. 도 3E는 시간의 경과에 따른 진균 콜로니 면적의 플롯을 제공한다. 오차 막대는 평균으로부터 1 표준 편차를 나타낸다. 도면 전체에서 "AC"는 "아세테이트 및 L-락트산"의 약자이다.
도 4A-4D는 피티움 운키눌라툼을 접종한 페트리 플레이트의 플롯과 이미지이며, 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물이 진균 병원체의 성장을 억제함을 입증한다. 도 4A-4C에 제시된 이미지는 각각 접종으로부터 3일, 4일 및 7일 후에 촬상되었다. 도 4A-4C의 각각에서, 첫번째(상단) 패널은 생물방제제 또는 락테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물 대신 물(H2O)을 함유하는 음성 대조군 페트리 플레이트의 이미지이고, 두번째 패널은 생물방제제(BCA)를 함유하는 페트리 플레이트의 이미지이고, 세번째(마지막) 패널은 각각 800 ppm 농도의 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물로 처리된 페트리 플레이트의 이미지이다. 도 4D는 시간의 경과에 따른 진균 콜로니 면적의 플롯을 제공한다. 오차 막대는 평균으로부터 1 표준 편차를 나타낸다. 도면 전체에서 "AC"는 "아세테이트 및 L-락트산"을 나타낸다.
도 5A-5H는 생물방제제, 또는 각각 800 ppm의 농도의 락테이트 및 L-락트산의 조성물을 첨가 또는 무첨가한, 감자 덱스트로스 한천에서 표시된 종의 성장을 보여주는 막대 그래프이다. 감자 덱스트로스 한천의 접종으로부터 4일 및 7일 후에 성장을 평가했다(N=3). 0.2 cm2는 페트리 플레이트를 접종하는 데 사용된 한천 플러그의 면적이었으며, 따라서 0.2 cm2의 면적은 제로(0) 성장에 해당한다. 56.7 cm2는 페트리 접시의 면적이었다. 오차 막대는 1 표준 편차와 같다.
본 발명은 진균 병원체의 성장 및/또는 생존을 억제하는데 유용한 조성물 및 방법을 특징으로 한다 (예: 보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 피티움 운키눌라툼, 리족토니아 솔라니, 스클레로티니아 미노르, 스클레로티움 케피보룸, 스클레로티니아 스클레로티오룸, 또는 베르티킬리움 달리아이).
본 발명은, 적어도 부분적으로, 락테이트 및 아세테이트를 함유하는 조성물이 토양 중 및/또는 식물 표면 상의 진균 병원체(예를 들어, 보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 피티움 운키눌라툼, 리족토니아 솔라니, 스클레로티니아 미노르, 스클레로티움 케피보룸, 스클레로티니아 스클레로티오룸, 또는 베르티킬리움 달리아이)의 억제에 유용함을 발견한 것에 기초한다.
조성물
본 발명은 진균 병원체(예를 들어, 보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 피티움 운키눌라툼, 리족토니아 솔라니, 스클레로티니아 미노르, 스클레로티움 케피보룸, 스클레로티니아 스클레로티오룸, 또는 베르티킬리움 달리아이)의 성장 및/또는 생존을 억제하는데 사용되는 조성물을 제공한다. 실시양태에서, 조성물은 락테이트 및 아세테이트(예를 들어, L-락테이트)를 함유하고 농업용으로 제형화된다.
조성물은 락테이트 대 아세테이트의 특정 몰비(락테이트:아세테이트)로 락테이트 및 아세테이트를 포함할 수 있다. 조성물은 락테이트 대 아세테이트의 특정 질량비(락테이트:아세테이트)로 락테이트 및 아세테이트를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 락테이트 대 아세테이트의 질량비 또는 몰비(락테이트:아세테이트)는 약 1:10∼약 10:1, 약 1:6∼약 6:1, 약 1:4∼약 4:1, 약 1:6∼약 1:1, 약 1:4∼약 1:1, 약 1:3∼약 1:1, 약 6:1∼약 1:1, 또는 약 4:1∼약 1:1이다.
일부 실시양태에서, 조성물은, 약 또는 적어도 약, 50 ppm 락테이트, 75 ppm 락테이트, 100 ppm 락테이트, 125 ppm 락테이트, 150 ppm 락테이트, 175 ppm 락테이트, 200 ppm 락테이트, 300 ppm 락테이트, 400 ppm 락테이트, 500 ppm 락테이트, 600 ppm 락테이트,700 ppm 락테이트, 800 ppm 락테이트, 900 ppm 락테이트, 1,000 ppm 락테이트, 1,100 ppm 락테이트, 1,200 ppm 락테이트, 1,300 ppm 락테이트, 1,400 ppm 락테이트, 1,500 ppm 락테이트, 1,600 ppm 락테이트, 1,700 ppm 락테이트, 1,800 ppm 락테이트, 1,900 ppm 락테이트, 2,000 ppm 락테이트, 2,200 ppm 락테이트, 2,300 ppm 락테이트, 2,400 ppm 락테이트, 2,500 ppm 락테이트, 3,000 ppm 락테이트, 3,500 ppm 락테이트, 4,000 ppm 락테이트, 4,500 ppm 락테이트, 5,000 ppm 락테이트, 또는 5,500 ppm 락테이트를 포함한다. 일부 실시양태에서, 조성물은, 약, 50 ppm 락테이트, 75 ppm 락테이트, 100 ppm 락테이트, 125 ppm 락테이트, 150 ppm 락테이트, 175 ppm 락테이트, 200 ppm 락테이트, 300 ppm 락테이트, 400 ppm 락테이트, 500 ppm 락테이트, 600 ppm 락테이트, 700 ppm 락테이트, 800 ppm 락테이트, 900 ppm 락테이트, 1,000 ppm 락테이트, 1,100 ppm 락테이트, 1,200 ppm 락테이트, 1,300 ppm 락테이트, 1,400 ppm 락테이트, 1,500 ppm 락테이트, 1,600 ppm 락테이트, 1,700 ppm 락테이트. 1,800 ppm 락테이트, 1,900 ppm 락테이트, 2,000 ppm 락테이트, 2,200 ppm 락테이트, 2,300 ppm 락테이트, 2,400 ppm 락테이트, 2,500 ppm 락테이트, 3,000 ppm 락테이트, 3,500 ppm 락테이트, 4,000 ppm 락테이트, 4,500 ppm 락테이트, 5,000 ppm 락테이트, 또는 5,500 ppm 락테이트 이하를 포함한다. 일부 실시양태에서, 조성물은, 약 또는 적어도 약, 50 ppm 아세테이트, 75 ppm 아세테이트, 100 ppm 아세테이트, 125 ppm 아세테이트, 150 ppm 아세테이트, 175 ppm 아세테이트, 200 ppm 아세테이트, 300 ppm 아세테이트, 400 ppm 아세테이트, 500 ppm 아세테이트, 600 ppm 아세테이트,700 ppm 아세테이트, 800 ppm 아세테이트, 900 ppm 아세테이트, 1,000 ppm 아세테이트, 1,100 ppm 아세테이트, 1,200 ppm 아세테이트, 1,300 ppm 아세테이트, 1,400 ppm 아세테이트, 1,500 ppm 아세테이트, 1,600 ppm 아세테이트, 1,700 ppm 아세테이트, 1,800 ppm 아세테이트, 1,900 ppm 아세테이트, 2,000 ppm 아세테이트, 2,500 ppm 아세테이트, 3,000 ppm 아세테이트, 3,500 ppm 아세테이트, 4,000 ppm 아세테이트, 4,500 ppm 아세테이트, 5,000 ppm 아세테이트, 또는 5,500 ppm 아세테이트를 포함한다. 일부 실시양태에서, 조성물은 약, 50 ppm 아세테이트, 75 ppm 아세테이트, 100 ppm 아세테이트, 125 ppm 아세테이트, 150 ppm 아세테이트, 175 ppm 아세테이트, 200 ppm 아세테이트, 300 ppm 아세테이트, 400 ppm 아세테이트, 500 ppm 아세테이트, 600 ppm 아세테이트, 700 ppm 아세테이트, 800 ppm 아세테이트, 900 ppm 아세테이트, 1,000 ppm 아세테이트, 1,100 ppm 아세테이트, 1,200 ppm 아세테이트, 1,300 ppm 아세테이트, 1,400 ppm 아세테이트, 1,500 ppm 아세테이트, 1,600 ppm 아세테이트, 1,700 ppm 아세테이트. 1,800 ppm 아세테이트, 1,900 ppm 아세테이트, 2,000 ppm 아세테이트, 2,500 ppm 아세테이트, 3,000 ppm 아세테이트, 3,500 ppm 아세테이트, 4,000 ppm 아세테이트, 4,500 ppm 아세테이트, 5,000 ppm 아세테이트, 또는 5,500 ppm 아세테이트 이하를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 조성물은 175 ppm L-락테이트 및 600 ppm 아세테이트, 600 ppm L-락테이트 및 600 ppm 아세테이트, 175 ppm L-락테이트 및 800 ppm 아세테이트, 또는 800 ppm L-락테이트 및 800 ppm 아세테이트를 포함한다.
