CN108004279A - 用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基及补料方法 - Google Patents

用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基及补料方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108004279A
CN108004279A CN201610935422.7A CN201610935422A CN108004279A CN 108004279 A CN108004279 A CN 108004279A CN 201610935422 A CN201610935422 A CN 201610935422A CN 108004279 A CN108004279 A CN 108004279A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fermentation
lovastatin
glycerine
culture medium
tank
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610935422.7A
Other languages
English (en)
Inventor
向中南
张葵
周镪
陈华桥
吉春光
王丁
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
CHONGQING DAXIN PHARMACEUTICAL Co Ltd
Peking University Founder Group Co Ltd
PKU Healthcare Industry Group
Original Assignee
CHONGQING DAXIN PHARMACEUTICAL Co Ltd
Peking University Founder Group Co Ltd
PKU Healthcare Industry Group
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by CHONGQING DAXIN PHARMACEUTICAL Co Ltd, Peking University Founder Group Co Ltd, PKU Healthcare Industry Group filed Critical CHONGQING DAXIN PHARMACEUTICAL Co Ltd
Priority to CN201610935422.7A priority Critical patent/CN108004279A/zh
Publication of CN108004279A publication Critical patent/CN108004279A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
    • C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明提供一种用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基，包括甘油10‑30g/L、麦芽糖50‑150g/L、酵母粉5‑20g/L、蛋白胨0‑3g/L、豆粕粉或棉籽粉40‑60g/L、氯化钠0.05‑0.2g/L、磷酸二氢钾0.2‑0.8g/L、硫酸锌0.2‑1g/L和消泡剂0.5‑3L/L。本发明还提供一种提高洛伐他汀发酵水平的方法，利用上述培养基，以土曲霉或红曲霉作为发酵菌种，通过在发酵中前期补加甘油，从而提高洛伐他汀的发酵水平。本方法有效解决了葡萄糖极强的代谢抑制作用问题，延长了发酵周期，提高了发酵水平，且成本低廉。

Description

用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基及补料方法
技术领域
本发明涉及微生物发酵及生物制药技术领域，具体地说，涉及一种用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基及补料方法。
背景技术
洛伐他汀(Lovastatin)，分子式C24H36O5，是一种胆固醇抑制剂，具有明显降血脂的作用，对危害现代人健康的心脑血管疾病效果显著。1979年日本科学家远藤从中药红曲中分离出来，1985年美国德克萨斯大学的布朗与戈尔兹坦两位科学家发现了洛伐他汀降胆固醇的药理依据，从而获得了诺贝尔医学奖。自1987年化学合成的洛伐它汀由美国FDA批准上市以来，该类药物被世界公认为治疗高脂血症、防治动脉硬化、冠心病和脑血管病的首选药物。目前市场上的洛伐他汀主要用于辛伐他汀的合成。
目前工业上采用微生物发酵法生产洛伐他汀，在现有的发酵技术中，发酵培养基配方不同的碳源和氮源对发酵水平的影响较大。随着洛伐他汀原料药价格的下降，该产品的生产工艺已不能满足企业的盈利需求。为了降低成本，增加市场竞争，寻求其他碳源和氮源并进行发酵工艺优化，降低发酵成本势在必行。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基。
本发明的另一目的是提供一种用于提高洛伐他汀发酵水平的补料方法。
为了实现本发明目的，本发明提供的洛伐他汀发酵用培养基，所述培养基中含有以下各组分：甘油10-30g/L、麦芽糖50-150g/L、酵母粉5-20g/L、蛋白胨0-3g/L、豆粕粉40-60g/L、氯化钠0.05-0.2g/L、磷酸二氢钾0.2-0.8g/L、硫酸锌0.2-1g/L和消泡剂0.5-3L/L。其中，豆粕粉可用棉籽粉代替，效果稍差。培养基初始pH值5.8-6.2，代谢期间不进行pH控制。
本发明使用的消泡剂包括陶氏DF103消泡剂(聚醚类)、DFC185消泡剂(硅醚类)和KH-570消泡剂(硅醚类)等中的至少一种。优选陶氏DF103消泡剂。
优选地，所述培养基中含有以下各组分：甘油20g/L、麦芽糖100g/L、酵母粉13g/L、蛋白胨1g/L、豆粕粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L、消泡剂1L/L。
本发明还提供一种提高洛伐他汀发酵水平的方法，利用上述洛伐他汀发酵用培养基，以土曲霉或红曲霉作为发酵菌种，通过在发酵中前期补加甘油，从而提高洛伐他汀的发酵水平。
