CN107982189A - 一种含干细胞分泌因子的抗皱眼霜及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及皮肤保养品技术领域，具体涉及一种含干细胞分泌因子的抗皱眼霜，以述抗皱眼霜的质量份数为100，抗皱眼霜的原料由以下重量份的组分组成：5‑10份珍珠粉、10‑20份维生素E份、5‑15份聚多糖紧肤剂、10‑20份角鲨烷/角鲨烯、10‑20份棕榈酰寡肽、0.05‑0.5份干细胞因子，以及余量的水。本发明的抗皱眼霜原料组分成分简单，配方合理，协同功效好，好能够兼顾保湿与抗皱的双重功效，具有较好的改善皮肤纹理即延缓皮肤衰老的效果。

Description

一种含干细胞分泌因子的抗皱眼霜及其制备方法

技术领域

本发明涉及皮肤保养品技术领域，具体涉及一种含干细胞分泌因子的抗皱眼霜及其制备方法。

背景技术

随着人们生活水平的提高，人们对美的追求越来越注重，其中一个体现就是对皮肤护理以及面部修饰的注重，眼睛是岁月的窗口，人体岁月形成的第一道皱纹往往就是出现在眼部。因此，眼睛最容易体现人的年龄和人的衰老，所以现代人更加注重对眼部的护理，然而市面上的很多眼部产品都是从假象上掩盖眼部皱纹，或者对于眼部抗皱达不到很好的效果。

皮肤衰老是由内源性因素和外源性因素共同作用的结果。其中在机体代谢过程中产生的具有高度化学活性的自由基是衰老的重要启动因素。自由基是一种因失去一个电子而成的不对称、不稳定的原子或分子，具有很大的能量，可攻击细胞组织中的脂质、蛋白质、糖类和DNA等物质，企图夺取一个电子以求得重新平衡，这就造成了脂质和糖类的氧化、蛋白质的变性、酶的失活、DNA结构的切断、碱基变化等等，从而导致细胞膜、遗传因子等的损伤，进而诱发各种疾病、癌变、机体老化等。长期受紫外线照射、环境污染以及香烟烟雾等外源性因素也都会产生大量自由基，导致皮肤衰老。

眼部肌肤是人体最薄肌肤，同时又是活动最频繁的部位，而且还是化妆中拉扯皮肤次数最多的地方，非常容易长出皱纹，而且一旦长出就很难消除，眼睛周围皮肤护理，最常用的就是涂抹眼霜，现在市场上现存的眼霜琳琅满目，但是其存在吸收不良、功效单一等缺陷，还存在着无法兼顾保湿与抗皱的双重功效，使其护理效果不佳。

发明内容

有鉴于此，有必要针对上述的问题，提供一种含干细胞分泌因子的抗皱眼霜。

本发明提供一种含干细胞分泌因子的抗皱眼霜，以述抗皱眼霜的质量份数为100，所述抗皱眼霜的原料由以下重量份的组分组成：5-10份珍珠粉、10-20份维生素E份、5-15份聚多糖紧肤剂、10-20份角鲨烷/角鲨烯、10-20份活性肽、0.05-0.5份干细胞因子，以及余量的水。

优选的，所述活性肽为棕榈酰寡肽。

优选的，所述聚多糖紧肤剂选自α-1，4-葡聚多糖、α-1，6-葡聚多糖或β-1，6-葡聚多糖中的至少一种。

优选的，所述干细胞分泌因子为脐带间充质干细胞的分泌因子。

优选的，所述干细胞分泌因子为0.05-0.1份。

优选的，所述水为去离子水或纯净水。

本发明还提供一种上述抗皱眼霜的制备方法，所述制备方法包括：将所述珍珠粉、所述维生素E份、所述活性肽、所述干细胞分泌因子以及水按重量份混合溶解，加入所述聚多糖紧肤剂和所述角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴加热搅拌，降至室温后，通过超微化得到所述抗皱眼霜。

优选的，所述加热搅拌的温度为40-65℃，加热搅拌的速率为3000-5000转/min。

优选的，所述超微化通过动态高压微射流超微化技术实现，所述动态高压微射流超微化技术包括剪碎、破碎和均质，所述动态高压微射流超微化技术的工作压力为140-180Mpa，工作温度为20-30℃。

