CN107854630B - 米秕糠提取物以及制备方法和应用 - Google Patents

米秕糠提取物以及制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及医药领域，具体涉及米秕糠提取物、制备方法以及在医药和保健食品中的应用。本发明所述的米秕糠提取物，含有以下重量百分比的成分：三十烷醇50％‑90％、二十八烷醇1％‑20％，三十二烷醇5％‑30％。本发明是以米秕糠为原料提取而成。本发明所述的米秕糠提取物对免疫功能有增强作用，结果证实本发明所述的米秕糠提取物对小鼠溶血素抗体生成，小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用，小鼠脾淋巴细胞增殖都有明显的促进作用。并且能激活小鼠NK细胞的活性，能明显拮抗环磷酰胺致Lewis肺癌小鼠白细胞数降低作用。此外，米秕糠提取物能显著降低高血脂症大鼠血清TC、TG和LDL‑C水平，同时升高血清HDL‑C水平。本发明涉及米秕糠提取物在制备药物以及在制备保健品中的应用。尤其是在制备增强免疫功能和制备降血脂的药物和保健品中应用。

Description

米秕糠提取物以及制备方法和应用
技术领域
本发明涉及医药领域，具体涉及米秕糠提取物、制备方法以及在医药和保健食品中的应用。
背景技术
我国是稻谷生产大国，稻谷年产量约占世界总产量的30％。米糠作为稻米加工的副产物，产量大，提取利用价值高。由昆明龙津药业股份有限公司起草、云南省食品药品检验所复核的“米秕糠药材标准”中记载其功能主治为：健脾开胃，消食化积，下气通肠；治脚气；用于食欲不振，噎膈，反胃，食积；脚气。
中国专利申请号93109943.9公开了一种“用于降血脂的总烷醇”，是从蜂蜡中提取的含有二十八烷醇至三十二烷醇的混合物，其主要成分是二十八烷醇为主，并含有三十烷醇和三十二烷醇的有效部位，用于降血脂、抗动脉硬化，亦可用于减肥。该申请没有对混合物中的各烷醇之间的比例关系进行说明，也没有对作为主要成分的二十八烷醇、三十烷醇、三十二烷醇的含量和比例进行说明。
市售多廿烷醇片，原料药是从甘蔗蜡中提取的，其主要含二十八烷醇60-70％，三十烷醇仅占10-15％，功能主治为降胆固醇。
中国专利申请号为200610048846.8、200910146061.8的中国专利申请公布了三十烷醇对肝癌、肠癌、肺癌等具有不同程度的疗效，申请号为201611234568.5的中国专利申请公布了三十烷醇作为COX-2和VEGF抑制剂的应用，申请号为200710066112.7的中国专利申请公布了三十烷醇单体的降血脂药物制剂。
二十八烷醇具有抗疲劳的生理功能，还具有促进高血脂症的脂质分解，提高体力、耐力和精力，提高能量代谢率，改善心肌缺血，保护肝脏，抗凝血等作用(郭天一，罗非君.二十八烷醇生理功能研究进展.[J].粮食与油脂.2017，30(3):26-30.)。
目前尚未检索到有关米秕糠提取物在提高免疫功能和降脂方面应用的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有提高免疫功能和降血脂的米秕糠提取物。
本发明的另一目的在于提供这种米秕糠提取物的制备方法。
本发明的再一目的在于提供这种米秕糠提取物的应用。
本发明所述的米秕糠提取物，含有以下重量百分比的成分：三十烷醇50％-90％、二十八烷醇1％-20％，三十二烷醇5％-30％。
本发明所述的米秕糠提取物，更佳的成分范围为(重量百分比)：三十烷醇70％-85％、二十八烷醇1％-20％，三十二烷醇10％-30％。
本发明所述的米秕糠提取物的制备方法由以下步骤组成：
一、以米秕糠为原料，进入湿式挤压膨化机，饱和蒸汽喷入压力0.6-0.8MPa，模板喷孔直径8-10mm，膨化比1：1.1-1.2，膨化温度100-110℃，得到多微孔颗粒物料，含水分12-14％；
