CN107854716B - 一种抗菌除湿型敷料贴及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种抗菌除湿型敷料贴及其制备方法。本发明抗菌除湿型敷料贴由胶布层、吸收层、敷料层和保护膜组成，所述的敷料层包括以下组分及其重量份数：胶原蛋白抗菌肽2‑4份、红枣果胶2‑6份、壳聚糖4‑8份、甘露糖2‑4份、芦荟多糖1‑3份、褐藻寡糖3‑6份、聚L‑乳酸4‑8份、海藻酸钠4‑8份、羧甲基纤维素钠3‑6份、抗敏剂1‑3份、苹果多酚1‑4份和泛醇8‑12份。本发明的技术优势在于：采用胶原蛋白抗菌肽、红枣果胶与壳聚糖等组分相互配合、协同作用对于细菌的生长和繁殖具有很好的抑制作用，对成纤维细胞的增殖具有很好的促进作用，且具有更好地保液能力和渗湿度。

Description

一种抗菌除湿型敷料贴及其制备方法
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种抗菌除湿型敷料贴及其制备方法。
背景技术
传统伤口敷料分为干纱布和油纱，干型传统敷料可以起到对伤口监督覆盖作用，不能用于感染性伤口，渗液管理能力有限、粘连伤口会对新生上皮组织再损伤，病人更换敷料后疼痛。油纱型敷料因含有凡士林或甘油三酯，可以避免粘连伤口，但仍旧不能促进愈合。同时由于创面分泌的液体不能透过胶布层，造成对局部皮肤的浸泡，使伤口及周围皮肤变白，严重的会使皮肤腐烂，伤口更是难以愈合。国内市面上单纯的水凝胶类型含有藻酸钙的医用敷料可以避免粘连伤口、促进愈合，但是价格较贵，其他的水胶体敷料或者泡沫敷料中使用的聚氨酯等其他高分子化合物以达到吸渗效果，来保护创面防止粘连但是促愈合效果并不理想。
中国专利CN103263687B公开了一种生物敷料贴，该辅料贴除含有红枣果胶外，还含有冰片、白矾等特征性成分，起到协同辅助作用。红枣果胶因其具有特定的酯化度低、凝胶度高的特点，且长链上键合有活性因子，除了具有普通果胶所具备凝胶性、稳定性、强吸水保湿性之外，其促进伤口愈合、去除疤痕效果极好，但其其抗菌效果有限，容易出现轻微的红肿热痛等炎症。
红枣果胶因其具有特定的酯化度低、凝胶度高特点，且长链上键合有活性因子，除了具有普通果胶所具备凝胶性、稳定性、强吸水保水性外，其促进创伤愈合、去除疤痕效果极好，中国专利申请CN103263687A公开了一种利用红枣果胶与冰片、白矾混合物作为功能性辅料层的辅料贴，其能有效促进伤口愈合，不会发生粘连，但是其杀菌效果较差，伤口容易出现红肿、化脓的现象。
发明内容
为解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种抗菌除湿型敷料贴及其制备方法。
本发明一种抗菌除湿型敷料贴，由胶布层、吸收层、敷料层和保护膜组成，所述的敷料层包括以下组分及其重量份数：
胶原蛋白抗菌肽2-4份、红枣果胶2-6份、壳聚糖4-8份、甘露糖2-4份、芦荟多糖1-3份、褐藻寡糖3-6份、聚L-乳酸4-8份、海藻酸钠4-8份、羧甲基纤维素钠3-6份、抗敏剂1-3份、苹果多酚1-4份和泛醇8-12份。
优选的，所述的敷料层由以下组分及其重量份数组成：
胶原蛋白抗菌肽3份、红枣果胶4份、壳聚糖6份、甘露糖3份、芦荟多糖2份、褐藻寡糖4.5份、聚L-乳酸6份、海藻酸钠6份、羧甲基纤维素钠4.5份、抗敏剂2份、苹果多酚2.5份和泛醇10份。