本发明提供的抗皱眼霜原料组分成分简单，配方合理，协同功效好，能够兼顾保湿与抗皱的双重功效，具有较好的改善皮肤纹理即延缓皮肤衰老的效果。本发明的抗皱眼霜膏体细腻、色泽均匀，配方中不含酒精、香精、尼泊金酯类，温和无刺激。制备方法简单，具有广泛的推广价值。

具体实施方式

为了便于本领域技术人员理解，下面将结合具体实施例对本发明进行进一步描述。

本发明提供一种含干细胞分泌因子的抗皱眼霜，以述抗皱眼霜的质量份数为100，所述抗皱眼霜的原料由以下重量份的组分组成：5-10份珍珠粉、10-20份维生素E份、5-15份聚多糖紧肤剂、10-20份角鲨烷/角鲨烯、10-20份活性肽、0.05-0.5份干细胞因子，以及余量的水。通过这些重量份比例的各原料得到的抗皱眼霜原料组分成分简单，配方合理，协同功效好，好能够兼顾保湿与抗皱的双重功效，具有较好的改善皮肤纹理即延缓皮肤衰老的效果。

具体实施方式中，活性肽采用棕榈酰寡肽，棕榈酰寡肽与其他组分结合使用，能够提升肌肤的含水量，增加皮肤紧实度以及减少细纹。聚多糖紧肤剂选自α-1，4-葡聚多糖、α-1，6-葡聚多糖或β-1，6-葡聚多糖中的至少一种。水为去离子水或纯净水等。

具体实施方式中，由于目前骨髓间充质干细胞的获得存在一些困难且来源不稳定，细胞增殖没有脐带间充质干细胞速度快；羊膜间充质干细胞虽然获得容易，但细胞体积大，增殖速度慢，获得干细胞分泌因子的成本高；脂肪间充质干细胞大多数供者自身都存在炎症问题，干细胞分泌因子中炎性因子也较多，不利于用于护肤品。本发明的抗冻护手霜中，干细胞分泌因子优选采用脐带间充质干细胞的分泌因子，所添加的干细胞分泌因子含量为0.05-0.1份。

具体的，干细胞分泌因子冻干粉制备过程如下：(1)收集健康人体脐带，对脐带作进一步清洗，再用无菌手术剪将脐带去除外膜、静脉和动脉后切割分为细小组织。(2)剪碎后的细小组织通过加入适当浓度的胰酶、胶原酶等消化脐带组织块0.5小时。以消化出单核细胞，收集消化出的细胞用无血清培养基进行贴壁培养，获得脐带间充质干细胞。(3)间充质干细胞的扩增培养,用干细胞培养基通过常规干细胞培养的方式进行间充质干细胞的培养,根据细胞生长状况进行换液，补液。(4)观察细胞生长情况，取细胞检测细胞表面阳性标志CD90、CD105和细胞表面阴性表面标志CD45、CD34的表达情况。高表达上述检测物质时，取50ml干细胞培养基，分装于培养皿中，液面厚度不高于3mm，盖上保鲜膜，放于-86℃冰箱中冷冻24h。(5)取出冷冻后的培养皿，用细针在保鲜膜上戳出若干小孔，放置于冻干机中，冷冻干燥。(6)冻干成粉末状分装备用。

具体的，本发明采用第3代到第5代的细胞用于制备干细胞分泌因子，用于制备干细胞分泌因子的培养基为不含酚红的RPMI-1640，用于制备干细胞分泌因子的培养上清只收集细胞接种后第72-96h时间区间的培养上清。

本发明所用的原料中角鲨烷是从深海鲨鱼肝脏中提取的角鲨烯经氢化制得一种性能优异的烃类油脂，故又名深海鲨鱼肝油。角鲨烷是一种化学稳定性高，使用感极佳的动物油脂，对皮肤有较好的亲和性，不会引起过敏和刺激，并能加速配方中其他活性成分向皮肤中渗透；具有较低的极性和中等的铺展性，且纯净、无色、无异味；还可抑制霉菌的生长。具有高度的滋润性和保湿性；其抗氧化性和热稳定性优异；在宽广的PH范围内有很好的稳定性；与矿物油和大多数护理用品的原料有很好的相容性。