前述的方法，待发酵培养基中总糖残量在3.5％以下开始补加浓度约50％的甘油水溶液，补加速率根据发酵液中甘油含量设定，控制发酵液中甘油含量在15-30g/L。
前述方法包括以下步骤：
1)种子液的制备：制得的种子液中活菌量为1×108-1×109CFU/mL；
2)洛伐他汀的发酵生产：按8-12％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3±0.2m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±2℃，通气量60-120m3/h，搅拌转速100-140rpm，罐压0.03-0.06MPa的条件下进行发酵培养，待发酵培养基中总糖残量在3.5％以下开始补加浓度50％的甘油，发酵结束前2天停止补加甘油，发酵周期为9-11天。
优选地，步骤2)按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。
其中，制备种子液时采用的种子罐培养基配方为：棉籽粉25g/L，蛋白胨10g/L，葡糖糖100g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，硫酸镁0.5g/L，氯化钠1.5g/L和泡敌1g/L。培养条件为：28±2℃，通气量0.5vvm，搅拌转速150rpm，罐压0.03-0.06MPa。
本发明发酵所用菌株为土曲霉CCTCC AF93208。其它可以用于洛伐他汀发酵生产的菌株也属于本发明保护范围。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
(一)本发明的洛伐他汀发酵用培养基，采用甘油和麦芽糖为碳源，豆粕粉、酵母粉、蛋白胨为氮源，与现有培养基配方中使用的葡萄糖、棉籽粉、蛋白胨等原料成本相差不大。
(二)本发明用于提高洛伐他汀发酵水平的补料方法，有效解决了葡萄糖极强的代谢抑制作用问题，延长了发酵周期，提高了发酵水平。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
以下实施例所用菌株为土曲霉CCTCC AF93208，由中国典型培养物保藏中心提供。所用消泡剂为美国陶氏DF103消泡剂(聚醚类)，浓度100。
实施例1用于提高洛伐他汀发酵水平的补料方法
本实施例提供的洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：甘油20g/L、麦芽糖100g/L、酵母粉13g/L、蛋白胨1g/L、豆粕粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L和消泡剂1L/L，初始培养基pH值6.12，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：制得的种子液中活菌量为5.4×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3.0m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。当发酵罐运行90小时，发酵液中总糖含量为3.2％时，开始补加流入50％的甘油水溶液，初始补加流速设置为4L/h，以后根据发酵液中甘油含量进行流加速率的调整，保持发酵液中甘油含量在15g/L左右，发酵结束前2天停止补甘油，发酵周期为246小时，发酵结束，放罐，发酵液pH为5.73，放罐体积3.3m3，洛伐他汀产量为12068mg/L。
其中，制备种子液时采用的种子罐培养基配方为：棉籽粉25g/L，蛋白胨10g/L，葡糖糖100g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，硫酸镁0.5g/L，氯化钠1.5g/L和泡敌1g/L。培养条件为：28±1℃，通气量0.5vvm，搅拌转速150rpm，罐压0.05MPa。
实施例2用于提高洛伐他汀发酵水平的补料方法
本实施例提供的洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：甘油20g/L、麦芽糖50g/L、酵母粉13g/L、蛋白胨1g/L、豆粕粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L和消泡剂1L/L，初始培养基pH值5.98，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：种子罐培养基同实施例1所述。培养条件为：28℃，通气量0.5vvm，搅拌转速150rpm，罐压0.03MPa。制得的种子液中活菌量为5.1×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有2.9m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。当发酵罐运行28小时，发酵液中总糖含量为3.35％时，开始补加流入50％的甘油水溶液，初始补加流速设置为4L/h，以后根据发酵液中甘油含量进行流加速率的调整，保持发酵液中甘油含量在20g/L左右，发酵结束前2天停止补甘油，发酵周期为250小时，发酵结束，放罐，发酵液pH为5.82，放罐体积3.5m3，洛伐他汀产量为11654mg/L。
实施例3用于提高洛伐他汀发酵水平的补料方法
本实施例提供的洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：甘油20g/L、麦芽糖150g/L、酵母粉13g/L、蛋白胨1g/L、豆粕粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L和消泡剂1L/L，初始培养基pH值6.08，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：种子罐培养基同实施例1所述。培养条件为：26℃，通气量0.5vvm，搅拌转速150rpm，罐压0.04MPa。制得的种子液中活菌量为4.2×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3.0m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。当发酵罐运行136小时，发酵液中总糖含量为3.43％时，开始补加流入50％的甘油水溶液，初始补加流速设置为4L/h，以后根据发酵液中甘油含量进行流加速率的调整，保持发酵液中甘油含量在30g/L左右，发酵结束前2天停止补甘油，发酵周期为250小时，发酵结束，放罐，发酵液pH为5.86，放罐体积3.1m3，洛伐他汀产量为10737mg/L。
