CN107831126A - 一种油脂过氧化值的测定方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种油脂过氧化值的测定方法及其应用，属于化学成分的检测技术领域。该方法包括以下步骤：绘制三价铁离子的标准曲线；将待测油脂与有机溶液混合，然后加入亚铁离子溶液，取上层水溶液作为样品组，设置不含待测油脂的对照组。取样品组和对照组分别与亚铁氰化钾溶液混合，测定吸光值，根据标准曲线得到待测油脂中三价铁离子的含量。按油脂过氧化值＝待测油脂中三价铁离子的含量/(28×待测油脂的质量)计算油脂过氧化值。该测定方法操作高效便捷，所用试剂种类少、来源广，经该测定方法测定所得的结果重复性好、准确有效。将该方法用于测定油脂过氧化值，可提高效率，节约成本。
Description
技术领域
本发明涉及化学成分的检测技术领域，且特别涉及一种油脂过氧化值的测定方法及其应用。
背景技术
油脂在加工贮藏过程中在光、热、空气中的氧及油脂中的水分和酶的作用下，会发生复杂的变化，其中过氧化物就是这个过程中产生的中间产物，它很不稳定，可以继续分解成为醛、酮及其他的氧化物，致使油脂进一步变质，是油脂前期开始变质的指标之一。如果油脂过氧化值过高，会造成动物采食量下降，严重的会造脏器损伤。
目前，国标中测定油脂中过氧化值的方法为滴定法，但该方法工作量较大，终点判断容易受人为因素影响，故有必要推出一个准确简便测定油脂过氧化值的方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种油脂过氧化值的测定方法，该测定方法操作高效便捷，所用试剂种类少、来源广，经该测定方法测定所得的结果重复性好、准确有效。
本发明的另一目的在于提供一种上述油脂过氧化值的测定方法在测定油脂的过氧化值中的应用，例如可用于测定大豆油和/或玉米油的油脂过氧化值，该方法较国标法能够提高工作效率，节约成本。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的：
本发明提出一种油脂过氧化值的测定方法，其包括以下步骤：
绘制三价铁离子的标准曲线；将待测油脂与有机溶液混合，然后加入亚铁离子溶液，取上层水溶液作为样品组，设置不含待测油脂的对照组。
取样品组和对照组以同等混合比例分别与亚铁氰化钾溶液混合，测定吸光值，根据标准曲线得到待测油脂中三价铁离子的含量。
按以下公式计算即得油脂过氧化值：油脂过氧化值＝待测油脂中三价铁离子的含量/(28×待测油脂的质量)。
有机溶液包括甲醇-丙酮溶液、乙醇-丙酮溶液、三氯甲烷-甲醇溶液和三氯甲烷-乙醇溶液中的至少一种。
优选地，有机溶液为三氯甲烷-甲醇溶液。
本发明还提出上述油脂过氧化值的测定方法在测定油脂过氧化值中的应用，例如可以用来测定大豆油和/或玉米油的油脂过氧化值。
本发明实施例的油脂过氧化值的测定方法及其应用的有益效果是：
本发明实施例提供的油脂过氧化值的测定方法操作高效便捷，所用试剂种类少、来源广，经该测定方法测定所得的结果重复性好、准确有效。将其用于测定油脂过氧化值，如测定大豆油和/或玉米油的油脂过氧化值，可较国标法中的滴定方法提高工作效率，节约成本。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的油脂过氧化值的测定方法及其应用进行具体说明。
本发明实施例提供的油脂过氧化值的测定方法，其原理为：油脂中的过氧化物能够将亚铁溶液中的二价铁离子氧化为三价铁离子，三价铁离子能够与亚铁氰化钾反应使溶液变为蓝色，通过分光光度计读数计算后能够得到溶液中三价铁离子的含量，进而可以求得油脂中过氧化值的含量。其所涉及的化学反应如下：油脂中的过氧化物+Fe2+→Fe3+；4Fe3++3[Fe(CN)6]4-→Fe4[Fe(CN)6]3。