优选的，所述的胶原蛋白抗菌肽的制备方法为：
1)取鲥鱼鱼骨粉碎，加入鲥鱼鱼骨质量2倍的水，煮沸后保持20min后冷却至室温，过滤得鱼骨泥；
2)将步骤1)所得鱼骨泥150g与蒸馏水300ml装入烧瓶并置于38℃水浴中，加入0.3g胰蛋白酶和0.4g胶原蛋白酶酶解2h，酶解后在85℃水浴中保温15min使酶失活，得酶解液；
3)将步骤2)所得酶解液冷却至室温，1000r/min离心分离，收集上清液，浓缩干燥，即得。
优选的，所述的红枣果胶的制备方法为：
(1)将红枣洗净、烘干，粉碎过80目筛，得红枣粉末；
(2)取步骤(1)所得红枣粉末200g加入600ml水，加入纤维素酶6g和果胶酶3g，37℃下反应30min后过滤得滤渣A；
(3)将步骤(2)所得滤渣A用500ml体积分数70％的乙醇溶液浸泡50min，向过滤所得滤渣B中加入800ml pH为2.7的醋酸溶液在48℃水浴中微波提取30min，过滤得红枣提取液；
(4)将步骤(3)所得红枣提取液浓缩，用柠檬酸钠调pH至7后用质量分数20％的过氧化氢脱色8h，醇沉，干燥，即得。
再优选的，所述的抗敏剂为甘草酸二钾。
另外，本发明还提供了一种抗菌除湿型敷料贴的制备方法，包括以下步骤：
S1、按重量份称取胶原蛋白抗菌肽、壳聚糖、甘露糖、芦荟多糖、褐藻寡糖、苹果多酚和泛醇在搅拌机中充分搅拌，得混合物A；
S2、按重量份称取红枣果胶、海藻酸钠和羧甲基纤维素钠，混合成固体粉末，过200目筛，得混合物B；
S3、将步骤S2所得混合物B缓慢加入步骤S1所得混合物A中，搅拌下加入聚L-乳酸和抗敏剂得敷料；
S4、将吸收层贴于胶布层，将步骤S3所得敷料经辐照灭菌后均匀涂抹在敷料贴的吸收层上形成敷料层，在敷料层上覆盖保护膜即得。
壳聚糖CAS号：9012-76-4；甘露糖CAS号：3458-28-4；芦荟多糖CAS号：8001-97-6；褐藻寡糖CAS号：9005-38-3；聚L-乳酸CAS号：26100-51-6；海藻酸钠CAS号：9005-38-3；羧甲基纤维素钠CAS号：9004-32-4；甘草酸二钾CAS号：68797-35-3；苹果多酚CAS号：85251-63-4；泛醇CAS号：91-13-0。
胶原蛋白抗菌肽是参与固有免疫的、具有广谱高效抗菌活性的物质，在动植物体内大量存在，具有抗菌性强、安全无毒、水溶性好、人稳定性好等特点，本发明采用胰蛋白酶和胶原蛋白酶酶解等步骤从鲥鱼鱼骨中提取胶原蛋白抗菌肽用于敷料贴，其会破坏细菌的细胞膜或细胞壁，造成细胞中内容物的溢出而使细菌死亡；本发明采用水溶液条件下酶解后醇沉后醋酸提取等步骤制备得到的红枣果胶具有特定的酯化度低、凝胶度高的特点，且长链上键合有活性因子，除了具有普通果胶所具备凝胶性、稳定性和强吸水保水性之外，其促进伤口愈合和去除疤痕效果极好。本发明各组分相互配合、协同作用共同起到抑菌和促进细胞增殖的作用。
与现有技术相比，本发明的技术优势在于：
(1)本发明采用胰蛋白酶和胶原蛋白酶酶解等步骤从鲥鱼鱼骨中提取得到的胶原蛋白抗菌肽用于敷料贴，在敷料贴医药技术领域领域尚属首次；
(2)本发明采用水溶液条件下酶解后醇沉后醋酸提取等步骤制备得到的红枣果胶，具有强吸水保水性和促进伤口愈合等效果；