实施例4用于提高洛伐他汀发酵水平的补料方法
本实施例提供的洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：甘油10g/L、麦芽糖50g/L、酵母粉5g/L、豆粕粉40g/L、氯化钠0.05g/L、磷酸二氢钾0.2g/L、硫酸锌0.2g/L和消泡剂0.5L/L，初始培养基pH值6.07，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：种子罐培养基同实施例1所述。培养条件为：29℃，通气量0.5vvm，搅拌转速150rpm，罐压0.05MPa。制得的种子液中活菌量为6.0×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3.0m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。当发酵罐运行26小时，发酵液中总糖含量为3.26％时，开始补加流入50％的甘油水溶液，初始补加流速设置为4L/h，以后根据发酵液中甘油含量进行流加速率的调整，保持发酵液中甘油含量在25g/L左右，发酵结束前2天停止补甘油，发酵周期为220小时，发酵结束，放罐，发酵液pH为6.03，放罐体积3.4m3，洛伐他汀产量为10854mg/L。
实施例5用于提高洛伐他汀发酵水平的补料方法
本实施例提供的洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：甘油30g/L、麦芽糖150g/L、酵母粉20g/L、蛋白胨3g/L、豆粕粉60g/L、氯化钠0.2g/L、磷酸二氢钾0.8g/L、硫酸锌1g/L和消泡剂3L/L，初始培养基pH值5.96，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：种子罐培养基同实施例1所述。培养条件为：30℃，通气量0.5vvm，搅拌转速150rpm，罐压0.06MPa。制得的种子液中活菌量为4.5×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3.0m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。当发酵罐运行142小时，发酵液中总糖含量为3.37％时，开始补加流入50％的甘油水溶液，初始补加流速设置为4L/h，以后根据发酵液中甘油含量进行流加速率的调整，保持发酵液中甘油含量在18g/L左右，发酵结束前2天停止补甘油，发酵周期为263小时，发酵结束，放罐，发酵液pH为5.80，放罐体积3.0m3，洛伐他汀产量为12333mg/L。
对比例1
洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：甘油20g/L、麦芽糖0g/L、酵母粉13g/L、蛋白胨1g/L、豆粕粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L和消泡剂1L/L，初始培养基pH值6.02，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：种子罐培养基同实施例1所述。培养条件略有变化。制得的种子液中活菌量为5.0×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3.1m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。发酵罐接入种子液后开始补加流入50％的甘油水溶液，初始补加流速设置为4L/h，以后根据发酵液中甘油含量进行流加速率的调整，保持发酵液中甘油含量在20g/L左右，发酵结束前2天停止补甘油，发酵周期为247小时，发酵结束，放罐，发酵液pH为5.97，放罐体积3.2m3，洛伐他汀产量为6041mg/L。
对比例2
洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：甘油20g/L、麦芽糖100g/L、蛋白胨14g/L、棉籽粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L和消泡剂1L/L，初始培养基pH值6.11，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：种子罐培养基同实施例1所述。培养条件略有变化。制得的种子液中活菌量为5.8×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有2.9m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。当发酵罐运行84小时，发酵液中总糖含量为3.17％时，开始补加流入50％的甘油水溶液，初始补加流速设置为4L/h，以后根据发酵液中甘油含量进行流加速率的调整，保持发酵液中甘油含量在20g/L左右，发酵结束前2天停止补甘油，发酵周期为252小时，发酵结束，放罐，发酵液pH为5.93，放罐体积3.3m3，洛伐他汀产量为10938mg/L。
对比例3
洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：葡萄糖180g/L、酵母粉13g/L、蛋白胨1g/L、豆粕粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L和消泡剂1L/L，初始培养基pH值6.15，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：种子罐培养基同实施例1所述。培养条件略有变化。制得的种子液中活菌量为6.2×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3.0m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下发酵培养185小时。发酵结束，放罐，发酵液pH为6.23，放罐体积2.6m3，洛伐他汀产量为8321mg/L。
对比例4
洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：甘油120g/L、麦芽糖100g/L、酵母粉13g/L、蛋白胨1g/L、豆粕粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L和消泡剂1L/L，初始培养基pH值6.10，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：种子罐培养基同实施例1所述。培养条件略有变化。制得的种子液中活菌量为4.6×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3.1m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养250小时，发酵结束，放罐，发酵液pH为6.05，放罐体积2.7m3，洛伐他汀产量为9324mg/L。
对比例5
洛伐他汀发酵用培养基含有以下各组分：葡萄糖50g/L、酵母粉13g/L、蛋白胨1g/L、豆粕粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L和消泡剂1L/L，初始培养基pH值6.08，代谢期间不进行pH控制。
发酵方法如下：
1、种子液的制备：种子罐培养基同实施例1所述。培养条件略有变化。制得的种子液中活菌量为5.2×108CFU/mL；
2、洛伐他汀的发酵生产：按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有2.9m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于28℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。当发酵罐运行35小时，发酵液中总糖含量为2.98％时，开始补加流入50％的葡萄糖水溶液，初始补加流速设置为4L/h，以后根据发酵液中总糖含量进行流加速率的调整，保持发酵液中总糖含量在20g/L左右，发酵结束前2天停止补葡萄糖，发酵周期为253小时，发酵结束，放罐，发酵液pH为5.86，放罐体积3.3m3，洛伐他汀产量为10001mg/L。
以上实施例1、2、3、4、5均采用本发明的培养基，甘油采取流加补料的方式，不同之处在于实施例2、3分别对麦芽糖用量的下限和上限进行验证，其余同实施例1，麦芽糖浓度低，补加甘油的量较大，麦芽糖浓度高，补加甘油的量较小，但是单位产量影响较大；实施例4、5验证培养基物料的使用下限和上限。对比例1采用本发明的培养基中不加麦芽糖，甘油采取流加补料的方式，菌丝前期生长出现问题，后面消耗了甘油，但是单位产量很低；对比例2以蛋白胨和棉籽粉为氮源，甘油采取流加补料的方式，与实施例1相比，洛伐他汀产量略有下降；对比例3采用葡萄糖为碳源，但不采取流加方式补料；对比例4中增加甘油初始配比，其余同实施例1，发酵过程中不采取流加的方式；对比例5采用葡萄糖为碳源，且采取葡萄糖流加方式补料。通过实施例与对比例的对比结果可以看出，采用本发明的培养基，采取流加补料的方式，有效解决了葡萄糖极强的代谢抑制作用问题，比以葡萄糖为碳源的发酵工艺极大地提高了发酵水平，大大降低了洛伐他汀发酵成本，且验证了培养基中各原料配比适中为宜。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (7)

1.一种洛伐他汀发酵用培养基，其特征在于，所述培养基中含有以下各组分：甘油10-30g/L、麦芽糖50-150g/L、酵母粉5-20g/L、蛋白胨0-3g/L、豆粕粉或棉籽粉40-60g/L、氯化钠0.05-0.2g/L、磷酸二氢钾0.2-0.8g/L、硫酸锌0.2-1g/L和消泡剂0.5-3L/L，pH值5.8-6.2，代谢期间不进行pH控制；
其中，所述消泡剂包括陶氏DF-103消泡剂、DFC185消泡剂和KH-570消泡剂中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基中含有以下各组分：甘油20g/L、麦芽糖100g/L、酵母粉13g/L、蛋白胨1g/L、豆粕粉或棉籽粉50g/L、氯化钠0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸锌0.5g/L、消泡剂1L/L。
3.一种提高洛伐他汀发酵水平的方法，其特征在于，利用权利要求1或2所述的培养基，以土曲霉或红曲霉作为发酵菌种，通过在发酵中前期补加甘油，从而提高洛伐他汀的发酵水平。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，待发酵培养基中总糖残量在3.5％以下开始补加浓度50％的甘油水溶液，补加速率根据发酵液中甘油含量设定，控制发酵液中甘油含量在15-30g/L。
5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)种子液的制备：制得的种子液中活菌量为1×108-1×109CFU/mL；
2)洛伐他汀的发酵生产：按8-12％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3±0.2m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于温度28±2℃，通气量60-120m3/h，搅拌转速100-140rpm，罐压0.03-0.06MPa的条件下进行发酵培养，待发酵培养基中总糖残量在3.5％以下开始补加浓度50％的甘油，发酵结束前2天停止补加甘油，发酵周期为9-11天。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤2)按10％的接种量，将步骤1)制备的种子液接入装有3m3洛伐他汀发酵用培养基的容积为5吨的发酵罐中，于28±1℃，通气量90m3/h，搅拌转速120rpm，罐压0.05MPa的条件下进行发酵培养。
7.根据权利要求3-6任一项所述的方法，其特征在于，发酵所用菌株为土曲霉CCTCCAF93208。
CN201610935422.7A 2016-11-01 2016-11-01 用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基及补料方法 Pending CN108004279A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610935422.7A CN108004279A (zh) 2016-11-01 2016-11-01 用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基及补料方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610935422.7A CN108004279A (zh) 2016-11-01 2016-11-01 用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基及补料方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108004279A true CN108004279A (zh) 2018-05-08