具体地，本发明实施例提供的油脂过氧化值的测定方法可包括以下步骤：绘制三价铁离子的标准曲线、取样、样品处理、分光光度计读数和结果计算。
其中，标准曲线可经以下步骤得到：将多份亚铁氰化钾溶液分别与不同浓度的三价铁离子溶液混合，测定吸光值并绘制曲线图。
优选地，亚铁氰化钾溶液的浓度为0.8-1.2mg/mL；更优地，亚铁氰化钾溶液的浓度为1mg/mL。
三价铁离子溶液可经以下步骤得到：混合六水合三氯化铁与水至三价铁离子在三价铁离子溶液中的质量浓度为0.5-0.7mg/mL。
作为可选地，标准曲线可参考如下操作：取5只25mL的比色管，向每个管中加入0.5mL亚铁氰化钾溶液。然后分别加入50μL、100μL、200μL、300μL、400μL三价铁离子标准溶液，加水至刻度线，混合均匀，分光光度计700nm读数，记录吸光值，然后制作三价铁离子的标准曲线。
取样即是称取待测油脂样品，如大豆油和/或玉米油。较佳地，本发明实施例中的待测油脂的取样质量为0.5-3g，取样后将其置于容器，如三角瓶中。
样品处理包括：将待测油脂与有机溶液混合，然后加入亚铁离子溶液，取上层水溶液作为样品组。
作为可选地，上述有机溶液包括甲醇-丙酮溶液、乙醇-丙酮溶液、三氯甲烷-甲醇溶液和三氯甲烷-乙醇溶液中的至少一种。优选地，上述有机溶液为三氯甲烷-甲醇溶液，三氯甲烷-甲醇溶液中三氯甲烷与甲醇的体积比为(5：5)-(7：3)。
将三氯甲烷-甲醇溶液作为有机溶剂可以将油脂充分溶解，这样油脂可以充分分散到有机溶剂中，以利于过氧化物和二价铁离子接触，使化学反应进行的更彻底。并且，三氯甲烷-甲醇溶液在本发明实施例提供的方法中较其余有机溶液对油脂溶解的效果更好。
亚铁离子溶液例如可经以下步骤得到：将氯化亚铁或硫酸亚铁与水混合，至二价铁离子在亚铁离子溶液中的质量浓度为0.8-1.0mg/mL。。有机溶液与亚铁离子溶液的体积比为15-25：0.1。优选地，有机溶液与亚铁离子溶液的体积比为20：0.1。
较佳地，在加入亚铁离子溶液后，向待测油脂与有机溶液的混合溶液中加入与亚铁离子溶液的体积比为0.05-0.2：20的水。优选地，亚铁离子溶液与水的体积比为0.1：20。通过额外加入水，有利于调整混合液中的有机相和水相的比例，利于两相之间的分层。
优选地，在加入水之前，将待测油脂与有机溶液和亚铁离子溶液的混合溶液静置至少3min，以使混合液中的有机相和水相分层更加明显和完全。
设置对照组，对照组与样品组的唯一区别在于对照组不含样品组中的待测油脂。
承上，作为可选地，样品处理可参考如下操作：向步骤装有油脂样品的三角瓶中加入20mL混合有机溶液，然用移液枪加入0.1mL亚铁离子溶液，摇匀，使瓶内液体充分接触混匀，放置3-5min，再加入20mL蒸馏水，充分震摇，静置，这时水溶液和有机液体会分层，后续取上层的水溶液。另外，取一只不加样品的三角瓶按上述操作加入试剂作为对照组。
分光光度计读数包括：取样品组和对照组以同等混合比例分别与亚铁氰化钾溶液混合，测定吸光值，根据标准曲线得到待测油脂中三价铁离子的含量。
作为可选地，样品组与亚铁氰化钾溶液的体积比以及对照组与亚铁氰化钾溶液的体积比均为8-12：0.5。优选地，样品组与亚铁氰化钾溶液的体积比以及对照组与亚铁氰化钾溶液的体积比均为10：0.5。
具体地，样品处理可参考如下操作：取两只25mL的比色管(其中一只作为空白)分别加入0.5mL的亚铁氰化钾溶液，然后取10mL样品处理步骤中所得的上层水溶液分别加入比色管中，加水至刻度线，混合均匀。以空白调零，分光光度计700nm读数，并记录吸光值。将所得的吸光值代入标准曲线，即得到待测油脂中三价铁离子的含量。值得说明的是，若测定所得的样品吸光值不在标准曲线区间内，则可适当增加或减少样品的称样量。
