CN107996401A - 一种牡丹组织培养防褐变促生根剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种牡丹组织培养防褐变促生根剂，其组分按重量份包括：6‑苄氨基嘌呤0.5‑2份、吲哚‑3‑乙酸0.05‑0.2份、胺鲜酯0.5‑2份、防褐变剂25‑35份、活性炭50‑100份、吲哚丁酸10‑20份、碳源10‑40份。本发明通过各物质合适的比例配合，不仅能够减轻不定芽的褐变情况，同时促进不定芽的增殖分化以及诱导不定芽生根，提高组织培养的成功率，使外植体可以正常生长。

Description

一种牡丹组织培养防褐变促生根剂

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，具体涉及一种牡丹组织培养防褐变促生根剂。

背景技术

牡丹为毛茛科落叶小灌木，是我国特有的名贵花卉。牡丹根皮供药用，为常用中药材，具有清热散瘀、去除伏火、消肿去痛、抑菌、抗惊厥和抗氧化等功效。牡丹籽胚乳富含脂肪，不饱和脂肪酸含量高达92％，其α-亚麻酸含量40％以上，具有健脑、增强免疫力等功能。牡丹抗逆性强，适应性广，花单瓣，结实量大，种子繁殖，在中国主要用作观赏牡丹嫁接砧木和中药材丹皮栽培。牡丹的繁殖方式已成为其良种化制度的主要技术瓶颈。牡丹实生苗变异普遍，个体差异大，难以保持母株优良性状，无性繁殖、嫁接、分株等方式受繁殖材料、季节等诸多限制，繁殖系数低且苗木大小、长势等参差不齐除用于为数不多的庭园观赏植株繁殖，难以实现标准化规模化生产。组织培养是解决良种快繁的主要途径。牡丹次生代谢旺盛，组织培养过程中80％以上的材料都会产生褐色物质，褐变已经成为影响牡丹组织培养成功的重要因素。牡丹的组织培养技术有待进一步研究。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出一种牡丹组织培养防褐变促生根剂；本发明可减轻不定芽的褐变情况，同时促进不定芽增殖分化和诱导生根。

本发明提出一种牡丹组织培养防褐变促生根剂，其组分按重量份包括：6-苄氨基嘌呤0.5-2份、吲哚-3-乙酸0.05-0.2份、胺鲜酯0.5-2份、防褐变剂25-35份、活性炭50-100份、吲哚丁酸10-20份、碳源10-40份。

优选地，所述防褐变剂包括叶酸、硫胺素和尼克酸。

优选地，叶酸、硫胺素、尼克酸的质量比为10-15：5-8：10-12。

优选地，所述碳源为蔗糖。

优选地，所述蔗糖的浓度为10-40g/L。

优选地，使用所述促生根剂的培养温度为24±1℃。

优选地，使用所述促生根剂的培养基pH值为6.0-6.2。

优选地，其组分按重量份包括：6-苄氨基嘌呤0.5-1份、吲哚-3-乙酸0.05-0.1份、胺鲜酯0.5-1份、防褐变剂28-35份、活性炭80-100份、吲哚丁酸12-18份、碳源20-30份。

优选地，所述蔗糖浓度为20-30g/L。

本发明中，通过各物质合适的比例配合，减轻不定芽的褐变情况，促进不定芽的增殖、生长和诱导生根，使外植体可以正常生长。本发明中蔗糖作为主要碳源，为离体培养提供碳营养。6-苄氨基嘌呤是细胞分裂素，具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质的分解，保绿防老以及将氨基酸、生长素、无机盐等向处理部位调运等多种效能；吲哚-3-乙酸的作用在于调节植物的生长，低浓度可促进植物生长；胺鲜酯能提高植物过氧化物酶和硝酸还原酶的活性，提高叶绿素的含量加快光合速度，促进植物细胞的分裂和伸长，促进根系的发育，调节体内养分的平衡；上述6-苄氨基嘌呤、吲哚-3-乙酸和胺鲜酯三者互配作为生长调节剂使用，能够很好地促进不定芽的增殖和生长。本发明中防褐变剂包括叶酸、硫胺素和尼克酸，三者互配可减轻不定芽的褐变情况，提高存活率。本发明中吲哚丁酸可诱导根原体的形成，促进细胞分化和分裂，有利于新根生成和维管束系统的分化，促进插条不定根的形成；加入活性炭，与吲哚丁酸配合使用，诱导分化生根，提高不定芽的生根率；同时，活性炭也可作为防褐变剂使用，防止不定芽褐变，提高组织培养成功率。

具体实施方式

下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。

实施例1

一种牡丹组织培养防褐变促生根剂，其组分按重量份包括：6-苄氨基嘌呤1份、吲哚-3-乙酸0.05份、胺鲜酯0.5份、防褐变剂35份、活性炭100份、吲哚丁酸15份、碳源25份。