(3)本发明制备的敷料贴对于细菌的生长和繁殖具有很好的抑制作用，对成纤维细胞的增殖具有很好的促进作用，具有更好地保液能力和渗湿度。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明做进一步的说明，这些实施例仅用于例证的目的，并不限制本发明的保护范围。
实施例1一种抗菌除湿型敷料贴
所述的抗菌除湿型敷料贴，由胶布层、吸收层、敷料层和保护膜组成，所述的敷料层由以下组分及其重量份数组成：胶原蛋白抗菌肽2份、红枣果胶2份、壳聚糖4份、甘露糖2份、芦荟多糖1份、褐藻寡糖3份、聚L-乳酸4份、海藻酸钠4份、羧甲基纤维素钠3份、甘草酸二钾1份、苹果多酚1份和泛醇8份。
所述的胶原蛋白抗菌肽的制备方法为：
1)取鲥鱼鱼骨粉碎，加入鲥鱼鱼骨质量2倍的水，煮沸后保持20min后冷却至室温，过滤得鱼骨泥；
2)将步骤1)所得鱼骨泥150g与蒸馏水300ml装入烧瓶并置于38℃水浴中，加入0.3g胰蛋白酶和0.4g胶原蛋白酶酶解2h，酶解后在85℃水浴中保温15min使酶失活，得酶解液；
3)将步骤2)所得酶解液冷却至室温，1000r/min离心分离，收集上清液，浓缩干燥，即得。
所述的红枣果胶的制备方法为：
(1)将红枣洗净、烘干，粉碎过80目筛，得红枣粉末；
(2)取步骤(1)所得红枣粉末200g加入600ml水，加入纤维素酶6g和果胶酶3g，37℃下反应30min后过滤得滤渣A；
(3)将步骤(2)所得滤渣A用500ml体积分数70％的乙醇溶液浸泡50min，向过滤所得滤渣B中加入800ml pH为2.7的醋酸溶液在48℃水浴中微波提取30min，过滤得红枣提取液；
(4)将步骤(3)所得红枣提取液浓缩，用柠檬酸钠调pH至7后用质量分数20％的过氧化氢脱色8h，醇沉，干燥，即得。
所述的抗菌除湿型敷料贴的制备方法，包括以下步骤：
S1、按重量份称取胶原蛋白抗菌肽、壳聚糖、甘露糖、芦荟多糖、褐藻寡糖、苹果多酚和泛醇在搅拌机中充分搅拌，得混合物A；
S2、按重量份称取红枣果胶、海藻酸钠和羧甲基纤维素钠，混合成固体粉末，过200目筛，得混合物B；
S3、将步骤S2所得混合物B缓慢加入步骤S1所得混合物A中，搅拌下加入聚L-乳酸和抗敏剂得敷料；
S4、将吸收层贴于胶布层，将步骤S3所得敷料经辐照灭菌后均匀涂抹在敷料贴的吸收层上形成敷料层，在敷料层上覆盖保护膜即得。
实施例2一种抗菌除湿型敷料贴
所述的抗菌除湿型敷料贴，由胶布层、吸收层、敷料层和保护膜组成，所述的敷料层由以下组分及其重量份数组成：胶原蛋白抗菌肽3份、红枣果胶4份、壳聚糖6份、甘露糖3份、芦荟多糖2份、褐藻寡糖4.5份、聚L-乳酸6份、海藻酸钠6份、羧甲基纤维素钠4.5份、甘草酸二钾2份、苹果多酚2.5份和泛醇10份。
所述的胶原蛋白抗菌肽、红枣果胶和抗菌除湿型敷料贴的制备方法与实施例1类似。
实施例3一种抗菌除湿型敷料贴
所述的抗菌除湿型敷料贴，由胶布层、吸收层、敷料层和保护膜组成，所述的敷料层由以下组分及其重量份数组成：胶原蛋白抗菌肽4份、红枣果胶6份、壳聚糖8份、甘露糖4份、芦荟多糖3份、褐藻寡糖6份、聚L-乳酸8份、海藻酸钠8份、羧甲基纤维素钠6份、甘草酸二钾3份、苹果多酚4份和泛醇12份。
所述的胶原蛋白抗菌肽、红枣果胶和抗菌除湿型敷料贴的制备方法与实施例1类似。
