CN102864112B - 一株耐重金属的多环芳烃降解菌及其在复合污染土壤修复中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于环境工程和微生物工程技术领域。尤其涉及一株降解多环芳烃的阴沟肠杆菌（Enterobactercloacae）tzyx2及其在复合污染土壤修复中的应用。该菌株为阴沟肠杆菌（Enterobactercloacae）tzyx2，在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCCNO:M2012240，具备降解多环芳烃的能力。提供一种降解多环芳烃菌株、该菌株在治理多环芳烃和重金属污染土壤中可以应用。
Description
技术领域
本发明属于环境工程和微生物工程技术领域。尤其涉及一株降解多环芳烃的阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）tzyx2及其在复合污染土壤修复中的应用。
背景技术
多环芳烃（PAHs）是一类持久性有机污染物（POPs）。PAHs污染源主要来自于废旧机器油、电器产品的润滑油和来自废旧金属拆解中的木材、有机高分子化合物、纸张等含碳氢化合物的物质经不完全燃烧或在还原性气氛中经热分解而生成的。由于多环芳烃及其衍生物具有致癌性、致突变性和致畸性，以及急性毒性和亚致死作用，目前已引起人们的极大关注。
多环芳烃（PAHs）污染土壤修复是当前环境修复中研究的热点。生物降解是对PAHs污染土壤进行修复的重要途径之一。对于多环芳烃污染，国内外进行了大量多环芳烃降解微生物的筛选工作。到目前为止，已分离出多个具有多环芳烃降解能力的菌株，如假单胞菌属、分枝杆菌属、芽孢杆菌属等。
调查研究表明，许多污染土壤都呈现出重金属和多环芳烃复合污染的趋势。这两类不同性质的污染物共存时会产生一系列复杂的化学、生化及物理化学过程三方面的交互作用，致使复合条件下的污染物的环境行为与非复合污染环境中的相比更加复杂，而重金属离子对微生物菌群的生物毒性影响也不容忽视，当土壤中的重金属离子含量较高时，会破坏微生物的生理结构，使其彻底丧失分解有机物、修复土壤的功能。
因此，现有技术中缺少一种能够耐受各种重金属环境的多环芳烃降解菌。
发明内容
本发明针对现有技术中多环芳烃降解菌不耐重金属的不足之处，提供一种降解多环芳烃菌株、该菌株在治理多环芳烃和重金属污染土壤中可以应用。
为达到上述目的，本发明是通过以下技术方案得以实现的：
一株耐重金属的多环芳烃降解菌，其特征在于，该菌株为阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）tzyx2，在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC NO:M 2012240，具备降解多环芳烃的能力。
所述菌株具有以多环芳烃为唯一碳源和能源进行生长的能力。
所述菌株的16SrDNA序列如SEQ NO.1所示。
所述耐重金属的多环芳烃降解菌，其特征在于重金属选自Cu2+ 、Zn2+ 、Cd2+ 、Ni3+、Pb3+中的一种或其混合物。
所述耐重金属的多环芳烃降解菌在多环芳烃污染的土壤的生物修复中的应用。
所述耐重金属的多环芳烃降解菌在重金属和多环芳烃复合污染土壤的生物修复中的应用。
利用所述耐重金属的多环芳烃降解菌进行复合污染土壤生物修复的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：选取重金属和多环芳烃污染的土壤100g，阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）tzyx2按质量百分比2.0%与土壤混合均匀，加水使土壤含水率保持在15%，放入恒温振荡器中，控制培养温度在25℃的恒温条件下，振荡培养修复120小时。
本发明提供的阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae），命名为tzyx2，于2012年6月24日保藏于“中国典型培养物保藏中心”，其保藏号CCTCC NO: M 2012240。
tzyx2是从浙江省台州市固体废弃物拆解场某污染土壤中分离并筛选得到。菌株可在15～35℃，pH值6.0～8.5培养条件下较好生长；菌株形态特征为革兰氏阴性，杆状，周生鞭毛，无芽孢；菌株在LB固体培养基上培养24h形成黏液状菌落，表面湿润，边缘不整齐。
作为优选，本发明所述菌株能以多环芳烃为唯一碳源和能源生长。
上述耐重金属多环芳烃降解菌的筛选方法，可按如下步骤依次实施：
（1）从固废拆解场采集距地表下5～20cm处表层土壤样品，作为菌源进行自然富集培养；所述富集培养基含有：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、 MgSO4；