结果计算可按以下公式计算，即得到待测油脂中的过氧化值：油脂过氧化值＝待测油脂中三价铁离子的含量/(28×待测油脂的质量)。值得说明的是，上述公式中待测油脂中三价铁离子的含量与待测油脂的质量两者的单位均一致，若不一致时，上述公式需根据两者单位之间的换算比例进行调整。
例如：以A代表根据标准曲线所得的油脂样品中三价铁含量(单位为mg)，m代表油脂样品的用量(单位为g)，过氧化值含量用1kg样品中活性氧的毫摩数表示(单位为mmoL/kg)，结果保留两位有效数字，计算公式则调整为：X＝(A/28m)×1000。
此外，本发明实施例还提供一种上述油脂过氧化值的测定方法在测定油脂的过氧化值中的应用。上述测定方法主要用于测定动物饲料中所添加的油脂的过氧化值，此油脂例如可以为大豆油和/或玉米油。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
标准曲线绘制：取5只25mL的比色管，向每个管中加入0.5mL亚铁氰化钾溶液。然后分别加入50μL、100μL、200μL、300μL、400μL三价铁离子标准溶液，加水至刻度线，混合均匀，以水调零，分光光度计700nm读数，对应吸光值分别为0.083、0.207、0.461、0.709、0.945。然后做出三价铁离子的标准曲线：y＝0.2542x+0.0097，R2＝0.9998。
其中，三价铁离子标准溶液配制方法如下：准确称量1.5165g六水合三氯化铁，用适量水溶解后转移到500mL容量瓶定容，此溶液中三价铁含量为：0.6284mg/mL。对应50μL、100μL、200μL、300μL、400μL三价铁标准溶液的三价铁含量分别为：0.0314mg、0.0628mg、0.1257mg、0.1885mg、0.2514mg，结合吸光值做出三价铁含量的标准曲线。
取样：称取m＝1.0516g的油脂样品于100mL三角瓶中。
样品处理：向上述三角瓶中加入20mL三氯甲烷-甲醇溶液，然用移液枪加入0.1mL亚铁离子溶液，摇匀，使瓶内液体充分接触混匀，放置5min，再加入20mL蒸馏水，充分震摇，静置，这时水溶液和有机液体会分层，后续取上层的水溶液。另外，取一只不加样品的三角瓶按上述操作加入试剂作为对照组。
其中，三氯甲烷-甲醇溶液由三氯甲烷与甲醇以体积比为7：3混合而得。亚铁离子标准溶液配制方法(现用现配)如下：将氯化亚铁与水混合，至二价铁离子在亚铁离子溶液中的质量浓度为1.0mg/mL，存于试剂瓶。
分光光度计读数：取两只25mL的比色管分别加入0.5mL的亚铁氰化钾溶液，然后取10mL上述的上层水溶液分别加入比色管中，加水至刻度线，混合均匀，以空白调零，分光光度计700nm读数，得到吸光值为：0.503。
结果计算：将上述吸光值代入标准曲线，计算出样品的三价铁含量A＝0.1376mg。再由公式X＝(A/28m)×1000计算出该样品中过氧化值含量为4.68mmoL/kg。
实施例2
本实施例与实施例1在测定方法上区别在于：
标准曲线获得步骤中亚铁氰化钾溶液的浓度为0.8mg/mL，三价铁离子溶液由六水合三氯化铁与水混合而得，三价铁离子溶液中三价铁离子的质量浓度为0.5mg/mL。
待测油脂为大豆油，其取样质量为0.5g。
样品处理步骤中有机溶液为三氯甲烷-甲醇溶液，三氯甲烷-甲醇溶液中三氯甲烷与甲醇的体积比为5：5。亚铁离子溶液由硫酸亚铁与水混合而得，亚铁离子溶液中二价铁离子的质量浓度为0.8mg/mL。三氯甲烷-甲醇溶液与亚铁离子溶液的体积比为15：0.1。在加入亚铁离子溶液后，将待测大豆油与三氯甲烷-甲醇溶液和亚铁离子溶液的混合溶液静置3min，然后加入与亚铁离子溶液的体积比为0.05：20的水。