本发明还提供一种上述抗皱眼霜的制备方法，制备方法包括：将珍珠粉、维生素E份、活性肽、干细胞分泌因子以及水按重量份混合溶解，加入聚多糖紧肤剂和角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴加热搅拌，降至室温后，通过超微化得到所述抗皱眼霜。其中，加热搅拌的温度为40-65℃，加热搅拌的速率为3000-5000转/min。超微化具体通过动态高压微射流超微化技术实现，所述动态高压微射流超微化技术包括剪碎、破碎和均质，所述动态高压微射流超微化技术的工作压力为140-180Mpa，工作温度为20-30℃。

具体的制备方法包括：在制备好干细胞分泌因子后，将5-10重量份珍珠粉、10-20重量份维生素E份、10-20重量份棕榈酰寡肽以及0.05-0.5重量份干细胞分泌因子，加入纯净水或去离子水中混合后溶解，向其中加入5-15重量份聚多糖紧肤剂，再加入10-20重量份的角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴搅拌下加热到40℃-65℃，加入搅拌机中搅拌，搅拌速率为3000-5000转/min，搅拌3-8min，降至室温，通过干法粉碎技术或者湿法粉碎技术进行超微化得到抗皱眼霜。更优选的，搅拌下加热到50℃，加入搅拌机中搅拌，搅拌速率为4000转/min，搅拌5min，降至室温。更优选的，其中，超微化采用的是动态高压微射流超微化技术，具体步骤：剪碎、破碎和均质，其中工作压力为150-170MPa，工作温度为20-30℃；更优选的工作压力为160MPa，工作温度为25℃。

本发明的制备方法中简单安全可靠，产品无任何毒副作用，制得的抗皱眼霜膏体细腻、色泽均匀，配方中不含酒精、香精、尼泊金酯类，温和无刺激。能够兼顾保湿与抗皱的双重功效，具有较好的改善皮肤纹理即延缓皮肤衰老的效果。

以下结合具体实施例予以进一步说明。

实施例1

在制备好干细胞分泌因子后，将5重量份珍珠粉、20重量份维生素E份、18重量份棕榈酰寡肽以及0.1重量份干细胞分泌因子，加入25.9重量份的去离子水中混合后溶解，向其中加入15重量份聚多糖紧肤剂，再加入16重量份的角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴搅拌下加热到55℃，加入搅拌机中搅拌，搅拌速率为3000转/min，搅拌8min，降至室温，通过干法粉碎技术进行超微化得到抗皱眼霜S1。

实施例2

在制备好干细胞分泌因子后，将8重量份珍珠粉、18重量份维生素E份、20重量份棕榈酰寡肽以及0.05重量份干细胞分泌因子，加入29.95重量份的去离子水中混合后溶解，向其中加入12重量份聚多糖紧肤剂，再加入12重量份的角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴搅拌下加热到50℃，加入搅拌机中搅拌，搅拌速率为3500转/min，搅拌7min，降至室温，通过湿法粉碎技术进行超微化得到抗皱眼霜S2。

实施例3

在制备好干细胞分泌因子后，将10重量份珍珠粉、12重量份维生素E份、15重量份棕榈酰寡肽以及0.3重量份干细胞分泌因子，加入32.7重量份的去离子水中混合后溶解，向其中加入10重量份聚多糖紧肤剂，再加入20重量份的角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴搅拌下加热到45℃，加入搅拌机中搅拌，搅拌速率为4000转/min，搅拌5min，降至室温，通过干法粉碎技术进行超微化得到抗皱眼霜S3。

实施例4

在制备好干细胞分泌因子后，将10重量份珍珠粉、10重量份维生素E份、20重量份棕榈酰寡肽以及0.5重量份干细胞分泌因子，加入36.5重量份的去离子水中混合后溶解，向其中加入8重量份聚多糖紧肤剂，再加入15重量份的角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴搅拌下加热到60℃，加入搅拌机中搅拌，搅拌速率为4500转/min，搅拌5min，降至室温，通过湿法粉碎技术进行超微化得到抗皱眼霜S4。

实施例5

在制备好干细胞分泌因子后，将10重量份珍珠粉、20重量份维生素E份、10重量份棕榈酰寡肽以及0.08重量份干细胞分泌因子，加入39.92重量份的纯净水中混合后溶解，向其中加入10重量份聚多糖紧肤剂，再加入10重量份的角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴搅拌下加热到50℃，加入搅拌机中搅拌，搅拌速率为5000转/min，搅拌3min，降至室温，通过干法粉碎技术或者湿法粉碎技术进行超微化得到抗皱眼霜S5。