（2）取（1）中所述富集培养液接种于无机盐选择培养基中进行选择培养，所无机盐选择培养基含有：柠檬酸钠、（NH4）2SO4、MgSO4、K2HPO4、KH2PO4；添加多环芳烃和重金属（多环芳烃萘、菲、荧蒽、芘、苯并蒽、苯并芘的浓度均为150mg/L～250mg/L；重金属Cu2+ 、Zn2+ 、Cd2+ 、Ni3+、Pb3+浓度均为150mg/L～250mg/L）；
（3）取（2）中所述选择培养物稀释涂布于固体无机盐选择培养基上，进行分离进行分离即得到多环芳烃降解菌Tzyx2。
上述多环芳烃降解菌tzyx2可用于多环芳烃和重金属污染土壤的生物修复。
本发明tzyx2可在15～35℃，pH值6.0～8.5培养条件下较好生长；菌株形态特征为革兰氏阴性，杆状，周生鞭毛，无芽孢；菌株在LB固体培养基上培养24h形成黏液状菌落，表面湿润，边缘不整齐。
tzyx2在LB固体培养基（胰蛋白胨1.0%，酵母提取物0.5%，氯化钠1.0%）培养24小时形成黏液状菌落，表面湿润，边缘不整齐。
tzyx2的生理生化特征，见表1。
表1 tzyx2的生理生化特征
| 鉴定项目 | 鉴定结果 |
| 吲哚产生 | - |
| M．R实验 | - |
| V．P实验 | + |
| 明胶水解 | + |
| 尿酶实验 | - |
| 酪素水解 | - |
| 苯丙氨酸脱羧酶 | |
| 精氨酸双水解酶 | + |
| KNO3 | + |
| 丙二酸盐利用 | + |
| 柠檬酸盐利用 | |
| 淀粉水解 | - |
| 纤维素水解 | + |
| 葡萄糖产酸产气 | + |
| 乳糖产酸产气 | + |
| 过氧化氢酶 | + |
| 葡萄糖利用 | + |
| 麦芽糖利用 | - |
| 阿拉伯糖利用 | - |
| 木糖利用 | + |
| 甘露醇利用 | + |
| 甘油利用 | - |
| 蔗糖利用 | + |
tzyx2的16SrDNA基因的PCR扩增、测序由北京三博远志公司完成，得到了长度为1416bp的序列。选择同源性大于97%的基因序列进行系统发育分析，表明菌株与Enterobacter cloacae同源性最高，结合菌株形态、菌落特征及生理生化特性，鉴定菌株属于阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）。
本发明的tzyx2既可以在营养培养基，如：普通牛肉膏蛋白胨、普通LB、营养琼脂中生长，又可在以多环芳烃为唯一碳源、能源的无机盐基础培养基中生长。
综上所述，本发明具有以下优点：本发明提供的tzyx2对重金属和多环芳烃复合污染土壤中的多环芳烃有快速降解能力，且降解底物范围广，在短时间内降解率高。由于该菌具有耐重金属作用，使其在重金属和多环芳烃复合污染土壤修复中有着广阔的应用潜力。
分类命名：阴沟肠杆菌tzyx2
拉丁文名： Enterobacter cloacae tzyx2
保藏单位：中国典型培养物保藏中心
地址：中国武汉武汉大学
保藏日期：2012年6月28日
保藏编号：CCTCC NO：M 2012240。
具体实施方式
下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步具体的说明，但是本发明并不限于这些实施例。
实施例1
本发明提供的Tzyx2的分离筛选方法。
从固废拆解场采集距地表下5～20cm处表层土壤样品，作为菌源进行自然富集培养，将葡萄糖2g，胰蛋白胨4g，牛肉膏4g，MgSO4 0.8g加入到400mL的蒸馏水中，配制好的培养液在121℃的温度条件下灭菌处理20min，在此培养基上培养三天，再配制无机盐基础培养基，加入萘、菲、荧蒽、芘、苯并蒽、苯并芘的多环芳烃化合物，再加入重金属离子，配制成溶液后，然后再加入蒸馏水定容至500mL，上述加入萘、菲、荧蒽、芘、苯并蒽、苯并芘的量要使配制好的培养液中萘、菲、荧蒽、芘、苯并蒽、苯并芘的最终浓度均为200mg/mL，上述加入重金属Cu2+ 、Zn2+ 、Cd2+ 、Ni3+、Pb3+的量要使配制好的培养液中重金属Cu2+ 、Zn2+ 、Cd2+ 、Ni3+、Pb3+的最终浓度均为200mg/mL，然后将配制好的培养液在121℃的温度条件下灭菌处理20min，即得所需的培养液。在此培养基上培养三天，稀释涂布分离出一株菌命名为Tzyx2，该菌于2012年6月24日保藏于“中国典型培养物保藏中心”其保藏号CCTCC M 2012240。
Tzyx2的16SrDNA基因的PCR扩增、测序由北京三博远志公司完成。根据测序结果构建系统发育树。系统发育表明菌株与Enterobacter cloacae的进化距离最近，结合形态、菌落特征及生理生化特性，鉴定菌株属于将阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）。