分光光度计读数步骤中，样品组与亚铁氰化钾溶液的体积比以及对照组与亚铁氰化钾溶液的体积比均为8：0.5。
实施例3
本实施例与实施例1在测定方法上区别在于：
标准曲线获得步骤中亚铁氰化钾溶液的浓度为1.2mg/mL，三价铁离子溶液由六水合三氯化铁与水混合而得，三价铁离子溶液中三价铁离子的质量浓度为0.7mg/mL。
待测油脂为玉米油，其取样质量为3g。
样品处理步骤中有机溶液为三氯甲烷-甲醇溶液和甲醇-丙酮溶液的混合液，三氯甲烷-甲醇溶液中三氯甲烷与甲醇的体积比为7：3。亚铁离子溶液由氯化亚铁与水混合而得，亚铁离子溶液中二价铁离子的质量浓度为0.9mg/mL。有机溶液与亚铁离子溶液的体积比为25：0.1。
在加入亚铁离子溶液后，将待测大豆油与三氯甲烷-甲醇溶液和亚铁离子溶液的混合溶液静置8min，然后加入与亚铁离子溶液的体积比为0.2：20的水。
分光光度计读数步骤中，样品组与亚铁氰化钾溶液的体积比以及对照组与亚铁氰化钾溶液的体积比均为12：0.5。
实施例4
本实施例与实施例1在测定方法上区别在于：
标准曲线获得步骤中亚铁氰化钾溶液的浓度为1mg/mL，三价铁离子溶液中三价铁离子的质量浓度为0.6mg/mL。
待测油脂为大豆油和玉米油的混合油，其取样质量为1.5g。
样品处理步骤中有机溶液为三氯甲烷-甲醇溶液和乙醇-丙酮溶液及三氯甲烷-乙醇溶液的混合液，三氯甲烷-甲醇溶液中三氯甲烷与甲醇的体积比为6：4。亚铁离子溶液是由硫酸亚铁与水混合而得，亚铁离子溶液中二价铁离子的质量浓度为0.9mg/mL。有机溶液与亚铁离子溶液的体积比为20：0.1。
在加入亚铁离子溶液后，将待测大豆油与三氯甲烷-甲醇溶液和亚铁离子溶液的混合溶液静置10min，然后加入与亚铁离子溶液的体积比为0.1：20的水。
分光光度计读数步骤中，样品组与亚铁氰化钾溶液的体积比以及对照组与亚铁氰化钾溶液的体积比均为10：0.5。
实施例5
本实施例与实施例1在测定方法上区别在于：样品处理步骤中，无静置步骤。
实施例6
本实施例与实施例1在测定方法上区别在于：样品处理步骤中，静置后，无额外加入水的操作。
试验例1
取5个不同油脂样品，采用与实施例1完全相同的步骤进行操作。另外，用现行有效国标(5009.227-2016)中的滴定法对5个样品进行过氧化值的测定，作为对比组，所得的最终结果如表1所示。
表1过氧化值的测定结果
由表1可以看出，本发明实施例与国标滴定法所测得的待测油脂的过氧化值结果接近，可作为替代方法用于油脂过氧化值的测定。
试验例2
设置对比组1-6，对比组1-6与实施例1中的测定方法的区别依次在于：对比组1中三氯甲烷-甲醇溶液是由三氯甲烷与甲醇按体积比为6：4混合而得，对比组2中三氯甲烷-甲醇溶液是由三氯甲烷与甲醇按体积比为5：5混合而得，对比组3中三氯甲烷-甲醇溶液是由三氯甲烷与甲醇按体积比为4：6混合而得，对比组4中三氯甲烷-甲醇溶液是由三氯甲烷与甲醇按体积比为3：7混合而得，对比组5中三氯甲烷-甲醇溶液是由三氯甲烷与甲醇按体积比为8：2混合而得，对比组6中三氯甲烷-甲醇溶液是由三氯甲烷与甲醇按体积比为9：1混合而得。
其结果显示：对比组1-2与实施例1所得结果较对比组3-6所得结果更符合国标滴定法所测得的结果。
试验例3
设置对比组7-10，对比组7-10与实施例1的测定方法的区别依次在于：对比组7中的有机溶液为甲醇-丙酮溶液，对比组8中的有机溶液为乙醇-丙酮溶液，对比组9中的有机溶液为三氯甲烷-乙醇溶液。
其结果显示：实施例1所得结果较对比组7-10所得结果更符合国标滴定法所测得的结果。
