CN107937271A - 一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，包括瓶身、瓶身设有瓶口、瓶盖，所述的瓶身内设有纳米半透膜，纳米半透膜将瓶身内的空间隔成两个部分，分别用作为贴壁细胞的培养容器、悬浮细胞的培养容器，瓶盖为透气性瓶盖。本技术方案的两种细胞操作时相互不影响，但两种细胞之间分泌的细胞因子的可以通过纳米半透膜相互作用，在一定意义上真实反应两种细胞之间的相互作用和影响。

Description

一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶

技术领域

本发明涉及于生物实验耗材领域，确切地说是一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶。

背景技术

细胞培养瓶，顾名思义就是用来培养细胞的。但目前市场上所有的培养的分类一般根据材质可以分为玻璃的和塑料的，底部形状有正方形、长方形、三角形等，根据瓶子容积有5至500ml供选择。另外，表面经过特殊改性处理后，可以让细胞更好的进行贴壁培养，这样根据细胞贴壁面积又可以分为25～175cm²多种。但是没有同时进行两种不同培养类型（贴壁细胞与悬浮细胞）共同培养的细胞瓶。

半透膜是一种只给某种分子或离子扩散进出的薄膜，对不同粒子的通过具有选择性的薄膜。例如细胞膜、膀胱膜、羊皮纸以及人工制的胶棉薄膜等。半透膜用于渗透溶胶和测定渗透压强等。生物吸取养分也是通过半透膜进行的。半透膜是一种只允许离子和小分子自由通过的膜结构，生物大分子不能自由通过半透膜，其原因是半透膜的孔隙的大小比离子和小分子大但比生物大分子如蛋白质和淀粉小。半透膜在化学中只允许溶液通过，胶体和浊液均不能通过。不同类型的半透膜的孔径是不同的。生物膜就是一种半透膜，植物细胞的原生质层与细胞液共同组成一个渗透系统，能够允许一些小分子比如说水、氧气、二氧化碳等自由通过。

目前细胞学研究一直倾向于模拟人体环境去培养细胞，旨在找出细胞培养中关键的细胞间的相互作用机理，但是实验工具的限制，常常导致实验无法进行或失败，达不到预期效果，不能评判实验思路的正确与否。例如研究：研究血液中的细胞如何与血管上的细胞相互影响。所以如何发明一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶成了亟待解决的问题。

目前的细胞培养瓶都无法做到两种不同培养类型的细胞在一起共同培养，由于没有合适的体内模拟环境容器或细胞共培养瓶，常常导致两种细胞的共培养实验无法进行，导致很多细胞学研究实验设计和科研思路终止或绕弯。

目前现有的替代技术有以下两种，但都有严重的不足或缺陷：

1、第一种替代方案：用其中一种细胞培养过的培养基作为细胞培养添加剂加到第二种细胞的细胞培养基中，但是这种方法不能长久的让第二种细胞刺激培养，因为在浓缩第一种细胞培养基时，可能会导致含量和浓度的变化，如果持续加入第一种细胞的浓缩培养基，第二种细胞的细胞培养基的各种培养指标会受到破坏，导致实验无法进行。

2、第二种替代方案：强行将两种不同类型的细胞共同培养，实际情况是两种生长类型不同的细胞在同一个细胞培养瓶中进行培养，在一个空间培养不同种类细胞时会因为悬浮细胞沉降作用覆盖贴壁细胞导致贴壁细胞与培养基接触较小，进而导致贴壁细胞生长较慢甚至死亡，同时较难分选两种细胞，对后续试验有很大阻碍或导致实验误差；同时两种细胞的细胞培养基是否相同，是否可以混用也要根据具体情况对待。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，该装置能够让两种细胞分泌的细胞因子可通过半透膜进行渗透相互作用，真实反应两种细胞的相互作用，可很好的解决贴壁细胞与悬浮细胞不能的共同培养的难题。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术手段：

一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，包括瓶身、瓶身设有瓶口、瓶盖，所述的瓶身内设有纳米半透膜，纳米半透膜将瓶身内的空间隔成两个部分，分别用作为贴壁细胞的培养容器、悬浮细胞的培养容器，瓶盖为透气性瓶盖。

本技术方案，在传统的细胞培养瓶的基础上中间加了一层纳米半透膜，纳米半透膜的分子透过孔径可根据需要设定，具体地，根据研究的细胞之间相互影响的外分泌因子大小不同，设计不同孔径的纳米半透膜，满足不同细胞之间的培养。同时该细胞共培养瓶瓶口也根据加液换液需求变成合在一起的两个半圆形瓶口，便于隔绝培养空间及分开加液与换液。本技术方案的两种细胞操作时相互不影响，但两种细胞之间分泌的细胞因子的可以通过纳米半透膜相互作用，在一定意义上真实反应两种细胞之间的相互作用和影响。