对比例1一种抗菌除湿型敷料贴
所述的抗菌除湿型敷料贴，由胶布层、吸收层、敷料层和保护膜组成，所述的敷料层由以下组分及其重量份数组成：胶原蛋白抗菌肽3份、红枣果胶4份、壳聚糖6份、甘露糖3份、褐藻寡糖6.5份、聚L-乳酸6份、海藻酸钠6份、羧甲基纤维素钠4.5份、甘草酸二钾2份、苹果多酚2.5份和泛醇10份。
所述的胶原蛋白抗菌肽、红枣果胶和抗菌除湿型敷料贴的制备方法与实施例2类似。
对比例1与实施例2的区别在于：不含芦荟多糖，增加褐藻寡糖的含量。
对比例2一种抗菌除湿型敷料贴
所述的抗菌除湿型敷料贴，由胶布层、吸收层、敷料层和保护膜组成，所述的敷料层由以下组分及其重量份数组成：紫菜蛋白抗菌肽3份、红枣果胶4份、壳聚糖6份、甘露糖3份、芦荟多糖2份、褐藻寡糖4.5份、聚L-乳酸6份、海藻酸钠6份、羧甲基纤维素钠4.5份、甘草酸二钾2份、苹果多酚2.5份和泛醇10份。
所述的红枣果胶和抗菌除湿型敷料贴的制备方法与实施例2类似。
对比例2与实施例2的区别在于：将胶原蛋白抗菌肽替换为紫菜蛋白抗菌肽，其制备方法胶原蛋白抗菌肽的制备方法类似。
对比例3一种抗菌除湿型敷料贴
所述的抗菌除湿型敷料贴，由胶布层、吸收层、敷料层和保护膜组成，所述的敷料层由以下组分及其重量份数组成：胶原蛋白抗菌肽3份、苹果果胶4份、壳聚糖6份、甘露糖3份、芦荟多糖2份、褐藻寡糖4.5份、聚L-乳酸6份、海藻酸钠6份、羧甲基纤维素钠4.5份、甘草酸二钾2份、苹果多酚2.5份和泛醇10份。
所述的胶原蛋白抗菌肽和抗菌除湿型敷料贴的制备方法与实施例2类似。
对比例3与实施例2的区别在于：将红枣果胶替换为苹果果胶，其制备方法与红枣果胶类似。
试验例1：抗菌试验
1.试验材料：实施例1-3及对比例1-3制备的抗菌除湿型敷料贴。
2.试验对象：金黄色葡萄球菌菌落和伤寒杆菌菌落。
3.试验方法：
1)准备下层无菌培养基：向无菌平皿中倾注10mL琼脂培养基，并使其凝结；
2)准备上层接种培养基：取45℃±2℃的琼脂培养基150mL放入烧瓶，加入细菌菌落总数为X1的试验菌液。振荡烧瓶使细菌分布均匀，向step1中的每个平皿中倾注5mL，并使其凝结。接种过的琼脂培养面应在1h内使用；
3)将平皿分别置于6个无菌的密闭等大的容器中，在这5个密封容器中加入等大的小烧杯用于分别存放按照实施例1-3及对比例1-3制备的抗菌除湿型敷料贴，在小烧杯的底部设置加热小烧杯的加热器促进面膜有效组分的挥发，控制密封容器中的气体成分始终与无菌的空气成分相同。经过24h的培养后，检测培养基中细菌菌落总数为X2，并按照下式计算得出细菌菌落降低率。
细菌菌落降低率＝(X1-X2)/X1。
4.试验结果：抗菌结果见表1。
表1菌落降低率(％)结果
组别 实施例1 实施例2 实施例3 对比例1 对比例2 对比例3
金黄色葡萄球菌菌落降低率 85.12 88.18 83.24 80.34 78.26 77.64
伤寒杆菌菌落降低率 77.24 82.45 79.36 74.18 71.48 69.23
从表1可以看出本发明实施例1-3制备的抗菌除湿型敷料贴较对比例1-3制备的敷料贴使得金色葡萄球菌菌落和伤寒杆菌菌落降低率更高效果更好，说明本发明采用胶原蛋白抗菌肽、红枣果胶与壳聚糖等组分相互配合、协同作用对于细菌的生长和繁殖具有很好的抑制作用。另外使用实施例2金色葡萄球菌菌落和伤寒杆菌菌落降低率最高，为本发明的优选实施例。
