CN107929344B - 一种用于预防及治疗喉癌的紫草复方组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于治疗喉癌的药物组方。它的活性成分是由包括如下质量比的组份制成：紫草提取物I、人参提取物和紫草提取物II的质量比为5:10:3，本发明紫草提取物I、人参提取物和紫草提取物II组方简单，药物来源广泛，药效作用明确，适用于治疗鳞状细胞癌性喉癌。

Description

一种用于预防及治疗喉癌的紫草复方组合物
技术领域
本发明涉及一种中药，即一种用于预防及治疗喉癌的紫草复方组合物。
背景技术
喉癌（ Carcinoma of larynx）是一种常见的恶性肿瘤，近年来，世界多数地区喉癌的发病率及死亡率均有明显增高趋势，严重威胁着人类的健康与生命。紫草具有抑制肿瘤生长、安神镇静、机体免疫调节及促进机体伤口愈合等作用，因此优选紫草入方。人参为百草之王，有大补元气之功效，现代医学研究表明，人参具有广泛的抗肿瘤功效 。喉癌是一种消耗性疾病，使患者身体日益衰弱，在抗癌的同时，应注意加强扶正固本，以扶正攻毒消除病灶，所以本方还添加人参提取物组方。紫草、人参协同作用用于治疗喉癌疾病未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于预防及治疗喉癌的紫草复方组合物，本发明紫草、人参药物来源广泛；紫草提取物I、人参提取物和紫草提取物II配伍后使用药效明显增加；适用于制备预防及治疗抗喉癌疾病的产品。
本发明提供的一种用于预防及治疗喉癌的紫草复方组合物，其活性成分是由以下质量比的原料药制成：
紫草提取物I、人参提取物和紫草提取物II的质量比为5:10:3。所述的紫草提取物I制备方法如下：取紫草药材，打成粗粉，过40目筛，加60%乙醇10倍量提取，提取2次，每次1h，合并提取液，经浓缩至干，粉碎，得粉末；所述的紫草提取物II制备方法如下：取紫草药材，打成粗粉，过40目筛，加乙醚10倍量回流提取，提取2次，每次1h，合并提取液，减压烘干，粉碎，得粉末。
本发明中，所述紫草提取物，人参提取物的用药部位是原药材干燥根的提取物。
上述中药组方的剂型可为片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、糖浆剂、浸膏剂中至少一种；所述剂型均属于口服制剂。
上述中药组方可采用如下方法之一制备而成：
（1）将所述组份的粉末混合而成。
（2）将所述组份混合后或分别用水煎煮，将煎煮液制成制剂。
（3）将所述组份混合后或分别用有机溶剂提取，将提取液制成剂型。
本发明中，所述组分的提取属于本领域中常规的提取方法；采用的有机溶剂均为本领域中常规的提取溶剂，如：具体采用乙醇水溶液。
经实验结果表明，紫草提取物I、紫草提取物II和人参提取物配伍充分发挥了中药组方抗喉癌的作用。
本发明具有以下优点：
1.配伍组成简单，物来源广泛，有效组分明确，有效部位制备工艺已经确立。
2.药效作用明确：改善荷瘤小鼠生长状况，使其免疫功能增强。复方组合物能提高小鼠机体抗肿瘤免疫应答水平，调节细胞因子分泌，从而发挥抗喉癌作用。
3.紫草提取物I、人参提取物和紫草提取物II配伍后使用药效明显增加。
4.扶正固本、益气解毒。适用于喉癌的辅助用药、保健用品，可提高免疫功能。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1、中药组方及其制备与药效学实验
紫草提取物I制备：取紫草药材，打成粗粉，过40目筛，加60%乙醇10倍量提取，提取2次，每次1h，合并提取液，经浓缩至干，粉碎，得粉末。
人参提取物制备：取人参药材，打成粗粉，过40目筛，加70％乙醇10倍量回流提取2次，每次1h，弃去残渣，合并乙醇提取液，经浓缩至干，粉碎，得粉末。
紫草提取物II制备：取紫草药材，打成粗粉，过40目筛，加乙醚10倍量回流提取，提取2次，每次1h，合并提取液，减压烘干，粉碎，得粉末。
将上述紫草提取物I、人参提取物和紫草提取物II的质量比为5:10:3混合，即得到本发明中药粉剂组方。
本发明中药组方的应用实验：
体内抗肿瘤作用实验
小鼠荷瘤动物模型的建立
取Hep-2细胞，用含有12.5%胎牛血清的RP-MI1640 培养基， 在37℃、5% CO2 培养箱中培养，待细胞长至对数生长期，用0.25%胰酶消化，磷酸盐缓冲液( PBS) 清洗3次并制成2×1010/ml 细胞悬液，给每只小鼠背部皮下接种0.2ml 细胞悬液，于接种2周后，测量肿瘤直径≥（6±1）mm，小鼠荷瘤动物模型的建立成功，备用。
给药方法
将接种成功的荷瘤小鼠随机分组，每组10 只，每隔1日灌胃给药1次，剂量及结果见表1，连续五次，阴性对照给同体积的生理盐水。
荷瘤小鼠肿瘤生长的检测
给药后第28 d，处死小鼠取出肿瘤，用游标卡尺测量肿瘤长径（a）和短径（b），计算肿瘤体积（mm3）=1/2×a×b2。
结果判定
肿瘤抑瘤率计算：抑瘤率 =（对照组肿瘤的平均体积－实验组肿瘤的平均体积）/对照组肿瘤的平均体积×100％。