实施例2
Tzyx2降解复合污染土壤中的多环芳烃。
选取芘、苯并蒽、苯并芘浓度各为200 mg/kg、硫酸铜、氯化锌、硝酸铅浓度各为600 mg/kg的复合污染土壤100g，Tzyx2按2.0%（质量百分比）用量与土壤混合均匀，加水使土壤含水率保持在15%，放入恒温振荡器中，控制培养温度在25℃的恒温条件下，振荡培养修复120小时，即能实现对复合污染土壤进行修复，得到修复后的土壤，芘、苯并蒽、苯并芘的降解率均为90%以上。
利用本发明的方法对复合污染土壤进行修复后的土壤多环芳烃的修复效果好，对多环芳烃的降解效果明显，说明菌株耐重金属并对复合污染土壤进行修复达到较好的多环芳烃降解的效果，与现有技术相比，提高了对多环芳烃复合污染土壤的修复效果，更有利于实际中对复合污染土壤的修复。
本发明中所描述的具体实施例仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 台州职业技术学院
<120> 一株耐重金属的多环芳烃降解菌及其在复合污染土壤修复中的应用
<130>
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1416
<212> DNA
<213> Enterobacter cloacae
<400> 1
gcaggcggca gcggaagtag cttgctactt tgccggcgag cggcggacgg gtgagtaatg 60
tctgggaaac tgcctgatgg agggggataa ctactggaaa cggtagctaa taccgcataa 120
cgtcgcaaga ccaaagaggg ggaccttcgg gcctcttgcc atcagatgtg cccagatggg 180
attagctagt aggtggggta acggctcacc taggcgacga tccctagctg gtctgagagg 240
atgaccagcc acactggaac tgagacacgg tccagactcc tacgggaggc agcagtgggg 300
aatattgcac aatgggcgca agcctgatgc agccatgccg cgtgtatgaa gaaggccttc 360
gggttgtaaa gtactttcag cggggaggaa ggtgctgagg ttaataacct cagcaattga 420
cgttacccgc agaagaagca ccggctaact ccgtgccagc agccgcggta atacggaggg 480
tgcaagcgtt aatcggaatt actgggcgta aagcgcacgc aggcggtctg tcaagtcgga 540
tgtgaaatcc ccgggctcaa cctgggaact gcattcgaaa ctggcaggct agagtcttgt 600
agaggggggt agaattccag gtgtagcggt gaaatgcgta gagatctgga ggaataccgg 660
tggcgaaggc ggccccctgg acaaagactg acgctcaggt gcgaaagcgt ggggagcaaa 720
caggattaga taccctggta gtccacgccg taaacgatgt cgacttggag gttgtgccct 780
tgaggcgtgg cttccggagc taacgcgtta agtcgaccgc ctggggagta cggccgcaag 840
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gatgcaacgc gaagaacctt acctactctt gacatccaga gaacttagca gagatgcttt 960
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tgttgggtta agtcccgcaa cgagcgcaac ccttatcctt tgttgccagc ggtcaggccg 1080
ggaactcaaa ggagactgcc agtgataaac tggaggaagg tggggatgac gtcaagtcat 1140
catggccctt acgagtaggg ctacacacgt gctacaatgg cgcatacaaa gagaagcgac 1200
ctcgcgagag caagcggacc tcataaagtg cgtcgtagtc cggattggag tctgcaactc 1260