综上所述，本发明实施例的油脂过氧化值的测定方法操作高效便捷，所用试剂种类少、来源广，经该测定方法测定所得的结果重复性好、准确有效。将其用于测定油脂过氧化值，如测定大豆油和/或玉米油的油脂过氧化值，可较国标法中的滴定方法提高工作效率，节约成本。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
Claims (10)
1.一种油脂过氧化值的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
绘制三价铁离子的标准曲线；将待测油脂与有机溶液混合，然后加入亚铁离子溶液，取上层水溶液作为样品组，设置不含所述待测油脂的对照组；
取所述样品组和所述对照组以同等混合比例分别与亚铁氰化钾溶液混合，测定吸光值，根据所述标准曲线得到所述待测油脂中三价铁离子的含量；
按以下公式计算即得油脂过氧化值：油脂过氧化值＝所述待测油脂中三价铁离子的含量/(28×所述待测油脂的质量)；
所述有机溶液包括甲醇-丙酮溶液、乙醇-丙酮溶液、三氯甲烷-甲醇溶液和三氯甲烷-乙醇溶液中的至少一种；
优选地，所述有机溶液为所述三氯甲烷-甲醇溶液。
2.根据权利要求1所述的油脂过氧化值的测定方法，其特征在于，所述标准曲线经以下步骤得到：将多份亚铁氰化钾溶液分别与不同浓度的三价铁离子溶液混合，测定吸光值并绘制曲线图；
优选地，所述亚铁氰化钾溶液的浓度为0.8-1.2mg/mL；
更优地，所述亚铁氰化钾溶液的浓度为1mg/mL。
3.根据权利要求2所述的油脂过氧化值的测定方法，其特征在于，所述三价铁离子溶液经以下步骤得到：混合六水合三氯化铁与水至三价铁离子在所述三价铁离子溶液中的质量浓度为0.5-0.7mg/mL。
4.根据权利要求1所述的油脂过氧化值的测定方法，其特征在于，所述待测油脂的质量为0.5-3g。
5.根据权利要求1所述的油脂过氧化值的测定方法，其特征在于，所述有机溶液为所述三氯甲烷-甲醇溶液，所述三氯甲烷-甲醇溶液中三氯甲烷与甲醇的体积比为(5：5)-(7：3)。
6.根据权利要求1所述的油脂过氧化值的测定方法，其特征在于，所述亚铁离子溶液经以下步骤得到：将氯化亚铁或硫酸亚铁与水混合，至二价铁离子在所述亚铁离子溶液中的质量浓度为0.8-1.0mg/mL。
7.根据权利要求1所述的油脂过氧化值的测定方法，其特征在于，所述有机溶液与所述亚铁离子溶液的体积比为15-25：0.1；
优选地，所述有机溶液与所述亚铁离子溶液的体积比为20：0.1。
8.根据权利要求1所述的油脂过氧化值的测定方法，其特征在于，加入所述亚铁离子溶液后，再向所述待测油脂与所述有机溶液的混合溶液中加入与所述亚铁离子溶液的体积比为0.05-0.2：20的水；
优选地，所述亚铁离子溶液与水的体积比为0.1：20；
优选地，在加入水之前，将所述待测油脂与所述有机溶液和所述亚铁离子溶液的混合溶液静置至少3min。
9.根据权利要求1所述的油脂过氧化值的测定方法，其特征在于，所述样品组与所述亚铁氰化钾溶液的体积比以及所述对照组与所述亚铁氰化钾溶液的体积比均为8-12：0.5；
优选地，所述样品组与所述亚铁氰化钾溶液的体积比以及所述对照组与所述亚铁氰化钾溶液的体积比均为10：0.5。
10.如权利要求1-9任一项所述的油脂过氧化值的测定方法在测定油脂的过氧化值中的应用；
优选地，所述油脂包括大豆油和/或玉米油。
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| 陈瑶: "油炸食品中油脂过氧化物含量的快速测定", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 * |
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