共培养细胞培养瓶使用流程：

打开培养瓶盖，用移液管取一定体积的含有贴壁细胞的重悬细胞培养液加入瓶身的纳米半透膜一侧的一个部分，培养基体积定容至纳米半透膜处浸透纳米半透膜；再用另一根移液管取一定体积含有悬浮细胞的细胞培养液加入瓶身的另一部分，然后放置二氧化碳培养进行培养即可。传代细胞时，首先将的悬浮细胞混匀，然后用移液管将细胞悬液转移至离心管中，然后加培养基冲洗两次，再将冲洗液转移至离心管中；其次将纳米半透膜另一侧的细胞培养液吸弃，用生理盐水轻轻冲洗底部两次，按照细胞消化流程把细胞消化下来并转移至离心管中待下步实验用。

进一步的优选技术方案如下：

所述的纳米半透膜与其中一侧的瓶壁的距离为0.3-1cm。范围在0.3-1cm，两种细胞操作时相互不影响，但两种细胞之间分泌的细胞因子的可以通过纳米半透膜相互作用。

所述的瓶盖的中心设有透气口，透气口填充透气材料。该细胞共培养瓶瓶身全身为聚苯乙烯材质，瓶口为斜颈设计。

本技术方案的有益效果：

1、可使两种不同类型的细胞进行共培养，可通过纳米半透膜进行渗透相互作用，真实反应两种细胞的相互作用，可很好的解决贴壁细胞与悬浮细胞不能的共同培养这一难题，以期达到实验效果。

2、在同一个相对独立的空间里，节省细胞培养时间、耗材，提高细胞共培养相互作用效率，提高实验的成功率。

3、两种细胞在同一个培养瓶培养，减少开放式操作次数，大大降低了内部与外部的交叉污染几率。

附图说明

图1是本发明的结构示意图。

图2是图1的俯视图。

附图标记说明：1-瓶盖；2-瓶口；3-瓶身；4-贴壁细胞的培养容器；5-纳米半透膜；6-悬浮细胞的培养容器。

具体实施方式

下面结合实施例，进一步说明本发明。

参见图1、图2可知，本发明的一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，由瓶身3、瓶口2及瓶盖1组成；瓶身3设有瓶口2，瓶身3内设有纳米半透膜5，纳米半透膜5将瓶身3内的空间隔成两个部分，分别用作为贴壁细胞的培养容器4、悬浮细胞的培养容器6，瓶盖1为透气性瓶盖1。

本技术方案，在传统的细胞培养瓶的基础上中间加了一层纳米半透膜5，纳米半透膜5的分子透过孔径可根据需要设定，具体地，根据研究的细胞之间相互影响的外分泌因子大小不同，设计不同孔径的纳米半透膜5，满足不同细胞之间的培养。同时该细胞共培养瓶瓶口2也根据加液换液需求变成合在一起的两个半圆形瓶口2，便于隔绝培养空间及分开加液与换液。本技术方案的两种细胞操作时相互不影响，但两种细胞之间分泌的细胞因子的可以通过纳米半透膜5相互作用，在一定意义上真实反应两种细胞之间的相互作用和影响。

所述的纳米半透膜5与其中一侧的瓶壁的距离为0.3-1cm。范围在0.3-1cm，两种细胞操作时相互不影响，但两种细胞之间分泌的细胞因子的可以通过纳米半透膜5相互作用。

所述的瓶盖1的中心设有透气口，透气口填充透气材料。该细胞共培养瓶瓶身3全身为聚苯乙烯材质，瓶口2为斜颈设计。

共培养细胞培养瓶使用流程：

打开培养瓶盖1，用移液管取一定体积的含有贴壁细胞的重悬细胞培养液加入瓶身3的纳米半透膜5一侧的一个部分，培养基体积定容至纳米半透膜5处浸透纳米半透膜5；再用另一根移液管取一定体积含有悬浮细胞的细胞培养液加入瓶身3的另一部分，然后放置二氧化碳培养进行培养即可。传代细胞时，首先将的悬浮细胞混匀，然后用移液管将细胞悬液转移至离心管中，然后加培养基冲洗两次，再将冲洗液转移至离心管中；其次将纳米半透膜5另一侧的细胞培养液吸弃，用生理盐水轻轻冲洗底部两次，按照细胞消化流程把细胞消化下来并转移至离心管中待下步实验用。

本技术方案的有益效果：

1、可使两种不同类型的细胞进行共培养，可通过纳米半透膜5进行渗透相互作用，真实反应两种细胞的相互作用，可很好的解决贴壁细胞与悬浮细胞不能的共同培养这一难题，以期达到实验效果。

2、在同一个相对独立的空间里，节省细胞培养时间、耗材，提高细胞共培养相互作用效率，提高实验的成功率。

3、两种细胞在同一个培养瓶培养，减少开放式操作次数，大大降低了内部与外部的交叉污染几率。

由于以上所述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护不限于此，任何本技术领域的技术人员所能想到本技术方案技术特征的等同的变化或替代，都涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，包括瓶身、瓶身设有瓶口、瓶盖，其特征在于：所述的瓶身内设有纳米半透膜，纳米半透膜将瓶身内的空间隔成两个部分，分别用作为贴壁细胞的培养容器、悬浮细胞的培养容器，瓶盖为透气性瓶盖。

2.根据权利要求1所述的贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，其特征在于：所述的纳米半透膜与其中一侧的瓶壁的距离为0.3-1cm。

3.根据权利要求1所述的贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，其特征在于：所述的瓶盖的中心设有透气口，透气口填充透气材料。