조성물은 D-락테이트를 실질적으로 포함하지 않을 수 있다. 일부 맥락에서, D-락테이트가 병원성 진균에 대한 탄소원으로서 기능하는 것을 방지하기 위해 본 발명의 조성물에서 D-락테이트의 부재 또는 단지 낮은 농도의 D-락테이트를 보장하는 것이 유리할 수 있다. 일부 실시양태에서, D-락테이트가 "실질적으로 없는" 조성물은, 약, 1%(wt/wt), 2%(wt/wt), 3%(wt/wt), 4%(wt/wt), 5%(wt/wt), 6%(wt/wt), 7%(wt/wt), 8%(wt/wt), 9%(wt/wt), 10%(wt/wt), 11%(wt/wt), 12%(wt/wt), 13%(wt/wt), 14%(wt/wt), 15%(wt/wt), 16%(wt/wt), 17%(wt/wt), 18%(wt/wt), 19%(wt/wt), 또는 20%(wt/wt) 미만의 D-락테이트를 포함한다.
조성물은 락테이트 및 아세테이트를 농업적으로 허용되는 담체 및/또는 첨가제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 담체 및/또는 첨가제의 비제한적 예는 증량제(extender), 용매, 희석제, 염료, 습윤제, 분산제, 유화제, 소포제, 영양소, 방부제, 2차 증점제, 접착제 및/또는 물을 포함한다. 본 발명의 제형은 농업적으로 허용되는 담체를 포함할 수 있으며, 이는 회복, 효능 또는 물리적 특성을 개선하고/거나 포장 및 투여를 돕기 위해 제형에 첨가되는 불활성 제형 성분이다. 담체는 고결 방지제(anti-caking agent), 산화 방지제, 증량제(bulking agent) 및/또는 보호제를 포함할 수 있다. 유용한 담체의 예는 다당류(전분, 말토덱스트린, 메틸셀룰로오스, 유청 단백질과 같은 단백질, 펩티드, 검), 당(락토스, 트레할로스, 자당), 지질(레시틴, 식물성 오일, 광유), 염(염화나트륨, 탄산칼슘, 시트르산나트륨), 규산염(점토, 무정형 실리카, 발연/침전 실리카, 규산염), 왁스, 오일, 알코올 및 계면활성제를 포함한다. 담체의 추가의 비제한적 예는, 특히, 식물 또는 식물 부분, 토양 또는 종자에 적용하기 위한, 더 나은 적용성을 위해, 락테이트 및 아세테이트와 혼합되거나 조합되는, 천연 또는 합성, 유기 또는 무기 물질을 포함한다. 고체 또는 액체일 수 있는 지지체 또는 담체는 일반적으로 불활성이며 농업용으로 적합해야 한다. 적합한 고체 또는 액체 담체/지지체는 예를 들어 암모늄 염 및 천연 미분 광물, 예를 들어 카올린, 점토, 활석, 백악, 석영, 아타풀자이트(attapulgite), 몬모릴로나이트(montmorillonite) 또는 규조토, 및 미분 실리카, 알루미나 및 천연 또는 합성 실리케이트와 같은 미분 합성 미네랄, 수지, 왁스, 고체 비료, 물, 알코올, 특히 부탄올, 유기 용매, 광유 및 식물성 오일, 및 또한 이들의 유도체 및 다양한 조합을 포함한다. 이러한 지지체 또는 담체의 혼합물을 사용하는 것도 가능하다. 과립에 적합한 고체 지지체/담체는 예를 들어 방해석, 대리석, 부석, 세피올라이트, 백운석과 같은 분쇄 및 분별 천연 미네랄, 또한 무기 및 유기 밀(meal)의 합성 과립, 및 톱밥, 코코넛 껍질, 옥수수 속대 및 담배 줄기와 같은 유기 물질의 과립이다. 적합한 액화 기체 증량제(extender) 또는 담체는 대기 온도 및 대기압 하에 기체인 액체, 예를 들어 부탄, 프로판, 질소 및 이산화탄소와 같은 에어로졸 추진제(aerosol propellant)이다. 카르복시메틸셀룰로오스와 같은 점착부여제, 및 분말, 과립 및 라텍스 형태의 천연 및 합성 중합체, 예를 들어 아라비아 검, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 아세테이트, 또는 천연 인지질, 예를 들어 세팔린 및 레시틴 및 합성 인지질이 제형에 사용될 수 있다. 다른 가능한 첨가제는 선택적으로 변형된 광물 및 식물성 오일 및 왁스이다. 사용된 증량제가 물인 경우, 예를 들어 유기 용매를 보조 용매로 사용하는 것도 가능하다. 적합한 액체 용매는, 본질적으로, 자일렌, 톨루엔 또는 알킬나프탈렌과 같은 방향족 화합물, 염소화 방향족 화합물 또는 염소화 지방족 탄화수소, 예컨대 클로로벤젠, 클로로에틸렌 또는 메틸렌 클로라이드, 지방족 탄화수소, 예컨대 시클로헥산 또는 파라핀, 예를 들어 광유 분획, 광물성 및 식물성 오일, 알코올, 예를 들어 부탄올 또는 글리콜, 및 또한 그의 에테르 및 에스테르, 케톤, 예를 들어 아세톤, 메틸 에틸 케톤, 메틸 이소부틸 케톤 또는 시클로헥사논, 디메틸포름아미드 및 디메틸 술폭시드와 같은 강한 극성 용매, 및 또한 물이다.
일부 실시양태에서, 조성물은 식물 또는 토양에 대한 조성물의 적용을 용이하게 하는 성분을 포함할 수 있다. 토양에 대한 본 발명의 조성물의 적용은 관주(drenching), 토양 내로의 혼입(incorporation), 또는 액적 적용(droplet application)에 의해 수행될 수 있다. 조성물은 또한 식물 뿌리 또는 종자에 직접 적용될 수 있다(예를 들어, 침지, 살포(dusting) 또는 분무를 통해). 적용을 돕기 위해, 조성물은 액체 용액, 에멀젼, 습윤성 분말, 현탁액, 분말, 더스트, 페이스트, 가용성 분말, 과립 또는 현탁액-에멀젼 농축물의 형태일 수 있다.
일부 실시양태에서, 조성물은 멸균 액체 용액일 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 액체 희석제 또는 용매(예를 들어, 물)를 함유할 수 있다. 희석제의 비제한적인 예는 조성물이 식물, 수생 생물 또는 가축의 성장에 악영향을 미치지 않도록 식물, 토양, 수경재배 또는 가축 적용과 양립가능한 수용액이다. 담체는 액체일 수 있다. 담체는 조성물의 안정성, 취급, 저장, 선적 또는 적용 특성을 개선할 수 있다.
일부 실시양태에서, 조성물은 계면활성제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 계면활성제는 글리세롤, 알킬벤젠설포네이트, 암모늄 라우릴 설페이트, 나트륨 라우릴 설페이트(SLS), 나트륨 도데실 설페이트(SDS), 나트륨 라우레스 설페이트(sodium laureth sulfate), 나트륨 라우릴 에테르 설페이트(SLES), 나트륨 미레스 설페이트(sodium myreth sulfate), 디옥틸 나트륨 설포숙시네이트, 퍼플루오로옥탄 설포네이트, 퍼플루오로부탄설포네이트, 알킬-아릴 에테르 포스페이트, 알킬 에테르 포스페이트, 나트륨 스테아레이트, 나트륨 라우로일 사르코시네이트, 퍼플루오로노나노에이트 및 퍼플루오로옥타노에이트를 포함한다. 일부 실시양태에서, 조성물은, 약 0.001%∼약 10%, 예컨대 0.001, 0.005, 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 또는 10%의 양으로, 또는 전술한 값 중 임의의 2개에 의해 정의된 범위 내의 양으로 존재하는, 유화제를 포함한다.