试验例2：敷料治愈性能检测
1.试验材料：实施例1-3及对比例1-3制备的抗菌除湿型敷料贴。
2.试验对象：新生儿皮肤的细胞。
3.试验方法：将新生儿皮肤的细胞作为培养细胞在质量分数10％新生牛血清的DMEM高糖培养液，体积分数5％CO2、37℃条件下进行培养24h，然后分别接种到中药成分的质量百分含量为1％的含质量分数0.5％新生牛血清的DMEM高糖培养液中，再培养48h，其中中药成分分两种情况添加：①所述的中药成分为各实施例制备的敷料；②作为空白对照在未添加任何中药成分的含有质量分数0.5％新生牛血清的DMEM高糖培养液中进行培养48h。用常规细胞计数方法进行计数，增殖效果如表2所示。
表2各敷料贴对成纤维细胞的增殖作用
组别 空白对照 实施例1 实施例2 实施例3 对比例1 对比例2 对比例3
成纤维细胞个数 760 894 986 884 825 832 824
增殖率/％ - 17.63 22.74 16.32 8.55 9.47 8.42
从表2可以看出本发明实施例1-3制备的敷料贴对成纤维细胞的增殖的促进作用较对比例1-3制备的敷料贴更高，说明本发明采用胶原蛋白抗菌肽、红枣果胶与壳聚糖等组分相互配合、协同作用对成纤维细胞的增殖具有很好的促进作用。另外实施例2抗菌除湿型敷料贴对成纤维细胞的增殖作用较实施例1和实施例3更好，为本发明的优选实施例。
试验例3：除湿性能测试
1.试验材料：实施例1-3及对比例1-3制备的抗菌除湿型敷料贴。
2.试验方法：测定实施例1-3和对比例1-3抗菌除湿型敷料贴的吸水倍率、吸水速率、保液能力和透湿度，其概念具体定义如下：
①吸水倍率：在不锈钢容器中放入约10ml的生理盐水(0.9％氯化钠)，将试验材料切成4×4cm的试验片，密封于容器内保存8小时，放入容器前的试验片重量为ml(g)，8小时后取出的试验片重量为m2(g)，吸水倍率Q＝(m2-m1)/ml；
②吸水速率：在试验片表面滴下500μl的生理盐水(0.9％氯化钠)，测定液体被完全吸收的时间；
③保液能力：在不锈钢容器中放入L1(ml)的生理盐水(0.9％氯化钠)，将试验材料切成7cm×10cm×0.1cm的试验片，密封于容器内保存8小时，取出试验片后，测量剩余生理盐水的量L2(ml)，保液能力＝(L2-L1)/(7*10*0.1)*103(L/m3)；
④透湿度：按照GB1037-88杯式法进行测量。在玻璃容器中放入约10ml精馏水，将试验材料切成直径为80mm的圆形试验片，将试验片覆盖在玻璃容器的开口部位，以石蜡做的薄膜将玻璃容器密封，测定此时的重量WO。然后在40℃-75％的恒温恒湿器中静置24小时后，准确测量放冷后的重量W1，透湿度＝(W1-W0)*104/A(g/m2/24h)。
表3除湿性能测试结果
组别 实施例1 实施例2 实施例3 对比例1 对比例2 对比例3
吸水倍率 23 28 25 18 16 12
吸水速率(s) 9 6 10 15 16 18
保液能力(L/m<sup>3</sup>) 12000 15000 14000 9000 8000 8500
透湿度(g/m<sup>2</sup>/24h) 1359 1467 1239 890 873 826
止血时间(s) 68 57 72 126 138 142