实施例6

在制备好干细胞分泌因子后，将10重量份珍珠粉、20重量份维生素E份、20重量份棕榈酰寡肽以及0.05重量份干细胞分泌因子，加入14.95重量份的去离子水中混合后溶解，向其中加入15重量份聚多糖紧肤剂，再加入20重量份的角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴搅拌下加热到50℃，加入搅拌机中搅拌，搅拌速率为4000转/min，搅拌5min，降至室温，通过干法粉碎技术或者湿法粉碎技术进行超微化得到抗皱眼霜S6。

实施例7

在制备好干细胞分泌因子后，将10重量份珍珠粉、10重量份维生素E份、20重量份棕榈酰寡肽以及0.2重量份干细胞分泌因子，加入39.8重量份的纯净水中混合后溶解，向其中加入5重量份聚多糖紧肤剂，再加入15重量份的角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴搅拌下加热到65℃，加入搅拌机中搅拌，搅拌速率为4500转/min，搅拌8min，降至室温，通过干法粉碎技术或者湿法粉碎技术进行超微化得到抗皱眼霜S7。

性能测试：

1、抗氧化测试

称取0.5g实施例所得S1-S7对应的抗皱眼霜，用纯水溶解后转入100mL容量瓶中定容，配制出质量浓度为5.00×10^-3g/mL的样品溶液。

分别配制浓度为2×10^-4g/mL的DPPH的无水乙醇溶液、浓度为10mmol/L水杨酸的无水乙醇溶液、浓度为10mmol/L的FeSO4水溶液、浓度为8.8mmol/L的H₂O₂水溶液、pH为8.2的Tris-HCl缓冲溶液、浓度为10mmol/L的HCl溶液、浓度为5mmol/L的邻苯三酚溶液(以浓度为10mmol/L的HCl溶液为溶剂)。

(1)对DPPH·自由基的抑制率测试

移取待测样品溶液3mL于10mL容量瓶中，随后加入3mL浓度为2×10^-4g/mL DPPH溶液。盖上塞子，摇匀，反应30min，在517nm处测定吸光度A_i；测定3mL样液与3mL乙醇混合液的吸光度A_j；测定3mL浓度为2×10^-4g/mL DPPH溶液与3mL纯水混合后的吸光度A₀。根据公式P＝[1－(A_i－A_j)/A₀]×100％，将测得的吸光度带入求得待测液对DPPH·自由基的抑制率。

(2)对·OH自由基的抑制率测试

向10mL的容量瓶中加入10mmol/L的水杨酸溶液和10mmol/L的FeSO₄溶液各2mL，然后加入待测液2mL，再加入2mL浓度为8.8mmol/L的H₂O₂溶液，摇匀后于37℃水浴中反应30min。在510nm处测定吸光度A_i；以2mL纯水代替H₂O₂测定吸光度A_j；用2mL纯水代替待测液来测定吸光度A₀。根据公式P＝[1－(A_i－A_j)/A₀]×100％，将测得的吸光度带入求得待测液对·OH自由基的抑制率。

(3)对·O^2-自由基的抑制率测试

取pH为8.2的Tris-HCl缓冲溶液5mL于10mL容量瓶中，在25℃水浴中预热20min，然后依次加入待测液2mL和5mmol/L的邻苯三酚溶液0.5mL，立即摇匀，于25℃水浴中反应4min，立即在320nm处测定其吸光度A_i；以10mmol/L的HCl溶液0.5mL代替邻苯三酚，测定吸光度A_j；用2mL纯水代替待测液来测定吸光度A₀。根据公式P＝[1－(A_i－A_j)/A₀]×100％，将测得的吸光度带入求得待测液对·O^2-自由基的抑制率。