일부 실시양태에서, 계면활성제는 유화제, 분산제 또는 이온성 또는 비이온성 유형의 습윤제 또는 이러한 계면활성제의 혼합물을 포함한다. 계면활성제의 추가의 비제한적인 예는 폴리아크릴산 염, 리그노설폰산 염, 페놀설폰산 염 또는 나프탈렌설폰산 염, 에틸렌 옥사이드와 지방 알코올 또는 지방산 또는 지방 아민과의 중축합물, 치환된 페놀(특히 알킬페놀 또는 아릴페놀), 설포숙신산 에스테르의 염, 타우린 유도체(특히 알킬 타우레이트), 폴리옥시에틸화 알코올 또는 페놀의 인산 에스테르, 폴리올의 지방산 에스테르, 및 황산염, 설폰산염 및 인산염 관능기를 함유하는 상기 화합물의 유도체를 포함한다.
비제한적인 예로서 보호 콜로이드, 접착제, 영양소, 증점제, 요변제(thixotropic agent), 침투제, 안정화제, 격리제(sequestering agent)와 같은 추가 성분이 조성물에 포함될 수도 있다.
일부 실시양태에서, 조성물은 착색제, 예컨대 무기 안료(예를 들어, 산화철, 산화티탄 및 프러시안 블루), 및 유기 염료(예를 들어, 알리자린 염료 및 아조 염료) 및 금속 프탈로시아닌 염료를 포함한다.
일부 실시양태에서, 조성물은 멸균 액체 매질, 용액, 스프레이, 미스트, 종자 코팅, 정전기로 대전된 종자 분말, 분말, 분말-유사 물질, 또는 동결-건조 분말로서 제제화된다.
일부 실시양태에서, 비제한적 예로서 벤조이드, 피라진, 알코올, 케톤, 휘발성 지방산, 휘발성 유기 화합물, 황화물 및/또는 알켄과 같은 추가 성분이 조성물에 포함될 수 있다. 일부 실시양태에서, 추가 영양소 및 생체 자극제 성분(biostimulant component), 비제한적인 예로서 질소, 칼륨, 인산염, 뿐만 아니라 유익한 박테리아 종 및 유익한 진균 종과 같은 것이, 조성물에 포함될 수 있다.
일부 실시양태에서, 조성물은 종자 코팅으로서 제제화될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 식물 종자를 코팅하는 데 사용되는 추가 영양소를 갖는 집합체(conglomerate) 혼합물일 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 저장 동안 해로운 병원체, 예컨대 진균으로부터 식물 종자를 보호한다. 일부 실시양태에서, 조성물은 발아율을 증가시키고, 묘목 생존을 증가시키고/시키거나 작물 수확량을 증가시킨다.
일부 실시양태에서, 조성물은, 분무(spraying), 분무(misting), 침지(soaking), 관수(watering), 토양 관주(soil drenching), 농작물 살포(crop-dusting)에 의한, 또는 토양, 식물, 식물의 일부 또는 식물의 구성 요소(component)에 조성물을 적용함에 의한, 식물, 나무, 잔디 또는 토양 적용 용으로 제제화될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 식물 자체, 예를 들어 잎, 줄기(stem), 식물 몸통(trunk), 식물의 대(stalk), 꽃, 가지, 과일, 뿌리, 새싹(shoot), 새싹(bud), 뿌리줄기, 종자, 또는 식물의 다른 부분에 적용되거나, 식물이 재배되고 있는 또는 그 주변의 토양에 적용된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 수확된 종자, 잎, 줄기(stem), 식물 몸통(trunk), 식물의 대(stalk), 꽃, 가지, 과일, 뿌리, 새싹(shoot), 새싹(bud), 뿌리줄기, 또는 식물의 다른 부분, 또는 식물이 재배되고 있는 또는 그 주변의 토양에 적용되는 용액으로서 제제화된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 잔디에 적용된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 동결 건조되거나 증발 공정을 통해 고체 또는 분말로 감소된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 식물 또는 토양에 적용하기 위한 비료 또는 미량 영양소와 함께 제제화된다. 이러한 비료 또는 영양소는 예를 들어 미량 미네랄, 인, 칼륨, 황, 망간, 마그네슘, 칼슘, 및/또는 미량 원소 중 임의의 하나 이상을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 적용 전에 희석될 수 있는 농축된 조성물로서 제제화된다. 예를 들어, 조성물은 물과 같은 용액으로 희석될 수 있는 액체 농축물로 제형화될 수 있거나, 물과 같은 용액에 용해하기 위해 분말과 같은 고체로 제형화될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 즉시 사용 가능한(ready-to-use) 조성물로서 제제화될 수 있다. 예를 들어, 조성물은 식물에 직접 적용하기 위한 적절한 농도의 성분 부분을 포함하는 용액으로 제제화될 수 있거나 식물에 직접 적용하기 위해 고체로 제형화될 수 있다.
본원에 제공된 조성물의 임의의 실시양태에서, 제제는 효과를 가능하게 및/또는 향상시키기 위해 기존의 시판 제품과 동시에 적용되는 보조제로서 개발될 수 있다.
본원에 제공된 조성물의 임의의 실시양태에서, 조성물은 무독성일 수 있고, 지하수, 동식물군에 대한 무독성을 포함하여, 인간, 처리되는 토양 또는 식물, 또는 환경에 독성 효과를 나타내지 않는 성분 부분을 포함할 수 있다. 본원에 제공된 조성물의 임의의 실시양태에서 사용하기에 적합한 성분은 개선된 식물 건강 및/또는 개선된 작물 생산을 비롯한 개선된 농업 건강, 또는 개선된 수경재배 또는 가축 건강으로 귀결될 수 있다. 또한, 본원에 제공된 조성물의 실시양태는 조성물의 적용을 용이하게 한다.
본 발명에 따른 조성물은 에어로졸 디스펜서, 캡슐 현탁액, 저온 연무 농축액, 살포성 분말, 유화성 농축액, 수중유 에멀젼, 유중수 에멀젼, 캡슐화된 과립, 미세 과립, 종자 처리용 유동성 농축물, 가스(압력 하), 가스 발생 제품, 과립, 고온 연무 농축액, 거대과립, 미세과립, 오일 분산성 분말, 오일 혼화성 유동성 농축액, 오일 혼화성 액체, 페이스트, 식물 소엽(rodlet), 건조 종자 처리용 분말, 가용성 농축액, 용해성 분말, 액체 용액, 현탁 농축물(유동성 농축물), 수분산성 과립 또는 정제, 슬러리 처리용 수분산성 분말, 수용성 과립 또는 정제, 수용성 분말, 및 습윤성 분말과 같은 다양한 형태로 사용될 수 있다.
이러한 조성물에는, 분무 또는 살포 장치와 같은 적절한 장치에 의해 처리될 식물, 종자 또는 토양에 적용할 준비가 된 조성물뿐만 아니라, 토양이나 식물에 적용하기 전에 희석해야 하는 농축된 상업적 조성물(예, 농축물)도 포함된다.
일부 실시양태에서, 조성물은 토양 또는 화분용 토양이다. 토양 또는 화분용 토양은 비제한적인 예를 제공하기 위해 화분(planter), 화분(pot), 백 또는 밀봉된 백에 배치될 수 있다.
전달 방법
일부 실시양태에서, 방법은 진균병 (예를 들어, 백색 부패, 회색 곰팡이)을 갖는 토양, 농작물, 나무, 잔디, 또는 관상용 식물을 본원에 기재된 조성물로 처리하는 단계를 포함한다.