二、步骤一的多微孔颗粒物料，用平板烘干机干燥至水分6-9％，温度50-65℃。按重量体积比1:4-6加入异丙醇或正己烷，温度50-65℃，浸出2-3h，回收溶剂得到米糠毛油；
三、将步骤二的米糠毛油搅拌加热至65-75℃，加入75-85℃的水，加水量为油重的5％-10％，静置沉淀1-2h，收集上层米糠毛油；
四、将步骤三的上层米糠毛油搅拌加热至65-75℃，加入75-85℃的水，加水量为油重的5％-10％，加入草酸或80-90％的磷酸，加入量为油重的0.1％-0.5％，搅拌20-30min脱胶，静置沉淀4-8h，收集上层脱胶油；
五、将步骤四的上层脱胶油加热至95-105℃后，真空干燥脱水，冷至70-80℃，搅拌通入5-10℃冷水间接降温，降温速率为2-6℃/h，降温至20-25℃，室温下继续慢速搅拌养晶24-36h后过滤，得到脱蜡油及蜡饼；脱蜡油用做其它用途；
六、所述的蜡饼挤压出蜡油后，得到粗制糠蜡，粗制糠蜡按重量比1:4-7加入异丙醇，加热至45-60℃，保持温度搅拌40-60min，静置2-3h分层，取上层溶液回收溶剂，再以相同条件重复萃取一次，回收溶剂得到精制米糠蜡；
七、按重量比精制米糠蜡：氧化钙：水为5:1-1.1:1-1.1混合，200℃下反应8-10h，冷却，得固体产物；
八、将所得固体产物粉碎至80-100目，按重量比1:14-16加入92-96％的乙醇溶液，保持温度70-80℃搅拌1-2h，搅拌速度10-15r/min，热过滤除去不溶物，再回收滤液中的溶剂获得长链脂肪醇；
九、将所得长链脂肪醇在真空度为8-10Pa、温度为200-250℃分馏10-12h，收集215-250℃的馏份，所得馏份即为米秕糠提取物。
本发明涉及米秕糠提取物在制备药物以及在制备保健品中的应用。
本发明涉及米秕糠提取物在制备增强免疫功能的药物中的应用。
本发明涉及米秕糠提取物在制备降血脂的药物中的应用。
本发明涉及米秕糠提取物在制备具有增强免疫功能的保健品中的应用。
本发明涉及米秕糠提取物在制备具有降血脂功能的保健品中的应用。
本发明所述的米秕糠提取物对免疫功能有增强作用，结果证实本发明所述的米秕糠提取物对小鼠溶血素抗体生成，小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用，小鼠脾淋巴细胞增殖都有明显的促进作用。并且能激活小鼠NK细胞的活性，能明显拮抗环磷酰胺致Lewis肺癌小鼠白细胞数降低作用。此外，米秕糠提取物能显著降低高血脂症大鼠血清TC、TG和LDL-C水平，同时升高血清HDL-C水平。
所述的米秕糠提取物可以制成液体饮料、口服液、颗粒剂、软胶囊、硬胶囊、片剂等。
有关实验：
一、米秕糠提取物对小鼠溶血素的影响
1.实验材料
1.1实验动物
昆明种小鼠，雄性，18-20g，由上海斯莱克动物责任有限公司提供。
1.2药物及试剂
实施例1的米秕糠提取物，昆明龙津药业股份有限公司制备，批号：20170306，实验剂量设计为：160mg/kg，80mg/kg，40mg/kg；实施例2的米秕糠提取物，批号：20170313，实验剂量设计为80mg/kg；实施例3的米秕糠提取物，批号：20170320，实验剂量设计为80mg/kg；香菇多糖，武汉迪奥药业有限公司，批号：20170112，实验剂量：50mg/kg。
2.实验方法
小鼠随机分组，高、中(3)、低各5个剂量组，阳性药组，空白模型组。每组10只。鸡红细胞用生理盐水洗涤3次，配成5％混悬液即可，补体以2只豚鼠血清混合，用生理盐水配成10％浓度。每鼠腹腔注射5％生理盐水鸡红细胞混悬液0.2ml进行免疫，同时开始给药，免疫后7日，最后一次给药1h摘眼球取血，离心，取血清用生理盐水稀释100倍，取稀释血清1ml，与5％鸡红细胞混悬液0.5ml、10％补体0.5ml混合，37℃恒温箱保温30min后，置0℃冰箱中中止反应。离心，取上清液于722分光光度计540nm处比色，测录光密度(OD)，另设不加血清的空白对照，取其上清液作为比色时调“0”的基准以OD值作为判定血清溶血素的指标，比较各组的差异。
