CN107999530A - 一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法 - Google Patents

一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法。本发明利用电动力学强化微生物修复，可极大的提高微生物的活性，进而提高微生物对石油烃污染的降解效果，提高修复效率。将电动力学修复技术与微生物耦合起来，可有效提高微生物及营养物质的活性及传输、扩散，并且具有高度的定向性，因此可显著节约经济及时间成本。

Description

一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法
技术领域
本发明属于石油烃污染土壤的修复技术领域，具体涉及一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法。
背景技术
随着社会经济的快速发展世界，相关行业对石油需求量急剧增加，使得石油开采规模呈指数增长趋势。但伴随着对石油的需求，危害也潜伏在人民的生活中，在石油开采、勘探、运输过程中，会由于多种天然及人为因素导致部分原油渗透到土壤、地表水、地下水，对生态环境造成很大破坏，直接危害到人类健康与生活。
针对于石油污染土壤带来的严重危害，发达国家已经对此给予了高度重视，分别采取了相应的处理技术进行油污土壤的修复。国内近年来大力提高土壤修复技术，最为常用的属于微生物修复技术。具有成本低、处理彻底、环保、无二次污染的特点，但在对于污染程度不同的地区以及石油烃成分的不同，微生物修复表现出局限性。
传统的石油烃去除方法是将营养物质注入地下提高微生物的活性和数量，但单纯的生物修复周期较长，且修复效果受限与土壤自身理化性质。
发明内容
发明目的：为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法,利用电动力学强化微生物修复的技术，通过电动力学耦合强化微生物的活性及营养物质的传输、扩散。
技术方案：一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，包括如下步骤：
(1)污染区域准备：在污染区域四周设置止水帷幕；
(2)石油降解菌培养：本设计以原油作为唯一碳源，配制成原油液体培养基，再以被石油污染的土壤作为菌种来源添加到原油液体培养基中，在微生物生长最适温度下摇床培养5～7d，再转接到新鲜的原油液体培养基中进行富集培养；两个周期过后，挑去菌液涂布于含油固体培养基中进行平板培养，即可获得生长良好的石油降解菌落；最后通过多次划线分离平板培养可得到纯种高效石油降解菌株；
(3)菌群培养及菌剂制备：将所得菌株与牛肉膏、蛋白胨、无机盐进行混合制得菌剂；
(4)菌剂投加：向污染土壤中分别均匀喷洒菌剂并进行翻搅，通过地表喷洒及地下水注射的方式进行补水，使含水率保持在60％左右；
(5)电动力耦合：在污染区域内布设电极，对施加菌剂的污染土层施加电场。
进一步的，所述步骤2中原油培养基七水硫酸镁占0.1-0.3％、磷酸氢二钾占3-5％、硝酸铵3-5％、磷酸二氢钾5-7％、原油0.4-0.6％、氯化钙及七水硫酸铁占0.5-1.5％，EDTA占1.0-1.8％。
进一步的，所述步骤2中原油培养基七水硫酸镁占0.2％、磷酸氢二钾占4％、硝酸铵4％、磷酸二氢钾6％、原油0.5％、氯化钙及七水硫酸铁占1％，EDTA占1.4％。
进一步的，所述步骤2中菌落包括邻单胞菌属、芽孢杆菌属按照质量比例1：1混合。
进一步的，所述步骤3中驯化过程如下：取菌群按照2-5％的总接种量接种于培养基中，在温度35℃下，转速180r/min摇床振荡培养5～7d。
进一步的，所述培养基中牛肉膏占比为0.2-0.4％、蛋白胨占比为0.8-1.2％、无机盐(氯化钠)占比为0.4-0.6％、琼脂占比为1.8-2.2％。
进一步的，所述培养基中牛肉膏占比为0.3％、蛋白胨占比为1％、无机盐(氯化钠)占比为0.5％、琼脂占比为2％。
进一步的，所述步骤5中采取直插式电流传输方式、电极材料石墨电极，施加电压大小为30V。
有益效果：本发明利用电动力学强化微生物修复，可极大的提高微生物的活性，进而提高微生物对石油烃污染的降解效果，提高修复效率。将电动力学修复技术与微生物耦合起来，可有效提高微生物及营养物质的活性及传输、扩散，并且具有高度的定向性，因此可显著节约经济及时间成本。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，以使本领域的技术人员能够更好的理解本发明的优点和特征，从而对本发明的保护范围做出更为清楚的界定。本发明所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
具体实施例1