일부 실시양태에서, 조성물은 락테이트의 타겟 농도가 토양 중 및/또는 식물의 표면 상에서 달성될 때까지 토양, 작물, 나무, 잔디 또는 관상용 식물에 적용된다. 일부 실시양태에서, 토양 중 및/또는 식물 표면 상의 락테이트의 타겟 농도는 약 또는 적어도 약 50 ppm 락테이트, 75 ppm 락테이트, 100 ppm 락테이트, 125 ppm 락테이트, 150 ppm 락테이트, 175 ppm 락테이트, 200 ppm 락테이트, 300 ppm 락테이트, 400 ppm 락테이트, 500 ppm 락테이트, 600 ppm 락테이트, 700 ppm 락테이트, 800 ppm 락테이트, 900 ppm 락테이트, 1,000 ppm 락테이트, 1,100 ppm 락테이트, 1,200 ppm 락테이트, 1,300 ppm 락테이트, 1,400 ppm 락테이트, 1,500 ppm 락테이트, 1,600 ppm 락테이트, 1,700 ppm 락테이트, 1,800 ppm 락테이트, 1,900 ppm 락테이트, 2,000 ppm 락테이트, 2,500 ppm 락테이트, 3,000 ppm 락테이트, 3,500 ppm 락테이트, 5,000 ppm 락테이트, 또는 5,500 ppm 락테이트이다. 일부 실시양태에서, 토양 중 및/또는 식물 표면 상의 락테이트의 타겟 농도는 약 50 ppm 락테이트, 75 ppm 락테이트, 100 ppm 락테이트, 125 ppm 락테이트, 150 ppm 락테이트, 175 ppm 락테이트, 200 ppm 락테이트, 300 ppm 락테이트, 400 ppm 락테이트, 500 ppm 락테이트, 600 ppm 락테이트, 700 ppm 락테이트, 800 ppm 락테이트, 900 ppm 락테이트, 1,000 ppm 락테이트, 1,100 ppm 락테이트, 1,200 ppm 락테이트, 1,300 ppm 락테이트, 1,400 ppm 락테이트, 1,500 ppm 락테이트, 1,600 ppm 락테이트, 1,700 ppm 락테이트, 1,800 ppm 락테이트, 1,900 ppm 락테이트, 2,000 ppm 락테이트, 2,500 ppm 락테이트, 3,000 ppm 락테이트, 3,500 ppm 락테이트, 5,000 ppm 락테이트, 또는 5,500 ppm 락테이트 이하이다. 일부 실시양태에서, 조성물은 토양 중 및/또는 식물 표면 상에서 아세테이트의 타겟 농도에 도달할 때까지 토양 및/또는 식물 표면에 적용된다. 일부 실시양태에서, 토양 중 및/또는 식물 표면 상의 아세테이트의 타겟 농도는 약 또는 적어도 약 50 ppm 아세테이트, 75 ppm 아세테이트, 100 ppm 아세테이트, 125 ppm 아세테이트, 150 ppm 아세테이트, 175 ppm 아세테이트, 200 ppm 아세테이트, 300 ppm 아세테이트, 400 ppm 아세테이트, 500 ppm 아세테이트, 600 ppm 아세테이트, 700 ppm 아세테이트, 800 ppm 아세테이트, 900 ppm 아세테이트, 1,000 ppm 아세테이트, 1,100 ppm 아세테이트, 1,200 ppm 아세테이트, 1,300 ppm 아세테이트, 1,400 ppm 아세테이트, 1,500 ppm 아세테이트, 1,600 ppm 아세테이트, 1,700 ppm 아세테이트, 1,800 ppm 아세테이트, 1,900 ppm 아세테이트, 2,000 ppm 아세테이트, 2,500 ppm 아세테이트, 3,000 ppm 아세테이트, 3,500 ppm 아세테이트, 5,000 ppm 아세테이트, 또는 5,500 ppm 아세테이트이다. 일부 실시양태에서, 토양 중 및/또는 식물 표면 상의 아세테이트의 타겟 농도는 약 50 ppm 아세테이트, 75 ppm 아세테이트, 100 ppm 아세테이트, 125 ppm 아세테이트, 150 ppm 아세테이트, 175 ppm 아세테이트, 200 ppm 아세테이트, 300 ppm 아세테이트, 400 ppm 아세테이트, 500 ppm 아세테이트, 600 ppm 아세테이트, 700 ppm 아세테이트, 800 ppm 아세테이트, 900 ppm 아세테이트, 1,000 ppm 아세테이트, 1,100 ppm 아세테이트, 1,200 ppm 아세테이트, 1,300 ppm 아세테이트, 1,400 ppm 아세테이트, 1,500 ppm 아세테이트, 1,600 ppm 아세테이트, 1,700 ppm 아세테이트, 1,800 ppm 아세테이트, 1,900 ppm 아세테이트, 2,000 ppm 아세테이트, 2,500 ppm 아세테이트, 3,000 ppm 아세테이트, 3,500 ppm 아세테이트, 5,000 ppm 아세테이트, 또는 5,500 ppm 아세테이트 이하이다.
일부 실시양태에서, 토양 중 및/또는 식물 표면 상의 타겟 농도는 약 87.5 ppm L-락테이트 및 100 ppm 아세테이트, 175 ppm L-락테이트 및 200 ppm 아세테이트, 175 ppm L-락테이트 및 600 ppm 아세테이트, 175 ppm L-락테이트 및 800 ppm 아세테이트, 600 ppm L-락테이트 및 600 ppm 아세테이트, 또는 800 ppm L-락테이트 및 800 ppm 아세테이트이다.
본 발명에 따라 특정 식물 또는 토양에 적용되는 락테이트 및 아세테이트의 정확한 양은 특정 식물의 민감도, 적용 방법, 및 토양의 품질과 같은 현장 조건에 따라 달라질 것이다. 이들 인자 모두는 특정 적용을 위해 식물 또는 토양에 적용하기 위한 최적의 락테이트 및 아세테이트의 양을 결정하기 위해 당 분야의 숙련자에 의해 고려될 수 있다. 조성물은 병원체를 제어(예를 들어, 성장 또는 생존을 억제)하기에 유효한 양으로 식물 또는 토양에 적용된다. 작물(예: 마늘이나 양파와 같은 알리움 식물), 나무, 잔디 및 관상용 식물은 성장의 여러 단계를 거친다. 예를 들어 양파(알리움 식물)은 성장하는 동안 영양생장(vegetative), 결구(bulbing), 개화(추대)의 세 단계를 거친다. 일부 실시양태에서, 알리움 식물의 뿌리는 식물 성장의 영양생장, 결구 또는 개화 단계 동안 본 발명의 조성물과 접촉된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 식재 시점 또는 식재 시점 이전에 식물 또는 토양에 적용된다. 조성물은 또한 일단 식물이 토양 내에 정착되면 적용될 수도 있다. 조성물은 성장 단계에 관계없이 종자, 생식 영양 물질(reproductive vegetative material), 묘목 및/또는 확립된 식물에 적용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 작물, 나무, 잔디, 토양 또는 관상용 식물은 잠재적인 또는 실제의 진균 병원성 질병(예를 들어, 백색 부패, 회색 곰팡이)에 대해 처리된다. 식물 또는 토양은 외부 또는 내부에 있을 수 있다(예: 온실 또는 다른 에워쌈(enclosure). 식물은 관상용 식물, 작물 또는 수경재배 식물일 수 있다. 토양은 곡물, 야채, 과일, 견과류, 콩, 씨앗, 허브, 향신료, 균류, 관상용 식물(예: 꽃, 관목, 잔디 및 나무), 산업용 식물 및/또는 사료용으로 재배된 식물과 같은 모든 농산물 또는 원예 제품의 생산에 사용되는 토양일 수 있다. 일부 실시양태에서, 식물 또는 토양은 산업적, 상업적, 레크리에이션의, 또는 미적 가치를 나타낸다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 조성물은 식물을 처리하는 데 사용된다. 일부 실시양태에서, 식물은 포인세티아, 꽃, 루핀, 풀, 알팔파, 나무 또는 아이비이다. 일부 실시양태에서 식물은 식품 생산 식물이다. 일부 실시양태에서, 식물은 바나나, 카카오, 카놀라, 커피, 콩, 목화, 마늘, 양파, 리크(leek), 차이브(chive), 옥수수(maize), 밀, 쌀, 옥수수(corn), 엽채류, 감자, 토마토, 고추, 호박, 박, 오이, 베리, 포도 덩굴 또는 포도, 이과(pome), 핵과(drupe), 감귤류, 멜론, 열대 과일, 목화, 너트, 대두, 수수, 케인(cane), 조롱박(cucurbit), 양파, 가지(aubergine), 파스닙(parsnip), 대마초 (예: 대마), 허브, 담배 또는 콩류 식물이다. 식물은 알리움 식물일 수 있다. 알리움 식물의 비제한적인 예는 알리움 사티붐(Allium sativum), 알리움 케파(Allium cepa), 알리움 차이넨스(Allium chinense), 알리움 스티피타툼(Allium stipitatum), 알리움 스코에노프라숨(Allium schoenoprasum), 알리움 투베로숨(Allium tuberosum), 알리움 피스툴로숨(Allium fistulosum), 또는 알리움 암펠로프라숨(Allium ampeloprasum)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 방법은 조성물을 식물 또는 식물이 성장하고 있는 토양에 적용하는 단계를 포함한다. 