3.实验结果
米秕糠提取物高、中剂量组对小鼠溶血素抗体生成具有明显促进作用，说明该药可增强体液免疫，见表1。
表1 米秕糠提取物对小鼠溶血素的影响
Figure BDA0001523006540000041
Figure BDA0001523006540000042
各组与空白模型组比较：*P＜0.05；**P＜0.01。
二、米秕糠提取物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响
1.实验材料
1.1实验动物
昆明种小鼠，雄性，18-20g，由上海斯莱克动物责任有限公司提供。
1.2药物及试剂
实施例1的米秕糠提取物，昆明龙津药业股份有限公司制备，批号：20170306，实验剂量设计为：160mg/kg，80mg/kg，40mg/kg。实施例2的米秕糠提取物，批号：20170313，实验剂量设计为80mg/kg；实施例3的米秕糠提取物，批号：20170320，实验剂量设计为80mg/kg；香菇多糖，武汉迪奥药业有限公司，批号：20170112，实验剂量：50mg/kg；灌胃给药，0.5ml/20g。
2.实验方法
小鼠随机分组，每组10只。米秕糠提取物样品高、中(3)、低各5个剂量组，阳性药、空白对照各一组。分组后第二天开始给药，连续给药1周，在最后一次给药后一小时小鼠腹腔内注射2％鸡红细胞(经去除纤维蛋白，生理盐水多次洗涤)0.2ml/只，4小时后处死小鼠，用生理盐水冲洗腹腔，收集冲洗液、离心，倾去上清液，收集细胞涂片，凉干后用瑞氏染色液染色，油镜下观察。计数100个巨噬细胞吞噬鸡红细胞数，按下公式计算。(1)吞噬百分率＝吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/100个巨噬细胞数，(2)吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞数/100个巨噬细胞数。
3.实验结果
米秕糠提取物样品中、高剂量组具有促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用，且具有一定剂量相关性。阳性药也具有促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用，见表2。
表2 米秕糠提取物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响
Figure BDA0001523006540000051
Figure BDA0001523006540000052
Figure BDA0001523006540000061
各组与模型组比较：*P＜0.05；**P＜0.01。
三、米秕糠提取物对小鼠脾淋巴细胞增殖及NK细胞活性的影响
1.实验材料
1.1实验动物
C57BL/6(SPF级)小鼠，体重18-20g/6周龄，雄性，上海斯莱克实验动物责任有限公司提供。
1.2药物及试剂
实施例1的米秕糠提取物，昆明龙津药业股份有限公司制备，批号：20170306；实施例2的米秕糠提取物，批号：20170313；实施例3的米秕糠提取物，批号：20170320；精确称取所需样品，以少量吐温80助溶后逐渐加入0.5％CMCNa溶液待充分混匀后稀释至所需浓度即可，给药体积为0.5ml/20g鼠；吐温80、0.5％CMC-Na；DMEM完全培养基，内含10％新生牛血清(GIBCO BRL)、巯基乙醇、HEPES等；3H-TdR:放射性浓度：1mci/ml，购自上海原子核研究所；刀豆蛋白A：50μg/ml，购自Sigma公司；YAC-1细胞：上海医药工业研究院药理评价研究中心传代维持；香菇多糖，武汉迪奥药业有限公司，批号20170112。