一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，包括如下步骤：
(1)污染区域准备：在污染区域四周设置止水帷幕。
(2)石油降解菌培养：本设计以原油作为唯一碳源，配制成原油液体培养基，再以被石油污染的土壤作为菌种来源添加到原油液体培养基中，在微生物生长最适温度下摇床培养5d，再转接到新鲜的原油液体培养基中进行富集培养；两个周期过后，挑去菌液涂布于含油固体培养基中进行平板培养，即可获得生长良好的石油降解菌落，菌落包括邻单胞菌属、芽孢杆菌属按照质量比例1：1混合；最后通过多次划线分离平板培养可得到纯种高效石油降解菌株；其中，原油培养基七水硫酸镁占0.1％、磷酸氢二钾占3％、硝酸铵3％、磷酸二氢钾5％、原油0.4％、氯化钙及七水硫酸铁占0.5％，EDTA占1.0％。
(3)菌群培养及菌剂制备：将所得菌株与牛肉膏、蛋白胨、无机盐进行混合制得菌剂；驯化过程如下：取菌群按照2％的总接种量接种于培养基中，在温度35℃下，转速180r/min摇床振荡培养5d。所述培养基中牛肉膏占比为0.2％、蛋白胨占比为0.8％、无机盐(氯化钠)占比为0.4％、琼脂占比为1.8％。
(4)菌剂投加：向污染土壤中分别均匀喷洒菌剂并进行翻搅，通过地表喷洒及地下水注射的方式进行补水，使含水率保持在60％左右。
(5)电动力耦合：在污染区域内布设电极，对施加菌剂的污染土层施加电场，其中，采取直插式电流传输方式、电极材料石墨电极，施加电压大小为30V。
具体实施例2
一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，包括如下步骤：
(1)污染区域准备：在污染区域四周设置止水帷幕。
(2)石油降解菌培养：本设计以原油作为唯一碳源，配制成原油液体培养基，再以被石油污染的土壤作为菌种来源添加到原油液体培养基中，在微生物生长最适温度下摇床培养7d，再转接到新鲜的原油液体培养基中进行富集培养；两个周期过后，挑去菌液涂布于含油固体培养基中进行平板培养，即可获得生长良好的石油降解菌落，菌落包括邻单胞菌属、芽孢杆菌属按照质量比例1：1混合；最后通过多次划线分离平板培养可得到纯种高效石油降解菌株；其中，原油培养基七水硫酸镁占0.3％、磷酸氢二钾占5％、硝酸铵5％、磷酸二氢钾7％、原油0.6％、氯化钙及七水硫酸铁占1.5％，EDTA占1.8％。
(3)菌群培养及菌剂制备：将所得菌株与牛肉膏、蛋白胨、无机盐进行混合制得菌剂；驯化过程如下：取菌群按照5％的总接种量接种于培养基中，在温度35℃下，转速180r/min摇床振荡培养7d。所述培养基中牛肉膏占比为0.4％、蛋白胨占比为1.2％、无机盐(氯化钠)占比为0.6％、琼脂占比为2.2％。
(4)菌剂投加：向污染土壤中分别均匀喷洒菌剂并进行翻搅，通过地表喷洒及地下水注射的方式进行补水，使含水率保持在60％左右。
(5)电动力耦合：在污染区域内布设电极，对施加菌剂的污染土层施加电场，其中，采取直插式电流传输方式、电极材料石墨电极，施加电压大小为30V。
具体实施例3
一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，包括如下步骤：
(1)污染区域准备：在污染区域四周设置止水帷幕；
(2)石油降解菌培养：本设计以原油作为唯一碳源，配制成原油液体培养基，再以被石油污染的土壤作为菌种来源添加到原油液体培养基中，在微生物生长最适温度下摇床培养6d，再转接到新鲜的原油液体培养基中进行富集培养；两个周期过后，挑去菌液涂布于含油固体培养基中进行平板培养，即可获得生长良好的石油降解菌落，菌落包括邻单胞菌属、芽孢杆菌属按照质量比例1：1混合；最后通过多次划线分离平板培养可得到纯种高效石油降解菌株；其中，原油培养基七水硫酸镁占0.2％、磷酸氢二钾占4％、硝酸铵4％、磷酸二氢钾6％、原油0.5％、氯化钙及七水硫酸铁占1％，EDTA占1.4％。
(3)菌群培养及菌剂制备：将所得菌株与牛肉膏、蛋白胨、无机盐进行混合制得菌剂；驯化过程如下：取菌群按照4％的总接种量接种于培养基中，在温度35℃下，转速180r/min摇床振荡培养6d。所述培养基中牛肉膏占比为0.3％、蛋白胨占比为1％、无机盐(氯化钠)占比为0.5％、琼脂占比为2％。
(4)菌剂投加：向污染土壤中分别均匀喷洒菌剂并进行翻搅，通过地表喷洒及地下水注射的方式进行补水，使含水率保持在60％左右。
(5)电动力耦合：在污染区域内布设电极，对施加菌剂的污染土层施加电场，其中，采取直插式电流传输方式、电极材料石墨电极，施加电压大小为30V。
本发明利用电动力学强化微生物修复，可极大的提高微生物的活性，进而提高微生物对石油烃污染的降解效果，提高修复效率。将电动力学修复技术与微生物耦合起来，可有效提高微生物及营养物质的活性及传输、扩散，并且具有高度的定向性，因此可显著节约经济及时间成本。

Claims (8)