조성물의 적용은 예를 들어, 스프링클러링, 분무(spraying), 관주, 담그기, 물주기, 작물 살포, 분무(misting), 고압 액체 주입, 또는 식물 또는 주변 토양에 조성물을 달리 적용하는 것을 포함하는 다양한 수단에 의해 달성될 수 있다. 조성물은 관개 시스템(irrigation system)을 사용하여 적용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 식물 자체, 예를 들어 잎, 줄기(stem), 식물 몸통(trunk), 식물의 대(stalk), 꽃, 가지, 과일, 뿌리, 새싹(shoot), 새싹(bud), 뿌리줄기, 종자, 또는 식물의 다른 부분에 적용되거나, 식물이 재배되고 있는 또는 그 주변의 토양에 적용된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 종자 코팅으로서 제제화되고, 방법은 종자를 조성물로 코팅하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 종자 코팅은 정전 종자 코팅(electrostatic seed coating)이다. 일부 실시양태에서, 종자 코팅은 미량 영양소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 종자 코팅은 진균과 같은 유해한 병원체로부터 식물 종자를 보호한다. 일부 실시양태에서, 종자 코팅은 대량 심기 기술을 위한 식물 종자의 균일한 크기를 가능하게 한다. 일부 실시양태에서, 종자 코팅은 발아율을 증가시키고, 묘목 생존을 증가시키고, 및/또는 작물 수확량을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 조성물은 분말로서 제제화되고, 방법은 분말을 식물 또는 식물 부분, 예를 들어 종자, 잎, 줄기(stem), 식물 몸통(trunk), 식물의 대(stalk), 꽃, 가지, 과일, 뿌리, 새싹(shoot), 새싹(bud), 뿌리줄기, 또는 식물의 다른 부분에 적용하거나, 식물이 재배되고 있는 또는 그 주변의 토양에 적용하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 조성물은 비료 또는 영양소와 함께 제형화되고, 방법은 조성물을 정지(disking) 또는 기경(tilling)을 통해 토양에 혼입시키는 것 또는 비료 또는 영양소를 식물에 적용하는 단계를 포함한다. 본 발명의 조성물은 식물 종자, 식물이 성장하는 토양, 식물 또는 종자가 곧 식재될 토양, 식물(예를 들어, 식물 뿌리), 또는 이들의 조합에 적용될 수 있다.
락테이트와 아세테이트의 특정 농도 및/또는 농도 비율은 토양에서 최적의 생물학적 제어 수준을 유지하는 데 중요할 수 있다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본 발명의 방법은 토양 중의 락테이트 및 아세테이트의 농도를 모니터링하거나 측정하고 토양 중의 타겟 농도를 설정, 복원 또는 유지하기 위해 본 발명의 조성물을 첨가하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 토양 중의 아세테이트 및 락테이트의 농도는 연속적으로, 매시간, 매일, 매주, 매월, 격월로 또는 4개월마다 모니터링된다. 일부 실시양태에서, 아세테이트 및/또는 락테이트의 농도가 토양에서 타겟 농도 미만으로 떨어지면, 아세테이트 및/또는 락테이트를 토양에 첨가하여 농도를 타겟 농도로 및/또는 타겟 농도 범위 내로 되돌린다. 락테이트 및 아세테이트 농도를 측정하는 대표적인 방법은 아래에서 논의된다.
실시양태에서, 조성물은 토양 및/또는 식물에 여러 번 적용된다. 실시양태에서, 토양 및/또는 식물은 약 또는 적어도 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20번 조성물과 접촉된다. 다양한 실시양태에서, 각각의 접촉은 개별적으로 약 또는 적어도 약 12시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 8일, 9일, 10일, 11일, 12일, 13일, 14일, 15일, 16일, 17일, 18일, 19일, 20일, 21일, 22일, 23일, 24일 또는 25일의 범위의 시간 간격만큼 이전 접촉으로부터 이격된다. 다양한 실시양태에서, 조성물은 식재 전 약 또는 적어도 약 12시간, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 8일, 9일, 10일, 11일, 12일, 13일, 14일, 15일, 16일, 17일, 18일, 19일, 20일, 21일, 22일, 23일, 24일, 또는 25일의 범위의 시간 간격으로 식재 시점 이전에 토양에 적용된다. 실시양태에서, 조성물은 식재 시에 토양 및/또는 식물에 적용된다. 실시양태에서, 조성물은 식재로부터 10일, 14일, 28일 및 42일 후에 토양 및/또는 식물에 적용된다. 실시양태에서, 조성물은 분무(spray) 또는 점적(drip) 적용에 의해 적용된다. 실시양태에서, 조성물은 식재로부터 14일, 30일, 36일 및 42일 후에 적용된다. 실시양태에서, 조성물의 마지막 적용은 점적 적용에 의한 것이다.
실시양태에서, 조성물의 적용은 식물의 활력에 부정적인 영향을 미치지 않는다. 실시양태에서, 조성물의 적용은 식물에 독성이 없다.
일부 실시양태에서, 조성물은 식재 시점에 또는 식재 시점 이전에 식물 또는 토양에 적용된다. 조성물은 또한 일단 식물이 토양 내에 정착되면 적용될 수도 있다. 조성물은 종자, 생식 영양 물질, 묘목 및/또는 확립된 식물에 적용될 수 있다.
토양 특성화(Soil Characterization)
액체 또는 토양 샘플 중의 락테이트 및 아세테이트의 농도는 당 분야의 통상의 지식을 가진 자에게 친숙한 다양한 방법에 의해 결정될 수 있으며, 그러한 방법의 비제한적인 예는, 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)(예: Lawongsa, et al., "Determination of organic acids in soil by high performance liquid chromatography,", Soil Sci. Plant. Nutr. 33:299-302(1987)), 이온 크로마토그래피(예: Baziramakenga, et al., "Determination of organic acids in soil extracts by ion chromatography," Soil Biology and Biochemistry, 27:349-356 (1995)) 및 질량 분광법(예: Adeleke, "Origins, roles and fate of organic acids in soils: a review,” South African Journal of Botany, 108:393-406 (2017))을 포함한다.
토양 샘플 중의 유기산의 정량화 방법의 한 실시양태에서, KH2PO4 또는 NaH2PO4와 같은 산성 추출제를 사용하여 샘플로부터 산을 추출할 수 있다. 추출물은 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 또는 기체 크로마토그래피(GC)를 사용하여 분석할 수 있다.
병원체 특성화(Pathogen Characterization)
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 방법은 토양 중 또는 식물 상에서 병원성 진균의 존재를 검출하는 단계를 포함한다. 방법은 병원성 진균의 존재가 검출되는 경우에만 본 발명의 조성물을 토양에 첨가하거나 식물을 상기 조성물과 접촉시키는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 당 분야의 숙련자는 토양 중 또는 식물 상에서 진균 병원체의 존재를 결정하기 위한 적절한 방법을 결정할 수 있을 것이다. 토양 중 또는 식물 상에서 진균 병원체의 존재를 검출하는 방법의 비제한적 예에는 육안 검사, 현미경 기술, 차세대 시퀀싱, DNA 마이크로어레이, 매크로어레이(예: Lievens, et al. al., "Fungal plant pathogen detection in plant and soil samples using DNA macroarrays", Methods Mol. Biol. 835:491-507 (2012), 모든 목적을 위해 그 전체가 참고로 본 명세서에 포함됨) 및 PCR이 포함된다. 본 발명의 방법은 식물에 조성물을 적용하기 전, 적용하는 동안, 및/또는 적용한 후에 토양 중 또는 식물 상에서 병원성 진균의 역가를 측정함으로써 식물 병원성 진균의 성장을 억제, 제어, 감소 또는 제거하는데 있어서의 본 발명의 조성물의 유효성을 모니터링하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 방법은 토양 중 또는 식물 상의 병원성 진균의 역가 또는 성장 속도의 감소를 최적화하기 위해 토양 또는 식물에 적용되는 조성물 중의 락테이트 또는 아세테이트의 농도를 변형시키는 단계를 포함한다.