2.实验方法
2.1NK细胞活性的测定
将C57BL/6小鼠随机分组，每组10只，实验剂量设计为：160mg/kg，80mg/kg，40mg/kg；香菇多糖，武汉迪奥药业有限公司，批号：20170112，实验剂量：50mg/kg。
按剂量连续给药两周，对照组给予同等体积的生理盐水，最后一次给药结束后处死小鼠，无菌条件下取脾脏，置于小容器中，用手术剪刀将脾脏剪碎，分离细胞，经几次自然沉降分离脾细胞，用DMEM培养基制成细胞悬液，将脾细胞调整至1×106/ml，加入100μl到96孔板中作为效应细胞。另取处于生长对数期的YAC-1细胞，调整细胞浓度为1×104/ml，作为靶细胞，以靶细胞与效应细胞之比为1:100的浓度加在96孔细胞培养板上，同时加入0.5μci/孔的3H-TdR同位素。每组设置10个复孔，在37℃二氧化碳培养箱中培养24小时，用多头细胞器收集细胞，在液闪仪上测定CPM值，计算特异性抑制百分率(Pi)表示NK细胞活性。其中Pi＝1-(实验组掺入CPM值/对照组掺入CPM值)×100％。
2.2小鼠脾淋巴细胞增殖的测定
将C57BL/6小鼠随机分组，每组10只，按剂量连续给药两周，最后一次给药结束后处死小鼠，无菌条件下取脾脏，置于小容器中，用手术剪刀将脾脏剪碎，分离细胞，经几次自然沉降分离脾细胞，用DMEM培养基制成细胞悬液，将脾细胞调整至1×107/ml，在无菌的96孔培养板中加入脾细胞100μl，同时加入1mg/ml的刀豆蛋白A 50ul，在37℃二氧化碳培养箱中培养48小时后加入0.5μci/孔的3H-TdR同位素，继续培养24小时。该实验每组设置10个复孔，对照组用培养基代替脾细胞。培养结束后在多孔细胞收集器中收集细胞，5％TCA固定，无水乙醇脱水，液闪仪上测定CPM值。
3.实验结果
结果表明，米秕糠提取物能够剂量依赖性的激活小鼠NK细胞的活性，同时也能够明显促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。详见表3、表4。
表3 米秕糠提取物对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响
Figure BDA0001523006540000071
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.01。
表4 米秕糠提取物对小鼠NK细胞活性的影响
Figure BDA0001523006540000081
与对照组比较：*P<0.05，**P<0.01。
四、米秕糠提取物对环磷酰胺致Lewis小鼠白细胞数降低的升白作用
1.实验材料
1.1实验动物
C57BL/6小鼠，雄性，18-20g，由上海斯莱克动物责任有限公司提供。
1.2药物及试剂
实施例1的米秕糠提取物，昆明龙津药业股份有限公司制备，批号：20170306；实施例2的米秕糠提取物，批号：20170313；吐温80；0.5％CMC-Na；环磷酰胺，江苏恒瑞制药有限公司，批号17030921；瘤源：Lewis肺癌肿瘤模型由上海医药工业研究院药理评价研究中心传代维持。
2.实验方法
2.1联合环磷酰胺致荷瘤小鼠骨髓抑制模型的建立
取生长旺盛的肿瘤，无菌条件下以匀浆法制备成细胞悬液约5～10×106/ml细胞浓度。每只小鼠右腋皮下接种0.2ml。接种第3天(150mg/kg)和第5天(100mg/kg)，除空白正常组合样品高剂量单独给药组外，其余各组分别给以CTX造成联合化疗致荷瘤小鼠骨髓抑制模型。
2.2分组和给药方法