gactccatga agtcggaatc gctagtaatc gtagatcaga atgctacggt gaatacgttc 1320
ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc atgggagtgg gttgcaaaag aagtaggtag 1380
cttaacgtcg gaggcgctta ccacttgggg tgcttg 1416
Claims (2)
1.一株耐重金属的多环芳烃降解菌，其特征在于，该菌株为阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）tzyx2，在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC NO：M 2012240，具备降解多环芳烃的能力，所述菌株具有以多环芳烃为唯一碳源和能源进行生长的能力，所述菌株的16SrDNA序列如SEQ NO.1所示；重金属选自Cu2+ 、Zn2+ 、Cd2+ 、Ni3+、Pb3+中的一种或其混合物。
2.利用权利要求1所述耐重金属的多环芳烃降解菌进行复合污染土壤生物修复的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：选取重金属和多环芳烃污染的土壤100g，阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）tzyx2按质量百分比2.0%与土壤混合均匀，加水使土壤含水率保持在15%，放入恒温振荡器中，控制培养温度在25℃的恒温条件下，振荡培养修复120小时；其中，多环芳烃为芘、苯并蒽、苯并芘一种或多种；其中重金属为硫酸铜、氯化锌、硝酸铅，浓度各为600 mg/kg。
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Citations (3)
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| CN101851582A (zh) * | 2010-04-27 | 2010-10-06 | 北京大学 | 去除多环芳烃和/或降解多环芳烃的菌剂及其应用 |
| CN101974445A (zh) * | 2010-05-26 | 2011-02-16 | 北京师范大学 | 高分子量多环芳烃降解菌株及其混合菌系 |
Non-Patent Citations (4)
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| Arulazhagan P et al.Biodegradation of polycyclic aromatic hydrocarbon by a halotolerant bacterial consortium isolated from marine environment.《 INTERNATIONAL JOURNAL OF ENVIRONMENTAL SCIENCE AND TECHNOLOGY》.2010,第7卷(第4期),第639-652页. |
| Biodegradation of polycyclic aromatic hydrocarbon by a halotolerant bacterial consortium isolated from marine environment;Arulazhagan P et al;《 INTERNATIONAL JOURNAL OF ENVIRONMENTAL SCIENCE AND TECHNOLOGY》;20101231;第7卷(第4期);第639-652页 * |
| Degradation of hexadecane by Enterobacter cloacae strain TU that secretes an exopolysaccharide as a bioemulsifier;Hua XF et al;《CHEMOSPHERE》;20100831;第80卷(第8期);第951-956页 * |
| Hua XF et al.Degradation of hexadecane by Enterobacter cloacae strain TU that secretes an exopolysaccharide as a bioemulsifier.《CHEMOSPHERE》.2010,第80卷(第8期),第951-956页. |
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