한 실시양태에서, 본 개시내용의 방법은 방법에 의해 처리된 식물 또는 토양과 관련된 미생물 군집(microbial community)의 조성을 결정하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 미생물 군집의 조성은 비제한적 예로서 PCR, 차세대 시퀀싱 및 DNA 마이크로어레이를 포함하는 당 분야의 숙련자에게 친숙한 기술을 사용하여 결정된다. 일부 실시양태에서, 미생물 군집의 조성은 16S 및/또는 18S rRNA 유전자의 서열분석에 의해 결정된다.
키트(Kit)
본 개시내용은 락테이트(예를 들어, L-락테이트) 및 아세테이트를 포함하는 조성물을 포함하는 키트를 제공한다. 일부 실시양태에서, 키트는 적용기(applicator)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 키트는 즉시 사용 가능한(ready-to-use) 키트이며, 상기 키트에 포함된 조성물은 추가 변경 없이 사용자가 사용할 준비가 되어 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 식물 또는 토양에 적용하기 위한 용기 내의 키트에 제공된다. 일부 실시양태에서, 용기는 조성물을 함유하는 스프레이 적용기이다. 일부 실시양태에서, 조성물은 농축된 액체 또는 고체이다. 이러한 실시양태에서, 조성물은 농축된 액체를 희석하거나 고체 조성물을 용해시키기 위해 물과 같은 액체에 첨가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 희석된 조성물이다. 일부 실시양태에서, 스프레이 적용기는 산업, 상업, 가정 정원사 또는 레크리에이션 목적으로 구성된다. 일부 실시양태에서, 키트는 노즐, 밸브, 분무기, 또는 본원에 기재된 조성물을 분배할 수 있는 임의의 다른 장치와 같은 분배 장치를 포함한다.
원하는 경우, 키트는 조성물 사용 및/또는 조성물 투여에 대한 지침(instructions)을 추가로 포함한다. 특정 실시양태에서, 지침은 다음 중 적어도 하나를 포함한다: 조성물의 성분에 대한 설명; 적용 양 및 기술; 예방책(precautions); 경고; 사용 금기(counter-indications); 토양 유기산 조성을 모니터링하는 방법에 대한 지침; 병원성 진균의 존재에 대해 토양을 모니터링하는 방법에 대한 지침; 토양 미생물군집의 구성을 결정하는 방법에 대한 지침; 및/또는 참조. 지침은 키트의 구성 요소에 직접 인쇄되거나 키트와 함께 제공된 별도의 시트, 팜플렛, 카드 또는 폴더로서 제공될 수 있다. 지침은 휴대용 데이터 저장 매체(예: 컴팩트 디스크 또는 USB 드라이브)에 디지털 형식으로 제공되거나 원격으로 액세스할 수 있는 서버에 원격으로 저장될 수 있다.
본 발명의 실시는 달리 지시되지 않는 한, 통상의 기술자의 이해의 범위 내에 있는 분자 생물학(재조합 기술 포함), 미생물학, 세포 생물학, 생화학 및 면역학의 통상적인 기술을 사용한다. 이러한 기술은 "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", 제2판(Sambrook, 1989); "Oligonucleotide Synthesis"(Gait, 1984); "Animal Cell Culture"(Freshney, 1987); "Methods in Enzymology" "Handbook of Experimental Immunology"(Weir, 1996); "Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells"(Miller and Calos, 1987); "Current Protocols in Molecular Biology"(Ausubel, 1987); "PCR: The Polymerase Chain Reaction", (Mullis, 1994); "Current Protocols in Immunology"(Coligan, 1991)과 같은 문헌에 충분히 설명되어 있다. 이들 기술은 본 발명의 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드의 생산에 적용 가능하며, 그 자체로 본 발명을 만들고 실행하는데 고려될 수 있다. 특정 실시양태에 대한 특히 유용한 기술은 다음 섹션에서 논의될 것이다.
하기 실시예는 본 발명의 검정, 스크리닝 및 치료 방법을 만들고 사용하는 방법에 대한 완전한 개시 및 설명을 당 분야의 숙련자에게 제공하기 위해 제시되며, 발명가가 자신의 발명으로 간주하는 발명의 범위를 제한하려는 것은 아니다.
실시예
실시예 1: 유기산 처리가 2종의 식물 진균 병원체의 시험관내 성장에 미치는 영향
백색 부패(알리움 뿌리 부패라고도 함)의 원인균인 스클레로티움 케피보룸, 및 회색 곰팡이의 원인균인 보트리티스 키네레아는 농업적으로 중요한 두 병원성 진균이다. S. 케피보룸은 알리움 속(예: 양파, 마늘 및 리크)의 식물에 영향을 미치는 토양 매개 식물 병원체(soil-borneplantpathogen)이다. B. 키네레아는 포도, 토마토, 대황(rhubarb), 대마초 및 딸기를 포함한 다양한 식물 종에 영향을 미치는 식물 병원체이다. B. 키네레아는 수확 전후에 작물을 공격할 수 있으며 신선한 과일과 채소에서 가장 중요한 수확후 병원체 중 하나로 간주된다. 이들 진균에 대한 기존 치료법은 수백만 파운드의 합성 화학 물질을 사용하여 환경 및 인간 건강에 지속 불가능한 결과를 초래한다. 따라서, 이들 진균 병원체의 성장을 제어하는 데 있어 환경적으로 지속 가능하고 무독성인 유기산 조성물의 효능을 평가하기 위한 실험이 완료되었다.
락테이트와 아세테이트는 건강한 토양에 중요한 대사 산물로 확인되었다. 따라서 스클레로티움 케피보룸 및 보트리티스 키네라를 억제하는 락테이트와 아세테이트의 효능을 평가하기 위한 실험을 완료하였다.
실험의 첫번째 라운드에서, 아세테이트, 그리고 락테이트 단독 또는 아세테이트와 혼합하여, 거울상 이성질체의 우선성(d), 좌선성(l) 및 라세미 혼합물의 효과를, 스클레로티움 케피보룸 및 보트리티스 키네라의 성장에 대해 평가했다(표 1A 및 1B). 락테이트의 입체 중심의 절대 배열(absolute configuration)은 R 또는 S로 지정된다. 아세테이트는 성장을 유의하게 억제했으며 억제는 표 1A 및 1B(아래)에서 평가된 농도에서 아세테이트 농도와 함께 증가했다. S. 케피보룸에 대하여, 락테이트 L(S)과 락테이트 DL(라세미 혼합물)은 성장을 억제한 반면 락테이트 D(R)는 탄소원으로 작용하는 것으로 나타났다. 락테이트 DL과 아세테이트는 S. 케피보룸 및 B. 키네라 둘 다의 성장을 억제했다. 이러한 결과에 기초하여, 락테이트 L(S) 및 아세테이트의 더 높은 농도의 혼합물을 평가하기 위해 추가 실험이 수행되었다(표 2A 및 2B).
성장에 대한 더 높은 농도의 아세테이트 및 락테이트 L(S)의 효과를 평가하였다(표 2A 및 2B). S. 케피보룸 성장에 대한 아세테이트의 억제 효과는 평가된 모든 농도에서 아세테이트 농도에 따라 증가했다(표 1A, 1B, 2A 및 2B). 반면 락테이트 L(S) 단독은 S. 케피보룸의 성장 억제에 있어서 평가된 농도에서 유효하지 않았다. 락테이트 L(S) 및 아세테이트는 락테이트 L(800 ppm) 및 아세테이트(800 ppm)에서 성장을 완전 억제하여 성장 억제에 매우 유효하였다. 따라서 락테이트 L(S)과 아세테이트 사이에 상승적인 성장 억제 효과가 관찰되었다. 따라서, 다양한 락테이트 L(S) + 아세테이트 조성물이 S. 케피보룸의 성장에 미치는 영향을 추가로 조사하기 위한 실험의 마지막 라운드가 완료되었다.