随机取10只小鼠在实验开始时作为基础白细胞测试，将其余动物以Lewis肺癌接种造成移植性肿瘤模型并随机分组，每组10只动物，并于接种肿瘤当日开始给药。米秕糠提取物样品口服给药，CTX腹腔注射给药。
(1)环磷酰胺组(接种后第3天，150mg/kg；接种后第5天，150mg/kg)。
(2)米秕糠提取物组160mg/kg(接种当日开始给药，直至实验结束，环磷酰胺同上组)。
(3)单纯米秕糠提取物组160mg/kg(接种当日开始给药，直至实验结束)。
(4)空白组(接种当日开始给相应溶剂，直至实验结束)。
2.3观察指标
实验开始时随机取10只小鼠进行眼眶后静脉丛穿刺采血，血细胞自动分析仪(HEMAVET-950)测试血液常规。此后在环磷酰胺末次给药后的次日开始每3天随机取5只小鼠以上述相同方法采血测试血液常规，直至各组白细胞恢复正常。
3.实验结果
结果在试验开始后的第9天，实施例1的米秕糠提取物样品+环磷酰胺组动物的白细胞数为正常动物的107.14％，实施例2的米秕糠提取物样品+环磷酰胺组动物的白细胞数为正常动物的107.44％，阳性对照环磷酰胺造模组动物的白细胞数降至正常动物的6.70％。实验表明米秕糠提取物样品组动物的白细胞数明显高于阳性对照环磷酰胺造模组动物的白细胞数，二组之间有显著性差异(P<0.01)。说明在此剂量和时相点米秕糠提取物样品+环磷酰胺组具有明显的拮抗环磷酰胺致Lewis肺癌小鼠白细胞数降低的作用。详见表5、图1。
表5米秕糠提取物样品对环磷酰胺致荷瘤小鼠白细胞降低的升白作用试验与阴性对照比较**P<0.01,(白细胞的正常值范围1.8—10.7K/uL)。
Figure BDA0001523006540000101
五、米秕糠提取物对高血脂大鼠的降脂作用
1.实验材料
1.1实验动物
SD大鼠，80只，雄性，200-220g，昆明医科大学实验动物中心提供。
1.2药物及试剂
实施例1的米秕糠提取物，昆明龙津药业股份有限公司制备，批号：20170306；实施例2的米秕糠提取物，批号：20170313；实施例3的米秕糠提取物，批号：20170320；立普妥，辉瑞制药有限公司，批号：L17981。TC、TG试剂盒，上海长征公司提供，LDL-C、HDL-C试剂盒，日本协和公司提供。
2.实验方法
(1)、试验分组
健康SD大鼠80只随机分为8组，每组10只，分别为A-H组：
A.空白对照组 等体积生理盐水
B.模型对照组 等体积生理盐水
C.阳性对照组 立普妥30mg/kg
D.实施例1米秕糠提取物高剂量组100mg/kg
E.实施例1米秕糠提取物中剂量组50mg/kg
F.实施例2米秕糠提取物中剂量组50mg/kg
G.实施例3米秕糠提取物中剂量组50mg/kg
H.实施例1米秕糠提取物低剂量组25mg/kg
(2)、药物对大鼠高血脂症的治疗作用
上述各组动物，观察10天后在乙醚麻醉下眼球后静脉丛采血测定血脂基础水平。除空白对照组喂食基础饲料外，其余各组动物开始喂食高脂饲料(1％胆固醇、10％猪油、10％蛋黄粉和79％基础饲料)，连续5周后采血复查血脂水平，判断模型是否成功。
造模成功后，C-H组动物按上述剂量分别灌胃给予本实施例米秕糠提取物(给药体积均为2ml/100g体重)，A、B组动物分别灌胃给予等体积的生理盐水，连续灌胃3周。给药期间，除空白对照组喂食基础饲料外，其余各组动物均继续喂食高脂饲料。
给药结束后，采血测定血脂水平。
血脂水平观察指标为：总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。
(3)、血脂测定用自动生化分析仪对血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)分别以胆固醇氧化酶法、甘油磷酸氧化酶法、酶法及选择遮蔽酶法测定。
(4)、统计学处理数据用均数±标准差(x±s)表示，各组间比较用多组单因素方差分析(ANOVA)，组间两两比较采用q检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