1.一种电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)污染区域准备：在污染区域四周设置止水帷幕；
(2)石油降解菌培养：本设计以原油作为唯一碳源，配制成原油液体培养基，再以被石油污染的土壤作为菌种来源添加到原油液体培养基中，在微生物生长最适温度下摇床培养5～7d，再转接到新鲜的原油液体培养基中进行富集培养；两个周期过后，挑去菌液涂布于含油固体培养基中进行平板培养，即可获得生长良好的石油降解菌落；最后通过多次划线分离平板培养可得到纯种高效石油降解菌株；
(3)菌群培养及菌剂制备：将所得菌株与牛肉膏、蛋白胨、无机盐进行混合制得菌剂；
(4)菌剂投加：向污染土壤中分别均匀喷洒菌剂并进行翻搅，通过地表喷洒及地下水注射的方式进行补水，使含水率保持在60％左右；
(5)电动力耦合：在污染区域内布设电极，对施加菌剂的污染土层施加电场。
2.根据权利要求1所述的电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，其特征在于：所述步骤2中原油培养基七水硫酸镁占0.1-0.3％、磷酸氢二钾占3-5％、硝酸铵3-5％、磷酸二氢钾5-7％、原油0.4-0.6％、氯化钙及七水硫酸铁占0.5-1.5％，EDTA占1.0-1.8％。
3.根据权利要求2所述的电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，其特征在于：所述步骤2中原油培养基七水硫酸镁占0.2％、磷酸氢二钾占4％、硝酸铵4％、磷酸二氢钾6％、原油0.5％、氯化钙及七水硫酸铁占1％，EDTA占1.4％。
4.根据权利要求1所述的电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，其特征在于：所述步骤2中菌落包括邻单胞菌属、芽孢杆菌属按照质量比例1：1混合。
5.根据权利要求1所述的电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，其特征在于：所述步骤3中驯化过程如下：取菌群按照2-5％的总接种量接种于培养基中，在温度35℃下，转速180r/min摇床振荡培养5～7d。
6.根据权利要求5所述的电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，其特征在于：所述培养基中牛肉膏占比为0.2-0.4％、蛋白胨占比为0.8-1.2％、无机盐(氯化钠)占比为0.4-0.6％、琼脂占比为1.8-2.2％。
7.根据权利要求6所述的电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，其特征在于：所述培养基中牛肉膏占比为0.3％、蛋白胨占比为1％、无机盐(氯化钠)占比为0.5％、琼脂占比为2％。
8.根据权利要求1所述的电动力学强化微生物去除土壤中石油烃的方法，其特征在于：所述步骤5中采取直插式电流传输方式、电极材料石墨电极，施加电压大小为30V。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109317511A (zh) * 2018-12-06 2019-02-12 中电建路桥集团有限公司 交流电场强化微生物修复石油烃污染土壤的装置和方法
CN111054742A (zh) * 2019-12-30 2020-04-24 浙江大学 直流-交流耦合电场强化微生物修复石油类有机物污染土壤的装置和方法
CN112658028A (zh) * 2020-12-30 2021-04-16 森特士兴集团股份有限公司 一种电化学-微生物耦合修复系统及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1943890A (zh) * 2006-10-27 2007-04-11 大连轻工业学院 原位微生物修复有机物污染土壤的方法
CN101234823A (zh) * 2008-03-03 2008-08-06 暨南大学 一种修复水体石油污染的方法
CN102443400A (zh) * 2011-10-22 2012-05-09 广东省生态环境与土壤研究所 铁氧化物与腐殖质及其还原菌三元复合有机污染修复剂及制备方法
CN103160448A (zh) * 2011-12-13 2013-06-19 中国科学院沈阳应用生态研究所 适合于电场条件下的石油烃降解菌及其应用
CN105861398A (zh) * 2016-06-15 2016-08-17 山东省科学院生态研究所 一株蜡状芽孢杆菌及其培养方法与应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1943890A (zh) * 2006-10-27 2007-04-11 大连轻工业学院 原位微生物修复有机物污染土壤的方法
CN101234823A (zh) * 2008-03-03 2008-08-06 暨南大学 一种修复水体石油污染的方法
CN102443400A (zh) * 2011-10-22 2012-05-09 广东省生态环境与土壤研究所 铁氧化物与腐殖质及其还原菌三元复合有机污染修复剂及制备方法
CN103160448A (zh) * 2011-12-13 2013-06-19 中国科学院沈阳应用生态研究所 适合于电场条件下的石油烃降解菌及其应用
CN105861398A (zh) * 2016-06-15 2016-08-17 山东省科学院生态研究所 一株蜡状芽孢杆菌及其培养方法与应用

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109317511A (zh) * 2018-12-06 2019-02-12 中电建路桥集团有限公司 交流电场强化微生物修复石油烃污染土壤的装置和方法
CN111054742A (zh) * 2019-12-30 2020-04-24 浙江大学 直流-交流耦合电场强化微生物修复石油类有机物污染土壤的装置和方法
CN111054742B (zh) * 2019-12-30 2021-03-23 浙江大学 一种修复石油类有机物污染土壤的装置和方法
CN112658028A (zh) * 2020-12-30 2021-04-16 森特士兴集团股份有限公司 一种电化学-微生物耦合修复系统及其应用

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