아세테이트와의 모든 levo-락테이트(L-락테이트) 혼합물은 ≥50% 수준에서 S. 케피보룸에 대하여 통계적으로 유의한 효능을 나타내었다(표 3). 175 ppm L-락테이트와 혼합할 때 600 ppm에서 800 ppm으로 아세테이트 농도를 증가시키자 효능이 증가했다. 600 ppm 또는 800 ppm의 L-락테이트 수준을 각각 600 ppm 아세테이트 또는 800 ppm 아세테이트와 혼합할 때 거의 완전한 성장 억제가 달성되었다. 두 유기산의 높은 농도는 최대 성장 억제를 초래했다.
B. 키네라 및 S. 케피보룸의 성장에 대한 L(S) 락트산, 락트산 및 아세트산, 아세트산의 억제 효과의 요약이 도 1에 제공된다. L(S) 락트산은 낮은 농도에서 S. 케피보룸의 성장을 억제했으나, 더 높은 농도에서 탄소원으로 사용되었다. 유사하게 아세트산은 낮은 농도에서 B. 키네라의 성장을 억제했으나, 더 높은 농도에서 탄소원으로 사용되었다. 레보-락테이트와 아세테이트의 조합은 S. 케피보룸의 성장을 억제하기 위해 상승적으로 작용했다.
[표 1A]
[표 1B]
[표 2A]
[표 2B]
[표 3]
실시예 2: 3종의 식물 병원체에 대한 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물의 시험관내 시험
다양한 종의 피티움(Pythium) 및 스클레로티니아(Sclerotinia) 진균은 전 세계적으로 농업 및 원예 산업에서 중요한 식물 병원체이다. 두 진균 그룹 모두 수십종의 상업용 작물에 영향을 미치며 상품 품질, 수확량 및 이익에 상당한 손실을 초래할 수 있다. 피티움 종은 가장 빈번하게 어린 묘목 뿌리 부패 및 식물 쇠퇴 및 죽음과 관련이 있다. 피티움 운키눌라툼은, 레터스의 뿌리 부패와 식물 죽음을 유발하고 캘리포니아에서 경제적으로 해를 끼치는 병원균이 되었다. 다양한 스클레로티니아 종 중에서, 스클레로티니아 스클레로티오룸과 스클레로티니아 미노르는 경제적으로 가장 중요한 두 가지 식물 병원체이다. 두 종 모두 매우 넓은 숙주 범위를 가지며 많은 식물의 근두 부패(crown rot)를 일으킨다. 게다가, 스클레로티니아 스클레로티오룸은 엽면 병해(foliar blights)와 부패를 초래하는 공중 포자기(aerial spore stage)를 갖는다.
생물방제제(biocontrol agent)(2020년 3월 20일에 출원된 미국 특허출원 62/992,364에 기술된 방법에 따라 제조되었으며, 그 개시 내용은 모든 목적을 위해 그 전체 내용이 본원에 포함됨)와 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물의 세 가지 식물 병원체의 성장을 방지하거나 억제능력을 시험하였다.
생물방제제와, 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물을, 각각 사용하여, 감자 덱스트로스 한천(PDA: potato dextrose agar) 아가로스 플레이트를 제조하였는데, 이 플레이트는 스트렙토마이신도 함유하였다. 생물방제제와, 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물을, PDA에 1:1 비율(조성)로 개별적으로 첨가하여(예: 스트렙토마이신-PDA 180ml와 생물방제제(BCA) 180ml를 혼합) 2 세트의 페트리 플레이트를 제조하였다. 음성 대조군으로서, 생물방제제, 또는, 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물을, 첨가하지 않고(즉, 생물방제제 또는 조성물 대신 물을 첨가함) 페트리 플레이트 세트를 제조하였다. 제조된 페트리 플레이트를 냉각 후 제조 당일 접종하였다. PDA 플레이트에서 아세테이트 및 L-락트산 각각의 최종 농도는 각각 800 ppm이었다.
실험을 위한 접종원을 제공하기 위해, 감자 덱스트로스 한천에서 자란 각 진균 병원체의 균사 배양물을 준비했다. 위에서 설명한 대로 준비된 신선한 PDA 플레이트에 준비된 균사체 배양물에서 취한 하나의 5mm 직경의 한천 플러그를 접종했다. 각 플러그는 접종되는 PDA 플레이트의 중앙에 배치되었다. 각 병원체의 성장을 3가지 처리(즉, 생물방제제, 아세테이트 및 L-락트산 조성물, 및 음성 대조군) 각각에 대해 3중으로 평가하였다. 그 다음, 접종된 플레이트를 어두운 인큐베이터에서 실온에서 인큐베이션하였다.
진균 성장에 대한 데이터는 2, 3, 4, 7일에 기록되었다. 진균 콜로니에 대한 사진을 촬영하였다(도 2A-2D, 3A-3D 및 4A-4C). ImageJ 소프트웨어를 사용하여 사진을 분석하여 진균 성장 면적을 결정했다(도 2E, 3E 및 4D). 예상대로 스클레로티니아 스클레로티오룸 및 스클레로티니아 미노르의 성장은 음성 대조군 플레이트(H2O)에서 빨랐으며 4일 후에 최대 면적(페트리 플레이트의 총 면적)에 도달했다. 성장 속도는 아세테이트 + L-락트산 조성물(락테이트+아세테이트)을 함유하는 플레이트에서 감소되었다. 생물방제제(BCA)를 포함하는 플레이트에서는 성장이 일어나지 않았다.
피티움 운키눌라툼의 경우, 락테이트 + 아세테이트 플레이트에서 어떤 날에도 성장이 일어나지 않았다. 또한, 생물방제제(BCA)를 함유하는 플레이트에서는 성장이 일어나지 않았다.
아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물은 평가된 3종의 진균 병원체 모두의 성장을 제어할 수 있었다.
실시예 3: 8가지 식물 병원체에 대한 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물의 시험관내 시험
보트리티스 키네레아, 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 피토프토라 칵토룸, 리족토니아 솔라니, 스클레로티움 케피보룸, 및 베르티킬리움 달리아이를 포함하는 농업적으로 중요한 진균의 성장을 제어하는 생물방제제의 효능이 평가되었다. 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이는 특이적으로 딸기만의 위조병(fusarium wilt)의 원인이 된다. 스클레로티움 케피보룸 또한 숙주 범위가 좁고 알리움 작물의 백색 부패를 일으킨다. 감염된 딸기에서 콜레토트리쿰 아쿠타툼, 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이, 마크로포미나 파세올리나, 및 피토프토라 칵토룸의 4종의 진균이 단리되었다.
감자 덱스트로스 한천 플레이트를 준비하고, 각 진균 균주를 접종하고, 실시예 2에 기재된 방법에 따라 배양하였다.
진균 성장에 대한 데이터는 접종으로부터 4일 및 7일 후에 기록되었다. 진균 콜로니의 사진을 촬영하였다. ImageJ 소프트웨어를 사용하여 사진을 분석하여 진균 성장 면적을 결정했다(도 5A-5H).
모든 종은 물 대조군 Strep-PDA 플레이트에서 예상대로 성장했다. 7일 후에는 빠르게 성장하는 종이 플레이트 전체를 뒤덮었다(=56.7 cm2): 보트리티스, 마크로포미나, 리족토니아, 스클레로티움.
적당히 빠르게 성장하는 종은 콜레토트리쿰 (12.6 cm2), 푸사리움 (21.0 cm2), 및 피토프토라 (9.7 cm2)였다. 베르티킬리움은 천천히 자라는 균류이며 7일후에 3.1cm2에 도달했다(표 2).
7일 후에는 아세테이트 및 L-락테이트(아세테이트 & 락트산)를 함유하는 조성물이 피토프토라의 성장을 완전 억제하였으며(= 0.2 cm2, 원래의 한천 플러그의 면적) 베르티킬리움의 성장을 71% 감소시켰다(0.9 대 3.1 cm2). PDA 플레이트 중의 아세테이트 및 락트산 각각의 최종 농도는 각각 800 ppm이었다. 스클레로티움 케피보룸 성장은 54% 감소했다(26.3 대 56.7 cm2). 나머지 종의 경우, 아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물은 22%에서 42%로 성장 감소를 초래하였다.
콜레토트리쿰, 피토프토라, 리족토니아, 스클레로디움, 및 베르티킬리움의 성장은 상기 생물학적 제어제에 의해 완전 억제되었다. 보트리티스 (3.4 cm2), 푸사리움 (3.4 cm2), 마크로포미나(3.9 cm2) 각각은 생물학적 제어제의 존재하에서 거의 성장을 나타내지 않았다.