3.实验结果
空白对照组动物在造模前、造模后及给药后3个时间点的血清TC、TG、LDL-C和HDL-C水平均无明显差异。
除空白对照组外，其余各组动物在连续喂食高脂饲料5周后，血脂水平检测显示，与空白对照组比较，各组动物的血清TC、TG、LDL-C水平均明显升高，而血清HDL-C显著降低。提示B-H组动物均已造成高血脂症模型。
造模成功连续给药3周后，与模型组比较，立普妥(30mg/kg)能明显降低高血脂症大鼠血清TC、TG、LDL-C水平，同时升高血清HDL-C水平；米秕糠提取物高剂量(100mg/kg)也能显著降低高血脂症大鼠血清TC、TG和LDL-C水平，同时升高血清HDL-C水平；米秕糠提取物中剂量组(50mg/kg)能显著降低高血脂症大鼠血清TC、TG和LDL-C水平，但对血清HDL-C水平无明显影响；米秕糠提取物低剂量组(25mg/kg)能显著降低高血脂症大鼠血清TC水平，但对血清TG和LDL-C水平无明显影响(见表6，表7)。
表6米秕糠提取物对高血脂症大鼠血清TC和TG水平的影响
Figure BDA0001523006540000121
n＝10，x±s，与空白组比较：**P<0.01与模型组比较：#P<0.05，##P<0.01。
表7米秕糠提取物对高血脂症大鼠血清LDL-C和HDL-C水平的影响
Figure BDA0001523006540000131
n＝10，x±s，与空白组比较：*P<0.05，**P<0.01与模型组比较：#P<0.05，##P<0.01。
附图说明
图1为本发明所述的米秕糠提取物对环磷酰胺致荷瘤小鼠白细胞降低的白细胞动态变化图。
图2为本发明所述的米秕糠提取物GC色谱图。
具体实施方式
下面的实施例是本发明的进一步的举例说明，而不限定本发明。
实施例1：
10t米糠进入湿式挤压膨化机，饱和蒸汽喷入压力0.7MPa，模板喷孔直径10mm，膨化比1：1.1-1.2，得到多微孔颗粒物料(100-110℃，水分14％)，再用平板烘干机干燥至水分6％左右，温度55℃。按重量体积比1：5加入正己烷55℃浸出2h，过滤，回收溶剂，得到米糠毛油1805kg。米糠毛油搅拌加热至70℃，加入70℃的热水150L，静置沉淀2h，收集上层米糠毛油。搅拌加热至70℃，加入70℃的热水100L，加入85％的磷酸3L，搅拌25min脱胶，静置沉淀5h，收集上层脱胶油，加热至100℃后真空干燥脱水，冷至80℃，搅拌通入10℃冷水间接降温，降温至20-25℃，室温下继续慢速搅拌养晶24h后过滤，得到脱蜡油及蜡饼，蜡饼挤压出蜡油后，得到粗制糠蜡54.5kg。粗制糠蜡加入异丙醇415L，加热至55℃，保持温度搅拌1h，静置2h分层，取上层溶液回收溶剂，再以相同条件重复萃取一次，回收溶剂得到精制米糠蜡45kg。精制米糠蜡加入氧化钙9kg、水9L混合，200℃下反应8h，冷却，得固体产物；将所得固体产物粉碎至100目，加入95％的乙醇溶液1200L，保持温度75℃搅拌(15r/min)2h，热过滤除去不溶物，再回收滤液中的溶剂获得长链脂肪醇3.2kg；将所得长链脂肪醇在真空度为9Pa、温度为200-250℃分馏12h，收集215-250℃的馏份，得到米秕糠提取物1.7kg。
米秕糠提取物含量测定：
色谱柱：HP-5(30m×320μm×0.25μm)；柱温：初始温度为230℃，保持6分钟，以每分钟10℃的速率升温至280℃，保持20分钟，再以每分钟20℃的速率升温至300℃，保持5分钟；进样口温度320℃，检测器：FID，温度为330℃；流速为每分钟2.5ml。
供试品溶液的制备：取本品12mg，精密称定，置25ml量瓶中，加三氯甲烷使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