统计学分析
用Spass11.0专业统计软件，资料分析采用t 检验，P <0 .05 为差异有统计学意义。
实验结果
肉眼观察各组小鼠肿瘤生长状况，给药时间达14d后可见对照组肿瘤体积生长明显加快，而实验组肿瘤体积虽然比注射开始有所增大但比对照组小，给药时间达28d后，处死小鼠取出肿瘤，用游标卡尺测量肿瘤长径和短径。实验组的标本总体积均分别小于对照组，复方制剂及各单味药组与对照组相比，对荷瘤小鼠肿瘤体积有显著的抑制作用，并具统计学意义（P＜0.01）。
Figure 148144DEST_PATH_IMAGE001
注意：★表示与生理盐水组相比有显著性差异，P＜0.01。▲表示与紫草提取物单独用药组相比有显著性差异，P＜0.01。
实施例2、中药组方及其制备与药效学实验
紫草提取物I制备：取紫草药材，打成粗粉，过40目筛，加60%乙醇10倍量提取，提取2次，每次1h，合并提取液，经浓缩至干，粉碎，得粉末。
人参提取物制备：取人参药材，打成粗粉，过40目筛，加70％乙醇10倍量回流提取2次，每次1h，弃去残渣，合并乙醇提取液，经浓缩至干，粉碎，得粉末。
紫草提取物II制备：取紫草药材，打成粗粉，过40目筛，加乙醚10倍量回流提取，提取2次，每次1h，合并提取液，减压烘干，粉碎，得粉末。
将上述紫草提取物I、人参提取物和紫草提取物II的质量比为5:10:3混合制成口服液。
紫草口服液对喉癌荷瘤小鼠免疫调节作用机制的研究
药物处理
取紫草口服液浓缩物，滤过除菌，4 ℃贮存，用时以含10%胎牛血清的培养基稀释至所需浓度。
给药方法及肿瘤模型的建立
将60 只小鼠平均分成6组，阴性对照组和模型组每天灌胃生理盐水，按照表2小鼠口服给药剂量，连续灌胃14天，模型组和紫草口服液药物作用组消毒腋下皮肤，无菌注射1×1010个/L Hep-2细胞悬液0.2ml，并每天持续灌胃直至第 4 周实验结束。阳性对照以90mg/kg左旋咪唑灌胃，2次/周。
测定紫草口服液对小鼠免疫功能的影响
T 淋巴细胞转化实验
分离、提取脾T淋巴细胞，调细胞浓度至2×109/L，实验孔加含10mg/L ConA的培养基，对照孔加等体积的RPMI1640培养基。37℃，5% CO2培养68h，加入5g/L MTT，4h后以酸性异丙醇溶解甲臜沉淀，570nm波长处测定A值。刺激指数(SI)=实验孔A值/对照孔A值。
NK 细胞杀伤活性检测
对照组为靶细胞(YAC-l细胞株)，实验组为靶细胞加效应细胞(小鼠 NK 细胞)，37℃，5%CO2培养 4 h，其余同上法。NK 细胞杀伤率(%)=〔1-(AE +T-AE )/AT 〕×100 %(AE +T为效应细胞加靶细胞的 A 值，AE 为效应细胞的 A 值，A T 为靶细胞的 A 值)。
B淋巴细胞功能测定
采用溶血分光光度法测定 B 淋巴细胞的功能。取5 ×109 /L B 淋巴细胞悬液1m l 、0. 2 %SRBC 悬液1 ml 、补体稀释液 1 m l 共加入试管中，37 ℃水浴 60 min ,于分光光度计波长 413 nm 处读值 。
ELISA 双抗体夹心法分别检测 IL-2和 VEGF 的含量。均按照商品试剂盒说明操作。
统计学分析
用Spass11.0专业统计软件，资料分析采用t 检验，P <0 .05 为差异有统计学意义。
实验结果
如表2、表3所示，模型组荷瘤小鼠的刺激指数、脾 NK 细胞杀伤能力、抗体释放量较生理盐水阴性对照组小鼠显著降低（p<0.01），而药物剂量组荷瘤小鼠的刺激指数、脾 NK细胞的杀伤能力、抗体释放量较模型组显著增高（p<0.01），接近甚至高于生理盐水阴性对照组小鼠，且呈浓度相关性；小鼠细胞因子I L-2 释放量增高，VEGF释放量降低。复方紫草口服液具有抗人喉鳞癌作用，能提高小鼠机体抗肿瘤免疫应答水平，调节细胞因子分泌，从而发挥抗喉癌作用。
Figure 962516DEST_PATH_IMAGE002

Claims (2)

1.一种用于预防及治疗喉癌的紫草复方组合物，其活性成分是由以下质量比的原料药组成：紫草提取物I、人参提取物和紫草提取物II的质量比为5:10:3；所述的紫草提取物I制备方法如下：取紫草药材，打成粗粉，过40目筛，加60%乙醇10倍量提取，提取2次，每次1h，合并提取液，经浓缩至干，粉碎，得粉末；所述的紫草提取物II制备方法如下：取紫草药材，打成粗粉，过40目筛，加乙醚10倍量回流提取，提取2次，每次1h，合并提取液，减压烘干，粉碎，得粉末；所述的人参提取物制备方法如下：取人参药材，打成粗粉，过40目筛，加70％乙醇10倍量回流提取2次，每次1h，弃去残渣，合并乙醇提取液，经浓缩至干，粉碎，得粉末。
2.根据权利要求1所述的用于预防及治疗喉癌的紫草复方组合物，其特征在于：所述的组合物为片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、糖浆剂或浸膏剂。
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