아세테이트 및 L-락트산을 함유하는 조성물은 평가된 8종 진균 병원체 모두의 성장을 제어할 수 있었다.
다른 실시예
전술한 설명으로부터, 다양한 용법 및 조건에 적응시키기 위해 본 명세서에 기재된 발명에 변형 및 수정이 이루어질 수 있음이 명백할 것이다. 이러한 실시예는 또한 다음 청구범위의 범위 내에 있다.
본원에서 변수의 정의에서 요소(element) 목록의 열거는, 나열된 요소의 임의의 단일 요소 또는 조합(또는 하위 조합)으로서 그 변수의 정의를 포함한다. 본 명세서에서 실시양태의 열거는, 임의의 단일 실시양태로서 또는 임의의 다른 실시양태 또는 그 부분과 조합하여 그 실시양태를 포함한다.
본원은 주제에 있어서 미국 가출원 번호 62/992,364에 기술된 발명과 관련될 수 있으며, 상기 미국 가출원의 개시 내용은 모든 목적을 위해 그 전체가 참고로 여기에 포함된다. 본 명세서에 언급된 모든 특허 및 간행물은, 각각의 독립 특허 및 간행물이 참조로 포함되는 것으로 구체적이고 개별적으로 표시된 것과 동일한 정도로, 참조로 여기에 포함된다.
Claims (41)
- 좌선성 락테이트(L-락테이트) 및 아세테이트를 포함하는 조성물로서,
상기 조성물이 우선성 락테이트(D-락테이트)를 실질적으로 포함하지 않는 조성물. - 제1항에 있어서,
L-락테이트 및 아세테이트 각각의 양이 조성물과 접촉하는 진균 병원체의 성장 또는 생존을 억제하는데 유효한 조성물. - 제1항 또는 제2항에 있어서,
담체를 추가로 포함하는 조성물. - 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물이 약 50 ppm∼약 1,600 ppm의 L-락테이트 및 약 50 ppm∼약 1,600 ppm의 아세테이트를 포함하는 조성물. - 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물이 약 400 ppm 이상의 L-락테이트 및 약 400 ppm 이상의 아세테이트를 포함하는 조성물. - 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물이 약 800 ppm 이상의 L-락테이트 및 약 800 ppm 이상의 아세테이트를 포함하는 조성물. - 진균의 성장을 감소 또는 제거하는 방법으로서,
상기 진균을 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉시켜 상기 진균의 성장을 감소 또는 제거하는 단계를 포함하는 방법. - 식물 중 또는 식물 상의 진균 질병을 억제하는 방법으로서,
상기 진균을 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉시켜 상기 진균 질병을 억제하는 단계를 포함하는 방법. - 알리움 식물 상에서 및/또는 알리움 성장 배지 중에서 백색 부패를 억제하는 방법으로서,
상기 알리움 식물 및/또는 상기 성장 배지를 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉시켜 상기 알리움 식물 상 및/또는 상기 알리움 성장 배지 중에서 백색 부패를 억제하는 단계를 포함하는 방법. - 식물 또는 성장 배지에서 회색 곰팡이를 억제하는 방법으로서,
상기 식물 및/또는 상기 성장 배지의 표면을 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉시켜 회색 곰팡이를 억제하는 단계를 포함하는 방법. - 제8항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 식물이 식용 작물, 관상용 식물, 나무 또는 잔디인 방법. - 제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 식물이 알리움 속에 속하는 방법. - 제7항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 진균이 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 속(genus)에 속하는 방법: 보트리티스(Botrytis), 콜레토트리쿰(Colletotrichum), 푸사리움(Fusarium), 마크로포미나(Macrophomina), 피토프토라(Phytophthora), 피티움(Pythium), 리족토니아(Rhizoctonia), 스클레로티니아(Sclerotinia), 스클레로티니아케아이(Sclerotiniaceae), 스클레로티움(Sclerotium), 및 베르티킬리움(Verticillium). - 제13항에 있어서,
상기 진균이 보트리티스 키네레아(Botrytis cinerea)인 방법. - 제13항에 있어서,
상기 진균이 콜레토트리쿰 아쿠타툼(Colletotrichum acutatum)인 방법. - 제13항에 있어서,
상기 진균이 푸사리움 옥시스포룸 f. sp. 프라가리아이(Fusarium oxysporum f. sp. fragariae)인 방법 - 제13항에 있어서,
상기 진균이 마크로포미나 파세올리나(Macrophomina phaseolina)인 방법. - 제13항에 있어서,
상기 진균이 피토프토라 칵토룸(Phytophthora cactorum)인 방법. - 제13항에 있어서,
상기 진균이 피티움 운키눌라툼(Pythium uncinulatum)인 방법. - 제13항에 있어서,
상기 진균이 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani)인 방법. - 제13항에 있어서,
상기 진균이 스클레로티니아 미노르(Sclerotinia minor)인 방법. - 제13항에 있어서,
상기 진균이 스클레로티움 케피보룸(Sclerotium cepivorum)인 방법. - 제13항에 있어서,
상기 진균이 스클레로티니아 스클레로티오룸(Sclerotinia sclerotiorum)인 방법. - 제13항에 있어서,
상기 진균이 베르티킬리움 달리아이(Verticillium dahliae)인 방법. - 제5항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 진균이 토양 또는 다른 성장 배지에 존재하는 방법. - 제7항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 진균이 식물의 지상에 존재하는 방법. - 알리움 식물 성장을 위한 토양 또는 성장 배지의 제조 방법으로서,
상기 토양 또는 성장 배지를 L-락테이트 및 아세테이트를 포함하는 조성물과 접촉시켜 상기 토양 또는 성장 배지를 제조하는 단계를 포함하는 방법. - 식물을 성장시키는 동안 식물 표면을 보호하는 방법으로서,
상기 식물 표면을 L-락테이트 및 아세테이트를 포함하는 조성물과 접촉시켜 상기 식물 표면을 보호하는 단계를 포함하는 방법. - 제9항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 식물이 알리움 사티붐(Allium sativum), 알리움 케파(Allium cepa), 알리움 차이넨스(Allium chinense), 알리움 스티피타툼(Allium stipitatum), 알리움 스코에노프라숨(Allium schoenoprasum), 알리움 투베로숨(Allium tuberosum), 알리움 피스툴로숨(Allium fistulosum), 또는 알리움 암펠로프라숨(Allium ampeloprasum)인 방법. - 제28항에 있어서,
상기 식물이 식용 작물, 관상용 식물, 나무 또는 잔디인 방법. - 제7항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 방법이 토양 또는 성장 배지에서 진균 성장 속도를 감소시키는 방법. - 제7항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 방법이 식물 상에서 진균 성장 속도를 감소시키는 방법. - 제7항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서,
접촉이 스프링클러의 사용, 분무(spraying), 점적(dripping) 또는 관주(drenching)를 포함하는 방법. - 제33항에 있어서,
진균이 토양 중에 존재하고 토양 관주에 의해 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉되는 방법. - 제33항 또는 제34항에 있어서,
진균이 식물 상에 존재하고 스프레이 병, 분무기, 스프링클러, 노즐 또는 드립 라인(drip line)으로부터의 L-락테이트 및 아세테이트와 접촉되는 방법. - 제9항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 접촉 후, 토양 또는 성장 배지 중 및/또는 식물 상의 L-락테이트의 농도는 약 40 ppm∼약 5000 ppm이고, 토양 또는 성장 배지 중의 아세테이트의 농도는 약 50 ppm∼약 5000 ppm인 방법. - 제36항에 있어서,
상기 접촉 후, 상기 토양 또는 성장 배지 및/또는 식물 표면은 약 1:6∼약 6:1의 중량비(락테이트:아세테이트)로 L-락테이트 및 아세테이트를 포함하는 방법. - 제9항 또는 제10항에 있어서,
상기 성장 배지가 생존 가능한 병원성 진균을 실질적으로 포함하지 않는 방법. - 제9항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 성장 배지가 액체 또는 고체인 방법. - L-락테이트 및 아세테이트를 포함하는 식물 성장 배지로서,
상기 식물 성장 배지가 우선성 락테이트(D-락테이트)를 실질적으로 포함하지 않는 식물 성장 배지. - 제40항에 있어서,
상기 성장 배지가 화분용 토양(potting soil)인 성장 배지.
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