对照品混合溶液的制备：取三十烷醇对照品10mg、二十八烷醇对照品7mg、三十二烷醇7mg，精密称定，置25ml量瓶中，加三氯甲烷使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法：分别精密吸取对照品混合溶液和供试品溶液各1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。
测得批号为20170306米秕糠提取物中三十烷醇含量为76.77％，二十八烷醇含量为3.52％，三十二烷醇含量为15.24％。
实施例2：
10t米秕糠进入湿式挤压膨化机，饱和蒸汽喷入压力0.6MPa，模板喷孔直径10mm，膨化比1：1.1-1.2，得到多微孔颗粒物料(100-110℃，水分13％)，再用平板烘干机干燥至水分6％左右，温度60℃。按重量体积比1:7加入异丙醇60℃浸出2h，回收溶剂，得到米糠毛油1886kg。米糠毛油搅拌加热至70℃，加入70℃的热水150L，静置沉淀2h，收集上层米糠毛油。搅拌加热至70℃，加入70℃的热水100L，加入85％的磷酸3L，搅拌30min脱胶，静置沉淀4h，收集上层脱胶油，加热至100℃后真空干燥脱水，冷至70℃，搅拌通入10℃冷水间接降温，降温至20-25℃，室温下继续慢速搅拌养晶24h后过滤，得到脱蜡油及蜡饼，蜡饼挤压出蜡油后，得到粗制糠蜡57kg。粗制糠蜡加入异丙醇420L，加热至60℃，保持温度搅拌50min，静置2h分层，取上层溶液回收溶剂，再以相同条件重复萃取一次，回收溶剂得到精制米糠蜡47.2kg。精制米糠蜡加入氧化钙9.5kg、水10L混合，200℃下反应8h，冷却，得固体产物；将所得固体产物粉碎至100目，加入95％的乙醇溶液1250L，保持温度75℃搅拌(15r/min)2h，热过滤除去不溶物，再回收滤液中的溶剂获得长链脂肪醇3.4kg；将所得长链脂肪醇在真空度为8Pa、温度为200-250℃分馏10h，收集215-250℃的馏份，得到米秕糠提取物1.8kg。
测得批号为20170313米秕糠提取物中三十烷醇含量为76.52％，二十八烷醇含量为4.72％，三十二烷醇含量糠为14.66％。
实施例3：
10t米糠进入湿式挤压膨化机，饱和蒸汽喷入压力0.8MPa，模板喷孔直径10mm，膨化比1：1.1-1.2，得到多微孔颗粒物料(100-110℃，水分14％)，再用平板烘干机干燥至水分6％左右，按重量体积比1:7加入异丙醇60℃浸出2h，回收溶剂，得到米糠毛油1888kg。米糠毛油搅拌加热至70℃，加入70℃的热水150L，静置沉淀2h，收集上层米糠毛油。搅拌加热至70℃，加入70℃的热水100L，加入草酸3L，搅拌25min脱胶，静置沉淀5h，收集上层脱胶油，加热至100℃后真空干燥脱水，冷至80℃，搅拌通入10℃冷水间接降温，降温至20-25℃，室温下继续慢速搅拌养晶24h后过滤，得到脱蜡油及蜡饼，蜡饼挤压出蜡油后，得到粗制糠蜡57.3kg。粗制糠蜡加入异丙醇415L，加热至55℃，保持温度搅拌1h，静置2h分层，取上层溶液回收溶剂，再以相同条件重复萃取一次，回收溶剂得到精制米糠蜡47.3kg。精制米糠蜡加入氧化钙9.5kg、水10L混合，200℃下反应8h，冷却，得固体产物；将所得固体产物粉碎至100目，加入95％的乙醇溶液1200L，保持温度75℃搅拌(15r/min)2h，热过滤除去不溶物，再回收滤液中的溶剂获得长链脂肪醇3.5kg；将所得长链脂肪醇在真空度为10Pa、温度为200-250℃分馏12h，收集215-235℃的馏份，得到米秕糠提取物1.75kg。
测得批号为20170320米秕糠提取物中三十烷醇含量为78.48％，二十八烷醇含量为2.36％，三十二烷醇含量为15.16％。
米秕糠提取物滴丸：
处方：