2、PH值及感官性能评定

分别称取S1-S7的眼霜样品0.3g，放入盛有30mL除去CO₂的去离子水的小烧杯中，加热至40℃左右并不断搅拌，冷至室温后用校正好的PH计测量。

将制备出的眼霜S1-S7分别在室温和非阳光直射下目测观察膏体是否细腻，色泽是否均匀一致，用嗅觉鉴别气味是否纯正。

3、功效测试

选择20人作为测试人员，平均年龄为55周岁，多为干燥缺水性肤质。受试人员每天早晚于洁面后在眼周涂抹眼霜，共使用90天，每隔15天用皮肤测试仪测试一次皮肤状况。

测试结果：

1、抗氧化测试结果

表1实施例眼霜溶液对3种自由基的抑制率

表1位本发明实施例1-7对应的抗皱眼霜溶液对三种自由基DPPH·、·OH、·O^2-的抑制率，从表中可以看出，本发明的抗皱眼霜对三种自由基抑制率平均水平都在60％以上，充分说明本发明的抗皱眼霜具有较强的抗氧化能力，能够有效清除自由基，具有较好的改善皮肤纹理即延缓皮肤衰老的效果。

2、感官及理化测试结果

表2感官及理化指标测试结果

样品	外观	PH	耐寒耐热
				实施例1	细腻、均匀、亮泽	5.9	无油水分离
实施例2	细腻、均匀、亮泽	5.7	无油水分离
				实施例3	细腻、均匀、亮泽	6.3	无油水分离
实施例4	细腻、均匀、亮泽	5.5	无油水分离
				实施例5	细腻、均匀、亮泽	6.2	无油水分离
实施例6	细腻、均匀、亮泽	6.0	无油水分离
				实施例7	细腻、均匀、亮泽	5.8	无油水分离

根据表2中的测试结果可知，本发明的抗皱眼霜的感官及理化指标均符合我国化妆品行业的标准要求。

3、试用结果分析

表3使用眼霜90天前后眼周皮肤各指标变化情况

指标	使用前	使用后
			油份/％	12	8
水分/％	4	8
			弹性/％	35	45
胶原纤维/％	55	65
			色素/％	30	25

20位平均年龄为55周岁的测试人员，使用本发明实施例6的眼霜后，眼周皮肤各项指标变化情况的平均水平如表3中所示。从表中可以看出，连续使用该眼霜90天后的眼周皮肤纹理明显变浅，缺水及眼周皮肤黯沉问题有所改善，眼周轮廓变得紧致。

综上可知，本发明制得的抗皱眼霜膏体细腻、色泽均匀，配方中不含酒精、香精、尼泊金酯类，温和无刺激。能够兼顾保湿与抗皱的双重功效，具有较好的改善皮肤纹理即延缓皮肤衰老的效果。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (9)

1.一种含干细胞分泌因子的抗皱眼霜，其特征在于，以所述抗皱眼霜的质量份数为100，所述抗皱眼霜的原料由以下重量份的组分组成：5-10份珍珠粉、10-20份维生素E份、5-15份聚多糖紧肤剂、10-20份角鲨烷/角鲨烯、10-20份活性肽、0.05-0.5份干细胞分泌因子，以及余量的水。

2.根据权利要求1所述的抗皱眼霜，其特征在于，所述活性肽为棕榈酰寡肽。

3.根据权利要求1所述的抗皱眼霜，其特征在于，所述聚多糖紧肤剂选自α-1，4-葡聚多糖、α-1，6-葡聚多糖或β-1，6-葡聚多糖中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的抗皱眼霜，其特征在于，所述干细胞分泌因子为脐带间充质干细胞的分泌因子。

5.根据权利要求4所述的抗皱眼霜，其特征在于，所述干细胞分泌因子为0.05-0.1份。

6.根据权利要求1所述的抗冻护手霜，其特征在于，所述水为去离子水或纯净水。

7.一种根据权利要求1所述的抗皱眼霜的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：将所述珍珠粉、所述维生素E份、所述活性肽、所述干细胞分泌因子以及水按重量份混合溶解，加入所述聚多糖紧肤剂和所述角鲨烷/角鲨烯，恒温水浴加热搅拌，降至室温后，通过超微化得到所述抗皱眼霜。

8.根据权利7所述的制备方法，其特征在于，所述加热搅拌的温度为40-65℃，加热搅拌的速率为3000-5000转/min。

9.根据权利7所述的制备方法，其特征在于，所述超微化通过动态高压微射流超微化技术实现，所述动态高压微射流超微化技术包括剪碎、破碎和均质，所述动态高压微射流超微化技术的工作压力为140-180Mpa，工作温度为20-30℃。