Family

ID=62047307

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610935422.7A Pending CN108004279A (zh) 2016-11-01 2016-11-01 用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基及补料方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108004279A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111718970A (zh) * 2019-03-21 2020-09-29 福安药业集团烟台只楚药业有限公司 一种高产洛伐他汀菌的发酵方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102559795A (zh) * 2010-12-20 2012-07-11 北大方正集团有限公司 发酵生产洛伐他汀的方法和所用发酵培养基
CN105219653A (zh) * 2015-09-22 2016-01-06 浙江师范大学 高产洛伐他汀的棒曲霉（Aspergillus clavatus）Ac-32菌株及其应用
CN105602856A (zh) * 2015-12-16 2016-05-25 浙江师范大学 黑曲霉（Aspergillus niger）An-19菌株及其用于洛伐他汀的生产的用途和发酵方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102559795A (zh) * 2010-12-20 2012-07-11 北大方正集团有限公司 发酵生产洛伐他汀的方法和所用发酵培养基
CN105219653A (zh) * 2015-09-22 2016-01-06 浙江师范大学 高产洛伐他汀的棒曲霉（Aspergillus clavatus）Ac-32菌株及其应用
CN105602856A (zh) * 2015-12-16 2016-05-25 浙江师范大学 黑曲霉（Aspergillus niger）An-19菌株及其用于洛伐他汀的生产的用途和发酵方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
陈泉等: "《高产Monacolin K红曲霉菌种的筛选及液态发酵条件优化》", 《中国酿造》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111718970A (zh) * 2019-03-21 2020-09-29 福安药业集团烟台只楚药业有限公司 一种高产洛伐他汀菌的发酵方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108713558B (zh) 一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂
CN1661001A (zh) 果醋液固两态串淋发酵法及其发酵设备
CN106434401A (zh) 一种富含麦角甾醇的酵母菌株及麦角酵母粉的制备方法
CN103290070B (zh) 一种连续流加补料发酵生产柠檬酸的方法
CN110656148A (zh) 一种静息细胞转化植物甾醇制备去氢表雄酮的方法
CN114621836A (zh) 黄酒酒曲及其制备方法
CN110218713A (zh) 一种提高桔青霉产核酸酶p1酶活的方法
CN108004279A (zh) 用于提高洛伐他汀发酵水平的发酵培养基及补料方法
CN106434823A (zh) 一种头孢菌素c的发酵方法
CN101538592A (zh) 用寇氏隐甲藻工业化发酵生产二十二碳六烯酸的方法
EP0136805B1 (en) Industrial-scale process for the production of polyols by fermentation of sugars
CN109628509B (zh) 半连续发酵工艺生产吡咯喹啉醌的方法
CN108277240B (zh) 一种发酵制备柠檬酸的工艺
CN104561168A (zh) 发酵生产洛伐他汀用发酵培养基及发酵过程中的补水方法
EP0136802B1 (en) Industrial-scale process for the production of polyols by fermentation of sugars (1111111)
CN108085359B (zh) 一种11α-羟基-4-烯-3,17-雄甾二酮的生产方法
CN110305913B (zh) 一种糖质原料生产四甲基吡嗪的方法
EP0136803A2 (en) Industrial-scale process for the production ofpolyols by fermentation of sugars
CN102140407B (zh) 灌窖发酵生产浓香型白酒的方法
CN105695527A (zh) 洛伐他汀发酵用培养基及发酵过程中的补料方法
CN107541407B (zh) 一种富含γ-氨基丁酸的红曲酒酿造方法
CN105524896A (zh) 粘质沙雷氏菌脂肪酶发酵产酶及其提高酶活的方法
CN105861410B (zh) 一种提高酪酸菌生长效率的方法
CN107177508A (zh) 一种生物法合成生产长链十二碳二元酸的方法
CN106497995B (zh) 一种多阶段发酵生产利普司他汀的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20180508

RJ01 Rejection of invention patent application after publication