米秕糠提取物 100g
聚乙二醇4000 200g
聚乙二醇6000 800g
制法：规定量聚乙二醇4000和聚乙二醇6000于水浴中加热至全部熔融后，加入规定量经过100目筛的米秕糠提取物，搅拌均匀后迅速转移至贮液瓶中，密闭并保温在85℃，用定量泵滴丸机由上往下滴制，冷却剂为精制玉米油，滴速30丸/分种，将形成的滴丸沥尽并擦去冷却液，倒入有吸水纸的盘中，待干燥后灌装，包装，即得。
米秕糠提取物胶囊：
处方(1000粒)：
米秕糠提取物 50g
淀粉 60g
二氧化硅 35g
制法：将上述米秕糠提取物和辅料混合均匀，装胶囊，制成1000粒，即得。
米秕糠提取物软胶囊：
处方(1000粒)：
Figure BDA0001523006540000171
制法：取米秕糠提取物，加大豆油中，搅拌使其溶解，加黄蜂蜡混匀，压制软胶囊，干燥，制成1000粒，即得。
米秕糠提取物片剂：
处方(1000粒)：
Figure BDA0001523006540000172
制法：称取羟丙甲纤维素在纯化水中溶解，加入适量乙醇，稀释成2％PVC的50％乙醇溶液，备用；将乳糖、微晶纤维素分别过100目筛后，称取处方量备用；再称取处方量的米秕糠提取物过200目筛后，与上述辅料混匀后用2％PVC的50％乙醇溶液制软材，制粒后干燥，加入处方量硬脂酸镁，混合均匀，压片，制成1000粒，即得。

Claims (3)

1.一种米秕糠提取物，其特征在于含有以下重量百分比的成分：三十烷醇70％-85％、二十八烷醇1％-20％，三十二烷醇10％-30％，所述的米秕糠提取物的制备方法由以下步骤组成：
一、以米秕糠为原料，进入湿式挤压膨化机，饱和蒸汽喷入压力0.6-0.8MPa，模板喷孔直径8-10mm，膨化比1：1.1-1.2，膨化温度100-110℃，得到多微孔颗粒物料，含水分12-14％；
二、步骤一的多微孔颗粒物料，用平板烘干机干燥至水分6-9％，温度50-65℃。按重量体积比1:4-6加入异丙醇或正己烷，温度50-65℃，浸出2-3h，回收溶剂得到米糠毛油；
三、将步骤二的米糠毛油搅拌加热至65-75℃，加入75-85℃的水，加水量为油重的5％-10％，静置沉淀1-2h，收集上层米糠毛油；
四、将步骤三的上层米糠毛油搅拌加热至65-75℃，加入75-85℃的水，加水量为油重的5％-10％，加入草酸或80-90％的磷酸，加入量为油重的0.1％-0.5％，搅拌20-30min脱胶，静置沉淀4-8h，收集上层脱胶油；
五、将步骤四的上层脱胶油加热至95-105℃后，真空干燥脱水，冷至70-80℃，搅拌通入5-10℃冷水间接降温，降温速率为2-6℃/h，降温至20-25℃，室温下继续慢速搅拌养晶24-36h后过滤，得到脱蜡油及蜡饼；脱蜡油用做其它用途；
六、所述的蜡饼挤压出蜡油后，得到粗制糠蜡，粗制糠蜡按重量比1:4-7加入异丙醇，加热至45-60℃，保持温度搅拌40-60min，静置2-3h分层，取上层溶液回收溶剂，再以相同条件重复萃取一次，回收溶剂得到精制米糠蜡；
七、按重量比精制米糠蜡：氧化钙：水为5:1-1.1:1-1.1混合，200℃下反应8-10h，冷却，得固体产物；
八、将所得固体产物粉碎至80-100目，按重量比1:14-16加入92-96％的乙醇溶液，保持温度70-80℃搅拌1-2h，搅拌速度10-15r/min，热过滤除去不溶物，再回收滤液中的溶剂获得长链脂肪醇；
九、将所得长链脂肪醇在真空度为8-10Pa、温度为200-250℃分馏10-12h，收集215-250℃的馏份，所得馏份即为米秕糠提取物。
2.如权利要求1所述的米秕糠提取物在制备增强免疫功能的药物中的应用。
3.如权利要求1所述的米秕糠提取物在制备具有增强免疫功能的保健品中的应用。
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