从表3可以看出本发明实施例1-3制备的敷料贴较对比例1-3制备的敷料贴吸水倍率高，保液能力高且透湿度高，说明本发明采用胶原蛋白抗菌肽、红枣果胶与壳聚糖等组分相互配合、协同作用具有更好地保液能力和渗湿度。另外实施例2抗菌除湿型敷料贴的吸水倍率和吸水速率最高、保液能力和透湿度较实施例1和实施例3更好，止血时间较实施例1和实施例3更短，为本发明的优选实施例。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种抗菌除湿型敷料贴，其特征在于，由胶布层、吸收层、敷料层和保护膜组成，所述的敷料层包括以下组分及其重量份数：
胶原蛋白抗菌肽2-4份、红枣果胶2-6份、壳聚糖4-8份、甘露糖2-4份、芦荟多糖1-3份、褐藻寡糖3-6份、聚L-乳酸4-8份、海藻酸钠4-8份、羧甲基纤维素钠3-6份、抗敏剂1-3份、苹果多酚1-4份和泛醇8-12份；
所述的胶原蛋白抗菌肽的制备方法为：
1)取鲥鱼鱼骨粉碎，加入鲥鱼鱼骨质量2倍的水，煮沸后保持20min后冷却至室温，过滤得鱼骨泥；
2)将步骤1)所得鱼骨泥150g与蒸馏水300ml装入烧瓶并置于38℃水浴中，加入0.3g胰蛋白酶和0.4g胶原蛋白酶酶解2h，酶解后在85℃水浴中保温15min使酶失活，得酶解液；
3)将步骤2)所得酶解液冷却至室温，1000r/min离心分离，收集上清液，浓缩干燥，即得；
所述的红枣果胶的制备方法为：
(1)将红枣洗净、烘干，粉碎过80目筛，得红枣粉末；
(2)取步骤(1)所得红枣粉末200g加入600ml水，加入纤维素酶6g和果胶酶3g，37℃下反应30min后过滤得滤渣A；
(3)将步骤(2)所得滤渣A用500ml体积分数70％的乙醇溶液浸泡50min，向过滤所得滤渣B中加入800ml pH为2.7的醋酸溶液在48℃水浴中微波提取30min，过滤得红枣提取液；
(4)将步骤(3)所得红枣提取液浓缩，用柠檬酸钠调pH至7后用质量分数20％的过氧化氢脱色8h，醇沉，干燥，即得。
2.根据权利要求1所述的抗菌除湿型敷料贴，其特征在于，所述的敷料层由以下组分及其重量份数组成：
胶原蛋白抗菌肽3份、红枣果胶4份、壳聚糖6份、甘露糖3份、芦荟多糖2份、褐藻寡糖4.5份、聚L-乳酸6份、海藻酸钠6份、羧甲基纤维素钠4.5份、抗敏剂2份、苹果多酚2.5份和泛醇10份。
3.根据权利要求1或2所述的抗菌除湿型敷料贴，其特征在于，所述的抗敏剂为甘草酸二钾。
4.根据权利要求1-3任一项所述的抗菌除湿型敷料贴的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、按重量份称取胶原蛋白抗菌肽、壳聚糖、甘露糖、芦荟多糖、褐藻寡糖、苹果多酚和泛醇在搅拌机中充分搅拌，得混合物A；
S2、按重量份称取红枣果胶、海藻酸钠和羧甲基纤维素钠，混合成固体粉末，过200目筛，得混合物B；
S3、将步骤S2所得混合物B缓慢加入步骤S1所得混合物A中，搅拌下加入聚L-乳酸和抗敏剂得敷料；
S4、将吸收层贴于胶布层，将步骤S3所得敷料经辐照灭菌后均匀涂抹在敷料贴的吸收层上形成敷料层，在敷料层上覆盖保护膜即得。
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