实施例2

一种牡丹组织培养防褐变促生根剂，其组分按重量份包括：6-苄氨基嘌呤1份、吲哚-3-乙酸0.1份、胺鲜酯1份、防褐变剂28份、活性炭80份、吲哚丁酸12份、碳源20份；

其中，所述防褐变剂包括叶酸、硫胺素和尼克酸；叶酸、硫胺素、尼克酸的质量比为6：3：5；所述碳源为蔗糖；所述蔗糖的浓度为20g/L；使用所述促生根剂的培养温度为24℃；使用所述促生根剂的培养基pH值为6.0。

实施例3

一种牡丹组织培养防褐变促生根剂，其组分按重量份包括：6-苄氨基嘌呤0.5份、吲哚-3-乙酸0.05份、胺鲜酯2份、防褐变剂35份、活性炭50份、吲哚丁酸10份、碳源30份；

其中，所述防褐变剂原料包括叶酸、硫胺素和尼克酸；叶酸、硫胺素、尼克酸的质量比为15：8：12。所述碳源为蔗糖；所述蔗糖的浓度为30g/L；使用所述促生根剂的培养温度为23℃；使用所述促生根剂的培养基pH值为6.2。

实施例4

一种牡丹组织培养防褐变促生根剂，其组分按重量份包括：6-苄氨基嘌呤0.5份、吲哚-3-乙酸0.2份、胺鲜酯0.5份、防褐变剂25份、活性炭100份、吲哚丁酸20份、碳源40份；

其中，所述防褐变剂包括叶酸、硫胺素和尼克酸；叶酸、硫胺素、尼克酸的质量比为2：1：2；所述碳源为蔗糖；所述蔗糖的浓度为40g/L；使用所述促生根剂的培养温度为25℃；使用所述促生根剂的培养基pH值为6.0。

实施例5

一种牡丹组织培养防褐变促生根剂，其组分按重量份包括：6-苄氨基嘌呤2份、吲哚-3-乙酸0.05份、胺鲜酯0.5份、防褐变剂30份、活性炭100份、吲哚丁酸18份、碳源10份；

其中，所述防褐变剂包括叶酸、硫胺素和尼克酸；叶酸、硫胺素、尼克酸的质量比为5：4：6；所述碳源为蔗糖；所述蔗糖的浓度为10g/L；使用所述促生根剂的培养温度为24℃；使用所述促生根剂的培养基pH值为6.0。

试验例1

选择生长健壮，高度约为1.5cm，表型一致的不定芽，选取这样的不定芽200株，分为2组，每组100株，进行常规消毒处理。第一组不定芽接种在添加有实施例2的培养基，其他成分与标准培养基相同，作为试验组；第二组不定芽接种在添加有市售组织培养液的标准培养基中，作为对照组；实验组和对照组在相同培养环境中培养30天，取出牡丹茎统计生根率，结果如下：

组别	生根率(％)	褐变率(％)
			试验组	85	10
对照组	55	40

由上表可以看出，本发明明显提高不定芽分化生根以及减轻不定芽褐变情况，具有明显效益。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种牡丹组织培养防褐变促生根剂，其特征在于，其组分按重量份包括：6-苄氨基嘌呤0.5-2份、吲哚-3-乙酸0.05-0.2份、胺鲜酯0.5-2份、防褐变剂25-35份、活性炭50-100份、吲哚丁酸10-20份、碳源10-40份。

2.根据权利要求1所述牡丹组织培养防褐变促生根剂，其特征在于，所述防褐变剂包括叶酸、硫胺素和尼克酸。

3.根据权利要求2所述牡丹组织培养防褐变促生根剂，其特征在于，叶酸、硫胺素、尼克酸的质量比为10-15：5-8：10-12。

4.根据权利要求1所述牡丹组织培养防褐变促生根剂，其特征在于，所述碳源为蔗糖。

5.根据权利要求4所述牡丹组织培养防褐变促生根剂，其特征在于，所述蔗糖的浓度为10-40g/L。

6.根据权利要求1-5任一项所述牡丹组织培养防褐变促生根剂，其特征在于，使用所述促生根剂的培养温度为24±1℃。

7.根据权利要求1-6任一项所述牡丹组织培养防褐变促生根剂，其特征在于，使用所述促生根剂的培养基pH值为6.0-6.2。

8.根据权利要求1所述牡丹组织培养防褐变促生根剂，其特征在于，其组分按重量份包括：6-苄氨基嘌呤0.5-1份、吲哚-3-乙酸0.05-0.1份、胺鲜酯0.5-1份、防褐变剂28-35份、活性炭80-100份、吲哚丁酸12-18份、碳源20-30份。

9.根据权利要求5所述牡丹组织培养防褐变促生根剂，其特征在于，所述蔗糖浓度为20-30g/L。